Резюме

Предистория/Цели:Хиалуронан (НА) олигозахаридите участват в няколко биологични процеса, предимно ремоделиране на колаген и заздравяване на рани. Ремоделирането на колагена се забавя при стареенето на кожата и причинява бръчки. Това проучване имаше за цел да оцени ефекта на 2-kDa HA олигозахариди (HA2k) върху бръчките чрез проникване през роговия слой и насърчаване на ремоделирането на колаген.

Гликозидът на цистанхе може също така да повиши активността на SOD в сърдечните и чернодробните тъкани и значително да намали съдържанието на липофусцин и MDA във всяка тъкан, като ефективно улавя различни реактивни кислородни радикали (OH-, H₂O₂ и др.) и предпазва от увреждане на ДНК, причинено от ОН-радикали. Cistanche phenylethanoid гликозидите имат силна способност за изчистване на свободните радикали, по-висока редуцираща способност от витамин С, подобряват активността на SOD в сперматозоидната суспензия, намаляват съдържанието на MDA и имат известен защитен ефект върху функцията на мембраната на спермата. Полизахаридите Cistanche могат да повишат активността на SOD и GSH-Px в еритроцитите и белодробните тъкани на експериментално стареещи мишки, причинени от D-галактоза, както и да намалят съдържанието на MDA и колаген в белите дробове и плазмата и да увеличат съдържанието на еластин, имат добър очистващ ефект върху DPPH, удължава времето на хипоксия при стареещи мишки, подобрява активността на SOD в серума и забавя физиологичната дегенерация на белия дроб при експериментално стареещи мишки. С клетъчна морфологична дегенерация експериментите показват, че Cistanche има добра антиоксидантна способност и има потенциала да бъде лекарство за предотвратяване и лечение на заболявания, свързани със стареенето на кожата. В същото време, ехинакозидът в Cistanche има значителна способност да пречиства DPPH свободните радикали и има способността да пречиства реактивните кислородни видове и да предотвратява индуцираното от свободните радикали разграждане на колагена, а също така има добър възстановителен ефект върху увреждането на анионите от свободните радикали на тимина.

Кликнете, за да видите продуктите с антиоксиданти

【За повече информация: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Методи:3D кожен модел и изрязана човешка кожа бяха използвани за оценка на проникването на белязан с флуоресцеин HA2k. Ефектът на HA2k върху метаболизма на колагена беше оценен чрез измерване на протеиновото ниво на проколаген тип 1 (COL1A1) и матриксната металопротеиназа-1 (MMP-1) в 3D модела на кожата. 0.1% разтвор на HA2k и контролен носител бяха приложени върху човешката предмишница в продължение на 8 седмици, за да се оцени плътността на дермалния колаген. За да се оцени ефектът на HA2k върху дълбочината на мимическите бръчки, беше проведено рандомизирано контролирано проучване с 0.1 процента лосион HA2k и лосион за превозно средство в продължение на 8 седмици.

Резултати:Беше потвърдено, че HA2k прониква през роговия слой чрез флуоресцентна микроскопия. Както COL1A1, така и MMP-1 бяха регулирани нагоре от приложение HA2k в култура на модел на 3D кожа. Плътността на колагена е по-висока за предмишницата, третирана с HA2k, отколкото за третираната с носител контролна предмишница след 4 седмици. Максималната дълбочина на бръчките в назолабиалната гънка и областта на пачия крак е значително по-плитка в групата с лосион HA2k, отколкото в контролната група.

Заключение:HA2k проникна в роговия слой, активира синтеза и разграждането на колаген едновременно и облекчи бръчките.

КЛЮЧОВИ ДУМИ

против стареене, клетъчна култура, ремоделиране на колаген, изследване при хора, хиалуронан

1|ВЪВЕДЕНИЕ

Екстрацелуларният матрикс (ECM) е състав от макромолекули, включително протеини и гликозаминогликани, които осигуряват механична подкрепа на околните клетки. В дермалната тъкан ECM допринася за физическите свойства на кожата. Например, колагенът, основният компонент на дермалния ECM, допринася за целостта, еластичността и гладкостта на кожата.1 Физиологично, кожният колаген се поддържа чрез разграждането на стария колаген и повторния синтез на нов колаген в процес, наречен колаген ремоделиране.2 Въпреки това, цикълът на ремоделиране на колаген може да се забави при стареенето на кожата, което води до бръчки, отпускане и намалена еластичност.3 Тези проблеми са значително свързани с по-високата предполагаема възраст на човека от действителната. Следователно ремоделирането на колаген е обещаваща цел за борба със стареенето. Подход, който потенциално е насочен към ECM, може да бъде по-добър за управление на тези проблеми, тъй като повърхностните подходи не засягат ECM. Микроиглата е начин, който е насочен към ECM за насърчаване на ремоделирането на дермален колаген; това обаче е сравнително инвазивен метод.

Хиалуронанът (HA), биологично получен полизахарид, също е компонент на ECM. ХК е открита за първи път в стъкловидното тяло на окото и по-късно в синовиалната течност, пъпната връв и кожата. Молекулното тегло на НА се различава в зависимост от вида на тъканта и нейното биологично състояние, вариращо от 1 kDa до 3000 kDa.4 НА в кожата обикновено съществува в състояние с високо молекулно тегло и поради високата си вискоеластичност и вода- способност за задържане, HA функционира като възглавница, лубрикант и овлажнител. Поради това високомолекулната НА се използва в областта на козметиката за поддържане на водното съдържание на роговия слой. Тъй като макромолекулите имат много ограничена пропускливост през кожата, има някои опити за подобряване на пропускливостта на НА чрез разграждане на НА на малки фрагменти, за които е потвърдено, че проникват през роговия слой.5

В допълнение към физическата функция, биологичната функция на НА е скорошна тема на изследване. Бяха публикувани някои забележителни доклади относно биологичната функция на НА като компонент на нишата на стволовите клетки6 и изключителното дълголетие на голи къртици плъхове. Молекулното тегло на НА трябва да се има предвид, когато се обсъждат нейните биологични функции. ХК в кожата обикновено съществува в състояние с високо молекулно тегло и според съобщенията поддържа стабилността на тъканите. За разлика от това, НА с ниско молекулно тегло активира няколко биологични процеса.7 В предишни доклади, НА тетразахаридът повишава синтеза на НА и колаген тип I в съвместно култивирани кератиноцити и фибробласти,8 индуцира маркери за диференциация в кератиноцитите,9 и облекчава увреждането в мишка, облъчена с ултравиолетови лъчи.5 По-специално, олигозахаридите под 10 kDa насърчават предимно процеси на зарастване на рани, като синтез на ECM,9 ангиогенеза, клетъчна миграция и пролиферация. Заздравяването на рани и ремоделирането на колагена са тясно свързани и 12-мер (т.е. приблизително 2 kDa) от HA регулира нагоре колаген тип I и матриксната металопротеиназа 1 (MMP-1) едновременно в култивираните фибробласти, но ефектът върху хората предстои да бъде изяснено.

Има някои съобщения за козметика с НА, която показва ефекти против бръчки. Крем за кожа с 50-kDa HA подобри дълбочината на бръчките при жени на възраст 30–60 години в рандомизирано сравнително проучване от половината страна.10 Отворено проучване показа, че кремът с микронизирана HA е прилаган локално върху 35 –65--годишни субекти, което доведе до подобряване на резултатите от въпросника за дълбочината на бръчките.11 В тези проучвания се предполага, че високата пропускливост на нискомолекулната НА с ниско молекулно тегло е механизъм на действие, въпреки че имаше няма данни за човешка кожа. В допълнение, ефектът на HA фрагментите върху плътността на колагена при хората остава да бъде изяснен.

Ние предположихме, че HA олигозахаридите проникват през роговия слой, насърчават ремоделирането на колаген и подобряват бръчките като ефект против стареене. Това проучване имаше за цел да оцени ефектите на 2-kDa HA (HA2k) върху ремоделирането на колаген и кожните състояния чрез in vitro и in vivo проучвания. Първо, проникването на HA2k беше оценено в модел на възстановена кожа и човешка изрязана кожа. Впоследствие ефектите върху ремоделирането на колаген са оценени in vitro и върху хора. И накрая, рандомизирано двустранно сравнение на HA2k-съдържащ лосион за кожа и контролен лосион е извършено сред 21 субекта, за да се оцени ефектът върху бръчките на кожата.

2|МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Това проучване е проведено от Хелзинкската декларация и одобрено от Комитета по медицинска етика на Kewpie Corp. и DERMAPRO Ltd. Институционален прегледен съвет, съответно с номера на одобрение 17–4 и 1-220 777-AN-02-DICN18228 . Това проучване е проведено с доброволното съгласие на субектите.

2.1|Реактиви

HAbooster™, козметичен клас HA2k реагент, е получен от Kewpie Corp. (Япония).

2.2|Кожно проникване на HA2k в триизмерен култивиран човешки епидермис и изрязана човешка кожа

Проникването на HA2k беше оценено чрез използване на дифузионна клетка от тип Franz, съгласно предишен доклад.12 Белязани с флуоресцеин (Fl-) HA проби бяха приготвени при<1.25 mg/ml HA in water and dimethyl sulfoxide mixed at a ratio of 2:1 (v:v). Next, 50 mg/ml each of 5-amino fluorescein, cyclohexyl isocyanide, and acetaldehyde was added to bind fluorescein to HA. After 5 h of reaction at room temperature in the dark, the sample was purified by gel filtration chromatography using a PD Midi Trap G-10 (GE Healthcare,) with an exclusion lower limit of 700 M r. The obtained FL-HA solution was lyophilized and used in the following experiments. For evaluation with reconstituted skin by cell culture, a 3D skin model EPI-606X (Mat Tek,), which was confirmed to retain barrier function, was fixed in a Franz-type diffusion cell. The three-dimensional (3D) skin model was precultured for 16–18 h at 37°C, 5% CO2 in the medium provided by the supplier. After the equilibration process, the medium was changed for testing. A 1% solution of Fl-HA samples of 2 or 8 kDa was applied to the upper compartment and then incubated for 5 h. After washing four times with phosphate-buffered saline, the specimen was embedded in OCT compound (Sakura Finetek,) and frozen by using dry ice/acetone for the preparation of the tissue section. For evaluation on human skin, dermatomed abdominal skin from a 34-year-old Caucasian woman (Biopredic International, France) was fixed in a Franz-type diffusion cell. A 0.1% Fl-HA solution (molecular weight, 2 or 1000 kDa) was applied to the human skin. After incubation at 32°C for 24 h, the tissue was subjected to cryosection preparation as described above. The tissue slides were observed under a fluorescent microscope.

2.3|Оценка на метаболизма на колаген в 3D кожен модел и изрязана човешка кожа

Беше използван 3D кожен модел за оценка на ефектите на HA2k върху метаболизма на колагена.13 Накратко, модел с пълна дебелина (EFT-412, Mat Tek), включващ кератиноцити и фибробласти, беше култивиран в 8 ug/ml HA2k- съдържаща среда. След 48 часа кондиционираната среда беше събрана и чрез ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) бяха измерени нивата на проколаген тип 1 (COL1A1) и MMP-1. Тъканта се обработва за имунохистологичен анализ. Колагенът в тъканите се оценява чрез използване на COL1A1 имунохистохимично оцветяване върху тъканни слайдове на фиксирани във формалин парафинови срезове. Срезовете се третират с протеиназа К в продължение на 10 минути при 37 градуса за извличане на антиген. След блокиране, анти-COL1A1 моноклоналните антитела (Abcam) се инкубират при 4 градуса за една нощ. След това предметните стъкла се инкубират с Alexa Fluor® 488 кози анти-заешки IgG (Abcam) при стайна температура в продължение на 2 часа. Ядрото се оцветява обратно с пропидиев йодид. Срезовете се наблюдават под флуоресцентен микроскоп.

2.4|Оценка на плътността на колагена на кожата, влажността и томографията при хора

HA2k се прилага локално върху човешка кожа, за да се оцени функцията му като активна съставка. Осем субекта (две жени и шест мъже; възраст 26–39 години) доброволно са включени в проучването. Предмишниците им бяха разделени на две области с размери 2 cm × 2 cm за пробите, които да се прилагат два пъти на ден. 0.1 процента от разтвора HA2k и контрола на превозното средство бяха приложени отделно към двете зони. На 0, 4 и 8 седмици бяха оценени резултатът за колаген, влажността на кожата и грапавостта на кожата. Субектите бяха аклиматизирани при контролирана атмосфера при 23 градуса ± 1 градуса и относителна влажност от 55 процента ± 2 процента за 20 минути. Този период на аклиматизация беше последван от измерване.

2.5|Оценка на резултата за колаген

Ултразвукът беше използван за измерване на плътността на колагена на кожата (DermaLab, Cortex Technology, Дания).14 Сондата беше приложена върху местата за контрол на лосиона HA2k и превозното средство за измерване на резултатите от колагена. Измерени са общо пет точки, включващи четирите ъгъла и центъра на всяко място, и е изчислена средната стойност.

2.6|Оценка на влажността на кожата

Влажността на кожата беше измерена с помощта на импедансния метод (SKICON, Yayoi).15 Сондата беше приложена към мястото за оценка, за да се измери влажността на кожата. Бяха измерени общо пет точки в четирите ъгъла и центъра. Изчислена е средната стойност.

2.7|Оценка на грапавостта на кожата

Грапавостта на кожата беше измерена чрез визуален анализ (VisioScan, Courage плюс Khazaka Electronic, Германия).16 Изображенията бяха получени в четирите ъгъла и анализирани от софтуера. Изчислена е средната стойност.

2.8|Оценка на бръчките, увисването и еластичността на кожата при хора

Като се има предвид, че дермалният колаген се свързва с бръчки, отпускане и еластичност на кожата, беше оценено приложението на HA2K в козметични продукти. Двадесет и един субекта бяха включени в съответствие със следните критерии: здрави жени с леки до умерени бръчки чрез визуална и фото оценка, варираща от степен на бръчки 1-3 според насоките за класификация на бръчките на Японското козметично научно общество, с назолабиални гънки, нито бременни нито кърмене и липса на чувствителност или свръхчувствителност на кожата. По време на този период на тестване субектите не са използвали никакви козметични продукти, инструменти за красота или процедури за грижа за кожата освен тестовия артикул. Примерните продукти, предоставени като лосион, се прилагат два пъти дневно (сутрин и вечер). Съставите на лосионите са показани в таблица 1. След измиване на лицето, лосионите се нанасят, последвани от определен млечен лосион и крем, ако е необходимо. HA2k лосион се прилага от едната страна, а контролният продукт се прилага от другата страна. Субектите бяха изследвани чрез система за анализ на 3D изображения за оценка на пачи крак, назолабиална гънка, увисване на кожата и еластичност в началото (0 седмици), 4 седмици и 8 седмици след лечението. Всички измервания бяха извършени при дадена относителна температура (20 градуса –24 градуса) и влажност (45 процента –55 процента).

2.9|Измерване на параметрите на бръчките

Параметрите на бръчките на пачия крак и назолабиалната гънка бяха оценени чрез визуален анализ (PRIMOS® Premium and Lite, GFMesstechnik,).17 Изображението беше анализирано в същата област в началото, 4 и 8 седмици след лечението с помощта на софтуер (Primos 5.8 E версия).

2.10|Измерване на еластичността на кожата

Еластичността на кожата беше измерена чрез метода на засмукване (Cutometer® MPA580, Courage plus Khazaka electronic,) съгласно предишен доклад.18 Накратко, кожата беше изтеглена в отвора на сондата при 450 бара за 2 секунди. Впоследствие отрицателното налягане се изключва за 2 s и кожата се оставя да се върне в първоначалната си форма. Извършени са три повторения в един цикъл на измерване. Еластичността на кожата на бузата беше анализирана чрез R2 параметри в началото, 4 и 8 седмици след лечението.

2.11|Измерване на увисването на кожата

Увисването на кожата на бузата беше оценено с помощта на топографския метод на Moire (F-ray®, Beyoung,),19 който е триизмерен морфометричен метод, при който контурните карти се произвеждат от припокриващите се интерферентни ивици, създадени, когато даден обект е осветен от кохерентна светлина. Беше взет моделът Moire на бузата и ъгълът, получен чрез изчертаване на две линии в края на носа, беше анализиран с помощта на софтуер (Image-Pro Plus®, MediaCybernetics,) в началото, 4 и 8 седмици след лечението.

2.12|Статистически анализ

Статистическият анализ беше извършен с помощта на софтуерната програма SPSS® (IBM). U-тестът на Mann-Whitney беше извършен за оценка на ефекта на HA2k върху ремоделирането на колаген in vitro. Ефектът на HA2k върху колагена при хора беше анализиран чрез използване на двоен t-тест. В проучвания върху хора, които оценяват ефекта на HA2k върху бръчките, отпускането и еластичността на кожата, тестът на Shapiro-Wilks или ексцесът и изкривяването са използвани за тестване за нормалност. Статистическият анализ на параметричните променливи беше извършен чрез използване на повторни измервания ANOVA. Ако стойността е непараметрична, всички първоначално се сравняват чрез използване на теста за знаков ранг на Wilcoxon с корекция на Bonferroni. Статистическият анализ за сравнение между местата беше извършен чрез повтарящи се измервания ANOVA или ANCOVA, използвайки стойността на вариацията от изходното ниво до 4 и 8 седмици след лечението. p-стойност от<0.05 was considered to be indicative of statistical significance. Change from baseline (%)   was defined as follows: (Baseline − After treatment)/Baseline × 100.

3|РЕЗУЛТАТИ

3.1|Проникване на кожата на HA2k

В модел на 3D кожа, белязаният с флуоресцеин HA2k премина през роговия слой (Фигура 1), докато 8-kDa HA не го направи. В човешката кожа белязаният с флуоресцеин HA2k прониква в дермата. 1000- kDa НА не преминава през роговия слой. Тези резултати показват, че в сравнение с НА с по-голямо молекулно тегло, НА2k има висока дермална пропускливост.

3.2|Ефект на HA2k върху метаболизма на колагена

В модел на 3D кожа, съдържанието на протеин както на COL1A1, така и на MMP-1 в кондиционираната среда беше регулирано нагоре чрез добавяне на HA2k (Фигура 2). Следователно се приема, че HA2k едновременно насърчава производството на COL1A1 и MMP-1.

3.3|Ефект на HA2k върху съдържанието на колаген и състоянието на кожата при хора

В проучванията при хора резултатите за дермален колаген са били по-високи след 4 седмици на мястото, където е бил приложен 0.1% разтвор на HA2k, отколкото на мястото, където е бил приложен контролният разтвор (Фигура 3). Освен това, състоянията на съдържанието на вода в кожата и грапавостта на кожата са по-добри след 8 седмици на мястото, третирано с разтвора HA2k, отколкото на мястото, третирано с контролния разтвор. Поради това се предполага, че HA2k насърчава производството на колаген в човешката кожа и подобрява нейното състояние.

3.4|Ефект на HA2k върху бръчките, отпускането и еластичността на кожата при хора

При теста с хора максималната дълбочина на пачия крак и назолабиалните бръчки са по-ниски на 4 седмици и 8 седмици от страната, третирана с 0.1 процента HA2k лосион, отколкото от страната, третирана с контролния лосион (Фигура 4) . Увисването на кожата се е подобрило от страната, третирана с лосиона HA2k след 4 седмици в сравнение с изходното ниво. Еластичността на кожата се подобрява след 4 и 8 седмици от страната, третирана с HA2k лосион, докато се подобрява само след 8 седмици от страната, третирана с контролния лосион. Тези резултати показват, че лосионът HA2k подобрява бръчките, отпускането и еластичността на кожата.

4|ДИСКУСИЯ

Съобщава се, че назолабиалната гънка е един от най-силните фактори, които влияят на разликата между действителната възраст на човек и възприеманата възраст. Инжектирането на пълнител е обичаен начин за подобряване на назолабиалната гънка; но ефектът и безопасността зависят от техниката на лекарите. Докладвани са някои тежки странични ефекти от инжектирането, причинени от съдова оклузия, водеща до кожна некроза и слепота.20 HA2k е по-безопасна и по-малко инвазивна опция за подобряване на назолабиалната гънка. Освен това, HA2k беше тестван като формулиран лосион в това проучване и се предполагаше, че е по-практична активна козметична съставка (ACI).

Назолабиалната гънка се причинява от стареенето в дермата и е трудно да се подобри, като се приближи само до горния слой на епидермиса. За да се доставят ACIs до по-дълбоките слоеве, като епидермиса и дермата, е необходимо да проникнат през роговия слой. Преди това,<300-kDa HAs have been shown to permeate through the stratum corneum of excised human skin.21 It is, therefore, reasonable that HA2k permeates through the stratum corneum. Interestingly,   a 1200-kDa HA has been reported to permeate through the stratum corneum of excised skin when polyion complex particles were constructed with a specific polycation.22 It is suggested that higher transdermal absorption of HA2k would be achieved by optimizing the formulation.

Някои доклади посочват, че ACIs регулират синтеза на колаген. По-рано докладвахме за такива ACI, включително HA тетразахариди, 8 соеви пептиди и колагенови пептиди. HA2k е уникален, защото регулира синтеза и разграждането на колаген едновременно. Има нужда да се изясни механизмът на регулиране нагоре на COL1A1 и MMP-1 в бъдещи проучвания.

Съобщава се, че НА с ниско молекулно тегло предизвиква възпаление в кожата23; механизмът на действие обаче остава спорен. Друго проучване, използващо възстановен епидермис, съобщава, че нискомолекулната НА е възпалителна.24 В нашето изследване при хора не са наблюдавани странични ефекти, включително възпалителни симптоми. Нискомолекулното тегло може да е предизвикало възпалително сигнализиране само in vitro, без дерма. При по-сложни условия, като тези на човешката кожа, между различните клетки на тъканите възниква кръстосано смущаване и възпалителната сигнализация се отменя. Трябва да се отбележи, че скорошно проучване показа, че ендогенната фрагментация на HA предизвиква възпалителни реакции, докато екзогенните HA с ниско молекулно тегло (2800– 60 000 Da) не го правят.25

Концентрацията на HA2k, използвана в това изследване при хора, беше 0.1 процента, но оптималната й доза предстои да бъде изяснена. HA2k може да се използва по-широко, ако по-ниските дози са ефективни. Освен това комбинирането с НА с по-високо молекулно тегло би позволило разработването на по-ефективна козметика против стареене, тъй като по-големите НА са по-добри овлажнители.4 HA2k все още е относително рентабилен материал за подобряване на бръчките, тъй като не се прилага интравенозно от лекар.

5|ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В това проучване изследвахме ефекта на HA2k върху подобряването на кожните бръчки чрез локално приложение върху човешката кожа. Назолабиалната гънка и пачият крак бяха значително подобрени от 0.1 процента HA2k лосион. Първата стъпка в предложения механизъм е проникването на HA2k през роговия слой, което потвърдихме чрез извършване на експеримент за проникване в 3D кожен модел и човешка изрязана кожа. Втората стъпка от механизма е активирането на колагеновото ремоделиране от HA2k, което демонстрирахме чрез извършване на ELISA на COL1A1 и MMP-1 в 3D кожен модел и чрез ултразвуков анализ на плътността на колаген в пилотно проучване при хора предмети. Взети заедно, HA2k е обещаваща съставка за козметика против стареене.

АВТОРСКИ ПРИНОС

Изследвания, проектирани от YA и YT. YA, HK и MK извършиха експерименти. YA и SS анализираха данните и SS написа ръкописа под надзора на TY. Всички автори са прочели и одобрили окончателния ръкопис.

БЛАГОДАРНОСТ

Помощта за писане на научна информация беше предоставена от Crimson Interactive Pvt. ООД

КОНФЛИКТ НА ИНТЕРЕСИ 

YT и MK декларират, че нямат конкурентни интереси. YA, SS и HK са служители на Kewpie Corporation, доставчик на HA.

ДЕКЛАРАЦИЯ ЗА НАЛИЧНОСТ НА ДАННИ

Данните, които подкрепят констатациите от това проучване, са достъпни от съответния автор при разумно искане.

ЕТИЧНО ОДОБРЕНИЕ

Това проучване е проведено от Хелзинкската декларация и одобрено от Комитета по медицинска етика на Kewpie Corp. и DERMAPRO Ltd. Институционален прегледен съвет с номера на одобрение 17-4 и 1-220777-AN-02-DICN18228 , съответно

ПРЕПРАТКИ

1. Arseni L, Lombardi A, Orioli D. От структура към фенотип: въздействие на промените на колагена върху човешкото здраве. Int J Mol Sci. 2018; 19: 1407.

2. Page-McCaw A, Ewald AJ, Werb Z. Матрични металопротеинази и регулиране на тъканното ремоделиране. Nat Rev Mol Cell Biol. 2007; 8: 221-233.

3. Лий ДХ, О ДжХ, Чунг Дж. Гликозаминогликан и протеогликан при стареене на кожата. J Dermatol Sci. 2016;83:174-181.

4. Fraser JR, Laurent TC, Laurent UB. Хиалуронан: неговата природа, разпространение, функции и оборот. J Intern Med. 1997; 242: 27-33.

5. Kage M, Tokudome Y, Hashimoto F. Проникване на хиалуронан тетразахариди през кожа на мишка без косми: in vitro и in vivo изследване. Arch Dermatol Res. 2013;305:69-77. doi:10.1007/ s00403-012-1252-2

6. Gesteira TF, Sun M, Coulson-Thomas YM, et al. Богатата на хиалуронан микросреда в нишата на лимбалните стволови клетки регулира диференциацията на лимбалните стволови клетки. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2017;58:4407-4421.

7. Kavasi RM, Berdiaki A, Spyridaki I, et al. HA метаболизъм в кожната хомеостаза и възпалително заболяване. Токсикол за хранителна химия. 2017;101:128-138.

8. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Експресия на хиалуронан синтаза и колаген тип I mRNA от хиалуронан тетразахариди в нормални човешки дермални фибробласти. J Japanese Cosmet Sci Soc. 2013;37:1-5.

9. Kage M, Tokudome Y, Matsunaga Y, Hariya T, Hashimoto F. Ефект на хиалуронан тетразахаридите върху епидермалната диференциация в нормалните човешки епидермални кератиноцити. Int J Cosmet Sci. 2014;36:109- 115.

10. Pavicic T, Gauglitz GG, Lersch P, et al. Ефикасност на кремообразни нови формулировки на хиалуронова киселина с различно молекулно тегло при лечение против бръчки. J лекарства Dermatol. 2011;10:990-1000.

11. Lubart R, Yariv I, Fixler D, Lipovsky A. Локален крем за лице с хиалуронова киселина с нова микронизирана молекулна технология, ефективно прониква и подобрява качеството на кожата на лицето: резултати от in vitro, ex-vivo и in-vivo (отворен ) проучвания. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:39-44.

12. Kano S, Todo H, Sugie K и др. Използване на реконструирани култивирани модели на човешка кожа като алтернативна кожа за изследвания на проникването на химични съединения. Altern Anim Test Exp. 2010;15:61-70.

13. McDaniel DH, Hamzavi IH, Zeichner JA, et al. Пълна защита плюс възстановяване: нова концепция за слънчева защита и подмладяване на кожата. J лекарства Dermatol. 2015;14:s3-s11.

14. Vitral GLN, Aguiar RAPL, de Souza IMF, Rego MAS, Guimarães RN, Reis ZSN. Дебелината на кожата като потенциален маркер за гестационна възраст при раждане въпреки различните профили на растеж на плода: проучване за осъществимост. PLoS One. 2018; 13: e0196542.

15. Clarys P, Clijsen R, Taeymans J, Barel AO. Измервания на хидратацията на роговия слой: сравнение между метода на капацитета (цифрова версия на корнеометъра CM 825) и метода на импеданса (Skicon-200EX). Skin Res Technol. 2012;18:316- 323.

16. Li X, Yuan C, Xing L, Humbert P. Топографско разнообразие на обикновената кожна микрофлора и нейната връзка с вида на околната среда на кожата: наблюдателно проучване при китайски жени. Sci Rep. 2017; 7: 18046.

17. Roques C, Téot L, Frasson N, Meaume S. PRIMOS: оптична система, която произвежда триизмерни измервания на кожни повърхности. J Грижи за рани. 2003;12:362-364.

18. Matsunaga Y, Fujiwara S, Mori Y, et al. Разработване на саморазтварящи се микроигли, състоящи се от хиалуронова киселина като лечение против бръчки. Списание IFSCC. 2012;15:73-78.

19. Борков Г, Елиас АС. Повдигане и изсветляване на кожата на лицето след сън върху калъфки за възглавници, съдържащи меден оксид. Козметика. 2016; 3:24.

20. Sito G, Manzoni V, Sommariva R. Съдови усложнения след инжектиране на лицев филър: преглед на литературата и мета-анализ. J Clin Aesthet Dermatol. 2019;12:E65-E72.

21. Essendoubi M, Gobinet C, Reynaud R, Angiboust JF, Manfait M, Piot O. Проникване на човешка кожа на хиалуронова киселина с различни молекулни тегла, както е изследвано чрез Raman спектроскопия. Skin Res Technol. 2016;22:55-62.

22. Tokudome Y, Komi T, Omata A, Sekita M. Нова стратегия за пасивно доставяне на кожата на наночастици, хиалуронова киселина с високо молекулно тегло, приготвена чрез метод на полийонен комплекс. Sci Rep. 2018; 8: 2336.

23. Jiang D, Liang J, Noble PW. Хиалуронът е имунен регулатор при човешки заболявания. Physiol Rev. 2011; 91: 221-264.

24. Farwick M, Gauglitz G, Pavicic T, et al. Хиалуроновата киселина от 50 kDa регулира някои епидермални гени, без да променя експресията на TNF в реконституирания епидермис. Skin Pharmacol Physiol. 2011;24:210-217.

25. Takabe P, Kärnä R, Rauhala L, Tammi M, Tammi R, PasonenSeppänen S. Фрагментацията на меланоцитната хиалуронова обвивка подобрява индуцираното от UVB TLR{2}} рецепторно сигнализиране и експресия на провъзпалителни медиатори IL6, IL8, CXCL1 и CXCL10 чрез NF-kappaB активиране. J Invest Dermatol. 2019;139:1993-2003.

【За повече информация: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】