Хетерологичен AZD1222 първичен режим и режим на усилване на BNT162b2 по-ефективно предизвиква неутрализиращи антитела, но не и Т-клетки на паметта, отколкото хомоложния режим BNT162b2
Aug 07, 2023
абстрактно
Предистория: Необходими са сравнителни анализи на SARS-CoV-2-специфични имунни отговори, предизвикани от различни режими на основно усилване, за да се установят ефективни режими за контрол на COVID-19. Метод: В това проспективно обсервационно кохортно проучване, пик-специфичен имуноглобулин G (IgG) и неутрализиращи антитела (nAbs) заедно със спайк-специфични Т-клетъчни отговори в съвпадащи по възраст групи на хомоложна BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222 ваксинация, хетероложен AZD1222/ Бяха оценени ваксинация BNT162b2 и предишна инфекция/ваксинация с див тип SARS-CoV-2. Резултати: Пиковите имунни отговори са постигнати след втората доза ваксина в нелекувани ваксинирани групи и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. Пиковите титри на анти-спайк IgG и nAb са значително по-високи в групите с AZD1222/BNT162b2 ваксинация и предишна инфекция/ваксиниране, отколкото в групите с BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222. Въпреки това, честотата на интерферон-с-продуциращи CD4 плюс Т клетки е най-висока в групата на ваксинирана BNT162b2/BNT162b2. Подобни резултати се наблюдават при анализа на полифункционални Т клетки. Когато nAb и CD4 плюс Т-клетъчните отговори срещу Делта варианта бяха анализирани, групата с предишна инфекция/ваксинация показа по-високи отговори от групите на други хомоложни или хетероложни режими на ваксиниране. Заключение: nAbs са ефективно предизвикани чрез хетероложна AZD1222/BNT162b2 ваксинация, както и предишна инфекция/ваксинация, докато шипове-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори са ефективно предизвикани чрез хомоложна BNT162b2 ваксинация. Вариантно разпознаващият имунитет се генерира по-ефективно чрез предшестваща инфекция/ваксинация, отколкото другите хомоложни или хетероложни схеми на ваксиниране.
cistanche tubulosa - подобряват имунната система
1. Въведение
Коронавирус 2 на тежкия остър респираторен синдром (SARS-CoV-2) се разпространява в световен мащаб от появата си през декември 2019 г. и разработването на ефективни ваксини срещу коронавирусната болест 2019 (COVID-19) е ускорено [1 ]. Успехът на начинанието беше забелязан сравнително бързо и няколко ваксини, използващи spike (S) протеин като антиген на ваксината, успешно демонстрираха безопасност и ефективност при предотвратяването на симптоматичен COVID-19. По-конкретно, базираната на иРНК ваксина BNT162b2 (Comirnaty, Pfifizer-BioNTech) и базираната на аденовирусен вектор ваксина AZD1222 (Vaxzevria, AstraZeneca) бяха първоначално одобрени и широко прилагани като двудозов режим с първично усилване. Две дози BNT162b2 имаха 95 процента (95 процента доверителен интервал [CI], 90–98 процента) ефикасност срещу симптоматичен COVID-19 [2], а две дози AZD1222 имаха 70 процента (95 процента CI, 55–81 процент ) ефикасност [3]. Интересно е, че хетероложните режими на първично усилване на лицензирани ваксини срещу COVID-19 спечелиха значителен интерес и впоследствие бяха започнати в няколко страни въпреки недостатъчните данни относно имуногенността и безопасността. BNT162b2, приложен като усилваща доза при индивиди, първично ваксинирани с AZD1222, индуцира силен S-специфичен имуноглобулин G (IgG) титри на антитела (Ab), отговори на неутрализиращи антитела (nAb) и интерферон-с плюс (IFN-c плюс) Т клетки [4 ,5]. Въпреки това, малко проучвания са оценили ефикасността на хетероложна ваксинация с AZD1222/BNT162b2 в сравнение с хомоложна ваксинация с BNT162b2/BNT162b2 [6–8] и в тези проучвания липсва цялостна оценка на S-специфичните Т-клетъчни отговори. Съответно, дали хетероложната AZD1222/BNT162b2 ваксинация води до мощни кръстосани варианти на nAb или Т-клетъчни отговори остава неясно. Друг пример за хетероложно иницииращо усилване може да се види при лица, които са били заразени със SARS-CoV-2 и по-късно ваксинирани срещу вируса. Няколко проучвания предполагат, че нивата на специфично свързване на Ab и nAb се откриват във високи нива при индивиди с предишна инфекция и ваксинация, въпреки че няма сравнителни анализи [9,10]. Здравните работници с предишна SARS-CoV-2 инфекция имат по-високи титри на Ab в отговор на единична доза иРНК ваксина, отколкото тези, които не са били заразени преди [11]. Нещо повече, индивиди с предишна инфекция проявяват засилени S-специфични Т-клетъчни отговори и Ат-секретиращи реакции на В-клетки на паметта след основната доза без усилващата доза [12]. В настоящото проучване, ние изчерпателно изследвахме хуморалната и клетъчната имуногенност на хомоложни и хетероложни първични усилващи режими в проспективна обсервационна кохорта с паралелни сравнения на S-специфично свързване на Ab, nAb и S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори . Ние също така оценихме имунологичните резултати при участници, които са били заразени с див тип SARS-CoV-2 и са получили ваксини срещу COVID-19, за да определим дали предишната инфекция и ваксинацията ефективно предизвикват имунен отговор срещу Делта варианта.
Cistanche ползи за мъжете - укрепване на имунната система
2. Методи
2.1. Уча дизайн
Многоцентрова проспективна кохорта беше създадена през март 2021 г. за изследване на имунните отговори на ваксинация срещу COVID-19. Участниците в тази кохорта бяха доброволно наети сред здравни работници и първоначално бяха планирани да получат две дози BNT162b2 на 3-седмичен интервал или AZD1222 на 12-седмичен интервал. Въпреки това, част от лицата, първично ваксинирани с AZD1222, получиха бустерната доза BNT162b2 между май и юни 2021 г. и бяха включени в групата за ваксинация AZD1222/BNT162b2. Сред участниците в кохортата, тези, които са имали предишна инфекция от див тип SARSCoV-2 и са получили BNT162b2 или AZD1222, са включени като група с предишна инфекция/ваксинация. Всички реципиенти на ваксина, анализирани в това проучване, са съвпадащи по възраст между групите. Бяха събрани проби от периферна кръв от всички участници в кохортата във всяка времева точка (T): преди и 3 седмици след първата доза ваксина (съответно T1 и T2), 5 седмици след първата доза BNT162b2 или 11 седмици след първата доза AZD1222 (T3) и 14 седмици след първата доза ваксина (T4). Схематично представяне на протокола на изследването е предоставено на Фиг. 1. За сравнение, реконвалесцентни проби са получени от неваксинирани пациенти, заразени с SARSCoV-2 Delta вариант, потвърден от полимеразна верижна реакция на обратна транскрипция в реално време, използвайки Seegene Allplex { {38}}nCoV Assay Kit (Seegene, Корея) и Illumina BTSeq SARS-CoV-2 комплект за секвениране на целия геном (Celemics Inc, Корея) на MiSeq секвенсер (150-bp paired-end mode; Illumina, Сан Диего, Калифорния, САЩ). Базовата последователност, получена чрез BTseq, беше сравнена с NCBI референтна последователност NC_045512.2 с помощта на софтуера IGV 2.10 за потвърждаване на Делта варианта. Проучването беше одобрено от институционалните съвети за преглед на всеки участващ институт и проведено в съответствие с принципите на Декларацията от Хелзинки. Всички участници предоставиха писмено информирано съгласие преди записване.
2.2. Участници в проучването
Тази група се състои от 22 участници, които са получили хомоложна BNT162b2/BNT162b2 ваксинация (средна възраст, 38.0 години; 31,8% мъже), 20 участници, които са получили хомоложна AZD1222/AZD1222 ваксинация (средна възраст, 39,7 години; 23,8% мъже) и 9 участници, които са получили хетероложна ваксинация AZD1222/BNT162b2 (средна възраст 38,2 години; 33,3 процента мъже). От 11 участници с предишна инфекция от див тип SARS-CoV-2 (средна възраст 38,5 години; 27,3 процента мъже), 2 и 9 са били ваксинирани съответно с BNT162b2/BNT162b2 и AZD1222/AZD1222. Демографските данни на различните ваксинирани групи са предоставени в допълнителна таблица 2. Всички участници с предишна инфекция от див тип SARS-CoV-2 са имали асимптоматичен или лек COVID-19, а 3 от тях са имали пневмония. Средното време от потвърждаване на COVID-19 до първата ваксинация е 121,5 (интерквартилен диапазон [IQR], 102,3–252,5) дни. Демографските данни на участниците с предишна инфекция от див тип SARS-CoV-2 и ваксинация са предоставени в допълнителна таблица 1. Реконвалесцентни проби са получени от 17 пациенти (средна възраст 53 години; 52,9 процента мъже), заразени със SARS -CoV-2 Delta вариант и хоспитализиран за умерен до критичен COVID-19 (умерен, 17,6 процента; тежък, 35,3 процента; критично болен, 47,1 процента). Средното време от появата на свързаните с COVID-19-симптоми до вземането на проби е 24 (IQR, 22–32) дни. Демографските данни на SARS-CoV-2 Delta реконвалесцентни участници са предоставени в Допълнителна таблица 2 и Таблица 3.
2.3. Свързващи антитела
SARS-CoV-2 S-специфични свързващи антитела бяха анализирани с помощта на търговски имуноанализ. Анализът на Elecsys anti-S протеин (Roche Diagnostics, Германия) е електрохемилуминесцентен имуноанализ, използван за откриване на SARS-CoV-2 S-специфични антитела на анализатора Cobas e411 (Roche Diagnostics, Германия), с диапазон на измерване от { {8}}.4 U/mL до 250 U/mL (до 2500 U/mL с вградено разреждане 1:10 и до 12 500 U/mL с вградено разреждане 1:50). Рекомбинантният рецепторен свързващ домен на S протеина беше използван с принципа на сандвич с двоен антиген. Антигените в реагента улавят предимно анти-SARSCoV-2 IgG. Анализът на Elecsys за антинуклеокапсиден протеин (Roche Diagnostics, Германия) беше използван за откриване на предишни инфекции със SARS-CoV-2 с граничен индекс 1,0.
ползи от добавката Cistanche - повишава имунитета
2.4. Тест за неутрализиране на редукция на плака
Тестове за неутрализиране на плака за див тип SARS-CoV- 2 вируси (BetaCoV/Корея/KCDC03/2020) и Делта вариант щам YS117 (GenBank номер за достъп MZ798798 и GISAID номер за достъп EPI{ {8}}ISL_3411836) бяха извършени с помощта на плазмени проби. Вирусът е отгледан върху клетки Vero E6 в лаборатория с ниво 3 на биобезопасност в Центъра за биомедицински изследвания Avison в Сеул, Корея. Проби от инактивирана плазма (135 lL) от проби от инактивирана плазма бяха 2-кратно серийно разредени (1:40 до 1:1280) и добавени към равен обем от 100 пъти 50-процентната инфекциозна доза от тъканна култура (TCID50) на вирус. Изолатите, съдържащи 100 пъти TCID50, се инкубират в 96-плаки с ямки за 60 минути при 37°С. Вирусно-плазмени смеси се инкубират за 60 минути при 37°С в CO2 инкубатор. След това смесите вирус-плазма се добавят към Vero E6 клетки, посяти в 24-плака с ямки с 1x105 клетки/ямка и се инкубират в продължение на 1 час при 37°C. Покриваща се среда, съставена от 2 процента фетален говежди серум (FBS) в DMEM и 1 процент агар се добавя към клетките Е6 и се инкубират в продължение на 3 дни при 37°С в CO2 инкубатор. След образуването на плака се използват 10% разтвор на формалдехид и 0,33% неутрално червено във фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS) за фиксиране и оцветяване на слоя клетъчна култура. Неутрализиращото разреждане на всяка проба се определя чрез идентифициране на ямката с най-високо плазмено разреждане без наблюдаван цитопатичен ефект. 50-те процента неутрализиращи дози (ND50) бяха изразени като реципрочно разреждане на плазмата, което доведе до 50-процентно намаление на броя на плаките в сравнение с положителната вирусна контрола. Методът на Spearman-Kärber беше използван за изчисляване на ND50 титрите. В сравнение с международни стандартни серуми на СЗО (NIBSC 20–136; титър на nAb: 1000 IU/mL), титрите на nAb бяха превърнати в международни единици на милилитър (IU/mL).
Фиг. 1. Схематично представяне на групите реципиенти на ваксината. Схема на изследване за откриване на SARS-CoV-2 шипове-специфични свързващи антитела, неутрализиращи антитела и Т-клетъчни отговори в проби от периферна кръв от лица, ваксинирани срещу COVID-19. Проучването включва BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) и предишен див тип SARS-CoV{{20 }} групи инфекция/ваксинация (n=11). Сред предишната инфекция/ваксинация с див тип SARS-CoV-2, 2 и 9 са били ваксинирани съответно с BNT162b2/BNT162b2 и AZD1222/AZD1222. Историята на инфекцията със SARS-CoV-2 е потвърдена чрез положителен тест за анти-SARS-CoV-2 нуклеокапсидно антитяло. T, времева точка; седмици, седмици.
2.5. Т-клетъчни анализи
Мононуклеарни клетки от периферна кръв (PBMC) се изолират чрез центрофугиране в градиент на плътността, като се използват епруветки Leucosep (Greiner Bio-One), съдържащи среда за разделяне на лимфоцити. След центрофугиране при 800 g за 15 минути със спиране, обогатената клетъчна фракция, състояща се от PBMCs, се събира и промива с 20 mL PBS. След центрофугиране при 300 g за 10 минути, клетъчната пелета се ресуспендира в 10 mL PBS за преброяване. След центрофугиране при 300g за 10 минути, клетките бяха криоконсервирани в FBS с 10 процента диметилсулфоксид при 180°С до употреба. За вътреклетъчно оцветяване с цитокини (ICS) на IFN-c, интерлевкин-2 (IL-2) и фактор на туморна некроза (TNF), използвахме пептидни групи от 15-mer пептиди, припокриващи се с 11 аминокиселини, покриващи имунодоминантните части на SARS-CoV-2 Wuhan S протеин (aa 304–338, 421–475, 492–519, 683–707, 741–770, 785–802 и 885–1273; Miltenyi Biotec). За да сравним Т-клетъчните отговори срещу щамовете Wuhan и Delta, ние използвахме два различни набора от S пептидни пулове, включващи незапазени региони на S последователности между щамовете Wuhan и Delta (B.1.617.2 линия) (Miltenyi Biotec). След размразяване на PBMCs и оставянето им в покой за една нощ, 1 106 PBMCs бяха стимулирани с пептидни пулове при крайна концентрация от 1 mg/mL и анти-човешки CD28/CD49d (1 mg/mL; BD Biosciences) за 1 час в { {45}}ямкова плака в RPMI-1640 среда, съдържаща 1 процент пеницилин–стрептомицин, 2 mM L-глутамин и 10 процента FBS. PBMC култура се инкубира за още 5 часа след добавянето на брефелдин А и монензин (BD Biosciences) при 37 °С в 5 процента CO2. След стимулацията клетките се промиват с PBS и се оцветяват с Live/Dead-Aqua (Invitrogen) за 20 минути при стайна температура, последвано от коктейл от повърхностни Abs за 20 минути при стайна температура, включително анти-CD14- BV510, анти-CD19-BV510, анти-CD4- BV650, анти-CD3-BV786 и анти-CD8-APC-Cy7 (BD Bioscience). Клетките бяха фиксирани и пермеабилизирани с помощта на набор от буфери за оцветяване на Foxp3/транскрипционен фактор (eBioscience) и след това оцветени с коктейл от вътреклетъчни Abs, включително анти-TNF-FITC, анти-IL-2-PE (eBioscience) и анти- IFN-c-APC (BD Biosciences) за 20 минути при стайна температура. След завършване на оцветяването, клетките бяха анализирани на LSR II инструмент с FACSDiva (BD Biosciences) и данните бяха анализирани в софтуер FlowJo (FlowJo LLC).
растение цистанче, повишаващо имунната система
2.6. Статистически анализ
Данните, нанесени в линейна скала, бяха изразени като средно ± стандартно отклонение. Данните, нанесени в логаритмични скали, бяха изразени като средно геометрично ± геометрично стандартно отклонение. Тестове Mann-Whitney U или Wilcoxon бяха приложени съответно за несдвоени или сдвоени сравнения. Статистическите анализи бяха {{0}}откъснати, като P < 0.05 се счита за значимо. Всички анализи бяха извършени в R studio или GraphPad Prism v9.0.
3. Резултати
3.1. Кинетика на имунните отговори, предизвикани от различни схеми на ваксиниране
Първо, изследвахме анти-S IgG титри след ваксинация с различни режими. Както се очакваше, първата доза значително повиши анти-S IgG титрите (Т2), а втората доза допълнително повиши значително анти-S IgG титрите в хомоложните BNT162b2/BNT162b2 (Т3) и AZD1222/AZD1222 ваксинация (Т4) и хетероложния AZD1222/ BNT162b2 ваксинирани (Т4) групи (Фиг. 2А). В групата с предишна инфекция/ваксинация, първата доза повишава максимално анти-S IgG титрите (Т3), но втората доза не повишава допълнително анти-S IgG титрите (Т4). Ние също изследвахме S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори след директна ex vivo стимулация с пептидни пулове, покриващи SARSCoV-2 Wuhan див тип S протеинова последователност. Въз основа на ICS, първата доза значително повиши честотата на IFN-c-продуциращите клетки сред CD4 плюс Т клетките, а втората доза допълнително увеличи значително честотата в BNT162b2/BNT162b2 (T3) и AZD1222/BNT162b2 ваксинираните (T4) групи (Фигура 2B). В групите с AZD1222/AZD1222 и предишна инфекция/ваксинация, първата доза значително повишава честотата на IFN-c плюс клетки сред CD4 плюс Т клетки, но втората доза не повишава допълнително честотата.
3.2. Сравнение на титрите на Ab между различни режими
След това сравнихме пиковите титри на свързващото Ab сред различните режими на ваксиниране. Като пикови титри избрахме анти-S IgG титри след втората доза в BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 ваксинирани групи и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. Пиковите титри на анти-S IgG са значително по-високи в групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2, отколкото в групите на ваксинация BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222 (Фиг. 3A). По подобен начин, пиковите титри на анти-S IgG са значително по-високи в групата с предишна инфекция/ваксинация, отколкото в групите на ваксинация BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222. Нямаше разлика в анти-S IgG титрите между AZD1222/BNT162b2 и групите с предишна инфекция/ваксинация. Ние също така оценихме титрите на nAb в пиковите времеви точки: след втората доза в групите на ваксинация BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. Забележително е, че титрите на nAb са значително по-високи в групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2, отколкото в групите на ваксинация BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222 (Фиг. 3В). В допълнение, титрите на nAb са значително по-високи в групата с предишна инфекция/ваксинация, отколкото в групите на ваксинация с BNT162b2/BNT162b2 или AZD1222/AZD1222. Нямаше разлика в титрите на nAb между AZD1222/BNT162b2 и групите с предишна инфекция/ваксинация. Нивото на хуморален отговор, предизвикано от различни режими на ваксиниране, беше категоризирано в силни, умерени и без/слаби отговори въз основа на класирането на перцентила. Пропорцията на силно отговорилите е най-висока в групата с предишна инфекция/ваксинация, последвана от групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2 по отношение на анализа на анти-S IgG (Фигура 3C) и nAb (Фигура 3D). Взети заедно, тези резултати показват, че хетероложното праймиране и усилване, включително както AZD1222/BNT162b2 ваксинация, така и предходна инфекция/ваксиниране, е по-ефективно при генерирането на хуморални отговори, отколкото хомоложното праймиране и усилване.
3.3. Сравнение на S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори между различни режими
Ние също така сравнихме S-специфичните CD4 плюс Т-клетъчни отговори сред различните режими на ваксиниране в пиковите моменти: след втората доза в BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 групите на ваксинация и след първата доза в предишните ваксинационни групи група инфекция/ваксинация. За разлика от титрите на анти-S IgG и nAb, честотата на IFN-c плюс клетки сред CD4 плюс Т клетки е най-висока в BNT162b2/BNT162b2 ваксинирана група (Фиг. 4А). Делът на силно отговорилите също беше най-висок в групата на ваксинация BNT162b2/BNT162b2, последвана от групата с предишна инфекция/ваксинация (Фиг. 4B). Тези резултати показват, че имунизацията с второто хомоложно усилване на BNT162b2 по-ефективно предизвиква Т-клетъчни реакции на паметта, отколкото втората хетероложна усилваща ваксинация или ваксинацията с първа доза след естествена SARS-CoV-2 инфекция. Напротив, хетероложните режими на основно усилване са по-склонни да развият по-високи нива на хуморален имунен отговор. Ние също анализирахме относителната честота на полифункционални CD4 плюс Т клетки, които едновременно произвеждат множество цитокини (т.е. IFN-c, IL-2 и/или TNF). Ваксинираната BNT162b2/BNT162b2 група показва значително по-високи честоти на полифункционални клетки, произвеждащи 2 цитокина сред S-специфични CD4 плюс Т клетки, отколкото ваксинираните групи AZD1222/AZD1222 или AZD1222/BNT162b2 (Фиг. 4C). Няма разлика в честотата между ваксинираните с BNT162b2/BNT162b2 групи и групите с предишна инфекция/ваксиниране. Честотата на полифункционалните клетки е значително по-висока в групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2, отколкото в групата на ваксинация AZD1222/AZD1222. Кръгови графики, представящи единични, двойно- и тройно положителни CD4 плюс Т клетки по отношение на производството на цитокини, отговарящи на S припокриващи се пептидни пулове, също показват относително висока честота на двойно- или тройно положителни клетки при BNT162b2/BNT162b2 ваксинация и преди това инфекция/- ваксинационни групи (Фиг. 4D).
3.4. Имунни отговори срещу Делта варианта сред различни режими
И накрая, анализирахме имунните отговори срещу Делта варианта. В този анализ включихме реконвалесцентни лица, които са се възстановили от SARS-CoV-2 Delta инфекция за сравнение. Титрите на nAb, специфични за Делта варианта, са значително по-високи в групата с предишна инфекция/ваксинация, отколкото в групите на ваксинация с BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 или AZD1222/BNT162b2, и са дори по-високи от тези в реконвалесцентните индивиди с Делта (фиг. 5A). . Ние също така изследвахме CD4 плюс Т-клетъчните отговори срещу S протеина на Делта варианта. В този анализ извършихме ICS на IFN-c след директна ex vivo стимулация, използвайки два различни набора от S пептидни групи, включващи незапазени региони на S последователности между щамовете Wuhan и Delta и изчислихме съотношението на честотата на Delta S-специфичния IFN-c плюс клетки до честотата на Wuhan S-специфични IFN-c плюс клетки. Както се очакваше, съотношението беше най-високо при реконвалесцентните индивиди от Delta. Интересно е, че съотношението е по-високо в групата с предишна инфекция/ваксинация, отколкото в групата на ваксинация BNT162b2/BNT162b2 (Фиг. 5B), въпреки че Wuhan S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори са най-високи в групата на ваксинация BNT162b2/BNT162b2 (Фиг. 4А). Взети заедно, тези резултати показват, че nAb и CD4 плюс Т-клетъчните отговори, които кръстосано разпознават Делта варианта, се генерират по-ефективно от предишна инфекция/ваксиниране, отколкото хомоложните или хетероложните схеми на ваксиниране.
Фигура 2. Отговори на антитела и Т-клетки, предизвикани от различни режими на първично усилване. Надлъжни имунни отговори според графика за вземане на проби от преди ваксинацията до 14 седмици след първата ваксинация. (A) SARS-CoV-2 спайк-специфични свързващи антитела са измерени в BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/ BNT162b2 (n {{ 20}}) и предишна инфекция/ваксинация (n=6) групи. (B) SARS-CoV-2 спайк-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори бяха измерени в BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 (n=9) и групи с предишна инфекция/ваксинация (n=7). Данните са представени като средно геометрично ± геометрично SD (A) или средно ± SD (B). Статистическите анализи между времевите точки във всяка група бяха извършени с помощта на Wilcoxon signed-rank test. ns, не е значимо; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Фиг. 3. Хуморални имунни отговори в пикови времеви точки. (A) SARS-CoV-2 спайк-специфични свързващи антитела бяха сравнени между BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n {{ 15}}) и предишна инфекция/ваксинация (n=6) групи в пиковите моменти. (B) Неутрализиращи антитела бяха сравнени между BNT162b2/BNT162b2 (n=22), AZD1222/AZD1222 (n=20), AZD1222/BNT162b2 (n=9) и предишна инфекция/ваксинация ( n=11) групи в пикови времеви точки. Пиковите времеви точки бяха избрани, както следва: след втората доза в BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 ваксинационни групи и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. Данните са представени като средно геометрично ± геометрично SD и са анализирани за значимост с помощта на теста на Mann-Whitney. (C и D) Процентите на участниците с различни нива на хуморален имунен отговор. Количественото определяне на типа отговор (силен, умерен и никакъв/слаб) се изразява като част от броя на реципиентите на ваксината във всяка група. Типовете отговорили бяха определени от перцентилния резултат, изчислен от всички ваксинирани участници. ns, не е значимо; *P < {{40}}.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
4. Дискусия
Понастоящем разрешените иРНК ваксини и аденовирусните векторни ваксини са показали забележителна ефикасност при предотвратяването на COVID-19. Счита се обаче, че хетероложната първична усилваща ваксинация подобрява имуногенността и смекчава периодичния недостиг на доставки [13]. В допълнение, повдигнати са въпроси за безопасността на аденовирусните векторни ваксини след разпознаването на тежки нежелани събития, включително животозастрашаваща венозна тромбоза, свързана с ваксинацията с AZD1222, особено при по-млади жени [14,15]. Те са довели до хетероложна иРНК бустер имунизация за тези, които вече са получили първата доза AZD1222. Въпреки че няма налични данни за ефективност, много национални здравни органи приеха хетероложни режими на разрешени ваксини срещу COVID-19. По този начин сравнителното изследване на хуморалните и клетъчните имунни отговори, предизвикани от различни режими на ваксинация с първично усилване, е информативно и помага за по-доброто разбиране на предизвикателствата в реалния свят. В настоящото проучване ние демонстрирахме диференциална индукция на хуморален и клетъчен имунитет чрез хетероложни първични усилващи ваксинации (допълнителна таблица 4). В рязък контраст както с нивата на специфично свързване на Ab, така и с неутрализационните титри, които са били най-високи в групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2, S-специфичните CD4 плюс Т-клетъчни отговори са най-високи в групата на ваксинация BNT162b2/BNT162b2, а не в групата на ваксинация AZD1222/BNT162b2 група. Относително ниските нива на S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори във ваксинирани с AZD1222/BNT162b2-участници бяха неочаквани и все още могат да изложат тези индивиди на риск от тежка SARS-CoV-2 инфекция. Нашите констатации се различават от тези, докладвани от Schmidt и колеги, които предполагат, че при хетероложно BNT162b2 усилване, титрите на nAb и Т-клетъчните отговори са значително повишени при AZD1222-праймирани индивиди [7]. Въпреки това, абсолютната честота на CD69 плюс IFN-c плюс клетки сред CD4 плюс Т клетки беше само незначително увеличена и това проучване изключи задълбочени анализи на полифункционалността на S-специфичните Т-клетъчни отговори. За лица, които преди това са били заразени, първата доза ваксина може да действа като бустер имунизация и мощно да индуцира хуморални и клетъчни отговори [16,17]. Тъй като се предполага, че титърът на nAb е ключов корелат на защитата срещу SARS-CoV-2 инфекция [18], нашите резултати се вписват добре в скорошното откритие за благоприятно повишаване на имунитета, придобит от инфекция, с коригирана ефективност на ваксината от > 90 процента след първата доза при реципиенти на ваксина, които са имали предишна SARS-CoV-2 инфекция [19]. Освен това, въпреки значителното избягване на отговорите на nAb срещу Delta варианта сред участниците в проучването, ние наблюдавахме най-високите нива на nAb кръстосано разпознаване на Delta варианта в групата участници с предишна инфекция от див тип SARS-CoV-2 и ваксинация. Въпреки това, в съответствие с групата на хетероложна AZD1222/BNT162b2 ваксинация, тези с предишна инфекция, които са били ваксинирани, имат по-слаб S-специфичен CD4 плюс Т-клетъчен отговор, отколкото индивидите с хомоложна BNT162b2/BNT162b2 ваксинация без предшестваща инфекция. Трябва да се отбележи, че нашите резултати показват, че две дози от BNT162b2 водят до надеждна и стабилна индукция на S-специфични CD4 плюс Т-клетъчни отговори, значително по-високи от други режими на ваксинация с основно усилване. Тези констатации са в съответствие с неотдавнашен доклад за четири различни ваксини срещу COVID-19 [20], докато нашият анализ включваше хетероложни режими с основно усилване и хибриден имунитет от предишна инфекция и ваксинация. Съответно, платформите за иРНК ваксини могат да бъдат избрани заради способността им да индуцират стабилни CD4 плюс Т-клетъчни отговори на паметта. Тъй като честотата на пробивна инфекция след ваксинация се увеличава в световен мащаб, има нарастващ интерес към защитата на имунитета от тежка форма на COVID-19. Тъй като новите варианти на SARS-CoV-2 продължават да се появяват и избягват хуморалната имунна защита, клетъчният имунитет, който е насочен към широк спектър от SARS-CoV-2 епитопи, разпознати от Т клетките, може да осигури стабилен защитен имунитет [21 ], въпреки че детерминантите на клетъчните отговори в медиираната от ваксина защита все още не са точно определени. Следователно дали повишената хуморална имуногенност на хетероложна AZD1222/BNT162b2 ваксинация последователно се превръща в подобрена защита остава неясно и това изисква допълнително проучване. В допълнение, трябва да се проучи дали хората, които са развили слаби T-клетъчни отговори след ваксинация, като тези, които са имунизирани с AZD1222, могат да се възползват от съставите на Т-клетъчна ваксина [22]. Както индуцираният от инфекция, така и индуцираният от ваксината имунитет естествено отслабва с времето; въпреки това изглежда, че по-голяма защита се предоставя на лица, които преди това са били заразени със SARS-CoV-2 [23]. При ваксинирани индивиди пробивната инфекция с варианта Omicron предизвиква по-малки отговори на nAb, отколкото инфекцията с варианта Delta [24], и относително малко се знае за потенциалните последици от хибридния имунитет, предоставен от инфекция и ваксинация с различни щамове. Независимо от това, наличието на полифункционални S-специфични Т клетки в предишни заразени и ваксинирани участници в нашето проучване е в съответствие с по-бавно намаляване на защитата срещу тежък COVID-19 в тази популация и може да допринесе за промяна на тежестта на заболяването след повторна инфекция със SARS -CoV-2 варианти [25,26]. Настоящото проучване има няколко ограничения. Първо, малкият размер на извадката в кохортата прави стабилния статистически анализ предизвикателство; следователно нашите открития ще трябва да бъдат допълнително валидирани в по-големи кохорти. Второ, не успяхме да тестваме проби в по-късни времеви точки, за да определим трайността и отслабването на хуморалните и клетъчните имунни отговори. Трето, нашите резултати могат да подценят влиянието на субдоминантните Т-клетъчни епитопи извън доминантните епитопи. Четвърто, изследвахме само циркулиращи лимфоцити и може да са необходими бъдещи изследвания на дрениращи лимфни възли след ваксинация, за да разберем механизмите, лежащи в основата на диференциалните реакции, наблюдавани тук. В обобщение, настоящото проучване с директни сравнения, съответстващи на възрастта, хвърля светлина върху противоречивата хуморална и клетъчна имуногенност на хетероложното праймиране и усилване в контекста на експозицията на SARS-CoV-2 антиген. Нашите открития подчертават как индивидуалният имунологичен опит оформя последващия имунен отговор, предизвикан от ваксинацията срещу COVID-19. Допълнителни данни за ефективност в реалния свят и лабораторни изследвания допълнително ще информират за най-подходящата стратегия за ваксиниране за защита от нововъзникващи варианти на SARS-CoV-2, с отражение върху разработването на платформи за ваксини от следващо поколение.
Фиг. 4. Клетъчни имунни отговори в пикови времеви точки. (A) Честотите на пик-специфични IFN-c плюс клетки сред CD4 плюс Т клетки бяха сравнени между BNT162b2/BNT162b2 (n=19), AZD1222/AZD1222 (n=18), AZD1222/BNT162b2 ( n=9) и предишна инфекция/ваксинация (n=7) групи в пиковите моменти. Пиковите времеви точки бяха избрани, както следва: след втората доза в BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 ваксинационни групи и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. (B) Процентите на участниците с различни нива на клетъчни имунни отговори. Количественото определяне на типа отговор (силен, умерен и никакъв/слаб) се изразява като част от броя на реципиентите на ваксината във всяка група. Типовете отговорили бяха определени от перцентилния резултат, изчислен от всички ваксинирани участници. (C) Честотите на полифункционалните шипове-специфични CD4 плюс Т клетки, произвеждащи всяка комбинация от IFN-c, IL-2 или TNF във всяка група ваксинирани участници. (D) Фракцията на шипове-специфичните CD4 плюс Т клетки е положителна за даден брой цитокини. Данните са представени като средно ± SD. Значимостта беше анализирана с помощта на теста на Mann-Whitney (A и C). ns, не е значимо; *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001.
Освен това съставката на традиционната китайска медицинабилка цистанчеможе също така да повиши имунитета, Механизмът на Cistanche deserticola за повишаване на имунитета
Ползи от добавката Cistanche - как да подсилим имунната система
Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Enhance Imunity
【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche tubulosaполизахаридите могат да стимулират пролиферацията на Т и В лимфоцити, но пролиферативният ефект на В лимфоцитите е значително по-силен от този на Т лимфоцитите. Полизахаридите на Cistanche deserticola насърчават освобождаването на цитокин IL22 от лимфоцитите, което е свързано с насърчаване на пролиферацията на лимфоцити в далака. Cistanche deserticola може да активира макрофагите и да регулира имунната система. Полизахаридите на Cistanche deserticola, ехиназидът и пилозидът имат значителни ефекти върху образуването и активността на човешките лимфоцити. Може да повиши реакцията на пролиферация на лимфоцитите, като по този начин засили имунната функция на тялото.
екстракт от цистанче
Функционалните компоненти наCistanche tubulosaобщите гликозиди имат значително въздействие върху възстановяването на клетките след радиационно увреждане от 60Coy и могат също така да подобрят имунната функция срещу радиационно увреждане.
Екстрактът от Cistanche tubulosa може не само да компенсира вродения имунен дефицит, но и да засили придобития имунитет.
Фигура 5. Кръстосано-вариантни имунни отговори срещу Delta, предизвикани от различни режими на основно усилване. (A) Плазмените проби бяха анализирани чрез тестове за неутрализиране на редукция на плака за SARS-CoV-2 Delta вариант в BNT162b2/BNT162b2 (n {{10}}), AZD1222/AZD1222 (n {{ 13}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), предишна инфекция/ваксинация (n=11) и делта-реконвалесцентни (n {{20}}) групи. Делта-неутрализиращи антитела бяха сравнени между групите в следните моменти от време: след втората доза в BNT162b2/BNT162b2, AZD1222/AZD1222 и AZD1222/BNT162b2 ваксинирани групи и след първата доза в групата с предишна инфекция/ваксинация. (B) PBMCs бяха анализирани чрез вътреклетъчно оцветяване за IFN-c след директна ex vivo стимулация, използвайки два различни набора от S пептидни групи, включващи незапазени области на шипове последователности между щамовете Wuhan и Delta в BNT162b2/BNT162b2 (n {{37} }), AZD1222/AZD1222 (n {{40}}), AZD1222/BNT162b2 (n=9), предишна инфекция/ваксинация (n=7) и делта-реконвалесцент ( n=17) групи. Във всяка група беше изчислено съотношението на честотата на IFN-c-продуциращи CD4 плюс Т клетки срещу Делта шипа към честотата на IFN-c-продуциращи CD4 плюс Т клетки срещу Wuhan шипа. Данните се представят като средно геометрично ± геометрично SD (A) или средно ± SD (B) и се анализират за значимост с помощта на теста на Mann-Whitney. ns, не е значимо; *P <0.05, **P <0,01, ***P <0,001, ****P <0,0001.
Препратки
[1] Bok K, Sitar S, Graham BS, et al. Ускорено разработване на ваксина срещу COVID-19: етапи, уроци и перспективи. Имунитет 2021; 54: 1636–51. https://doi. org/10.1016/j.immuni.2021.07.017.
[2] Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Безопасност и ефикасност на ваксината BNT162b2 mRNA Covid-19. N Engl J Med 2020; 383: 2603–15. https://doi.org/ 10.1056/NEJMoa2034577.
[3] Falsey AR, Sobieszczyk ME, Hirsch I, et al. Фаза 3 Безопасност и ефикасност на ваксината AZD1222 (ChAdOx1 nCoV-19) Covid-19. N Engl J Med 2021; 385: 2348–60. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2105290.
[4] Borobia AM, Carcas AJ, Pérez-Olmeda M, et al. Имуногенност и реактогенност на BNT162b2 бустер при ChAdOx1-S-праймирани участници (CombiVacS): многоцентрово, отворено, рандомизирано, контролирано, фаза 2 изпитване. Lancet 2021; 398: 121–30. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(21) 01420-3.
[5] Barros-Martins J, Hammerschmidt SI, Cossmann A, et al. Имунен отговор срещу SARS-CoV-2 варианти след хетероложна и хомоложна ChAdOx1 nCoV-19/BNT162b2 ваксинация. Nat Med 2021; 27: 1525–9. https://doi.org/ 10.1038/s41591-021-01449-9.
[6] Hillus D, Schwarz T, Tober-Lau P, et al. Безопасност, реактогенност и имуногенност на хомоложна и хетероложна първична усилваща имунизация с ChAdOx1 nCoV-19 и BNT162b2: проспективно кохортно проучване. Lancet Respir Med 2021; 9: 1255–65. https://doi.org/10.1016/S2213-2600(21)00357- X.
[7] Schmidt T, Klemis V, Schub D, et al. Имуногенност и реактогенност на хетероложна ChAdOx1 nCoV-19/mRNA ваксинация. Nat Med 2021; 27: 1530–5. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01464-w.
[8] Liu X, Shaw RH, Stuart ASV и др. Безопасност и имуногенност на хетероложни срещу хомоложни графици за първично усилване с аденовирусна векторна и иРНК COVID-19 ваксина (Com-COV): едно-сляпо, рандомизирано, неинфериорно изпитване. Lancet 2021; 398: 856–69. https://doi.org/10.1016/S0140- 6736(21)01694-9.
[9] Krammer F, Srivastava K, Alshammary H, et al. Отговори на антитела при серопозитивни лица след единична доза SARS-CoV-2 иРНК ваксина. N Engl J Med 2021; 384: 1372–4. https://doi.org/10.1056/NEJMc2101667.
[10] Брадли Т, Грундберг Е, Селваранган Р и др. Отговори на антитела след единична доза иРНК ваксина срещу SARS-CoV-2. N Engl J Med 2021; 384: 1959–61. https:// doi.org/10.1056/NEJMc2102051.
[11] Saadat S, Rikhtegaran Tehrani Z, Logue J, et al. Титри на свързващи и неутрализиращи антитела след единична доза ваксина при здравни работници, заразени преди това със SARS-CoV-2. JAMA 2021; 325: 1467–9. https://doi.org/ 10.1001/jama.2021.3341.
[12] Reynolds CJ, Pade C, Gibbons JM, et al. Предишна инфекция със SARS-CoV-2 спасява В- и Т-клетъчните отговори на варианти след първата доза ваксина. Наука 2021; 372: 1418–23. https://doi.org/10.1126/science.abh1282.
[13] Ледфорд Х. Възможно ли е смесването на ваксини срещу COVID да стимулира имунния отговор? Nature 2021; 590: 375–6. https://doi.org/10.1038/d41586-021-00315-5.
[14] Schultz NH, Sorvoll IH, Michelsen AE, et al. Тромбоза и тромбоцитопения след ваксинация срещу ChAdOx1 nCoV-19. N Engl J Med 2021; 384: 2124–30. https:// doi.org/10.1056/NEJMoa2104882.
[15] Greinacher A, Thiele T, Warkentin TE, et al. Тромботична тромбоцитопения след ваксинация срещу ChAdOx1 nCov-19. N Engl J Med 2021; 384: 2092–101. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2104840.
[16] Mazzoni A, Di Lauria N, Maggi L, et al. Първа доза иРНК ваксинация е достатъчна за повторно активиране на имунологичната памет към SARS-CoV-2 при субекти, които са се възстановили от COVID-19. J Clin Invest 2021; 131: e149150.
[17] Samanovic MI, Cornelius AR, Gray-Gaillard SL, et al. Наблюдават се силни имунни отговори след една доза от BNT162b2 mRNA ваксина при индивиди, преживели SARS-CoV-2-. Sci Transl Med 2022;14:eabi8961.. https://doi.org/ 10.1126/scitranslmed.abi8961.
[18] Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. Нивата на неутрализиращи антитела са силно предсказващи за имунната защита от симптоматична SARS-CoV-2 инфекция. Nat Med 2021; 27: 1205–11. https://doi.org/10.1038/s41591-021-01377-8.
[19] Зала V, Foulkes S, Insalata F, et al. Защита срещу SARS-CoV-2 след Covid- 19 ваксинация и предишна инфекция. N Engl J Med 2022; 386: 1207–20. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2118691.
[20] Zhang Z, Mateus J, Coelho CH, et al. Хуморална и клетъчна имунна памет към четири ваксини срещу COVID-19. Клетка 2022; 185: 2434–51. https://doi.org/10.1016/ j.cell.2022.05.022.
[21] Vardhana S, Baldo L, Morice WG, et al. Разбирането на Т-клетъчните отговори на COVID-19 е от съществено значение за информиране на стратегиите за обществено здраве. Sci Immunol 2022; 7: eabo1303.. https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo1303.
[22] Мос П. Т-клетъчният имунен отговор срещу SARS-CoV-2. Nat Immunol 2022; 23: 186–93. https://doi.org/10.1038/s41590-021-01122-w.
[23] Goldberg Y, Mandel M, Bar-On YM, et al. Защита и отслабване на естествения и хибриден имунитет към SARS-CoV-2.N Engl. J Med 2022; 386: 2201–12. https://doi. org/10.1056/NEJMoa2118946.
[24] Rossler A, Knabl L, von Laer D, et al. Профил на неутрализация след възстановяване от SARS-CoV-2 Omicron инфекция. N Engl J Med 2022; 386: 1764–6. https://doi. org/10.1056/NEJMc2201607.
[25] Guerrera G, Picozza M, D'Orso S, et al. BNT162b2 ваксинацията индуцира трайни SARS-CoV-2-специфични Т клетки с фенотип на паметта на стволовите клетки. Sci Immunol 2021; 6 (eabl5344). https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abl5344.
[26] Голдблат Д. SARS-CoV-2: от групов имунитет към хибриден имунитет. Nat Rev Immunol 2022; 22: 333–4. https://doi.org/10.1038/s41577-022-00725-0.
