Роля за BATF3 в диференциацията на Tu9 и Т-клетъчно управляваните L патологии МукОсал (част 2)

За да научите повече информация, моля свържете сеdavid.wan@wecistanche.com

ДИСКУСИЯ

T#9 клетките са важни за развитието на възпалителни и алергични заболявания. Въпреки това, транскрипционната програма и възпалителните тригери, които стимулират диференциацията на TH9 клетки, остават неразбрани. В това проучване ние идентифицирахме провъзпалителния цитокин TL1A като мощен индуктор на миша и човешка T-9 диференциация и идентифицирахме BATF3 като важен транскрипционен фактор, участващ в диференциацията на TH9 клетки. Транскрипционната мрежа, която беше индуцирана от TL1A, включваше транскрипционните фактори BATF и BATF3 и няколко BATF-регулирани гени (допълнителна фигура 7). In vivo, в експерименти с осиновителен трансфер,Tμ9-TL1A клеткиса силно провъзпалителни, водещи до възпаление на червата и белите дробове. Провъзпалителната склонност на T-9-TL1A клетки зависи от производството на IL-9. Трансферите на Batf3-/T и 9-TL1A клетки водят до намалено възпаление на лигавицата и експресия на цитокини in vivo.

Въпреки че Tμ9 клетките са идентифицирани като отделна Т-хелперна подгрупа, транскрипционен фактор, който действа като главен регулатор или само идентифицира TH9 фенотипа, не е идентифициран. Вместо това, няколко транскрипционни фактора действат съвместно, за да регулират диференциацията на T-9 клетките. BATF е доказано, че функционално си сътрудничи с IRF4 и се свързва с композитни елементи в промоторните региони на реагиращите гени. BATF заедно с IRF4 е наскоро предложен като "пионерски фактори" в диференциацията на Tp17 клетки, като допринася за първоначалната достъпност на хроматина и улеснява достъпа на други транскрипционни фактори.36 Наблюдавахме, че TL1A има пряк ефект върху експресията на BATF и синергизира с TGF{{9} } и IL-4 за максимално индуциране на експресия на BATF, особено в началото на диференциацията на TH9. В подкрепа на това схващане, стимулирането само с TL1A води до свързването на BATF към II9 промотора, докато няма пряк ефект върху свързването на други транскрипционни фактори (IRF4 и BATF3). Въпреки това,TH9-TL1Aусловията синергично засилват свързването на BATF3 и IRF4, както и ацетилирането на хистон H3, пермисивна модификация на хроматин, която корелира с активността на промотора на ll9.14 В съответствие с публикувани по-рано данни, BATF е необходим за експресията на IL-9 и IL-10 при условия на T,9.15 TL1A е поне частично способен да преодолее изискването за BATF при индуцирането на IL-9 и IL-13 най-вероятно чрез усилване на друга транскрипция фактори, които биха могли да компенсират загубата на BATF. Един кандидат за функционална компенсация е BATF3, който е транскрипционно индуциран от TL1A. Предполага се, че BATF и BATF3 са функционално взаимозаменяеми за развитието на Tu17 и Tp2 и свръхекспресията на BATF3 в BATF-'- Т клетки може да възстанови производството на IL-17 в TH17 клетки и IL-4 и IL{{ 23}} производство в T#2 клетки.18323738 Въпреки това, ролята на BATF3 в развитието на Tu клетки при физиологични условия и потенциалното взаимодействие между BATF и BATF3 по време на диференциацията на TH9 не е дефинирана. Ние демонстрираме тук, че TL1A улеснява свързването на BATF3 към ll9 промотора. Като функционално следствие, BATF3 допринася за производството на IL-9 при условия на T-9, особено в контекста на TL1A стимулация. Изненадващо, BATF3 не е необходим за ранната диференциация на Tu9 клетки, но може да е необходим за стабилизиране или поддържане на TA9 фенотипа и секрецията на IL-9 в по-късни времеви точки. Нашите констатации за ролята на BATF3 в диференциацията на TH9 са в контраст с предишни доклади за BATF3, който не е необходим за диференциацията на Tu1, TA2 и Tu17.2'3'За разлика от BATF, BATF3 допринася само за секрецията на IL-9 и не към други TH9 цитокини, като IL-10 и IL-13, което предполага, че BATF3 се свързва специфично с ll9 промотора и индуцира секрецията на IL-9. Необходими са допълнителни проучвания за определяне на допълнителни целеви гени BATF3 по време на диференциация на TH9 и неговата роля в други Tu подгрупи.

Щракнете тук, за да научите повече за Cistanche

Фиг.7 Дефицитът на Batf3 води до намалено възпаление на лигавицата, управлявано от TH9-TL1A клетки. Наивните WTor Batf3-/клетки бяха диференцирани в T_9-TL1A клетки и инжектирани в Rag1-7мишки. a Представителни H&E оцветявания на бели дробове (горни панели) и дебели черва (долни панели). Мащаб: 200 mm. b Хистологични резултати за белите дробове.c Общ брой клетки (вляво, в средата), честота на CD4* Т клетки (вдясно). Данните представляват средно±SD.n=10/група.d Вътреклетъчно оцветяване на IL{{11} }, IL-13 и IL-17 от далак, MLN и бели дробове след ex vivo рестимулация с РМА плюс лономицин. Данните представляват средно ±SD.n=5/група. Показан е един представителен експеримент от три независими експеримента.*стр<0.05,><0.01 as="" determined="" by="" student's="">

Въпреки че е описано, че други провъзпалителни цитокини или медиатори като IL-1, OX40 и TSLP подобряватTH9 диференциация, TL1A изглежда е уникален в регулирането на BATF, като по този начин отваря хроматина за набиране на други транскрипционни фактори, включително BATF3.353940 Нашите данни за секвениране на РНК подкрепят това заключение, идентифицирайки подгрупа от BATF-зависими гени, значително регулирани нагоре от TL1A. Освен това, нашите данни за секвениране на РНК разкриват, че BATF3 регулира активността на транскрипционните фактори, клетъчната пролиферация и вътреклетъчната сигнална трансдукция, което предполага важна роля на BATF3 по време на диференциация на T#9. In vivo клетките Batf3-'- TA9-TL1A доведоха до намалено възпаление на лигавицата и експресия на цитокини. Не наблюдавахме нарушена миграция на Batf3-'- TH9-TL1A клетки към червата, което е в контраст с BATF-'- CD4 плюс Т клетките, които не успяват да регулират нагоре маркерите за чревна миграция и не населяват червата.4' Нашите данни подкрепят ролята на BATF3 в патофизиологичната функция на TA9-TL1A клетки.

IL-9 и TA9 клетките наскоро бяха свързани с патогенезата на IBD.*-10 IL-9 плюс CD4 плюс Т клетките бяха обогатени при пациенти с UC и високи серумни нива на IL{{ 5}} корелира с тежко заболяване при пациенти с CD.-10В експериментален модел на индуцирано от хаптен UC-подобно заболяване, IL-9-и PU.1-мишки с дефицит са защитени от чревни възпалението и анти-IL-9 антителата са защитни в модел на хронична превенция. степен Въпреки това, ние не наблюдавахме никакви ефекти на TL1A върху експресията на PU.1 при условия на Т9. Ние показахме, че стимулирането на TL1A води до регулиране нагоре на BATF и BATF3, но не и на PU.1. Въпреки че PU.1 е описан като главен регулатор на диференциацията на TH9, той е необходим само за експресията на подгрупа от TH9 гени и мишки което предполага обвързване на PU.1 не се променя в BATF - пълна независимост на PU.1 и BATF. 75

Ние демонстрираме, че T,9-TL1A клетките са силно патогенни in vivo и предизвикват възпаление на червата и белите дробове. Възпаление на червата приTH9-TL1Aреципиентите е ограничено главно до тънките черва. Освен това наблюдавахме увеличен брой CCR6* и CD103 клетки в реципиенти на TH9-TL1A in vivo. Тези данни последователно демонстрират, че хемокиновият рецептор CCR6 и интегринът CD103 се експресират върху TH9 клетки и улесняват миграцията към възпалителни места и мукозни повърхности.15,42 Увеличеният брой CCR6 плюс клетки в Tμ9-TL1A реципиенти in vivo е в съответствие с нашето наблюдение на основно възпаление на тънките черва, тъй като е доказано, че оста CCR6/CCL20 специфично улеснява миграцията на T,17 клетки към тънките черва и е правдоподобно, че подобни механизми се прилагат за Tμ9 клетки.3 Нашите открития също са последователни с скорошни открития за повишени серумни нива на IL-9 при пациенти с CD, особено с тежки заболявания.?

TL1A засилва диференциацията на T,1, TH2 и TA17 и въпреки че не видяхме никаква индикация за глобално изместване от T9 клетки към други TH подгрупи in vitro, това може да предполага, че TH9 клетките, диференцирани с TL1A, може да са нестабилни in vivo и "транс" -диференциране" в други подмножества. Потенциалът на транс-диференциация на TH9 клетки е противоречив и може да зависи от контекста, модела на заболяването и имунния статус на гостоприемника. При EAE настъпва транс-диференциация на TH9 към IFN-Y-продуциращи клетки, но фенотипът T,9 изглежда стабилен в раковите модели.339 Изненадващо, in vivo T9-TL1A клетките продължават да произвеждат IL{ {18}} и цитокини надолу по веригата като IL-17 и IL-13 и не се диференцират транс-диференцирано. Това схващане се подкрепя и от нашите данни, показващи, че анти-lL-9 лечението само по себе си е достатъчно, за да блокира патогенните ефекти на T9-TL1A клетки. Лечението с анти-Lil-9 антитяло само по себе си намали производството на IL-13 и отслаби чревното и белодробното възпаление обратно до нивата на TH9. Развитието на алергично белодробно възпаление изисква корпорацията на TH2 и TH9 клетки. Въпреки това, нашият модел на хронично, неалергично белодробно възпаление изглежда се управлява главно от IL-9-продуциращи Т.9 клетки, въпреки че не можем да изключим приноса на IL-9-продуциращи не-Т клетки в патогенезата на нашите модел.

В обобщение, TL1A е силен индуктор на миша и човешка Т9 диференциация и ние изяснихме включените сигнални пътища. Като се имат предвид провъзпалителните свойства на TH9-TL1A клетката in vivo, насочването към оста TL1A-BATF3-IL-9 може да бъде обещаващ терапевтичен подход при Т19-диванирани патологии като IBD или алергично белодробно заболяване.

МЕТОДИ

Мишки C57BL/6, C57BL/6 Rag1-/, B6.SJL-Ptprc" Pepc/BoyJ(CD45.1),(B6.Cg-Nfkb1*m130l/J), Stat 6-/-(B6.129S2(C)-Stat6"miGr"/J), p50-/-B6.Cg-Tg(TcraTcrb)425Cbn/ (OT-I),Batrf/( B6.129s-Batm1.1kmm/) и Bat3-/(B6.129 S(C)-Batf3m1km"/) мишки са закупени от лабораторията Jackson. Dr3-/- n мишки са описани другаде.4 Мишките са държани при SPF условия. Всички проучвания върху животни са одобрени от Комитета за грижа и използване на животните на медицинския център Cedars-Sinai. Т-клетъчно изолиране и диференциация Наивни Т-клетки (CD62LhichcD44'o"CD25~; клонове MEL-14, IM7, PC61.5; eBioscience) бяха изолирани от далаци и MLN с помощта на комплекта за изолиране EasySeptM Mouse CD4 plus (стволови клетки Technologies), последвано от клетъчно сортиране (MoFlo, Beckman Coulter). Клетките се култивират в RPMI-1640 среда (10 процента FBS) с анти-CD3s (145-2C11; BD Biosciences), анти-CD28 (37.51 ; eBioscience) (TH0 условия) и миши TL1A (100 ng/ml; R&D Systems) при T-9 условия (човешки TGF- 1 [3 ng/ml], Biolegend, IL{{66} } [20 ng/ml, PeproTech).След 2 дни беше добавен IL-2(20 U/ml).За да се оцени клетъчната пролиферация, сортираните клетки бяха белязани с карбоксифлуоресцеин сукцинимидилов естер (CFSE; Invitrogen), диференцирани за 5 дни и разреждането на CFSE беше оценено чрез поточна цитометрия.За да се оцени антиген-специфичната Т,9 диференциация, наивните CD4 плюс Т клетки от OT-Il мишки бяха стимулирани в продължение на 3 дни с 1 ug/ml OVA;23-339 пептид в наличието на сингенни APC (съотношение 1:3). e, получен чрез изчерпване на CD90.2T клетки от спленоцити (технологии на стволови клетки), последвано от лечение с митомицин С. изолиране на човешки CD4 плюс Т клетки и диференциация. Кръвта е получена от здрави доброволци след информирано съгласие в съответствие с процедурите, установени от Cedars-Sinai Institutional Review Board (IRB # 3358, 2673). Наивни CD4 плюс Т клетки (CD4 плюс CD25-CD45RA плюс CD45RO7) бяха изолирани от PBMC с помощта на комплекта за обогатяване на човешки CD4 Т клетки EasySepl (технология на стволови клетки), последвано от сортиране на клетките. Клетките се култивират с анти-CD3（5 ug/ml） и анти-CD28（2 ug/ml） с човешки TL1A (100ng/ml; Fitzgerald) при условия на TH9 (човешки TGF- 1 [5 ng/ml] , човешки IL-4 [10 ng/ml]). ELISA Концентрацията на цитокини в супернатантите на културата беше анализирана чрез ELISA за миши или човешки IL-9, IL-10 и IL-13 (eBioscience). Вътреклетъчно оцветяване Клетките бяха повторно стимулирани с 50 ng/ml PMA (форбол 12-миристат 13-ацетат), 500 ng/ml йономицин и монензин (eBioscience) в продължение на 4 часа, оцветени с анти-CD4 (RM{{ 117}}, eBioscience), фиксирани и пермеабилизирани с помощта на комплекта буфери за оцветяване FoxP3 (eBioscience) и оцветени с антитела срещу миши IL-9 (RM9A4, BioLegend),IL-10(JES{{123} }E3),IL-13(13A),IL-17A (eBio17B7), IL-17F (eBio18F10),IFN-y(XMG1.2),IL{{136} } (BVD6-24G2),IL-22 (1H8PWSR),Ki67(SolA15),BATF(MBM7C7), IRF4 (3E4),човешки IL-9(MH9A4, всички eBioscience), и BATF3 (841792, R&D Systems). Пробите бяха анализирани с помощта на поточен цитометър CyAnADP (Dako Cytomation) и софтуер FlowJo (TreeStar Inc.).

Количествен RT-PCR

Общата РНК се изолира с помощта на комплекти RNeasy и се транскрибира обратно в cDNA с комплект Omniscript RT (и двата Qiagen). qPCR се извършва с помощта на Mastercycler" ep realplex² System （Eppendorf). Бяха проведени платинени количествени PCR SuperMix-UDG (Invitrogen) и TaqMan сонди и праймери използвани за Actb, I9, I10, 13 и BATF （IDT）（Допълнителна таблица 7）. RT² SYBR"Green qPCR Mastermix (Qiagen) и комплекти праймери бяха използвани за Actb и Batf3 (IDT). mRNA експресията на целевите гени се нормализира до експресията на Actb. Относителната генна експресия се изчислява по метода.

имунопреципитацията на 2-AACt хроматин

Chloe се извършва с помощта на комплект за имунопреципитация на хроматин EZ ChIP (Millipore), последван от qPCR анализ. Общо 1 × 10 градуса клетки бяха стимулирани, фиксирани, обработени с ултразвук и имунопреципитирани с помощта на 2 ug ChIP-клас антитела: анти-BATF(sc-100974), анти-BATF3(sc-162246), нормална мишка lgG(sc-2025), анти-IRF4(sc-6059), нормална коза lgG(sc-2028)(всички биотехнологии на Санта Круз), анти-ацетил-хистон H3({{17 }}) и нормален заек lgG (мили-пора). Имунопреципитираната ДНК беше обратно омрежена, пречистена с помощта на въртящи се колони и анализирана чрез qPCR (праймерни последователности: Допълнителна таблица 7). За количествено определяне на имунопреципитирана ДНК, ние генерирахме стандартна крива от серийни разреждания на входяща ДНК. Данните са представени като процент на входяща ДНК въз основа на нормализиране спрямо количеството на входяща ДНК.

Секвениране на РНК (GEO регистрационни номера: GSE60362 и GSE106926)

РНК-сегмент с нисък вход (TH9 срещу TH9-TL1A): Комплектът SMARTer Ultra"Low Input RNA за секвениране v3 на Clontech беше използван за генериране на двойноверижни сДНК библиотеки от 1,5 до 2,5 ng обща РНК от всяка проба според препоръките на производителя. Двуверижните cDNA библиотеки бяха индивидуално фрагментирани и лигирани с lon Torrent lon Xpress" баркод адаптери, използващи lon Xpress" Plus Fragment Library Kit с ограничени модификации, включително избрани по размер крайни библиотеки с почистване с двойни перли и V обем на йонни адаптери Библиотеките RNA-Seq бяха оценени за концентрация и дължина с помощта на QubitdsDNA HS Assay Kit на Invitrogen и AgilentДНК комплект с висока чувствителност, respectively. Samples were multiplexed to obtain >10 милиона четения всяко за секвениране. Обединените библиотеки бяха амплифицирани върху lon Sphere" и секвенирани с помощта на lon PIM Sequencing 200 Kit v2,lon Torrent".

mRNA-Seg (WT vs.Baft3-7T,9-TL1A): Illumina TruSeq Stranded mRNA library preparation kit was employed for RNA-Seq. Of total RNA, 1 ug per sample was used for poly-A mRNA selection using streptavidin-coated magnetic beads. cDNA was synthesized from enriched and fragmented RNA using reverse transcriptase (Super-Script ll, Invitrogen) and random primers. The cDNA was converted into double-stranded DNA, and enriched with PCR for library preparation. The PCR-amplified library was purified using Agencourt AMPure XP beads(Beckman Coulter). The concentration of the amplified library was measured with a NanoDrop spectrophotometer and on an Agilent 2100 Bioanalyzer. Samples were multiplexed to obtain >20 милиона четения/извадка и секвенирани на платформа NextSeq 500 (Illumina) с помощта на 75-bp еднокрайно секвениране.

Анализ на данни. Необработените показания бяха филтрирани и подрязани от инструментариума FASTX (http://hannonlab.cshl.edu/fastx{{0}}toolkit/) и подравнени с помощта на Tophat версия 2.0.8 с UCSC GRCm38/mm10 референтна геномна анотация на мишка (http://genome.ucsc.edu). Броят на прочетените гени беше генериран с помощта на HTSeq (v0.5.4) и след това нормализиран чрез съкратената средна стойност на метода за нормализиране на M-стойностите с edgeR (v3.0.8) в Bioconductor в R(v2.15), който използва претеглена съкратена средна стойност на коефициентите на логаритмично изразяване. За всички анализи са използвани само сигнали за качество (праг: десет броя на милион в поне две от четири проби). Беше извършен неконтролиран анализ, като се използваха 100-те най-добре класирани гени по интерквартилния диапазон и след това беше генерирано йерархично групиране с помощта на (v2.11) с помощта на двупосочни корелации на Pearson за визуализиране на безпристрастни модели на всепроникваща генна експресия. За определяне на диференциалните изрази между TH9 и T беше използван контролиран анализ с помощта на модифициран точен тест на Fisher в edgeR и фалшиво откриване на процент от 10 процента, използвайки процедурата на Benjamini и Hochberg.9-TL1A или WT и Batf{{23} }T,9-TL1A. Анализът на обогатяване на пътя беше извършен с помощта на DAVID6.7 (http://david.abcc.ncifcrf.gov/) с праг на преброяване =5 и праг на резултата =0.05.

Т-клетъчен трансферен модел

CD4 плюс CD62LighcD44"cD25- Т клетки от CD45.1 мишки бяха диференцирани в T9 или T,9-TL1A клетки за 3 дни. Мъжки Rag{{10}}/реципиентни мишки бяха инжектирани ip с 0,5×10 градуса TH9, или TH9-TL1A клетки. Мишките бяха претеглени в продължение на 6-8 седмици. За експерименти за неутрализация мишките бяха инжектирани ip с анти-IL-9 или lgG2b контрола антитяло (и двете по 50 ug/доза; R&D Systems) три пъти седмично в продължение на 4 седмици и два пъти седмично за оставащото време, започвайки от деня на Т-клетъчния трансфер Тъканите бяха фиксирани във формалин, вградени в парафин и оцветени с H&E или AB-PAS Възпалението се оценява чрез полуколичествена точкова система от обучен патолог, който не е запознат с експерименталните условия. 10 ml HBSS, съдържащ 15 ug/ml Liberase"（Roche） и 25ug/ml DNase I （Sigma） и филтриране през 40-μm клетъчна цедка, последвано от лизис на червени кръвни клетки. Едноклетъчните суспензии бяха оцветени с анти-CD4, анти-CD45.1(A20), анти-CCR6 (29-2L17) и анти-CD103(2E7, всички eBioscience) и анти-Ki{{52 }}(SolA15, BD PharMingen)антитела за поточна цитометрия или рестимулирани с анти-CD3c/анти-CD28 антитела за 3 дни. Нивата на цитокини в супернатантите се измерват чрез ELISA.

Статистика

Статистическата значимост се изчислява с помощта на софтуер SPSS (IBM SPSS Statistics 20, IBM Machines Corp., Armonk, NY, USA). Данните бяха анализирани с помощта на еднопосочен анализ на дисперсията (ANOVA), последван от post hoc несдвоен двустранен t-тест на Student или U тест на Mann-Whitney, както е посочено. Разликите се считат за значителни на стр<>

БЛАГОДАРНОСТИ

Тази работа беше подкрепена от NIH (DK056328 до SRT) и фондация F. Widjaja (SRT и KSM). Анита Вибсиг Нойцски-Вулф получи постдокторантски стипендии от Фондация Карлсберг (Дания) и Фондация Лундбек (Дания). Джордан Нунели получи награда за студентски изследвания от Фондацията на Крон и Колит в Америка. Биобанката Cedars-Sinai MIRIAD IBD се подкрепя от Института за изследване на възпалителните черва и имунобиологията на фондация F. Widjaja, грантове на NIH/NIDDK P01 DK046763, U01 DK062413 и благотворителния тръст на Леона М и Хари Б Хелмсли.

АВТОРСКИ ПРИНОС

MT, HH, LT, MW, BS, MW, BS, MW, JN, JS, AN-W, RB, YW, JT, VF и KM. извършени експерименти, анализирани данни и критичен преглед на ръкописа. AP, J. T и YW извършиха RNA-Seq анализ на данни. MT, ST и KM проектираха експериментите. MT и KM написаха ръкописа.

ДОПЪЛНИТЕЛНА ИНФОРМАЦИЯ

Онлайн версията на тази статия (https://doi.org/10.1038/s41385-018-0122-4) съдържа допълнителен материал, който е достъпен за оторизирани потребители.

Конкуриращи се интереси: Авторите декларират липса на конкурентни интереси.

Бележка на издателя: Springer Nature остава неутрален по отношение на претенции за юрисдикция в публикувани карти и институционални връзки.

ПРЕПРАТКИ

1. Dardalhon, V. et al. IL-4 инхибира TGF-бета-индуцирани Foxp3 плюс Т клетки и заедно

с TGF-бета, генерира IL-9 плюс IL-10 плюс Foxp3(-) ефекторни Т клетки. Нац. Immunol. 9, 1347-1355(2008).

2. Veldhoen, M. et al. Трансформиращият растежен фактор-бета "препрограмира" различните

иницииране на Т хелпер 2 клетки и насърчава подгрупа 9-продуцираща интерлевкин. Нац. Immunol.9, 1341-1346 (2008).

3. Jager, A, Dardalhon, V, Sobel, RA, Bettelli, E. & Kuchroo, VK Th1, Th17 и Th9

ефекторните клетки индуцират експериментален автоимунен енцефаломиелит с различни патологични фенотипове. J.Immunol.183,7169-7177(2009).

4. Licona-Limon, P. et al. Th9 клетките стимулират имунитета на гостоприемника срещу стомашно-чревния тракт

инфекция с червеи. Имунитет 39,744-757(2013).

5. Purwar, R. et al. Силен туморен имунитет към меланом, медииран от интерлевкин-9-

произвеждащи Т клетки. Нац. Med. 18, 1248-1253 (2012).

6. Gerlach, K. et al. TH9 клетките, които експресират транскрипционния фактор PU.1, задвижват Т клетките-

медииран колит чрез IL-9 рецепторно сигнализиране в чревни епителни клетки. Nat Immunol.15,676-686(2014).

7. Nalleweg, N. et al. IL-9 и неговият рецептор участват предимно в

патогенеза на UC. Gut.64, 743-755 (2015).

8. Feng, T. et al. Серумните нива на интерлевкин 9 предсказват тежестта на заболяването и клиничната картина

ефикасността на инфликсимаб при пациенти с болест на Crohn. Възпаление. Чревна дис. 23, 1817-1824(2017).

9. Matusiewicz,M., Neubauer,K,Bednarz-Misa,I, Gorska,S.&Krzystek-Korpacka,M.

Системен интерлевкин-9 при възпалително заболяване на червата: връзка със заздравяването на лигавицата при улцерозен колит. World J. Gastroenterol. 23, 4039-4046(2017).

10. Ответникът, C. et al. Значение на серумните нива II-9 при възпаление на червата

заболяване. Вътр. J. Immunopathol. Pharmacol. 28, 569-575 (2015).

11. Джаш, А. и др. Ядрен фактор на активирани Т клетки 1 (NFAT1)-индуциран пермисив

модификацията на хроматин улеснява трансактивирането на ядрен фактор-kappaB (NF-kappaB) интерлевкин-9 (IL-9). J. Biol. Chem. 287, 15445-15457(2012). 12. Staudt, V. et al. Интерферон-регулаторният фактор 4 е от съществено значение за развитието

програма на Т хелперни 9 клетки. Имунитет 33, 192-202 (2010).

13. Goswami, R. et al. STAT6-зависима регулация на развитието на Th9.J. Immunol.

188,968-975(2012).

14. Chang, HCet al. Транскрипционният фактор PU.1 е необходим за развитието на

Т-клетки, произвеждащи IL-9- и алергично възпаление. Нац. Immunol. 11, 527-534 (2010).

15. Jabeen, R. et al. Развитието на Th9 клетки изисква BATF-регулирана транскрипция

мрежа. J. Clin. Инвестирам. 123, 4641-4653(2013).

16. Kaplan, MH Мрежата на транскрипционния фактор в Th9 клетки. Семин. Имунопатология.

39,11-20(2017).

17. Echlin, DR, Tae, HJ, Mitin, N. & Taparowsky, EJB-ATF функционира като отрицателен

регулатор на AP-1 медиирана транскрипция и блокира клетъчната трансформация от Ras и Fos. Онкоген 19, 1752-1763 (2000).

18. Murphy, TL, Tussiwand, R. & Murphy, KM Специфичност чрез сътрудничество:

Взаимодействията BATF-IRF контролират имунорегулаторните мрежи. Нац. Rev. Immunol. 13, 499-509(2013).

19. Sopel, N., Graser, A., Mousset, S. & Finotto, S. Транскрипционният фактор BATF

модулира цитокин-медиираните отговори в Т клетките. Cytokine Growth Factor Rev. 30, 39-45 (2016).

20. Edelson, BT et al. Периферните CD103(плюс) дендритни клетки образуват единна подгрупа

свързани с развитието на CD8 алфа(плюс) конвенционални дендритни клетки.J. Exp. Med. 207, 823-836(2010).

21. Хилднер, К. и др. Дефицитът на Batf3 разкрива критична роля за CD8alpha＋ дендрит

клетки в цитотоксичния Т-клетъчен имунитет. Science 322, 1097-1100 (2008).

22. Meylan, F. et al. Рецепторът DR3 от семейството на TNF е от съществено значение за различни Т-клетъчни

медиирани възпалителни заболявания. Имунитет 29, 79-89 (2008).

23. Fang, L, Adkins, B, Deyev, V. & Podack, ER Съществена роля на TNF рецептора

суперсемейство 25 (TNFRSF25) в развитието на алергично възпаление на белите дробове. J. Exp.Med.205,1037-1048(2008).

24. Pappu, BP et al. Взаимодействието TL1A-DR3 регулира функцията на Th17 клетките и Th17-

медиирано автоимунно заболяване. J. Exp. Med. 205, 1049-1062 (2008).

25. Bull, MJ и др. Пътят на рецептора на смъртта 3-TNF-подобен протеин 1A задвижва

нежелана костна патология при възпалителен артрит.J. Exp.Med. 205, 2457-2464 (2008).

26. Thomas, LS et al. Членът на семейството на TNF TL1A индуцира секрецията на IL-22 в

ангажирани човешки Th17 клетки чрез IL-9 индукция. J. Leukoc. Biol. 101, 727-737 (2017).

27. Richard, ACet al. TNF-семейният лиганд TL1A и неговият рецептор DR3 насърчават T

клетъчно-медиирана алергична имунопатология чрез засилване на диференциацията и патогенността на IL-9-продуциращи Т клетки.J.Immunol.194,3567-3582(2015). 28. Tan, C. et al. Антиген-специфичните Th9 клетки показват уникалност в своята кинетика на

производство на цитокини и кратко задържане на мястото на възпалението. Immunol. 185, 6795-6801(2010).

29. Wilhelm, C. et al. Репортер на съдбата на IL-9 демонстрира индуцирането на вроден IL-

9 реакция при възпаление на белите дробове. Нац. Immunol. 12, 1071-1077 (2011).

30. Banias, G. et al. Роля на TL1A и неговия рецептор DR3 в два модела на хронична

миши илеит. Proc. Natl Acad. Sci. САЩ 103, 841-8446 (2006).

31. Betz, BC et al. BATF координира множество аспекти на функцията на В и Т клетките

за нормални отговори на антитела.J. Exp.Med. 207, 933-942(2010).

32. Schraml, BU et al. Транскрипционният фактор AP-1 BATF контролира T(H)17 разл.

посвещение. Nature 460, 405-409 (2009).

33. Glasmacher, E. et al. Геномен регулаторен елемент, който ръководи сглобяването и

функция на имуно-специфични AP-1-IRF комплекси. Science 338, 975-980 (2012). 34. Li, P. et al. BATF-JUN са критични за IRF4-медиирана транскрипция в Т клетки. Природата

490,543-546(2012).

35. Yao, W. et al. Интерлевкин-9 е необходим за медиирано алергично възпаление на дихателните пътища

от цитокина TSLP.Immunity 38,360-372 (2013).

36. Ciofani, M. et al. Валидирана регулаторна мрежа за спецификация на Th17 клетки. клетка

151,289-303(2012).

37. Tussiwand, R. et al. Компенсаторно развитие на дендритни клетки, медиирано от BATF-

IRF взаимодействия. Nature 490, 502-507(2012).

38. Ивата, А. и др. Качеството на TCR сигнализирането се определя от различни афинитети на

енхансери за съставния комплекс на транскрипционен фактор BATF-IRF4. Нац. Immunol.18,563-572(2017).

39. Vegan, F. et al. Транскрипционният фактор IRF1 диктува зависимостта от IL-21-

противоракови функции на TH9 клетки. Нац. Immunol. 15, 758-766(2014).

40. Xiao, X. et al. OX40 сигнализирането благоприятства индукцията на T(H)9 клетки и дихателни пътища

възпаление. Нац. Immunol. 13, 981-990 (2012).

41. Wang, C. et al. BATF е необходим за нормална експресия на червата

рецептори от Т хелперни клетки в отговор на ретиноева киселина. J. Exp. Med. 210, 475-489(2013).

42. Кара, ЕЕ и др. Различни хемокинови рецепторни оси регулират трафика на Th9 клетки

към алергични и автоимунни възпалителни места. J. Immunol. 191, 110-117 (2013).

43. Esplugues, E. et al. Контролът на TH17 клетките се осъществява в тънките черва. Природа 475,

514-518(2011).

44. Shih, DQ et al. Установено инхибиране на нов фиброгенен фактор Tella

фиброза на дебелото черво. Mucosal Immunol.7, 1492-1503 (2014).

45. Останин, ДВ и др. Т-клетъчен трансферен модел на хроничен колит: концепции, съображения и трикове на търговията. Am. J. Physiol. Гастроинтест. Liver Physiol. 296, G135-G146(2009).

46. ​​Chin, JE et al. Набирането на левкоцити в дихателните пътища при мишки зависи от алфа4-

интегрини и адхезионна молекула на съдови клетки-1. Am. J. Physiol. 272, L219-L29 (1997).

47. Weigmann, B. et al. Изолиране и последващ анализ на миша lamina propria

мононуклеарни клетки от тъкан на дебелото черво. Нац. Protoc. 2, 2307-2311 (2007).