Актеозид: Изследване на антиоксидантна и антихипертензивна активност

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com

Антиоксидантна и антихипертензивна активност на актеозида и неговите аналози

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,* и Miao-Lin HU1,*

Резюме. Актеозид(Act), фенилетаноиден гликозид, е активно съединение в няколко растения и традиционни билкови лекарства. Действайте заедно със своя структурен изомер,изоактеозид(Isoact) и аналог 6-O-ацети-лактеозид (6-O-ацетилакт), са използвани в проучването за изследване наантиоксидант, антиангиотензин-конвертиращ ензим (ACE) и инхибиторни активности на хемолизатав витрои антихипертензивна активност срещу спонтанно хипертензивни плъхове (SHR)в vivo. Показахме, че Act, Isoact и 6-O-ацетилактът ефективно пречиства 1,1-дифенил-2-пикрил-хидразил радикали (с IC50 при 11,4, 9,48 и 9,55 μM, съответно) и супероксидни радикали (с IC50 при 66,0, 38,5 и 39,1 μM, съответно). Като Isoact и 6-O-ацетилактът има сходни действия за отстраняване на радикали, само Act и Isoact са използвани за следващите проучвания. Както Act, така и Isoact инхибират активността на ксантиноксидазата с IC50 съответно при 53,3 и 62,2 μM. Както Act, така и Isoact също значително инхибират активността на ACE и хемолизата, предизвикана от 2,2'-азо-бис(2-амидинопропан)дихидрохлорид, но ефектите на Act са по-силни от Isoact. След това приложихме перорално единична доза от Act или Isoact (10 mg/Kg телесно тегло) на SHR и измерихме промените на систолното кръвно налягане (SBP) и диастолното кръвно налягане (DBP) за 24 часа. Act, но не Isoact, показва антихипертензивна активност при понижаване на SBP и DBP. Резултатите предполагат потенциалната полезност на Закона като здравословен хранителен продукт заантиоксидантзащита и регулиране на кръвното налягане.

Ключови думи: Актеозид; Антихипертензивна активност; Ангиотензин-конвертиращ ензим (ACE); антиоксидант; Хемолиза.

активна съставка актеозид в цистанче

Въведение

Актеозид(Act), фенилетаноиден гликозид, съдържащ кафеена киселина, 3',4'-дихидрокси фенилетанол, глюкоза и рамноза, е изолиран за първи път от цветя наSyringa вул- гарис(Birkofer et al., 1968) и заедно със структурния изомер наизоактеозид(Изоакт) и производното на6-O-ацетилактеозид(6-O-ацетилакт), е открит в много растения и билкови лекарства, като напрЛигструм purpurascens(Wong et al., 2001),Callicarpa дихотома(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),Цистанче deserticolaиБошнякия rossica(Wu et al., 2006),Скрофулария ningpoenis(Huang et al., 2008),Ремания glutinosa(Li et al., 2006). Съобщава се, че актът проявява антиметастатична активност върху B16 меланомни клетки в модели на мишки C57BL/6 (Ohno et al., 2002). Акт, Изоакт и 6-O-ацетилакт наскоро беше показано, че инхибира IL-1 -активираната експресия на междуклетъчен CAM-1 и васкуларен CAM-1 в човешки ендотелни клетки на пъпната вена (Chen et al., 2009). Act също така защитава говеждите белодробни ендотелни клетки от оксидативен стрес, предизвикан от хидроксилни радикали (Chiou et al., 2004) и инхибира производството на азотен оксид и TNF чрез блокиране на активирането на AP-1 в липополизахарид-стимулирани макрофаги (Rao et al. , 2009). Act и Isoact проявяват невропротективни действияв витро(Koo et al., 2005). Koo и др. (2006) съобщава, че Act и неговите агликони ефективно пречистват 1,1-дифенил-2-пикрил-хидразил (DPPH) и азотен оксидв витро. Малко проучвания обаче са сравнявали едно до другов витро антиоксидантактивности на Act и неговите структурно свързани съединения като Isoact и 6-O- ацетилакт.

Няколко класа фармакологични средства са използвани при лечението на хипертония (Mark and Davis, 2000). Един клас антихипертензивни лекарства, известни като инхибитори на ангиотензин I конвертиращия ензим (ACE) (т.е. пептидазни инхибитори), имат ниска честота на нежелани странични ефекти и са предпочитаният клас антихипертензивни лекарства.

агенти при лечение на пациенти със съпътстващи вторични заболявания (Fotherby and Panayiotou, 1999). ACE (пептидил-дипептидна хидролаза EC 3.4.15.1) е дипептид-освобождаваща Zn-съдържаща екзопептидаза, която премахва дипептид от С-края на ангиотензин I, за да образува ангиотензин II, силно хипертензивно съединение. Няколкоантиоксидантпептиди (редуциран глутатион и свързани с карнозин пептиди) проявяват АСЕ инхибиторни активности (Hou et al., 2003). Първият клинично достъпен перорално активен АСЕ инхибитор, каптоприл, е разработен за лечение на хипертония (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). Съобщава се, че действието упражнява медиирани от азотен оксид релаксиращи ефекти върху непокътнатите от ендотела аортни пръстени на SD плъхове (Wong et al., 2001). Ахмад и др. (1995) съобщават, че Act предизвиква зависимо от дозата понижение на систоличното кръвно налягане (SBP) и диастоличното кръвно налягане (DBP) след интравенозно инжектиране на нормотензивни анестезирани Wistar плъхове. Въпреки това, не е ясно дали перорално прилаганият Act и/или неговите свързани изомери са антихипертензивнив vivo. В настоящото проучване ние изследвахмев витро антиоксиданткапацитет и АСЕ инхибиторни дейности, както ив vivoантихипертензивна активност на Act, Isoact и/или 6-O-ацетилакт при използване на плъхове със спонтанна хипертония (SHR). Очаква се тези проучвания да предоставят полезни данни за развитието на Act като здравословен хранителен продукт.

Материали и методи

Материали

2,2'-азо-бис(2-амидинопропан)дихидрохлорид (AAPH), ACE (I единица, бял дроб на заек), бутилиран хидрокситолуен (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}фурил]акрилоил)-Phe-Gly-Gly (FAPGG), NADH, феназин метосулфат (PMS), ксантин и ксантин оксидаза бяха закупени от Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA). Каптоприл е закупен от Calbiochem Co. (Калифорния, САЩ). Акт, Изоакт и 6-O-ацетилакт (Фигура 1) са закупени от Equal Corp. (чистота > 98 процента, Шанхай, Китай). Други химикали и реагенти са от Sigma Chemical Co. (Сейнт Луис, Мисури, САЩ).

Почистване дейност на действайте, Изоакт, и 6-O- ацетилакт срещу dPPH радикали от спектрофотометрия

Обем (0.3 mL) от Act, Isoact и 6-O-ацетилакт (крайните концентрации са 1,56 до 50 µM), BHT и аскорбинова киселина (крайните концентрации са 2,4 до 60 µM) се добавят към 0,1 mL 1 М Tris-HCl буфер (рН 7,9 ) и след това се смесва с 0,6 mL от 100 µM DPPH в метанол до крайна концентрация от 60 µM за 20 минути при защита от светлина при стайна температура (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Намаляването на абсорбцията при 517 nm се измерва и изразява като ΔA517 nm. Като празен експеримент се използва дейонизирана вода. Почистващата активност на DPPH радикал (проценти) се изчислява с уравнението: (ΔA517 празно − ΔA517 проба) ÷ ΔA517 празно × 100. IC50 означава концентрацията на полуинхибиране.

Инхибиращ дейност на действайте и Изоакт срещу ксантин оксидаза

Активността на ксантиноксидазата се измерва чрез определяне на образуването на пикочна киселина при 295 nm, като се използва ксантин като субстрат (Kalckar, 1947). Различните количества Act и Isoact (крайните концентрации бяха 25, 50 и 75 µM) бяха предварително смесени с 50 µL от 1 mU/mL ксантин оксидаза при 4 градуса за 1 час и след това 300 µL от 1 mM ксантин бяха добавени. Промените на абсорбцията при 295 nm се записват за 2 минути и се изразяват като ΔA295 nm/min. Инхибиторната активност на ксантин оксидазата (проценти) се изчислява, както следва: (ΔA295 nm/min черно − ΔA295 nm/min проба) ÷ ΔA295 nm/min черно × 100. Дейонизирана вода се използва вместо разтвор на пробата като празен експеримент. IC50 означава концентрацията на полуинхибиране.

Почистване дейност на действайте, Изоакт, и 6-O- ацетилакт срещу супероксид радикали от спектрофотометрия

Супероксидният радикал се генерира от системата PMS-NA-DH (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Всички проби от 0,2 ml, съдържащи различни количества Act, Isoact и 6-O-ацетилат (крайната концентрация беше 15,6, 31,3, 62,5, 125 и 250 µM), се добавят последователно към 0.2 mL от 630 µM нитросин тетразолий, 0,2 ml от 33 цМ PMS и 0.2 ml от 156 цМ NADH в 100 mM фосфатен буфер (рН 7.4). Дейонизирана вода беше използвана вместо разтвор на пробата като празен експеримент. Аскорбинова киселина (крайната концентрация е 6, 9, 12 и 24 цМ) се използва като положителна контрола. Промените на абсорбцията при 560 nm се записват в продължение на 2 минути и се изразяват като ΔA560 nm/min. Почистващата активност на супероксидните радикали (проценти) се изчислява, както следва: (ΔA560 nm/min черен − ΔA560 nm/min проба) ÷ ΔA560 nm/min черен × 100. IC50 означава концентрацията на полуинхибиране.

решителност на AcE инхибиторен дейност на действайте и Изоакт от HPLC

Всеки 50 µL Act (0.2, 0.4, 0.5 и 2.0 µmole) и Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0 и 2.0 µmole) бяха предварително смесени с 15 µL от 1U/mL ACE за 5 минути и след това се добавят 200 µL от 0,5 mM FAPGG и реагира при стайна температура за 10 минути (Anzenbacherova et al., 2001). 800 uL метанол се добавят, за да се спре реакцията. Празният експеримент беше само FAPGG. В контролния експеримент, ACE реагира с FAPGG при същите условия. Хроматографското разделяне на FAPGG и FAP се извършва на хроматографската система Hitachi (Япония) с 10 µL-контур. HPLC анализът се извършва на Biosil Aqua-ODS-W 5 µ колона (Biotic Chemical Co., Ltd., Тайван, 250 × 4.6 mm id), размер на частиците 5 µm. Реагиралата смес се разделя изократно с подвижна фаза, състояща се от 0.02 М нониламин (коригиран до рН 2.4 с фосфорна киселина) и ацетонитрил в съотношение 67.5:32.5 (V/V) (Anzenbacherova et al., 2001). Скоростта на потока е 1 mL/min; инжекционният обем е 10 µL; детекторът беше настроен на 345 nm. АСЕ инхибиранията (проценти) на Act и Isoact бяха изчислени, както следва: [(Площ на FAPGGblank − Площ на FAPGG контрол) − (Площ на FAPGGblank − Площ на FAPGG проба) ÷ (Площ на FAPGGblank − Площ на FAPGG контрол) × 100.

Инхибиращ дейност на действайте и Изоакт срещу AAPH-медииран хемолиза

Свободнорадикалното верижно окисление на червените кръвни клетки на плъх (RBC) чрез AAPH-медиирана хемолиза (Miki et al., 1987). Кръвта на плъх се поставя в хепаринизирани епруветки и се центрофугира при 1000 ×gза 10 мин. След промиване с 0,15 М NaCl три пъти, опакованите червени кръвни клетки се получават чрез центрофугиране при 1000 ×gза 10 мин. Различните количества от Act и Isoact (крайните концентрации бяха 2, 5 и 10 µM) бяха смесени 25 µL от 20 процента RBC суспензия (V/V, в 10 mM PBS) и 25 µL от 500 mM разтвор на AAPH при 37 градуса за 0 , 1, 1,5, 2, 2,5, 3 и 3,5 часа с леко разклащане. Всяка смес се центрофугира при 1000 ×gза 10 минути и супернатантата се измерва при 536 nm. Използва се дейонизирана вода вместо разтвор на AAPH или разтвор на проба, съответно като празна група или като контролна група. Инхибирането на хемолизата (процент) на Act и Isoact на 3 h или на 3,5 h се изчислява, както следва: (ΔA536 nm контрола − ΔA536 nm проба) ÷ ΔA536 nm контрола × 100.

Антихипертензивно ефекти на действайте и Изоакт На SHr

Ефектите на перорално приложените Act, Isoact и каптоприл чрез захранваща сонда (20 × 80 mm) върху намаленото SBP и намаленото DBP бяха определени съгласно метода на предишни доклади (Lin et al., 2006; Lin et al., 2008; Han et al., 2011). Всички експериментални процедури върху животни следват публикуваните указания (Национален научен съвет, 1994 г.). Мъжките SHR (на възраст 8 седмици, Национален център за лабораторни животни, Тайпе) бяха настанени индивидуално в стоманени клетки, държани при 24 градуса с 12-h цикъл светло-тъмно и имаха свободен достъп до стандартна храна за мишки/плъхове ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) и вода. SHR бяха произволно разделени на контролни и пробни лечения за определяне на SBP и DBP (шест плъха на група). За краткосрочен антихипертензивен експеримент 0,5 mL от 10 mg Act или Isoact/Kg SHR или 5 mg каптоприл/Kg SHR бяха приложени перорално еднократно и кръвното налягане на опашката беше измерено на 2, 4, 6 и 24 h след еднократно перорално приложение. 0,5 mL дестилирана вода се използва за празен експеримент. Индиректен апарат за кръвно налягане (BP-98A, Softron Co. Ltd. Токио, Япония) беше използван за измерване на SBP и DBP четири пъти при всяко определяне за всяко лечение.

данни анализ

Стойностите са представени като средни стойности ± SD и са анализирани с помощта на еднопосочен ANOVA, последван от post hoc теста на Tukey за множество средни сравнения. Студентитеt-извършен е тест, когато са сравнени само две групи данни (като например между Act и Isoact при една и съща концентрация). P-стойност < 0.05="" се="" счита="" за="" статистически="" значима.="" статистическият="" анализ="" беше="" извършен="" с="" помощта="" на="" spss="" за="" windows,="" версия="" 10="" (spss,="" inc.,="" чикаго,="" илинойс,="">

актеозидв cistanche за подобряване на паметта

Резултати

Почистване дейност на PPH и супероксид радикали

Акт, Изоакт и 6-O-ацетилакт показва дозозависими DPPH очистващи активности при pH 7,9 (Фигура 2). Стойностите на IC50 бяха съответно 11,4, 9,48 и 9,55 µM за Act, Isoact и 6-O-ацетилакт. Стойностите IC50 на положителните контроли на аскорбиновата киселина и BHT бяха съответно 13,1 и 18,5 µM.

инхибиране на ксантин оксидаза дейност

Показано е, че Act и Isoact проявяват зависимо от дозата инхибиране на ксантин оксидазата (Фигура 3). IC50 се изчислява на 53.3 и 62.2 цМ, съответно, за Act и Isoact.

инхибиране на супероксид дисмутаза дейност

Тъй като и Act, и Isoact инхибираха активността на ксантиноксидазата, ние използвахме системата PMS-NADH за генериране на супероксидни радикали (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). действайте,

Изоакт и 6-O-ацетилактът проявява зависими от дозата дейности за отстраняване на супероксидни радикали (Фигура 4). Стойностите на IC50 бяха съответно 66,0, 38,5 и 39,1 µM за Act, Isoact и 6-O-ацетилакт. Стойностите на IC50 на положителната контрола на аскорбиновата киселина са 9,0 µM. От резултатите на фигури 2 и 4 стана ясно, че Isoact и 6-O-ацетилатът има сходни действия за отстраняване на радикали срещу DPPH и супероксидни радикали и по този начин само Act и Isoact са избрани за по-нататъшни скрининги на биологична активност.

AcE инхибиторен дейности на действайте и Изоакт

В предварителния тест открихме, че Act и Isoact пречат на абсорбцията на ACE субстрата FAPGG и неговия хидролизиран продукт FAP при 345 nm, както се използва за непрекъснат спектрофотометричен анализ (Holmquist et al., 1979). Следователно, разделянето, съчетано с откриване на Act или Isoact и FAPGG чрез HPLC, се използва за проследяване на АСЕ инхибиторните активности. Фигури 5A до Фигури 5D са типични HPLC хроматограми от 10 µl реакционни смеси от празен тест (само FAPGG, Фигура 5A); контролен тест (ACE реагира с FAPGG, за да произведе FAP, Фигура 5B); 0.5 µmole от Act (312.5 µg), ACE и FAPGG (Фигура 5C); и 0.5 µmole Isoact (312.5 µg), ACE и FAPGG (Фигура 5D). Площта на FAPGG на Фигура 5В е най-ниската, а тази на Фигура 5А е най-високата от четири типични HPLC хроматограми. Областите на FAPGG на Фигури 5C и 5D зависят от АСЕ инхибиторните активности на различни концентрации на Act и Isoact. Изчислените ACE инхибиции на Act и Isoact са показани на Фигура 5E. Действието показва по-високи ACE инхибиторни активности, отколкото Isoact, и IC50 на първия е изчислен на 472 µM по площ в HPLC хроматограмите.

Инхибиращ дейност на действайте и Изоакт срещу AAPH-медииран хемолиза

Инхибиторните активности на Act и Isoact срещу AAPH-медиирана хемолиза при концентрации от 2, 5 и 10 µM бяха оценени за 3,5 часа (Miki et al., 1987). Резултатите от Фигура 6А показват, че хемолизата в червените кръвни клетки на плъх се е увеличила драматично (изразява се като ΔA536 nm) след 3-h или 3.5-h реакции в присъствието на AAPH радикали (като контролни групи, бял символ на цикъла ). Беше наблюдавана малка или никаква хемолиза в отсъствието на AAPH радикали по време на реакцията 3.5-h (като празни групи, черен символ на цикъл). Следователно, инхибирането на хемолизата на Act и Isoact на 3 h или на 3,5 h се изчислява, както следва: (ΔA536 nm контрола − ΔA536 nm проба) ÷ ΔA536 nm контрола × 100. Фигура 6B

показва, че както Act, така и Isoact при 2, 5 и 10 µM проявяват зависимо от концентрацията инхибиране на AAPH-индуцирана хемолиза, като инхибиторните ефекти на Act са значително по-силни от тези на Isoact при всяка използвана концентрация.

Антихипертензивно ефекти на действайте и Изоакт На SHr

SHR получават еднократно перорално приложение на Act и Isoact (10 mg/Kg SHR) и промените в SBP и DBP са регистрирани за 24 часа. По-рано докладвахме, че кръвното налягане (SBP и DBP) на SHR е променливо по време на 24-h (Lin et al., 2006; Han et al., 2011). Поради това беше използвано сравнение във фиксирано време (като 2, 4, 6, 8 и 24 часа) между празната проба и пробата вместо преди и след самото перорално приложение. Установено е, че Act, но не Isoact, ефективно намалява SBP и DBP на SHR в сравнение с празната (дестилирана вода) група. SBP беше значително намалено в групата на Act на 2, 4 и 6 h съответно с 18,8, 16,5 и 14,9 mmHg, но понижението на SBP (3,3 mmHg) на 24-ия час след лечението с Act не беше стабилно.

художествено значими (Фигура 7А). Както е показано на Фигура 7B, DBP е понижено в Act групата на 2, 4 и 6 h (съответно с 8,5, 7,6 и 12.0 mmHg), въпреки че само резултатът, получен на 6 h, е статистически значим (P< 0.05).="" беше="" отбелязано,="" че="" act="" и="" каптоприл="" (като="" положителна="" контрола)="" имат="" подобни="" ефекти="" върху="" sbp="" в="" ранните="" етапи="" (2,="" 4="" и="" 6="" часа)="" след="" перорално="">

актеозидin cistanche имат добри антиоксидантни ефекти

ДИСКУСИЯ

Активните кислородни видове и медиираните от свободните радикали реакции участват в дегенеративни или патологични процеси като стареене, рак, коронарна болест на сърцето и болестта на Алцхаймер (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). Няколко доклада са фокусирани върху скрининга наантиоксидантдейности от природни ресурси. В настоящото проучване първо сравнихмеантиоксидантдейности на Act, Isoact и 6-O-ацетилат. Act и Isoact са структурни изомери, в които съставната част на кафеената киселина е свързана към C-4 хидроксилната група на глюкозата в първия и към C-6 хидроксилната група на глюкозата във втория. Докато съставките на рамнозата и 3',4'-дихидрокси фенил етанол, съответно, са свързани към C-3 и C-1 хидроксилните групи на глюкозната част в една и съща Act и Isoact молекула, { {8}}O-ацетилакт е производно на Act, в което оцетната киселина е свързана към C-6 хидроксилната група в глюкозната част (Фигура 1). Koo и др. (2006) съобщават, че Act и неговите агликони показват DPPH-почистващи дейности и редът на тези дейности (изразени като IC50) е Act (1,28 µM) > кафеена киселина (2,22 µM) > 3',4'-дихидрокси фенил етанол ( 7,72 µM) > -токоферол (15,1 µM). В настоящия доклад (Фигура 2), редът на дейностите по почистване на DPPH (изразен като IC50) е 6-O-ацетилат (9,55 µM) ≈ Isoact (9,48 µM) > Act (11,4 µM). Тези стойности са сравними или по-добри от тези на аскорбиновата киселина (IC50 от 13,1 µM) и BHT (IC50 от 18,5 µM) за отстраняване на DPPH радикали. По-високият IC50 на Act в настоящия доклад може да е от крайната концентрация от 60 µM DPPH вместо 30 µM, използвани от Koo et al. съобщава (2006). Тъй като анализът на DPPH радикал принадлежи към реакцията на пренос на електрон (Huang et al., 2005), предполага се, че производното в C-6 хидроксилната група на глюкозната част, като ацетилната група в {{21 }}O- ацетилатната и кафеената киселинна част в Isoact, могат по-лесно да осигурят реакция на пренос на електрони, отколкото тези на C-6 свободната хидроксилна група в глюкозната част на Act за DPPH анализа за отстраняване.

Действай, 6-OСъобщава се, че -ацетилатът и Isoact притежават супероксид-поглъщаща активност in vitro, използвайки системата ксантин/ксантин оксидаза за генериране на супероксидни радикали (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Настоящото ни проучване обаче показва, че Act проявява инхибиторни активности на ксантин оксидазата (Фигура 3). Следователно, супероксидният радикал е генериран чрез използване на системата PMS-NADH в настоящия доклад (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) вместо системата ксантин/ксантин оксидаза. Наистина, използвайки системата ксантин/ксантин оксидаза за генериране на супероксидни радикали, Wang et al. (1996) получиха IC50 от 63 µM Act срещу супероксидни радикали и тази стойност е близка до тази за инхибиране на активността на ксантин оксидазата чрез Act, както се съобщава в настоящото изследване (53,3 µM). Съобщава се, че кафеената киселина проявява инхибиторна активност на ксантин оксидазата (Chiang et al., 1994). Може да се спекулира, че дейностите по отстраняване на супероксид, използващи система за генериране на ксантин/ксантин оксидаза на някои фитохимикали със структури, свързани с кафеените киселини, като Act или Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999), може да имат са допринесли, поне частично, за инхибиране на ксантин оксидазата. Интересното е, че Wang et al. (1996) установяват, че Act (0,5 и 2,5 mM) не инхибира активността на ксантин оксидазата, която се определя от кислороден електрод за консумацията на кислород по време на окислението на ксантин. Поради това е важно да се има предвид, че различни методи за анализ на активността на отстраняване на супероксид могат да дадат противоречиви данни.

Li et al. (1993) съобщават за подобна степен на инхибиране на Act и Isoact срещу AAPH-медиирана хемолиза в RBC на мишки. Въпреки това, ние показахме тук, че Act проявява много по-висока инхибиторна активност срещу AAPH-индуцирана хемолиза в RBC на плъхове, отколкото Isoact (Фигура 6). Не е ясно дали подобно несъответствие може да се дължи на разликата във видовете гризачи.

Kang и др. (2003) съобщават, че Act проявява АСЕ инхибиторни активности и IC50 е 373,3 µg/mL, което е изчислено на 598 µM при използване на Hip-His-Leu като субстрати. В настоящия доклад Act показва по-високи ACE инхибиторни активности, отколкото Isoact, и IC50 на първия е изчислен на 472 µM по площ в HPLC хроматограмите (Фигура 5). Съобщава се, че действието упражнява медиирани от азотен оксид релаксиращи ефекти върху непокътнати от ендотела аортни пръстени на SD плъхове (Wong et al., 2001). Въпреки че е доказано, че Act е антихипертензивен при плъхове Wistar,

проучването използва интравенозно инжектиране на Act в анестезиран плъх, за да се изключи факторът на адсорбция (Ahmad et al., 1995). Тук администрирахме Act устно на SHRs и определихме промените в кръвното налягане. Установихме, че фактът на перорално приложение, но не и на Isoact, показва антихипертензивни ефекти чрез понижаване на SBP и DBP за 24 часа след еднократно приложение (Фигура 7). Act в доза от 10 mg/kg телесно тегло има ефект, близък до този на каптоприл в доза от 5 mg/kg SHR при понижаване на SBP и е по-добър от каптоприл при понижаване на DBP.

В заключение актът е изложенантиоксидантдейности, АСЕ инхибиторни активности и антихипертензивни ефекти върху SHRs. Резултатите, представени тук, ще бъдат от полза за усилията за разработване на билкови лекарства или свързани продукти, използващи Закона, който е открит в много растения и билкови лекарства, за антиоксидантна защита и терапевтични ефекти в бъдеще.

Цистанчеактеозидза антиоксиданти и против стареене

1 Департамент по хранителни науки и биотехнологии, Национален университет Chung Hsing, Тайчунг, Тайван

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Тао-Юан, Тайван

3 Училище по фармация, Медицински университет в Тайпе, Тайпе, Тайван

4Завършил Институт по биомедицински материали и инженерство, Медицински университет в Тайпе, Тайпе, Тайван

5 Изследователски център за традиционна билкова медицина, Медицинска университетска болница в Тайпе, Тайпе, Тайван

6 Дипломиран институт по фармакогнозия, Медицински университет в Тайпе, Тайпе, Тайван

(Получено на 12 март 2012 г.; Прието на 20 април 2012 г.)

ЦИТИРАНА ЛИТЕРАТУРА

Ahmad, M., GH Rizwani, K. Aftab, VU Ahmad, AH Gilani и SP Ahmad. 1995 г.Актеозид: ново антихипертензивно лекарство. Фитотер. Рез. 9: 525-527.

Ames, BN 1983. Диетични канцерогени и антикарциногени: кислородни радикали и дегенеративни заболявания. Наука 221:1256-1264.

Анзенбахерова, Е., П. Анценбахер, К. Мачек и Й. Кветина. 2001. Определяне на инхибитори на ензим (ангиотензин конвертаза) въз основа на ензимна реакция, последвана от HPLC.J. Фармацевт. Biomed. анален 24: 1151-1156.

Birkofer, L., C. Kaiser и U. Thomas. 1968 г.Актеозиди неоактеозид: Zuckerester aus Syringa vulgaris. Naturforsc- окачен 23B: 1051-1058.

Borer, JS 2007. Инхибиране на ангиотензин-конвертиращия ензим: забележителен напредък в лечението на сърдечно-съдови заболявания. Евро. Heart J. Suppl. 9(Допълнение E): E2-E9.

Chen, CH, TY Song, YC Liang и ML Hu. 2009 г.Актеозиди 6-О-ацетилактеозид регулира надолу молекулите на клетъчната адхезия, индуцирани от IL-1 чрез инхибиране на ERK и JNK в човешки съдови ендотелни клетки. J. Agric. Храна

Chem. 57: 8852-8859.

Chiang, HC, YJ Lo и FJ Lu. 1994. Инхибитори на ксантин оксидазата от листа на Alsophila spinulosa (Hook) Tryon. J. Enzyme Inhibit. 8: 61-71.

Chiou, WF, LC Lin и CF Chen. 2004 г.Актеозидпредпазва ендотелните клетки от оксидативен стрес, предизвикан от свободните радикали. J. Pharm. Pharmacol. 56: 743-748.

Fotherby, MD и B. Panayiotou. 1999. Антихипертензивна терапия в превенцията на инсулт: какво, кога и за кого? Наркотици 58: 663-674.

Гао, Джей Джей, К. Игалаши и М. Нукина. 1999. Активност на фенилпропаноидни гликозиди за отстраняване на радикали в Caryopteris incana. Biosci. Биотехнология. Biochem. 63: 983-988.

Gey, KF 1990. Theантиоксидантхипотеза за сърдечно-съдови заболявания: епидемиология и механизми. Biochem. Soc. прев. 18: 1041-1045.428 Ботанически изследвания, том. 53, 2012 г

Han, CH, JC Liu, KH Chen, YS Lin, CT Chen, CT Fan, HL Lee, DZ Liu и WC Hou. 2011. Антихипертензивни действия на преработен чесън върху спонтанно хипертензивни плъхове и хора с хипертония. Бот. Stud. 52: 277-283.

Holmquist, B., P. Bunning и JF Riordan. 1979. Непрекъснат спектрофотометричен анализ за ангиотензин-конвертиращ ензим. анален Biochem. 95: 540-548.

Hou, WC, HJ Chen и YH Lin. 2003. Антиоксидантни пептиди с инхибиторни активности на ангиотензин-конвертиращия ензим и приложения за пречистване на ангиотензин-конвертиращия ензим. J. Agric. Food Chem. 51: 1706-1709.

Huang, D., B. Ou и RL Prior. 2005. Химията задантиоксидантанализи на капацитета. J. Agric. Food Chem. 53: 1841-1856.

Huang, CG, YJ Shang, J. Zhang, JR Zhang, WJ Li и BH Jiao. 2008. Хипоурикемични ефекти на фенилпропаноидните гликозидиактеозидна Scrophularia ningpoenis върху серумните нива на пикочна киселина при мишки, предварително третирани с калиев оксонат. амер. Дж.

Брадичка. Med. 36: 149-157.

Лий, KY, EJ Jeong, HS Lee и YC Kim. 2006 г.Актеозидна Callicarpa dichotoma отслабва индуцираните от скополамин увреждания на паметта. Biol. Pharm. Бик. 29: 71-74.

Li, J., P. Wang, R. Zheng, Z. Liu и Z. Jia. 1993. Защита на фенилпропаноидни гликозиди от Pedicularis срещу окислителна хемолиза in vitro. Planta Med. 59: 315-317.

Li, H., GX Chou, ZT Wang и ZB Hu. 2006. HPLC определяне наактеозидв Radix Rehmanniae. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 31: 822-824.

Lin, SY, CC Wang, YL Lu, WC Wu и WC Hou. 2008 г.Антиоксидант, антисемикарбазид-чувствителна аминооксидаза и антихипертензивни активности на гераниин, изолиран от Phyllanthus urinaria. Food Chem. Токсикол. 46: 2485-2492.

Liu, DZ, YS Lin и WC Hou. 2004. Монохидроксамати на аспарагинова киселина и глутаминова киселинаантиоксиданти инхибиторни активности на ангиотензин-конвертиращия ензим. J. Agric. Хранителна химия. 52: 2386-2390.

Kalckar, HM 1947. Диференциална спектрофотометрия на пуринови съединения с помощта на специфичен ензим. J. Biol. Chem.167: 429-443.

Kang, DG, YS Lee, HJ Kim, YM Lee и HS Lee. 2003. Инхибиторни на ангиотензин-конвертиращия ензим фенилпропаноидни гликозиди от Clerodenron trichotomum. J. Ethnopharmacol. 89: 151-154.

Koo, KA, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee и YC Kim. 2005. In vitro невропротективни активности на фенилетаноидни гликозиди от Callicarpa dichotoma. Planta Med.71: 778-780.

Koo, KA, SH Kim, TH Oh и YC Kim. 2006 г.Актеозиди неговите агликони предпазват първичните култури от кортикални клетки на плъхове от индуцирана от глутамат екситотоксичност. Life Sci. 79:709-716.

Lin, CL, SY Lin, YH Lin и WC Hou. 2006. Ефекти на протеин за съхранение на клубени от сладък картоф (Dioscorea alata cv. Tainong No.1) и неговите пептични хидролизати върху спонтанно хипертензивни плъхове. J. Sci. Храна Agric. 86: 1489-1494.

Марк, К. С. и Т. П. Дейвис. 2000. Инсулт: развитие, превенция и лечение с пептидазни инхибитори. Пептиди 21: 1965-1973.

Мики, М., Х. Тамай, М. Мино, Й. Ямамото и Е. Ники. 1987. Верижно окисляване на свободни радикали на червени кръвни клетки на плъхове от молекулярен кислород и неговото инхибиране от -токоферол. Arch Biochem. Biophys. 258: 373-380.

Национален научен съвет. 1994. Ръководство за грижа и използване на лабораторни животни. Национален научен съвет, Тайван.

Ohno, T., M. Inoue, Y. Ogihara и I. Saracoglu. 2002. Антиметастатичната активност наактеозид, фенилетаноиден гликозид. Biol. Pharm. Бик. 25: 666-668.

Vendetti, MA, B. Rubin, DW Cushman. 1977. Дизайн на специфични инхибитори на ангиотензин-конвертиращия ензим: нов клас орално активни антихипертензивни средства. Наука 196: 441-444.

Rao, YK, SH Fang, SC Hsieh, TH Yeh и YM Tzeng. 2009. Съставките на Anisomeles India и техните противовъзпалителни действия. J. Ethnopharmacol. 121: 292-296.

Smith, MA, G. Perry, PL Richey, LM Sayre, VE Anderson, MF Beal и N. Kowal 1996. Оксидативно увреждане при Алцхаймер. Nature 382: 120-121. Wang, P., J. Kang, R. Zheng, Z. Yang, J. Lu, J. Gao и Z. Jia.

1996. Почистващи ефекти на фенилпропаноиден гликозид от Pedicularis върху супероксиден анион и хидроксилен радикал чрез метода на завъртане. Biochem. Pharmacol. 51: 687- 691.

Wong, IYF, Y. Huang, ZD He, CW Lau и ZY Chen. 2001. Релаксиращи ефекти на екстракт от Ligstrum purpurascens и пречистенактеозидв аортни пръстени на плъхове. Planta Med. 67: 317-321.

Wu, YT, LC Lin, JS Sung и TH Tsai. 2006. Определяне наактеозидв Cistanche deserticola и Boschniakia rossica и неговата фармакокинетика при свободно движещи се плъхове с помощта на LC-MS/MS. J. Chromatogr. B 844: 89-95.