Противотуморни и противовъзпалителни ефекти на олигозахаридите от екстракт от Cistanche Deserticola при увреждане на гръбначния мозък

Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com

Hong Zhang и др

Резюме

В настоящото изследване фармакологичните ефекти на олигозахаридите отЦистанчеdeserticolaекстрактНавъзпаление, оксидативен стрес и апоптоза при мъжки плъхове албиноси с увреждане на гръбначния мозък са изследвани. Липидна пероксидация, GSH, каталаза, супероксид дисмутаза, ацетилхолин естераза, GPx, ROS и азотна киселина са значително променени при плъхове с увреждане на гръбначния мозък. Нивата на експресия на иРНК на IL-6, TNF-, циклооксигеназа-2, iNOS,p53, каспаза-3, Bax и pro-NGF бяха намалени с N20 процента след добавяне на екстракт. Нивата на протеинова експресия на каспаза-3 и pro-NGF също бяха намалени с N20 процента. Броят на p53 положителните клетки беше съответно 1, 79, 54, 33 и 19 в групите GI–GV, а съответният брой на каспаза-3 положителните клетки беше 2, 87, 51, 23 и 14. Въз основа на настоящите резултати, използването на олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстрактът е ефективен срещувъзпаление, оксидативен стрес и апоптоза при мъжки плъхове албиноси с увреждане на гръбначния мозък.

Ключови думи:Cistanche deserticola, възпаление, оксидативен стрес, апоптоза, плъхове

1. Въведение

Увреждането на гръбначния мозък включва увреждане на гръбначния мозък, което води до функционална промяна със загуба на усещане, мускулна и автономна функция [1]. В допълнение, апоптозата може да бъде индуцирана в олигодендроцити и неврони, което води до дисфункция на гръбначния мозък поради демиелинизация и аксонална дегенерация [2,3]. Увреждането на гръбначния мозък предизвиква значителен оксидативен стрес ивъзпалениеслед началото на апоптоза в олигодендроцити и неврони [2,4]. Реактивни кислородни видове (ROS) и провъзпалителни цитокини се освобождават по време на невродегенерация и микроглиите са жизненоважни по време на невродегенеративните и възпалителни процеси [5–7]. Интерлевкините (IL) са важни цитокини, участващи в различни имунологични процеси [8]. Yune et al., [9] съобщават, че пронервният растежен фактор (pro-NGF), освободен от микроглия, води до апоптотична клетъчна смърт. Следователно, нови и мощни терапевтични средства срещу оксидативен стрес ивъзпалениеса нужни.

РастениетоЦистанчеdeserticolaе известен като пустинна метла и е холопаразитен член на семейство Orobanchaceae [10].Цистанче deserticolaлипсва хлорофил и получава вода и хранителни вещества по паразитен начин от белия саксаул (Haloxylon persicum) и черния саксаул (Haloxylon ammodendron). TheЦистанчеdeserticolaмногогодишно растение, известно като Rou Cong Rong, може да нарасне до 160 см по размер и има жълти цветя. Той е широко разпространен в Китай и Монголия [11] и в традиционната китайска медицина е отличен източник за лечение на няколко заболявания. Той също така служи като основно билково лечение за ободряване на Ян и тонизиране на бъбреците [11]. Koo и др. [12] съобщават, че гликозидите наЦистанчеdeserticolaдействат като ефективни вещества в централната нервна система (ЦНС). Няколко изследователи съобщават за антиапоптотични, противовъзпалителни и антиоксидантни свойства наЦистанчеdeserticola[13,14]. Произведените от храната антиоксиданти и противовъзпалителни молекули могат да служат като химиопревантивни вещества срещу хронични заболявания [15]. Предвид гореспоменатите терапевтични ползи, терапевтичната ефикасност на олигозахаридите отЦистанчеdeserticolaекстракт срещувъзпаление, оксидативен стрес и апоптоза бяха изследвани в настоящото изследване с помощта на модел на мъжки плъх албинос с увреждане на гръбначния мозък.

2. Материали и методи

2.1. Материали

Праймери на тумор некрозис фактор-алфа (TNF-), IL-6, циклооксигеназа, индуцируема азотен оксид синтаза (iNOS), p53, Bax, каспаза-3, BCL-2, pro-NGF и глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (GAPDH) са закупени от Thermo Fisher Scientific (Пекин, Китай). Първични антитела за каспаза-3 (AV00021), p53 (P5813-100UL), моноклонална анти-коза/овча IgG-пероксидаза (A9452) и анти-миши IgG флуоресцеин изотиоцианат (FITC; F{{15} }ML) са закупени от Sigma-Aldrich China, Inc. (Шанхай, НР Китай).

2.2. Плъхове

Мъжки плъхове Wistar албиноси (180–220 g) са закупени от животновъдната къща на West China Hospital, Sichuan University, Китай. На плъховете бяха осигурени храна и вода ad libitum. 12-h светлина: 12-h тъмен цикъл се поддържа в полипропиленови клетки за плъхове при относителна влажност. Всички експерименти с плъхове бяха одобрени от етичния комитет на WestChina Hospital, Sichuan University, Китай. Спазени са всички приложими международни, национални и институционални указания за грижа и използване на животни.

2.3. Индуциране на увреждане на гръбначния мозък

Увреждането на гръбначния мозък е предизвикано от надлъжен хирургически разрез след излагане на халотан (1,5 процента). Цялата хирургична процедура се проведе при стайна температура. Разрезът е направен от долните до средните гръдни прешлени на гърба на животното. Тежест от 20–25 g се поставя върху откритата повърхност на Th12 за 30 минути, за да предизвика нараняване. Кожата и мускулите бяха зашити след отстраняване на тежестта от повърхността на Th12 и беше предизвикана временна възпроизводима парализа в долните крайници [16,17]. Плъховете са държани в продължение на 24 години при подходящи условия и ветеринарен контрол.

2.4. Приготвяне на екстракт от Cistanche deserticola и количествен анализ

РастениетоЦистанчеdeserticola(1 kg) беше събран от Gansuprovince, Китай, изсушен на въздух и прах с помощта на електрическа мелница. Прахът се екстрахира в етанол (70 процента) в продължение на 60 минути, филтрува се и се концентрира при понижено налягане. Концентратът се изсушава във вакуум на прах [18]. Количествен анализ наЦистанчеdeserticolaекстракт се извършва с помощта на високоефективна течна хроматография (HPLC), както е описано по-рано [11].

2.5. Лечение

Експерименталните групи бяха както следва: група I (GI), нормални контролни плъхове; група II (GII), плъхове с увреждане на гръбначния мозък (фалшиви контроли); и групи III–V (GIII–V), плъхове с увреждане на гръбначния мозък, получаващи 100, 200 или 400 mg/kg олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракт, респ. Всяка група съдържа шест плъха иЦистанчеdeserticolaекстракт се прилага перорално на плъхове в продължение на 6 последователни седмици.

2.6. Вземане на кръв

В края на лечението кръв (5-6 ml) се събира с 5 ml спринцовка с игла 23G1 през сърдечната пункция и плъховете се анестезират с кетамин хидрохлорид (100 mg/kg телесно тегло) и ксилазин (10 mg/kg телесно тегло). тегло) и пожертвани чрез обезглавяване.

2.7. Приготвяне на тъканен хомогенат

В края на лечението плъховете се анестезират с кетамин хидрохлорид (100 mg/kg телесно тегло) и ксилазин (10 mg/kg телесно тегло) и се умъртвяват чрез обезглавяване. Проби от гръбначния мозък (12 mm) бяха събрани от оперираната област. Тъканите на гръбначния мозък се нарязват на малки парчета и се хомогенизират в Tris-HCl буфер (рН 7.4, 50 mM) при 6000 rpm за 5 минути. Хомогенатът се центрофугира и супернатантата се събира за по-нататъшни експерименти. Всички препарати на хомогенат и супернатант се извършват при 4 градуса.

2.8. Биомаркери на оксидативен стрес

Липидната пероксидация се определя според съдържанието на малондиалдехид (MDA) чрез измерване на реактивните видове на тиобарбитуровата киселина (TBARS). Крайният продукт се измерва при 534 nm [19]. ROS се определят с помощта на дихлорофлуоресцеинов анализ [20]. Редуцираното съдържание на глутатион (GSH) се определя чрез измерване на крайния продукт при 405 nm [21]. Ензимните активности на супероксид дисмутаза (SOD), глутатион пероксидаза (Gpx), каталаза и ацетилхолинестераза (AChE) бяха измерени с помощта на спектрофотометрия [19].

2.9. Възпалителни маркери

Серумните нива на TNF- и IL-6 са определени за всички групи [22]. Съдържанието на нитрит се измерва като индекс на нивото на азотен оксид (NO) и се изразява в mM [23,24]. Нивата на експресия на иРНК на TNF-, IL-6, iNOS, циклооксигеназа-2 и GAPDH бяха определени съгласно Moon et al. [25]. Праймерите, използвани в това изследване, са показани в таблица 1.

2.10. Биомаркери на апоптоза

Нивата на експресия на иРНК на каспаза-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF и GAPDH бяха определени съгласно Moon et al. [25]. Нивата на протеинова експресия на каспаза-3, p53, bcl-2, bax, pro-NGF и GAPDH бяха определени съгласно Lobos et al. [26]. TUNEL оцветяване на каспаза-3 и р53 беше извършено в невронални срезове [25]. Праймерите, използвани за RT-PCR, са дадени в таблица 1.

2.11. статистически анализи

Стойностите са представени като средни стойности със стандартна грешка на средната стойност (SEM). Контролът иЦистанчеdeserticolaтретираните с екстракт групи бяха сравнени с помощта на несдвоен t-тест на Student. Еднопосочен анализ на дисперсията (ANOVA) беше използван за множество сравнения. Счита се, че P-стойностите ˂0.05 показват статистическа значимост.

3. Резултати

В настоящото изследване терапевтичната ефикасност на олигозахаридите отЦистанче deserticolaекстракт срещувъзпаление, окислителенстреси апоптоза при мъжки плъхове албиноси с увреждане на гръбначния мозък. Беше наблюдавано наличието на олигозахариди (78,68 процента), актеозид (9,29 процента), ехинакозид (6,34 процента) и 8-епилоганова киселина (5,75 процента)Цистанче deserticolaекстракт (фиг. 1). Съдържанието на MDA, измерено като краен продукт на липидна пероксидация, е 22,58 nmol/g при нормални контролни плъхове (GI) и е драстично повишено със 179,5 процента при фалшиви контролни плъхове (GII). Третиране на плъхове с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракт значително намалява съдържанието на MDA с 50.1 процента в GV групата (Таблица 2, P b 0,05). Съдържанието на GSH е 85,31 mg/g в групата с GI и е драстично намалено с 61,1 процента в групата с GII. Лечение съсЦистанчеdeserticolaекстракт при плъхове с увреждане на гръбначния мозък значително повишава съдържанието на GSH със 121,6 процента в групата с GV (Таблица 2, P b0.05).

Активността на SOD е 6,2 U/mg в групата с GI и е значително намалена с 51,1 процента в групата с GII. Плъхове с увреждане на гръбначния мозък, допълнени с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракт показва значително повишена SOD активност, с 91,4 процента в GV групата (Таблица 2, P b0.05). Активността на каталазата е 12,8 U/g в групата с GI и е значително намалена с 59,3 процента в групата с GII. Плъхове с увреждане на гръбначния мозък, допълнени с олигозахариди отЦистанче deserticolaекстракти показват значително повишена каталазна активност, с 106,1 процента в GV групата (Таблица 2, P b 0.05). Активността на GPx е 0,87 (mg/протеин) в групата с GI и е намалена с 55,2 процента в групата с GII. Активността на GPx се повишава със 100 процента в групата с GV (Таблица 2, P b 0,05). Активността на AChE е 9,3 (μmol/min/mg протеин) в групата с GI и е намалена с 54,8 процента в групата с GII. Плъхове с увреждане на гръбначния мозък, допълнени с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракт показва значително повишена активност на AChE, съответно с 26,2, 57,1 и 107,1 процента в групите GIII, GIV и GV (Таблица 2, P b 0,05).

ROS бяха измерени и изразени в относителни флуоресцентни единици (RFUs): вътреклетъчната ROS беше 44,23 в групата с GI, която беше увеличена с 349 процента в групата с GII. Суплементация с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракти значително намаляват вътреклетъчните нива на ROS с 61,9 процента в GV групата (фиг. 2A, P b 0.05). Съдържанието на нитрит се измерва като индекс на нивото на NO и се изразява в mM. Нивото на NO е 3,7 (mM) в групата с GI, което е повишено с 349 процента в групата с GII. Суплементация с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстрактът значително намалява нивата на NO с 63,6 процента в групата с GV (фиг. 2B, P b 0.05).

Нивата на IL-6 и TNF- бяха измерени и изразени като pg/mg протеин. Нивата на IL-6 и TNF- бяха значително повишени, съответно с 912,7 и 695,4 процента, в групата с GII. Въпреки това, добавките с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстрактът значително намалява нивото на IL{{0}} и TNF- с N60 процента в групата с GI в сравнение с групата с GII (фиг. 3, P b 0.{{16 }}5). Експресията на иРНК на възпалителни маркери, като IL-6, TNF-, циклооксигеназа-2 и iNOS, беше количествено определена и изразена като кратни промени. Нивата на експресия на иРНК на IL 6, TNF-, циклооксигеназа-2 и iNOS бяха повишени с 0.72-, 0.81-,0.54- , и 0.67-сгъване съответно в групата GII. Допълване съсЦистанчеdeserticolaекстракт намалява нивата на експресия на иРНК на IL{{0}}, TNF-, циклооксигеназа-2 и iNOS с N20 процента в групата на GV в сравнение с групата на GII (фиг. 4, P b 0.05).

Експресията на иРНК на апоптотичните маркери каспаза{{0}}, p53,bcl-2, bax и pro-NGF също беше определена. Нивата на експресия на иРНК на p53, каспаза-3, bax и pro-NGF бяха повишени с 0.97-,1.{{10}}, 1.{ {12}} и 0.76-кратно в GII групата, съответно, и нивото на експресия на bcl-2 иРНК е намалено с 0.67-кратно . Третирането с екстракт значително намалява нивата на експресия на mRNA на p53, caspase-3, bax и pro-NGF с N30 процента, докато нивото на експресия на bcl-2 mRNA се повишава със 178 процента (фиг. 5, P b 0,05). Въз основа на Western blotanalysis нивата на каспаза-3 и pro-NGF протеини бяха значително повишени, съответно с 0.95-пъти и 0.68-пъти, в групата с GII. Добавка с олигозахариди отЦистанчеdeserticolaекстракт значително намалява нивата на експресия на каспаза{{0}} и pro-NGF протеинови нива с N20 процента в GI групата в сравнение с GII групата (фиг. 6, P b 0.05). Анализът на оцветяване с TUNEL беше използван за откриване на броя на p53- и каспаза-3-положителните клетки. Броят на p53-позитивните клетки беше съответно 1, 79, 54, 33 и 19 в групите GI–GV. Броят на каспаза-3-позитивните клетки беше съответно 2, 87, 51, 23 и 14 в групите GI–GV (Фигури 7–8, P b 0,05).

4. Обсъждане

В настоящото изследване терапевтичната ефикасност на олигозахаридите отЦистанчеdeserticolaекстракт срещувъзпаление, оксидативен стрес и апоптоза при мъжки плъхове албиноси с увреждане на гръбначния мозък. Liuet al. [27] съобщават, че добавките с антиоксидант могат да бъдат ефективни срещу няколко невродегенеративни заболявания. Наличието на ехинакозид (фенилетаноиден гликозид) се съобщава вЦистанчеdeserticolaекстракт [10] и няколко изследователи са демонстрирали противовъзпалителните и антиноцицептивните свойства наЦистанче deserticola[28,29]. В настоящото проучване се наблюдава, че олигозахаридите, актеозидът, ехинакозидът и 8-епилогановата киселина са основните съставки на екстракта от Cistanche deserticola.

TNF-подобрени поведенчески дефекти и апоптоза са наблюдавани в SH-SY5Y невронни клетки след лечение с ехинакозид [30,31]. Нан и др. [32] съобщават за намаляване на нивата на TNF-, T-tau и IL-1 при пациенти с болестта на Алцхаймер и подобрено възстановяване на атрофията на хипокампа и когнитивните способности след добавки с Cistanche herba. Терапевтичните ефекти наЦистанчеdeserticolaекстракт навъзпаление, оксидативен стрес и апоптоза не са съобщавани досега. Това е първият доклад за фармакологичните ефекти наЦистанчеdeserticolaекстракт в модел на травма на гръбначния мозък.

Няколко изследователи съобщават, че лечението с актеозид значително намалява оксидативния стрес и чревниявъзпалениепри мишки, предизвикани от възпалителни заболявания на червата [33]. Нам и др. [34] съобщават, че противовъзпалителната активност на изоактеозид от Abeliophyllum distichum в човешки мастоцити. Противовъзпалителни фенилпропаноидни гликозиди от листата на Clerodendron trichotomum са докладвани в мишки модел [35]. Zhou и др. [36] съобщават, че противовъзпалителната активност на олигозахаридите в макрофаги RAW 264.7 клетки. Съобщава се за олигозахаридни мономери за инхибиране навъзпалениев LPS-стимулирани макрофаги чрез потискане на MAPK и NF-κB пътища [37].

Fahnestock и др. [38] съобщават, че pro-NGF е преобладаващата форма в мозъка и се увеличава при пациенти с болестта на Алцхаймер. Няколко разцепени протеини, в допълнение към pro-NGF, активират антиапоптотични клетъчни отговори [39]. Съотношението между зрелия NGF- и pro-NGF играе критична роля в балансирането на клетъчното оцеляване и смъртността [40]. Ke Zhang и др. [18] съобщават за намалено образуване на тумори и по-дълъг живот при мишки, допълнени сЦистанчеdeserticolaекстракт. Невропротективни ефекти наЦистанчеdeserticolaекстракт при увреждане, предизвикано от невротоксини, са докладвани по-рано [41]. Xuan и Liu et al. [42] съобщават за подобрения в имунната функция, паметта, ученето и антиоксиданта при мишки, допълнени сЦистанчеdeserticolaекстракт. Добавката с екстракт от Cistanche deserticola намалява MDA и повишени нива на GPx и SOD в модел на плъх с исхемия-реперфузия. Освен това се наблюдава понижена регулация на каспаза-3, със съпътстващо увеличение на съотношението bax/BCL-2 [43], което е в съответствие с нашите открития, показващи намалени нива на оксидативни, възпалителни и апоптотични маркери в гръбначния стълб нараняване на кабела плъхове, допълнени сЦистанчеdeserticolaекстракт.

5. Заключение

В обобщение, количественият анализ разкрива наличието на олигозахариди, актеозид, ехинакозид и 8-епилоганова киселина вЦистанчеdeserticolaекстракт.Възпаление, оксидативния стрес и маркерите за апоптоза са значително намалени при плъхове с увреждане на гръбначния мозък, допълнени с олигозахариди от екстракт от Cistanche deserticola.

Ограничения на изследването

Това изследване, въпреки че разкрива антитуморни и противовъзпалителни ефекти,Цистанчеdeserticolaекстрактът има някои ограничения. Не сме оценили острия ефект наЦистанчеdeserticolaекстракт върху тумор ивъзпалениепри увреждане на гръбначния мозък.

Финансиране

Това проучване е подкрепено от Националната природонаучна фондация на Китай (Грант № 31370984, 81501879, 31870961, GZ1219), Министерството на науката и технологиите на провинция Съчуан (№ 2015HH004) Проект за научни изследвания от Комисията по здравеопазване и семейно планиране на провинция Съчуан (№ 100097).

Конкуриращи се интереси

Всички автори декларират, че нямат конкурентни интереси.

Авторски принос

Hong Zhang, Zhou Xiang, Xin Duan и Juan li Jiang бяха проведени експерименти и съставиха ръкописа. Yi Ming Xing, Cheng Zhu и Qiang Song събраха литературни прегледи, проведоха анализ на необработени данни и интерпретация на данни. Qin Rong Yu ревизира интелектуалното съдържание на ръкописа.

От: ' Антитуморни ианти-възпалителенефекти на олигозахаридите отЦистанчеdeserticolaизвлечение за травма на гръбначния мозък' отHong Zhang и др

---H. Zhang et al. / Международен журнал за биологични макромолекули 124 (2019) 360–367

Препратки

[1] MO Krucoff, S. Rahimpour, MW Slutzky, VR Edgerton, DA Turner, Подобряване на възстановяването на нервната система чрез невробиология, обучение на нервен интерфейс и неврорехабилитация, Front. Neurosci. 10 (2016) 584.
[2] TY Yune, JY Lee, MH Jiang, DW Kim, SY Choi, TH Oh, Системното приложение на слят протеин PEP-1-SOD1 подобрява функционалното възстановяване чрез инхибиране на смъртта на невронни клетки след увреждане на гръбначния мозък, Free Radic. Biol. Med. 45 (2008) 1190–1200.

[3] SM Lee, TY Yune, SJ Kim, DW Park, YK Lee, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Миноциклинът намалява клетъчната смърт и подобрява функционалното възстановяване след травматично увреждане на гръбначния мозък при плъх, J. Neurotrauma 20 (2003) 1017–1027.

[4] F. Bao, D. Liu, Пероксинитрит, генериран в гръбначния мозък на плъхове, предизвиква невронна смърт и неврологични дефицити, Neuroscience 115 (2002) 839–849.

[5] L. Qin, Y. Liu, T. Wang, SJ Wei, ML Block, B. Wilson, B. Liu, JS Hong, NADPH оксидазата медиира индуцирана от липополизахарид невротоксичност и провъзпалителна генна експресия в активирана микроглия, J. Biol . Chem. 279 (2004) 1415–1421.
[6] ML Block, JS Hong, Microglia andвъзпаление-медиирана невродегенерация: множество тригери с общ механизъм, Prog. Neurobiol. 76 (2005) 77–98.
[7] KJ Min, HK Pyo, MS Yang, KA Ji, I. Jou, EH Joe, Ганглиозидите активират микроглията чрез протеин киназа С и NADPH оксидаза, Glia 48 (2004) 197–206.
[8] J. Hussein, M. El-Banna, TA Razik, ME El-Naggar, Биосъвместими нанокристали от цинков оксид, стабилизирани чрез хидроксиетил целулоза за смекчаване на диабетни усложнения, Int. J. Biol. Macromol. 107 (Pt A) (2018) 748–754.
[9] TY Yune, JY Lee, GY Jung, SJ Kim, MH Jiang, YC Kim, YJ Oh, GJ Markelonis, TH Oh, Minocycline облекчава смъртта на олигодендроцитите чрез инхибиране на производството на про-нервен растежен фактор в микроглията след увреждане на гръбначния мозък, J. Neurosci. 27 (2007) 7751–7761.
[10] GQ Sheng, JR Zhang, XP Pu, J. Ma, CL Li, Защитен ефект на вербаскозид върху невротоксичност, индуцирана от 1-метил-4-фенилпиридиниев йон в PC12 клетки, Eur. J. Pharmacol. 451 (2002) 119–124.
[11] Y. Jiang, PF Tu, Анализ на химичните съставки във видовете Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[12] KA Koo, SH Sung, JH Park, SH Kim, KY Lee, YC Kim, In vitro невропротективни активности на фенилетаноидни гликозиди от Callicarpa dichotoma, Planta Med. 71 (2005) 778–780.
[13] Q. Dong, J. Yao, JN Fang, K. Ding, Структурна характеристика и имунологична активност на два екстрахирани със студена вода полизахариди отЦистанчеdeserticolaYC Ma, Carbohydr. Рез. 342 (2007) 1343–1349.
[14] LW Lin, HT Lin, FH Tsai, WH Wang, CR Wu, Антиноцицептивна и противовъзпалителна активност, причинена отЦистанчеdeserticolaпри гризачи, J. Ethnopharmacol. 83 (2002) 177–182.
[15] J. Hussein, M. El-Bana, E. Refaat, ME El-Naggar, Синтез на базирана на карвакрол наноемулсия за лечение на невродегенеративни разстройства при експериментален диабет, J. Funct. Храни 37 (2017) 441–448.
[16] M. Sakanaka, P. Zhu, B. Zhang, TC Wen, F. Cao, YJ Ma, K. Samukawa, N. Mitsuda, J. Tanaka, M. Kuramoto, H. Uno, R. Hata, Интравенозно инфузия на дихидро-гинзенозид Rb1 предотвратява компресивно увреждане на гръбначния мозък и исхемично увреждане на мозъка чрез регулиране на VEGF и Bcl-xL, J. Neurotrauma 24 (2007) 1037–1054.
[17] S. Naruo, K. Okajima, Y. Taoka, M. Uchiba, T. Nakamura, H. Okabe, K. Takagi, Простагландин E1 намалява индуцираното от компресионна травма увреждане на гръбначния мозък при плъхове главно чрез инхибиране на неутрофилното активиране, J Невротравма 20 (2) (2003) 221–228.
[18] K. Zhang, X. Ma, W. He, H. Li, S. Han, Y. Jiang, H. Wu, L. Han, T. Ohno, N. Uotsu, K. Yamaguchi, Z. Ma , P. Tu, Екстракти отЦистанчеdeserticolaможе да противодейства на имуносеценцията и да удължи продължителността на живота при мишки, предразположени към стареене 8 (SAM-P8), Evid. Базирано допълнение. Алтернативен. Med. 2014 (2014), 601383.
[19] T. Kaddour, K. Omar, AT Oussama, H. Nouria, B. Iméne, A. Abdelkader, Индуцирана от алуминий остра невротоксичност при плъхове: лечение с воден екстракт от Arthrophytum (Hammada scoparia), J. Acute Dis. 5 (6) (2016) 470–482.
[20] Т. В. Арутюнян, А. Ф. Користова, Л. Н. Кублик, М. К. Левитман, В. В. Шапошникова, Ю. Н. Користов, Таксифолин и фукоидан премахват индуцираното от облъчване увеличение на производството на реактивни кислородни видове в аортата на плъхове, Bull. Exp. Biol. Med. 160 (2016) 635–638.
[21] M. Erden Inal, A. Akgün, A. Kahraman, Ефектите на екзогенния глутатион върху намаленото ниво на глутатион, активността на глутатион пероксидаза и глутатион редуктаза на плъхове с различна възраст и пол след Γ-облъчване на цялото тяло, J. Am . Стареене ст.н.с. 26 (2003) 55–58.
[22] J. Tavakkol Afshari, N. Ghomian, A. Shameli, MT Shakeri, MA Fahmidehkar, E. Mahler, R. Khoshnavaz, M. Emadzadeh, Определяне на концентрациите на интерлевкин-6 и тумор некрозис фактор-алфа в Иранско-хорасански пациенти с прееклампсия, BMC Бременност Раждане 5 (2005) 14.
[23] D. Medhat, J. Hussein, ME El-Naggar, MF Attia, M. Anwar, YA Latif, HF Booles, S. Morsy, AR Farrag, WKB Khalil, Z. El-Khayat, Ефект на Au-dextran NPS като противотуморен агент срещу EAC и солиден тумор при мишки чрез биохимични оценки и хистопатологични изследвания, Biomed. Pharmacother. 91 (2017) 1006–1016.
[24] TI Shaheen, MI El-Naggar, JS Hussein, M. El-Bana, E. Emara, Z. El-Khayat, MMG Fouda, H. Ebaid, A. Hebeish, Антидиабетна оценка; in vivo изследване на златни и сребърно-златни наночастици със сърцевина и черупка върху индуцирани от стрептозотоцин диабетни плъхове, Biomed. Pharmacother. 83 (2016) 865–875.
[25] YJ Moon, JY Lee, MS Oh, YK Pak, KS Park, TH Oh, TY Yune, Инхибиране навъзпалениеи оксидативният стрес от екстракта от Angelica dahuricae radix намалява апоптотичната клетъчна смърт и подобрява функционалното възстановяване след увреждане на гръбначния мозък, J. Neurosci. Рез. 90 (1) (2012) 243–256.
[26] E. Lobos, C. Gebhardt, A. Kluge, K. Spanel-Borowski, Експресия на изоформите на нервния растежен фактор (NGF) в матката на плъх по време на бременност: натрупване на прекурсор proNGF, Endocrinology 146 (4) (2005) 1922–1929 г.
[27] J. Liu, E. Head, AM Gharib, W. Yuan, RT Ingersoll, TM Hagen, CW Cotman, BN Ames, Загубата на памет при стари плъхове е свързана с мозъчно митохондриално разпадане и окисление на РНК/ДНК: частично обръщане от захранване с ацетил-L-карнитин и/или R-_-липоева киселина, Proc. Natl. акад. Sci. САЩ 99 (2002) 2356–2361.
[28] ZD Nan, KW Zeng, SP Shi, MB Zhao, Y. Jiang, PF Tu, Фенилетаноидни гликозиди с противовъзпалителни действия от стъблата наЦистанчеdeserticolaкултивиран в пустинята Тарим, Fitoterapia 89 (2013) 167–174.
[29] XM Wu, XM Gao, KWK Tsim, PF Tu, арабиногалактан, изолиран от стъблата наЦистанчеdeserticolaиндуцира пролиферацията на култивирани лимфоцити, Int. J. Biol. Macromol. 37 (2005) 278–282.
[30] M. Deng, JY Zhao, PF Tu, Y. Jiang, ZB Li, YH Wang, Echinacoside спасява невронните клетки SHSY5Y от TNF-алфа-индуцирана апоптоза, Eur. J. Pharmacol. 505 (2004) 11–18.
[31] X. Geng, X. Tian, ​​P. Tu, X. Pu, Невропротективни ефекти на ехинакозид в миши MPTP модел на болестта на Паркинсон, Eur. J. Pharmacol. 564 (2007) 66–74.

[32] L. Nan, W. Jianping, M. Jun, G. Zhiqiang, J. Chao, Y. Lie, F. Xiaojie, Невропротективни ефекти на терапията с cistanches herba при пациенти с умерена болест на Алцхаймер, Evid. Базирано допълнение. Алтернативен. Med. (2015) 103985.

[33] M. Hausmann, F. Obermeier, DH Paper, K. Balan, N. Dunger, K. Menzel, K. Rogler, In vivo лечение с билковия фенилетаноид актеозид подобрява чревния трактвъзпалениепри индуциран от декстран сулфат натрий колит, Clin. Exp. Immunol. 148 (2) (2007) 373–381.

[34] SY Nam, HY Kim, MS Yoou, AH Kim, BJ Park, HJ Jeong, HM Kim, Противовъзпалителни ефекти на изоактеозид от Abeliophyllum distichum, Immunopharmacol. Имунотоксикол. 37 (3) (2015) 258–264.
[35] KH Kim, S. Kim, MY Jung, IH Ham, WK Whang, Противовъзпалителни фенилпропаноидни гликозиди от листа на Clerodendron trichotomum, Arch. Pharm. Рез. 32 (1) (2009) 7–13.
[36] R. Zhou, X. Shi, Y. Gao, N. Cai, Z. Jiang, X. Xu, Противовъзпалителна активност на гулуронатни олигозахариди, получени чрез окислително разграждане от алгинат в липополизахарид-активирани миши макрофаги RAW 264.7 клетки, J. Agric. Food Chem. 14; 63 (1) (2015) 160–168.
[37] W. Wang, P. Liu, C. Hao, L. Wu, W. Wan, X. Mao, Неоагаро-олигозахаридните мономери инхибиратвъзпалениев LPS-стимулирани макрофаги чрез потискане на MAPK и NF-кВ пътища, Sci. Rep. 7 (7) (2017), 44252.
[38] M. Fahnestock, B. Michalski, B. Xu, MD Coughlin, Прекурсорният пронервен растежен фактор е преобладаващата форма на нервния растежен фактор в мозъка и се увеличава при болестта на Алцхаймер, Mol. клетка. Neurosci. 18 (2001) 210–220.
[39] R. Lee, P. Kermani, KK Teng, BL Hempstead, Регулиране на клетъчното оцеляване чрез секретирани проневротрофини, Science 294 (2001) 1945–1948.
[40] MV Chao, M. Bothwell, Neurotrophins: to cleave or not to cleave, Neuron 33 (2002) 9–12.
[41] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Хепатопротективна активност на фенилетаноиди отЦистанчеdeserticola, Planta Med. 64 (2) (1998) 120–125.
[42] GD Xuan, CQ Liu, Изследване на ефекта на фенилетаноидни гликозиди (PEG) наЦистанчеdeserticolaвърху анти-стареенето при стари мишки, индуцирано от D-галактоза, J. ​​Chin. Med. Матер. 31 (9) (2008) 1385–1388.
[43] Q. Yu, X. Li, X. Cao, Кардиопротективни ефекти на богат на фенилетаноидни гликозиди екстракт отЦистанчеdeserticolaпри миокарден инфаркт, предизвикан от исхемия-реперфузия при плъхове, Ann. Vasc. Surg. 34 (2016) 234–242.