Автономна дисфункция и увреждане при синдром на хроничната умора

Резюме:

Предистория: миалгичен енцефаломиелит/Синдром на хроничната умора(ME/CFS) епридобито сложно заболяване с пациенти, страдащи от основните симптоми наумора, и след усилиенеразположение (PEM), когнитивно увреждане, болка и автономна дисфункция. ME/CFS епредизвикана от инфекция при повечето пациенти. Първоначално доказателство за потенциална роля на естественоторегулаторни автоантитела (AAB) към бета-адренергични (AdR) и мускаринови ацетилхолинови рецептори (MAChR) при пациенти с ME/CFS идва от няколко проучвания.

Методи: Тук анализирахме корелациитена тежестта на симптомите с нива на AAB до вазорегулаторни AdR, AChR и ендотелин-1 тип Aи B (ETA/B) и ангиотензин II тип 1 (AT1) рецептор в група от пациенти с ME/CFS в Берлин(n = 116) чрез ELISA. Тежестта на заболяването, симптомите и автономната дисфункция бяха оценени отвъпросници.

Резултати: Установихме, че нивата на повечето AABs значително корелират с ключовите симптоминаумораи мускулна болка при пациенти с начало, предизвикано от инфекция. Тежестта на когнитивнитеувреждане, свързано с AT1-R- и ETA-R-AAB и тежестта на стомашно-чревните симптоми салфа1/2-AdR-AAB. Обратно, пациентите с ME/CFS, които не са предизвикани от инфекция, показват по-малкои други корелации.

Заключение: Корелации на специфични AAB срещу G-протеин-свързани рецептори(GPCR) със симптоми предоставят доказателства за ролята на тези AAB или съответните рецепторни пътища впатомеханизъм на заболяването.

Ключови думи:адренергични рецептори; автоантитела; миалгичен енцефаломиелит;синдром на хроничната умора; автоимунитет; вазорегулация; G-протеин-свързан рецептор,цистанче

За повече информация:wallence.suen@wecistanche.com

1. Въведение

Миалгичният енцефаломиелит/синдром на хроничната умора (ME/CFS) е придобитокомплексно заболяване с основни симптоми на умора, неразположение след усилие (PEM), когнитивнидисфункция и болка [1]. Прогнозното разпространение е до 0.86 процента, с пикове презтийнейджърски години и средна възраст [2,3]. ME/CFS се предизвиква от инфекция в повечето случаина пациенти [4]. Въпреки че патогенезата все още е неизвестна, има достатъчно доказателстваимунна и автономна дисрегулация [5]. Има все повече доказателства, че съдовата дисфункция и хипоперфузията играят роляважна роля в ME/CFS. Намалено снабдяване с кислород в мускулите при тренировка бешепоказано в няколко проучвания при пациенти с ME/CFS [6,7]. В съответствие с това метаболитните променипри ME/CFS показват хипоксия и исхемия [8]. Няколко проучвания показват намаляване нацеребрален кръвен поток при ортостатично предизвикателство [9,10]. По този начин хипоперфузията, която евлошава се при усилие, може да причини умствена и скелетна мускулна умора, които са отличителни белезина ME/CFS [11]. За регулиране на кръвния поток, G-протеин-свързани рецептори (GPCR) за вазоактивнихормони, като катехоламини, ацетилхолин, ангиотензин II и ендотелин 1, играятважна роля [12]. Регулаторните автоантитела (AAB), насочени към GPCR, участват впатогенезата на много заболявания. Анти-GPCR AAB се свързват със съответните им рецептори,което може да доведе както до агонистични, така и до антагонистични ефекти [13]. Сред първите AAB доОписаните GPCR са тези към бета1 адренергичния рецептор (AdR) при дилатативна кардиомиопатияи към рецептора на ангиотензин II тип 1 (AT1-R), медиирайки вазоконстрикцията като рискови фактори заотхвърляне на бъбречен трансплантат [14,15]. AAB срещу GPCR е открит при много ревматичниболести също [16]. Този AAB принадлежи към регулаторна мрежа, която е нерегулирана вмного болести [17]. Има доказателства, че AdR и мускариновите ацетилхолинови рецептори (M-AChR)-AABиграят роля и в ME/CFS. Танака и др. бяха първите, които описаха повишен M-AChR-AAB вME/CFS и връзката им с мускулна слабост и неврокогнитивно увреждане [18]. В предишно проучване открихме повишени AAB срещу бета2-AdR, както и M3/M4-AChRв подгрупа пациенти с ME/CFS [19]. Bynke и др. успяха да проверят тези констатации чрезоткриване на повишени AAB срещу бета1/2-AdR и M3/M4-AChR в серума, но не и вцереброспинална течност на пациенти с ME/CFS [20]. Нивата на Beta1/2-AdR-AAB в кръвта корелиратсъс структурни промени в мозъка, свързани с модулацията на болката [21]. Наскоро открихмеагонистичен бета2-AdR-AAB при здрави контроли и при пациенти с ME/CFS, стимулирайкибета2-AdR върху имунни клетки и репортерни клетъчни линии. Важно е, че тази агонистична функция бешеатенюиран в ME/CFS [22]. При извършване на имуноадсорбция за отстраняване на AAB отциркулация, наблюдавахме краткотрайно клинично подобрение при повечето пациенти [23,24]. ЗаПациенти с ME/CFS, получаващи ритуксимаб, документирахме продължителен спад на предварителната терапияповишени нива на бета2-AdR-AAB при пациенти с клиничен отговор на лечение с ритуксимаб [19]. Целта на това проучване беше да се изследват корелациите между нивата на свързване на AAB къмвазорегулиращ GPCR и тежестта на клиничните симптоми при ME/CFS. Като отговори на AABчесто се активират от инфекции, разграничихме пациенти със и безинфекция, предизвикала поява на ME/CFS. В скорошно проучване открихме повишено разпространение наавтоимунно свързаните еднонуклеотидни варианти в CTLA4 и PTPN22 при ME/CFSсамо пациенти с начало на инфекциозно заболяване [25]. Катехоламини, свързващи се с алфа1/2-AdRвърху васкуларните гладкомускулни клетки предизвикват вазоконстрикция, докато медиират вазодилатациятачрез бета2-AdR. Свързване на ангиотензин II с AT1-R и ендотелин-1 с ендотелин-1 типА и В рецепторите (ETA/BR) активират важни вазоконстриктивни пътища. Тезилигандите се увеличават при физическо усилие [12]. Протеазно-активираните рецептори (PAR) играят aроля във вазорегулацията по време на възпаление. Показано е активиране на PAR-1 от тромбинпредизвикват съдова констрикция [26,27]. PAR-2, активиран от трипсин, може да медиира възпалениеклетъчна адхезия към ендотела [28]. Ацетилхолинът може да медиира вазодилатацията чрез M3-AChR зависимо освобождаване на азотен оксид [29]. Експресията на M4-AChR е описана вмозъчна микросъдова система [30]. Очаквахме, че ако вазорегулаторните нива на AAB играят aроля в патомеханизма на ME/CFS, те трябва да корелират с тежестта на keyсимптоми и увреждане.

2. Материали и методи

2.1. пациенти

Общо 116 пациенти са диагностицирани в амбулаторията с имунодефицитив Института по медицинска имунология към Харитé Universitätsmedizin Berlin междуОктомври 2016 г. и май 2017 г. Диагнозата ME/CFS при всички пациенти се основава на 2003 г.Канадски консенсусни критерии и изключване на други медицински или неврологични заболявания, коитоможе да причини умора чрез цялостна клинична и лабораторна оценка [1]. Всички пациентиполучи кардиопулмонална обработка преди насочване. При съмнение за ревматизъм,стомашно-чревни или неврологични заболявания, пациентите са били насочвани към специалисти предибеше поставена диагноза ME/CFS. Проучването е одобрено от Комитета по етика наЧаритé Universitätsmedizin Berlin (EA4/090/10) в съответствие с Декларацията от 1964 г.от Хелзинки и по-късните му изменения. Всички пациенти са дали информирано съгласие.

2.2. Определяне на нива на автоантитела и лабораторни кръвни данни

CellTrend GmbH, Luckenwalde, Германия, анализира серумните нива на AAB срещуалфа1-, алфа2-, бета1-, бета2-, бета3-AdR, M3- и M4-AChR ; AT1-R, ETA-R и ETB-R;PAR1/2. Проби от цяла кръв от всеки субект се оставят да се съсирят при стайна температураи след това се центрофугира при 2000× g за 15 минути в охладена центрофуга. Серумът бешепречистени и съхранявани при−35 ◦C. AAB бяха измерени в серумни проби с помощта на сандвичELISA комплект (CellTrend GmbH, Luckenwalde, Германия). Микротитърната 96-ямка полистиренплаките бяха покрити с рецепторни протеини с пълна дължина. За поддържане на конформационнитеепитопи на рецептора, към всеки буфер се добавя 1 mM калциев хлорид. Дубликатпроби от серумно разреждане 1:100 се инкубират при 4◦C за 2 часа. След измиване стъпки, чиниисе инкубират в продължение на 60 минути с 1:20, 000 разреждане на белязана с хрян пероксидаза козаантичовешки IgG, използвани за откриване. За да се получи стандартна крива, плочите бяхаинкубиран с тестов серум от пациент с GPCR AAB-положителен индекс. ELISA бяхавалидиран съгласно „Ръководство за индустрията: Валидиране на биоаналитичен метод“ на FDA.Концентрацията на серумните подкласове IgG, IgA, IgM, IgE и IgG се определя приЧаритé диагностична лаборатория Labor Berlin GmbH.

2.3. Въпросници за оценка на симптомите

Наличието и тежестта на симптомите при пациенти с ME/CFS са оценени въз основа наотносно критериите за канадски консенсус от 2003 г. [1,31]. Основни симптоми на умора, болки в мускулите,имунни симптоми (средно от 3-те симптома на болезнени лимфни възли, възпалено гърло и грипоподобенсимптоми) и когнитивно увреждане (средно от 3 симптома на нарушение на паметта,способност за концентрация и умствена умора) се оценяват между 1 (без симптоми) и10 (най-тежки симптоми) от пациентите. Симптомите на автономна дисфункция бяхаоценени чрез комбинирания резултат за автономни симптоми 31 (COMPASS 31) [32]. В допълнение,уврежданията бяха изследвани с помощта на резултата на Bell, фокусиран върху нивото на ограничение през деняфункциониране [33] и умора с помощта на рейтинга на Chalder Fatigue Score [34]. Ежедневни физически дейностиживота са оценени чрез Кратка форма на здравно проучване 36 (SF-36) [35]. 

2.4. Статистически анализ

Статистическите анализи на данни бяха извършени с помощта на IBM SPSS Statistics 22.0 (Ню Йорк, Ню Йорк,САЩ), GraphPad Prism 6.0 (Сан Диего, Калифорния, САЩ) и R 4.0 (R Foundation for StatisticalКомпютинг, Виена, Австрия.Всички даннибяха представени като медиана и интерквартилен диапазон (IQR), средно и стандартно отклонение(SD) или честота (n) и процент, където е подходящо. Количествени сравненияпараметрите между две групи бяха извършени с помощта на непараметричния Mann-Whitneyтест. Категориалните параметри бяха сравнени между подгрупите чрез прилагане на Pearson'sχ2-тест. Корелационният анализ беше извършен с помощта на непараметричния коефициент на Spearman.Поради множество тестове беше приложена корекция на Benjamini-Hochberg (BH), целящаконтролирайте процент на фалшиви открития от 5 процента. Коригиранp-стойности < 0.05 се считат за предоставящидоказателство за статистически значим резултат.

Щракнете тук, за да купите Cistanche

3. Резултати

3.1. Кохортни характеристики

Ние анализирахме група от 116 пациенти с ME/CFS за корелация на нивата на AAB стежестта на симптомите. Характеристиките на пациента са показани в таблица1. Средната възраст беше43 години(IQR: 31–50) и предишната средна продължителност на заболяването към момента на анализабеше четири години (IQR: 2–9). Общо 83 от 116-те пациенти (72 процента) са жени и 86 (74 процента)съобщават за началото на заболяването, предизвикано от инфекция. Пациенти с начало, предизвикано от инфекцияса били по-млади със средна разлика от десет години (p = 0.005) и докладвано по-кратко заболяванепродължителност (p = 0.022). Няма разлики в тежестта на симптомите, скалата на увреждания на Bell,SF-36 физическа функция и COMPASS 31-оценена автономна дисфункция (Таблица1) нито вНивата на AAB (Таблица2) между тези групи.

3.2. Корелация на AAB с общ IgG и възраст

Както вече отбелязахме в предишно проучване [19], повечето от нивата на AAB показват aположителна корелация с общите IgG и IgG-подкласове, предимно с IgG1 и IgG3(Таблица S1). Тъй като GPCR AAB принадлежат към регулаторна мрежа на AAB, тяхното ниво можезависят от общите нива на IgG. Освен това наблюдавахме обратна корелация с възрастта за някоиAAB (Таблица S1), както и между възрастта и общия IgG (цялата кохорта: r =−0.2526; p = 0.007, n = 114). Следователно, ние изчислихме съотношенията AAB/IgG, за да коригираме ефекта от възрастта (Таблица2 и таблица S2).

3.3. Корелация на AAB с резултатите от клиничните симптоми

Нивата на различни AAB корелират с тежестта на симптомите (Таблица S3).Освен това ниенаблюдава положителна корелация на алфа1/2-AdR, M4-AChR и ETA-R със заболяванетопродължителност (Таблица S2). Минимизиране на ефекта от възрастта чрез използване на съотношения AAB/IgG за корелацияанализите доведоха като цяло до по-високи корелационни оценки (r) и повече корелации достигнаха aниво на значимост (Таблица S4). Анализирахме кохортите пациенти според вида на заболяванетоначало. Тъй като 74 процента от пациентите съобщават за инфекциозно начало, тази група е много по-голяма отгрупата с неинфекциозно начало. Корелации на тежестта на симптомите със съотношенията AAB/IgGстратифицирани според началото на заболяването са показани като стойности на коефициента на корелация на Spearmanна фигура1, и корелациите на клиничните симптоми с абсолютните нива на AAB са показани вФигура S1. Най-много корелации са открити при пациенти с начало, предизвикано само от инфекция,докато по-малко и други корелации са открити при тези с начало, което не е предизвикано от инфекция(Таблици S3 и S4)

Фигура 1.Корелации между тежестта на симптомите и съотношенията AAB/IgG. Корелационен анализ на съотношенията AAB/IgG стежестта на (A) умора, мускулна болка, резултати от когнитивни и имунни симптоми, физическо функциониране (SF-36) и Bellоценка за инвалидност и (B) с поддомейни COMPASS 31. Коефициентите на корелация на Spearman (r) са показани за пациенти сначало, предизвикано от инфекция (черни ленти) и пациенти без начало, предизвикано от инфекция (сиви ленти). Значителни корелации предикъм BH-корекцията са маркирани със звездички (*p < 0.05,="" **="">p < 0.01),="" correlations="" that="" remained="" signifificant="" after="" bh-correction="">са обозначени с черно-бели ивици.При пациенти с начало, предизвикано от инфекция (n = 86), тежестта на умората корелира положителнос повечето съотношения AAB/IgG, включително тези срещу алфа1/2-AdR, бета1/2/3-AdR,M3/4-AChR, AT1-R, ETA-R и ETB-R, но не и PAR-1/2 (Фигура1A, черни ленти). музясната тежест на болката показва подобни корелации с умората, с изключение на бета3-AdR-AAB/IgG.

Физическата функция SF-36 показа модел на корелация, подобен наумораи мускулиболка със значителни отрицателни корелации (поради по-ниски резултати, показващи по-тежкаувреждане) с алфа2-AdR-, бета1/2-AdR- и M4-ACh-AAB/IgG. За разлика от тях,тежестта на когнитивните симптоми корелира положително с AT1-R- и ETA-R-AAB/IgGсамо. Тежестта на оценката за увреждане на Bell показва подобна отрицателна корелация сAT1-R- и ETA-R- и с alpha1/2-AdR-AAB/IgG. За имунния резултат само anбеше открита обратна корелация с PAR1. Резултатът за умора на Chalder не корелира сAAB/IgG (не е показано). Графиките на разсейване за значителни корелации са показани на фигури S2–S5.Нито една от тези значителни корелации на умора и мускулна болка не е открита впациенти без начало, предизвикано от инфекция (Фигура1A, сиви ленти). Корелации междуповечето резултати за физическата функция AAB/IgG и SF-36 бяха дори противоположни на тези на пациентитес начало, предизвикано от инфекция. Въпреки това оценките на корелацията (r) между AT1-RAAB/IgG и когнитивни симптоми и между AT1-R- и ETA-R-AAB/IgG иРезултатът по Bell е подобен на този на пациенти с начало, предизвикано от инфекция. Като тази подгрупабеше много по-малък (n = 30), това може да обясни липсата на значимост. Освен това открихме aзначителна отрицателна корелация на ETB-R-AAB/IgG и резултата на Bell само в тази група.Интересни модели на корелация също бяха открити за AAB/IgG и трите домейнана ортостатична, стомашно-чревна и зенично-моторна функция, оценени от COMPASS 31въпросник (Фигура1Б). При пациенти с начало, предизвикано от инфекция, стомашно-чревниятсимптомите корелират положително с алфа1/2-AdR- и зеничномоторните симптомисъс съотношения алфа1-, бета2/3-AdR- и M4-AChR-AAB/IgG. За разлика от това, неинфекциятагрупата със задействано начало показва силни корелации на алфа1/2-AdR- и бета1/2/3-AdRAAB/IgG с ортостатични симптоми и обратна корелация на PAR2-AAB/IgG ссекретомоторни симптоми, които липсват в другата подгрупа. Не сме наблюдавалинякоя от тези корелации с общия IgG (не е показано). Пациенти без отключена инфекцияначалото има значително по-голяма продължителност на заболяването преди тези анализи (Таблица1). Тъй като ниенаблюдавани по-високи съотношения алфа1/2-AdR, M4-AChR и ETA-R-AAB/IgG, които трябва да бъдат свързанис по-голяма продължителност на заболяването (Таблица S2), това може да окаже влияние върху корелациите наalpha1/2-AdR/IgG с ортостатични симптоми.При пациенти с начало, предизвикано от инфекция, повечето от съотношението AAB/IgG корелират сумора, мускулни болки и когнитивни симптоми, както и оценка на Bell с ETA-R-AAB/IgG,остава значителна след BH-корекция (Таблица3 и фигура1). Освен това сдружениетона зенично-моторни симптоми с M4-AChR-AAB/IgG остава значителен. След БХкорекция, нито една от корелациите, наблюдавани при пациенти без начало, предизвикано от инфекцияостана значително.

4. Обсъждане

Има все повече доказателства за ролята на съдовата дисфункция при ME/CFS, която показваасоциации с ключови симптоми [11]. В това проучване открихме няколко забележителни кореливазорегулативни AAB с клинични симптоми при ME/CFS. Зависимостта междуизмереният биологичен градиент на AAB и тежестта на симптомите предполагат причинна връзкапатомеханична връзка.Поради корелация на естествения регулаторен AAB с общия IgG [19] и зависимостта отНива на IgG според възрастта [36], съотношенията AAB/IgG бяха използвани в нашите анализи, за да се коригиравлиянието на възрастта. Използване на съотношенията AAB/IgG вместо разкрити абсолютни нива на AABпо-силни и повече корелации и ощеp-ценностите достигнаха ниво на значимост.В съответствие с нашата хипотеза за ролята на вазоактивния AAB в ME/CFS, ние открихме тованива на алфа1/2- и бета1/2/3-AdR-, M3/4-AChR- и AT1-R-, ETA/BR-AAB/IgGвсички съотношения значително корелират с тежестта на умората и, с изключение набета3-AdR-AAB/IgG, с мускулна болка. Същият AAB алфа2-AdR-, бета1/2-AdR- иM4-AChR- (но не AT1-R-, ETA/BR-) корелира с физическата функция на SF-36. Танакаet al. вече са описани нивата на M-AChR-AAB (без данни за подтипа M) вME/CFS да се свързва с мускулна слабост [18]. Bynke и др. не можа да покажесвързване на AAB срещу бета1/2-AdR и M3/M4-AChR с различни свързани със здраветовъпросници, но тяхната кохорта беше доста малка и ключови симптоми, включително умора,мускулна болка, когнитивни и автономни симптоми не са оценени отделно [20]. Ниеоткриха повишени AAB срещу бета2-AdR, както и M3 и M4-AChR, при пациенти с ME/CFSв предишното ни проучване [19]. 

В това проучване тежестта на симптомите не е определена.При пациенти със синдром на постурална тахикардия (POTS) едно проучване съобщава за повишени стойностинивата на AAB спрямо алфа1-AdR и M4-AChR, за да корелират с тежестта на симптомите [37], докато друг демонстрира повишени нива на AAB срещу бета1-AdR- и бета2-AdR къмкорелират с тежестта на симптомите [38]. Наблюдавахме различен модел за когнитивно увреждане, което беше свързанос ETA-R и AT1-R-AAB. Представляват интерес, ETA/BR-, AT1-R- и още alpha1/2-AdRAAB/IgG също корелира с тежестта на резултата за инвалидност на Bell, като обхваща усилието впредизвикани симптоми и работоспособност. ETA-R-, AT1-R- и alpha1/2-AdR всички активират силновазоконстрикторни пътища, стимулирани от физическо натоварване [12]. Подобрени нива на AT1-RAAB са добре установен рисков фактор за отхвърляне на бъбречен трансплант [14]. При хипертония,Описани са повишени AT1-R-AAB и алфа1-AdR-AAB, което предполага агонистиченефект върху техните рецептори [39]. Освен това, AT1-R-AAB се свързват със съдовото стареенеи артериална скованост [40,41]. Ролята на ETA-R-AAB е описана при автоимунно-свързанибелодробна артериална хипертония както при системен лупус еритематозус, така и при системна склеротезароза [42,43]. Нашата концепция за по-високи ETA-R и AT1-R AAB/IgG за корелация с когнитивнитеувреждане, дължащо се на вазоконстрикция, е в съответствие с последните проучвания на van Campen et al.,показващо както церебрална хипоперфузия, така и спад в когнитивната функция при ME/CFS приортостатичен стрес [9,10]. Намерени са интересни модели на корелация за съотношенията AAB/IgG и стомашно-чревния тракти зенично-моторната функция също и в групата с начало, предизвикано от инфекция. Гастроинъттестинални симптоми, свързани с алфа1/2-AdR-ABB/IgG. Тази констатация е в съответствие спроучване, показващо, че колоректалната подвижност се медиира от алфа1-AdR [44]. Пупиломоторсимптоми, свързани с алфа1-AdR-, бета2/3-AdR- и M4-AChR-ABB/IgG. При БХкорекция, връзката на зеничномоторните симптоми с M4-AChR-ABB/IgG останазначителен. Експресията на M4-AChR е описана в мозъчната микроваскуларна система иендотел на роговицата [30,45]. 

Забележително е, че не открихме значими корелации на AAB/IgG срещу AdR, AChR иAT1-R/ET-R с умора, мускулна болка и AdR- и AChR-ABB/IgG със SF-36 физикаcal функция при пациенти без началото на заболяването, предизвикано от инфекция. Въпреки това, подобниоценки за корелациите на съотношенията AAB/IgG спрямо AT1-R/ETA-R и alpha1/2-AdR със cogбяха открити nition и Bell Score, които не бяха значими, вероятно свързани с три пътипо-малък брой пациенти в тази група. Само при пациенти с неинфекциозно начало на заболяванетозначителни корелации на симптомите на ортостатична непоносимост с всички AdR-AAB/IgGбяха видени. Освен това, обратна корелация на PAR2-AAB/IgG със секретомоторни симптомие намерено. Показано е, че PAR2, активиран от трипсин, медиира слюнчената секреция [46]. GPCR AAB са различни от класическите автоантитела, които често се активират, допълвати може да посредничи при възпаление и разрушаване [47]. Няма цитотоксичен ефект или комплементдосега е докладвано активиране на GPCR AAB. GPCR AAB се свързва специфичнокъм съответните им рецептори, което може да има функционални последствия. И двете стимулиращиса описани агонистични и инхибиращи антагонистични ефекти [13,15,48]. Имайки в предвидагонистична функция, няколко асоциации на AAB със симптоми, които открихме, саправдоподобен. Повишените нива на агонистичен AT1-R/ETA-R AAB биха могли добре да обяснят връзкатас повече когнитивна дисфункция поради описания им ефект върху вазоконстрикциятапри няколко други заболявания [49]. По подобен начин може да се обясни повишената активност на PAR2по-малко секретомоторни симптоми и повишена активност на алфа1-AdR повече стомашно-чревнисимптоми [44]. Обратната корелация на имунния резултат с PAR1-AAB/IgG може да бъдеобяснява се с по-ниски нива на PAR1-AAB, което води до по-малко съдово свиване [26,27]. Theасоциации на повишени нива на алфа- и бета-AdR-AAB с по-тежка умораи мускулна болка при постинфекциозен ME/CFS може да сочи към свръхактивност на вазоконстриктораалфа-AdR-AAB или нарушена функция на вазодилатативния бета2-AdR-AAB. Преди това ниеоткриха нарушена агонистична функция на бета2-AdR-AAB в имунната и репортерната клетъчна линияанализи при пациенти с ME/CFS с по-високи нива на AAB [22]. AAB срещу бета1-AdR бяхадоказано, че уврежда както бета1-AdR-, така и бета3-AdR-медиираната вазорелаксация при плъхове [50]. Дисфункцията на AdR може конкретно да играе роля при усилие с повишено освобождаване наепинефрин и норепинефрин, което води до засилена вазоконстрикция и хипоперфузияс последваща умора и болки в мускулите. Вероятно са включени автоимунни механизмипостинфекциозен ME/CFS [25]. Тъй като всички тези AAB са естествени регулаторни, AAB дисфункцияможе да се развие по време на инфекция чрез активиране на страничен наблюдател и произтичаща от това соматична хипермутацияв AAB с по-силно или променено антигенно свързване към GPCR или при разпространение на епитоп.

спо отношение на AdR такъв сценарий би бил в съответствие с пациентите, които често съобщават, че анинфекция в стресова ситуация, вероятно съпътстваща активиране, предизвикано от стресна AdR, предизвика началото на заболяването.Най-несъответстващите модели, които наблюдавахме между подгрупите пациенти, сакорелации на всички AdR-AAB с ортостатична дисфункция при заболяване, което не е предизвикано от инфекцияно с умора, мускулни болки и SF-36 при постинфекциозен ME/CFS. Тъй като абсолютен AABнивата, както и съотношенията AAB/IgG, не се различават между двете подгрупи пациенти, товапредполага, че не само нивото на AAB, а по-скоро функцията на AAB или нарецепторите са различни в тези подгрупи пациенти. За да проследим тази хипотеза, впри пациенти с начало, което не е предизвикано от инфекция, функцията на отговорите на AdR-AAB може да не функционирада бъдат променени, но корелациите тук могат да отразяват адаптивен отговор. Например пациентитесъс заболявания на съединителната тъкан, като синдром на Ehlers Danlos (EDS), са по-високириск от развитие на ME/CFS. Тук васкулатурата е по-еластична, което води до по-ниска систолнаи диастолично кръвно налягане, тахикардия и често POTS. Пациентите имат автономнадисфункция със стомашно-чревни проблеми и нарушена функция на пикочния мехур. Таме доказателство, че пациентите с EDS имат повишена вазоконстрикция поради адренергичнисвръхотзивчивост [51]. Изкушаващо е да се спекулира, че при тези пациенти повишенитеAdR-AAB отразяват тази компенсаторна свръхактивност на адренергичната система. В редицас тази концепция, при пациенти с POTS, повишени нива на AAB срещу алфа1-AdR иM4-AChR корелира с тежестта на симптомите [37]. Ограничение на това проучване е, че няколко корелации вече не са очевидни след товакорекция за многократно тестване поради многото параметри, анализирани в нашето проучване.

Ниепредостави както коригираните, така и некоригираните корелации, за да се отговори на възможнаненужно отхвърляне на истински констатации при коригиране за многократно тестване [52]. Theинтерпретацията на констатациите в кохортата без начало, предизвикано от инфекция, се основава напо-малък брой пациенти и някои незначителни находки. Не увеличихмеброй пациенти с неинфекциозно предизвикано ME/CFS, защото не искахме да добавямегрупа пациенти, диагностицирани и анализирани на по-късен етап. В допълнение, началото на заболяването есамоотчитане и някои пациенти може да бъдат класифицирани погрешно. Тежестта на симптомите се съобщава самостоятелнои субективна мярка, водеща до широко разпространение. Като нарушения на съня саключов симптом и при ME/CFS и сънят е свързан с парасимпатиковата система, aрезултатът от съня трябва да бъде оценен в по-нататъшни проучвания. Освен това не анализирахме здравиконтролна кохорта в това проучване. В предишни и текущи непубликувани проучвания ние постоянноустановиха, че подгрупа от приблизително една трета от пациентите с ME/CFS има по-висок AABсрещу бета2-AdR, както и M3/M4-AChR в сравнение със здрави контроли [19,20]. Констатацииот нашето скорошно функционално проучване предполагат, че агонистичната функция на бета2-AdR AABможе да бъде отслабено и при пациенти с ME/CFS, въпреки нормалните нива на AAB [22]. В заключение, нашето проучване предоставя доказателства, че AAB и/или рецепторните пътища наAdR, AChR, както и AT1-R и ET-R играят роля в ME/CFS поради връзката стежестта на симптомите. Следователно е възможно различни симптоми на ME/CFS, включителноумора, мускулна болка, когнитивно увреждане и автономна дисрегулация, могат да бъдат медиираниили влошени от тези AAB. Необходими са допълнителни изследвания за дешифриране на механизмаи специфичност на свързване на тези GPCR-AAB и техния ефект върху съдовата функция вME/CFS и как това може да се преведе в терапевтични концепции. В случай на нефункционалноAAB, терапиите, насочени към AAB, като имуноадсорбция или ритуксимаб, бихаса оправдани и са показали, че са ефективни при подгрупа пациенти с ME/CFS (прегледанив [5]). По-нататъшно специфично насочване към дисфункционални или регулативни AAB може да бъде разработено катостратегии за лечение при ME/CFS.

5. Патенти

CellTrend GmbH притежава патент за използването на бета-адренергични рецепторни антитела вдиагнозата CFS.

Допълнителни материали:Таблица S1: Параклинични корелации на AAB, Таблица S2: Съотношение AAB/IgG параклинични корелации, Таблица S3: AAB клинични корелации на AdR-, AChR- и други AAB; началостратифицирана, Таблица S4: Клинични корелации на съотношението AdR-, AChR- и други AAB/IgG; начало-стратифицирано,Фигура S1: Корелации между тежестта на симптомите и AAB, Фигура S2: Корелации с уморатапри пациенти с начало, предизвикано от инфекция, Фигура S3: Корелации с мускулна болка, когнитивна иимунни симптоми при пациенти с начало, предизвикано от инфекция, Фигура S4: Корелации с оценка на Bell,физическо функциониране и симптоми на автономна дисфункция при пациенти с отключена инфекцияначало, Фигура S5: Корелации при пациенти без начало, предизвикано от инфекция.

Авторски принос:Концептуализация, CS методология, MS, SL, HF и HH; валидиране,MS, HF, SB и FS; формален анализ, MS; разследване, С.Б., Ц.К., П.Г. и Х.Х.; ресурси, CKи PG; обработка на данни, MS, SL и TL; писане—подготовка на оригинална чернова, MS, HF и CS;писане—преглед и редактиране, SL, FS, SB, AP, CK, PG, TL, GR и HH; визуализация, HFи MS; надзор, CS; администриране на проекти, CS; придобиване на финансиране, CS Всички автори иматпрочете и се съгласи с публикуваната версия на ръкописа.

Финансиране:Това изследване е финансирано от фондация Weidenhammer-Zöbele, MS получи aстипендия от Фондация „Изгубени гласове“.

Изявление на институционалния съвет за преглед:Проучването е проведено съгласно насоките наДекларация от Хелзинки и одобрена от Комитета по етика на Charité Университетска медицина в Берлин(код на протокола EA4/090/10, дата на одобрение 11 декември 2012 г.).

Изявление за информирано съгласие:Беше получено информирано съгласие от всички субекти, участващи вученето.

Декларация за наличност на данни:Данните, представени в това проучване, са достъпни при разумна заявкаот съответния автор.

Благодарности:Подкрепата на болничните грижи и управлението на данни от Silvia Thiel е призната. Освен това благодарим на всички пациенти, които с доверие дариха своите кръвни проби и се съгласихаучастват в този изследователски проект.

Конфликти на интереси:HH, управляващ директор на CellTrend GmbH, притежава патент за използването на бетаадренергични рецепторни антитела при диагностицирането на CFS. Всички останали автори декларират липса на конфликт на интереси.Финансиращите нямат роля в дизайна на проучването; в събирането, анализите или тълкуването наданни; в написването на ръкописа или в решението за публикуване на резултатите.