Оценка на характеристиките на различни състави на крем против стареене от каротеноиден екстракт от щам на бактериален симбионт Virgibacillus Salarius

Ключови думи:сметана;цистанче;антиоксиданти; слънцезащитен крем; бактериален симбионт

Щракнете тук, за да научите повече за Cistanche On Anti-Aging

1. Въведение

Преждевременно стареенее дегенеративно заболяване, характеризиращо се със суха, набръчкана, грапава кожаи черни петна [1]. Два фактора задействат преждевременното стареене, а именно вътрешните факторикато стрес, издръжливост, хормонални промени и здраве, както и външни фактори, включителноултравиолетовите лъчи и свободните радикали. Свободните радикали са кислородсъдържащи молекули, чиитоатомното подреждане е нестабилно и следователно претърпява верижни реакции, които могат да възникнат втяло и водят до продължителни увреждания [2]. 

Свободните радикали са много реактивни и опасни вещества, които причиняват увреждане натъкани на тялото, което може да доведе до развитие на различни заболявания в напреднала възраст [3]. Свободните радикали обаче са възможни за преодоляване чрез използване на антиоксиданти [4] които спиратверижни реакции, предизвикани от свободните радикали чрез даряване на електрони на нестабилните молекули.Примери за антиоксидантни съединения включват цистан, витамин С и витамин Е [5].

цистанче са съединения, за които е доказано, че са потенциални антиоксиданти [6–10], както съдържатдълговерижно изопреново съединение с конюгирана двойна връзка [5,7,11]. Конюгираниятдвойната връзка премахва синглетния кислород и деактивира други свободни радикали, възникващи презпроцесът на пренос на електрони [12,13]. Впоследствие съединенията, които са спрегнати, се удвояватвръзките могат да бъдат намерени в сухоземни и морски организми. Съединения от морскиорганизмите имат уникални характеристики и няколко открития за нови биоактивни съединенияза антибиотици, противоракови, фармацевтични продукти, козметика, ензими и пигментиса получени от много коралови екосистеми, особено меки корали.

Масовото използване на меки корали не трябва да се използва, тъй като ще причини щетиекосистемата. Бактериалният симбионт, свързан с мекия корал, може да се превърне в силаалтернатива, която произвежда цистанхе като източник на антиоксиданти [14,15]. Козметичнипри употреба са необходими формули, които могат да се прилагат безпроблемно и удобнокаротеноидни съединения. Следователно предпочитаната козметична формула е във форматаот крема. Кремът е избраният полутвърд препарат, който лесно се разнася равномерно върху кожата,не е лепкав и се почиства лесно, така че е удобен за използване от потребителите. Използването насимбионтните бактерии като източник на козметични суровини е последният пробив, койтотрябва да се развие.

2.1. Материали и инструменти

Бактериалният симбионтV. заплатищам 19.PP.Sc1.6, изолиран отСинуларияsp. произходродом от остров Панджанг, Джепара, Централна Ява, Индонезия; конкретната точка е на координатитеот „6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Необходимите материали включват метанол (аналитиченклас), закупен от Merck (Дармщат, Германия);

2,2-дифенил-1-пикрилхидразил

(DPPH) от Sigma-Aldrich Co. (Сейнт Луис, Мисури, САЩ). Други съставки, използвани във формулите на кремакато стеаринова киселина, глицерин, натриев тетраборат, триетаноламин (TEA), ланолин,слънчогледово масло, пчелен восък, цетилов алкохол, span 80, глицерол моностеарат и Tween 80 бяхазакупен от Merck (Дармщат, Германия). Използваните инструменти бяха UV-visСпектрофотометър Shimadzu 1240 (Киото, Япония), първичен вискозиметър Brookfield LVDV-I(Торонто, Онтарио, Канада), pH метър цифров USB Phs 3c 3d Rohs, центрофуга IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, САЩ) и орбитален шейкър Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Корея).

2.2. Изолиране на бактериален симбионт на Sinularia sp.

TheСилунарияsp. тъканите бяха поставени в стерилни петриеви панички, които бяха частично напълнени сстерилизирана морска вода. Повърхностите на меките коралови тъкани бяха отрязани и само вътрешносттаот пробата се използва за изолиране на микроби. За бактериална изолация серия от разрежданиябеше проведено за всички проби. От всяко петриево блюдо се събират 10 mL от пробатастерилна пипета и се поставя в колба, съдържаща 90 mL стерилизирана морска вода, за да се получи10−1 разреждане. От 10−1 разреждане, 1 mL се премества в епруветка, съдържаща 9 mL стериленморска вода, за да получите 10−2 разреждане. Този процес на разреждане се повтаря до 10−5 разрежданебеше получено. Проба (1 mL) от всяка серия от разреждания беше събрана и поставена в стерилен съдпетриево блюдо, съдържащо агарна среда Zobell 2216E (Himedia, Мумбай, Индия) за бактериалнаизолация. След това петриевите блюда се инкубират при 30°С◦C за 2 дни. Бактерия с жълт цвятколониите, които растат на повърхността на агаровата среда, се разделят чрез метод на щрихи, за даполучаване на чисти бактериални щамове.

2.3. Култура на бактериални симбионти

БактериитеV. salariusщам 19.PP.Sc1.6 [16] се инокулира чрез прехвърляне на 1 mL отизолата в 2 L стерилен Zobell Marine Broth 2216 (Himedia, Мумбай, Индия). Бешеслед това се поставя върху шейкъра при 100 rpm при 27◦C, докато цветът на носителя стане жълт (±7 дни).Впоследствие симбиотичните бактерии, които са произвели цистанхе, са изолирани ицентрофугирани за 15 минути при 6000 rpm, след което пелетите се отделят и след това се филтруватизползвайки филтърна хартия Whatman No 1 (Maidstone, UK).

2.4. Екстракция на каротеноид

Екстракция на цистанче чрез метода на бърза мацерация, извършен на тъмностая. Беше закупен метанол (аналитичен клас) от Merck (Дармщат, Германия).добавя се към пелетната култура и след това се центрофугира за 10 min при 6000 rpm. Впоследствие аполучава се филтрат, съдържащ цистанхи и пелети под формата на бактериална маса,филтрува се с филтърна хартия Wahtman № 1, изпарява се и се суши с помощта на N газ [14,15].

2.5. Формули на крем

Във формулата са използвани три състава с различни видове крем, а именно срещу,ой, и горе [16–18]. Използваната формула е както е показано в табл1.

Маса 1.Кремообразни формули на екстракт от каротеноидV. заплатищам 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Формула 1: Крем срещу

Разтопихме стеариновата киселина и глицерина в купа. Na тетраборат и TEA бяхаразтворен в малко вода, след което се поставя в разтвор на стеаринова киселина и глицерин. След това разбъркахмеи се хомогенизира, и се добавя малко вода, така че резултатите да са добри. Последната стъпка бешеза да добавите каротеноидния екстракт и разбъркайте, докато се разпредели равномерно.2.5.2. Формула 2: Крем влПърво, глицерол моностеаратът и цетиловият алкохол бяха разтопени в чаша 1. Слънчоглед иTween 80 бяха смесени в чаша 2. След това поставихме сместа в чаша 2 в чаша 1. Товасе разбърква до хомогенност с малко гореща вода. Накрая добавихме каротеноидаекстракт и го разбъркайте до хомогенизиране.

2.5.3. Формула 3: Крем wo

2.6. Оценка на крема

Бяха оценени характеристиките на три състава на крема; първоначалната оценкабеше извършен органолептичен тест. При органолептичните тестове наблюденията включват промени вцвят, мирис (гранясване) и усещане. В органолептичния тест като респонденти са използвани 25 души,състоящ се от 15 обучени и 10 необучени човека. Следният тест беше хомогенност,което се постига чрез нанасяне на крема върху стъклени чинии и спазване на равномерността нацвета, независимо дали е равен или не. Впоследствие, при рН теста, кремът се отлагав стъклена чаша и след това измерването на pH се извършва с помощта на pH метър, който имапреди това е бил калибриран със стандарт Dappar (pH 4 и pH 7). Силата на разпръскванетестът беше извършен върху прозрачно стъкло, поставено върху милиметрова хартия и беше 0.5 g крем

поставени върху стъклото и след това покрити с друго прозрачно стъкло и оставени за±5 s довземете диаметъра на образуваната площ. След това, различни тегла от 50, 100, 150, 200, 250, 300,350, 400 и 450 g бяха поставени върху прозрачното стъкло и диаметърът на образуваната площбе наблюдаван. В спецификациите е посочено, че кремът трябва да се разнася лесно и равномерно.

Междувременно, тестът за вискозитет на крема беше определен с помощта на Brookfield LVDV-I PrimeВискозиметър Беше извършен тест за адхезия със стъклен предмет, маркиран като4 × 2,5 см, след това толкова, колкото 0.25 g крем се поставят в средата на зоната и се покриват сдруги стъклени предмети. Затова се поставя товар от 1 kg за 5 минути, след това двата стъклени предметакоито бяха прикрепени, бяха монтирани на тестовото оборудване, на което беше даден товар от 80ж. След това беше отбелязано времето, необходимо за разделяне на двата стъклени предмета. Наблюдения завсички тестове се провеждат седмично в продължение на 5 седмици.

2.7. Измерване на антиоксидантната активност

Кремове, разтворени в метанол, се приготвят в серия от концентрации. Следователно, aобщо 3 mL от пробата се разреждат с 1 mL 0.1 mM DPPH разтвор и се оставятда престои 30 мин. При утаяване разтворът се хомогенизира и се абсорбираизмерено с помощта на спектрофотометър при дължина на вълната 517 nm. Абсорбцията набеше прочетен и контролен разтвор, тоест DPPH без тестов разтвор. Освен това,количеството антиоксидантна активност се измерва с помощта на следното уравнение [19]: 

2.8. Измерване на слънцезащитен фактор (SPF)

Извършено е измерване на стойността на слънцезащитния фактор (SPF).инвитро. SPFбеше проведен тест за определяне на слънцезащитната активност на крема с помощта на UV-Visспектрофотометър. Всеки крем с тегло 0.1 g се разтваря в 100 mL метанол вмерителна колба и се филтрува с помощта на ватман № 1. Слагат се общо 3 mL от разтворав кювета за измерване на абсорбцията му с помощта на UV-Vis спектрофотометър. Впоследствие,определянето на SPF стойността с помощта на UV-Vis спектрофотометър е известно отхарактеристики на поемане на крема при дължини на вълните от 290 до 320 nm с интервали от 5 nm.Изчисляването на стойността на SPF използва следното уравнение [20,21]: 

abs=Абсорбция на пробата.

Питай за още:

Имейл:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp плюс 86 15292862950