Ефект на ехинакозид върху плъхове с церебрална исхемия

Резюме: Цел Да се ​​изследва ефектът отЕхинозид(ECH) върху моноаминови невротрансмитери в извънклетъчната течност на стриатума при плъхове с фокална церебрална исхемия и за изследване на възможния механизъм на невропротективния ефект на ECH върху мозъка. Методи SD плъхове бяха разделени на случаен принцип в контролна група, моделна група, ECH групи с висока и ниска доза и група с лигустразин (CXQ). Плъховете във всяка група получават съответните лекарства или физиологичен разтвор интраперитонеално веднъж на ден в продължение на 7 дни. На третия ден от приложението, ръкавът на сондата беше вграден в стриатума на мозъка. Един час след последното приложение беше направен модел на плъх на фокална церебрална исхемия (MCAO). След изработването на модела веднага се извършва микродиализа. Диализатът се инжектира във високоефективна течна хроматография-електрохимичен детектор (HPLC-ECD), за да се определи съдържанието на норепинефрин (NE), допамин (DA), 5-хидрокситриптамин (5-HT), 3 ,4-дихидроксифенилоцетна киселина (DOPAC), хомованилова киселина (HVA), 5-хидрокси индол оцетна киселина (HIAA) в извънклетъчната течност на стриатума на всяка група. Резултати В сравнение с контролната група нивата на NE, DA и 5-HT в моделната група се повишават и киселинните метаболити DOPAC, HVA и HIAA също се повишават. В сравнение с моделната група, съдържанието на шест вещества в групите с високи и ниски дози на ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) и групите CXQ намалява. Заключение Невропротективният ефект на ECH може да бъде свързан с повишаване на моноаминовите невротрансмитери след церебрална исхемия.

Цистанче на прах

Ключови думи: Ехинозид; Церебрална исхемия; стриатум; HPLC-ECD; Моноаминови невротрансмитери и метаболити

Ехинацеозид(ECH) е ефективен компонент на фенилетаноидни гликозиди, изолиран и пречистен отCistanche deserticola, специален завод в Синдзян. Проучванията показват, че ECH има невропротективни ефекти като антиоксидант [1-2], защита на нервите [3-4], забавяне на стареенето [5] и подобряване на ученето и паметта [6-8]. Резултатите от Chen Hong et al. потвърди, че ECH има защитен ефект върху DA невроните при болестта на Паркинсон [9]. Моноаминовите невротрансмитери са вид важни вещества, които регулират физиологичните дейности на тялото.Съдържанието в тъканта може да отразява процесите на биосинтеза на невротрансмитери, освобождаване, усвояване и инактивиране [10-11]. Понастоящем няма подходящ доклад за ефекта на ECH върху моноаминови предаватели в мозъка на плъхове с церебрална исхемия. В това проучване ефектът на ECH върху съдържанието на моноаминови невротрансмитери в извънклетъчната течност на стриатума на плъхове с церебрална исхемия е изследван чрез използване на технология за мозъчна микродиализа и възможният механизъм на ECH върху мозъчната невропротекция е предварително проучен.

Екстракт от Cistanche tubulosa на прах

1.Материал

1.1 Опитни животни

SD плъхове, ♂, телесна маса 250~300 g (закупени от Xinjiang Experimental Animal Center, номер на лиценз: 2009-0053).

1.2 Лекарства и реактиви

ECH е дарение от професор Tu Pengfei, Факултет по фармация, Пекинския университет (чистота над 95%); Норепинефрин (NE), допамин (DA), 5-хидрокситриптамин (5-HT), 3,4-дихидроксифенилоцетна киселина (DOPAC), хомованилова киселина (HVA)

5-хидрокси индол оцетна киселина (HIAA) е Сигма; Тетраметилпиразин хидрохлорид за инжектиране (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Цинков фосфатен цимент (продукт на Shanghai Medical Instruments Co., Ltd., съставен от течност и прах, смесени с времето); Натриев 1-алкил сулфат (DIKMA); Лимонена киселина хидрат (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); Тринатриев цитрат (Acros); Динатриев етилендиамин тетраоцетна киселина (JTTakerChemicalco); Метанол (DIKMA); Ацетонитрил (DIKMA); Перфузионната течност за церебрална микродиализа е инжектиране на съединение с натриев хлорид (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Цялата използвана вода е вода за повторна обработка.

1.3 Инструмент

американски стереотаксичен апарат за мозъка на плъх BAS4100; CMA/12 сонда и втулка на сондата; CMA/120 устройство за животни в съзнание; микро помпа CMA/402; Автоматичен колектор за нискотемпературни проби CMA/150. Инфузионна помпа Esa 5600A; Инфузионна помпа Esa 5600A; Esa 542 устройство за автоматично инжектиране на проби; електрохимичен детектор CoulArray на Esa; Работен електрод от стъклен въглен и референтен електрод Ag/AgCl; C18 колона (DIKMA, ODS5 μm, 150 mm × 4,6 mm); Работна станция за хроматография CoulArraywin (компания Esa); Вихров миксер (тип QL-861); Настолен тестер за киселинност (HANNA-211); Настолна високоскоростна центрофуга (тип XYJ-2).

2.Метод

Цистanche добавка близо до мен—Imдоказват паметта

Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Improve Memory

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 Групиране и администриране на животните

Тридесет плъха бяха разделени на случаен принцип в пет групи: ① Контролна група: 1 ml · kg-1 · d-1 нормален физиологичен разтвор; ② Моделна група: нормален физиологичен разтвор 1 ml · kg-1 · d-1; ③ Модел+лигустразин (CXQ) 30 mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Модел+ECH групи с висока и ниска доза (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Всички животни във всяка група бяха инжектирани интраперитонеално в продължение на 7 дни.

2.2 Метод на моделиране и микродиализа

Всеки плъх се заравя с канюла на третия ден от прилагането: плъховете се анестезират с 10% хлоралхидрат (3,5 ml · kg-1), фиксиран върху мозъчния стереотаксичен апарат BAS4100 и катетърът на сондата беше имплантиран в левия стриатум (координати AP: +0.2 mm; ML: - 3.0 mm; DV: - 3.5 mm) относно „Стереотактичната карта на мозъка на плъх“ на Джордж Паксинос. След последното приложение, плъховете бяха анестезирани 1 час по-късно и на плъховете беше направен модел на фокална церебрална исхемия (MCAO модел), като се използва подобреният метод на Yang Zanzhang [12] за зашиване на Longa. Рибната линия в контролната група беше поставена само на 10 mm, а останалите стъпки бяха същите като тези в операционната група. След моделиране, вкарайте сондата за микродиализа в състояние на съзнание и свободно движение и използвайте разтвор на Рингер за μ Церебралният микродиализат беше събран при 4 градуса и епруветка с диализат беше събрана на 20 минути. След като всяка епруветка с диализат бъде събрана, тя незабавно се съхранява в хладилник с - 20 градуса и се прехвърля в хладилник с - 70 градуса след диализата. Степента на възстановяване на сондата беше измерена преди употреба, която беше използвана за преобразуване на концентрацията на моноаминови невротрансмитери в диализата.

какво прави cistanche tubulosa—Подобрява паметта

2.3 HPLC-ECD анализ

Конфигурация на подвижната фаза: подвижната фаза съдържа 829 ml 0.15 mol · L-1 лимонена киселина-натриев цитратен буфер на литър; 0.1mol · L-1 динатриев EDTA 1ml; Метанол 150ml; Натриев {{10}}алкилсулфат 0.283g. Задайте скоростта на потока на подвижната фаза като 0.7ml · min-1 и температурата на колонната пещ като 28 градуса. Работното напрежение на електрохимичния детектор е 200mV, 400mV и 600mV, съответно с 2, 3 и 4 канала; Усилването е 2nA. Инжекционният обем е 25 μl. Стандартната крива е начертана със смесен стандартен разтвор с градиент 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1.

2.4 Статистическа обработка

Експерименталните данни се изразяват в x поле ± s, а данните от повторните измервания се анализират с помощта на статистически софтуер SPSS13.{1}}.

Фиг. 1-6 изобразява промените в нивата на NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA и 5-HT в извънклетъчната течност на стриатума на плъх. От фигурата може да се види, че след церебрална исхемия моноаминовите невротрансмитери в екстрацелуларната течност на стриатума имат метаболитно разстройство и съдържанието на всеки невротрансмитер се е увеличило. В рамките на определен диапазон увеличението е по-очевидно с удължаването на времето на исхемия. При 90 минути исхемия, концентрацията на DA и NE в извънклетъчната течност на стриатума е повече от три пъти по-висока от нивото на контролната група. Нивата на NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA и 5-HT в контролната група намаляват от високи до ниски, което може да е свързано с временната исхемия на левия мозък след лигиране на лявата обща каротидна артерия и щетите, причинени от поставянето на сондата. От кривата на промяна ECH и CXQ могат да намалят пиковата концентрация на DA, DOPAC, HIAA, HVA и 5-HT след церебрална исхемия, а CXQ и ECH с високи дози са по-очевидни. Изместването надолу на кривата на времето на всеки невротрансмитер показва, че ECH може да инхибира увеличаването на невротрансмитерите и техните метаболити в мозъка на плъхове с церебрална исхемия.

                                                                           Фигура 2 Ефект на ехинозид върху извънклетъчното ниво на DA в стриатума на плъхове

Фигура 3 Ефект на ехинозид върху извънклетъчното ниво на DOPAC в стриатума на плъхове Фигура 4 Ефект на ехинозида върху извънклетъчното ниво на HIVV в стриатума на плъхове

Фигура 5 Ефект на ехинозид върху извънклетъчното ниво на HVA в стриатум на плъхове Фигура 6 Ефект на ехинозид върху извънклетъчното ниво на 5-HT инстриатум на плъхове

4.Дискусия

Супермен цистанчебилка—Импроимам памет

【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Механизмът на увреждане на мозъка, причинено от церебрална исхемия, е сложен. В случай на церебрална исхемия моноаминовите невротрансмитери в мозъка са нарушени и съдържанието на NE, DA и 5-HT е значително намалено. Колкото по-тежка е церебралната исхемия, толкова по-ниско е съдържанието на NE, DA и 5-HT в мозъчната тъкан [13]. Методът на интрацеребралната микродиализа доказа, че съдържанието на моноаминови невротрансмитери се повишава в извънклетъчната течност по време на церебрална исхемия, продължава през целия исхемичен период и допълнително се увеличава с удължаване на исхемичното време. Експерименталните резултати са в съответствие с доклада [14].Ехинозиде ефективен компонент на фенилетаноидни гликозиди, изолирани и пречистени от Cistanche deserticola, специално растение в Синдзян. Има много невропротективни ефекти като анти-стареене, подобряване на ученето и паметта и анти-невронна апоптоза. В това проучване беше използвана домашна усъвършенствана мозъчна микродиализа, комбинирана с HPLC-ECD технология за откриване, за предварително изследване на ефекта наЕхинозидвърху моноаминови невротрансмитери и техните метаболити в извънклетъчната течност на стриатума на експериментални плъхове с церебрална исхемия. Резултатите показват, че ECH може да намали увеличаването на моноаминовите невротрансмитери в извънклетъчната течност на стриатума, причинено от церебрална исхемия, и има по-добър ефект върху подобряването на увреждането на церебралната исхемична тъкан.