Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 98-ма болница на Китайската народна освободителна армия, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Fuyang Traditional Chinese Medicine Orthopedic Hospital, Hangzhou City, Zhejiang Province, Hangzhou 311400, Zhejiang, Китай

Резюме

Цел: Да се ​​наблюдава ефекта отЦистанчеводен екстрактвърху заздравяването наостеопоротиченфрактури при плъхове и да изследва механизма им. Методи: SPF-клас SD женски плъхове бяха разделени на случаен принцип в контролна група, моделна група и група за лечение и моделирани съгласно свързани методи. 24 часа след моделирането на фрактурата, на контролната група и моделната група беше дадена сонда с нормален физиологичен разтвор, а на групата за лечение беше поставена сонда сЦистанчеводен екстракт веднъж на ден. След 2 седмици и 6 седмици интервенция беше взета кръв от коремната аорта за откриване на интерлевкини. Нива на TP (IL-1 B) и трансформиращ растежен фактор-B l (TGF-8 1), съберете проби от фрактури едновременно, направете микро-CT сканиране след фиксация, измерете R0 I костна обемна фракция на калус (BV/TV) и други свързани параметри След декалцификация, дехидратация и вграждане, той беше направен във восъчни блокове за употреба. Резултати: 6 седмици след установяването на модела на остеопорозата, костната минерална плътност на плъховете в моделната група и групата на лечение е по-ниска от тази на контролната група (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Цистанчеможе да насърчи заздравяването наостеопоротиченфрактури и неговият механизъм може да е свързан с инхибирането му наостеопоротиченсчупвания. След плъши серум IL-1 B и насърчаване на секрецията на TGF-8 1, което може да подобри остеопорозата и да насърчи зарастването на фрактури.

Ключови думи: остеопоротична фрактура, Cistanche, зарастване на фрактура, плъх

Остеопорозата е заболяване, при което се намалява костната плътност, разрушава се фината структура на костната тъкан и се увеличава чупливостта на костите. Пациентите могат да причинят фрактури при лека външна сила в ежедневието. Това е често срещано клинично заболяване и често срещано заболяване. Освен това, този тип фрактури са предимно пациенти в напреднала възраст, често свързани с други заболявания, и повечето от фрактурите са натрошени, с лоша стабилност и понякога се получава бавно или несрастване на фрактурите, и има висок процент на увреждане и леталност. В момента лечението му е основно чрез хирургия, мануално възстановяване и антиостеопорозно лечение. Липсват лекарства за таргетно лечение на пациенти состеопоротиченсчупвания. Традиционната китайска медицина има дълга история за лечение на остеопороза и има положителен ефект. Доказано е, че много традиционни китайски лекарства подобряват костите. Бедността също може да насърчи зарастването на фрактури. Rongrong обикновено се използва като представително лекарство за подхранване на бъбречния ян и има ефект на подхранване на черния дроб и бъбреците. Традиционната китайска медицина вярва, че бъбрекът управлява костта и лечението на фрактури също е неотделимо от бъбрека и есенцията. Съвременната фармакология е установила, че пепелта от месо има и известен естрогенен ефект. Това проучване възнамерява да използва измерване на костната плътност, Micro-CT и серумен интерлевкин-13 (IL-10), наблюдение на нивото на трансформиращ растежен фактор-P KTGF-P 1) и воден екстракт от паста за месна херния върху изцеление наостеопоротиченфрактури при плъхове

Цистанче

1 Материали и методи

1.1 Експериментални животни и реагентно оборудване: 52 SPF женски SD плъха с тегло 210~250g са отгледани в Центъра за експерименти с животни на Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine. Комплексен йод, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., партиден номер 20160720; Penicillin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., партиден номер F3117217; IL-18 комплект (партиден номер: 20160715), TGF-8 1 комплект (партиден номер: 20160722); Двуенергиен рентгенов скенер за костна плътност, 0STE0C0RE2; Микро-КТ, Skyscan1176O

1.2 Извличане наЦистанчеводен извлек: накиснете земятацистанче(Фармацевтична фабрика на Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine) 10 пъти ултрачиста вода за 0,5 часа, отвара от тиган за 1,5 часа, повторете екстракцията 2 пъти и смесената медицинска течност с ротационен параход Концентрирайте до концентрация от 1,5 g /ml и съхранявайте в хладилник на 4 градуса за последваща употреба.

1.3 Подготовка за моделиране: Точките са както следва.

1.3. 1 Модел на остеопороза: Плъховете се отглеждат адаптивно в продължение на 1 седмица преди моделирането и се разделят на случаен принцип на контролна група, моделна група и група за лечение, съответно с 16 плъха, 18 плъха и 18 плъха, като всяка група се основава на времевата точка на 2 седмици и 6 седмици. Всеки беше разделен на две групи. И групата на лечение, и групата на модела бяха анестезирани с 1% пентобарбитал натрий (0.4ml/100g), кожата беше анестезирана, дезинфекцирана, драпирана и кожата беше изрязана. Двустранните яйчници на плъха бяха отстранени. Контролната група имаше само разрез. Недей

Отстраняване на яйчниците

1.3. 2 Модел на фрактурата: 6 седмици след изготвянето на модела на остеопорозата ще бъде изготвен моделът на фрактурата. След като плъховете във всяка група са анестезирани, се измерва костната минерална плътност на средната бедрена кост. , Разрез, направете модел на напречна фрактура на средната бедрена кост, фиксирайте го с тел Киршнер 1 mm, стерилизирайте и зашийте кожата на разреза

1.4 Лекарствена намеса: Рентгеново откриване на бедрената кост беше извършено след моделиране, плъхове, които не успяха да приготвят модела, бяха елиминирани и 80 000 единици пеницилин бяха инжектирани интрамускулно след моделиране, за да се предотврати инфекция. 24 часа след операцията, на лекуваната група е даден воден екстракт от паста от месна херния (концентрация 1,5 g/ml, lg/kg, веднъж дневно). Контролната група и моделната група получават същия обем нормален физиологичен разтвор.

1.5 Вземане на проби: Проби от плъхове бяха събрани 2 и 6 седмици след интервенцията. След анестезия с 1% пентобарбитал натрий, 5-10ml кръв се събира от коремната аорта за приготвяне на серум и се съхранява в -20B хладилник. резервен. След това плъховете бяха умъртвени и пробите от бедрената фрактура бяха събрани и поставени в 10 процента неутрален формалдехид за 72 часа.

1.6 Индикатори за тестване: Точките са както следва.

1.6. 1 Костна минерална плътност: Всички плъхове след модела на остеопороза бяха анестезирани преди модела на фрактурата и след това беше измерена костната минерална плътност на средната бедрена кост. Трите групи плъхове получиха проби след 2 и 6 седмици интервенция, като пробите бяха фиксирани за 72 часа и след това отново беше измерена костната плътност.

1.6. 2 Микро-КТ: Микро-КТ сканиране се извършва, след като пробата е фиксирана за 72 часа, с 200 снимки над и под края на фрактурата като област на интерес (R01), ъгъл на сканиране 360 градуса, ток 555uA, напрежение 42kV, филтър Al 0.2mm, резолюция 8.73um, след завършване на реконструкцията на триизмерното изображение и анализ на калуса. Параметрите за откриване са както следва: костна обемна фракция BV/TV, костен трабекуларен модел фактор (Tb. Pf); индекс на структурен модел (SMI) и т.н."

1.6.3 Определяне на серумен IL-1P и TGF-P1: Размразете серума на плъх от хладилника при -20 градуса и извършете откриването стъпка по стъпка в съответствие с IL-13 и инструкции за комплект TGF" 1.

1.7 Статистически методи: използвайте софтуер за статистически анализ SPSS.19 за обработка. Експерименталните данни са изразени като средно ± стандартно отклонение (G±s) и костната минерална плътност на трите групи плъхове. Параметрите на микро-CT JL-1 P JGF- P 1 нивата се осредняват чрез еднопосочен анализ на дисперсията и се използват сравнения по двойки между групите Инспекция, нивото на инспекция е P<0.>

2 резултата

2.1 Костна плътност на трите групи: вижте Таблица 1.

Таблица 1 Резултати от костната минерална плътност в средната бедрена кост на всяка група плъхове (x±s, g/cm²)

Забележка: В сравнение с моделната група, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Микро-КТ двуизмерно напречно сечение: сагиталното двуизмерно напречно сечение избира снимките на надлъжната ос на бедрената кост във всяка времева точка във всяка група (вижте Фигура 1), а хоризонталното двуизмерно напречно секция избира 100-та снимка под линията на фрактурата за сравнение (Фигура 2) ), може да се види от фигурата, че калусът на всяка група постепенно се е увеличил с течение на времето, но е бил пластичен в различна степен 6 седмици след фрактурата; в същото време може да се види, че калусът в контролната група е голям, а калусният кортекс е дебел и пълзи през линията на фрактурата след 6 седмици, докато калусът в моделната група имаше по-малко кост в калуса при 2 седмици, а калусният кортекс беше разхлабен след 6 седмици. Въпреки че обемът на калуса в групата на лечение не беше голям на 2 седмици, костната маса в калуса беше повече от тази в моделната група. Калусът беше по-добре оформен след 6 седмици. И линията на счупване не е очевидна.

Контролна група Група модел Група за лечение

Фигура 1 Сагитално напречно сечение на средната бедрена кост на всяка група

Фигура 2 Хоризонтален разрез на средната бедрена кост на всяка група

2.3 Микро-CT триизмерна реконструкция: триизмерната реконструкция на калуса в счупения край на бедрената кост е показана на Фигура 3. Може да се види от Фигура 3, че калусът се е образувал по протежение на периоста в двата края на фрактурата линия 2 седмици след фрактурата във всяка група, нишките на фрактурата във всяка група бяха все още ясни, особено в групата на модела и групата на лечение, докато калусът в контролната група беше дебел и дебел, предимно с пластини 6 седмици след фрактурата . Трабекуларните кости бяха преобладаващи и линията на фрактурата изчезна, докато моделната група беше с разхлабени кости и линията на фрактурата беше размита, но групата на лечение имаше повече калусна кост, правилна и дебела трабекуларна кост и линията на фрактурата не беше очевидна.

Фигура 3 Триизмерна реконструкция на R0I калус в счупения край

2.4 Микро-КТ параметри: Използвайте софтуер за анализ на калуса в счупения край. Вижте таблица 2 за свързани параметри.

Таблица 2 Сравнение на Micro-CT параметрите на всяка група (x±s)

Контролна група Група модел Група за лечение

Забележка: В сравнение с моделната група, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Серумно ниво на IL-1 P .TGF-P 1: вижте Таблица 3.

Таблица 3 Сравнение на нивата на IL-1 P JGF-0 1 във всяка група G±s, n=8)

Забележка: В сравнение с моделната група, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

През последните години традиционните китайски лекарства Yinyangdian, Drynaria fortune и техните съединения (Qing's Pills, Liuwei Dihuang Pills и др.) са доказали в клиничната практика, че значително подобряват остеопорозата. Този тип китайска медицина и съединения се използват най-вече за подхранване на черния дроб и бъбреците. Това е в съответствие с принципа за подхранване на бъбрека и обновяване на мускулите в средните и късните стадии на фрактурата. „Десет дни. Месестата паста за крайници е публикувана за първи път в „Materia Medica на Shen Nong“. Топла по природа, има функцията да подхранва бъбреците и да укрепва Ян, да попълва есенцията и костния мозък, да подхранва кръвта и да овлажнява сухотата, и да приятен цвят и удължаване на живота.

В това проучване костната минерална плътност на лекуваната група е по-висока от тази на моделната група след 2 и 6 седмици на интервенция (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">остеопоротичензарастване на фрактури. Той директно отразява костното съдържание на калуса. Това показва, че Rouganrong може да има ефект на насърчаване на остеогенезата. Анализът може да бъде ефективен при пастата от месна херния. Съставките имат ефект на регулиране нагоре на BMP2, а BMP2 е един от членовете на семейството на TGF-8. И този резултат се потвърждава и от други параметри на Micro-CT сканирането (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp и SMI отразяват биомеханичните свойства на калуса и стойностите в групата за лечение са значително по-добри от моделната група, това също така допълнително предполага, че Roudongrong има ефект на подобряване на костната загуба, насърчаване на остеогенезата и ускоряване на зарастването на фрактури.

По отношение на серумните нива на IL-1B и JGF-P 1, след 2 седмици и 6 седмици интервенция беше установено, че нивото на IL-1P в групата на лечение е по-ниско от другите две групи на 2 седмици и на 6 седмици. Въпреки че нивото на IL-1 B в групата на лечение е по-високо от контролната група, все още значително по-ниско от моделната група (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Цистанчемогаподобряване на загубата на костна маса, насърчават остеогенезата и ускоряват заздравяването на фрактури. Може да намали нивото на IL-13 востеопоротиченфрактурни плъхове и инхибират фрактурата. Постига се активност на костните клетки; освен това може да е свързано и с факта, чеЦистанчеможе да повиши нивото на TGF-B 1 при фрактурирани плъхове, да насърчи остеогенната диференциация и узряването и оформянето на калуса.

В обобщение, въз основа на анализа на костната минерална плътност, параметрите на микро-КТ сканирането и серумните нива на IL-1 P, TGF"1, беше установено, че водният екстракт отЦистанчемогаподобряване на загубата на костна масаинасърчаване на заздравяването на остеопоротични фрактури. Механизмът може да е свързан с това. Той може да инхибира секрецията на серумен ILT 8 и да стимулира секрецията на TGF-B 1 при плъхове следостеопоротиченфрактури, като по този начин подобрява остеопорозата и насърчава заздравяването на фрактури.

4 Използвана литература

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang и др. Насоки за диагностика и лечение на остеопороза при възрастни хора в Китай (2018) [J], Китайски вестник за остеопороза, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang и др. Терапевтичният ефект и механизмът на алкохолния екстракт от месна херния върху овариектомирани плъхове с остеопороза [J]. Journal of Jilin University (Medicine Edition), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. Екстрактът от сърцевина от Dalbergia sissoo насърчава заздравяването на фрактури и приложението му при остеопоротични плъхове, предизвикани от овариектомия [J]. Вестник по фармация и фармакология, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Кевин 0'Нийл, Кристофър MS, Николас AM, и др. Микрокомпютърна томографска оценка на прогресията на заздравяването на фрактури при мишки [j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian и др. Експертен консенсус относно степенувана диагностика и лечение на първична остеопороза с традиционна китайска медицина в провинция Zhejiang (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ма Менг, Джан Жигуо, Ма Сяохуей. Напредък на изследванията в превенцията и лечението на остеопорозата чрез единични и комбинирани китайски лекарства [J]. Китайско медицинско ръководство, 2018 г., 20 (8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng и др. Ефектът на семейното пюре от пустинно месо върху експресията на протеин BMP-2 при бързо стареещи остеопоротични мишки [J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116