Ефекти на захарния диабет върху сексуалната функция, хистоморфологията и експресията на -гладки мускули в кавернозно тяло на пениса при плъхове при плъхове
Mar 05, 2025
Резюме:
Цел:Да наблюдавасексуална функция на диабетаМоделирайте плъхове и проучете възможния механизъм на вторична сексуална дисфункция, причинена от хипергликемия.
МетодиЕксперименталните плъхове бяха разделени на случаен принцип на празната група (n =5) иГрупа за диабет(n =15). След като животинският модел на диабет е успешно конструиран, сексуалната функция на две групи е оценена. Наблюдавани са хистологичните характеристики на тестисите в две групи. Измерва се експресията на -smooth мускулен актин (-SMA) в тъканта на пениса на две групи. Резултати Нивата на серумните сексуални хормони са значително намалени (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ЗаключениеНамалените нива на половите хормони, намаленият брой гладко мускулни клетки в кавернозно тяло на пениса, намалената експресия на -SMA в кавернозно тяло на пениса, нарушената структура на интерстициалната тъкан на тестисите, морфологичните промени на гладките мускулни клетки и влошаването на фиброзата при диабета плъхове са важни фенотипични особености на това заболяване. Изследването на диагнозата и лечението на това заболяване с тези фенотипни характеристики ще има голямо значение.
Ключови думи:Диабет захарен;Еректилна дисфункция; сексуална функция; Полов хормон; - Изразяване на актина на гладката мускулатура
Билкови добавки за цистанче за еректилна дисфункция, причинена от диабет
Диабет захарен (ДМ)отдавна е фокусна точка на вниманието както в страната, така и в международен план поради високата си честота и разпространение [1]. Различните усложнения, предизвикани от ДМ, значително влияят на качеството на живот на пациентите. Сред тях, честотата наЕректилна дисфункция (ED)при мъжкиПациенти с ДМе значително повишен. В момента DM се превърна в високорискова група за ED [2–3]. Следователно, провеждане на задълбочени проучвания върхуDM-индуциран ED (DMED)има голямо значение. Това проучване има за цел да наблюдава ефектите на DM върху еректилната функция, половите хормони, нивата на експресия на -гладко мускулен актин (-SMA) в кавернозното тяло на пениса и морфологията на интерстициалното между тестисите ипенис кавернозен гладък мускулТъканите при плъхове, изследващи предварително потенциалната патологична основа на ЕД, индуцирана от DM.
1 Материали и методи
1.1 Експериментални животни и реагенти
Избрани са двадесет възрастни SPF мъжки SD плъхове с равномерно телесно тегло. Основните експериментални реагенти включват стрептозотоцин (STZ) и апоморфин (APO), както и антитела, необходими за откриване на -SMA експресия. Това проучване е одобрено от Комитета за хуманно отношение към животните и етиката на болница Dongzhimen, Пекин Университет по китайска медицина (№ 17-04).
1.2 Експериментални методи
1.2.1 Установяване на модел на диабетичен плъх
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/L по всяко време след 5 дни интраперитонеална инжекция STZ се считат за стандарт за успешно установяване на DM модел [4].
1.2.2 Тест за еректилна функция при плъхове
След потвърждаване на успешното моделиране на DM, плъховете се претеглят и се поставят в прозрачна стъклена кутия. APO разтворителят (100 ug/kg) се инжектира подкожно в задната част на шията въз основа на телесното тегло. Околната среда беше мълчалива, а светлинно осветление беше регулирано до ниво, достатъчно достатъчно за наблюдение на ерекция на пениса при плъхове. Броят на ерекцията на пениса в рамките на 30 минути след подкожната инжекция е наблюдаван и записан. Критерии за ерекция на пениса: Уголемяване на пениса, оттегляне на препуциума, излагане на гланките, придружени от хиперемия и зачервяване, и видимост на средния и долния сегменти на пениса.
1.2.3 Измерване на половите хормони при плъхове
Серумните нива на полов хормон на двете групи се измерват по метода на радиоимуноаналита, следвайки специфичните процедури, очертани в инструкциите за комплект RadioImmunoAssay.
1.2.4 Хистопатологично наблюдение на интерстициалната тъкан на тестисите
След събиране на кръв от коремната аорта на плъховете, десният тестис се извлича равномерно. Тестилът се промива с PBS буфер и напълно се фиксира в параформалдехид в продължение на 72 часа. Тъканта е вградена в парафин, секцията, оцветена с хематоксилин-еозин (H&E) и се наблюдава за хистологични характеристики.
1.2.5 Наблюдение на пенис кавернозна фиброза при плъхове
След събиране на кръв от коремната аорта, тъканта на пениса се изрязва и се промива с PBS буфер. Тъканта беше напълно фиксирана в параформалдехид в продължение на 72 часа, вградена в парафин, разделена и оцветена с трихрома на Масон. Относителното съдържание на гладките мускулни/колагенни влакна в пенис кавернозната тъкан на всяка група се наблюдава под микроскоп.
1.2.6 Измерване на нивата на експресия -SMA в пенис кавернозна тъкан
Пенилната кавернозна тъкан се подлага на рутинна депарафинизация на вода, промива се с PBS буфер в продължение на 5 минути и се подлага на микровълнова топлинна ремонт в цитратен буфер (pH 6. 0) в продължение на 20 минути. След охлаждане до стайна температура, тъканта се промива три пъти с PBS, 3 минути всеки път. 3% разтвор на водороден пероксид се прилага в тъмна стая при стайна температура в продължение на 15 минути, последвано от промиване на PBS. -SMA антитяло се добавя и тъканта се инкубира за една нощ на 4 градуса. След връщане към стайна температура, тъканта се промива с PBS, инкубира се с вторично антитяло на 37 градуса в продължение на 30 минути и отново се промива с PBS. DAB се прилага за развитие на цветовете на тъмно и реакцията се прекратява с вода. PBS се използва като заместител на първичното антитяло като отрицателна контрола и се провежда количествен анализ с анализатор на изображения.
1.3 Статистически методи
Данните, събрани в това проучване, бяха организирани с помощта на Microsoft Excel и след това се анализират с помощта на SPSS 25. 0 за статистическо тестване. Данните на всяка група се изразяват като средно ± стандартно отклонение (x̄ ± s). P-стойност по-малка от 0. 0 5 (p <0,05) се счита за статистически значима.
2 резултата
2.1 Сравнение на телесното тегло и промени в кръвната глюкоза между двете групи
Вижте таблица 1.
2.2 Сравнение на степента на ерекция на пениса между двете групи
Вижте таблица 2.
2.3 Сравнение на нивата на серумния полов хормон между двете групи
Вижте таблица 3.
2.4 Патологично наблюдение на интерстициалната тъкан между двете групи между двете групи
Интерстициалната тъкан на тестисите на контролната група изглежда нормална. Интерстициалните клетки са били кръгли или овални по форма, с редовна морфология, нормално междуклетъчно разстояние, подредено подреждане и без значително намаляване на броя на клетките. За разлика от тях, диабетичната група показва интерстициален оток на тестисите, неправилна клетъчна морфология, разхлабени междуклетъчни пространства, нарушено подреждане, нарушаване на вътреклетъчните структури и признаци на дедиференциация в някои клетки, губейки структурни характеристики. Вижте Фигура 1.
| Група | Размер на пробата (n) | Основно телесно тегло (G) | Тегло на телесното тегло 5 дни след моделирането (G) | Кръвна глюкоза 5 дни след моделиране (MMOL/L) | Телесно тегло преди жертва (ж) | Кръвна глюкоза преди жертва (mmol/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Група за диабет | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Контролна група | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Забележка: В сравнение с контролната група,P <0. 01.
Таблица 2: Сравнение на степента на ерекция на пениса между две групи
| Група | Размер на пробата (n) | Положителни случаи при тест за ерекция (n) | Степента на ерекция (%) |
|---|---|---|---|
| Група за диабет | 15 | 5 | 33.3** |
| Контролна група | 5 | 4 | 80.0 |
Забележка: В сравнение с контролната група,P <0. 01.
Таблица 3: Сравнение на нивата на серумния полов хормон между две групи (x̄ ± s)
| Група | Размер на пробата (n) | T (nmol·l⁻)) | Fsh (iu · l⁻⁻) | LH (ng · l⁻)) |
|---|---|---|---|---|
| Група за диабет | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Контролна група | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Забележка: В сравнение с контролната група,P <0. 01.
2.4 Патологично наблюдение на интерстициална тъкан между две групи между две групи между две групи
В контролната група, интерстициалната тъкан на тестисите изглежда нормална, като интерстициалните клетки са кръгли или овални по форма, показвайки редовна морфология, нормални междуклетъчни пространства и подредено подреждане. Броят на клетките не показва значително намаляване. В сравнение с контролната група, диабетичната група проявява интерстициален оток на тестисите, неправилно оформени клетки, разхлабени междуклетъчни пространства, нарушено подреждане, нарушени вътреклетъчни структури и признаци на дедиференциация в някои клетки, губейки своите структурни характеристики. Вижте Фигура 1.
2.5 Наблюдение на пенис кавернозна фиброза между две групи
Оцветяването на Масон се използва за наблюдение на разликите в степента на фиброза в пенис кавернозната тъкан между двете групи. В диабетичната група делът на колагеновите влакна е значително по -висок, с увеличаване на относителното съдържание, докато делът на гладките мускулни клетки е по -малък, с намаляване на относителното съдържание. Вижте Фигура 2.
Фигура 1 Той оцветява резултатите от тестисите в две групи (× 10, n=3)
Фигура 2 Масон Оцветяване Резултати от Corpora Cavernosa в две групи (× 4, N=3)
2.6 Експресия на -SMA в клетките на гладката мускулатура на Corpus cavernosum в две групи
Имунохистохимията се използва за откриване на експресията на -SMA в двете групи. В сравнение с празната група, кафявото -жълто оцветена част в диабетичната група е значително намалена, тоест положителната клетъчна експресия на -SMA в диабетичната група е значително намалена. Вижте Фигура 3.
Фиг. 3 Имунохистохимия Резултати от корпус каверноз в две групи (× 10, n=3)
