Епигалокатехин-3-заредените с галат липозоми благоприятстват противовъзпалителните действия на клетките на микроглията и насърчават неврозащитата

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Резюме

признава се, че невровъзпалението, медиирано от микроглия, допринася главно за прогресирането на невродегенеративни заболявания. Епигалокатехин{1}}галат (EGCG), известен като естествен антиоксидант в зеления чай, може да инхибира медиираното от микроглия възпаление и да защити невроните, но има недостатъци като висока нестабилност и ниска бионаличност. Разработихме липозомна формула на EGCG, за да подобрим нейната бионаличност и оценихме невропротективната активност в in vitro и in vivo модели на невровъзпаление. Заредените с EGCG липозоми са приготвени от фосфатидилхолин (PC) или фосфатидилсерин (PS), покрити с или без витамин Е (VE) чрез метод на хидратация и мембранна екструзия. Theпротивовъзпалителноефектът е оценен срещу индуцирано от липополизахарид (LPS) активиране на BV-2 микроглиални клетки и възпаление в substantia nigra на плъхове Sprague Dawley. В модела на клетъчно възпаление, миши BV-2 микроглиални клетки променят своята морфология от нормална сфероидна до активирана форма на вретено след 24 часа индукция на LPS. В in vitro теста за свободен радикал 2, 2-дифенил-1-пикрилхидразил (DPPH), EGCG поглъща 80 процента от DPPH в рамките на 3 минути. Заредените с EGCG липозоми могат да бъдат фагоцитирани от BV-2 клетки след 1 час клетъчна култура от експерименти за клетъчно усвояване. Заредените с EGCG липозоми подобряват производството на BV-2 получен от микроглия азотен оксид и TNF- след LPS. В in vivo модела на плъх с Паркинсонов синдром, едновременно интранигрално инжектиране на липозоми, заредени с EGCG, отслабва LPS-индуцираните провъзпалителни цитокини и възстановява двигателното увреждане. Ние демонстрирахме, че заредените с EGCG липозоми упражняват невропротективен ефект чрез модулиране на активирането на микроглия. EGCG, извлечен от зелен чай и заредени липозоми, може да бъде ценен кандидат за модифицираща заболяването терапия заБолест на Паркинсон (PD).

Ключови думи:невропротекция; невровъзпаление; болестта на Паркинсон; катехин; L- -фосфатидилхолин;фосфатидилсерин

предотвратявамПаркинсонзаболяванеефекти на Cistanche сцистанче

Chun-Yuan Cheng 1,2, Lassina Barro 2, Shang-Ting Tsai 2,3, Tai-Wei Feng 2,3, Xiao-Yu Wu 2, Che-Wei Chao 4, Ruei-Siang Yu 2, Ting-Yu Chin 4,* и Ming Fa Hsieh 2,3,*

1 отделение по неврохирургия, отделение по хирургия, християнска болница Changhua, ул. Nanxiao 135, град Changhua, окръг Changhua 500, Тайван; 83998@cch.org.tw

2 Катедра по биомедицинско инженерство, Chung Yuan Christian University, No. 200, Zhongbei Rd., Zhongli Dist., Taoyuan City 320314, Тайван;

3 Център за минимално инвазивни медицински устройства и технологии, Chung Yuan Christian University, No. 200, Zhongbei Rd., Zhongli Dist., Taoyuan City 320314, Тайван

4 Департамент по бионаучни технологии, Chung Yuan Christian University, No. 200, Zhongbei Rd., Zhongli Dist., Taoyuan City 320314, Тайван.

1. Въведение

Когато нервната система е увредена или заразена, клетките на микроглията се активират и трансформират, за да бъдат разклонени, което води до прекомерна експресия на голямо количество провъзпалителни цитокини като тумор некрозис фактор- (TNF-), интерлевкин-1 ( IL-1 ), интерлевкин 6 (IL-6) и възпалителни медиатори като азотен оксид (NO) и реактивни кислородни видове (ROS). И накрая, нервните клетки се увреждат, дегенерират или умират от тези възпалителни медиатори. Наскоро беше установено, че в мозъка на пациенти с невродегенеративни заболявания като болест на Паркинсон0 (PD), болест{0 на Алцхаймер0, болест на Хънтингтън0 и болест на Кройцфелд-Якоб , големи количества микроглиални клетки се активират и свръхекспресират [1–3]. Епидемиологично, причината за PD е свързана най-вече с невровъзпалителната реакция. Получените възпалителни медиатори, като TNF-, IL-1, IL-6, NO и ROS, се намират в стриатума на мозъка [1,4–7]. Разграждането на допаминергичните неврони може да се регулира от микроглиални клетки [8].

Невровъзпалителният процес, който причинява PD, се предшества от първично увреждане на невроните, причинено от токсини от околната среда, включително ротенон [9], липополизахарид (LPS) [5,7] и ефектите от анормалното натрупване на протеин [10]. Увреждането ще причини лезии и дори апоптоза на допаминергичните неврони. След това клетките на микроглията се активират за освобождаване на цитокини, което води до възпаление и смърт на невроните и накрая води до PD.

Когато микроглиалните клетки се стимулират от LPS, LPS се свързва с повърхностния рецептор CD14 свързващ сайт на микроглиалните клетки. Комплексът LPS-CD14 е свързан с MD2 линкер чрез трансмембранни протеини на toll-подобен рецептор -4 (TLR4) и след това участва в множество пътища за предаване на съобщения, генерирани от митоген-активирани протеин кинази (MAPK) и активиращи транскрипционни фактори (ядрен фактор -kappa B, NF-κB). След генна транскрипция [5,11,12] микроглиалните клетки освобождават цитокини като TNF- и IL-1 или експресират гени на индуцируема синтаза на азотен оксид (iNOS) и циклооксигеназа-2 (COX{ {17}}), което води до освобождаване на простагландини или NO. В допълнение, разрушителните свободни радикали ONOO се генерират чрез комбиниране на супероксидни аниони, произведени от никотинамид аденин динуклеотид фосфат (NADPH) оксидаза с NO, произведен от iNOS, което води до смъртта на допаминергичните неврони [13]. Следователно, в това проучване LPS е използван за индуциране на невровъзпаление на микроглиални клетки като in vitro модел на PD.

Катехините са естествени антиоксиданти, които могат да предотвратят увреждането на клетките и да осигурят много фармакологични ползи като противотуморни, противоракови, против стареене, анти-фармакологична радиация и улавяне на свободните радикали [14]. Зеленият чай съдържа около 10 процента полифеноли от теглото, включително големи количества катехин, наречен епигалокатехин галат (EGCG). EGCG има най-високата антиоксидантна активност и капацитет за отстраняване на свободните радикали във всички катехини на зелен чай и може да улови ROS, за да защити клетките от увреждането на оксидативния стрес [15]. EGCG също има висока противовъзпалителна ефикасност, която може ефективно да инхибира секрецията на цитокини (TNF-, IL-2 и IL-8) от макрофагите [16], фосфорилирането на Akt сигнализиращи протеини и IκB протеини в възпалителни пътища за намаляване на експресията на NF-κB или транскрипция на AP-1 чрез инхибиране на фосфорилирането на MAPK протеини нагоре по веригата, за да се балансира експресията на COX-2 и да се намали производството на провъзпалителни цитокини [17].

Наскоро беше съобщено, че EGCG е потенциално терапевтичен или профилактичен за PD поради потискане на активните олигомери на -синуклеин (S) [18]. EGCG също предотвратява агрегацията на S in vitro [19–21], а цитоплазмената агрегация на S в допаминергичните неврони е една възможна патогенеза на PD, водеща до увреждане на допаминергичните неврони в substantia nigra [22]. Освен това, EGCG може да възстанови 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрахидропиридин (МРТР)-индуцирано неврохимично или функционално увреждане и да регулира феропортина в субстанция нигра и да намали оксидативен стрес [23]. EGCG също така има невропротективни и имунни защитни ефекти при мишки, третирани с МРТР, и може да модулира невровъзпалението и да предпази загубата на допаминергични неврони при МРТР-индуцирана PD [24].

Изследвани са противовъзпалителните ефекти на EGCG. EGCG потиска LPS, индуцирано производство на NO и експресия на iNOS в BV-2 микроглиални клетки. EGCG може ефективно да инхибира експресията на провъзпалителни цитокини като TNF- и IL-1 в BV-2 клетки [25]. Предварителната обработка на човешки макрофаги с EGCG значително инхибира индуцираната от LPS експресия на провъзпалителни цитокини като TNF-, IL-1 и IL-6 [26]. В допълнение, пост-третирането на EGCG върху LPS-увредени мишки намалява производството на провъзпалителен цитокин чрез модулиране на TLR4-NF-κB пътя [27]. Освен това, поли(лактид-ко-гликолид) (PLGA) микросфери, заредени с EGCG и оптимизирани чрез добавяне на -циклодекстрин (-CD), могат ефективно да потиснат производството на NO от BV-2 клетки в in vitro модел на миши BV -2 микроглиални клетки, стимулирани от LPS, което показва, че микросферите могат да потискат възпалението на активирани микроглиални клетки [28].

Въпреки че зеленият чай е ежедневна напитка, ефикасността на катехините е неефективна поради ниската перорална бионаличност; следователно са необходими ефективни фармацевтични дозирани форми. Нано носителят на лекарства има предимствата на избягване на преждевременен метаболизъм, удължаване на времето за действие на лекарството и насочване на доставянето на лекарството. Следователно, това проучване възнамерява да разработи липозоми, съдържащи фосфатидилхолин (PC) и фосфатидилсерин (PS), подобни компоненти на клетъчната мембрана, като противовъзпалителни лекарствени форми. EGCG, извлечен от листата на зелен чай, беше зареден в липозоми, за да забави възпалителните реакции в микроглиалните клетки, индуцирани от LPS. Терапевтичният ефект на липозоми, заредени с EGCG, върху in vivo модела на PD за невропротекция също беше оценен.

2. Резултати

2.1. Екстракция на EGCG

2.1.1. Екстракт от EGCG

Данните за характеризиране на епигалокатехин{{0}}галата могат да бъдат намерени в допълнителния файл (фигури S1 и S2). 2.1.2. Различни формулировки на EGCG В Таблица 1 средният диаметър на частиците на плацебо PS-, PS-EGCE- и PS-EGCG-VE липозоми е по-малък от този на плацебо PC-, PC-EGCE- и PC-EGCG-VE- липозоми, съответно. Тъй като PC е неутрален и PS е отрицателно зареден [29], това показва, че адитивният повърхностен потенциал е повлиял на размера на частиците. Индексът на полидисперсност (PDI) на всички липозоми е по-малък от 0,22, което показва, че структурата на липозомите в разтвор е стабилна. Отрицателните заряди на PS доведоха до отблъскваща сила върху повърхностния потенциал между PS-липозомите, избягвайки агрегацията и намалявайки размера на PS-липозомите.

Ефективността/размерът на капсулиране на PS-съдържащи липозоми, описани в Таблица 1, е по-голям/по-малък от този на съответните PC-съдържащи липозоми [30]. Ефективността на капсулиране на PC-EGCG-VE-липозомите и PS-EGCG-VE-липозомите е по-обширна от тази на PC-EGCG-липозомите и съответно PS-EGCG-липозомите. Това е така, защото витамин Е е мастноразтворим, вграден във фосфолипидна двуслойна мембрана и осигурява антиоксидантен протектор за EGCG.

2.2. Клетъчен анализ in vitro

2.2.1. Клетъчна жизнеспособност

Клетъчната жизнеспособност на клетките, третирани с EGCG от 50 до 400 µM, беше значително намалена в сравнение с контролната група (Фигура 1А). Обратно, жизнеспособността на клетките, получаващи 5 до 25 µM, е подобна на жизнеспособността на клетките от контролната група. Концентрацията на EGCG, използвана в това изследване, е определена на 25 µM. По подобен начин, концентрацията на LPS, използвана за индуциране на клетъчно възпаление, беше определена на 50 ng/mL съгласно Фигура 1В. На фигура 1C клетъчната жизнеспособност на клетките, култивирани съвместно с плацебо липозоми от всички концентрации, не е статистически значима в сравнение с контролната група. Следователно плацебо липозомите не са цитотоксични за микроглиалните клетки.

2.2.2. Клетъчна морфология

Клетъчната морфология на контролната група (Фигура 2A) и морфологията на клетките, третирани с 25 μM EGCG (Фигура 2B) са сферични, докато морфологията на клетките, третирани с 50 ng/mL LPS (Фигура 2C) е с вретеновидна форма. Въпреки това, морфологията на клетките, третирани с 25 uM EGCG и активирани от LPS (Фигура 2D), е сферична. Това означава, че EGCG може да инхибира активирането, предизвикано от LPS. Следователно, предварителната обработка на EGCG има инхибиторен ефект върху невровъзпалението, предпазвайки микроглиалните клетки от активиране.

2.2.3. НЕ Освобождаване

На Фигура 3А, освобождаването на NO от BV-2 клетки, индуцирано с 5–1000 ng/mL LPS по време на 24 h инкубация, е статистически значимо в сравнение с освобождаването на NO от контролната група. Концентрацията на LPS, използвана за активиране на клетъчното възпаление, за да работи, беше определена на 50 ng/mL.

Освобождаването на NO от BV-2 клетки, третирани с 25 µM EGCG, не е статистически значимо в сравнение с контролната група, както е показано на Фигура 3B. Въпреки това, клетъчното възпаление, индуцирано с LPS за 24 часа, показва значително увеличение в сравнение с контролната група. Тези клетки, третирани с 25–200 µM EGCG за 1 час и след това активирани с LPS, показват статистически значимо намаление в сравнение с групата клетки, активирани само с LPS. Освобождаването на NO не намалява, когато EGCG се повиши от 50–200 µM, тъй като жизнеспособността на клетките намаля, когато EGCG се повиши от 50–200 µM, съгласно Фигура 1А.

Производството на NO от клетките, третирани с 25 µM EGCG, последвано от възпалението, предизвикано с 50 ng/mL LPS, не е статистически значимо в сравнение с контролната група (Фигура 3C). Въпреки това, NO, освободен в групата от клетки, третирани с PC-EGCG-липозоми или PC-EGCG-VE-липозоми, последвано от LPS активиране с 50 ng/mL, показва значително намаление в сравнение с групата от клетки, третирани само с LPS. Освобождаването на NO от клетки, предварително третирани с PC-EGCG-липозоми или PC-EGCG-VE-липозоми, е по-високо от освобождаването на NO от групата клетки, предварително третирани с EGCG, което трябва да се обясни с бавното освобождаване на EGCG от липозомите.

2.2.4. Анализ на цитокини

На фигура 4А, концентрацията на TNF- на клетки, третирани с LPS след 24 часа, показва статистически значимо увеличение в сравнение с това на контролната група или средата на клетъчна култура (DMEM). Плацебо PC-липозомите са близки до тези на клетките, третирани с LPS. Въпреки това, концентрацията на TNF- в групата от клетки, предварително третирани с PS-EGCG-липозоми или PS-EGCG-VE-липозоми, последвани от LPS активиране, показва статистически значимо понижение в сравнение с това на клетките, третирани с LPS. Тази намаляваща концентрация на TNF- показва, че заредените с EGCG липозоми могат да намалят активирането на микроглиални клетки, индуцирано от LPS. Инхибиторният ефект на PS-EGCG-VE-липозомите е по-добър от този на PS-EGCG-липозомите.

Фосфолипидите на клетъчната мембрана могат да бъдат хидролизирани от цитозолна фосфолипаза А2 (cPLA2), за да се получи арахидонова киселина. Циклооксигеназата (COX) е ключов ензим, който превръща арахидоновата киселина в простагландин. COX-2 и cPLA2 често се генерират от възпаление или злокачествено заболяване [31–34]. На Фигура 4В възпалението се индуцира от LPS от 5–50 ng/mL за 24 часа и експресията на cPLA2 се увеличава, когато концентрацията на LPS се повишава. Фигура 4C показва повишените активности на COX-2, индуцирани от LPS (5–50 ng/mL) за 24 часа. Експресията на COX-2 се повишава от 5–25 ng/mL LPS, докато намалява при 50 ng/mL. На Фигура 4D експресията на cPLA2 беше намалена, когато BV-2 клетки бяха предварително третирани с EGCG и индуцирани от LPS. Експресията на COX-2, когато LPS активира BV-2 клетки, се повишава в сравнение с контролната група (Фигура 4E). Има значително намаление на COX-2 в групата клетки, предварително третирани с EGCG, плацебо PS-липозоми, PS-EGCG-липозоми и PS-EGCG-VE-липозоми, последвано от LPS възпалителна индукция. По-специално, експресията на COX-2 на клетки, предварително третирани с плацебо PS-липозоми, има статистически значима разлика от тази на клетките, индуцирани от LPS.

2.3. In Vivo тест върху животни

2.3.1. Поведение на животните

Тест. Броят на кръговете, завършени от плъховете с Паркинсонова болест след прилагане на амфетамин (показан на Фигура 5А), беше значително увеличен в сравнение с броя на кръговете, завършени от плъховете от контролната група. Поведението на паркинсонови плъхове0, третирани с различната формула на EGCG, е подобно на това на плъховете от контролната група. Тези данни показват, че EGCG отслабва индуцираните от LPS едностранни лезии на нигростриаталната система. 2.3.2. Анализ на възпалителни маркери Съотношението на TNF-/GAPDH в третираната група беше значително по-ниско в сравнение със съотношението, установено при плъхове със синдром. Тенденцията на IL-1 е подобна на тенденцията на TNF. Резултатите in vivo съответстват на резултатите от in vitro проучвания. Експресията на получен от мозъка невротрофичен фактор (BDNF) в третираната група е подобна на LPS-индуцираната група (Фигура 5D). Въпреки това, този резултат може да показва, че подобряването на координацията на крайниците при плъхове с Паркинсонов синдром чрез заредени с PC-EGCG липозоми е причинено от намаляване на невровъзпалителния отговор, но не и от увеличаване на експресията на BDNF.

Също така отговаря на предишни доклади, че намаляването на производството на TNF- и NO чрез предварително третиране на плъхове с EGCG (10 mg/kg) за 24 часа и индукция с LPS след 7 дни намалява в сравнение с това на плъхове, третирани с LPS, и се заключава, че EGCG има потенциален терапевтичен ефект за LPS-индуцирана невротоксичност поради намаляване на освобождаването на TNF- и NO.

3. Дискусия

В това проучване беше установено, че чистотата на EGCG, извлечен от зелен чай, е 90,5 процента, а активността на EGCG за отстраняване на свободните радикали е по-голяма от 80 процента в рамките на 3 минути. Той се увеличава с по-висока концентрация на EGCG или по-дълго време за реакция. Размерът на частиците на PC-EGCG-VE- и PS-EGCG-VE-липозомите е 161,5 и 142,9 nm, което е по-малко от това на EGCG, зареден в PLGA микросфери [28] с допълнителен -циклодекстрин (вариращ от 1-14 µm) . Ефективността на капсулиране на PC-EGCG-VE- и PS-EGCG-VE-липозомите е съответно 60,2 процента и 76,8 процента. Тези резултати показват, че PS-съдържащите липозоми са по-малки, по-стабилни и имат по-висока ефективност на капсулиране поради заряда на PS и водят до сила на отблъскване между липозомите, за да се избегне агрегацията.

Експресията на TNF- в клетки, предварително третирани с PS-EGCG- и PS-EGCG-VE-липозоми и след това индуцирани от LPS, има статистически значими разлики в сравнение с тази на клетките, индуцирани с LPS, и подобни резултати се наблюдават при предварителното третиране на EGCG върху LPS -индуцирана TNF- експресия в BV-2 клетки [25] и човешки макрофаги [26]. В обобщение, клетъчната морфология и експресията на TNF- от групата, лекувана с EGCG, показват инхибиращ ефект на възпалението, предизвикано от LPS.

В настоящото проучване предварителната обработка с EGCG може да намали освобождаването на NO. Потискането на производството на NO от LPS-индуцирани BV-2 клетки чрез предварителна обработка на EGCG-заредени PLGA микросфери също беше изследвано в нашето предишно проучване [28].

В настоящото изследване синдромът на Паркинсон при плъхове се създава от увреждането на едностранния участък на substantia nigra, предизвикано от LPS. Друго важно откритие е, че чрез статистически количествен анализ липозоми, заредени с EGCG, могат да облекчат синдрома, дължащ се на увреждане на унилатералната нигрозинова област на средния мозък на мозъка на плъх, индуцирана от LPS в ротационния тест, и производството на невровъзпалителни фактори TNF- в субстанцията nigra зоната на мозъка на плъх също може да бъде намалена от липозоми, заредени с EGCG. Това проучване показва, че подобряването на координацията на крайниците и намаляването на невронното възпаление при LPS-индуциран паркинсонов синдром се причинява от локално прилагане на липозоми, натоварени с EGCG, но не и от увеличаване на експресията на BDNF. Резултатите от анти-невровъзпалението обаче са необходими за невропротективен ефект [35]. Активирането на BV-2 освобождава провъзпалителни фактори, които са невротоксични и водят до увреждане на клетките. Като предотвратява активирането на BV-2, EGCG осигурява невропротективен ефект. Известно последващо лечение с EGCG за подобряване на пролиферацията, степента на преживяемост и невронната диференциация на възрастни неврални стволови клетки в зъбната извивка, индуцирана от LPS, показва, че EGCG може да бъде потенциален терапевтичен агент за невровъзпалителни заболявания [27].

Предишни фармакокинетични проучвания показват, че екзогенният PS може да премине през кръвно-мозъчната бариера (BBB), при което изглежда има афинитет към хипоталамуса [6], а пероралното приложение води до пикови нива след 1-4 часа. Освен това беше установено, че PS-съдържащите липозоми имитират апоптотични клетки, за да стимулират секрецията на противовъзпалителни медиатори, като трансформиращ растежен фактор- 1 (TGF- 1) (за понижаване на NO, произвеждан от макрофаги) [36] и простагландин Е2 (PGE2) от макрофаги и клетки от микроглия in vitro [6,37], а също така насърчават облекчаването на възпалението in vivo [38]. Съответно, PS-съдържащите липозоми, заредени с EGCG, демонстрирани в това проучване, имат предимството на по-малък размер на частиците, по-висока ефективност на капсулиране и инхибиране на активирането на паркинсоновия синдром както в клетките на микроглията, така и в модела на плъх Vivo, показвайки подобрена противовъзпалителна функция и невропротекция.

Ограничението е, че нашето проучване е проведено с някои липсващи анализи, като например в случая на невропротективния ефект, и оцветяването с NeuN не е изследвано. Ние също анализирахме само BDNF като невротрофичен фактор. FGF2 и IGF2 също са невротрофични фактори, които трябва да се имат предвид [39].

5. Изводи

За да се подобри ниската орална бионаличност на катехини, EGCG е зареден в липозоми в това проучване. Установено е, че PS-съдържащите липозоми са по-малки и по-стабилни. Той има по-висока ефективност на капсулиране и добавянето на витамин Е може да предпази EGCG от окисление и да подобри ефективността на капсулиране. В in vitro проучването, експресиите на продукцията на TNF- и NO от BV-2 клетки бяха намалени след предварителна обработка на липозоми, заредени с EGCG върху LPS-индуцирани BV-2 клетки. Следователно, заредените с EGCG липозоми са изиграли съществена роля в невровъзпалителния отговор като инхибитор. Благоприятните ефекти са предотвратяване на апоптоза на клетките при невровъзпалителни реакции.

При изследване in vivo паркинсоновият синдром при плъхове, индуциран от LPS в едностранния участък на substantia nigra на средния мозък, е подобрен. Механизмът на невровъзпалението, включително секрецията на TNF, е инхибиран от последващо третиране на липозоми, заредени с EGCG. Ние показахме, че EGCG би бил по-ценен кандидат за лечение на невродегенеративни заболявания чрез облекчаване на възпалението в мозъка. Последващото изследване трябва да се фокусира върху възпалителните пътища чрез използване на лизозомен тракер за проследяване на входа на липозомата в клетката и освобождаването на EGCG от липозомата.

Препратки

1 Lull, ME; Блок, ML Микроглиално активиране и хронична невродегенерация. Neurotherapeutics 2010, 7, 354–365. [CrossRef]

2. Ekdahl, C.; Кокая, З.; Lindvall, O. Възпаление на мозъка и неврогенеза при възрастни: Двойната роля на микроглия. Neuroscience 2009, 158, 1021–1029. [CrossRef] [PubMed]

3. Weissleder, R.; Нарендорф, М.; Pittet, MJ Изобразяване на макрофаги с наночастици. Нац. Матер. 2014, 13, 125–138. [CrossRef]

4. Papageorgiou, IE; Фетани, AF; Lewen, A.; Heinemann, U.; Kann, O. Широко разпространеното активиране на микроглиалните клетки в хипокампуса на хронични епилептични плъхове корелира само частично с невродегенерацията. Мозъчна структура. Функц. 2015, 220, 2423–2439. [CrossRef] [PubMed]

5. Дута, Г.; Джан, П.; Liu, B. Липополизахаридният животински модел на болестта на Паркинсон: Механистични изследвания и откриване на лекарства. Фундамент. Clin. Pharmacol. 2008, 22, 453–464. [CrossRef] [PubMed]

6. Оцука, М.; Цучия, С.; Aramaki, Y. Участие на ERK, MAP киназа, в производството на TGF- от макрофаги, третирани с липозоми, съставени от фосфатидилсерин. Biochem. Biophys. Рез. Общ. 2004, 324, 1400–1405. [CrossRef]

7. Ли, Р.; Huang, Y.-G.; Фанг, Д.; Le, W.-D. (-)-Епигалокатехин галат инхибира индуцираното от липополизахарид микроглиално активиране и предпазва от медиирано от възпаление допаминергично невронно увреждане. J. Neurosci. Рез. 2004, 78, 723–731. [CrossRef]

8. Лиу, Дж.; Хонг, З.; Динг, Дж.; Liu, J.; Джан, Дж.; Chen, S. Преобладаващо освобождаване на лизозомни ензими от микроглия на новородени плъхове след лечение с LPS, разкрито от протеомни изследвания. J. Proteome Res. 2008, 7, 2033–2049. [CrossRef]

9. Чо, Х.-С.; Ким, С.; Lee, S.-Y.; Парк, JA; Kim, S.-J.; Chun, HS Защитен ефект на компонента на зеления чай, L-теанин върху индуцираната от околната среда токсини невронна клетъчна смърт. Невротоксикология 2008, 29, 656–662. [CrossRef]

10. Мариани, М.М.; Kielian, T. Microglia при инфекциозни заболявания на централната нервна система. J. Neuroimmune Pharmacol. 2009, 4, 448–461. [CrossRef]

11. Сантяго, RM; Barbieiro, J.; Лима, ММ; Домбровски, PA; Андреатини, Р.; Жизненоважни, МА депресивно-подобни поведенчески промени, предизвикани от интраневрални MPTP, 6-OHDA, LPS и ротенонови модели на болестта на Паркинсон, се свързват предимно със серотонин и допамин. Прог. Невро-психофармакол. Biol. Психиатрия 2010, 34, 1104–1114. [CrossRef] [PubMed]

12. Лю, М.; Bing, G. Липополизахаридни животински модели за болестта на Паркинсон. Болест на Паркинсон. 2011, 2011, 327089. [CrossRef] [PubMed]

13. Wu, D.-C.; Тейсман, П.; Tieu, K.; Вила, М.; Джаксън-Луис, В.; Ischiropoulos, H.; Przedborski, S. NADPH оксидазата медиира оксидативния стрес в 1-метил-4-фенил-1, 2, 3, 6-тетрахидропиридин модел на болестта на Паркинсон. Proc. Natl. акад. Sci. САЩ 2003, 100, 6145–6150. [CrossRef]

14. Рахман, И.; Biswas, SK; Kirkham, PA Регулиране на възпаление и редокс сигнализиране от диетични полифеноли. Biochem. Pharmacol. 2006, 72, 1439–1452. [CrossRef] [PubMed]

15. Вълко, М.; Rhodes, C.; Moncol, J.; Изакович, М.; Мазур, М. Свободни радикали, метали и антиоксиданти при рак, предизвикан от оксидативен стрес. Chem. Biol. Взаимодействайте. 2006, 160, 1–40. [CrossRef]

16. Разбира се, Y.-J.; Чун, К.-С.; Ча, Х.-Х.; Хан, SS; Keum, Y.-S.; Парк, К.-К.; Lee, SS Молекулярни механизми, лежащи в основата на хемопревантивните дейности на противовъзпалителните фитохимикали: Понижаване на СОХ-2 и iNOS чрез потискане на активирането на NF-кВ. Мутат. Рез. Фундамент. Mol. мех. Мутагенеза 2001, 480, 243–268. [CrossRef]

17. Renaud, J.; Набави, SF; Даглия, М.; Набави, SM; Martinoli, M.-G. Епигалокатехин-3-галат, обещаваща молекула за болестта на Паркинсон? Подмладяване Res. 2015, 18, 257–269. [CrossRef]

18. Янг, JE; Ро, Кентъки; Лий, С.; Лий, JT; Парк, JH; Бхак, Г.; Paik, SR EGCG-медиирана защита на разрушаването на мембраната и цитотоксичността, причинена от „активния олигомер“ на -синуклеин. Sci. Rep. 2017, 7, 1–10. [CrossRef]

19. Bieschke, J.; Russ, J.; Фридрих, RP; Ehrnhoefer, DE; Wobst, H.; Neugebauer, K.; Wanker, EE EGCG ремоделира зрелите синуклеинови и амилоидни фибрили и намалява клетъчната токсичност. Proc. Natl. акад. Sci. САЩ 2010, 107, 7710–7715. [CrossRef]

20. Йошида, В.; Кобаяши, Н.; Сасаки, Й.; Икебукуро, К.; Sode, K. Частичен пептид на -синуклеин, модифициран с инхибитори с малки молекули, специфично инхибира амилоидната фибрилация на -синуклеин. Вътр. J. Mol. Sci. 2013, 14, 2590–2600. [CrossRef] [PubMed]

21. Xu, Y.; Джан, Й.; Quan, Z.; Wong, W.; Guo, J.; Джан, Р.; Янг, Q.; Дай, Р.; McGeer, PL; Qing, H. Епигалокатехин галат (EGCG) инхибира агрегацията на алфа-синуклеин: потенциален агент за болестта на Паркинсон. Neurochem. Рез. 2016, 41, 2788–2796. [CrossRef] [PubMed]

22. Ли, Й.; Чен, З.; Lu, Z.; Янг, Q.; Лиу, Л.; Jiang, Z.; Джан, Л.; Джан, X.; Qing, H. "Клетъчно пристрастяващо" двойно целево проследимо нанолекарство за лечение на болестта на Паркинсон чрез пътя на флотилините. Theranostics 2018, 8, 5469. [CrossRef]

23. Xu, Q.; Лангли, М.; Kanthasamy, AG; Reddy, MB Епигалокатехин галат има невроспасяващ ефект при миши модел на болестта на Паркинсон. J. Nutr. 2017, 147, 1926–1931. [CrossRef] [PubMed]

24. Джоу, Т.; Жу, М.; Liang, Z. (-)-Епигалокатехин-3-галат модулира периферния имунитет в MPTP-индуцирания миши модел на болестта на Паркинсон. Mol. Med. 2018 г., 17, 4883–4888. [CrossRef]

25. Парк, Е.; Chun, HS Полифенолът на зеления чай Епигалокатехин галат (EGCG) предотвратява индуцираното от LPS BV-2 активиране на микроглиални клетки. J. Life Sci. 2016, 26, 640–645. [CrossRef]

26. Liu, J.-B.; Джоу, Л.; Wang, Y.-Z.; Уанг, X.; Zhou, Y.; Хо, В.-З.; Ли, Ж.-Л. Невропротективна активност на ()-епигалокатехин галат срещу липополизахарид-медиирана цитотоксичност. J. Immunol. Рез. 2016, 2016, 4962351. [CrossRef] [PubMed]

27. Seong, K.-J.; Lee, H.-G.; Kook, MS; Ко, Х.-М.; Jung, J.-Y.; Ким, В.-Дж. Епигалокатехин-3-галатът спасява LPS-увредена хипокампална неврогенеза при възрастни чрез потискане на TLR4-NF-κB сигналния път при мишки. Корейски J. Physiol. Pharmacol. 2016, 20, 41. [CrossRef] [PubMed]

28. Cheng, C.-Y.; Pho, Q.-H.; Wu, X.-Y.; Чин, T.-Y.; Chen, C.-M.; Fang, P.-H.; Lin, Y.-C.; Hsieh, M.-F. PLGA микросфери, заредени с -циклодекстринови комплекси от епигалокатехин-3-галат за противовъзпалителни свойства в активирани микроглиални клетки. Полимери 2018, 10, 519. [CrossRef]

29. Бузело, К.; Harnisch, S.; Мюлер, Р.; Müller, B. Влиянието на алкалните мастни киселини върху свойствата и стабилността на парентерални O/W емулсии, модифицирани с Solutol HS 15®. Евро. J. Pharm. Biopharm. 2000, 49, 143–149. [CrossRef]

30. Шаши, К.; Сатиндер, К.; Бхарат, П. Пълен преглед на: Липозоми. Вътр. Рез. J. Pharm. 2012, 3, 10–16.

31. Wang, W.-Y.; Тан, М.-С.; Ю, J.-T.; Тан, Л. Роля на провъзпалителни цитокини, освободени от микроглия при болестта на Алцхаймер. Ан. Превод Med. 2015, 3. [CrossRef]

32. Смит, JA; Das, A.; Рей, SK; Banik, NL Роля на провъзпалителни цитокини, освободени от микроглия при невродегенеративни заболявания. Brain Res. Бик. 2012, 87, 10–20. [CrossRef] [PubMed]

33. Ху, Х.; Li, Z.; Жу, X.; Лин, Р.; Chen, L. Salidroside намалява мобилността на клетките чрез NF-κB и MAPK сигнализиране в LPS-индуцирани BV2 микроглиални клетки. Evid. Базирана допълваща алтернатива. Med. 2014, 2014, 383821. [CrossRef]

34. Tambuyzer, BR; Ponsaerts, P.; Nouwen, EJ Microglia: Пазачи на имунологията на централната нервна система. J. Leukoc. Biol. 2009, 85, 352–370. [CrossRef] [PubMed]

35. Лий, Д.-С.; Jeong, G.-S. Бутеинът осигурява невропротективни и анти-невроинфламаторни ефекти чрез експресия на Nrf2/ARE-зависима хемоксигеназа 1 чрез активиране на пътя PI3K/Akt. бр. J. Pharmacol. 2016, 173, 2894–2909. [CrossRef]

36. Мацуно, Р.; Aramaki, Y.; Tsuchiya, S. Участие на TGF- в инхибиторни ефекти на отрицателно заредени липозоми върху производството на азотен оксид от макрофаги, стимулирани с LPS. Biochem. Biophys. Рез. Общ. 2001, 281, 614–620. [CrossRef] [PubMed]

37. Джан, Дж.; Fujii, S.; Wu, Z.; Хашиока, С.; Танака, Й.; Shiratsuchi, A.; Наканиши, Й.; Nakanishi, H. Участие на COX-1 и повишени простагландин Е синтази в индуцираното от фосфатидилсерин липозома производство на простагландин Е2 от микроглия. J. Neuroimmunol. 2006, 172, 112–120. [CrossRef]

38. Ramos, GC; Фернандес, Д.; Чаро, Кънектикът; Souza, DG; Teixeira, MM; Assreuy, J. Апоптотична мимикрия: Фосфатидилсериновите липозоми намаляват възпалението чрез активиране на рецептори, активирани от пероксизомен пролифератор (PPARs) in vivo. бр. J. Pharmacol. 2007, 151, 844–850. [CrossRef]

39. Абе, Н.; Нишихара, Т.; Йорозуя, Т.; Tanaka, J. Microglia и макрофаги в патологичните централни и периферни нервни системи. Клетки 2020, 9, 2132. [CrossRef] [PubMed]

40. Chen, C.-H.; Hsieh, M.-F.; Хо, Y.-N.; Huang, C.-M.; Lee, J.-S.; Yang, C.-Y.; Chang, Y. Подобряване на проникването на катехин през кожата чрез новоизработена MPEG-PCL-графт-2-хидрокси целулозна мембрана. J. член. Sci. 2011, 371, 134–140. [CrossRef]

41. Партхасарати, С.; Bin Azizi, J.; Раманатан, С.; Исмаил, С.; Сасидхаран, С.; каза, MIM; Mansor, SM Оценка на антиоксидантна и антибактериална активност на водни, метанолови и алкалоидни екстракти от листата на Mitragyna speciosa (семейство Rubiaceae). Молекули 2009, 14, 3964–3974. [CrossRef] [PubMed]

42. Ерера, Д.; Молина, А.; Булин, К.; Klinge, B. Пародонтални заболявания и връзка с атеросклеротично заболяване. Пародонтология 2000 2020, 83, 66–89. [CrossRef] [PubMed]

43. Батиста, CRA; Gomes, GF; Candelario-Jalil, E.; Fiebich, BL; de Oliveira, Индуцирано от ACP липополизахарид невровъзпаление като мост за разбиране на невродегенерацията. Вътр. J. Mol. Sci. 2019, 20, 2293. [CrossRef]

44. Крийс, И.; Бърт, DR; Snyder, SH Повишаването на свързването с допаминови рецептори придружава индуцирана от лезия поведенческа свръхчувствителност. Science 1977, 197, 596–598. [CrossRef] [PubMed]