Изолиране и идентифициране на фенилетанол гликозиди от Cistanche Deserticola

Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com

въведение

Cistanche deserticolaсъбрани в китайската фармакопея е сухото месесто стъбло наCistanche deserticola, растение Orobanchaceae, което е често използвано лекарство за тонизиране на бъбреците в традиционната китайска медицина. Има много разновидности на Cistanche deserticola и има много изследователски доклади за Cistanche salsa иCistanche tubulosaв литературата, но има малко изследвания върху сортовете, събрани във фармакопеята. Luo Shangfeng и други са получили манитол, 8-епигастрална киселина и аминокиселина от Cistanche deserticola. За по-нататъшно развитие и проучване на Cistanche, Факултетът по фармация, Медицинският колеж в Синдзян извлича и разделя неговите водоразтворими компоненти – фенилетанол гликозиди. Резултатите показаха, че четири компонента са разделени и идентифицирани, те саехинакозид, кастанозид А,актеозиди 2'-ацетилактеозид. Горните компоненти имат фармакологични ефекти като насърчаване на бъбречните функции ипротив стареене.

Експериментална част

Експерименталните медицински материали са закупени от компанията за медицински материали Urumqi и са произведени в окръг Jinghe. Разновидностите са идентифицирани от Li Jiazheng, асоцииран изследовател на Синдзянския институт по етническа медицина. Моделът на макропореста смола беше AB-B, който е химически продукт на университета Нанкай. Силикагелът, използван в слоя на колоната, е продукт на морския химически завод в Кингдао, Stephan-dex LH-20 е продукт на фармацевтичната фабрика в Шанхай Чанджън. Моделът на UV спектрофотометъра беше Shimadzu UV-360. Инфрачервеният спектрофотометър беше Shimadzu IR-440. Моделите на H-NMR и C-NMR инструменти бяха Bruker MSL-300 (300 мегацикъла)

1. Извличане и разделяне

Извлечен Cistanche deserticola10 kg три пъти чрез обратен хладник с етанол, смесете екстракта и го концентрирайте до паста при понижено налягане, добавете малко количество вода за суспензия, обезмаслете го с етил ацетат, екстрахирайте го с n-бутанол, комбинирайте екстракта, концентрирайте го, за да изсъхне при понижено налягане, добавете малко количество вода за разтваряне, последователно събирайте и концентрирайте метаноловата част през колона с макропореста смола и колона с полиамид (промийте първо с вода и след това с метанол). Общите гликозиди на фенил етанол се получават от колонния слой силикагел. С CHCl3-MeOH (10:3 до 10:5) градиентно елуиране бяха събрани общо 78 потока (около 300 ml на поток), от които 16-23 бяха сурови съединения IV (2,1g), 28-42 бяха сурови съединения III (5.4g), 48-61 бяха сурови съединения II (3.2g), 65-78 бяха сурови съединения I (5.1g). Горните компоненти се пречистват чрез колонна хроматография със силикагел (условията на елуиране са същите като по-горе) и след това се пречистват чрез декстран гел колона LH-20. Елуира се с CH3OH: H20 (1:1) и се събира метаноловата част, за да се получат мономерни съединения IV (1,3 g), III (3,5 g), II (1,8 g) и I (3,5 g)

2. Идентификация

Съединение I: светложълт аморфен прах, реакция на FeCl3 и - положителен тест за нафтол, Rf стойност на тънкослойна хроматография върху силикагел от 0.3 (CHCl3:MeOH:H2O=6:4:1 разширение, 20 процент откриване на пръскане H2SO4), UV λ (MeOH/nm): 244, 292, 333. IR (KBr/MAX): cm-1: 3360, 1690, 1625, 1598, 1518. H-NMR (метанол- d1) δ: 1,08 (3H, D, J=6Hz, CH3), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-) , 4.29, 4.39 (1H, D, J=8Hz, два крайни протона на глюкоза), 5.18 (1H, D, J=1Hz, рамнозилни крайни протони), 6.28 (1H, J{{50 }}Hz, Ar-CH=CH-), 6.5-7.1 (6Н, арил Н), 7,59 (1Н, D, J=16Hz, Ar-CH{ {63}}CH-) C-NMR данните са показани в таблица 1. Горната химическа реакция и спектралните данни са в съответствие с доклада наехинакозидв литературата. Следователно, съединение I се идентифицира като ехинакозид.

Съединение II: светложълт аморфен прах, реакция на FeCl3 и - тестът с нафтол е положителен и тънкослойна хроматография върху силикагел Rf 0.35 (условията за проявяване и откриване са същите като по-горе). Неговите UV и IR спектри бяха много подобни на тези наехинакозид, но H-NMR се появи 5 3.84 (3H, s) сигнал, C-NMR се появи 56.5 сигнал, което показва, че структурата съдържа 1 метокси. UV λ (MeOH/nm): 246, 290, 333. IR (KBr/MAX) cm-1: 3350, 1655, 1620, 1596, 1508. H-NMR (метанол-d1) δ: 1,08 (3H, d, J=6Hz, метилова група в рамноза), 286 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2- CH2-), 3.84 (3H, s, OCH3), 4.28, 4.39 (1H, d, J=8Hz, два протона от крайната група на глюкозата), 5.18 (1H, s, протоните от крайната група на рамноза), 6.27 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6.65-7.1 (6H, арил Н), 7.60 (1H, d , J=16Hz, Ar-CH=CH-). Вижте Таблица 1 за C-NMR данни, горните спектрални данни са в съответствие с литературната стойност на кастанозид А. Следователно, съединение II е идентифицирано като кастанозид A Съединение III: светложълт аморфен прах, тънкослойна хроматография върху силикагел Rf стойността е 0,40 (разработване и условията за откриване са същите като по-горе). Неговите UV и IR спектри също са подобни на тези на ехинакозида. Има един глюкозен краен протон по-малко в H-NMR и един глюкозен сигнал по-малко в C-NMR, което предполага, че това е дизахарид. UV λ (MeOH/nm): 247, 292, 334. IR (KBr/MAX): 3350, 1690, 1625, 1600, 1515. H-NMR (метанол-dl) 5: 1.10 (3H, d, J{{ 83}}Hz, рамноза метил), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,38 (1H, d, J{{94} }Hz, глюкозен краен протон), 5,19 (1H, d, J=1Hz, рамнозен краен протон), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 65-7.1 (6Н, арил Н), 7,59 (1Н, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). C-NMR данните са показани в таблица 1. Горните спектрални данни са в съответствие с литературните стойности наактеозид, така че съединение LII се определя катоактеозид.

Съединение IV: светложълт аморфен прах. Rf стойността на тънкослойна хроматография със силикагел е 0.42 (условията за проявяване и откриване са същите като по-горе). Неговите спектрални данни са много подобни наактеозид. Има още един пик на абсорбция от 1735cm-1 в инфрачервения спектър и H-NMR показва сигнали от ацетилната матрица на δ1.98(3H.S), а C-NMR показва сигнали от въглеродни и метилови групи на δ171.5 и 20.9. Съгласно закона за изместване на глюкозилирането, ацетилирането се намира на 2'захарната хидроксилна група. X (MeOH/nm): 247, 292, 333. IR (KBr/MAX): 3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-NMR (метанол-dl) 5: 1.08 (3H, d, J{ {27}}Hz, рамноза метил), 1.98 (3H, s. OAc), 2.70 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4.50 (1H, d=8Hz, глюкозен краен протон), 5.19 (1H, d, рамнозен краен протон), 6.28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 65-7.1 (6Н, арил Н), 7,60 (1Н, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). C-NMR данните са показани в таблица 1. Горните спектрални данни са в съответствие с литературната стойност на 2'-ацетилактеозид, така че съединение IV е потвърдено, че е 2'-ацетилактеозид.