Инхибиторът на JAK блокира индуцираното от COVID{0}}цитокини JAK-STAT-APOL1 сигнализиране в гломерулни клетки и подоцитопатия в човешки бъбречни органоиди

Резюме

Причини за заразяване с COVID-19колапс на гломерулни капиляриизагуба на подоцити, завършваща на aтежко бъбречно заболяванеНареченСвързана с COVID{0}}нефропатия(COVAN). Основният механизъм на COVID-19 не е известен. Ние предположихме, че цитокините, индуцирани от COVID-19, задействат експресията на патогенен APOL1 чрез JAK-STAT сигнализиране, което води до загуба на подоцити и COVAN фенотип. Тук, въз основа на девет доказани с биопсия случая на COVAN, ние демонстрирахме за първи път, че APПротеинът OL1 се експресира изобилно в подоцитите игломерулен ендотелклетки (GECs) на COVAN бъбреците, но не и в контролите. Освен това, мнозинството (77,8%) от пациентите на COVAN са носили двеAPOL1рискови алели. Ние показахме, че рекомбинантните цитокини, индуцирани от SARS-CoV-2, действат синергично за задвижванеAPOL1експресия чрез JAK-STAT пътя в първични човешки подоцити, GECs имикроорганоиди на бъбрецитеполучени от носител на двеAPOL1рискови алели, но бяха блокирани от JAK1/2-инхибитора, барицитиниб. Демонстрирахме за първи път, че индуцираното от цитокини JAK-STAT-APOL1 сигнализиране намалява жизнеспособността на органоидните подоцити на бъбреците, но е спасено от барицитиниб. Заедно нашите резултати подкрепят заключението, чеЦитокини,-19-предизвикани от COVIDса достатъчни, за да управляват свързаната с COVAN подоцитопатия чрез JAK-STAT-APOL1 сигнализиране и този JAK-инхибитор може да блокира този патогенен процес. Тези констатации предполагат, че JAK-инхибиторите могат да имат терапевтични ползи за управление на индуцирана от цитокини APOL1-медиирана подоцитопатия.

Поддържаща услуга на Wecistanche-най-големият износител на cistanche в Китай:

Имейл:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/телефон:+86 15292862950

Пазарувайте за повече подробности за спецификациите:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

ВЗЕМЕТЕ НАТУРАЛЕН ОРГАНИЧЕН ЕКСТРАКТ ОТ ЦИСТАНША С 25% ЕХИНАКОЗИД И 9% АКТЕОЗИД ПРИ БЪБРЕЧНИ ИНФЕКЦИИ

Въведение

Бъбречната недостатъчност е опустошително усложнение наCOVID-19 инфекция. До 50% от болничните и 70% от отделенията за интензивно лечение с COVID-19 са усложнени от остро бъбречно увреждане (ОБН), което от своя страна увеличава смъртността с 30-50% (1, 2). Серия от случаи на биопсия на бъбрек разкри, че колапсиращата гломерулопатия е най-честата хистопатологична диагноза при ОПП, свързано с COVID-19- (3). Отличителна черта на колабиращата гломерулопатия, свързана с COVID-19- (съкратено COVAN), е нейното почти изключително предразположение към афро-американци или чернокожи, които носят два рискови алела на аполипопротеин L1 (APOL1) (3, 4). Двата рискови алела (наречени G1 и G2) се появяват като кодиращи варианти в гена APOL1 и осигуряват защита срещу африканска трипанозомиаза. Въпреки това, носителството на G1G1, G2G2 или G1G2 (наречени високорискови генотипове) увеличава риска от спектър от бъбречни заболявания и обяснява голяма част от повишения риск от недиабетно бъбречно заболяване сред афро-американците (5-8). Приблизително 13% от афро-американците носят високорискови APOL1 генотипове (7). По време на пандемията от COVID-19 проучвания установиха, че забележителните 92% от доказаните чрез биопсия случаи на COVAN са били при носители на високорискови генотипове APOL1, 61% от които са имали нужда от диализа при представяне (3, 9). Тези констатации установяват, че вариантите на APOL1 са основен фактор за расовото несъответствие в здравните резултати от COVID-19. Въпреки тази впечатляваща връзка, клетъчният механизъм, който свързва високорисковите APOL1 генотипове с инфекцията SARS CoV-2 и патогенезата на колабиращата гломерулопатия на COVAN остава неизвестен.

Силната епидемиологична връзка между високорисковия генотип APOL1 и COVAN доведе до хипотезата, че COVID-19-индуцираната експресия на APOL1 G1 или G2 в подоцити и гломерулни ендотелни клетки - бъбречните клетки, повлияни от колабираща гломерулопатия - задвижва патогенезата на COVAN. Тази хипотеза беше подкрепена от скорошни доклади, че трансгенната свръхекспресия на рискови алели на APOL1 в миши подоцити или гломерулни ендотелни клетки причинява подоцитопатия, ендотелиопатия, гломерулопатия и клинични прояви на бъбречна недостатъчност (10-14). Тези модели на миши болести предполагат, че механизмът, който стои в основата на експресията на APOL1, предизвикана от COVID-19-, би бил потенциална терапевтична цел за COVID-19. Има обаче две важни неизвестни. Първо, не е известно дали експресията на APOL1 протеин се регулира нагоре в гломерулите на пациенти с COVAN. Второ, не е известно дали SARS-CoV-2 индуцира експресия на APOL1 директно чрез вирусна инфекция на бъбречни клетки или индиректно чрез ефектите на индуцирана от SARS-CoV-2-цитокинова буря.

Неуспешното откриване на SARS-CoV-2 вбъбречни биопсии на COVANпациенти осигурява косвена подкрепа за хипотезата, че COVAN вероятно е резултат от ефектите на цитокинова буря, а не от директна вирусна инфекция на бъбречния паренхим. Случайното откриване на SARS-CoV-2 вирусни частици е в бъбречни проби от аутопсия, при които не може да се изключи объркващият ефект на тъканната автолиза (3, 4, 15, 16). Забелязано е, че няколко възпалителни цитокини и хемокини се регулират нагоре всеруми на пациенти с COVID-19и/или COVAN (4, 17, 18). Този списък включва цитокини като интерферони алфа, бета, гама и TNF, за които е известно, че повишават експресията на APOL1. Списъкът обаче включва и няколко възпалителни цитокини, които се регулират силно от инфекция с COVID-19. Не е известно дали тези цитокини имат адитивен, синергичен или антагонистичен ефект върху експресията на APOL1 и свързаната подоцитопатия.

В настоящото проучване ние се справихме с тези пропуски в знанията, като използвахме бъбречни биопсии, получени от девет пациенти с COVAN и два човешки контролни бъбрека, за да проучим дали и къде протеинът APOL1 се експресира в COVAN и контролните бъбреци. Профилирахме осемнадесет цитокини, индуцирани от COVID-19-, за да идентифицираме осем цитокина, които бяха достатъчни, в отсъствието на SARS-CoV-2, за синергично индуциране на експресия на APOL1 в първични човешки гломерулни клетки и причиняване на подоцитопатия в човешки бъбречни микро- органоиди. Това проучване не само предлага първото доказателство в експериментален модел, получен от хора, че цитокиновата буря на COVID-19 индуцира експресия на APOL1 и подоцитопатия, но също така идентифицира общия сигнален път, който медиира патогенните ефекти. Това проучване има последици, които биха могли да повлияят на стратегиите за скрининг и лечение на COVID-19 при чернокожи и испанци. Това повдига въпроси относно безопасността на допълнителните интерферони като терапия срещу COVID-19 при чернокожи и испанци, които носят високорискови APOL1 генотипове (19, 20).

Резултати

Експресията на APOL1 се регулира нагоре в подоцити и гломерулни ендотелни клетки на пациенти с COVAN. За да проучим дали пациентите с доказана чрез биопсия диагноза COVAN имат повишена експресия на протеин APOL1 в техните подоцити и гломерулни ендотелни клетки (GECs), извършихме имунохистохимично съвместно оцветяване на APOL1, синаптоподин (свързан с актин протеин на диференцирани подоцити) и CD31 (ендотелен клетъчен маркер) върху бъбречни биопсии на двама пациенти с диагноза COVAN (Фигура 1). Експресията на APOL1 беше изобилна в гломерулите както на случай 1, който беше биопсиран десет месеца след диагностицирането на COVID-19 (Фигура 1A-F), така и на случай 6, който беше биопсиран девет дни след диагностицирането на COVID-19 (Фигура 1G-L). И при двамата пациенти имаше силно оцветяване с APOL1 в синаптоподин-позитивни подоцити (стрелка; Фигура 1B, E, H и K) и по протежение на CD31-положителен гломерулен ендотел (върх на стрелка; Фигура 1C, F, I и L ). Наличието на протеин APOL1 в подоцитите и GECs на моменти 9 дни и 10 месеца след диагностицирането на инфекцията с COVID-19 предполага, че експресията на APOL1 се индуцира рано и може да персистира в гломерулите няколко месеца, дълго след отключващия COVID{{ 27}} инфекцията е разрешена.

Експресията на APOL1 се регулира нагоре в биопсична тъкан на случаи на COVAN, но не и в контролите. За по-нататъшна оценка на възможността за обобщаване на тези имунохистохимични находки, ние идентифицирахме общо девет случая на COVAN с налична тъкан за биопсия за генотипиране и IHC (Фигура 2), както и двама контролни пациенти, включително една контролна аутопсия на пациент с COVID{{2 }} инфекция, но не е развил AKI (Фигура 2B и 2C). Класическите хистопатологични характеристики на COVAN включват колапс на гломерулни капилярни снопчета с хипертрофия и пролиферация на съседни подоцити, често с капчици реабсорбция на подоцитен протеин, свързани с гломерулна протеинурия (допълнителна фигура 1 и гъвкава фигура 2). Оцветяването с APOL1 IHC отсъства във всички гломерули на контролите (Фигура AC), но присъства в гломерулите на всичките девет пациенти с COVAN (Фигура 2D-X). Оцветяването с APOL1 беше в изобилие в цитоплазмата на подоцитите, GECs и в някои париетални епителни клетки (Фигура 2N, зачеркнат кръг) (Фигура 1, Фигура 2 и Допълнителна фигура 3). Протеинът APOL1 може да се види в гломерули с отворени капиляри, както и в области на гломерулен колапс. Очевидното присъствие на протеин APOL1 в капилярен лумен вероятно представлява циркулиращ APOL1, който се произвежда предимно от черния дроб (21). Освен това, APOL1 се наблюдава и в перитубулни капиляри и в увредени тубулни епителни клетки (звездички). Специфичността и значението на това последно откритие не са ясни. Трябва да се отбележи, че седем от деветте случая на COVAN носят високорисков генотип APOL1 (Фигура 2D-V). Другите два случая, случай 9 и случай 4, носят нискорискови G0G0 генотипове (Фигура 2W и 2X). Въпреки че е от генотип с нисък риск, експресията на APOL1 в случай 9 е сравнима с тази на седемте високорискови случая (Фигура 2W). Имаше само два гломерула в случай на слайд от 4 бъбречна биопсия и експресията на APOL1 беше по-ниска в тези гломерули (Фигура 2X). Заедно тези открития показват, че базалната бъбречна експресия на APOL1 е ниска в гломерулите на индивиди без гломерулно увреждане, дори когато индивидът има инфекция с COVID-19; докато експресията на APOL1 се регулира нагоре в подоцитите и GECs в условията на COVAN в 89% от нашите случаи.

Както е показано в таблица 1, седем от деветте пациенти (77,8%) с доказан чрез биопсия COVAN се идентифицират като афроамериканци. Шест от тези седем пациенти (85,7%) носят високорискови APOL1 генотипове (четири G1G1, един G1G2, един G2G2). За сравнение, 13% от афро-американците носят високорисков генотип APOL1. Останалите двама пациенти се самоопределиха като бели испанци, но по-специално, един от тях също носеше високорисков генотип APOL1. Общо седем от деветте пациенти с COVAN (77,8%) носят високорискови APOL1 генотипове. Средната възраст на случаите е 51 години (диапазон 37-60). Всичките девет случая са развили остро бъбречно увреждане и са имали различна степен на протеинурия, варираща от субнефротичен до нефротичен диапазон (1.4- 14 g/24 часа). Повечето биопсии са извършени най-малко 1 месец след заразяване с COVID-19, с изключение на случай 6, който е биопсиран 9 дни след положителен PCR тест. Биопсията на един пациент не е извършена до 10 месеца след инфекцията, вторична поради непълно възстановяване. Всичките девет биопсии на пациенти показват колабираща гломерулопатия, тубулно увреждане и интерстициално възпаление. В нито един от случаите не са наблюдавани ендотелни тубулни ретикуларни включвания. Трябва да се отбележи, че в двете биопсии на COVAN, които бяха тествани за директна SARS-CoV-2 вирусна инфекция чрез IHC и in situ хибридизация, не беше открит вирус (данните не са показани).

Рекомбинантни COVID-19-индуцирани цитокини синергично повишават експресията на APOL1 в първичните човешки гломерулни ендотелни клетки и подоцити. За да изследваме дали индуцираната от COVID-19-цитокинова буря е достатъчна, за да предизвика експресия на APOL1 в човешки гломерулни клетки, култивирахме първични човешки подоцити, изолирани от починал донорен бъбрек и първични човешки гломерулни ендотелни клетки (GECs) в 1 от 18 цитокини и хемокини преди това се съобщава, че са повишени в серума на пациенти със SARS-CoV-2 (Фигура 3A) (4, 17). Идентичността на подоцитите беше потвърдена с множество маркери на подоцити, включително тумор на Wilms1, синаптоподин, нефрин и подокаликсин (Фигура 3B и Допълнителна фигура 4A-B). GEC идентичността се потвърждава чрез експресия на PECAM1 спрямочовешки ембрионален бъбрек293 cells (HEK) (Figure 3C). Induced APOL1 expression was quantitated by qPCR and immunoblot after 48hr treatment in GECs (Figure 3D and 3F) and podocytes (Figure 3E and 3G). Consistent with prior report (22), we found that interferons (gamma > beta > alpha) robustly induced expression of APOL1 in both GECs and in podocytes. Similarly, we found that TNF also induced a modest APOL1 expression in GECs and podocytes. Unexpectedly, we found that three cytokines-IL-6, IL-1β, and IL-18, which were previously unrecognized as inducers of APOL1 expression, also individually induced modest APOL1 expression in GECs or podocytes. Notably, the combination of all 18 recombinant cytokines produced a synergistic upregulation of APOL1 that was an order of magnitude higher than that produced by any of the interferons alone (Figure 3D). These effects were not only observed with cytokine concentration of 50ng/mL (Figures 3D and 3E) but also at 20ng/mL and 10ng/mL (Supplemental Figure 5). Cytokine conditions inducing >1,5-кратният APOL1 транскрипт в сравнение с третираната със среда контрола беше допълнително анализиран за значимост. Значимостта беше оценена с помощта на несдвоен t-тест с корекция на Holm-Sidak за множество сравнения. Отчетените P-стойности са коригираните p-стойности. Тези резултати разширяват списъка от физиологични цитокини, които са способни да индуцират експресия на APOL1 отвъд добре познатите интерферони и TNF. Важно е, че констатациите също предполагат, че синергията на индуцираните от COVID{10}}цитокини може да е по-уместна за регулирането на APOL1, отколкото въздействието на изолиран цитокин самостоятелно.

JAK-STAT сигнализирането посредничиCOVID{0}}индуцирана от цитокини APOL1 експресия. След това проучихме дали индуцираните от COVID{0}} цитокини повишават експресията на APOL1 чрез общ вътреклетъчен сигнален път, който може да се използва като терапевтична цел. По-рано беше съобщено, че индукцията на интерферон на APOL1 се медиира от JAK-STAT1/2 (22, 23). Показано е, че предаването на сигнал през IL-6 рецептора се медиира от STAT3 и се съобщава, че както IL-1, така и TNF индиректно активират STAT3 (24, 25). Интересно е, че Meliambro et al наскоро съобщиха за повишена регулация на фосфо-STAT3 в биопсичната тъкан на случай на COVAN и HIV-свързана нефропатия (HIVAN) в сравнение с контролата (26). Въз основа на тази основна информация предположихме, че пътищата JAK1/2-STAT1/2/3 са основните медиатори на ефектите на индуцираните от COVID-19-цитокини при стимулиране на експресията на APOL1. За да тестваме тази хипотеза, ние определихме състоянието на тези сигнални пътища чрез измерване на фосфорилираните STAT1, 2 и 3 в лизати на GEC след култивирането им в индивидуални или комбинирани цитокини в продължение на 48 часа (Фигура 3F). Интерфероните тип I (IFN и IFN) повишават фосфорилирането на STAT1-3, докато IFN повишава фосфорилирането на STAT 1 и 3. IL-1, TNF и IL-6 повишават фосфорилирането само на STAT3. Комбинираните цитокини повишават фосфорилирането на STAT1-3. Знаейки, че JAK1 и JAK2 са първичните протеин кинази нагоре по веригата, които фосфорилират STAT1-3, ние предположихме, че инхибирането на JAK1/2 ще блокира експресията на APOL1, индуцирана от „всички цитокини“. В съответствие с тази прогноза открихме, че JAK1/2-специфичен инхибитор, барицитиниб, значително намалява APOL1 иРНК и експресията на APOL1 от третирани с изцяло цитокини GEC и първични подоцити (Фигура 3D G). Заедно тези резултати показват, че сигнализирането на JAK-STAT е основният път, който медиира индуцираната от COVID-19-цитокини APOL1 експресия.

Индуцирани-19-COVID цитокини са достатъчни, за да стимулират експресията на APOL1 в бъбречни микроорганоиди, получени от човешки iPSC, чрез JAK-STAT пътя. Микроорганоидът на човешки бъбрек е доказана платформа за моделиране на бъбречно заболяване при хора и улесняване на клиничния превод. Попитахме дали резултатите, които получихме от първични човешки подоцити и GECs, са генерализирани и потвърдени от човешки микроорганоиден модел на бъбрек. Следователно, ние генерирахме бъбречни микроорганоиди от индуцирани плурипотентни стволови клетки (iPSC) на афроамерикански носител на генотип G1G2 APOL1, за да изследваме регулацията, експресията и резултатите на APOL1 в този модел (Фигура 4А). Ние култивирахме бъбречни микроорганоиди в IFN 10 ng/mL или комбинация от осем цитокина (IFN, IFN, IFN, IL-18, IL-8, IL-6, TNF, IL{{18 }} ) всеки при 10 ng/mL или в отсъствието, или в присъствието на барицитиниб, 10 µM за 24 часа. Тези осем цитокина бяха избрани поради наблюдаваната им регулация на експресията на APOL1 в предходните експерименти. Подоцитите и тубулните епителни клетки в микроорганоидите на бъбреците са потвърдени с маркер (Фигура 4В). В съответствие с литературата (27), ендотелните клетки са недостатъчно представени в бъбречните микроорганоиди (данните не са показани). Открихме, че базалната експресия на APOL1 протеин е ниска в микроорганоидите. Третирането с IFN индуцира значителна експресия на APOL1, с най-висок интензитет, локализиран съвместно в области на подоцитен маркер, подокаликсин. Коктейлът от цитокини индуцира извънгабаритна и силна експресия на APOL1 в цялата микроорганоидна структура в сравнение с други лечения. Групите, третирани с IFN плюс барицитиниб и всички цитокини плюс барицитиниб, не показват експресия на APOL1, което съответства на пълното инхибиране на цитокиновия ефект. Експресията на APOL1 в бъбречните микроорганоидни подоцити напомня тази, наблюдавана в подоцитите на пациенти с COVAN. Въпреки това, за разлика от бъбреците на COVAN, при които не се наблюдава значителна експресия на APOL1 в здрави тубулни епителни клетки, бъбречните микроорганоидни E-Cadherin-положителни тубулни епителни клетки експресират APOL1. Тази разлика може да се дължи на разлики в мембранните цитокинови рецептори или епигенетични фактори, които влияят на протеиновата експресия в незрелите тубули на бъбречните микроорганоиди. В обобщение, получените от човешки iPSC бъбречни микроорганоиди, култивирани с индуцирани от COVID-19-цитокини, показват силна регулация на патогенния протеин G1G2 APOL1 и експресията е блокирана чрез инхибиране на JAK-STAT сигнализацията.

Индуцираното от цитокини JAK-STAT-APOL1 сигнализиране намалява жизнеспособността на бъбречните микроорганоидни подоцити, които са спасени от JAK-инхибитор. И накрая, попитахме дали G1G2 APOL1, експресиран в бъбречни микроорганизми, уврежда жизнеспособността на подоцитите. Ние предположихме, че цитокин-индуцираният вариант на протеин APOL1 ще причини загуба на подоцити - отличителен фенотип на COVAN. За да тестваме тази хипотеза, ние изолирахме подоцити от бъбречни микроорганоиди, генерирани от iPSCs на носител на G1G2. Подоцитите се култивират в IFN (10 ng/mL) или комбинация от осем цитокина (10 ng/mL всеки), както в присъствието, така и в отсъствието на барицитиниб (10 µM) за 96 часа (Фигура 5А и В). Лечението с цитокини силно индуцира експресия на APOL1 и тази експресия беше блокирана от барицитиниб, в съответствие с нашите по-ранни експерименти (Фигура 5C). Съответно, лечението с цитокини причинява значителна загуба на подоцити, както е показано чрез анализ на жизнеспособността и общия клетъчен АТФ (Фигура 5D и 5E). Забележително е, че барицитиниб напълно спасява индуцираната от цитокини загуба на подоцити. Заедно тези резултати подкрепят заключението, че индуцираните от COVID-19-цитокини задействат JAK-STAT-APOL1 сигнализиране, което от своя страна причинява нараняване и загуба на подоцити. Защитният ефект на JAK-инхибирането върху жизнеспособността на подоцитите силно подкрепя тази хипотеза.

Дискусия

Основните заключения от настоящото проучване са, че няколко индуцирани от COVID-19- цитокини извън интерфероните действат синергично чрез JAK-STAT сигнализиране, за да стимулират експресията на патогенен APOL1, което води до увреждане и загуба на подоцити, което се блокира от инхибирането на JAK. Въз основа на серия от случаи, ние демонстрираме за първи път, че протеинът APOL1 се експресира в изобилие в подоцити и GECs на пациенти, диагностицирани с COVID-19, но не и в гломерулите на здрави контроли, нито на COVID-19-положителни, а COVAN-отрицателна контрола. В три експериментални модела ние демонстрираме, че рекомбинантните цитокини, регулирани нагоре при инфекция с COVID-19, са достатъчни, за да стимулират стабилна експресия на APOL1, и неочаквано, че силният синергизъм, произведен от комбинация от цитокини, е медииран предимно чрез общ вътреклетъчен сигнален път. Взети заедно, нашите експериментални доказателства силно подкрепят причинно-следствената връзка между индуцираното от цитокини JAK-STAT-APOL1 сигнализиране и in vivo COVAN гломеруларен фенотип и подкрепят по-нататъшното изследване на тази терапевтична цел.

Повишената честота на високорисковия APOL1 генотип (77,8%) сред пациентите с COVAN, която докладваме тук, корелира с скорошен международен многоцентров патологичен преглед, който съобщава за високорисков APOL1 генотип при 91,7% от пациентите с COVAN (3). Като се има предвид, че честотата на високорисковия APOL1 генотип в общото афро-американско население е 13% (28), откриването на честота от 77-90% в COVAN е дълбоко и сравнимо с 60-70% честота, отчетена в HIV-свързана нефропатия (HIVAN) (28-31). Съществуването на останалите 20-30% от случаите на COVAN (и HIVAN), които не носят високорискови APOL1 генотипове, предполага възможността за APOL{{20}}независим патомеханизъм или възможността, че в някои случаи, индуцираната от COVID-19-супрафизиологична експресия на G0 APOL1 също може да причини подоцитопатия. Разборът на тези възможности ще изисква допълнителни проучвания. Въпреки това преди това демонстрирахме вчовешки ембрионален бъбрек(HEK) клетки с тетрациклин-индуцируема APOL1 експресионна система, че цитотоксичността на APOL1 зависи както от варианта, така и от дозата (32, 33). Дозозависимата цитотоксичност на APOL1 е докладвана и от други изследователи в подобни клетъчно базирани системи (34). Нещо повече, моделите на трансгенни мишки APOL1 не само са потвърдили причинно-следствената връзка между рисковите алели на APOL1 и увреждането на подоцитите, но са показали, че степента на подоцитопатия корелира с нивата на експресия на APOL1 (10, 12-14, 35) . Нашето откритие, че осем от девет случая на COVAN демонстрират силна гломерулна експресия на APOL1 спрямо контролите и доказателствата, че експресията на ендогенни рискови алели на APOL1 причинява подоцитопатия в микроорганоиди на човешки бъбрек, подкрепя причинно-следствената връзка между APOL1 и подоцитопатия. Обратно, липсата на APOL1 в гломерулите на COVID-19 положителен, но AKI-отрицателен G0G0 аутопсионен контрол предполага, че COVID-19 инфекция без индуциране на APOL1 не е достатъчен двигател наCOVAN заболяване.