Хормонът мелатонин като терапевтично оръжие срещу невродегенеративни заболявания

Резюме: Мозъчните нарушения като болестта на Алцхаймер и Паркинсон (PD) са необратими състояния с няколко когнитивни проблеми, включително затруднения в ученето, загуба на памет, двигателни аномалии и проблеми с говора. Тези разстройства са причинени от различни фактори, главно поради индуцирани от токсични замърсители биохимични промени в производството на протеини, неконтролирана електрическа активност на невроните и променени нива на невротрансмитери. Оксидативният стрес и токсичността, свързани с повишените нива на глутамат, намаляват нивата на ацетилхолин, а възпалението на мозъка е основният допринасящ фактор. Хормонът мелатонин се счита за един от мощните подходи за лечение на невродегенеративни заболявания.

Кликнете, за да проверите екстракта от памет на Cistanche tubulosa

Мелатонинът се освобождава от епифизната жлеза и е от решаващо значение за регулирането на мозъчната функция. Мембранните рецептори, местата на свързване и химичните взаимодействия медиират хормоналните действия, имащи множество фенотипни изрази. Той действа като невродегенеративен агент срещу някои неврологични разстройства като болестта на Алцхаймер (AD), PD, депресия и мигрена. Мелатонинът инхибира хиперфосфорилирането на тау протеин, предизвикано от невротоксични замърсители, особено при AD. Други основни характеристики на мелатонина са неговите противовъзпалителни свойства, които намаляват експресията на провъзпалителни цитокини и фактори като IL-8, IL-6 и TNF. Мелатонинът също намалява NO (възпалителен фактор). В този преглед ние подчертахме защитните ефекти на мелатонина, като акцентирахме главно върху неговите невропротективни механизми, които ще бъдат от полза при оценката на неговите ефекти при невродегенеративна патология, предизвикана от замърсяване на околната среда.

Ключови думи: болест на Алцхаймер; възпаление; мелатонин; Болестта на Паркинсон; Невродегенеративен агент

Въведение

Болестта на Алцхаймер (AD) е невродегенеративно заболяване, което засяга 2 процента от възрастното население по света (1). Амилоидните плаки и нишковидните обвивки с мозъчна амилоидна ангиопатия са два основни симптома при пациенти с AD. Дисбалансът между синтеза на бета-амилоид (А) от амилоиден прекурсорен протеин и неговия мозъчен клирънс е основната причина за натрупването на А и неговата патогенност (2). Вътреклетъчните А сглобки разрушават ендолизозомно-автофагичната система и последващия синтез на автофагична вакуола и деформирани митохондрии в неврона (3). Съществуват значителни взаимодействия между А и Тау протеините, които са основният протеин, свързан с микротубулите на зрял неврон, който се свързва с микротубулите и стабилизира цялата мрежа от микротубули (4). Бета-амилоидни групи вътре и извън невроните.

От друга страна, интраневроналният хиперфосфорилиран Тау, анализът на дендритните шипове и деградацията на синапсите могат в крайна сметка да доведат до загуба на памет при хора, засегнати от AD. Амилоидните плаки се идентифицират в ранния стадий на AD в кората и хипокампуса, докато се разпространяват от предклиничния стадий към клиничния стадий, разпространявайки се в централната нервна система или ЦНС (5). Свързаните с глия възпаления и невронни смъртни случаи при AD намаляват невронните функции и следователно когнитивните увреждания (6). Болестта на Паркинсон (PD) е друго невродегенеративно заболяване, което засяга около 1,8 процента от възрастните хора. Причинява се от прогресивната загуба на допаминергични неврони в substantia nigra pars compacta (SNpc) в средния мозък и последователна загуба на допамин и клинично се проявява с дефектни двигателни функции, намалени когнитивни функции и депресия. Биохимичните анализи предполагат, че реактивните кислородни видове (ROS) или реактивните азотни видове (RNS) са основни медиатори при PD. Заболяването понякога има генетични връзки и признаци и симптоми на PD вероятно се развиват, поне отчасти, след увреждане на SNpc от свободните радикали. В допълнение, възпалението на невроните и неправилното функциониране на митохондриите допринасят за етиологията на това заболяване и засилват оксидативното увреждане на допаминергичната невронна популация.

След като голям процент от тези клетки бъдат загубени, се появяват признаци на PD (7). Хормонът мелатонин (N-ацетил-5-метокситриптамин) се освобождава от епифизната жлеза на средния мозък и някои периферни тъкани. Този хормон е един от семейството на свързаните с G-протеин рецептори, активиращи вътреклетъчните сигнални пътища (8). Мелатонинът, метаболит на триптофан, има няколко физиологични роли като регулиране на циркадните ритми, отстраняване на свободните радикали, повишаване на имунитета и като цяло инхибиране на окисляването на биомолекулите (9). Този хормон има защитен ефект върху невродегенеративните заболявания (10). При пациенти с AD се съобщава за намаляване на серумното ниво на мелатонин и цереброспиналната течност (CSF) и намаляване на дневния мелатонин.

Освен това, нивата на мелатонин в CSF намаляват след развитие на AD неврон-базирани патологии (11). Съдържанието на мелатонин в CSF и човешките постмортални жлези намалява с първите симптоми на AD невропатология (12). Съществува силна връзка между съдържанието на епифизата, CSF и плазмените нива на мелатонин, което може да бъде ранен маркер в ранните стадии на AD (13). Други характеристики на AD могат да се характеризират със синаптична деградация, неврити или невронална дегенерация, ендозомна агрегация, лизозоми и анормални митохондрии (като екстракорпорални аневризми). Влошаването на синапсите и апоптозата на невроните в лимбичната система причиняват когнитивен дефицит при пациенти с AD (Фигура 1) (14). Разнообразието от функции на мелатонин може да се разпознае като факта, че мелатониновите рецептори са разположени в множество тъкани (15). Мозъчните рецептори за мелатонин могат да се видят в префронталната кора, малкия мозък, хипокампуса, базалното ядро, субстанция нигра, nucleus accumbens, ретината, а също и в различни клетки на хипоталамуса.

Освен това, тези рецептори се разкриват в периферните тъкани като стомашно-чревния тракт, мастната тъкан, панкреаса, яйчниците, кожата, белите дробове, сърцето и лимфоцитите (16). Мелатонинът има два рецептора от общ клас, които включват G-семейство рецептори [(мелатонинов рецептор 1 (MT1) и мелатонинов рецептор 2 (MT2)] и семейство ензими хинон редуктаза [мелатонинов рецептор 3 (MT3)]. MT1 и MT2 могат да инициират клетка сигнални пътища след свързване с техния лиганд, всеки от които води до специфичен отговор (15, 16).Съобщено е понижен имунитет чрез MT2 и повишен имунитет чрез MT1 в хипокампуса на пациенти с AD (17).MT1 и MT2 са уникални рецептори с отличителни фармакологични характеристики и хромозомна локализация МТ1 и МТ2 рецепторите са с дължина съответно 350 и 362 аминокиселини с молекулна маса 39–40 kDa (18).

Тези рецептори сигнализират чрез свързване с хетеротримерен Gi протеин, който съдържа , , и субединици. Активирането на тези рецептори насърчава дисоциацията на G протеини в , , и димери, които взаимодействат с низходящите клетъчни сигнални молекули (19). Молекулите надолу по веригата в МТ1 и МТ2 рецепторите, сигнализиращи чрез G протеиново свързване, включват аденилил циклаза, фосфолипаза С, фосфолипаза А2, калиеви канали, гуанилил циклаза и калциеви канали (20). Тъканите, обогатени с MT1 и MT2 рецептори, включват ретината, мозъка, супрахиазматичното ядро, pars tuberalis, яйчниците, бъбреците, панкреаса, адипоцитите и имунните клетки (21). Други свойства, които считат мелатонина за защитен фактор срещу много заболявания като рак или невродегенеративни заболявания, са неговите антиапоптотични свойства.

Въпреки че мелатониновите антиапоптозни сигнални пътища все още не са напълно идентифицирани, е доказано, че мелатонинът може да се активира от някои защитни пътища, като повишен Bcl-xL, Bcl-2, супер оксидаза дисмутаза и глутатион пероксидаза, или отстраняване на свободните радикали (22). Инхибирането на някои фактори, участващи в апоптозата, като каспаза, намалена активност на MAPK и ERK, предотвратява увеличаването на процеса на разкъсване в клетките, за да осигури защита срещу апоптоза (23). Много проучвания показват ефектите на мелатонина върху AD, мозъчно-съдови заболявания, амиотрофична латерална склероза (ALS) и PD. Проучванията установяват, че появата на тези заболявания обикновено е придружена от загуба на мелатонин или неговите рецептори (24). Други функции на мелатонин включват противовъзпалителни свойства.

Мелатонинът може да повлияе на много възпалителни фактори като NO и NOS (25). Този хормон регулира синтеза на цитокини като IL-6, IL-8 и други възпалителни параметри. Мелатонинът забавя определена прогресия на заболяването (26). El-Shenawy и др. (25) наблюдават антиапоптотичния ефект на мелатонина върху невродегенеративните заболявания. Мелатонинът може да се използва за намаляване на симптомите на Хънтингтън (27). Освен това, in vitro мелатонинът е разкрит, за да противодейства на пътищата на ALS, Паркинсон, инсулт и AD, където мелатонинът предотвратява зависимите от митохондриите апоптотични пътища както in vitro, така и in vivo и пречи на клетъчното оцеляване (28).

Влияние на факторите на околната среда

Доказано е, че множество замърсители на околната среда медиират невродегенерацията чрез промени в фосфорилирането на тау, агрегация на протеини като -синуклеин (-syn), митохондриална дисфункция и промени в металната хомеостаза (29). Проучванията разкриха, че нивата на A 42 и циклооксигеназа 2 (индикатор за невровъзпаление) са по-високи в хипокампуса и фронталния кортекс на хора, изложени на силно замърсяване на въздуха (30). Замърсителите на въздуха активират микроглията и генерирането на провъзпалителни цитокини, което води до вентрикуломегалия (чрез токсичност за олигодендроцитите) и хипомиелинизация (30). Предишни in vivo проучвания върху мишки Tg2576 показват, че острото подкожно приложение на органофосфатен пестицид хлорпирифос (50 mg/kg) увеличава загубата на памет и нивата на А в хипокампуса и кората и намалява двигателната активност след 6 месеца (31).

Въпреки че наночастиците са обещаващи терапевтични инструменти за невродегенеративни заболявания, някои доказателства, които ги свързват с промяна на молекулярните механизми, са включени в патогенезата на невродегенеративните заболявания (32). Ze et al (33) показаха, че назалното приложение на 2,5–10 mg/kg наночастици TiO2 за 90 дни причинява оксидативен стрес, клетъчна смърт в хипокампуса и влошаване на познанието и свързаните с паметта гени. Също така, намаляване на електрофизиологичните крайни точки и пространственото познание беше установено в друго проучване върху плъхове, изложени на 0,5 mg/kg CuO-NPs (14 дни, ip), което съответства на високо ниво на образуване на ROS и липидна пероксидация и понижено ниво на антиоксидантни ензими ( 34). Многобройни експериментални и епидемиологични проучвания подчертаха потенциалния риск от излагане на замърсители на околната среда, включително наночастици, пестициди, метали и развитието на невродегенеративни заболявания (35). Поради подобни механизми на токсичност, базирани на намалените нива на антиоксидантни ензими и генерирането на оксидативен стрес от тези замърсители, естествените антиоксиданти, включително мелатонин, куркумин, ресвератрол и т.н., и техните наноформулации са привлекли повече внимание (35-37).

Мелатонинът предизвиква подобрение при невродегенеративни заболявания

Многобройни проучвания разкриват ефекта на мелатонина върху AD. Проучена е подобрена памет при мишки с Алцхаймер и in vitro намаляване на бета-амилоидната апоптоза от мелатонин (27). В друго проучване, мелатонинът е в състояние да предотврати хиперфосфорилирането на тау протеин чрез инхибиране на cAMP, намаляване на PKA активността и намаляване на CREB фосфорилирането in vitro (38). Мелатонинът има силни противовъзпалителни свойства, които потискат провъзпалителните цитокини и фактори като IL-8, IL-6 и експресията на TNF (39). Тъй като мелатонинът е един от най-добрите антиоксидантни агенти, тъй като директно улавя свободните радикали, той се използва в забележително голям брой експериментални модели, в които се смята, че патогенността се медиира от свободните радикали по един или друг начин (7, 40).

Също така, мелатонинът намалява NO (важен фактор, участващ във възпалението. Освен това, според Tan et al. (41) метаболизмът на AFMK, който има подобни на мелатонин способности, е по-висок при пациенти с менингит, отколкото при нормални индивиди. Korkmaz et al. (42) ) също съобщава, че мелатонинът инхибира възпалителната ензимна активация (Фигура 2). Мелатонинът намалява нитратите чрез намаляване на iNOS в PSLPS / IFN U чрез инхибиране на активността на NFkB. Мелатонинът може също да покаже защитен ефект при травматични дефекти на ЦНС (43). Според Hong et al (44) в модела на хронично SCI (нараняване на гръбначния мозък) мелатонинът намалява вторичното увреждане и ускорява възстановяването чрез инхибиране на липидната пероксидация, предизвикана от неутрофилите.

Ефект на мелатонин върху Akt/протеин киназа (PKB) B път

Този път е ключов медиатор за оцеляване на клетката и фактор на апоптотични стимули. Пътят на PI3K /Akt има основна роля в оцеляването на нервните клетки (45). Когато PI3K се активира, мембранните фосфолипиди произвеждат фосфатидилинозитол, който от своя страна индуцира Akt фосфорилиране, като по този начин се активират фактори като Bcl-2 и инхибира апоптозата (46). Тези протеини са антиапоптотични. Елиминирането на 2-Bcl ендогенни нервни сигнали директно успокоява невронната апоптоза при невродегенеративни заболявания. JNK пътят предотвратява апоптозата при невродегенеративно заболяване (47). Мелатонинът потиска апоптозата, като засяга клетъчното сигнализиране и регулира надолу процеса на апоптоза. По време на прогресията на невродегенеративното заболяване, сигналните каскади се медиират от невронни защитни фактори, включително пътя на активатора на фосфо-инозитол 3 киназа и N-киназа 3 протеин киназа (48).

Ефект на мелатонина върху намаляването на токсичността на А

Молекула (39-43 аминокиселини), производна форма на амилоиден прекурсорен протеин (АРР), има основна функция при AD. АРР е член на фамилията амилоидни прекурсорни протеини APLP1 и APLP2. Всички тези протеини преминават през мембраната наведнъж и имат голяма външна мембранна област. Всички членове на това семейство могат да произвеждат амилоидни фрагменти и нива на регулиране на иРНК надолу от АРР, което води до производство на изоформа, която е най-честата форма в нервната система (49, 50). Вариантите на 695 аминокиселини на АРР са предимно в ЦНС, но вариантите на 751 и 770 аминокиселини се експресират другаде. Подобни проучвания разкриват потенциални свойства за А, които могат да бъдат активирани от кинетични ензими при регулиране на оксидативния стрес (51).

Антифибрилогенните ефекти на мелатонина са разкрити чрез различни микроскопични и спектроскопски техники (52). Освен това се предполага, че реакцията между мелатонин и А е свързана със структурата и свойствата на мелатонина (53). Изследвания от спектрометрични техники са установили, че мелатонинът взаимодейства с около 40 аминокиселинни остатъка на А, особено аспартат и хистидин, които са благоприятни за образуване на -лист. Разрушаването на тези връзки води до разтваряне на молекулата А. Взаимодействието на мелатонин със сукцинатни имидазолкарбоксилатни мостове доведе до превръщане на листова структура в произволни намотки. По този начин мелатонинът не само предотвратява образуването на -лист и намалява невротоксичността, но също така намалява секрецията на А пептид чрез повишено протеолитично разграждане (54).

Свръхекспресията на молекула доведе до клетъчно увреждане, включително липидна пероксидация, повишена концентрация на вътреклетъчен свободен калций, окислително увреждане на митохондриалната ДНК и освободени индикатори за апоптоза. Проучванията показват, че мелатонинът регулира течливостта на вътрешната мембрана на митохондриите и се свързва с мембраната на митохондриите. Потискането на А агрегацията се счита за основен фактор при лечението на AD. Напоследък различни видове изследвания показаха, че мелатонинът може да реагира с молекули А40 и А42, за да предотврати постепенното им прогресиране до листовидни или амилоидни влакна (Таблица 1) (54, 55).

Мелатонинът потиска синтеза на тау протеини

Тау е водещият протеин, намиращ се в аксона, който стабилизира невронните пътища, микротубулите и невронното предаване. Този ген се намира на дългото рамо на хромозома 17 и съдържа 16 екзона (56). Тау присъства не само в невронните аксони, но и в олигодендроцитите. Тау хиперфосфорилираната форма е неразтворима, при което нейната склонност към микротубули е намалена и спонтанно образува сложни взаимосвързани структури (57). Тау протеините се натрупват извън AD и други заболявания на ЦНС (39). Тези видове разстройства са известни като тауопатия. Количеството неврофибриларни струни е един от маркерите за прогноза на AD (58). Основните компоненти на тези спирали са хиперфосфорилирани и натрупани форми на тау протеин.

Подобно на А олигомерите, анормалните тау протеинови междинни агрегати също имат вредни ефекти върху клетките и причиняват когнитивно увреждане. Неразтворимите сложни нишки може да нямат неблагоприятен ефект, но намаленото синаптично предаване и броят на невроните се дължат на вредните ефекти на неврофибриларните спирали. Болестта на Паркинсон е идентифицирала повече от 30 мутации в тау гена на хромозома 17 (59). За разлика от това, няма мутация в тау протеина при AD и образуването на неврофибриларна спирала не е резултат от мутация на тау протеина. Въпреки това, увеличаването на количеството на фосфорилиране на тау в гръбначно-мозъчната течност е пряко свързано с намаляване на резултатите от когнитивните тестове.

Повишените нива на тау фосфорилиран в цереброспиналната течност могат да се прилагат като подходящ биомаркер при прогнозиране и диагностициране на ранните стадии на AD при пациенти с когнитивно увреждане. Инхибирането на синтеза на мелатонин причинява нарушения на пространствената памет при мишки и повишено фосфорилиране на тау чрез потискане на активността на PP-2A (60). Добавянето на мелатонин с 5-хидроксииндол-метилтрансфераза значително повишава задържането на паметта, спира Тау и намалява хиперфосфорилирането, оксидативния стрес и активностите на PP-2A (60).

Защитен ефект на мелатонина върху невровъзпалението

При някои видове пинеалектомията и други експериментални процеси, които инхибират секрецията на мелатонин, стимулират етапа на имуносупресия, който допълнително се обръща чрез прилагане на мелатонин (61). В различни in vivo експериментални модели и in vitro проучвания, мелатонинът индуцира възпалителни цитокини и синтез на азотен оксид. Мелатонинът индуцира Т-лимфоцити, моноцити, естествени клетки убийци, гранулоцити, клетъчно-зависима цитотоксичност и зависим от антителата отговор (62). В допълнение, инхибирането на свързването на NF-кВ ДНК от мелатонин значително намалява провъзпалителния отговор и води до 50% намаление на А-индуцираните провъзпалителни цитокини. Въпреки това, Т-лимфоцитите и NK клетките са от огромен интерес при невронно възпаление. Мелатонинът има противовъзпалителен ефект чрез насочване към IL-6, IL-2, IL-1b, IL-12, IL-1, TNF- и IFN - цитокини (63).

Мелатонинът в моноцитите увеличава образуването на ROS и клетъчната токсичност, което показва двойните ефекти на мелатонина върху възпалението (64). Въпреки това, неговият ефект върху синтеза на моноцити и микроглиални клетки не е докладван. Мелатонинът има значителни ефекти върху промяната на броя на лимфоцитите и други левкоцити в тъканите на периферната имунна система. Въпреки това, тези промени в имунната система по време на юношеството могат да имат неблагоприятен ефект върху здравето и индиректно да засегнат ЦНС. Освен това, мелатонинът насочва инхибирането на простагландин Е2 (PGE2) върху синтеза на IL-2. Той регулира противовъзпалителните фактори L-10 и IL-2 (65).

Тези два противовъзпалителни ефекта на мелатонина в макрофагите се медиират от kB-NF пътя, който включва експресия на циклооксидаза 2 (COX 2) чрез активиране на iOS. Докладите разкриват, че мелатонинът инхибира апикалната апоптоза и фрагментацията на ДНК чрез инхибиране на активността на каспаза-1 и секрецията на IL-1 в мозъчните клетки. Той също така предотвратява възпалението чрез пътищата на фосфорилиране на Akt / K-PI3, JNK и Akt. Мелатонинът регулира апоптотичните сигнали чрез понижаване на фосфорилирането / MEK1, 1-Raf и ERK1, като по този начин предотвратява клетъчното увреждане (66).

Мелатонинът като чистач на свободните радикали

АТФ се произвежда в митохондриалната верига за пренос на електрони по време на клетъчното дишане. При нормални условия 5,5% от кислорода се превръща в приблизително един вид кислород (67). Максималното количество ROS радикали са супероксиден анион (O2), който е съставен от електронен произход на кислородна (O2) молекула. Други евтини ROS съединения, съдържащи анион нитритен пероксид, са хидроксилни радикали, карбонатни радикали и азотен диоксид (NO2), които се синтезират от дефектни клетъчни компоненти и имат вредни ефекти върху протеиновия синтез (67). Отсега нататък улавянето на свободните радикали има ключова роля в много неврологични, имунни разстройства, възпалителни и митохондриални заболявания.

Непълната митохондриална функция е една от най-ефективните причини за видовете свободни радикали при заболявания като невродегенеративни заболявания, исхемия и процес на стареене. Следователно повишените свободни радикали, дихателната активност, активността на митохондриалното производство и дефектите във веригата за транспортиране на електрони причиняват митохондриална дисфункция и клетъчна смърт. Мелатонинът индуцира синтеза на глутатион, друг антиоксидант, който намалява електронното излъчване на митохондриалната електронна верига (68).

Мелатонинът се абсорбира селективно от митохондриите и действа като мощен антиоксидантен агент и регулира биоенергийните функции на митохондриите (69). Той повишава пропускливостта на митохондриалната мембрана и стимулира различни антиоксидантни ензими. Следователно, мелатонинът може да устои на окислително увреждане чрез възстановяване на микрозомалните мембрани. Мелатонинът намалява производството на свободни радикали. Той предотвратява излъчването на електрони в дългосрочен план и по този начин подобрява митохондриалната функция чрез инхибиране на зареждането на електрони. Най-високото ниво на мелатонин се намира в митохондриите (70).

Ролята на мелатонина в лечението на PD

PD е неврологично заболяване, при което допаминергичните клетки увреждат substantia nigra и striatum. Няколко изследователски доклада подчертават мутацията, оксидативния стрес и индуцираното от свободните радикали увеличение в митохондриалните и допамин-метаболизиращите ензими (74). Следователно прилагането на антиоксиданти се препоръчва като обещаваща терапия за PD (75). Singhal и др. (76) използва невротоксин (MPTP) в модел на PD на плъхове и открива индуцирано от мелатонин намаляване на MPTP-медиирана липидна пероксидация и хипертриглицеридемия. През последното десетилетие стотици доклади представят научни данни за терапевтичните роли на мелатонина при няколко разстройства, свързани с OS, като защитните действия се приписват на преките и непреките антиоксидантни свойства на индола. Мелатонинът се използва в няколко експериментални модела, при които се смята, че патогенезата се медиира от свободните радикали по един или друг начин.

Основното доказателство за специалното значение между мелатонин и PD идва от констатациите за намалена активност на епифизата и последователно намаляване на циркулиращите концентрации на мелатонин при хора, засегнати от PD (40). Мелатонинът също така повишава нивата на антиоксидантните ензими, освен предотвратяването на апоптоза в хипокампуса. Този превантивен механизъм на мелатонин включва инхибиране на извънклетъчния обмен на калций през митохондриалната мембрана, стимулиране на mtPTP пътя, избягване на образуването на ROS и намаляване на секрецията на цитохром С. Друго проучване върху животински модел с мишки показва, че мелатонинът инхибира активността на каспаза-3. MPTP упражнява своите невродегенеративни ефекти чрез увеличаване на синтеза на NO, което води до увреждане на допаминергичните влакна в нервния край на стриатума.

Мелатонинът действа чрез JNK пътя, за да предотврати допаминергичната апоптоза в substantia nigra и striatum и по този начин намалява нивата на iNOS и NO в нервните клетки и влияе върху този процес (77). Мелатонинът също така стимулира Mn-SOD, антиоксиданти и GPx антиоксиданти в допаминергичните клетки (78, 79). Освен това, мелатонинът повишава активността на митохондриалните комплекси 1 и 3 и има благоприятен ефект. Запазва митохондриалната хомеостаза, намалява синтеза на свободни радикали и подобрява синтеза на АТФ. Следователно, мелатонинът може да предотврати апоптотичната каскада и апоптозата на дедопаминергичните неврони (80). Противно на горното, няколко проучвания разкриват, че анормалната агрегация на цитоскелета засяга патогенезата на невродегенеративното заболяване. Телцата на Леви, които са цитопатологични маркери на PD, са анормални структури на тубулин, убиквитин и микротубулни протеини 1 и 2.

Мелатонинът е много ефективен при формирането и регенерирането на образуването на цитоскелета и следователно е възможно да бъде една от потенциалните терапевтични молекули при невродегенеративни заболявания. Различни проучвания разкриват, че мелатонинът има мощно лечебно значение като невропротективен агент при PD, ALS и мозъчна травма. Освен това клиничните изпитвания на мелатонин установяват неговите невропротективни ефекти (81). Скорошни проучвания показват подобрения терапевтичен потенциал на мелатонина, използвайки наноносители от биологичен произход за доставяне на лекарства (82). Тези наноформулации могат да осигурят висока ефективност при преминаване на кръвно-мозъчните бариери и удължаване на освобождаването на мелатонин (82, 83). Отличителните черти позволяват на мелатонина да защитава невродегенерацията чрез насочване към пътища, свързани с митохондриите (84). Разбира се, трябва да се отбележи, че вниманието към други фактори като генетични проблеми, генна терапия и генетично разнообразие в това отношение е много важно (85-87).

Заключение

Мелатонинът е ендогенен, нетоксичен и антиоксидантен агент. Счита се за полезен агент при различни невродегенеративни разстройства, включително AD и PD, като съвместно лечение с конвенционалните терапевтични методи. Различни изследвания върху мелатонина предполагат, че той може да се използва като добавка при невродегенеративни разстройства чрез многобройните си ефекти, особено антиапоптотични и противовъзпалителни свойства. Експерименталните данни общо предполагат, че употребата на мелатонин ще намали тежестта на заболяването. Тъй като невралните заболявания обикновено се причиняват от оксидативно увреждане, мелатонинът е изследван в различни експериментални модели. Базираната на мелатонин терапия изглежда идеален подход за намаляване на когнитивните увреждания при възрастни хора, засегнати от AD и PD.

Защо яденето на Cistanche може да лекува AD&PD

Cistanche съдържа биоактивни съединения, за които е установено, че имат невропротективни ефекти. По-конкретно, той съдържа ехинакозид и актеозид, за които е доказано, че подобряват когнитивната функция и предпазват от невродегенерация при проучвания върху животни. Установено е също, че тези съединения имат противовъзпалителни и антиоксидантни свойства, които могат да помогнат за намаляване на увреждането на мозъчните клетки и подобряване на здравето на мозъка. Освен това е установено, че Cistanche повишава нивата на невротрансмитери като допамин и ацетилхолин, които са важни за поддържане на мозъчната функция и се изчерпват при AD и PD.

Рефренс

1 Буш AI. Металобиологията на болестта на Алцхаймер. Тенденции Neurosci 2003; 26(4): 207-214.

2. Kepp KP. Болест на Алцхаймер поради загуба на функция: нов синтез на наличните данни. Prog Neurobiol 2016; 143: 36-60.

3. Poirier J. Аполипопротеин Е, транспорт и синтез на холестерол при спорадична болест на Алцхаймер. Neurobiol Aging 2005; 26(3): 355- 361.

4. Akiyama H, Barger S, Barnum S, Bradt B, Bauer J, Cole GM et al. Възпаление и болест на Алцхаймер. Neurobiol Aging 2000; 21(3): 383-421.

5. Holscher C. Развитие на индуцирана от бета-амилоид невродегенерация при болестта на Алцхаймер и нови невропротективни стратегии. Rev Neurosci 2005; 16(3): 181.

6. Andersen JV, Christensen SK, Westi EW, Diaz-delCastillo M, Tanila H, Schousboe A, et al. Дефицитният метаболизъм на астроцитите уврежда синтеза на глутамин и невротрансмитерната хомеостаза в миши модел на болестта на Алцхаймер. Neurobiol Dis 2021; 148: 105198.

7. Mayo JC, Sainz RM, Tan DX, Antolín I, Rodríguez C, Reiter RJ. Мелатонин и болестта на Паркинсон. Endocr 2005; 27(2): 169- 178.

8. Pohanka M. Болест на Алцхаймер и свързани невродегенеративни разстройства: значение и противодействие на мелатонин. J Appl Biomed 2011; 9(4): 185-196.

9. Skene DJ, Swaab DF. Ритмичност на мелатонина: ефект от възрастта и болестта на Алцхаймер. Exp Gerontol 2003; 38(1-2): 199-206.

10. Рудницкая EA, Максимова KY, Muraleva NA, Logvinov SV, Yanshole LV, Kolosova NG и др. Благоприятни ефекти на мелатонин в плъх модел на спорадична болест на Алцхаймер. Биогеронтология 2015; 16(3): 303-316.

11. Jean-Louis G, Zizi F, Von Gizycki H, Taub H. Ефекти на мелатонин при двама индивида с болестта на Алцхаймер. Percept Mot Skills 1998; 87 (1): 331-339.

12. Matsubara E, Bryant-Thomas T, Pacheco Quinto J, Henry TL, Poeggeler B, Herbert D et al. Мелатонинът увеличава преживяемостта и инхибира оксидативната и амилоидната патология в трансгенен модел на болестта на Алцхаймер. J Neurochem 2003; 85 (5): 1101-1108.

13. Mihardja M, Roy J, Wong KY, Aquili L, Heng BC, Chan YS, et al. Терапевтичен потенциал на неврогенезата и регулирането на мелатонина при болестта на Алцхаймер. Ann NY Acad Sci 2020; 1478(1): 43-62.

14. Brunner P, Sözer-Topcular N, Jockers R, Ravid R, Angeloni D, Fraschini F et al. Епифизните и кортикалните рецептори за мелатонин MT1 и MT2 са намалени при болестта на Алцхаймер. European J Histochem 2006; 50(4): 311-316.

15. Pandi-Perumal SR, Trakht I, Srinivasan V, Spence DW, Maestroni GJ, Zisapel N et al. Физиологични ефекти на мелатонина: ролята на мелатониновите рецептори и пътищата на сигнална трансдукция. Prog Neurobiol 2008; 85 (3): 335-353.

16. Ng KY, Leong MK, Liang H, Paxinos G. Мелатонинови рецептори: разпределение в мозъка на бозайниците и техните съответни предполагаеми функции. Brain Struct Funct 2017; 222 (7): 2921-2939.

17. Ekmekcioglu C. Рецептори за мелатонин при хора: биологична роля и клинично значение. Biomed Pharmacother 2006; 60(3): 97-108.

18. Krause DN, Dubocovich ML. Рецептори за мелатонин. Annu Rev Pharmacol Toxicol 1991; 31(1): 549-568. 19. Dubocovich ML, Markowska M. Функционални MT 1 и MT 2 мелатонинови рецептори при бозайници. Endocr 2005; 27(2): 101-110.

20. Jockers R, Maurice P, Boutin J, Delagrange P. Мелатонинови рецептори, хетеродимеризация, сигнална трансдукция и места на свързване: какво ново? Br J Pharmacol 2008; 154 (6): 1182-1195.

21. Masana MI, Doolen S, Ersahin C, Al-Ghoul WM, Duckles SP, Dubocovich ML и др. МТ2 мелатониновите рецептори присъстват и функционират в опашните артерии на плъхове. J Pharmacol Exp Ther 2002; 302 (3): 1295-1302.

22. He H, Dong W, Huang F. Антиамилоидогенна и антиапоптозна роля на мелатонин при болестта на Алцхаймер. Curr Neuropharmacol 2010; 8(3): 211-217.

23. Wongprayoon P, Govitrapong P. Мелатонин като митохондриален протектор при невродегенеративни заболявания. Cell Mol Life Sci 2017; 74(21): 3999-4014.

24. Andrabi SA, Sayeed I, Siemen D, Wolf G, Horn TF. Директно инхибиране на преходната пора на митохондриалната пропускливост: възможен механизъм, отговорен за антиапоптозните ефекти на мелатонина. FASEB J 2004; 18(7): 869-871.

25. El-Shenawy SM, Abdel-Salam OM, Baiuomy AR, El-Batran S, Arbid MS. Проучвания върху противовъзпалителните и антиноцицептивните ефекти на мелатонин при плъхове. Pharmacol Res 2002; 46 (3): 235-243.

26. Samiei M, Ahmadian E, Eftekhari A, Eghbal MA, Rezaie F, Vinken M. Клетъчни връзки и орално здраве. EXCLI J 2019; 18: 317.

27. Mauriz JL, Collado PS, Veneroso C, Reiter RJ, González-Gallego J. Преглед на молекулярните аспекти на противовъзпалителните действия на мелатонина: скорошни прозрения и нови перспективи. J Pineal Res 2013; 54 (1): 1-14.

28. Cardinali DP, Pagano ES, Bernasconi PAS, Reynoso R, Scacchi P. Мелатонин и митохондриална дисфункция в централната нервна система. Horm Behav 2013; 63 (2): 322-330.

29. Ventriglio A, Bellomo A, di Gioia I, Di Sabatino D, Favale D, De Berardis D et al. Замърсяване на околната среда и психично здраве: наративен преглед на литературата. CNS Spectr 2021; 26 (1): 51-61.

30. Allen JL, Oberdorster G, Morris-Schaffer K, Wong C, Klocke C, Sobolewski M et al. Невротоксичност за развитието на замърсяване на въздуха с вдишани ултрафини частици: паралели с невропатологични и поведенчески характеристики на аутизма и други разстройства на неврологичното развитие. Невротоксикол 2017; 59: 140-154.

31. G Salazar J, Ribes D, Cabre M, L Domingo J, Sanchez-Santed F, Teresa Colomina MJ. Нивата на амилоиден пептид се повишават в мозъка на A PP Swedish мишки след излагане на хлорпирифос. Curr Alzheimer Res 2011; 8(7): 732-740.

32. Hussain Z, Thu HE, Elsayed I, Abourehab MA, Khan S, So hail M et al. Наномащабните материали могат да предизвикат тежка невротоксичност при хронично излагане на мозъчни тъкани: Критична оценка и скорошни актуализации на предразполагащи фактори, основен механизъм и перспективи. J Контролно издание 2020; 328 серия

33. Ze Y, Hu R, Wang X, Sang X, Ze X, Li B et al. Невротоксичност и генно-експресиран профил при мишки с мозъчни увреждания, причинени от излагане на наночастици от титанов диоксид. J Biomed Mater Res A 2014; 102 (2): 470-478.

34. An L, Liu S, Yang Z, Zhang T. Когнитивно увреждане при плъхове, предизвикано от нано-CuO и неговите възможни механизми. Toxicol Lett 2012; 213 (2): 220-227.

35. Eftekhari A, Dizaj SM, Chodari L, Sunar S, Hasanzadeh A, Ahmadian E et al. Обещаващото бъдеще на нано-антиоксидантната терапия срещу токсичността, предизвикана от замърсителите на околната среда. Biomed Pharmacother 2018; 103: 1018-1027. 36. Eftekhari A, Ahmadian E, Azarmi Y, Parvizpur A, Fard JK, Eghbal MA. Ефектите на циметидин, N-ацетилцистеин и таурин върху метаболитното активиране на тиоридазин и индуцирането на оксидативен стрес в изолирани хепатоцити на плъх. Pharma Chem J 2018; 51(11): 965- 969.

37. Fard J, Hamzeiy H, Sattari M, Eftekhari A, Ahmadian E, Eghbal MA. Триазол ризатриптан индуцира чернодробна токсичност чрез лизозомна/митохондриална дисфункция. Drug Res 2016; 66(09): 470-478.

38. Wu YH, Ursinus J, Zhou JN, Scheer FA, Ai-Min B, Jockers R, et al. Промени на мелатониновите рецептори MT1 и MT2 в хипоталамусното супрахиазматично ядро ​​по време на депресията. J Affect Disord 2013; 148(2-3): 357-367.

39. Wang JZ, Wang ZF. Ролята на мелатонина в подобна на Алцхаймер невродегенерация. Acta Pharmacol Sin 2006; 27(1): 41-49. 40. Тан DX. Мелатонин: мощен, ендогенен улавяне на хидроксилни радикали. Endocr J 1993; 1: 57-60.

41. Tan D, Reiter RJ, Manchester LC, Yan M, El-Sawi M, Sainz RM et al. Химични и физични свойства и потенциални механизми: мелатонин като антиоксидант с широк спектър и ловец на свободни радикали. Curr Top Med Chem 2002; 2(2): 181-197.

42. Korkmaz A, Reiter RJ, Topal T, Manchester LC, Oter S, Tan DX. Мелатонин: утвърден антиоксидант, достоен за използване в клинични изпитвания. Mol Med 2009; 15(1): 43-50.

43. Mayo JC, Sainz RM, Tan DX, Hardeland R, Leon J, Rodriguez C et al. Противовъзпалителни действия на мелатонин и неговите метаболити, N1-ацетил-N2-формил-5-метоксикинурамин (AFMK) и N1- ацетил-5-метоксикинурамин (AMK ), в макрофагите. J Neuroimmunol 2005; 165(1-2): 139-149.

44. Hong Y, Palaksha K, Park K, Park S, Kim HD, Reiter RJ et al. Мелатонин плюс базирана на упражнения неврорехабилитативна терапия за увреждане на гръбначния мозък. J Pineal Res 2010; 49(3): 201-209. 45. Ha E, Yim SV, Chung JH, Yoon KS, Kang I, Cho YH и др. Мелатонинът стимулира транспорта на глюкоза чрез инсулинов рецепторен субстрат-1/фосфатидилинозитол 3-киназен път в C2C12 миши скелетни мускулни клетки. J Pineal Res 2006; 41(1): 67-72.

46. ​​Anhê GF, Caperuto LC, Pereira-Da-Silva M, Souza LC, Hirata AE, Velloso LA и др. In vivo активиране на инсулинова рецепторна тирозин киназа от мелатонин в хипоталамуса на плъх. J Neurochem 2004; 90(3): 559-566.

47. Borsello T, Forloni G. JNK сигнализиране: възможна цел за предотвратяване на невродегенерация. Curr Pharmaceutic декември 2007 г.; 13(18): 1875-1886. 48. Goodenough S, Schleusner D, Pietrzik C, Skutella T, Behl C. Гликоген синтаза киназа 3 свързва неврозащитата от 17 -естрадиол с ключови процеси на Алцхаймер. Neurosci 2005; 132 (3): 581-589.

49. Лима ACP, Louzada PR, De Mello FG, Ferreira ST. Неврозащита срещу А и глутаматна токсичност от мелатонин: участват ли GABA рецепторите? Neurotox Res 2003; 5(5): 323-327.

50. Pappolla M, Bozner P, Soto C, Shao H, Robakis NK, Zagorski M et al. Инхибиране на фибрилогенеза на Алцхаймер от мелатонин. J Biol Chem 1998; 273 (13): 7185-7188.

51. Lin L, Huang QX, Yang SS, Chu J, Wang JZ, Tian Q. Мелатонин при болестта на Алцхаймер. Int J Mol Sci 2013; 14(7): 14575-14593.

52. Wang SSS, Chen PH, Hung YT Ефекти на р-бензохинон и мелатонин върху амилоидната фибрилогенеза на лизозим от кокоши белтък. J Mol Catal B Enzym 2006;43(1-4), 49-57.

53. Ozansoy M, Ozansoy MB, Yulug B, Cankaya S, Kilic E, Goktekin S et al. Мелатонинът засяга освобождаването на екзозоми и съдържанието на тау in vitro модел на амилоид-бета токсичност. J Clin Neurosci 2020; 73: 237-244.

54. Pappolla M, Matsubara E, Vidal R, Pacheco-Quinto J, Poeggeler B, Zagorski M et al. Лечението с мелатонин подобрява лимфния клирънс в трансгенен миши модел на амилоидоза. Curr Alzheimer Res 2018; 15(7): 637-642.

55. Яо К, Джао Иф, Зу Хб. Стимулирането на мелатониновия рецептор от агомелатин предотвратява A-индуцираното тау фосфорилиране и окислително увреждане в PC12 клетки. Drug Des Dev Ther 2019; 13: 387.

56. Deng Yq, Xu Gg, Duan P, Zhang Q, Wang Jz. Ефекти на мелатонин върху индуцирано от вортманин tau хиперфосфорилиране. Acta Pharmacol Sin 2005; 26(5): 519-526.

57. Carrascal L, Nunez-Abades P, Ayala A, Cano M. Роля на мелатонина във възпалителния процес и неговия терапевтичен потенциал. Curr Pharmaceutic декември 2018 г.; 24(14): 1563-1588.

58. Zhu LQ, Wang SH, Liu D, Yin YY, Tian Q, Wang XC и др. Активирането на гликоген синтаза киназа-3 инхибира дългосрочното потенциране със свързани със синапса увреждания. J Neurosci 2007; 27(45): 12211-12220.

59. Wang XC, Zhang J, Yu X, Han L, Zhou ZT, Zhang Y и др. Предотвратяване на индуцирано от изопротеренол tau хиперфосфорилиране от мелатонин при плъхове. Acta Physiol Sin 2005; 57 (1): 7-12.

60. Zhu L, Wang S, Ling Z, Wang Q, Hu M, Wang J. Инхибирането на биосинтезата на мелатонин активира протеин киназа а и индуцира подобно на Алцхаймер tau хиперфосфорилиране при плъхове. Chinese Med Sci J 2005; 20(2): 83-87.

61. Неги Г, Кумар А, Шарма СС. Мелатонинът модулира невровъзпалението и оксидативния стрес при експериментална диабетна невропатия: ефекти върху NF-κB и Nrf2 каскадите. J Pineal Res 2011; 50(2): 124-131.

62. Srinivasan V, Brzezinski A, Pandi-Perumal SR, Spence DW, Cardinali DP, Brown GM. Мелатониновите агонисти при първична безсъние и безсъние, свързано с депресия: превъзхождат ли те седативно-хипнотичните? Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry 2011; 35 (4): 913-923.

63. Filippone A, Lanza M, Campolo M, Casili G, Paterniti I, Cuzzocrea S et al. Защитен ефект на натриевия пропионат при 1- 42-индуцирана невротоксичност и травма на гръбначния мозък. Неврофармакол 2020; 166: 107977.

64. Calvo JR, Gonzalez-Yanes C, Maldonado M. Ролята на мелатонина в клетките на вродения имунитет: преглед. J Pineal Res 2013; 55 (2): 103-120.

65. Osseni RA, Rat P, Bogdan A, Warnet JM, Touitou Y. Доказателство за прооксидантно и антиоксидантно действие на мелатонин върху човешка чернодробна клетъчна линия HepG2. Life Sci 2000; 68 (4): 387-399. 66. Zhai K, Liskova A, Kubatka P, Büsselberg D. Навлизане на калций чрез TRPV1: Потенциална цел за регулиране на пролиферацията и апоптозата в ракови и здрави клетки. Int J Mol Sci 2020; 21(11): 4177.

67. Galano A, Tan DX, Reiter RJ. Мелатонинът като естествен съюзник срещу оксидативния стрес: физикохимично изследване. J Pineal Res 2011; 51 (1): 1-16.

68. Martín M, Macías M, Escames G, León J, Acuña-Castroviejo D. Мелатонинът, но не и витамините С и Е, поддържа глутатионовата хомеостаза при митохондриален оксидативен стрес, индуциран от t-бутил хидропероксид. FASEB J 2000; 14(12): 1677-1679.

69. Nguyen XKT, Lee J, Shin EJ, Dang DK, Jeong JH, Nguyen TTL и др. Липозомният мелатонин спасява предизвиканото от метамфетамин митохондриално натоварване, проапоптоза и допаминергична дегенерация чрез инхибиращия PKCδ ген. J Pineal Res 2015; 58 (1): 86-106.

70. Paradies G, Petrosillo G, Paradies V, Reiter RJ, Ruggiero FM. Мелатонин, кардиолипин и митохондриална биоенергетика при здраве и болест. J Pineal Res 2010; 48 (4): 297-310.

71. Безансон Е, Гуо С, Лок Дж, Тимянски М, Ло Е.Х. Отвъд NMDA и AMPA глутаматните рецептори: възникващи механизми за йонен дисбаланс и клетъчна смърт при инсулт. Тенденции Pharmacol Sci 2008; 29(5): 268-275.

72. Wang Dd, Jin Mf, Zhao Dj, Ni H. Намаляване на свързания с митофагия оксидативен стрес и запазване на функцията на митохондриите с помощта на терапия с мелатонин в HT22 хипокампален модел на невронална клетка на индуцирана от глутамат екситотоксичност. Преден Ендокринол 2019; 10: 550.

73. Jürgenson M, Zharkovskaja T, Noortoots A, Morozova M, Beniashvili A, Zapolski M et al. Ефекти на лекарствената комбинация мемантин и мелатонин върху нарушена памет и мозъчни невронални дефицити в амилоидно преобладаващ миши модел на болестта на Алцхаймер. J Pharm Pharmacol 2019; 71 (11): 1695-1705. 74. Srinivasan V, Cardinali DP, Srinivasan US, Kaur C, Brown GM, Spence DW et al. Терапевтичен потенциал на мелатонин и неговите аналози при болестта на Паркинсон: фокус върху съня и невропротекция. Ther Adv Neurol Disord 2011; 4(5): 297-317.

75. Videnovic A, Noble C, Reid KJ, Peng J, Turek FW, Marconi A, et al. Циркаден ритъм на мелатонин и прекомерна сънливост през деня при болестта на Паркинсон. JAMA Neurol 2014; 71 (4): 463-469.

76. Singhal NK, Srivastava G, Agrawal S, Jain SK, Singh MP. Мелатонинът като неврозащитен агент в моделите на болестта на Паркинсон при гризачи: готово ли е за неопровержим клиничен превод? Mol Neurobiol 2012; 45 (1): 186-199.

77. Кардинали ДП. Мелатонин: клинични перспективи при невродегенерация. Преден Ендокринол 2019; 10: 480.

78. Maldonado M, Murillo-Cabezas F, Terron M, Flores L, Tan D, Manchester L et al. Потенциалът на мелатонина за намаляване на заболеваемостта и смъртността след черепно-мозъчна травма. J Pineal Res 2007; 42 (1): 1-11.

79. Asefy Z, Hoseinnejhad S, Ceferov Z. Подходи с наночастици при диагностика и лечение на невродегенеративни заболявания. Neurolog Sci 2021: 1-8.

80. Juknat AA, Méndez MdVA, Quaglino A, Fameli CI, Mena M, Kotler ML. Мелатонинът предотвратява индуцираната от водороден пероксид Bax експресия в култивирани астроцити на плъх. J Pineal Res 2005; 38 (2): 84-92.

81. Wang X. Антиапоптотичната активност на мелатонина при невродегенеративни заболявания. CNS Neurosci Ther 2009; 15(4): 345-357.

82. Srivastava AK, Choudhury SR, Karmakar S. Наноструктури на мелатонин/полидопамин за терапия на болестта на Паркинсон, базирана на колективна невропротекция. Biomater Sci 2020; 8(5): 1345-1363.

83. An Z, Yan J, Zhang Y, Pei R. Приложения на наноматериали за отстраняване на реактивни кислородни видове при лечението на заболявания на централната нервна система. J Mater Chem B 2020; 8(38): 8748-8767.

84. Shankar J, Geetha K, Wilson B, Технология. Потенциални приложения на наномедицина за лечение на болестта на Паркинсон. J Drug Deliv Sci Technol 2021: 102793.

85. Kazemi E, Zargooshi J, Kaboudi M, Heidari P, Kahrizi D, Mahaki B, Mohammadian Y, Khazaei H, Ahmed K. Проучване за асоцииране в целия геном за идентифициране на кандидат-гени за еректилна дисфункция. Кратка биоинформация 2021; 22 (4):bbaa338.

86. Ercisli M., Lechun, G, Azeez S, Hamasalih R, Song S, Aziziaram Z. Уместност на генетичните полиморфизми на човешкия цитохром P450 3A4 при пациенти, лекувани с ривароксабан. Cell Mol Biomed Rep 2021; 1(1): 33-41.

87. Kotler M, Rodríguez C, Sáinz RM, Antolin I, Menéndez-Peláez A. Мелатонинът повишава генната експресия за антиоксидантни ензими в мозъчната кора на плъхове. J Pineal Res 1998;24(2):83-9.

Zahra Asefy1, Ameer Khusro2*, Shakar Mammadova3, Sirus Hoseinnejhad1, Aziz Eftekhari1,4*, Saad Alghamdi5, Anas S. Dablool6, Mazen Almehmadi7, Elham Kazemi8, Muhammad Umar Khayam Sahibzada9*

1 Катедра по фармакология и токсикология, Университет на медицинските науки в Мараге, Мараге, Иран

2 Изследователски отдел по растителна биология и биотехнология, Loyola College, Ченай, Тамил Наду, Индия

3 Катедра по физическа география, Бакински държавен университет, Баку, Азербайджан 4 Катедра по биология и химия, Държавен педагогически университет "Иван Франко" в Дрогобич, Дрогобич, Украйна

5 Катедра по лабораторна медицина, Факултет по приложни медицински науки, Университет Umm Al-Qura, PO Box.715, Makkah, 21955, Саудитска Арабия

6 Катедра по обществено здраве, Колеж по здравни науки в Al-Leith, Университет Umm Al-Qura, Мека, Саудитска Арабия

7 Катедра по клинични лабораторни науки, Колеж по приложни медицински науки, Taif University, PO Box 11099, Taif 21944, Саудитска Арабия

8 Център за изследване на плодовитостта и безплодието, Институт по здравни технологии, Университет на медицинските науки в Керманшах, Керманшах, Иран

9 Катедра по фармация, Sarhad University of Science & Information Technology, Peshawar 25100, Khyber Pakhtunkhwa, Пакистан