Morin облекчава увреждането на черния дроб и бъбреците, предизвикано от афлатоксин B1-, като инхибира освобождаването на хетерофилни извънклетъчни капани, оксидативния стрес и възпалителните реакции при пилетата

За повече информация, свържете се сtina.xiang@wecistanche.com

РЕЗЮМЕАфлатоксин B1 (AFB1) е вторичен метаболит, произведен от Aspergillus favus и паразитен aspergillus, който се намира главно в зърнени култури, фъстъци, царевица и други култури, които сериозно застрашават домашните птици, човешкото здраве и околната среда. Морин, флавоноидно съединение, извлечено от растения Moraceae, притежава антиоксидантно, антибактериално ипротивовъзпалителноефекти. Въпреки това, дали моринът има защитен ефект върху AFB1-индуцираначерен дробиувреждане на бъбрецитепри пилета не е конкретно докладвано. В това проучване ние потвърдихме главно защитния ефект на морин върху AFB1-индуцирано увреждане на черния дроб и бъбреците при пилета и изяснихме неговия механизъм. Установено е, че моринът може значително да намали чернодробните биохимични показатели за аланин аминотрансфераза (ALT), аспартат аминотрансфераза (AST) и бъбречните показатели за нивата на креатинин (CRE) и урея азот (BUN). Междувременно хистопатологичното изследване показа, че моринът ефективно облекчава AFB1-, причинено от увреждане на черния дроб, включително разрушаване на хепатоцитите, подуване и възпалителна клетъчна инфилтрация, и ефективно облекчава увреждане на бъбреците, включително некроза на бъбречните клетки, ексфолиация и вакуолизация. По-нататъшно изследване на неговия механизъм показа, че морин значително инхибира AFB1-индуцираното освобождаване на хетерофилни извънклетъчни капани (HETs) и намалява нивото на малондиалдехид (MDA), но повишава нивата на супероксид дисмутаза (SOD), глутатион пероксидаза (GSH- Px) и каталаза (CAT) in vivo. Освен това, количествен PCR (qRT-PCR) анализ в реално време показа, че моринът също така значително намалява AFB1-индуцираната иРНК експресия на тумор некрозисфактор- (TNF-), интерлевкин-6(I{{10} }) и интерлевкин-1 (IL-1), индуцируема азотен оксид синтаза (iNOS), циклооксигеназа-2 (COX-2), каспаза-1, каспаза{ {16}} и каспаза-11. В заключение, всички резултати потвърждават, че моринът може да защити AFB1-причинено увреждане на черния дроб и бъбреците чрез инхибиране на освобождаването на HET, регулиране на оксидативния стрес и инхибиране на възпалителния отговор, което предполага, че morin може да се използва като потенциално лекарство за превенция и лечение на афлатоксикоза в птицевъдната индустрия.

Ключови думи:морин, афлатоксин B1,хетерофилни извънклетъчни капани,възпалителен отговор,оксидативен стрес

ВЪВЕДЕНИЕ

Афлатоксинът е вид вторичен метаболит с висока токсичност и ниско молекулно тегло, произвеждан от гъби като Aspergillus flavus, Parasitic aspergillus и специфичен aspergillus, които имат силна токсичност, мутагенност и канцерогенност, сред които афлатоксин B1 (AFB1) има най-силна токсичност (Rawal et al, 2010). Замърсяването с AFB1 е свързано с безопасността на храненето, производството на животни и безопасността на храните и дори застрашава човешкото здраве. Следователно е важно да се разреши замърсяването с AFB1 във фуража и остатъчните проблеми при животните и животинските продукти. Излагането на афлатоксини по време на бременност представлява заплаха за здравето на плода, който може да се предава от майката на плода чрез кръвта от пъпната връв и кърмата (Denning et al., 1990). Докладвано е, че нивото на AFB1 в серума на жълтеница с 6-дефицит на фосфоглюкоза дехидрогеназа при новородени и е установено, че 58 процента от новородените и 75 процента от майките са дали положителен тест (Raafat et al, 2021). Като най-важният хепатоцелуларен карциноген, AFB1 е основната причина за хепатоцелуларен карцином (HCC) в света и проучванията са установили, че AFB1 и вирусът на хепатит B (HBV) работят заедно, за да увеличат допълнително честотата на HCC (Rushing and Selim, 2019). ).AFB1-индуцираноксидативен стресе един от важните начини, по които се проявява неговата токсичност (Abdel-Wahhab и Aly, 2003). Но по-дълбоките механизми в основата на афлатоксикозата и по-ефективните лекарства за превенция и лечение все още остават да бъдат изследвани.

Моринът (химическата структура е показана на фигура 1) е вид естествен пигмент, извлечен от растения Moraceae, който принадлежи към флавоноидите и има биологични свойства, включително противовъзпалителни (Wei et al), (Li et al, 2020), и антиоксидант 2015), антибактериално (Wei et al, 2015), антиатеросклероза (Zhou et al, 2017), понижаване на кръвната захар и антистрес, и се използва широко в клиничното лечение на коронарна сърдечна болест, диабет и рак. Съобщава се, че моринът може да упражнява антибактериални ефекти върху Staphylococcus aureus, Bacillus и Micrococcus flavus чрез намеса в синтеза на бактериална ДНК и инхибиране на активността на аденозин трифосфат (ATPase) (Xu et al.2001). Някои проучвания показват, че моринът може да инхибира TLR4/NF-xB и да активира Nrf2 и HO-сигналните пътища за защита на LPS-индуцирани остриувреждане на черния дробпри мишки (Tian et al, 2017). Морин също може ефективно да подобри индуцираната от диетилов амониев нитрат чернодробна фиброза при плъхове чрез модериране на Hippo/YAP и TGF- 1/Smad сигнална трансдукция (Perumal et al, 2017). Понастоящем се съобщава, че различни съединения като витамини А, Cand E (Alpsoy и Yalvac, 2011) и евгенол могат да устоят наоксидативен стресотговор на AFB1. Въпреки това, като традиционно антиоксидантно лекарство, дали моринът може също да играе защитна роля в черния дроб иувреждане на бъбрецитепри пилета с афлатоксикоза не е съобщено.

Неутрофилните извънклетъчни капани (NETs) са първата линия на защита на тялото срещу външни патогени, открити през последните години. Мрежите са мрежова структура с ДНК като скелет и модифицирана от цитрулиниран хистон 3 (citH3) и еластаза (Wei et al.,

2019b), с антибактериални (Brinkmann et al., 2004), антивирусни (Saitoh et al, 2012) и антипаразитни (Wei et al, 2016) ефекти. Хетерофилните извънклетъчни капани (HETs) имат подобна функция на NETs, ​​с изключение на това, че HETs нямат експресията на миелопероксидаза (MPO) (Chuammitri et al., 2009). Доказано е, че N. canine може да индуцира освобождаването на кучешки NET in vitro, за да устои на инфекция (Wei et al, 2016). Проучване също е потвърдено, че може да намали респираторните изблици при абамектин (AVM) шаран чрез инхибиране на активирането на PI3K-ERK сигналния път, като по този начин инхибира освобождаването на NETs в шарана (Zheng et al, 2020). Подобно на абамектин, моринът е признато терапевтично лекарство, независимо дали неговият терапевтичен ефект е свързан с освобождаването на NETs, ​​това изисква от нас да проучим допълнително.

Ето защо, механизмът на действието на морин върху AFB1-индуцирано чернодробно и бъбречно увреждане при пилета беше изследван в нашето проучване и бяха изследвани неговите защитни ефекти. Очаква се да предостави експериментална основа за ветеринарното клинично прилагане на морин и да предостави експериментални данни и референции за превенция и контрол на отравяне с микотоксини.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ Реактиви и материали

AFB1 (A6636, чистота по-голяма или равна на 98 процента, Sigma-Aldrich [Shang-hail Trading Co., Ltd., Шанхай, Китай). Морин (чистота по-голяма или равна на 98 процента) е закупен от Chengdu Pusi Biological Co., Ltd. (Chengdu, Китай). Комплект за анализ на Pico Green dsDNA (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Комплектът от AST, ALT, BUN и CRE е получен от Института по биологично инженерство на Nanjing Jiancheng (Nanjing, Китай). Комплектът от GSH-Px SOD, CAT и MDA е получен от Института по биологично инженерство на Nanjing Jiancheng (Nanjing, Китай). RevertAid First Strand cDNA Synthesis Kit беше получен от Thermo.qPCR master mix беше получен от Roche (Манхайм, Германия).

Създаване на животински модели

Двадесет и пет еднодневни пилета бяха закупени от развъдната ферма Foshan (Foshan, Guangdong) и пилетата бяха хранени адаптивно за един ден. Установяването на модела на заразената пилета започна на втория ден. Тестваните пилета бяха разпределени на случаен принцип в 5 групи: контролна група, група AFB1 (5 mg/kg), група за лечение с морин (20 mg/kg, 40 mg/kg, 80 mg/kg). На първия ден от моделирането, лечението групата беше интраперитонеално инжектирана с морин за превенция и беше инжектирана отново 16 часа по-късно. Кръвта беше събрана 24 часа по-късно, пилетата бяха убити и бяха взети чернодробни и бъбречни тъкани. Цялото изпълнение на експеримента беше проведено в съответствие с насоките на Комитета по етика на изследване на животни към университета Фошан (FSUeae2019112501).

Откриване на HETs в серума

Събраната кръв беше неподвижна, центрофугирана при 12,000 rpm за 10 минути и горният серум беше екстрахиран, разреден 5-кратно с TE багрило и след това беше добавено същото количество Pico Green. Накрая, експерименталните резултати бяха наблюдавани с флуоресцентен четец на микроплаки.

Откриване на ALT и AST в серума

Измерване на нивата на ALT и AST в серума с комплекта и експерименталните резултати бяха открити при дължина на вълната от 510 nm от четеца на микроплаки.

Откриване на BUN и CRE в серума

Нивата на CRE и BUN в серума бяха изследвани със съответните комплекти и експерименталните резултати бяха открити при дължина на вълната от 510 nm от четеца на микроплаки.

Хистопатологична оценка на чернодробна и бъбречна тъкан

Събраните проби от чернодробна и бъбречна тъкан се фиксират в 10% формалин. След това тъканта беше дехидратирана, вградена и оцветена с хематоксилин и еозин (Wet al, 2021). И накрая, хибридният микроскоп на Revolve беше използван за наблюдение на патологични промени.

Откриване на оксидазната активност и антиоксидантната ензимна активност

Нивата на оксидаза MDA и антиоксидантна оксидаза GSH-Px, SOD и CAT бяха открити изследвани със съответните комплекти (Guo et al, 2021). Сред тях SOD и CAT бяха измерени със серум, а MDA и GSH-Px бяха измерени с чернодробна тъкан. Освен това трябва да използваме TBD реагенти за количествен анализ на концентрацията на протеин в пробите (Cao et al., 2020).

Количествен PCR анализ в реално време

QRT-PCR се използва за откриване на експресията на иРНК навъзпалителенфактори TNF-a, IL-1, IL-6, медиатор на възпалението COX-2, iNOS и каспаза сигнален път ключови фактори каспаза-1,каспаза{{6} } и caspase-11. Инструментът CFX Connect Real-Time System беше използван за количествено определяне на PCR флуоресценция в реално време. Праймерите на целевия ген са в таблица 1. Откриването на qRT-PCR използва Roche 25 μL система, състоянието е 50 градуса, 2 минути; 95 градуса, 10 минути; 95 градуса, 15 секунди; 60 градуса, 60-те години, общо 40 цикъла. GAPDH като вътрешна референция и методът за обработка на данните използва 2-AACT (Qianru et al., 2021).

Статистически анализ

Всички данни бяха изчислени от софтуера GraphPad Prism 5.0, използвайки еднопосочен анализ на дисперсията (ANOVA) с тест за множествено сравнение на Tukey. Разликите между групите се считат за статистически значими при нива на P<>

РЕЗУЛТАТИ

Промяна на телесното тегло и чернодробния коефициент при пилета

Телесното тегло на всяка пилета се записва и се изчислява чернодробен коефициент (чернодробен коефициент =чернодробно тегло/телесно тегло] × 100). Резултатите показват, че скоростта на растеж на телесното тегло в групата на лечение с морин (20 mg/kg, 80 mg/kg) е значително повишена в сравнение с групата AFB1 (Фигура 2А), потвърждавайки, че моринът има известен ефект върху теглото на мацки. Въпреки това, чернодробният коефициент на всяка група пилета не се променя значително (Фигура 2B).

Morin значително намалява нивата на ALT и AST в серума

ALT и AST са показатели за увреждане на черния дроб. Данните показват, че AFB1 значително повишава нивата на ALT и AST, докато моринът показва напълно противоположна тенденция в сравнение с AFB1 (Фигура 3A и B), което предварително предполага, че моринът има благоприятен ефект върху предизвиканото от AFB{3}} увреждане на черния дроб при пилета .

Морин значително облекчава AFB1-индуцираното увреждане на черния дроб при пилета

За по-нататъшно потвърждаване на ефектите на морин върху увреждане на черния дроб, причинено1-от AFB, беше извършено хистопатологично изследване. Както е показано на фигура 4, лечението с AFB1 предизвиква подуване на хепатоцити, фрагментация и възпалителна клетъчна инфилтрация в черния дроб, но моринът (20, 40, 80 mg/kg) ефективно облекчава увреждането на чернодробната тъкан, което допълнително потвърждава, че моринът има смекчаващ ефект върху увреждане на черния дроб, предизвикано от AFB1- при пилета.

Morin значително намалява нивата на BUN и CRE в серума

BUN и CRE като важни индикатори за увреждане на бъбреците, открихме, че AFB1 значително повишава нивата на BUN и CRE в сравнение с контролната група, докато моринът показва напълно противоположна тенденция в сравнение с AFB1 (Фигура 5A и B), което също предварително предполага, че моринът има благоприятен ефект върху AFB1-причинено бъбречно увреждане при пилета.

Морин значително облекчава AFB1-предизвиканото бъбречно увреждане при пилета

За по-нататъшно потвърждаване на ефектите на морин върху бъбречно увреждане, причинено1-от AFB, беше извършено хистопатологично изследване. Бъбрекът на групата на лечение с AFB1 показва некроза на бъбречните клетки, ексфолиация и вакуолизация, докато групата на лечение с морин, с повишаването на концентрацията на морин (20,40,80 mg/kg), ефективно облекчава увреждането на бъбречната тъкан (Фигура 6 ), което допълнително потвърди, че моринът има смекчаващ ефект върху причиненото от AFB1-бъбречно увреждане при пилета.

МоринЗначително намалено нивото на AFB1-индуцирани HETs в серума

За да се изследва механизмът, лежащ в основата на защитата на морин при AFB1-индуцирано увреждане на тъканите, HETs, освободени в серума, бяха открити от Pico Green. Бяха взети кръвни проби за откриване на нивото на HETsсерум. Експерименталният резултат показва, че AFB1 значително индуцира генерирането на HETs в серума, докато моринът значително инхибира генерирането на HETs в сравнение с групата AFB1 (Фигура 7). По този начин ние първо потвърдихме, че моринът облекчава AFB1-причинява увреждане на черния дроб и бъбреците чрез инхибиране на освобождаването на HETs.

Моринът значително облекчава окислителния стрес1-, причинен от AFB при пилета

Съобщава се, че оксидативният стрес е решаващ механизъм в токсичните ефекти на AFB1, беше открита функцията на морин върху AFB1-причинения оксидативен стрес. Резултатът показва, че AFB1 значително е добавил нивото наоксидаза MDA, като същевременно значително намалява нивата на антиоксидантния ензим GSH-Px, SOD и CAT. Въпреки това, в сравнение с AFB1, моринът ефективно облекчава дисбаланса между оксидазата и антиоксидантните ензими (Фигура 8).

За да се изследва механизмът, лежащ в основата на защитата на морин при AFB1-индуцирано увреждане на тъканите, HETs, освободени в серума, бяха открити от Pico Green. Бяха взети кръвни проби за откриване на нивото на HETs

Morin инхибира значително нивата на иРНК на AFB{0}}индуцирани възпалителни медиатори и възпалителни фактори в черния дроб

Theвъзпалителенреакцията е важен механизъм в токсичните ефекти на AFB1; беше изследван ефектът на морин върху възпалителните реакции, причинени от AFB1-. qRT-PCR анализът беше използван за откриване на експресията на възпалителни медиатори COX-2 и iNOS, и възпалителни фактори TNF-. IL-1 . IL-6. Експерименталните резултати показват, че AFB1 значително подобрява нивата на експресия на тези цитокини, докато моринът значително инхибира експресията на тези цитокини (Фигура 9).

Morin значително инхибира AFB1-Индуцира иРНК експресията на каспаза-1, каспаза-3 и каспаза-11

Съобщава се също, че каспазният сигнален път участва в процеса на оксидативен стрес и възпалителни реакции. ROS може да индуцира увреждане на митохондриалната мембрана, което води до ефлукс на цитохром с и активиране на каспазния сигнален път. Следователно, ние открихме експресията на иРНК на ключови фактори на каспазния сигнален път. Резултатът потвърди, че AFB1 значително повишава експресията на иРНК на каспаза-1, каспаза-3 и каспаза-11, докато моринът значително намалява експресията на тези фактори (Фигура 10).

ДИСКУСИЯ

AFB1 е най-токсичният микотоксин, който е основната причина за аспергилоза. Има много проучвания за токсичността на AFB1, включително хепатотоксичност, невротоксичност и канцерогенност. Черният дроб, като основен орган за детоксикация и основното място на трансформация на метаболизма на веществата при животните, е изключително уязвим към увреждане на AFB1, което се медиира главно от 4 механизма: ензимна система на цитохром P450 (CYP450), митохондрии, имунна система и свободни радикали . След като AFB1 навлезе в тялото, той се абсорбира от дванадесетопръстника на храносмилателния тракт и навлиза в черния дроб през порталната вена, където се трансформира в AFBO от CYP1A2 и CYP3A4 във фаза I метаболизъм ензим CYP450 ензимна система в хепатоцити (Yang et al ..2013). Горният процес е най-важната причина, поради която AFB1 причинява нарушения на тялото и предизвиква токсичност и канцерогенни ефекти. AFB1 също може да индуцира апоптоза на хепатоцити чрез регулиране нагоре на експресията на рецепторите за смърт F AS и TNFR1 и надолу регулиране на експресията на антиапоптотични рецептори XIAP и Bcl-2(Mughal et al., 2017). В предишните експерименти , ние потвърдихме, че AFB1 може да причини увреждане на черния дроб и бъбреците при пилета и предварително изяснихме механизма.

Моринът е вид естествен флавоноид, който има естествена антиоксидантна структура. Хинонът, образуван от неговото окисление, има силна антиоксидантна активност, която може да защити ненаситените мастни киселини на клетъчната мембрана от окисление (Xie et al, 2003). Проучванията потвърждават, че моринът може да играе известна защитна роля при увреждане на черния дроб при мишки, причинено от IFOS, чрез инхибиране на оксидативния стрес. възпаление, както и клетъчна апоптоза (Ozdemir et al2020). Morin също така може да облекчи причинения от LPS мастит чрез инхибиране на PI3K/ AKT, MAPK, NF-kB. и NLRP3 сигнални пътища (Jiang et al..2020). Въпреки това, свързаните защитни ефекти на морин върху щетите, причинени от AFB1-, остават неизвестни. Следователно, този експеримент основно изследва защитните ефекти на морин върху AFB1-причинено увреждане на черния дроб и бъбреците и изяснява неговия механизъм.

Въз основа на по-точна оценка на дозировката и ефектите на морин е избрана интраперитонеалната инжекция. Освен това, методът на приложение с морин е в съответствие с този при мишки и плъхове (Jiang et al..2020;

Khamchai et al, 2020). Първо, нивата на AST, ALT, BUN и CRE в серума бяха изследвани, за да се потвърди, че моделът на токсичност AFB1 е успешно установен. Индексите на увреждане на черния дроб и бъбреците на групата AFB1 бяха значително повишени, докато групите с морин значително инхибираха експресията на тези ензими, което предварително потвърди ролята на морина в защитата срещу увреждане на черния дроб и бъбреците, причинено от AFB1- при пилета. В същото време открихме, че въпреки че няма забележителна разлика в чернодробния индекс между групите, скоростта на растеж на теглото е значително подобрена в групата на лечение с морин (20 mg/kg, 80 mg/kg), потвърждавайки ефекта на морин върху теглото на пилетата. Освен това хистопатологичното изследване потвърди, че моринът ефективно облекчава AFB1-, причиняващ разрушаване на хепатоцитите, подуване, възпалителна клетъчна инфилтрация и некроза на бъбречните клетки, ексфолиация и вакуолизация, което допълнително потвърждава защитните ефекти на морина върху увреждането на черния дроб и бъбреците при пилета . След това проучихме защитния механизъм на морин срещу AFB1-причинено чернодробно и бъбречно увреждане при пилета.

NETs, ​​като първа линия на защита на вродения имунитет, е нож с две остриета за организма. От една страна, той играе важна роля в защитата на организма срещу патогени. От друга страна, той ще причини увреждане на тъканите и ще участва в образуването на някои заболявания, като атеросклероза и тромбоза (Moschonas и Tselepis, 2019). Проучването потвърди, че NET и хистоните играят важна роля при увреждането на епителните клетки на млечната жлеза при говедата (BMEC) и инхибирането на образуването на прекомерни NET може да облекчи нараняването, свързано с мастит (Wei et al. 2019a). Ние също така открихме, че AFB1 може да причини увреждане на черния дроб и бъбреците при пилета чрез индуциране на освобождаването на HETs. Дали защитният ефект на morin върху AFB1, причинено от нараняване при пилета, е свързан с HETs също е важна цел на нашия експеримент. HET действат като жизненоважен вроден имунен отговор на пилетата и най-доброто време за откриване на HET в серума е в рамките на 24 часа, като по този начин е избрано времето на изследването. Установено е, че моринът значително намалява образуването на HETs в серума и за първи път е потвърдено, че моринът облекчава AFB1-причинено нараняване при пилета чрез инхибиране на освобождаването на HET.

В нормалния метаболитен процес на тялото редокс е в динамично равновесие, но когато производството на реактивни кислородни видове (ROS) в тялото надвиши количествата антиоксиданти, ще настъпи оксидативен стрес. Оксидативният стрес участва в много чернодробни заболявания, като чернодробно фибропролиферативно заболяване, алкохолно чернодробно заболяване и неалкохолно мастно чернодробно заболяване (Cichoz-Lach и Michalak, 2014). MDA е крайният продукт на липидната пероксидация, произведен от ROS, и може независимо да отразява степента на увреждане на мембранната система и степента на атака от свободните радикали върху клетките, така че се счита за добър маркер за оценка на оксидативния стрес (Wang et al , 2019). SOD е специфичен антиоксидантен ензим, който пречиства супероксидния анион в ROS свободните радикали, които индиректно наблюдават способността на тялото да премахва свободните от кислород радикали и има изключително важна функция в изследването на чернодробно увреждане (Zhang et al..2018) . GSH-Px е важен индикатор за измерване на редокс състоянието на клетките, който може да противодейства на токсичността на кислородните радикали чрез директно доставяне на H плюс и намаляване

оксидативно увреждане на черния дроб. CAT съществуват в различни тъкани на животни, особено в черния дроб във високи концентрации, които могат ефективно да разграждат водородния пероксид до въглероден диоксид и вода, за да предпазят клетките от окислително увреждане (Alfonso-Prieto et al., 2009). Резултатът показва, че AFB1 значително намалява нивата на антиоксидантните ензими GSH-Px, SOD и CAT, също повишава нивото на антиоксидантните ензими MDA, докато групата на морин показва обратната тенденция, ефективно облекчавайки дисбаланса между оксидазата и антиоксидантните ензими, което показва, че че моринът може ефективно да инхибира окислителния стрес, причинен от AFB1-.

Съобщава се, че ROS може да причини експресията на възпалителни цитокини и активирането на ядрен фактор kappa B (NF-xB) и митоген-активирана протеин киназа (MAPK) пътища (Li et al. 2014). NF-xB протеинът обикновено образува хомо/хетеродимери от p65 и p50 и е в неактивно състояние в цитоплазмата поради образуването на тримерен комплекс с инхибиторния протеин IkB (Pantano et al., 2006). След като бъде стимулиран от патогена, IkB се дисоциира от тримера и NF-kB димерът се излага на ядрени локализационни последователности (NLS), които бързо навлизат в ядрото от цитоплазмата и се свързват със специфични последователности на ядрената ДНК, насърчавайки транскрипция на сродни гени (Zhang and Ghosh, 2001).TNF- е най-важният провъзпалителен цитокин, участващ в активирането на NF-B, индуциращ експресията на IL-18, IL-6, COX -2, iNOS и други възпалителни медиатори надолу по веригата (Rajendran et al 2018). Нашите резултати показват, че AFB1 значително насърчава експресията на иРНК на възпалителни фактори TNF-, IL-1, IL-6 и възпалителни медиатори COX-2 и iNOS, но групата на морин значително инхибира експресията от тези фактори, което показва, че моринът може ефективно да инхибира AFB1-индуцирания възпалителен отговор при пилета.

Проучванията показват, че оксидативният стрес е един от факторите, предизвикващи апоптоза (Chandra et al., 2000) и много вещества, които предизвикват апоптоза, обикновено са оксиданти или стимули в клетъчния окислителен метаболизъм. Активирането на NF-kB може да стимулира транскрипцията на гени на проапоптотичен фактор или да инхибира експресията на антиапоптотични протеини. Междувременно сигналният път на каспазата и възпалителният отговор са в тандем. Каспаза-1 играе важна роля в секрецията на Il-1 и каспаза-11 е хомология на човешката възпалителна каспаза-4 и каспаза-4 каспаза{{9} на членовете на семейството }} (Ван Опденбош и Ламканфи, 2019). Ние потвърдихме, че AFB1 значително повишава експресията на каспаза-1, каспаза-3 и каспаза-11, докато моринът значително намалява експресията на тези фактори, потвърждавайки, че моринът може ефективно да инхибира активирането на AFB1-индуциран каспазен сигнален път при пилета.

Въз основа на горните резултати ние потвърдихме, че моринът може ефективно да облекчи причинените от AFB1-увреждания на черния дроб и бъбреците при пилетата, което може да осигури експерименталната основа и теоретичната справка за практическото приложение на морина. При следващите изследвания трябва да се избере режим на хранене с морин, като вода за пиене и са необходими повече пилета и по-възрастни пилета, за да се потвърди ефектът на морина в птицевъдството.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Моринът, като естествено съединение, често срещано в китайските билкови лекарства и хранителни добавки, е напълно проучено и потвърдено за неговата безопасност и е получило задоволителни резултати. Експериментите ни допълнително показаха, че моринът може ефективно да облекчи увреждането на черния дроб и бъбреците, причинено1- от AFB, като инхибира освобождаването на HETs, оксидативния стрес и възпалителния отговор. Следователно, това проучване показва, че моринът има потенциал като фуражна добавка за защита на черния дроб и бъбреците на домашните птици, предотвратяване на вредни вещества във фуража и подобряване на продуктивността на домашните птици.