ЧАСТ 1 Водни екстракти от Herba Cistanche насърчават чревната подвижност при плъхове с индуциран от лоперамид запек чрез подобряване на интерстициалните клетки на Cajal

Shuai Yan, 1, 2 Yin-zi Yue, 1 Xiao-peng Wang, 1 Hong-li Dong, 1 Shu-guang Zhen, 1 Ben-sheng Wu, 1 и Hai-hua Qian3

1 Болница Суджоу наТрадиционна Китайска Медицина,Суджоу, Дзянсу 215009, Китай

2 Университет на НанкинТрадиционна Китайска Медицина, Нанкин, Дзянсу 210023, Китай

3 Отделение по аноректална хирургия, болница на провинция ДзянсуТрадиционна Китайска Медицина, Нанкин, Дзянсу 210029, Китай

Correspondence should be addressed to Hai-Hua Qian; haihuaqian@126.com

Получена на 24 май 2017 г.; Преработен на 5 октомври 2017 г.; Приет на 25 октомври 2017 г.; Публикувано на 28 декември 2017 г

Академичен редактор: Самра Башир

Авторско право © 2017 Shuai Yan et al. Това е статия с отворен достъп, разпространявана под лиценза Creative Commons Attribution, който позволява неограничена употреба, разпространение и възпроизвеждане във всеки носител, при условие че оригиналното произведение е правилно цитирано.

Традиционна Китайска Медицинасе съобщава, че има добри ефекти при лечение на функционален запек. Тази работа се опитва да докаже ефектите на водните екстракти от Herba Cistanche (AEHC) върху лечението на STC и да определи възможните механизми чрез модел на индуциран от лоперамид бавен транзитен запек (STC). HPLC се извършва за идентифициране и потвърждаване на биоактивните компоненти в AEHC. Беше установено, че AEHC отслабва отговорите на STC на базата на повишено фекално количество, съдържание на влага и скорост на чревния транзит, както и серумни нива на GAS, MTL, SS и CGRP. Нивата на протеин и иРНК на c-kit, маркиране на интерстициални клетки на Cajal (ICC), също се повишават. Междувременно, само протеиновото ниво на SCF, лиганд на c-kit, се повишава. Анализът на нашите данни предполага, че AEHC очевидно може да подобри функцията на ICC чрез сигнален път, включващ PI3K, SCF и c-kit и да подобри индексите на подвижността на дебелото черво като GAS, MTL, SS и CGRP. Интересно е да се отбележи, че AEHC изглежда е ефективен при запек, така че са необходими допълнителни експерименти, за да се изяснят точните включени механизми.

За повече информация моля свържете се с:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola има много ефекти, щракнете тук, за да научите повече

1. Въведение

Запекът е често срещано функционално стомашно-чревно заболяване и проблем на общественото здраве, характеризиращ се с продължителна трудна, рядка или непълна дефекация [1]. Разпространението на запека варира от 0.7 процента до 81 процента по целия свят, особено при възрастните хора [2, 3]. Бавен транзитен запек (STC) е често срещано стомашно-чревно оплакване сред 13–37 процента от пациентите с хроничен резистентен на лечение запек [4, 5]. Епидемиологичните данни показват по-висока честота наSTCсред младите жени, отколкото при мъжете [6].STCпричинява неразрешим запек, показващ слаб отговор на консервативно лечение и склонност към невродегенеративно разстройство. Не е толкова просто като функционално заболяване, то изисква инвазивно и агресивно лечение [7].

Редица настоящи химически лекарства като осмотични или секреторни лаксативи и обемни агенти се използват универсално за

лекуват запек [8], въпреки че приложенията им са ограничени поради високите разходи и коремни странични ефекти като болка, спазми и подуване на корема [9]. Понастоящем регулирането на стомашно-чревния тракт е основният фокус на терапиите за запек. Цизапридът първоначално е генериран като средство за стимулиране на стомашно заболяване, но по-късно е изтеглен поради риска от сърдечни аритмии [10].

Tegaserod е селективен 5-хидрокситриптаминов рецепторен антагонист, който може да стимулира чревната перисталтика и секреция [11, 12]. Прукалоприд е ново производно на дихидро бензофуран карбоксамид и 5-HT рецепторен агонист с висока селективност и специфичност, който може да подобри подвижността на стомаха, тънките черва и дебелото черво и работи по-бързо в динамика [13–15]. Като производно на простагландин Е1, лубипростонът може селективно да активира CIC канала, за да насърчи стомашно-чревната секреция и да увеличи ефектите от чревното предаване [16].

Цистанчеима ефект на тонизиране набъбреки може също да лекувазапек

Мотилитетът при запек е широко разпространен проблем, но неговата етиология все още не е ясна. Въпреки това, убедителни доказателства показват приноса на интерстициалните клетки на Cajal (ICC) към патогенезата на запека [17]. ICC се намира между нервните окончания и гладкомускулните клетки в стомашно-чревния тракт. ICC е общопризнат като пейсмейкър клетки за стомашно-чревна активност и като медиатори на нервно-мускулно предаване [18]. Проучванията показват, че плътността на ICC в дебелото черво на пациенти с бавен транзитен запек е забележително по-ниска в сравнение с тази при нормални пациенти [19]. Съответно, намаляващият брой на ICC може да доведе до недостиг на активност с бавни вълни, като по този начин повлиява контрактилния отговор и предизвиква забавен транзит при пациенти със запек с бавен транзит. За тази цел подобряването на ICC с помощта на фармацевтични продукти може да бъде от решаващо значение за излекуване на бавния транзитен запек.

Различни билкови лекарства и традиционна китайска формула Mula наскоро привлякоха вниманието като новомодни терапевтици за лечение на хроничен запек в резултат на подобрено производство на изпражнения [20, 21]. Herba Cistanche е традиционно билково лекарство, използвано за лечение на хронично бъбречно заболяване, женско безплодие, профузна менорагия и импотентност [22, 23]. Herba Cistanche предотвратява апоптозата на мозъчните неврони чрез експресиране на свързани с апоптоза фактори и невротрофични фактори в MES23.5 клетки [24]. Herba Cistanche също демонстрира фармацевтичен потенциал при лечението на синдрома на бъбречна недостатъчност на Yang-Qi. Скорошно проучване показа, че Herba Cistanche повишава митохондриалното дишане и антиоксидантния статус на глутатиона в H9c2 кардиомиоцитите [25].

TCM вярва, че запекът има тясна връзка с бъбреците. Отваряйки се на външните гениталии и ануса, бъбрекът управлява уринирането и дефекацията. Транспортирането на отпадъците зависи от насърчаването на бъбречната ци и подхранването на бъбречния ин. Ако бъбречният ян е дефицитен или вратата на огъня на живота изчезне, студената конгестия на дебелото черво ще доведе до стагнация на отпадъците. Запекът също се причинява от сухо движение на червата, тъй като дефицитът на бъбречна есенция не успява да генерира достатъчно течност [26].

HerbaЦистанчее често срещана обединяваща билка, която е сладка и солена на вкус и топла по природа. Приписващ се на меридианите на дебелото черво и бъбреците, той може да тонизира ян на бъбреците и да овлажнява червата, за да облекчи запека. Тази единствена билка и нейнатаКитайскифармацевтичните препарати са били широко използвани за лечение на запек със забележителна ефикасност [27].

В Китай ефектите на HerbaЦистанчекорени при запек са записани [28, 29] и посочени в китайската Materia Medica на Shen Nong като „изсушени сочни стъбла от вида Cistanche“ [30]; Въпреки това досега не е имало научно доказателство за ефекта на корените от Herba Cistanche върху запека, клинично ефективната доза е 20 g на ден приКитайска фармакопеяи клиничният ефект не се увеличава допълнително с дозировката.

Тъй като Herba Cistanche е толкова оскъдна [31], стандартизирането на нейната клинична дозировка за лечение наSTCчрез експериментално проучване не само предотвратява неуспешно лечение, дължащо се на неадекватна дозировка, но също така предпазва пациентите от икономически загуби и дори злополука с лекарства поради прекомерна употреба. Надяваме се

резултатите биха могли да поставят научна основа за нови лекарства за запек. Следователно е важно да се проучи функцията на водната Herba Cistanche за чревна промоция и нейното действие върху ICC в настоящото изследване.

Цистанчеможе да лекувазапек

2. Материали и методи

2.1. Приготвяне на воден екстракт от Herba Cistanche.

Всички Herba Cistanche са закупени от Nanjing Haichang Chinese Medicine Group Co., Ltd. (Nanjing, Китай), които са събрани, събрани и обработени съгласно стандартните етноботанически практики от насажденията в района Sinkiang в Китай. Идентичността на растението е установена морфологично от професор Ту Лин Лу от Нанкинския университет по китайска медицина, Нанкин, Китай. Образец на ваучер (NUCMCHS-2015628) беше депозиран в Колежа по здравни науки, Нанкинския университет по китайска медицина, Нанкин, Китай.

Резени Herba Cistanche, тежащи 500 g, се пулверизират с помощта на електрически блендер и се екстрахират в 5000 ml дестилирана вода, след което водният екстракт се пречиства при 100 °C в продължение на 2 часа, като се използва оборудване за циркулираща екстракция

мембранни пори (Millipore, Billerica, MA, USA), и остатъкът, получен от екстрактите, се разтваря в 4000 ml вода. След екстракция с обратен хладник, екстрактите се събират и изпаряват, за да се получи крайната проба от продукта. Водните екстракти се концентрират до сухи пелети (1 g/ml), като се използва a

за последваща употреба. Твърдите проби се разтварят в дестилирана вода, за да се получат необходимите дози от 10, 20 и 40 mg/kg телесно тегло за експеримента.

2.2. Животни.

Експерименталният протокол, използван в това проучване, беше прегледан и одобрен въз основа на етични процедури и научна грижа от болница Суджоу наТрадиционна Китайска Медицина-Институционален комитет за грижа и използване на животните, Суджоу, Китай (SHTCM-IACUC; номер на одобрение: PNU- 2016-0003). Всички мъжки плъхове (щам Sprague Dawley) с ag са закупени от Центъра за изследване на лабораторни животни в Шанхай в съответствие с насоките на Националния институт по здравеопазване. Животните имаха свободен достъп до стандартна диета (AIN-93 M) и чешмяна вода ad libitum и бяха настанени индивидуално в процентна относителна влажност от неръждаема стомана и изложени на 12 часа естествена светлина и 12 часа тъмно дневно.

2.3 Експериментален дизайн.

Лоперамидът се използва за предизвикване на запек при плъхове в съответствие с предишни проучвания [32, 33]. Общо 60 плъха бяха разделени на случаен принцип в 5 групи (на група): A: нормална група (NG), B: моделна група (Lop плюс група, третирана с носител), C: група плъхове със запек, третирани с ниско съдържание на воден екстракт от Herba Cistanche (Lop плюс LAEHC-третирана група), D: група плъхове със запек, третирани със среден воден екстракт от Herba Cistanche (Lop плюс MAEHC-третирана група), и E: група плъхове със запек, третирани с високо воден екстракт от Herba Cistanche (Lop плюс група, лекувана с HAEHC). Група А беше третирана с нормален физиологичен разтвор (10 ml/kg); Група Б е лекувана с лоперамид

(4 mg/kg); Група C беше третирана с лоперамид (4 mg/kg) и нисководен екстракт от Herba Cistanche (1 g/kg); Група D беше третирана с лоперамид (4 mg/kg) и среден воден екстракт от Herba Cistanche (2 g/kg), а група E беше третирана с лоперамид (4 mg/kg) и висок воден екстракт от Herba Cistanche (4 g/ килограма). Всички плъхове от нормалната група бяха инжектирани с 0.9% натриев хлорид, докато другите бяха инжектирани с лоперамид в 0.9% натриев хлорид два пъти дневно в продължение на 3 последователни дни, за да предизвикат запек. Водният екстракт от Herba Cistanche се суспендира във вода и се прилага перорално веднъж дневно от ден 4 до ден 18 в група C, група D и група E, докато групи A и B получават постоянен обем вода чрез сонда.

2.4. Хроматографско състояние.

HPLC профилирането е извършено в Shimadzu Liquid Chromatographic System (Токио, Япония), състояща се от LC-20AT помпа и

бяха наблюдавани при 330 nm при 30 C. Изократната подвижна фаза се състоеше от метанол 0,1 процента мравчена киселина (80 : 20, v/v) и протичаше при скорост на потока 1,0 ml/min . Хроматографското разделяне беше

размер на частиците 5 m, Beijing Dikma Science and Technology Co., Ltd., Пекин, Китай).

2.5. Анализ на упражнения, прием на храна, прием на вода, тяло

Гума (водна суспензия от 20 процента въглен и 10 процента гума) се прилага орално в обем от 25 ml/kg за всяко животно. След 30 минути, животните бяха хуманно умъртвени чрез цервикална дислокация и дисектирани. Тънките черва от пилора до сляпото черво бяха прекосени и разстоянието, покрито от брашното от въглен, и общата дължина на тънките черва бяха измерени. За отделен плъх процентът на чревния транзит се изчислява като процент на разстоянието, изминато от брашното с въглен спрямо общата дължина на тънките черва. Следното уравнение изчислява скоростта на чревния транзит (проценти): разстояние, изминато от въглен/разстояние от пилора до цекума 100 процента.

2.6. Вземане на кръвни проби и тъкани. В края на експерименталния период плъховете бяха подложени на 12 часа гладуване, но им беше разрешен свободен достъп до вода. След това всички плъхове бяха анестезирани 30 минути по-късно чрез интраперитонеално инжектиране на натриев пентобарбитал (50 mg/kg) и поставени на маса с регулирана температура. Кръвните проби бяха събрани и центрофугирани при 3500 rpm за 15 минути, за да се получи серум. Дебелото черво се разделя незабавно и се промива с нормален физиологичен разтвор при 4°C и след това се разделя на две части. Единият фрагмент беше фиксиран в 10 процента формалин и обработен в разделен парафин за последващ имунохистохимичен (IHC) анализ, докато другият беше тегло и коса. Промени в упражненията, приема на храна, вода

съхранявани при 80°С, докато бъдат анализирани. приемът, телесното тегло и косата се наблюдават и записват ежедневно през целия експериментален период. Наблюдавахме "промени в упражнението" след специфичните стъпки: самостоятелно направената кутия (60 cm висока, 50 cm дълга и 80 cm широка с тъмна периферна стена) се използва за тест на открито; бялата основа беше разделена на диаманти (12 см) от черната линия в тъмна и тиха стая; крушка от 100 W, окачена на 1 m над центъра на кутията; плъховете бяха поставени в центъра на кутията на 4-ия, 6-ия, 12-ия и 18-ия ден от моделирането. Броят на квадратчетата, през които плъховете преминават в рамките на 5 минути, се използва като резултат за хоризонтално движение, а времето за изправяне на плъховете в рамките на 5 минути се използва като резултат за вертикално движение. Резултатите от хоризонтално и движение плюс резултати от вертикално движение показват количеството упражнения на плъхове. Всеки плъх беше измерен веднъж [34, 35].

Цистанчеможе да облекчизапек

2.7. Измерване на фекални параметри.

В последния ден от пероралното приложение, пресни пелети от изпражнения от всеки SD плъх се събират в епруветки с обло дъно и запушалка за 6 часа и се записват общите тегла от всяка група. За да определим съдържанието на фекална влага, използвахме електрическа везна, за да изсушим пелетите от изпражненията до достигане на постоянно тегло и измерихме сухото тегло. Съдържанието на влага

2.8. Оценка на GAS, MTL, SS и CGRP.

Концентрациите на гастрин (GAS), мотилин (MTL), соматостатин (SS) и калцитонин ген-свързан пептид (CGRP) в серума бяха оценени чрез ELISA, като се използваха налични в търговската мрежа комплекти.

2.9. Хистологичен анализ.

Напречните колони, събрани от SD плъхове, се фиксират с 10 процента формалин за 12 часа, вградени

m дебели резени, които бяха оцветени с хематоксилин и еозин (H&E, Sigma-Aldrich, MO, USA). Морфологичните характеристики на тези срезове бяха наблюдавани под светлинна микроскопия, след което дължината на вилуса, дебелината на криптата и дебелината на мускула бяха измерени с помощта на Leica Application Suite (Leica Microsystems, Швейцария).

2.10. Имунохистохимичен анализ.

Следвахме методите на Zhu et al. (2016) [36]; неоцветени 5 м участъци бяха

оцветени със заешки анти-c-kit (1:100) при 4°С за една нощ. Методът на вторичното антитяло и комплекса авидин-биотин-пероксидаза се използва съгласно инструкциите на производителя. Използвана е имуноглобулин-отрицателна контрола за елиминиране на неспецифичното свързване. Нива на изразяване на c-kit

2.11. Анализ на скоростта на чревния транзит.

Съотношението на чревния транзит се провежда съгласно докладвани по-рано протоколи [36]; накратко, след 14 дни лечение, всички SD плъхове бяха подложени на 12 часа гладуване, но им беше разрешен свободен достъп до вода.

Полимеразна верижна реакция в реално време. Нивата на генна експресия на c-kit, SCF и PI3K иРНК в дебелото черво бяха определени с помощта на комплект за екстракция на тотална РНК (TIANGEN Biotech,

Пекин, Китай) съгласно протоколите на производителя. PCR в реално време се извършва с ABI StepOnePlus PCR система в реално време (ABI). SYBR Green I Real-Time PCR Master Mix (QPK201, Toyobo, Япония) беше използван за откриване на PCR продукти. Реакциите се провеждат в три повторения. Впоследствие прясна тъкан от дебелото черво на плъх с тегло 0,5 g беше хомолог-

l) се екстрахира съгласно инструкциите на производителя, като се използва реагент TRIzol (Invitrogen, САЩ). Използван е комплект за обратна транскрипция-PCR (Takara Biotechnology Co., Inc.) за синтезиране на първата верига на cDNA в съответствие с протокола на производителя. Всички целеви параметри са показани в таблица 1. Цикличният протокол беше при следните условия: 95 °C за 5 минути (денатурация на ДНК), последвано от 40 цикъла от 95 °C за 15 s, 60 °C за 20 s и 72 °C за 40 с. Беше извършен анализ на кривата на топене в края на циклите на усилване.

2.12. Уестърн блот анализ.

Протеиновото съдържание на c-kit и SCF в хомогенати от проби от дебелото черво се оценява чрез Western blot. Накратко, общите протеини на хомогенати се определят с помощта на анализ на бицинхонинова киселина (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA). Натриев додецилсулфат-полиакриламиден гел (SDS-PAGE) беше използван за разделяне на протеини в системата за електрофореза BioRad (BioRad Laboratories, Херкулес, Калифорния, САЩ). След това протеините се прехвърлят към мембрани от поливинилиден дифлуорид (PVDF). След 2 часа третиране с блокиращ буфер в TBS, съдържащ 5 процента обезмаслено мляко при стайна температура, PVDF мембраните се инкубират за една нощ с 1: 1000 разреден анти-c-kit (Santa Cruz, CA, USA), 1: 500 разреден анти-c-kit SCF (Сигма, Мисури,

САЩ) и съответно 1: 8000 разредени анти-актинови (Kangchen, Shanghai, China) антитела. Свързването на първичното антитяло се открива с помощта на съответното HRP-конюгирано вторично антитяло (Beyotime, Jiangsu, Китай). Подобрен комплект за хемилуминесценция (Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL, USA) и Odyssey Infrared Imaging System (Gene Company Ltd., Хонг Конг) бяха използвани за откриване на хемилуминесценция. Като контрола на натоварването беше използван домакински пролактин. Количеството протеинова експресия е представено спрямо нивата на актин.

2.13. Статистически анализ.

Данните от измерването бяха докладвани като средна стандартна грешка на средната стойност (SEM) и анализирани от SPSS

16.0 софтуер (SPSS, Чикаго, Илинойс, САЩ). Използван е еднопосочен дисперсионен анализ (ANOVA), последван от многобройните тестове на Duncan, за да се определят значителни разлики във всички параметри. Стойностите се считат за статистически значими при

Цистанчеотвара е добро лекарство за лечениезапек

3. Резултати

3.1. Състав и функционални компоненти на Herba Cistanche.

Както е показано на Фигура 1, корените на Herba Cistanche съдържат високи концентрации на няколко биоактивни компонента, свързани с слабителни ефекти. Концентрациите на общия ехинакозид и общия вербаскозид бяха съответно 0.64 mg/g и 0.16 mg/g. Два пика, показващи високи нива на ехинакозид и вербаскозид, бяха открити в LP при подходящо време на задържане чрез високоефективна течна хроматография (HPLC).

3.2. Общо наблюдение.

SP плъховете не умряха през целия ход на експеримента, което показва по-добра сигурност и работоспособност на животинския модел. В сравнение с група А, плъховете в моделната група показват пухкава козина, отпадналост, сухи изпражнения и

се влошава с удължаването на времето за моделиране.

3.3. Ефект на AEHC върху броя на изпражненията и съдържанието на влага при плъхове с индуциран от лоперамид запек.

В сравнение с нормалните изпражнения, изпражненията в Групи B, C, D и E бяха сухи, малки и твърди и бяха без изглаждане преди лечението.

в края на краищата плъховете са били инжектирани с лоперамид (лекувани с лекарство са облекчили симптомите като тяло и 3(b)).

теглото не се различава значително сред всички експериментални групи, въпреки че група Е показва малко по-ниско телесно тегло от другите групи (Фигура 2 (а)). В допълнение, SD плъхове със запек са яли значително по-малко храна от група A (), докато разликите между групи B, C, D и E (Фигура 2 (b)) не са значими. Потреблението на вода също не се промени между група А и група Б. Освен това не беше установено значително увеличение на потреблението на вода в

че лечението с AEHC не е предизвикало никаква промяна. Въпреки че скоростта на чревния транзит в групи C, D и също е значително по-високаГрупите C, D и E имат значително по-ниски съотношения от група A.

3.4. Ефект на AEHC върху скоростта на преминаване през тънките черва при плъхове с индуциран от лоперамид запек.

Както се вижда от Фигура 4, не са открити разлики в изходното време за преминаване през тънките черва между петте групи. Група B има видимо по-нисък коефициент на задвижване на прах от въглен в сравнение с група A (𝑃 < 0.01).="" въпреки="" че="" скоростта="" на="" чревния="" транзит="" в="" групи="" c,="" d="" и="" e="" също="" беше="" значително="" по-висока="" от="" тази="" в="" група="" b="" (𝑃=""><0,05), групите="" c,="" d="" и="" e="" имаха="" значително="" по-ниски="" съотношения="" от="" група="">

3.5. Интервенцията с AEHC частично подобрява функцията на индекса на подвижността на дебелото черво.

Серумните нива на GAS и MTL, получени от плъхове от група B, значително намаляват в сравнение с тези от група A (𝑃 < {{0}}.01,="" респ.).="" от="" друга="" страна,="" групи="" c,="" d="" и="" e="" (𝑃="">< 0.05,="" респ.)="" имат="" ефективно="" по-високи="" нива="" на="" gas="" и="" mtl="" от="" прилагането="" на="" екстракти="" от="" herba="" cistanche="" в="" сравнение="" с="" група="" b="" стойностите="" на="" ss="" при="" плъхове="" от="" група="" b="" са="" по-високи="" в="" сравнение="" с="" група="" a="" (𝑃="">< 0.01);="" групи="" c,="" d="" и="" e="" имат="" атенюирани="" нива="" на="" ss="" (𝑃=""><0,05) (фигура="" 5).="" в="" сравнение="" с="" плъхове="" със="" запек,="" нивата="" на="" cgrp="" в="" нормални="" плъхове="" от="" група="" а="" (𝑃="">< 0,01)="" и="" в="" групи="" c,="" d="" и="" e,="" на="" които="" е="" приложен="" herba="" cistanche,="" са="" постоянни="" (𝑃=""> 0,05).

3.6. Хистологична промяна на дебелото черво.

За да се изследва дали лечението с AEHC може да предизвика структурна промяна на тъканта на дебелото черво, дължината на вилуса, дебелината на слоя на криптата и дебелината на мускулите бяха измерени в напречните колони на плъхове в петте групи след H&E оцветяване. Чрез сравняване на патологията на дебелото черво на плъховете във всяка група, лигавицата на дебелото черво е гладка и съдържа малки артерии и малки вени в субмукозата и голям брой мастни клетки. В допълнение, мускулният слой се състои от гладкомускулни клетки и субсерозата е пълна. Средната дължина на вилата беше значително по-къса в група B, отколкото в група A (𝑃 < {{0}}.01).="" въпреки="" това,="" средната="" дължина="" на="" вилуса="" в="" група="" c="" значително="" се="" е="" увеличила="" с="" повече="" от="" 30="" процента="" в="" сравнение="" с="" група="" b="" (фигури="" 6="" и="" 7)="" (𝑃=""><0,05). междувременно,="" средната="" дължина="" на="" вилата="" се="" увеличава="" значително="" в="" групи="" d="" и="" e="" в="" сравнение="" с="" група="" b="" (фигури="" 6="" (a)="" и="" 6="" (b))="" (𝑃=""><0.01). освен="" това,="" промяната="" на="" мускулната="" дебелина="" е="" много="" подобна="" на="" дължината="" на="" вила.="" в="" група="" б,="" мускулната="">

беше драстично по-тънък в сравнение с група А. Въпреки това, нивата на мускулна дебелина в групите C, D и E се увеличиха с 30-35 процента в сравнение с тези на група B (фигури 6 и 7). Като цяло, тези констатации показват, че AEHC може да увеличи дължината на вилуса и мускулната дебелина в дебелото черво на плъхове със запек.

3.7. Прилагане на лечение с AHEC Повишена протеинова експресия на c-Kit и SCF.

Имунореактивността му беше открита в дебелото черво, тъй като клетките във всички групи бяха положителни за c-kit. Както е показано на фигура 8, нивото на експресия на c-kit в група B е по-ниско от това в група A (𝑃 < 0.05).="" нивото="" на="" експресия="" на="" c-kit="" в="" група="" c="" е="" по-високо="" от="" това="" в="" група="" b="" (𝑃="">< 0.{{20}}5),="" докато="" повече="" c-kit="" присъства="" в="" групи="" d="" и="" e="" отколкото="" в="" група="" b="" (𝑃="">< 0.05).="" след="" третиране="" с="" различни="" концентрации="" на="" воден="" екстракт="" от="" herba="" cistanche="" в="" продължение="" на="" 2="" седмици,="" нивата="" на="" протеинова="" експресия="" на="" c-kit="" и="" scf="" бяха="" открити="" чрез="" western="" blot="" анализ.="" western="" blot="" анализът="" показа,="" че="" нивата="" на="" експресия="" на="" c-kit="" и="" scf="" са="" забележително="" по-ниски="" след="" лечение="" с="" лоперамид="" в="" дебелото="" черво="" на="" плъхове="" (фигура="" 9).="" фигура="" 8(e)="" демонстрира,="" че="" намаленият="" c-kit="" при="" плъхове="" със="" запек="" се="" е="" увеличил="" значително="" с="" 31,2="" процента="" след="" третиране="" на="" плъховете="" с="" 500="" µg/ml="" aehc="" (𝑃=""><0,05). в="" допълнение,="" лечението="" със="" 100="" и="" 200="" g/ml="" aehc="" повишава="" нивата="" на="" експресия="" на="" c-kit="" протеин.="" експресията="" на="" scf="" протеин="" значително="" се="" повишава="" с="" 20,1,="" 24,7="" и="" 8,4="" процента="" при="" лечение="" съответно="" със="" 100,="" 200="" и="" 500="" µg/ml="" aehc="" (фигура="" 9).="" 3.8.="" ефект="" на="" aehc="" върху="" експресията="" на="" ирнк="" на="" c-kit,="" scf="" и="" pi3k.="" за="" да="" се="" изследва="" дали="" лечението="" с="" aehc="" може="" да="" повлияе="" на="" регулацията="" на="" ирнк,="" свързана="" с="" мускулната="" контракция,="" бяха="" наблюдавани="" промени="" в="" нивата="" на="" експресия="" на="" c-kit,="" scf="" и="" pi3k="" в="" дебелото="" черво="" на="" плъхове="" със="" запек,="" използвайки="" специфични="" праймери.="" резултатите="" показват,="" че="" нивата="" на="" mrna="" на="" c-kit="" в="" група="" b="" са="" значително="" по-ниски="" в="" сравнение="" с="" група="" a="" (𝑃=""><0,05), докато="" нивата="" на="" mrna="" в="" групи="" c,="" d="" и="" e="" са="" по-високи,="" отколкото="" в="" група="" b="" (𝑃=""><0,05) (фигура="" 10).="" изследвахме="" и="">

експресия на SCF, лиганд на kit. Експресията на mRNA на SCF при плъхове от група B е значително по-ниска, отколкото в група A, докато лечението с AEHC в групи C, D и E повишава експресията на mRNA на SCF (Фигура 10). В допълнение, ние изследвахме ефекта на AEHC върху експресията на PI3K ген. На 14-ия ден нивото на експресия на PI3K ген е значително по-високо в групи C, D и E, отколкото в група B (𝑃 <>