Част 1: Изтичането на магнезий от клетките на Drosophila Kenyon е критично за нормалната и подобрена с диета дългосрочна памет

за повече информация:Ali.ma@wecistanche.com

Моля, щракнете тук за част 2

Yanying Wu1, Yosuke Funato2, Eleonora Meschi1, Kristijan D Jovanoski1, Hiroaki Miki2, Scott Waddell1*

1 Център за невронни вериги и поведение, Оксфордския университет, Tinsley Building, Оксфорд, Обединеното кралство; 2 Отдел по клетъчна регулация, Изследователски институт за микробни заболявания, Университет в Осака, Суита, Япония

Резюме Диетичните добавки с магнезий (Mg2 плюс) могат да подобрятпаметпри млади и възрастни плъхове.памет-увеличаването на капацитета до голяма степен се приписва на увеличаване на синаптичната плътност на хипокампа и повишена експресия на NR2B субединицата на NMDA-тип глутаматния рецептор. Тук показваме, че храненето с Mg2 плюс също подобрява дългосрочнопаметв дрозофила. Нормална и Mg2 плюс - подобрена мухапаметизглежда независимо от NMDA рецепторите в тялото на гъбите и вместо това изисква експресия на запазен CNNM-тип Mg2 плюс -ефлукс транспортер, кодиран от неразширения (uex) ген. UEX съдържа предполагаем цикличен нуклеотид-свързващ хомологичен домен и неговата мутация разделя жизненоважна роля за uex от функция впамет. Освен това локализацията на UEX в Kenyon клетките на тялото на гъбите (KCs) се променя впамет-дефектни мухи, носещи мутации в cAMP-свързани гени. Функционалното изобразяване предполага, че UEX-зависимият ефлукс е необходим за бавно ритмично поддържане на KC Mg2 плюс. Ние предлагаме, че регулираният невронален Mg2 плюс изтичане е критичен за нормалния и Mg2 плюс -усиленпамет.

Кликнете, за даМагазин за витамини Cistanche и Cistanche за памет

Въведение

Магнезият (Mg2 плюс) играе критична роля в клетъчния метаболизъм и се счита за основен кофактор за повече от 350 ензима (Romani и Scarpa, 2000; Vink и Nechifor, 2011). В резултат на това промените на Mg2 плюс хомеостазата са свързани с широк спектър от клинични състояния, включително такива, засягащи нервната система, като глаукома (DeToma et al., 2014), болест на Паркинсон (Hermosura et al., 2005; Hermosura и Garruto, 2007; Lin et al., 2014; Shindo et al., 2016), болестта на Алцхаймер (Andra´si et al., 2000; Andra´si et al., 2005; Cilliler et al., 2007; Durlach et al. ., 1997; Glick, 1990; Lemke, 1995; Chui et al., 2011; Vural et al., 2010), тревожност (Sartori et al., 2012), депресия (Whittle et al., 2011; Murck, 2002; Murck, 2013; Rasmussen et al., 1990; Ghafari et al., 2015) и интелектуално увреждане (Arjona et al., 2014).

Може би изненадващо, увеличаването на мозъка Mg2 плюс чрез диета може да подобри пластичността на невроните ипаметпроизводителност на млади и възрастни гризачи, измерена в различни поведенчески задачи (Slutsky et al., 2010; Landfield and Morgan, 1984; Mickley et al., 2013; Abumaria et al., 2013). В допълнение, повишеният Mg2 плюс намалени когнитивни дефицити в миши модел на болестта на Алцхаймер (Li et al., 2013) и засилва изчезването на спомените за страх (Abumaria et al., 2011). Тези очевидно благоприятни ефекти са довели до предложението, че диетичният Mg2 плюс може да има терапевтична стойност за пациенти с различнипамет-свързани проблеми (Billard, 2011).

Въпреки големия брой потенциални места за действие на Mg2 плюс в мозъка,памет-увеличаващото свойство при гризачи до голяма степен се дължи на увеличаването на хипокампалната синаптична плътност и активността на N-метил-D-аспартат глутаматните рецептори (NMDAR). Екстрацелуларният Mg2 plus блокира порите на канала на NMDAR и по този начин инхибира преминаването на други йони (Mayer et al., 1984; обобщение. Пословичната поговорка „ти си това, което ядеш“ идеално обобщава концепцията, че нашата диета може да повлияе както на умственото, така и на физическо здраве. Знаем, че храни, които са полезни за сърцето, като ядки, мазна риба и горски плодове, са полезни и за мозъка. Знаем също, че витамините и минералите са от съществено значение за цялостното добро здраве. Но има ли доказателства че увеличаването на приема на определени витамини или минерали може да помогне за стимулиране на мозъчната ви сила?

Въпреки че може да звучи твърде добре, за да е истина, има някои доказателства, че това е така за поне един минерал, магнезий. Проучвания при гризачи показват, че добавянето на магнезиеви добавки към храната подобрява доколко добре животните изпълняват задачите на паметта. И младите, и старите животни се възползват от допълнителния магнезий. Дори възрастните гризачи със състояние, подобно на болестта на Алцхаймер, показват по-малкопаметзагуба при приемане на магнезиеви добавки. Но какво да кажем за другите видове?

Wu и др. сега показват, че магнезиевите добавки също повишават производителността на паметта при плодовите мушици. Една група мухи беше хранена със стандартно царевично брашно в продължение на няколко дни, докато другата група получи царевично брашно, допълнено с магнезий. След това и двете групи бяха обучени да свързват миризма с награда за храна. Мухите, които са получили допълнителния магнезий, се показват по-добрепаметза миризмата при тестване 24 часа след тренировка.

Wu и др. показват, че магнезият подобрявапаметв мухите чрез механизъм, различен от докладвания по-рано за гризачи. При гризачи магнезият повишава нивата на рецепторен протеин за мозъчен химикал, наречен глутамат. При плодовите мухи, напротив,паметусилването зависи от протеин, който транспортира магнезия от невроните. Мутирани мухи, които нямаха този транспортер, показаха увреждания на паметта. За разлика от нормалните мухи, тези без транспортьор не показват подобрение на паметта след консумация на храна, обогатена с магнезий. Резултатите предполагат, че транспортерът може да помогне за регулиране на нивата на магнезий в мозъчните клетки в отговор на невронната активност.

Хората произвеждат четири варианта на този магнезиев транспортер, всеки кодиран от различен ген. Един от тези транспортери вече е замесен в развитието на мозъка. Констатациите на Wu et al. предполагат, че транспортерите могат да действат и в мозъка на възрастните, за да повлияят на познанието. Необходими са допълнителни проучвания, за да се провери дали насочването към магнезиевия транспортер в крайна сметка може да бъде обещаващо за лечениепаметувреждания.

Bekkers и Stevens, 1993; Jahr и Stevens, 1990; Nowak et al., 1984). Важно е, че предшестваща невронална деполяризация, задвижвана от други трансмитерни рецептори, е необходима за освобождаване на Mg2 плюс блока на NMDAR и за разрешаване на глутамат-зависим Ca2 плюс приток. Следователно NMDAR играе важна роля в пластичността на невроните като потенциален хебийски детектор за съвпадение. Острото повишаване на екстрацелуларната концентрация на Mg2 плюс ([Mg2 плюс ]e) в рамките на физиологичния диапазон (0,8–1,2 mM) може да противодейства на индуцирането на NMDAR-зависимо дългосрочно потенциране (Dunwiddie and Lynch, 1979; Malenka et al., 1992; Malenka и Nicoll, 1993; Slutsky et al., 2004). Обратно, увеличаването на [Mg2 плюс]e за няколко часа в невронни култури води до усилване на NMDAR медиирани токове и улесняване на експресията на LTP (Slutsky et al., 2004). Подобряващите ефекти на увеличения [Mg2 плюс ]e също се наблюдават in vivo в мозъка на плъхове, хранени с Mg2 плюс -L-треонат (Slutsky et al., 2010). Хипокампалните невронни вериги претърпяват хомеостатична пластичност (Turrigiano, 2008), за да поемат увеличения [Mg2 plus]e чрез регулиране на експресията на NMDARs, съдържащи NR2B субединица (Slutsky et al., 2004; Slutsky et al., 2010). Смята се, че по-високата плътност на хипокампалните синапси с NMDAR, съдържащи NR2B, компенсира хроничното увеличение на [Mg2 плюс]e чрез усилване на NMDAR токове по време на залпово изстрелване. В подкрепа на този модел, мишки, които са генетично проектирани да свръхекспресират NR2B, проявяват подобрен хипокампален LTP и поведенческипамет(Tang et al., 1999).

Обонятелнипаметпри Drosophila включва хетеросинаптичен механизъм, задвижван от подсилващи допаминергични неврони, което води до пресинаптична депресия на холинергичните връзки между клетките Kenyon (KCs) с активирани от миризмата гъбени тела (MB) и изходните неврони на гъбените тела (MBONs) (Schwaerzel et al., 2003). ; Aso et al., 2010; Aso et al., 2012; Claridge-Chang et al., 2009; Burke et al., 2012; Liu et al., 2012; Plac¸ais et al., 2013; Owald et al. ., 2015; Hige et al., 2015; Barnstedt et al., 2016; Parisse et al., 2016; Aso et al., 2014; Oswald и Waddell, 2015). В допълнение, обонятелната информация се предава на KC чрез холинергично предаване от обонятелни проекционни неврони (Yasuyama et al., 2002; Leiss et al., 2009). Въпреки че е възможно глутаматът да бъде доставен до MB мрежата по все още неустановен път, понастоящем няма очевидно място за зависима от NMDAR пластичност в известната архитектура на холинергичните входни или изходни слоеве (Barnstedt et al., 2016). ). Следователно мухата предоставя потенциален модел за изследване на други механизми, чрез които хранителният Mg2 плюс може да се подобрипамет.

Подсилващите ефекти на допамина зависят от допаминовия рецептор тип Dop1R D1- (Kim et al., 2007; Qin et al., 2012; Handler et al., 2019), който е положително свързан с производството на cAMP (Tomchik и Дейвис, 2009; Бото и др., 2014). Нещо повече, ранните проучвания при Drosophila идентифицират съответно кодираната от dunce и rutabaga cAMP фосфодиестераза и тип I Ca2 плюс -стимулирана аденилат циклаза, които са от съществено значение за обоняниетопамет(Dudai et al., 1976; Byers et al., 1981; Dudai и Zvi, 1984; Chen et al., 1986; Livingstone et al., 1984; Levin et al., 1992). Проучвания в клетки на бозайници показват, че хормони или агенти, които повишават клетъчното ниво на сАМР, често предизвикват значително Na plus -зависимо екструдиране на Mg2 plus в извънклетъчното пространство (Romani и Scarpa, 1990b; Romani и Scarpa, 1990a; Romani и Scarpa, 2000; Винк и Нечифор, 2011; Ворман и Гюнтер, 1987). Въпреки това, не е ясно дали Mg2 плюс екструзия играе някаква роля в обработката в паметта.

Тук демонстрираме, че Drosophila дългосрочнопамет(LTM) може да се повиши с хранителна добавка Mg2 плюс. Откриваме, че неудълженият (uex) (Maeda, 1984; Coulthard et al., 2010) ген, който кодира функционален ортолог на муха на протеините Cyclin M2 Mg2 плюс -efflux transporter (CNNM) на бозайниците, е критичен запамет-подобряващо свойство на Mg2 plus. UEX функцията в MB KCs е необходима за LTM и функционалното възстановяване на uex разкрива, че MB е ключовото място на Mg2 плюс-зависимото подобрение на паметта. Хронично променящият се метаболизъм на cAMP чрез въвеждане на мутации в dnc или rut гените променя клетъчната локализация на UEX. Освен това, мутирането на запазения домен на циклична нуклеотид-свързваща хомология (CNBH) в UEX разделя съществена роля на uex от неговата функция в паметта. Изтичането на Mg2 плюс, управлявано от UEX, е необходимо за бавно ритмично поддържане на нивата на KC Mg2 плюс, което предполага потенциална роля за обработката в паметта на потока Mg2 плюс.

Резултати

Храненето с Mg2 плюс подобрява LTM на мухи от див тип

Предишни проучвания съобщават, че храненето на плъхове с храна, съдържаща висока концентрация на Mg2 плюс - подобрява способността им за учене и памет (Slutsky et al., 2010; Landfield and Morgan, 1984; Abumaria et al., 2011; Mickley et al., 2013; Abumaria и др., 2013). Затова тествахме дали подобни ефекти съществуват при мухите, като ги хранихме с храна, съдържаща висока концентрация на Mg2 плюс преди тренировка. Изненадващо, мухи от див тип, хранени 4 дни преди тренировка с храна, допълнена с допълнителен магнезиев хлорид (MgCl2), показват значително подобрена 24-часова производителност на паметта. Подобряването на паметта зависи от концентрацията и е максимално, когато храната е допълнена с 80 mM MgCl2 (Фигура 1А). Незабавната производителност на паметта не беше очевидно подобрена (Фигура 1B). Повишаващият ефект на MgCl2 също се наблюдава при мухи, хранени с магнезиев сулфат (MgSO4), но не и с калциев хлорид (CaCl2) (Фигура 1C). В допълнение, храненето на мухи в продължение на 4 дни с храна, съдържаща между 5 и 80 mM стронциев хлорид (SrCl2), доведе до високи нива на смъртност и мухите, които оцеляха при хранене с 5 mM SrCl2, не показаха подобрена незабавна или 24-часова памет (данните не са показани) . Ефектите за подобряване на паметта следователно могат да се припишат конкретно на хранителните добавки на двувалентен Mg2 плюс.

Подобрената с Mg2 плюс памет е независима от NMDAR в телата на гъбите

Тъй като подобрената памет на магнезиев-L-треонат при плъхове е свързана с повишена регулация на NMDARs, съдържащи хипокампална NR2B субединица (Slutsky et al., 2010), ние тествахме за промени в експресията на глутаматния рецептор при мухи, хранени с MgCl2. RT-qPCR анализите не показват значителна разлика в изобилието на mRNAs за предполагаемите рецептори NMDA (Nmdar1, Nmdar2), AMPA (GluRIA) или каинат тип (GluRIIA) в глави, взети от мухи, хранени в продължение на 4 дни с 80 mM MgCl2 спрямо тези, хранени с 1 mM MgCl2 (Фигура 1D).

След това тествахме директно дали Mg2 плюс -подобрената памет изисква NMDAR функция, чрез понижаване на експресията на Nmdar1 или Nmdar2 гените с помощта на трансгенна UAS-задвижвана РНК интерференция

Фигура 1. Хранителната добавка Mg2 плюс подобрява дългосрочната памет на Drosophila. (A) Мухите от див тип бяха обучени и тествани за 24-часова апетитна памет след 1-5 дни ad libitum хранене с храна, допълнена с Mg2 плюс. Паметта е значително подобрена при мухи, хранени в продължение на 4 дни с 80 mM MgCl2, в сравнение с тези, хранени с 1 mM. 80 mM MgCl2 произвежда незначително по-висока производителност от 50 mM или 100 mM и така се счита за оптимален (звездичките означават p<0.05, t-test="" between="" 1="" mm="" and="" 80="" mm="" groups="" for="" each="" time="" point,="" n="6–8)." (b)="" 4="" days="" of="" 80="" mm="" mgcl2="" food="" did="" not="" enhance="" immediate="" memory.="" (c)="" appetitive="" 24="" hr="" memory="" was="" enhanced="" by="" feeding="" wild-type="" flies="" for="" 4="" days="" with="" mgcl2="" and="" mgso4,="" but="" not="" cacl2.="" asterisks="" denote="" significant="" differences=""><0.05, anova,="" n="6)" between="" mg2+="" fed="" and="" plain="" groups.="" (d)="" rt-qpcr="" showed="" no="" significant="" differences="" in="" glutamate="" receptor="" mrna="" expression="" between="" 1="" mm="" and="" 80="" mm="" fed="" flies="" (t-test,="" n="5)." (e)="" c739-gal4;="" uas-magfret-1="" flies="" were="" fed="" for="" 4="" days="" on="" food="" supplemented="" with="" mg2+.="" brains="" were="" dissected="" and="" fixed="" and="" a="" fluorescence="" emission="" ratio="" measurement="" (citrine/cerulean)="" was="" taken="" as="" an="" indicator="" of="" [mg2+]i.="" the="" magfret="" signal="" was="" significantly="" greater="" in="" the="" ab="" lobes="" of="" flies="" fed="" with="" 80="" mm="" mgcl2="" than="" those="" fed="" with="" 1="" mm="" mgcl2=""><0.05, t-test,="" n="52–60)." unless="" otherwise="" noted,="" all="" data="" are="" mean="" ±="" standard="" error="" of="" the="" mean="" (sem).="" asterisks="" denote="" significant="" differences=""><0.05), individual="" data="" points="" displayed="" as="" open="">

Онлайн версията на тази статия включва следните добавки към фигури за фигура 1:

Допълнение към фигура 1. Нокдаунът на N-метил-D-аспартат глутаматния рецептор (NMDAR) в телата на гъбите не уврежда паметта, подобрена с Mg2 плюс.

(RNAi) конструкции (Dietzl et al., 2007; Perkins et al., 2015). От двете независими UAS-Nmdar1R-NAi и четири UAS-Nmdar2RNAi линии, които тествахме, само една Nmdar1RNAi (BDSC 25941) линия, когато се задвижва във всички неврони от невроналния Synaptobrevin (nSyb)-GAL4, показва значително понижена производителност на 24 часа памет, т.к. в сравнение с това на хетерозиготни контролни мухи (Фигура 1—фигура допълнение 1A). За разлика от това, по-селективната експресия на този UAS-Nmdar1RNAi в LTM-релевантни ab KCs, използвайки c739-GAL4, не влоши значително производителността на 24-часовата памет (Фигура 1—добавка към фигура 1B). Освен това, мухите, експресиращи Nmdar1RNAi в ab неврони, запазват стабилна Mg2 плюс -подобрена памет (Фигура 1—добавка към фигура 1C). Тези резултати предполагат, че Mg2 плюс -подобрената памет не променя експресията на глутаматните рецептори или изисква NMDAR функция в ab KCs.

Концентрацията на Mg2 плюс в ab невроните е повишена при мухи, хранени с високо количество Mg2 плюс Използвахме MagFRET, първият генетично кодиран флуоресцентен Mg2 плюс сензор (Lindenburg et al., 2013), за да проверим дали храненето с Mg2 плюс променя вътреклетъчната концентрация на Mg2 плюс ([Mg2 плюс ]i). Конструирахме мухи, съдържащи UAS-MagFRET-1 трансген и го комбинирахме с c739-GAL4, за да експресираме MagFRET- 1 в ab KCs. Сравнихме FRET сигналите във фиксирани мозъци от c739; UAS-MagFRET-1 мухи, хранени с 1 mM или 80 mM MgCl2 храна в продължение на 4 дни. Сигналът MagFRET беше значително по-висок както в a, така и в b обезпеченията на ab KCs на мухи, хранени с 80 mM, отколкото в тези, хранени с 1 mM (Фигура 1E). Този резултат показва, че храненето с Mg повишава невроналния [Mg2 плюс ]i. Като се има предвид афинитетът на MagFRET-1 (Kd=148 mM) и ~50-процентното увеличение на FRET сигнала при Mg2 плюс свързване (Lindenburg et al., 2013), ние изчисляваме, че ~8-процентното усилване на сигналът MagFRET, измерен при мухи, хранени с 80 mM MgCl2, съответства приблизително на 50 mM увеличение на ab KC [Mg2 плюс ]i средно.

Неразширеният кодиран CNNM тип Mg2 плюс транспортер има роля в паметта

Ние идентифицирахме unextended (uex; Maeda, 1984; Coulthard et al., 2010) като генно променящ апетитен обонятелен LTM, подсилен със захароза. Мухи с вмъкване uexMI01943 MiMIC (Venken et al., 2011) показаха силен дефект в 24-часовата памет, но тяхното представяне веднага след обучението беше неразличимо от това на контролите от див тип. По-подробен анализ на мухите uexMI01943 разкри стабилен спад на паметта, който първо стана значително различен от този на мухите от див тип 12 часа след обучението (Фигура 2А). Не е очевиден дефект на паметта при хетерозиготни uexMI01943/ плюс мухи, което показва, че този предполагаем полов алел е рецесивен.

uex привлече вниманието ни, защото е единственият ортолог на муха на четирите човешки CNNM гена, които кодират Mg2 плюс транспортери (Ishii et al., 2016), и също така съдържа предполагаем CNBH домейн, който е структурно свързан с тези в циклични нуклеотидни затворени канали (Zagotta et al., 2003; Flynn et al., 2007; Kesters et al., 2015). Подравняването на 834 аминокиселинната UEX последователност с CNNM1-4 разкрива особено високо запазване на последователността с CNNM2 и CNNM4 в DUF21, CBS двойката и CNBH домейните (Фигура 2—фигура допълнение 1A–C). Следователно ние предположихме, че UEX има потенциала да свърже подобряващите паметта ефекти на диетичния Mg2 плюс с cAMP-зависимата невронна пластичност.

Although uexMI01943 is assigned to the uex gene, the MiMIC element is annotated to lie 17 kb downstream of the uex coding region (Venken et al., 2011; Figure 2B). RYa (Yoon et al., 2016) is the next nearest gene to uexMI01943 but is >230 kb по-далеч. Първо потвърдихме местоположението на MiMIC чрез обратна PCR (Attrill et al., 2016). Важно е, че не е открито допълнително вмъкване на MiMIC в тези мухи. След това тествахме дали uexMI01943 е отговорен за дефекта на паметта чрез прецизно премахване на MiMIC елемента чрез ексцизия, медиирана от транспозаза на Минос (Arca` et al., 1997; Фигура 2 - фигура допълнение 2A и B). Премахването на MiMIC в uexMI01943.ex1 и uexMI01943.ex2 възстановява нормалната производителност на паметта за 24 часа, демонстрирайки, че вмъкването на MiMIC е необходимо за uexMI01943паметдефект (Фигура 2C).

Както qRT-PCR на иРНК, така и Western blot анализ на протеинови екстракти от глави на мухи не успяха да разкрият значителна разлика в uex/UEX експресията при uexMI01943 мухи. Затова ние използвахме CRISPR, за да въведем стоп кодон в петия кодиращ екзон на uex локуса (Фигура 2B и Фигура 2—добавка към фигура 2C). Мухите, хомозиготни за получената uexD мутация, не са жизнеспособни като възрастни, умирайки в стадия на ларвите. За разлика от това, хетерозиготните uexMI01943/uexD мухи бяха жизнеспособни, но техният 24-часов апетитпаметбеше значително увредено (Фигура 2D). Тези данни показват, че uex е основен ген и че uexMI01943 е жизнеспособен хипоморфен алел на uex.

Тествахме и аверсивапаметпредставяне на uexMI01943 мутантни мухи. Хомозиготни uexMI01943 мухи, изложени незабавнопаметкоето беше неразличимо от това на хетерозиготни и див тип контроли (Фигура 2E). Въпреки това, тяхната 24-часова памет, формирана след или пет опита на аверсивно разпределено обучение (Tully et al., 1994; Jacob and Waddell, 2020), или едно изпитване на улеснено обучение на гладно (Hirano et al., 2013), е значително нарушена (Фигура 2E). Тези експерименти предполагат, че мухите uexMI01943 са по-общо компрометирани в способността си да образуват LTM. Освен ако не е посочено друго, всички последващи анализи напаметв това проучване използвайте кондициониране, възнаградено със захар.

Фигура 2. uexMI01943 мутантните мухи имат дефект в дългосрочен планпамет(LTM). (A) Запазването на апетитната памет беше тествано в различни моменти след тренировка. Мухите, хомозиготни за uexMI01943, показват значителен дефект в паметта от 12 часа след обучението, в сравнение с представянето на хетерозиготни uexMI01943/ плюс и контролни мухи от див тип (p<0.05, anova,="" n="6–10)." (b)="" the="" uex="" locus="" lies="" on="" chromosome="" 2r="" between="" 3,900,285="" and="" 3,949,425="" (light="" blue="" bar).="" the="" four="" alternate="" uex="" transcripts,="" uex-re,="" uex-rg,="" uex-rh,="" and="" uex-rf,="" all="" encode="" the="" same="" protein.="" the="" uexmi01943="" mimic="" (blue="" triangle)="" resides="" ~17="" kb="" downstream="" of="" the="" uex="" coding="" region.="" the="" crispr/cas9="" edited="" uexd="" allele="" replaces="" a="" 3047="" bp="" fragment,="" including="" exon="" 7="" of="" uex="" with="" a="" stop="" signal="" (termination="" codon="" in="" all="" three="" reading="" frames)="" and="" a="" gfp="" cassette,="" truncating="" the="" uex="" reading="" frame="" (dark="" blue="" bar).="" (c)="" precise="" excision="" of="" the="" uexmi01943="" mimic="" restores="" normal="" 24="" hr="" memory="" to="" uexmi01943.ex1="" and="" uexmi01943.ex2="" flies=""><0.05, anova,="" n="8–11)." (d)="" uexd="" fails="" to="" complement="" the="" 24="" hr="">паметдефект на uexMI01943 (стр<0.05, anova,="" n="6–8)." (e)="" flies="" homozygous="" for="" uexmi01943="" showed="" a="" significant="" defect="" in="" aversive="" ltm,="" as="" figure="" 2="" continued="" on="">

Фигура 2 продължава

в сравнение с представянето на хетерозиготни uexMI01943/ plus и контролни мухи от див тип (p<0.05, anova,="" n="8–12)." an="" ltm="" defect="" was="" also="" observed="" following="" five="" cycles="" of="" aversive="" spaced="" training="" and="" a="" 16="" hr="" fasting="" facilitated="" one-cycle="" training="" protocol.="" immediate="" aversive="">памете незасегнат при uexMI01943 хомозиготни мутантни мухи.

Онлайн версията на тази статия включва следните изходни данни и допълнения към фигури за фигура 2:

Изходни данни 1. Таблица на контролите на захарта и обонятелната сетивна острота за всички поведенчески експерименти в този ръкопис.

Допълнение към фигура 1. Запазване на UEX с неговите ортолози.

Фигура допълнение 2. Конструктивни схеми за изрязване на uex Mino и създаване на алел uexD.