ЧастⅠQi Sui Zhu Shui Пластирът инхибира AQP1 и MAPK сигнализирането Намалява увреждането на черния дроб, предизвикано от циротичен асцит

Резюме

1. Обектив

Понастоящем в съвременната медицина няма специално лечение за циротичен асцит. Гипс Qi Sui Zhu Shui (QSZSP) се използва при асцит. Целта на това проучване е да се изследва механизмът на действие на QSZSP при лечението на циротичен асцит и връзката му с аквапорин 1 (AQP1).

2. Методи

Двадесет и четири плъха бяха разделени на четири групи, по шест плъха във всяка група. В моделирането се инжектира тетрахлорметан-зехтин. Контролните и моделните групи се третират с празен гел пластир (2 cm × 2 cm), групата с ниска доза QSZSP се третира с пластир Qi Sui Zhu Shui (1 cm × 1 cm), а групата с висока доза QSZSP се третира с Qi Гипс Sui Zhu Shui (2 cm × 2 cm). Бяха измерени промените в телесното тегло и коремната обиколка, хистопатологичните промени в черния дроб, бъбреците и перитонеума бяха наблюдавани при HE оцветяване, биохимичните индекси, свързани с чернодробната функция, бяха открити и промените в експресията на AQP1 и активирането на MAPK пътя в черния дроб, бъбреците и перитонеалните тъкани бяха оценени чрез IHC оцветяване и Western blot.

3. Резултати

След една седмица на инжектиране на въглероден тетрахлорид чернодробно масло, плъховете в моделната група увеличават бавно телесното си тегло и коремната обиколка на моделните плъхове продължава да се увеличава с времето. След 16 седмици на конструиране на модела на циротичен асцит, черният дроб, бъбреците и перитонеума са значително увредени и серумните нива на TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na и Ca при плъховете са значително по-високи ( P < 0.001) и нивата на ALB са значително по-ниски (P < 0.001) от тези в контролната група. След 4 седмици лечение се подобриха уврежданията на черния дроб, бъбреците и перитонеума. Нивата на TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na и Ca са значително по-ниски (P <0,001), а нивата на ALB са значително по-високи (P <0,001) от тези в моделната група. plus e протеиновата експресия на AQP1, p-ERK, p-JNK и p-p38 е установено, че се инхибира в черния дроб, бъбреците и перитонеума.

4. Заключение

QSZSP инхибира протеиновата експресия на AQP1 и MAPK сигналния път в черния дроб, перитонеума и бъбреците, за да облекчи увреждането на черния дроб, бъбреците и перитонеума, причинено от циротичен асцит, като по този начин намалява анормалния растеж на коремната обиколка.

Ключови думи

AQP1, MAPK сигнализация, чернодробно увреждане, асцит,Cistanche добавки.

Щракнете тук, за да получитеползите от Cistanche

Въведение

Цирозата е често срещано клинично заболяване, което се причинява от поредица от патологични промени като дегенерация, некроза, регенерация и пролиферация на фиброзна тъкан на хепатоцити, дължащи се на постоянното или повтарящо се действие на различни патогенни фактори върху чернодробните тъкани, проявяващи се главно като черния дроб намаляване на функцията [1]. Световното разпространение на цирозата не е известно. Разпространението на цирозата в Съединените щати е около 0.15 процента –0.27 процента [2]. 69 процента от хората не знаят, че имат цироза, а диабетът, злоупотребата с алкохол, хепатит С и хепатит В, мъжеството и възрастта са свързани с цироза [3]. Независимо от етиологията, 50% от пациентите с цироза ще развият циротична кардиомиопатия [4]. Докладът за национална жизнена статистика за 2017 г. за Съединените щати съобщава, че приблизително 4,5 милиона възрастни, или 1,8 процента от възрастното население, имат хронично чернодробно заболяване и цироза. 41 473 души са починали от хронично чернодробно заболяване и цироза [5].

Асцитът е най-ярката клинична проява на цироза. Това е необичайно натрупване на течност в коремната кухина. Около 60 процента от пациентите с компенсаторна цироза развиват абнормно натрупване на перитонеална течност в рамките на 10 години от диагностицирането. Високата честота и лошата прогноза на цирозния асцит, особено рефрактерния асцит, може да предизвика много фатални усложнения, които сериозно засягат качеството на живот и процента на преживяемост на пациенти с цироза [7]. 90 процента от случаите на рак на черния дроб са свързани с наличието на цироза [8].

Традиционната китайска медицина (ТКМ) има ефект на блокиране или забавяне на злокачествените заболявания и има ниска токсичност [9]. Дългосрочната употреба на китайски билки може да намали риска от цироза при пациенти с хроничен хепатит B [10]. Мазилката Qi Sui Zhu Shui (QSZSP) се състои от Radix Astragali, Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Poria, Herba Leonuri, Radix Salviae miltiorrhizae и Pericarpium Arecae. Предишно клинично проучване установи, че адювантното лечение с QSZSP на пациенти с циротичен асцит води до подобрено отделяне на урина, 24-часова екскреция на натрий в урината, намалени нива на креатинин и общ билирубин, повишено съдържание на албумин, подобрена честота на рецидиви на асцит след 3 месеца непрекъснато лечение с QSZSP [11]. Има малко проучвания за QSZSP и циротичен асцит. В историята на изследванията на компонентите в QSZSP и цироза на черния дроб, Xiaozhang Tie като адювант към първичната терапия на циротичен асцит е безопасен [12]. Salviae miltiorrhizae значително облекчава цирозата и порталната хипертония [13]. Необходими са допълнителни проучвания за агентите на действие на QSZSP при лечението на циротичен асцит.

канал и впоследствие CHIP28 беше преименуван на аквапорини [14, 15]. Идентифицирани са тринадесет аквапорини (AQP0-AQP12) [16–18]. Аквапорините имат три изоформи. Първият подтип транспортира само водни молекули, вторият подтип транспортира водни молекули, урея, глицерол и др., а третият подтип транспортира непрекъснато отворени канали, без консумация на енергия или регулиране [19–21]. Аквапорин 1 (AQP1) принадлежи към първия подтип, който съществува като тетрамер и позволява само водни молекули да се транспортират през мембраната и е независим воден канал [22, 23]. Черният дроб, перитонеума и бъбреците са органите в близък контакт и AQP1 се разпределя в черния дроб, перитонеума и бъбреците [24]. Съдържанието на вода в човешкото тяло е 70 процента от телесното тегло, а анормалното производство-абсорбция-отделяне на вода в перитонеалната кухина е ключов фактор за образуването на асцит [19]. AQP1 е един от аквапорините, участващи само в транспорта на водни молекули. Асцитът при цироза води до повишено натрупване на течност в черния дроб и излишната течност се прехвърля в перитонеума, който не реабсорбира достатъчно вода и в крайна сметка води до повишена реабсорбция на вода от бъбреците, така че AQP1 може да бъде важен междинен продукт за изследване метаболизъм на асцит.

Първоначално цирозата води до намалена чернодробна функция и повишено натрупване на течност в коремната и гръдната кухина, образувайки асцит [25]. Асцитът се среща често при цироза [6]. Асцитът е необичайно натрупване на течност в коремната кухина [6]. Циротичният асцит може да доведе до бъбречна дисфункция [26]. В хипотезата за периферна артериална вазодилатация, бъбрекът участва във всичките 5 стадия на асцит [27]. Чрез свързване на експресията на AQP1 в черния дроб, перитонеума и бъбрека, ние предлагаме ос "черен дроб-перитонеален-бъбрек" при циротичен асцит и предполагаме, че той играе критична роля при образуването на циротичен асцит. Съобщава се, че AQP1 се регулира от MEK1/2 инхибитори в глиалните клетки [28]. В клетките на рак на простатата нивата на експресия на AQP1 протеин се регулират от p38MAPK [29]. В човешки плеврални мезотелиални клетки пептидогликанът инхибира p38 MAPK регулацията на AQP1 протеиновата експресия [30]. Следователно пътят на MAPK би бил посока на промените на AQP1 в оста "черен дроб-перитонеален-бъбрек".

Ролята на QSZSP при лечението на циротичен асцит и връзката му с AQP1 все още не е докладвана. Спекулираме, че оста "черен дроб-перитонеална-бъбреци" е функционална ос на водния метаболизъм с аквапорини като обща материална основа, която участва в "производството-абсорбция-изрязване" на перитонеална течност и играе ключова роля в образуването на циротичен асцит. MAPK пътят може да медиира QSZSP регулацията на AQP1. Следователно, в това проучване, ние лекувахме плъхове с циротичен асцит in vitro с QSZSP, наблюдавахме хистопатологичните промени в черния дроб, бъбреците и перитонеума и оценихме промените в експресията на AQP1 и активирането на MAPK пътя в черния дроб, бъбреците и перитонеума тъкани, за да се изясни ефектът на QSZSP при лечението на циротичен асцит и неговия механизъм.

Екстракт от цистанче

Материали и методи

1. Регенти.

Използваните реагенти са както следва: въглероден тетрахлорид (C805332) от Macklin, зехтин от Yihai Kerry Golden Dragon Fish Cereals, Oils and Foodstuffs Co., Ltd. (Китай), ксилол и абсолютен етанол от National Pharmaceutical Group Chemical Reagent Co., Ltd. (Китай), еозин (E8090) и неутрална смола (G8590) от Solarbio (Китай) и хематоксилин (G1004) от Service.

2. Процес на мазилка Qi Sui Zhu Shui.

Мазилката Qi Sui Zhu Shui се състои от Radix Astragali, Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Poria, Herba Leonuri, Radix Salviae miltiorrhizae и Pericarpium Arecae. Горните седем китайски лекарства са закупени от Първата свързана болница на Университета за традиционна китайска медицина в Гуанси, съгласно разпоредбите на изданието на "Китайската фармакопея" от 2010 г.

12 ml вода се добавят към всеки 1 g Radix Astragali, Poria и Herba Leonuri и се накисват за 3 0 минути, екстракцията с обратен хладник се повтаря 3 пъти, 1,5 часа всеки път, и екстрактите се комбинират и филтрират . 6 ml 85 процента етанол се добавят към всеки 1 g Radix Kansui, Radix Aucklandiae, Radix Salviae miltiorrhizae и Pericarpium Arecae и се накисват за 30 минути, водната екстракция се повтаря два пъти, 1,5 часа всеки път, и екстрактите се комбинират и филтриран. Горните два екстракта бяха комбинирани и изсушени под вакуум, за да се получи сух прах. Основата се състои от 60 процента SodiuM акрилат, 30 процента карбомер, 10 процента алуминиев глицинат и 6 пъти глицерин. Усилвателят на проникването се състои от 50 процента Azone и 50 процента пропилей гликол. Основата, усилвателят на проникването и сухият прах се смесват. Използва се Coater (RK-200, Tianjin Ruikang Babu Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd.), произвеждащ QSZSP. Хидрогелната паста се приготвя от машина за нанасяне на хидрогелно покритие RK-200 (Tianjin Ruikang Babu Pharmaceutical Biotechnology Co.). Всяка таблетка от този продукт съдържа Astragalus methylase (C41H68O14) в Radix Astragali, не по-малко от 0,6932 mg, и Euphorbia grandis dienol (C30H50O) в Radix Kansui, не по-малко от 1,4766 mg.

3. Животно.

Животни от три университета Gorges, двадесет и четири плъха, мъжки, с тегло 200~250 g, бяха отгледани при условия на липса на специфичен патоген (без специфични патогени, SPF). Средата за хранене е 22-26 градуса, 50 процента -60 процента относителна влажност. Моделирането ще започне след две седмици. Въглероден тетрахлорид-зехтин в съотношение 4:6, интраперитонеална инжекционна доза от 3 mL/kg телесно тегло и инжекциите се прилагат два пъти седмично (четирите дни и седемте дни) в продължение на единадесет седмици. За контролната група е приложена изотонична интраперитонеална инжекция на равно количество зехтин. Теглото и коремната обиколка се измерват преди всяка инжекция. През периода е използвана дестилирана вода със 75% медицински спирт за приготвяне на 10% концентрация на питейна вода за плъхове. Накрая, в рамките на четири седмици от лечението, телесното тегло (Таблица 1) и коремната обиколка (Таблица 2) на плъховете се измерват два пъти седмично в продължение на 15 седмици.

4. Третиране и вземане на проби.

Двадесет и четири плъха бяха разделени на четири групи, шест плъха във всяка група, всички плъхове бяха обезкосмени по корема и зоната на обезкосмяване беше 3 cm × 3 cm. Контролната група (Con) се третира с празен гел пластир (2 cm × 2 cm); моделната група (Mod), празен гел гипс (2 cm × 2 cm); QSZSP група с ниска доза, мазилка Qi Sui Zhu Shui (1 cm × 1 cm); и QSZSP група с висока доза, мазилка Qi Sui Zhu Shui (2 cm × 2 cm). Те се прилагат върху коремната кожа на депилирани плъхове веднъж дневно в продължение на 6 часа в продължение на 4 седмици. Тетрахлорид-зехтин се инжектира подкожно в гърба веднъж седмично по време на лечението, за да се предотврати обратното развитие на цироза. След четири седмици животните бяха убити чрез анестезия и кръвопускане. Ако животните не са мъртви, животните се анестезират до смърт със свръхдоза пентобарбитал натрий (100 mg/kg). След упойката животните умират без дишане и сърдечна дейност. Методът на филтърната хартия се използва за получаване на асцит. Кръвта от коремната аорта се събира и центрофугира и серумът се събира. Подходящо количество чернодробна тъкан, бъбречна тъкан и перитонеална тъкан се изрязват и фиксират с 4 процента параформалдехид. В допълнение, тъканите на черния дроб, перитонеума и бъбреците се съхраняват в хладилник с ултра ниска температура при -80 градуса. Фиксираният черен дроб, бъбреците и перитонеалните тъкани на плъхове бяха дехидратирани и вградени във восък. Секциите бяха замразени при -20 градуса и нарязани на дебелина 3 μm, водна баня беше използвана за разтягане на секциите, секциите бяха прикрепени към слайдове и секциите бяха съхранени при 4 градуса за резервно копие.

Цистанче на прах

5. Оцветяване с хематоксилин и еозин (HE).

Срезовете се оцветяват в разтвор на хематоксилин за 4 минути, последвано от изплакване с течаща чешмяна вода за 2 минути и 15 s. След това срезовете се оцветяват обратно с разтвор на еозин в продължение на 3 минути. Почистването се извършва при 80% и 95% етанол, съответно, за 30 s всяко. След това секциите се изчистват в ксилен за 3 s и се монтират с неутрален балсам. След оцветяването срезовете се наблюдават с помощта на микроскоп и Leica Application Suite се използва за събиране и анализ на съответните части от пробите.

6. Биохимичен анализ.

След като серумните проби бяха размразени при 4 градуса, серумните проби бяха открити с автоматичен биохимичен анализатор Shenzhen Mindray BS420 и концентрациите на TBiL, AST, ALT, ALB, Cr, BUN, K, Na и Ca бяха определени с Shenzhen Mairui ( Шенжен, Китай) Съответстващ биохимичен комплект.

7. Имунохистохимично оцветяване.

Протеиновата експресия на AQP1 в черния дроб, перитонеума и бъбречните тъкани беше изследвана чрез имунохистохимия. Слайдовете се пекат при 65 градуса за 1 час, накисват се в ксилен за 30 минути и се хидратират в градиентен алкохол. 1 mM Tris-EDTA буферен разтвор (G1203, Servicebio) се използва за 18 минути възстановяване при 125 градуса и 103 kPa, инкубира се с 3 процента H2O2 (National Pharmaceutical Group Chemical Reagent Co., Ltd., Китай) за 10 минути, инкубира се с 10 процента кози серум (SL038, Solarbio) за 30 минути и титруван с първично антитяло AQP1 (PAB45863, Bioswamp), разреждане на перитонеума 1: 250 и разреждане на черен дроб и бъбрек 1: 400 при 4 градуса C за една нощ. Срезовете се прехвърлят от 4 градуса на стайна температура и се оставят за 45 минути. Третирано с Max Vision TM HRPPolymer анти-заешко вторично антитяло (KIT-5020, MXB) за 60 минути при 37 градуса. Третира се с DAB (DA1010, Solarbio) до промяна на цвета на срезовете. Накиснете срезовете последователно, хематоксилин 3 минути, 75 процента алкохол 5 минути, 85 процента алкохол 5 минути, 95 процента алкохол 5 минути, 100 процента алкохол 10 минути, ксилен 10 минути. Неутралните смоли запечатват секции. Използвана е системата за изображения Leica Application Suite за заснемане на съответните части от пробата. Ядрата бяха оцветени в синьо с хематоксилин и DAB показа положително кафеникаво жълто.

8. Уестърн Блот.

Протеиновите нива на p38, p-p38, ERK1/2, p-ERK1/2, JNK1/2/3, p-JNK1/2/3 и AQP1 в тъканите на черния дроб, перитонеума и бъбреците бяха анализирани чрез Western blot . Тъканните проби се хомогенизират в RIPA лизат (R0010, Solarbio), съдържащ протеазен инхибитор при 4 градуса С и се центрофугират при 12000 g за 15 минути. Концентрацията на протеините се измерва с помощта на BCA Protein Assay Kit (PC0020, Solarbio). Протеините (20 ug) се разделят чрез електрофореза с 12 процента натриев додецилсулфат-полиакриламиден гел и се прехвърлят върху мембрани от поливинилиден флуорид (IPVH00010, Millipore). Мембраните се блокират с 5 процента обезмаслено мляко в продължение на 2 часа при стайна температура в Tris-буфериран физиологичен разтвор и се инкубират с първични антитела срещу p-ERK1/2 (ab214036), JNK1/2/3 (ab208035), p-JNK1/2/ 3 (ab76572) и p-p38 (ab47363) от Abcam (UK) и ERK1/2 (MAB37123), p38 (PAB37381), AQP1 (PAB45863) и GAPDH (PAB36269) от Bioswamp (Китай), през нощта в 4 степен . GAPDH антитяло (PAB36269, Bioswamp) беше избрано като вътрешна референция. Всички първични съотношения на разреждане на антитела са 1:1000. След това мембраните се промиват с Tris-буфериран физиологичен разтвор и се инкубират в козе анти-заешко IgG вторично антитяло (SAB43714, Bioswamp, 1: 20000) в продължение на 2 часа при стайна температура. Имунореактивността се визуализира чрез колориметрична реакция, като се използва Immobilon Western HRP (WBKLS0500, Millipore). Мембраните се сканират с автоматичен хемилуминесцентен анализатор (Tanon 5200, Tanon).

9. Статистически анализи.

Статистическите анализи бяха извършени с помощта на софтуер SPSS 23.0. Всички данни бяха представени като средно ± стандартно отклонение (SD). Сравненията между двете групи бяха направени с помощта на t-тестовете за независима извадка. Еднопосочният ANOVA беше използван за сравняване на разликите между три или повече групи, а post hoc тестът за най-малко значима разлика (LSD) на Fisher беше използван за индивидуалните групови сравнения. Стойностите на P < 0.05 се считат за статистически значими.

Ефектите на Cistanche

Препратки

[1] D. Schuppan и NH Afdhal, "Цироза на черния дроб," The Lancet, vol. 371, бр. 9615, стр. 838–851, 2008 г.

[2] Б. Шарма и С. Джон, Чернодробна цироза. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, Флорида, САЩ, 2022 г.

[3] S. Scaglione, S. Kliethermes, G. Cao, et al., „Епидемиологията на цирозата в Съединените щати: проучване, базирано на популацията“, Journal of Clinical Gastroenterology, vol. 49, бр. 8, стр. 690–696, 2015 г.

[4] LA Lyssy и MP Soos, Циротична кардиомиопатия. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, Флорида, САЩ, 2022 г.

[5] A. Sharma и S. Nagalli, Хронично чернодробно заболяване. StatPearls, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, Флорида, САЩ, 2022 г.

[6] FA Rochling и RK Zetterman, "Управление на асцит," Лекарства, том. 69, бр. 13, стр. 1739–1760, 2009.

[7] R. Planas, S. Montoliu, B. Ballest´e, et al., „Естествена история на пациенти, хоспитализирани за лечение на циротичен асцит,“ Клинична гастроентерология и хепатология, том. 4, бр. 11, стр. 1385–1394, 2006.

[8] A. Zanetto, E. Campello, F. Pelizzaro и F. Farinati, "Хемостатични промени при пациенти с цироза и хепатоцелуларен карцином: лабораторни доказателства и клинични последици", Liver International: Официален вестник на Международната асоциация за изследване на черния дроб, 2022 г.

[9] Z. Yi, Q. Jia, Y. Lin, et al., „Механизъм на Elian гранули при лечението на предракови лезии на рак на стомаха при плъхове чрез MAPK сигнален път, базиран на мрежова фармакология,“ Pharmaceutical Biology, vol. . 60, бр. 1, стр. 87–95, 2022 г.

[10] ZJ Hou, JH Zhang, X. Zhang, et al., „Дългосрочна традиционна китайска медицина, комбинирана с NA антивирусна терапия върху честотата на цироза при пациенти с хроничен хепатит В в реална среда: ретроспективно проучване,“ Доказателства базирана на комплементарна и алтернативна медицина: eCAM, том. 2020 г., номер на артикул 3826857, 8 страници, 2020 г.

[11] HZ Qiu Hua и D. Mao, „Ефекти от точковото приложение на TCM с QiSuiZuShui-паста върху качеството на живот при пациенти с рефрактерен асцит на цироза,“ Китайски вестник за интегрирана традиционна китайска и западна медицина върху храносмилането, том. 17, бр. 5, стр. 306–309, 2009.

[12] F. Xing, Y. Tan, G.-J. Yan, et al., "Ефекти на китайската билкова катаплазма Xiaozhang Tie върху циротичен асцит," Journal of Ethnopharmacology, vol. 139, бр. 2, стр. 343–349, 2012 г.

[13] H. Wang, XP Chen и FZ Qiu, "Salviae miltiorrhizae подобрява цирозата и порталната хипертония чрез инхибиране на азотния оксид при цирозни плъхове," Hepatobiliary and Pancreatic Diseases International: HBPD INT, vol. 2, бр. 3, стр. 391–396, 2003.

[14] BM Denker, BL Smith, FP Kuhajda и P. Agre, „Идентифициране, пречистване и частично характеризиране на нов Mr 28,000 интегрален мембранен протеин от еритроцити и бъбречни тубули,“ Journal of Biological Chemistry , кн. 263, бр. 30, стр. 15634–15642, 1988 г.

[15] P. Agre, S. Sasaki и MJ Chrispeels, "Аквапорини: семейство протеини на водния канал", The American Journal of Physiology, том. 265, бр. 3, член ID F461, 1993 г.

[16] AS Verkman, MO Anderson и MC Papadopoulos, "Аквапорини: важни, но неуловими лекарствени цели", Nature Reviews Drug Discovery, vol. 13, бр. 4, стр. 259–277, 2014 г.

[17] Z. Draelos, "Аквапорини: въведение в ключов фактор в механизма на хидратация на кожата", The Journal of Clinical and aesthetic dermatology, vol. 5, бр. 7, стр. 53–56, 2012.

[18] AS Verkman, "Повече от просто водни канали: неочаквани клетъчни роли на аквапорините," Journal of Cell Science, vol. 118, бр. 15, стр. 3225–3232, 2005 г.

[19] M. Suzuki и S. Tanaka, "Структура и различни функции на аквапорини на гръбначни животни", Seikagaku The-Journal of Japanese Biochemical Society, том. 86, не. 1, стр. 41–53, 2014 г.

[20] AD Sales, CH Lobo, AA Carvalho, AA Moura и APR Rodrigues, „Преглед на структурата, функцията и локализацията на аквапорините: възможните им последици върху криоконсервацията на гамети,“ Генетика и молекулярни изследвания, том. 12, бр. 4, стр. 6718–6732, 2013 г.

[21] J. von B¨ulow, „Аквапорини--водни канали в клетъчната мембрана и терапевтични цели,“ Medizinische Monatsschrift fur Pharmazeuten, vol. 36, бр. 3, стр. 86–94, 2013.

[22] A. Yool, „Функционални домейни на аквапорин-1: ключове към физиологията и цели за откриване на лекарства“, Current Pharmaceutical Design, vol. 13, бр. 31, стр. 3212–3221, 2007 г.

[23] G. Benga, "Първият открит протеин на водния канал, по-късно наречен аквапорин 1: молекулярни характеристики, функции и медицински последици", Molecular Aspects of Medicine, vol. 33, бр. 5-6, стр. 518–534, 2012 г.

[24] MYS Kalani, AS Filippidis и HL Rekate, „Хидроцефалия и аквапорини: ролята на аквапорин-1“, Acta Neurochirurgica Supplementum, vol. 113, стр. 51–54, 2012 г.

[25] NJ Shah, OY Mousa, K. Syed и S. John, Остра хронична чернодробна недостатъчност, StatPearls Publishing LLC., Treasure Island, Флорида, САЩ, 2022 г.

[26] JS Pedersen, F. Bendtsen и S. Møller, "Управление на циротичен асцит," Терапевтичен напредък при хронични заболявания, том. 6, бр. 3, стр. 124–137, 2015 г.

[27] DV Garbuzenko и NO Arefyev, "Съвременни подходи към лечението на пациенти с циротичен асцит", World Journal of Gastroenterology, vol. 25, бр. 28, стр. 3738–3752, 2019.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 и Zhen Heng Song 3

1 Катедра по хепатология, Първата свързана болница на Университета по китайска медицина Гуанси, Нанинг, Китай

2 отдел по медицинска лаборатория, Първата свързана болница на Университета по китайска медицина Гуанси, Нанинг, Китай

3 Катедра по хепатология, Университет по китайска медицина Гуанси, Нанинг, Китай