Превантивен ефект на Cistanche Salsa Phenylethanoid Glycosides върху плъхове с церебрален оток на голяма надморска височина

Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com

Резюме

Цел Да се ​​наблюдава ефектът и механизмът на фенилетаноидни гликозиди от Cistamnche Salsa върху плъхове с мозъчен оток на голяма надморска височина. Методи. Фенилетаноидни гликозиди се дават профилактично за установяване на плъх модел на мозъчен оток на голяма надморска височина чрез използване на хипобарна камера в симулирана среда на 5000 m надморска височина. Измерват се патологичните промени в белодробната тъкан на плъхове, съдържанието на вода, IL-6, TNF-a, MDA и ензимната активност на SOD и GSH-Px в белодробния хомогенат. Резултати В сравнение с контролната група, плъховете с церебрален оток на голяма надморска височина показват забележителния характер на церебралния оток и високото съдържание на вода в белите дробове. Съдържанието на IL-6, TNF-a и MDA в белодробния хомогенат се повишава, докато ензимната активност на SOD и GSH-Px значително намалява. Фенилетаноидните гликозиди могат да подобрят патологичните промени в белодробната тъкан, да намалят съдържанието на вода, IL-6, TNF-a и MDA, като същевременно повишават ензимната активност на SOD и GSH-Px в белодробния хомогенат, Concision Фенилетаноидните гликозиди могат да предотвратят мозъчен оток на голяма надморска височина. чийто механизъм може да е свързан с противовъзпалителния и антиокислителния стрес в белодробната тъкан.

Ключови думи: Cistanche Salsa; фенилетаноиден гликозид; мозъчен оток на голяма надморска височина

Cistanche фенилетаноидни гликозиди

Височинен мозъчен оток (HACE) обикновено се появява, когато надморската височина е над 3000 m за първи път. Това е сериозно животозастрашаващо заболяване, причинено от неприспособимостта на тялото към надморската височина с ниско налягане и ниска кислородна среда. Свързано е с височинната болест. , Височинният белодробен оток е трите прояви на остра височинна болест. Въпреки че има по-малко проучвания за HACE в сравнение с белодробния оток на голяма надморска височина, свързани проучвания показват, че оксидативният стрес и възпалението играят важна роля в патогенезата на HACE (P-3).

Cistanche фенилетаноидни гликозиди(фенилетаноидни гликозиди от Cistanche Salsa, PhGCs) се извличат от Xinjiang Cistanche cistanche и свързани проучвания успешно изолират различни фенилетаноидни гликозиди, главно включително ехинакозид и вербаскозид 1. Изследванията на фармакологичните ефекти на PhGC през годините показват, че той има подобни фармакологични ефекти на салидрозид, активната съставка за борба с височинната болест. Има анти-хипоксия, анти-радиация, улавя свободните радикали и т.н. P-7]. В този експеримент мрежа от HACE модел на плъх 91 беше установена в специална експериментална камера за изкуствена среда в северозападния регион и PhGCs бяха администрирани превантивно, за да се наблюдава неговият превантивен ефект върху HACE и неговия възможен механизъм на действие.

Билка цистанче:Cistanche фенилетаноидни гликозиди

1 материал

1.1 Животни

Експериментално животно плъх Wistar, клас SPF, половин мъжки и половин мъжки, тегло 180-220g [Център за експериментални животни към Медицинския университет в Синдзян, номер на лиценз за производство на животни SCXK (нов) 2011-0004, номер на лиценз за използване на животни SYXK ( ново) 2011- 0004].

1.2 Апаратура

Северозападна кабина за изкуствени експерименти със специална среда (Guizhou Fenglei Aviation Ordnance Co., Ltd., DY{{0}}); оптичен микроскоп (японска компания Nikon, E 200); слайсер за тъкани (немска компания Mecang, HM340E); електронен баланс (Mettler-Toledo Instrument Co., Ltd., AL204, точност; 0,1 mg); четец на микроплаки (Bio-RAD, XMark 7M, САЩ): UV спектрофотометър (Shanghai Lens Optical Technology Co., Ltd., SpectrumLab 22); електрическо отопление, сушилня с постоянна температура (Huangshi, Hubei) City Medical Equipment Co., Ltd., SKHG-01).

1.3 Тествано лекарство

PhGCs (професор Tu Pengfei от Пекинския университет, съдържание: 90,70 процента, приготвен с дестилирана вода, за да се получи разтвор със съответната концентрация); Rhodiola Rosea Oral Liquid (Tibet Tibetan Medicine Group Co., Ltd., партиден номер: 120503, спецификация: 10 mL); Фактор на туморна некроза- (туморен некротичен фактор-, TNF-) комплект (партиден номер: ZJAGBZAB01), интерлевкин-6 (интерлевкин-6, IL-6) комплект (партиден номер: ZIBIBZAB 02) (Shanghai Yikesai Biological Products Co., Ltd. Company); Натриев пентобарбитал (American Amresco Company, партиден номер: 20110612); Параформалдехид (фабрика за химически реагенти Chengdu Kelon, партиден номер: 20110901); Комплект за супероксид дисмутаза (SOD) (партиден номер: 20130812), комплект за малондиалдехид (MDA) (партиден номер: 20130812), комплект за глутатион пероксидаза (GSH-Px) (партиден номер: 20130814) (Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering); PBS фосфатен буфер на прах (Fuzhou Maixin Biotechnology Development Co., Ltd., партиден номер: 13061716).

билка цистанче

2 метод

2.1 Групиране и медикаменти

Плъхове Wistar бяха разделени на случаен принцип в 6 групи: нормална контролна група, моделна група, група с перорален разтвор на Rhodiola Rosea (1,78 mL·kg-'), група с ниска доза PhGCs (75 mg·kg-), група със средна доза PhGCs (15 0mg ·Kg-'), PhGCs група с висока доза (300mg·kg-), 12 плъха във всяка група. Всяка група е отглеждана в SPF среда. Нормалната контролна група и моделната група бяха дадени интрагастрално с дестилирана вода (1.0 mL/100g). На другите групи се прилага интрагастрално в съответствие със съответната доза в продължение на 10 последователни дни. На 8-ия ден, останалите с изключение на нормалната контролна група. Всяка група беше държана в продължение на 72 часа в изкуствена експериментална кабина, която симулира среда на плато на надморска височина от 5 000 m. Височината в кабината се издига с постоянна скорост от 10 m·s-' до надморска височина 5000 m (атмосферното налягане е 54,1 kPa, парциалното налягане на кислорода е 11,52 kPa), при което животните свободно влизат във водата и се хранят, а кабината се отваря за 0,5 часа на всеки 24 часа. Лекарство, добавете фураж и вода за пиене.

2.2 Боравене с животните

Плъховете във всяка група бяха анестезирани чрез интраперитонеално инжектиране на натриев пентобарбитал (2 процента, 0.2 mL/100g) веднага след напускане на кабината, взета беше кръв от коремната аорта, черепната кухина беше отворена, мозъчната тъкан е взета и горната половина на левия мозък е извадена и претеглена. Опаковката се използва за определяне на водното съдържание и долната половина на левия мозък се фиксира с 4 процента параформалдехид за оцветяване с HE. Претеглете десния мозък, добавете разтвор на PBS, за да приготвите 10 процента хомогенат, центрофугирайте при 3 000 r·min-' за 10 минути, аликвотирайте супернатантата и я съхранявайте в хладилник при 80 градуса за определяне на TNF- a, IIL-6, SOD, MDA, GSH-Px.

2.3 Наблюдение на патологията на мозъчната тъкан

След като мозъчната тъкан е напълно фиксирана в 4 процента параформалдехид, дехидратирана, вградена, нарязана и оцветена с HE, патологичните промени се наблюдават под оптичен микроскоп при различни увеличения и се правят снимки.

2.4 Определяне на съдържанието на мозъчна вода и определяне на свързаните индекси на възпалението и оксидативния стрес на хомогенната мозъчна тъкан

Изпечете мозъчната тъкан, увита в калаено фолио, във фурна (80 градуса, 72 часа) до постоянно тегло, претеглете сухото тегло и изчислете водното съдържание: водно съдържание=(тегло на тъканта-сухо тегло на тъканта) / тегло на тъканта × 100 процента. Използвайте комплект за ензимен имуноанализ за измерване на съдържанието на TNF-, IL-6, UV спектрофотометър за измерване на MDA, SOD, GSH-Px, конкретните стъпки следвайте инструкциите.

2.5 Статистически анализ

Софтуерът SPSS 16.0 беше използван за анализ, всички данни от измерванията бяха представени с долните плюс s, данните бяха първо тествани за нормалност, тестът за независима проба 1 беше използван за сравнение между съответстващите групи и логаритмичната трансформация беше извършена за несъответстващата група. Нивото на проверка е =0.05.

екстракт от цистанче

3 резултата

3.1 Ефектът на PhGCs върху патологичните промени на мозъчната тъкан при HACE плъхове

Наблюдаването на патологичните срезове на мозъчните тъкани на плъхове във всяка група под светлинен микроскоп показа, че молекулярният слой, външният гранулиран клетъчен слой, клетъчният слой на тялото на прешлените, вътрешният гранулиран клетъчен слой и структурата на многоредовия клетъчен слой на мозъчната тъкан от нормалната контролна група бяха чисти и не бяха открити лезии. В моделната група, мозъчните тъкани на плъховете бяха с хиперемия и оток на капилярите, а отокът на клетките в молекулярния слой и слоя на тялото на прешлените беше очевиден. PhGCs група с ниска доза от плъхове мозъчна тъкан молекулен слой част от вазодилатация и конгестия оток, лек клетъчен оток, оток по-малък от моделната група: PhGCs група със средна доза от мозъчна тъкан на плъхове част от субменингеалната вазодилатация и конгестия, понякога клетъчен оток , оток в сравнение с моделната група Групата е значително намалена; молекулярният слой на групата с високи дози PhGCs няма очевиден оток и има лек периваскуларен оток, който е значително намален в сравнение с моделната група. Молекулярният слой на мозъчната тъкан на плъхове в групата Rhodiola Rosea имаше разпръснат оток, а разпръснатите кръвоносни съдове имаха много лек оток. Отокът е значително намален в сравнение с моделната група. Може да се види, че мозъчната тъкан на плъховете в моделната група очевидно е оток и моделът е установен. PhGCs и Rhodiola Rosea могат да намалят степента на мозъчен оток при плъхове с HACE модел. Резултатите са показани на фигура 1.

Фигура 1 Хистопатологично наблюдение на мозъка на плъх в различни групи (HE × 400)

3.2 Ефектът на PhGCs върху съдържанието на вода в мозъка на HACE плъхове

В сравнение с нормалната контролна група, съдържанието на вода в мозъчната тъкан на моделната група се увеличава и разликата е статистически значима (P<0.01), indicating="" that="" the="" model="" was="" established.="" the="" brain="" tissue="" water="" content="" of="" rats="" in="" the="" low,="" medium,="" and="" high="" doses="" of="" phgcs="" and="" the="" rhodiola="" rosea="" group="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group,="" and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.01). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" tissue="" water="">

3.3 Ефектът на PhGC върху TNF-a и IL-6 в мозъчната тъкан на HACE плъхове

В сравнение с нормалната контролна група, съдържанието на TNF-a и IIL-6 в хомогената на мозъчната тъкан на моделната група се повишава значително (P<0.01). the="" contents="" of="" tnf-α="" and="" iil-6="" in="" the="" brain="" tissue="" homogenate="" of="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" model="" group=""><0.05), and="" the="" difference="" was="" statistically="" significant.="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" in="" brain="" tissue="" tnf-a="" and="" iil-6="" levels="" between="" the="" phgcs="" dose="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

3.4 Ефектът на PhGC върху оксидативния стрес в мозъчната тъкан на HACE плъхове

В сравнение с нормалната контролна група, ензимните активности на SOD и GSH-Px в мозъчната тъкан на моделната група бяха значително намалени и съдържанието на MDA беше значително повишено (P<0.01). the="" sod="" and="" gsh-px="" enzyme="" activities="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" phgcs="" low,="" medium,="" and="" high="" dose="" groups="" and="" rhodiola="" rosea="" group="" were="" higher="" than="" the="" model="" group,="" and="" the="" mda="" content="" was="" lower="" than="" that="" of="" the="" model="" group.="" the="" difference="" was="" statistically="" significant=""><0.05). there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" content="" of="" sod,="" gsh-px,="" and="" mda="" in="" the="" brain="" tissue="" between="" the="" phgcs="" groups="" and="" the="" rhodiola="" rosea="">

добавка Cistanche: подобряване на имунитета

4. Обсъждане

През последните години вътрешните изследвания за превенция и лечение на височинна болест с традиционната китайска медицина постигнаха значителни иновативни резултати и успешно бяха разработени традиционни китайски лекарства с независими права на интелектуална собственост за превенция и лечение на височинна болест. Например, капсулите Rhodiola, разработени от Тибетския военен регион, са получили номера на одобрение за специални военни лекарства и се използват в граничните отбранителни сили на платото като специални лекарства за превенция и лечение на болести на платото. Пероралната течност Rhodiola Rosea, лансирана от местните фармацевтични компании в Цинхай и Тибет, получи официалния номер на одобрение на националните разновидности на китайската медицина и е клинично подходяща за превенция и лечение на остра и хронична височинна болест10. Фармакологичните ефекти на PhGCs са подобни на салидрозид, така че избрахме Rhodiola Rosea перорална течност, която се продава и използва на пазара и има лекарствен стандарт, като лекарство за положителна контрола.

Голям брой проучвания [1H12 доказват, че нивата на TNF- и IL-6 при пациенти с HACE са повишени, Zhou Qiquan et al. [3 Проучванията показват, че TNF- играе важна роля в промяната на пропускливостта на кръвно-мозъчната бариера. Важен фактор за повишена бариерна пропускливост. Секрецията на TNF се увеличава по време на хипоксемия. Когато TNF- се увеличи необичайно в кръвта, той може да увреди васкуларните ендотелни клетки, причинявайки промени в морфологията на васкуларните ендотелни клетки, увреждане на клетъчната мембрана и органелите и т.н., и TNF-a може също да се използва като Вътреклетъчният сигнал за апоптоза индуцира апоптозата на васкуларните ендотелни клетки, насърчава производството на ендотелин (ET-1) и влошава увреждането на стената на кръвоносните съдове и има ефект на насърчаване на секрецията на IIL-614.

Хипоксията се счита за ключов фактор, водещ до появата на остра височинна болест. Реакцията на оксидативния стрес, предизвикана от хипоксия, играе важна роля в церебралната артериална хипертония и съдовото изтичане. Местните свободни радикали участват в причиняването на съдови увреждания. Цереброваскуларното увреждане и увеличеното изтичане на течности могат да причинят мозъчен оток 13i4. Zhou Qiquan и др. [7 Проучванията показват, че свободните кислородни радикали играят важна роля в образуването на HACE и са важен фактор за повишаване на пропускливостта на кръвно-мозъчната бариера в среда на голяма надморска височина. В хипоксична среда свободните радикали и MDA ще бъдат значително увеличени, докато функцията на антиоксидантните ензими се регулира надолу. Следователно ниската функция на антиоксидантните ензими и увеличаването на увреждането от липидната пероксидация може да има важно значение в патогенезата на острата височинна болест. MDA се произвежда от разграждането на пероксиди на мастни киселини и е най-често измерваният продукт на липидна пероксидация в биологичните системи. Антиоксидантните ензими в тялото включват SOD, GSH-Px и т.н., които или директно пречистват свободните супероксидни радикали и водородния пероксид, или ги превръщат в по-малко активни вещества, за да играят защитна роля. Така че открихме SOD, MDA, GSH-Px в хомогената на мозъчната тъкан.

В този експеримент, в сравнение с нормалната контролна група, количеството TNF-a и IIL-6 в хомогената на мозъчната тъкан на HACE моделната група се повишава значително, активността на SOD, GSH-Px ензимите намалява и съдържанието на MDA се повишава значително. Това показва, че индуцирана от хипоксия дисфункция на оксидативния стрес и възпаление при плъхове участват във формирането на HACE. Превантивното приложение на PhGC може да намали съдържанието на вода в мозъчната тъкан при плъхове с мозъчен оток и значително да подобри патологичните промени на оток на мозъчната тъкан, което показва, че има ефект на предотвратяване на появата на HACE. PhGCs могат да повишат SOD и GSH-Px в мозъчната тъкан на плъх по време на хипоксия. Ензимната активност намалява съдържанието на MDA в мозъчната тъкан, причинено от хипоксия. Съдържанието на TNF- и IL-6 в мозъчната тъкан на плъхове в групата за превантивно приложение на PhGCs е значително по-ниско от това в моделната група, което предполага, че нашият антиоксидантен стрес и противовъзпалителни средства може да са превенцията и лечението на PhGCs Един от механизмите на височинната болест. Въз основа на резултатите от този експеримент, ефектът на PhGC в групата със средна доза е малко по-добър от този с висока доза, но разликата не е статистически значима. Няма свързани литературни съобщения PhGCs са индуктори на чернодробни лекарствени ензими, което може да изключи възможността лекарствата да индуцират повишаване на активността на чернодробните лекарствени ензими и да ускорят самообмяната на веществата. Спекулира се, че възможната причина е, че с увеличаването на концентрацията на лекарството концентрацията на лекарството в тялото надхвърля обхвата на връзката доза-ефект. При средна доза всички рецептори в тялото са заети и рецепторите са наситени, така че няма продължително увеличаване на ефекта от високите дози и лекарството. Това е гликозид, който може да хидролизира захарта в стомаха и повишаването на вискозитета ще ограничи ефективната абсорбция на лекарството, когато концентрацията е твърде висока.

добавка Cistanche: подобряване на имунитета

справка

[1] Джон Б. Уест, превод на английски на „номенклатура, класификация и диагностични критерии за болести на голяма надморска височина в Китай“ [J]. High Altitude Med Biol, 2010, 11(2): 169-172.

[2] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Променен метаболизъм на свободните радикали при остра планинска болест: последици за динамичната церебрална авторегулация и функцията на кръвно-мозъчната бариера [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[3] Tang YP, Wu P, Su JJ, et al. Ефекти на аквапорин-4 върху образуването на оток след интрацеребрален кръвоизлив [J]. Експериментална неврология, 2010, (223): 485-495.

[4] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong и др. Ефективни съставки в Cistanche cistanche от различен произход Количествен анализ на [J]. Китайска билкова медицина, 2007, 38(3): 452-455.

[5] Muhebuli • Abuliz, Mao Xinmin, Rena • Kasmu и др. PhGCs Антиоксидантна активност в HL-60 клетки [J]. Китайски фармакологичен бюлетин, 2008, 3 (24): 362-364.

[6] Liu Fengxia, Wang Xiaowen, Luo Lan и др. PhGC срещу -амилоиден пептид Ефектът и механизмът върху ученето и паметта на миши модел с болест на Алцхаймер [J]. Научен бюлетин по китайска фармакология, 2006, 22(5): 595-599.

[7] Liu Zhiqin, Chen Quieting, Li Yan и др. Ефекти на Cistanche върху хематопоезата и хемопоетичните ефекти на химиотерапията при мишки, носещи тумор. Влиянието на имунната функция [J]. Вестник на Пекинския университет по традиционна китайска медицина, 2010 г., 33 (11): 758-761.

[8] Xu Yonghua, Zhang Qiong, Cao Jinjun и др. Създаване на широкомащабна комбинирана камера с ниско налягане за разширяване на медицината Видове експериментални платформи [J]. Китайски журнал за сравнителна медицина, 2012 г., 22 (7): 60-63.

[9] Tao Yicun, Shi Wen Hui, Xu Yonghua и др. Височинен белодробен оток при симулирана среда на плато Създаване на миши модел [J]. Китайски вестник за експериментални животни, 2014 г., 22 (1): 76-78.

[10] Уанг Хай. Фармакотерапия при професионална височинна болест [M]. Пекин: Издателска къща за военни медицински науки, 2010: 131-148.

[11] Чен Юнтиен, Ху Ин. Промени в плазмения интерлевкин-6 при пациенти с остър HACE [J]. Китайски вестник за превантивна медицина, 2006, 24 (2): 92-94.

[12] Colleen Glyde JL, Andrew WS, Megan JW и др. Остра планинска болест, възпаление и пропускливост: нови прозрения от изследване на кръвен биомаркер [J]. J Appl Physiol, 2011, 111: 392-399.

[13] Zhou QQ, Tan XL, Wang J. Повишената пропускливост на кръвно-мозъчната бариера, причинена от възпалителни медиатори, участват в церебрален оток на голяма надморска височина [J]. Sci Res and Essays, 2011, 6 (3): 607-615.

[14] Ohga E, Matsuset. Връзката между адхезионните молекули и хипоксията [J]. Nippon Rinsho, 2000, 59 (8): 1587-1591.

[15] Bakonyi T, Radak Z. Голяма надморска височина и свободни радикали [J]. J Sports Sci Med, 2004, 3(2): 64-69.

[16] Bailey DM, Evans KA, James PE, et al. Променен метаболизъм на свободните радикали при остра планинска болест: последици за динамичната церебрална авторегулация и функцията на кръвно-мозъчната бариера [J]. J Physiol, 2009, 587(1): 73-85.

[17] Zhou Qiquan, Wang Jing, Wang Yunli и др. Кръв-мозък при излагане на голяма надморска височина на свободни кислородни радикали Ролята на промените в пропускливостта на бариерата и нейната връзка с HACE [J]. China Micro Circulation, 2007, 11(3): 149-153.