Резултати от немското проучване за хронично бъбречно заболяване (GCKD) Подкрепа на асоциацията на относителната дължина на теломерите със смъртността при голяма група пациенти с умерено хронично бъбречно заболяване
Mar 12, 2022
Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com
Федерика Фацини1, Клаудия Ламина1, Джулия Рашенбергер и др.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, Международно дружество по нефрология. Публикувано от Elsevier Inc. Това е статия с отворен достъп под лиценз CC BY
Известно е, че дължината на теломерите е обратно свързана със стареенето и е предложена като маркер за заболявания, свързани със стареенето. Изтриването на теломерите може да се ускори от оксидативен стрес и възпаление, и двете често присъстващи при пациенти с хронично бъбречно заболяване. Тук изследвахме дали относителната дължина на теломерите е свързана със смъртността в голяма група пациенти с хронично бъбречно заболяване в стадий G3 и A1-3 или G1-2 с явна протеинурия (A3) при записване. Относителната дължина на теломерите е количествено определена в периферната кръв чрез количествен PCR метод при 4955 пациенти от проучването GCKD, текуща проспективна кохорта за наблюдение. Налично е пълно четиригодишно проследяване от 4926 пациенти, при които регистрирахме 354 смъртни случая. Относителната дължина на теломерите е силен и независим предиктор за смъртност от всякаква причина. Всяко намаление с 0.1 относителна единица дължина на теломерите беше силно свързано с 14 процента повишен риск от смърт (коефициент на риск 1,14 [95 процента доверителен интервал 1.06-1.22]) в коригиран модел за възраст, пол, изходно ниво на eGFR, съотношение албумин/креатинин в урината, захарен диабет, преобладаващо сърдечно-съдово заболяване, LDL-холестерол, HDL-холестерол, тютюнопушене, индекс на телесна маса, систолично и диастолично кръвно налягане, С-реактивен протеин и серумен албумин. Това означава 75 процента по-висок риск за тези в най-ниския в сравнение с най-високия квартил на относителната дължина на теломерите. Асоциацията се дължи главно на 117 сърдечно-съдови смъртни случая (1,20 [1.05-1.35]), както и 67 смъртни случая, дължащи се на инфекции (1,27 [1.07-1.50]). По този начин нашите открития подкрепят връзката на по-къса дължина на теломерите със смъртност от всякакви причини, сърдечно-съдова смъртност и смърт поради инфекции при пациенти с умерено хронично бъбречно заболяване.
КЛЮЧОВИ ДУМИ:хронично бъбречно заболяване; инфекции; смъртност; относителна дължина на теломерите
Хронично бъбречно заболяване(CKD) е комплексно заболяване и неговата наследственост се оценява на 30 процента –70 процента.9–12 През последните години проучвания за асоцииране в целия геном идентифицираха много генетични локуси, свързани с бъбречната функция и ХБН.13–17
Въпреки това, индексните единични нуклеотидни полиморфизми в идентифицираните локуси обясняват само малка част от наследствеността и може да липсват допълнителни генетични фактори. Към днешна дата само няколко малки проучвания са изследвали връзката между TL и бъбречно заболяване. Някои проучвания установиха, че късият TL корелира с увредена бъбречна функция в общата популация,18,19 както и при пациенти със сърдечна недостатъчност.20 Наскоро описахме значително по-къс относителен TL (RTL) при пациенти с умерено тежка CKD, които имат преобладаващо сърдечно-съдово заболяване ( CVD),21 както и връзка с продължителността22 и прогресията на ХБН.23 Пациенти, които са достигнали до бъбречна недостатъчност, лекувани с хемодиализа, се описват като имащи намален TL в сравнение със здрави контроли,24–27 и намаленият TL е обратно пропорционален на смъртността. 28 Проведени са само няколко изследвания при бъбречни пациенти, които не са зависими от диализа.21–23,29,30 Доколкото ни е известно, настоящото проучване е първото проспективно проучване, което изследва връзката между левкоцитния RTL и причините за смъртността в големи кохорта с независима от диализа ХБН.
Полза от Cistanche: подобряване на бъбречната функция
РЕЗУЛТАТИ
Базови характеристики на изследваната популация
RTL е количествено определен в периферната кръв чрез метод на количествена полимеразна верижна реакция при 4955 пациенти от ГерманияХронично бъбречно заболяванепроучване. Налично е пълно {{0}}годишно проследяване от 4926 пациенти. Основните характеристики на тези 4926 пациенти според квартилите на RTL са предоставени в таблица 1. RTL варира от минимум {{10}}.40 до максимум 2,31 (допълнителна фигура S1 ), със средна стойност ± SD от 0.95 ±0.19 и медиана от 0.92 (1-ви квартил ¼ 0.82; 3-ти квартил ¼ 1 .05). RTL има отрицателна корелация с възрастта (r ¼ –{{30}}.36, P <0,001) и="" положително="" корелира="" с="" изчислената="" скорост="" на="" гломерулна="" филтрация="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p=""><0,001) и="" албумин="" в="" урината–="" креатининово="" съотношение="" (r="0,05," p=""><0,001). когато="" коригирахме="" rtl="" за="" възраст="" и="" пол,="" вече="" не="" наблюдавахме="" значителна="" корелация="" с="" egfr="" и="" съотношението="" албумин-креатинин="" в="">
Проспективно проследяване и смъртност
Общо 354 смъртни случая са настъпили по време на среден период на проследяване от 4 години (1483 дни). Причините за смъртта са ССЗ, включително инфаркт на миокарда, коронарна болест на сърцето, внезапна сърдечна смърт, застойна сърдечна недостатъчност, белодробна емболия, заболяване на сърдечната клапа и исхемичен инсулт (117 пациенти, 33,1 процента), инфекции (67 пациенти, 18,9 процента), неисхемична цереброваскуларна причини (9 пациенти, 2,5 процента), периферно съдово заболяване (7 пациенти, 2.0 процента), бъбречна недостатъчност (8 пациенти, 2,3 процента), различни други причини (103 пациенти, 29,1 процента) и неизвестни причини ( 43 пациенти, 12,1 процента).
Графиките на кумулативната честота показват, че честотата на смъртност по всякаква причина (Фигура 1а) се увеличава с по-кратък RTL, като най-високата честота е с най-нисък RTL квартил. В кривите на функцията на кумулативната честота на сърдечно-съдовата (Фигура 1b) и смъртността от инфекции (Фигура 1c), разликата между квартилите е по-слабо изразена, но редът на квартилите е същият.
Фигура 1|Функция на кумулативната честота за (а) смъртност по всякаква причина, (б) смъртност от сърдечно-съдови заболявания (ССЗ) и (в) смърт поради инфекции, по квартили (Q) на относителната дължина на теломерите (RTL). Q1 е квартилът, включващ пациенти с най-къс RTL.
Резултатите от регресионните модели на Кокс, прилагащи различни корекции, са дадени в таблица 2 и показват значителна връзка между по-късия RTL и риска от смъртност по всякаква причина. Оценявано непрекъснато, всяко намаление на 0.1 единици RTL се свързва с 16 процента повишен риск от смърт в модел, коригиран за възрастта и пола (коефициент на риск [HR], 1,16; 95 процента доверителен интервал [CI], 1.08–1.24; P=1.7e-05). Връзката остава значителна след разширена корекция за eGFR, съотношението албумин-креатинин в урината, захарен диабет и преобладаващо сърдечно-съдово заболяване (модел 2: HR, 1,16; 95 процента CI, 1,08–1,24), както и допълнителните рискови фактори за ССЗ ниска плътност липопротеинов холестерол, липопротеинов холестерол с висока плътност, тютюнопушене, индекс на телесна маса, систолично кръвно налягане, диастолично кръвно налягане, С-реактивен протеин и серумен албумин на изходно ниво (модел 3: HR, 1,14; 95 процента CI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Нелинейните P сплайн анализи са дадени на фигура 2 и разкриват почти линейна връзка на RTL със смъртността по всякаква причина. Пациентите с най-къс RTL (1-ви квартил) са имали 75 процента по-висок риск от смъртност по всякаква причина в сравнение с тези в квартила с най-дълъг RTL (допълнителна таблица S1, напълно коригиран модел: HR, 1,75; 95 процента CI, 1,22–2,50 ; P=0,0024).
След това анализирахме какво води до връзката на RTL със смъртността от всякаква причина (Таблица 2). Ние оценихме 2-те най-чести специфични причини за смърт и наблюдавахме, че всяко намаление с 0.1 RTL единици беше свързано с 20 процента повишен риск от смърт от ССЗ в напълно коригирания модел (HR, 1,2 0; 95 процента CI, 1.05–1,35; P=0,0052). Намаленият RTL също е значително обратно свързан със смъртта поради инфекции. Всяко намаление на RTL с 0,1 единици се свързва с 1{18}}кратно по-висок риск от смърт поради инфекции (HR, 1,27; 95 процента CI, 1,07–1,50; P=0,0051). Разглеждането на оценките за различните квартили в допълнителна таблица S1 разкрива за смърт поради инфекции, че оценките за всеки от квартилите 1, 2 и 3 са били подобно повишени в сравнение с тези за квартил 4. Анализът с други причини за смърт като както и неизвестни причини за смъртта очевидно е твърде разнороден и не разкрива никаква връзка с RTL (данните не са показани).
Графиката на мащабираните остатъци на Шьонфелд и тестът за допускания за пропорционална опасност не предполагат никакви променящи се във времето ефекти за RTL върху нито един от изследваните резултати. HR на подразпределението както за сърдечно-съдова, така и за инфекциозна смърт, докладвани в допълнителна таблица S2, са само леко отслабени в сравнение със специфичните за причината HR.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 в напълно коригираните модели). Като се има предвид, че наскоро наблюдавахме U-образна връзка между продължителността на ХБН и RTL,22 направихме анализ на чувствителността, като допълнително коригирахме продължителността на ХБН на изходно ниво, определена като по-малко от 6 месеца, между 6 месеца и 5 години и повече от 5 години. Тази допълнителна корекция доведе само до незначителни промени на HR, получени за всичките 3 крайни точки (допълнителна таблица S3).
Полза от Cistanche: подобряване на бъбречната функция
ДИСКУСИЯ
Резултатите от това проучване показаха значителна връзка на RTL със смъртността от всякаква причина в кохорта от независима от диализа ХБН. По-късият RTL се свързва с по-висок риск от смъртност, независимо от бъбречната функция и традиционните рискови фактори за ССЗ. Тази асоциация се дължи на смърт, дължаща се на ССЗ, както и на смърт, дължаща се на инфекции.
Асоциация със смъртността по всякаква причина
Предишни проучвания,5,6,31–35с малки изключения,36,37 са показали отрицателна връзка между RTL и смъртността от всякакви причини в общото население. Най-голямото проучване досега (n=64 637) е извършено от Rode et al., с коригиран HR за смъртност от 1,40 за децила с най-къс спрямо децила с най-дълъг RTL.35В съответствие с тези резултати, нашето проучване показа с всяко намаление с 0.1 RTL единици 14 процента по-висок риск от смъртност по всякаква причина, което означава 75 процента по-висок риск за тези в най-ниската в сравнение с най-високата квартил на RTL. Доколкото ни е известно, само Carrero et al.28са изследвали връзката между RTL и риска от смъртност при пациенти с ХБН. Те са изследвали 175 пациенти с краен стадий на бъбречно заболяване, лекувани с хемодиализа, от които 70 са починали по време на средно 31 месеца наблюдение. Авторите отбелязват, че TL независимо прогнозира преживяемостта на пациентите след допълнителна корекция за възраст, пол и възпаление. Настоящото проучване разширява тези наблюдения към много по-голямата група лица с ХБН, които не се нуждаят от диализа.
Фигура 2|Коригирани нелинейни сплайнове (и 95% доверителни ленти) за връзката между нарастващата относителна дължина на теломерите (RTL) и съотношението на риска (HR) на (a) смъртност от всякаква причина, (b) сърдечно-съдова смърт и (c) смърт поради инфекции . HR се дава като логаритмична скала на данъците. Сива линия: модел на корекция 1 (коригиран за възраст и пол). Blueline: модел на корекция 3 (коригиран за възраст, пол, прогнозен [продължение]
Връзка със смъртността от ССЗ
Досега нито едно проучване не е изследвало връзката на RTL със смъртността от ССЗ при пациенти с ХБН, въпреки че това е основната причина за смърт при тези пациенти. В зависимост от изследваната етническа принадлежност и от моделите за коригиране на данните, някои, но не всички, проучвания в общата популация съобщават за връзка между ниските RTL и резултатите от ССЗ.33,38–41Силна подкрепа за причинно-следствена връзка идва от рандомизиращо проучване на Мендел, при което е установено, че генетични варианти, свързани с по-къс RTL, са свързани с исхемична болест на сърцето.40В настоящото проучване установихме значителна връзка на RTL със сърдечно-съдови смъртни случаи, с 20 процента по-висок риск при всяко намаляване на RTL с 0.1 единици, или 75% по-висок риск за тези пациенти в квартила с най-къс TL в сравнение с квартила с най-дълги TL. Тази констатация е в съответствие с нашия по-ранен доклад за връзка с преобладаващи сърдечно-съдови събития в тази популация пациенти: всяко намаление на RTL с 0,1 единици беше значително свързано с 6% по-високи шансове за преобладаващо ССЗ в модел, коригиран спрямо възрастта, пола, настоящето тютюнопушене, хипертония, диабетно състояние, липопротеинов холестерол с ниска плътност, висока плътност
липопротеинов холестерол, С-реактивен протеин, eGFR и индекс на телесна маса.21Проспективното проследяване при тези пациенти в настоящото изследване разкрива, че най-ниският квартил на RTL е свързан със значително повишен риск, докато другите 3 квартила показват много сходни оценки (Фигура 1b).
Асоциация със смърт поради инфекции
Въпреки че експерименталните доказателства подкрепят ролята на клетъчното стареене и късия TL при нарушен имунен отговор, епидемиологичните проучвания са оскъдни, особено при пациенти с ХБН. Хелби и др. проведе най-голямото (n=75 309) проспективно популационно проучване, изследващо RTL и риска от хоспитализация за инфекциозни заболявания и риска от смърт, свързана с инфекция. По време на 7 години проследяване те наблюдават по-висок риск от каквито и да било инфекции в квартила с най-кратък в сравнение с квартила с най-дълъг RTL.42 Предишни проучвания с по-малък размер на извадката съобщават за противоречиви резултати.32,43,44Нашите открития при пациенти с ХБН описват за първи път връзката между късия RTL и по-високия риск от смърт поради инфекции в тази високорискова популация.
Полза от Cistanche: подобряване на бъбречната функция
Потенциален механизъм
Биологичният механизъм, който е в основата на връзката между RTL и смъртността, все още е неясен. Асоциацията, идентифицирана от нашето проучване, не изяснява дали скъсяването на RTL е причинно свързано със сърдечно-съдови заболявания и инфекции. Въпреки това, проучване за асоцииране в целия геном, последвано от анализ на оценка на генетичния риск, комбиниращ водещи варианти в 7 генетични локуса, показа асоциация на алелите, свързани с по-къс RTL, с повишен риск от коронарна артериална болест. Това откритие осигурява възможна подкрепа за потенциална причинно-следствена роля на RTL при ССЗ.45,46Освен това, клетъчното стареене, предизвикано от изтриването на теломерите, може да бъде отключващ фактор за атеросклероза, както и артериосклероза. Натрупването на стареещи клетки в съда допринася за образуването на атеросклеротични плаки и калцификации на медиите, което води до повишена артериална скованост като доминираща характеристика на уремичното артериално заболяване.47Повечето от проучванията са измервали RTL в ДНК от периферни левкоцити. Доказана е обаче тясна корелация между TL на левкоцитите и тъканта на аортната стена.48Следователно клетъчното стареене може да повлияе на ендотелните клетки, водещо до дисфункция на съдовата стена и насърчаване на адхезията на имунните клетки, първично събитие при атеросклероза. Освен това, късите теломери активират р53 и аутофагията в сърдечните прогениторни клетки, дестабилизирайки баланса на покой и пролиферация към диференциация и стареене, което води до изчерпване на сърдечните прогениторни клетки.49Доказано е, че дисфункцията на теломерите предизвиква дълбоко p53-зависимо потискане на главните регулатори на митохондриалната биогенеза и функция, което води до биоенергиен компромис поради нарушено окислително фосфорилиране и генериране на аденозин трифосфат.50,51
Има и няколко връзки между RTL и инфекциите. Загубата на теломери е наблюдавана по време на Т клетъчна диференциация,52при хронични вирусни инфекции,53и с възрастта.54Освен това се съобщава за къси левкоцитни TL като рисков фактор при различни имуно-свързани заболявания55и диабет.56По-късият TL на левкоцитите причинява клетъчно стареене, което е последвано от намаляване на пролиферативния капацитет на имунните клетки. TL може също да участва в свързано с възрастта намаляване на имунната функция, свързано с недостатъчен отговор на ваксини и остри инфекции.57–59Потенциалната роля на TL при инфекции се подкрепя и от скорошно проучване за асоцииране на целия геном в китайско население. Dorjee и колеги наблюдават връзка между TL-редуциращ алел и смърт поради респираторна инфекция.60Изтощението на RTL може да бъде силно предизвикано от наличието на повишен оксидативен стрес, често срещано състояние при ХБН.61 Няколко in vitro и in vivo проучвания показват, че оксидативният стрес ускорява изтриването на теломерите.62,63Наистина, теломерите, с тяхното високо съдържание на гуанин, са силно податливи на окислително увреждане,64и прекъсванията на едноверижна ДНК, предизвикани от оксидативен стрес, могат да бъдат важен фактор за скъсяване на теломерите по време на репликация на ДНК.65
Полза от Cistanche: подобряване на бъбречната функция
Силни страни и ограничения
Силните страни на това изследване включват големия размер на извадката от добре дефинирана популация със средно проследяване от 4 години без почти никакви загуби за проследяване, хомогенност на изследваната популация и централизирана оценка на TL и измервания на резултатите. Особено измерването на RTL е от изключителна важност, тъй като стандартизацията между лабораториите не е лесна за постигане и следователно процесът трябва да се извършва в една и съща лаборатория при точно същите условия по отношение на протокол, референтен ген, инструмент, персонал,66 и ДНК процедура за извличане.67
Има някои ограничения за това проучване. Първо, RTL се измерва в периферни левкоцити. Известно е, че скоростта на прогресия към стареене се различава при различните подгрупи лимфоцити. 59За съжаление, няма данни за състава на кръвните клетки в ГерманияХронично бъбречно заболяванепроучване и следователно не беше възможно да се изследва този аспект. Познаването на RTL от различни видове бъбречни клетки би представлявало интерес, но не е възможно да се получи в голямо епидемиологично проучване, тъй като това ще изисква тъканен материал от биопсии. Второто ограничение включва наблюдателния дизайн на изследването, който не позволява изясняване на причинно-следствената връзка или биологичния механизъм. Трето, проучването включва главно пациенти с ХБН в стадий G3 или A3 и констатациите може да не могат да бъдат обобщени за други стадии на ХБН. Четвърто, връзката с конкретни причини за смърт може да е била ограничена от статистическата сила, но все още е налице за 2-те конкретни основни причини за смърт. И накрая, въпреки че нашите анализи бяха коригирани за традиционни сърдечно-съдови рискови фактори, както и параметри на бъбречната функция, не можем да изключим възможността за остатъчно объркване от неизвестни или неизмерени
променливи. Въпреки това беше много интересно да се види, че коригираните според възрастта и пола оценки на RTL за различни резултати са много стабилни с допълнителна корекция за другите променливи, което показва, че RTL е относително независим от други променливи, когато данните се коригират за възраст и пол.
Изводи
Краткият относителен TL, определен количествено от левкоцитите на периферната кръв, е независимо свързан със смъртността по всякаква причина по време на 4-годишно проследяване при пациенти с умерено тежка ХБН. Тази асоциация се дължи на смърт, дължаща се на ССЗ, както и на смърт, дължаща се на инфекции.
Полза от Cistanche: подобряване на бъбречната функция
МЕТОДИ
Проучване на населението
НемецътХронично бъбречно заболяване study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min на 1,73 m2 при наличие на изявена протеинурия (стадий G1–G2, A3). Критериите за изключване не са кавказка етническа принадлежност, трансплантация на солиден орган или костен мозък, активно злокачествено заболяване в рамките на 24 месеца преди скрининга, сърдечна недостатъчност IV етап на New York Heart Association и юридическо обслужване или невъзможност за предоставяне на съгласие. Всички представени лабораторни параметри са измерени от събрани биопроби в централна лаборатория, както е описано по-горе.68 Информацията за социодемографските фактори, медицинската и семейната история, лекарствата и свързаното със здравето качество на живот са получени от обучен персонал чрез стандартизирани въпросници. Преобладаващото сърдечно-съдово заболяване в началото се дефинира като анамнеза за нефатален инфаркт на миокарда, присаждане на коронарен артериален байпас, перкутанна транслуминална коронарна ангиопластика, инсулт и интервенции на каротидните артерии (каротидна ендартеректомия и/или каротидна балонна ангиопластика или имплантиране на стент).
Всички участници предоставиха писмено информирано съгласие и проучването беше одобрено от комисиите по етика на всички участващи институции и регистрирано в националния регистър за клинични проучвания (DRKS 00003971). Всички методи бяха проведени в съответствие с одобрените насоки и Декларацията от Хелзинки. Данните се събират и управляват с помощта на Askimed (https://www.askimed.com) като облачна уеб платформа за събиране и управление на формуляри за докладване на случаи и лабораторни данни.
Клинични крайни точки по време на проспективно проследяване
Както беше описано наскоро, 69 пациенти се проследяват всяка година от обучен персонал, редуващ посещения лице в лице с посещения по телефона. По време на тези посещения данните за хоспитализациите, крайните събития и медицинската история се актуализират като част от структурирано интервю. Всички доклади за изписване от болница се събират от лекуващите лекари и/или болниците. Крайните точки непрекъснато се извличат от тези доклади от обучен и контролиран комитет за крайни точки, съставен от 3 независими лекари съгласно предварително определен каталог на крайните точки. Информацията за причината за смъртта се взема от тези доклади, както и от свидетелства за смърт, събрани от службите по граждански вписвания, когато персоналът на изследването е информиран за смъртта на участник в изследването.
Настоящият анализ включва всички крайни точки, настъпили до 4-годишното проследяване. Ако пациент пропусне 4-годишното посещение за проследяване, ние включихме всички крайни точки до 4,5 години след съответното изходно посещение. Следователно времето за цензуриране е било 4-годишната дата на проследяване или 4,5 години след изходното ниво. Първичният резултат е смъртност от всякаква причина. За да се оцени дали идентифицираните асоциации могат да бъдат приписани на конкретна причина за смъртта, смъртта от сърдечно-съдови причини и инфекциозни заболявания се считат за вторични резултати. Групата на смъртните случаи от ССЗ включва инфаркт на миокарда, коронарна болест на сърцето, внезапна сърдечна смърт, застойна сърдечна недостатъчност, белодробна емболия, заболяване на сърдечната клапа и исхемичен инсулт. Бяха записани и други причини за смърт, но тези подгрупи не бяха достатъчно големи, за да проведат по-нататъшни анализи, свързани със специфични причини.
Измерване на RTL
Геномна ДНК беше извлечена от цяла кръв в централна лаборатория с Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Германия). Настоящият анализ се основава на 4926 пациенти, за които са налични измервания на RTL в изходните кръвни проби и данни за смъртността. RTL се измерва в четири екземпляра, като се използва количествен анализ, базиран на полимеразна верижна реакция, разработен от Cawthon70 и модифициран, както е описано по-горе. 71 ДНК проби се провеждат в 15-ml реакции, съдържащи 1x Quantifast TM SYBR Green PCR основна смес (Qiagen, Hilden, Германия), 10 ng ДНК, 1 mM теломерен праймер или 250 nm праймер 36B4 на домакински ген. Ние определихме относителното съотношение на броя на повторенията на теломерите (T) към броя на копията на гена с едно копие (ген 36B4, кодиращ рибозомален фосфопротеин PO, разположен на хромозома 12; S). Съотношенията T/S са пропорционални на отделните RTL. Автоматизирането на тази високопроизводителна процедура доведе до много добри мерки за контрол на качеството с нисък коефициент на вариация между анализите на съотношенията T/S. Налична в търговската мрежа ДНК, включена във всички плаки за количествена полимеразна верижна реакция, беше използвана за проверка на ефективността на анализа през цялото изследване. Коефициентът на вариация между анализите на съотношенията T/S на тази проба, анализирана в 112 независими експеримента, е 9,6 процента преди нормализирането и намалява до 4,0 процента след нормализирането (допълнителна фигура S2).
Статистически анализ
Сравнихме базовите характеристики на участниците (Таблица 1), използвайки теста на Kruskal-Wallis за непрекъснати променливи и тестове хи-квадрат за категорични променливи. Функционалните криви на кумулативната честота бяха използвани за оценка на кумулативната честота на различните причини за смърт, отчитайки конкуриращия се риск.72 Пропорционалните регресионни модели на Кокс бяха проведени за оценка на асоциациите на RTL с 3 резултата: (i) смъртност по всякаква причина, ( ii) смърт поради ССЗ и (iii) смърт поради инфекции. И за двете специфични за причината крайни точки (ii и iii) пациентите са цензурирани, ако смъртта е настъпила по друга причина. В допълнение, асоциациите с тези специфични за причината крайни точки бяха изследвани с помощта на регресия на оцеляването на конкурентни рискове, като всички смъртни случаи от други причини се разглеждат като конкурентни събития. Следователно както специфични за причината HR, така и подразделения HR се докладват за смърт поради ССЗ или инфекции. Моделите на пропорционалните опасности на Кокс бяха монтирани с помощта на 3 различни нива на корекция: модел 1, коригиран за възраст и пол; модел 2, допълнително коригиран за изходната eGFR, съотношението албумин-креатинин в урината, преобладаващо ССЗ и диабет; модел 3, допълнително коригиран за традиционните рискови фактори за ССЗ като липопротеинов холестерол с ниска плътност, липопротеинов холестерол с висока плътност, индекс на телесна маса, тютюнопушене, систолично и диастолично кръвно налягане, С-реактивен протеин и албумин. Изборът на променливи, коригирани за различните модели, се основава на разликите в клиничните характеристики между квартилите на RTL, предоставени в таблица 1. В регресионните модели, RTL се анализира непрекъснато и като категоричен предиктор (в квартили на RTL). Като се има предвид, че първоначалните резултати показват по-висок риск, особено за ниски стойности на RTL, (специфичната за причината) HR също се отчита за квартили 1, 2 и 3 в сравнение с квартил 4 като референтна (допълнителна таблица S1). Допълнителен анализ надолу по веригата се основава на визуална проверка на P-сплайна, за да се изведе формата на връзката между RTL и риска от смъртност. Използвахме коефициента на рангова корелация на Spearman, за да оценим връзката между променливите на изследването. Всички статистически анализи бяха извършени с помощта на R 3.3.2 (https://www.r-project.org); P-стойности<0.05 were="" considered="" statistically="">
ПРЕПРАТКИ
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS, et al. Силно запазена повтаряща се ДНК последователност (TTAGGG)(n), присъстваща в теломерите на човешките хромозоми. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Динамика на теломерите в човешките клетки. Биохимия. 2008; 90: 116-121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Теломерите като биомаркери за стареене и свързани с възрастта заболявания. Curr Mol Med. 2005; 5: 197–203.
4. Forero DA, González-Hiraldo Y, López-Quintero C, et al. Дължина на теломерите при болестта на Паркинсон: мета-анализ. Exp Gerontol. 2016; 75: 53-55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. Дължина на теломерите на левкоцитите и смъртност от всички причини, сърдечно-съдови заболявания и рак: резултати от мета-анализ на данни на отделни участници от 2 големи проспективни кохортни проучвания. Am J Epidemiol. 2017; 185: 1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL, et al. Дължина на теломерите и смъртност по всякаква причина: мета-анализ. Aging Res Rev. 2018; 48: 11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Теломери и теломераза при бъбречно здраве. J Am Soc Nephrol. 2011; 22: 39-41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Има ли връзка между възпалението, активността на теломеразата и транскрипционния статус на обратната транскриптаза на теломеразата при бъбречна недостатъчност? Cell Mol Biol Lett. 2015; 20: 222-236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R, et al. Генетична предразположеност към хронично бъбречно заболяване – още няколко парчета от пъзела за наследственост. Преден генет. 2019; 10: 453.
10. Сатко С. Г., Фридман Б. И. Фамилното групиране на бъбречно заболяване и свързани фенотипове. Med Clin North Am. 2005; 89: 447-456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Общогеномни проучвания за идентифициране на рискови фактори за бъбречно заболяване с фокус върху пациенти с диабет. Трансплантация на Nephrol Dial. 2015; 30: iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Прозрения за бъбречните заболявания от проучвания за асоцииране в целия геном. Nat Rev Nephrol. 2016; 12: 549-562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. Асоциация на свързани с eGFR локуси, идентифицирани от GWAS, с инцидент на ХБН и ESRD. PLoS Genet. 2011; 7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM и др. Генетични локуси, влияещи върху бъбречната функция и хронично бъбречно заболяване. Нат Генет. 2010; 42: 373-375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Нови локуси, свързани с бъбречната функция и хронично бъбречно заболяване. Нат Генет. 2010; 42: 376-384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M, et al. Генетичните асоциации при 53 локуса подчертават клетъчни типове и биологични пътища, които са от значение за бъбречната функция. Nat Commun. 2016; 7: 10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M, et al. Каталог на генетични локуси, свързани с бъбречната функция от анализи на милион индивида. Нат Генет. 2019; 51: 957-972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M, et al. Връзка между бъбречната функция и дължината на теломерите: изследване на сърцето и душата. Am J Nephrol. 2012; 36: 405-411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH, et al. Късата дължина на теломерите е свързана с бъбречно увреждане при японски субекти със сърдечно-съдов риск. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA, et al. Бъбречната дисфункция е свързана с по-къса дължина на теломерите при сърдечна недостатъчност. Clin Res Cardiol. 2009; 98: 629-634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Асоциация на относителната дължина на теломерите със сърдечно-съдови заболявания в голяма кохорта с хронични бъбречни заболявания: проучването GCKD. атеросклероза. 2015; 242: 529-534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S, et al. Имат ли теломерите по-висока пластичност, отколкото се смята? Резултати от немското проучване за хронична бъбречна болест (GCKD) като високорискова популация. Exp Gerontol. 2015; 72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J, et al. Асоциация на относителната дължина на теломерите с прогресирането на хронично бъбречно заболяване в две кохорти: промяна на ефекта от тютюнопушене и диабет. Sci Rep. 2015; 5: 1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. Преждевременно стареене на циркулиращите Т клетки при пациенти с краен стадий на бъбречно заболяване. Kidney Int. 2011; 80: 208-217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S, et al. Дължина на теломерната G-опашка и хоспитализация за сърдечно-съдови инциденти при пациенти на хемодиализа. Clin J Am Soc Nephrol. 2014; 9: 2117-2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S, et al. Индуцирано от стрес преждевременно стареене в мононуклеарни клетки от пациенти на дългосрочна хемодиализа. Am J Kidney Dis. 2005; 45: 353-359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F, et al. Активността на теломераза е намалена в мононуклеарните клетки на периферната кръв на пациенти на хемодиализа. Am J Nephrol. 2006; 26: 91-96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. Изтриването на теломерите е свързано с възпаление, ниски нива на фетуин-А и висока смъртност при преобладаващи пациенти на хемодиализа. J Intern Med. 2008; 263: 302-312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A, et al. Изтриване на теломерите, бъбречна функция и преобладаващо хронично бъбречно заболяване в Съединените щати. Oncotarget. 2017; 8: 80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A, et al. Теломеразна активност при пациенти с хронично бъбречно заболяване в стадий 2–5D. Нефрология. 2017; 37: 592-597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E, et al. Асоциация на затлъстяване, дължина на теломерите и смъртност: данни от NHANES 1999-2002. Int J Obes. 2018; 42: 198-204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. Дължина на теломерите на левкоцитите и смъртност в изследването на сърдечно-съдовото здраве. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011; 66A: 421-429.
33. Needham BL, Rehkopf D. Дължина на теломерите на левкоцитите и смъртност в Националното изследване на здравето и храненето, 1999–2002. Епидемиология. 2015; 26: 528-535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G, et al. Дължина на теломерите и смъртност в изследването на риска и сърдечно-съдовото здраве в Лудвигсхафен. PLoS One. 2018; 13: e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. Дължина на теломерите на левкоцитите в периферната кръв и смъртност сред 64 637 индивиди от общата популация. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. Дължина на теломерите на левкоцитите и смъртност сред възрастните в САЩ: промяна на ефекта чрез поведение на физическа активност. J Sports Sci. 2018; 36: 213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U и др. Дължина на теломерите на левкоцитите и оценка на епигенетично базирания риск от смъртност: асоциации със смъртността от всякаква причина сред възрастните хора. Епигенетика. 2018; 13: 846-857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M, et al. Връзка между съкратената дължина на теломерите на левкоцитите и кардиометаболичните резултати: систематичен преглед и мета-анализ. Circ Cardiovasc Genet. 2015; 8: 82-90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S, et al. Дължина на теломерите на левкоцитите и риск от сърдечно-съдови заболявания: систематичен преглед и мета-анализ. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG, et al. Къса дължина на теломерите и
исхемична болест на сърцето: наблюдателни и генетични изследвания при 290 022 индивида. Clin Chem. 2016; 62: 1140-1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M, et al. Дължина на теломерите на левкоцитите и сърдечно-съдови заболявания при афро-американци: проучването на сърцето на Джаксън. атеросклероза. 2017; 266: 41-47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T, et al. По-късата дължина на теломерите на левкоцитите е свързана с по-висок риск от инфекции: проспективно проучване на 75 309 индивида от общата популация. Haematologica.2017; 102: 1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E, et al. Връзка между дължината на теломерите в кръвта и смъртността при хора на възраст над 60 години. Ланцет. 2003; 361: 393-395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. Връзка между дължината на теломерите, специфичните причини за смъртта и годините на здравословен живот по отношение на здравето, стареенето и състава на тялото: кохортно проучване, базирано на населението. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E, et al. Идентифициране на седем локуса, засягащи средната дължина на теломерите и тяхната връзка с болестта. Нат Генет. 2013; 45: 422-427.
46. Zhan Y, Hägg S. Дължина на теломерите и риск от сърдечно-съдови заболявания. Curr Opin Cardiol. 2019; 34: 270-274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D, et al. Експресията на CDKN2A/p16INK4a е свързана със съдова прогерия при хронично бъбречно заболяване.
Стареене (Олбани, Ню Йорк). 2017; 9: 494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y, et al. Съдържанието на ДНК на теломерите в кръвта на левкоцитите предсказва съдържанието на ДНК на теломерите в кръвта при хора със или без съдово заболяване. Eur Heart J. 2008; 29: 2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J, et al. Късите теломери индуцират p53 и аутофагия и модулират свързаните с възрастта промени в съдбата на сърдечните прогениторни клетки. Стволови клетки. 2018; 36: 868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. Транскрипционните коактиватори PGC-la и PGC-lb контролират припокриващи се програми, необходими за перинаталното съзряване на сърцето. Genes Dev. 2008; 22: 1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Теломери и митохондрии в стареещото сърце. Circ Res. 2012; 110: 1226-1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S, et al. Измерванията на теломерна флуоресценция в гранулоцити и подгрупи Т лимфоцити сочат висока.