Роля на полиморфизма TOMM40'523' в риска от заболяване и възрастта при поява на симптомите в две независими кохорти на болестта на Паркинсон

Резюме

Анормалната митохондриална функция е ключов процес в патогенезата на болестта на Паркинсон (PD). Централният порообразуващ протеин TOM40 на митохондриите е кодиран от транслоказата на хомоложния ген 40 на външната митохондриална мембрана (TOMM40). Силно вариантното '523' поли-Т повторение е свързано със свързан с възрастта когнитивен спад и възрастта на поява на болестта на Алцхаймер, но дали играе роля в модифицирането на риска или клиничния ход на PD все още не е изяснено. Дължината на алела TOMM40 '523' е определена при 634 души с PD и 422 здрави контроли от австралийска кохорта и кохорта на Инициативата за маркери за прогресия на Паркинсон (PPMI), като се използва полимеразна верижна реакция или анализ на последователността на целия геном. Честотите на генотипа и алелите на TOMM40 '523' и APOE ε не се различават значително между кохортите. Анализите показват, че групите алели TOMM40 '523' не са свързани с риск от заболяване, като се има предвид APOE ε генотип. Регресионните анализи разкриха, че генотипът TOMM40 S/S е свързан със значително по-късна възраст на поява на симптомите в кохортата на PPMI PD, но не и след корекция за ковариати или в австралийската кохорта. Въпреки че вариацията в полиморфизма TOMM40 '523' не е свързана с риска от PD, възможността това да бъде модифициращ фактор за възрастта на поява на симптомите изисква по-нататъшно изследване в други популации от PD.

Щракнете тук, за да знаетеползите от Cistanche

Въведение

Болестта на Паркинсон (PD) е все по-известна като многостранно невродегенеративно разстройство с хетерогенно и обременително представяне и прогресия на симптомите. Анормалното или недостатъчно митохондриално функциониране е широко замесено като ключов процес в селективната невронална смърт и патогенезата на PD. Митохондриалната дисфункция, водеща до загуба на ефективност на електрон-транспортната верига (ETC) или намаляване на капацитета за синтез на АТФ, изглежда предизвиква допаминергична клетъчна смърт чрез няколко механизма, включително генериране на реактивни кислородни видове (ROS), нарушено производство на АТФ и нарушен калций хомеостаза. Основната роля на митохондриалната дисфункция при PD се подкрепя от няколко токсина, причиняващи паркинсонизъм, генетични мутации и вмъквания на ретротранспозони, които конкретно увреждат митохондриалната функция. Прозренията от тези токсини и мутации предполагат, че митохондриалната дисфункция в патогенезата на PD може да възникне от широк спектър от биологични процеси, като биоенергийни смущения, ядрени и митохондриални ДНК мутации, нарушено сливане и делене, дефектна митофагия, анормална морфология и размер. Например, значителна причина за митохондриална дисфункция при PD е инхибирането на митохондриален комплекс I, ETC дефект, който води до тежък оксидативен стрес и ROS- и каспаза-медиирана допаминергична клетъчна смърт. По-специално, последното увреждане е основна патологична характеристика на PD, индуцирана от фамилни PTEN-индуцирани киназа 1 (PINK1), алфа-синуклеин (SNCA) и Daisuke-Junko-1 (DJ-1) генни мутации или токсина 1-метил-4-фенил-1,2,3,6- тетрахидропиридин (MPTP). По този начин се смята, че митохондриалната дисфункция причинява невронален стрес и дегенерация, водеща до това невродегенеративно заболяване, PD.

Транслоказата на гена 40 хомолози на външната митохондриална мембрана (TOMM40) кодира порообразуващата субединица (TOM40) на каналите за транспортиране на протеини във външната мембрана на митохондриите, като по този начин играе основна роля във функционирането на митохондриите. Протеинът TOM40 улеснява вноса на приблизително 1500 външно синтезирани протеини и пептиди в митохондриите и играе ключова роля в пътя на разграждане на митофагията. Смята се, че променен или необичайно функциониращ TOM40, медииран от генетични промени или атипична протеинова експресия, допринася за митохондриална дисфункция и натрупване на протеин при болестта на Алцхаймер (AD) и PD. Това може да се случи чрез различни механизми: (1) увреждане на митохондриалния импорт, което може да попречи на основните протеини и пептиди да достигнат до определените им митохондриални цели или да позволи на нежелани и мутантни протеини да се агрегират в митохондриите; или (2) нарушение на митофагията, което може да позволи натрупването на повредени и неправилно функциониращи митохондрии. Като се имат предвид доказателствата за митохондриална дисфункция при PD, генетичните варианти, засягащи експресията на TOMM40, могат да имат рискови и модифициращи заболяването ефекти.

Сухо цистанчеиCistanche хапчета

Надолу по веригата на TOMM40 е аполипопротеин Е (APOE), който е в област на силно неравновесие на връзката (LD) или неслучайна асоциация, с вариация на TOMM40. Въпреки че степента, до която често срещаните варианти в TOMM40 могат да имат APOE-независими ефекти върху риска от заболяване или ефектите, модифициращи заболяването, остава несигурна, полиморфизмите в TOMM40 са независимо свързани с набор от предимно базирани на когнитивни невродегенеративни заболявания, включително AD, фронтотемпорална деменция, и деменция с телца на Леви, както и непатологично стареене. Един от тези варианти е разположен в интрон 6 на TOMM40 и е хомополимер на повтарящи се тиминови (Т) нуклеотиди, известен като rs10524523 или „523“. Вариантът „523“ е полиморфен, с дължини, които варират от 11 до 39 T остатъци при кавказците. За по-добро категоризиране и описание на този разнообразен структурен вариант, преди това са установени три алелни групи за хомополимера, според броя на съставните Т остатъци: „Къси“ (S, T По-малко или равно на 19), „Дълги“ (L , 20 По-малко или равно на T По-малко или равно на 29) и „Много дълго“ (T По-голямо или равно на 30). Въпреки че функционалните ефекти на вариацията '523' са предимно неизвестни, смята се, че увеличаването на дължината на поли-Т повторението увеличава експресията на TOMM40. Следователно, ефектът от варианта TOMM40 '523' и променените нива на протеин TOM40 може да допринесе за митохондриална дисфункция при PD. Въпреки че огромен брой публикувани проучвания съобщават за противоречиви роли на различните дължини на вариантите TOMM40 '523' при AD и застаряващите популации, има само две предишни проучвания в рамките на кохортите на PD с различни констатации. Първото беше проучване на сравнително голяма кохорта от полски PD, което не откри значителни връзки между TOMM40 '523' и риска от PD или възрастта на началото. Впоследствие беше докладвано значително свръхпредставяне на генотипа L/VL '523' в шведска PD кохорта в сравнение със здрави контроли, въпреки че трябва да се отбележи, че тези открития все още не са публикувани изцяло. По този начин, с противоречиви констатации в тези две европейски кохорти, е необходимо допълнително изследване в други популации.

Поради съществената роля на TOMM40 в митохондриалния импорт и митофагията, и двата правдоподобни източника на PD, причиняващи митохондриална дисфункция, вариантът „523“ в TOMM40 следователно е потенциален рисков фактор и модификатор на заболяването при PD. Това проучване изследва разпределението на алелите „523“ и тяхната връзка с риска от заболяване и възрастта на поява на симптомите в две независими кохорти на PD, една австралийска и една международна (Инициативата за маркери за прогресия на Паркинсон, PPMI), използвайки базирано на PCR и секвениране на целия геном подходи.

Дискусия

Настоящото проучване имаше за цел да изследва структурния вариант TOMM40 '523' като потенциален рисков фактор за PD и модификатор на възрастта при поява на симптомите. Разпределението на '523' поли-Т алели не варира между PwP и здрави контроли, или в двете изследвани независими кохорти. Заслужава да се отбележи сходството в алелното разпределение на „523“ между PPMI и австралийските кохорти, тъй като това проучване използва два различни подхода при извикването на варианта TOMM40 „523“, установявайки базиран на PCR и базиран на WGS анализ за използване в Австралийски и PPMI кохорти, съответно. Разработването на анализа за варианта TOMM40 '523' обикновено се счита за трудно, тъй като поли-Т вариантите са предизвикателство за секвениране. Въпреки оптимизацията в рамките на това проучване, PCR заекването се наблюдава в PCR-базиран анализ, подобен на предишни доклади, което е стандартно усложнение при усилване на повтарящи се геномни последователности и подчертава необходимостта от по-нататъшно оптимизиране на анализа. За сравнение, извикването от WGS файлове разкри подобно разпределение, както беше съобщено по-рано. Въпреки че беше представено като имащо по-малко предизвикателства при оптимизиране и последователност, извикването на варианти „523“ беше труден процес и гореспоменатото проучване заяви, че корелацията между извикването на „523“ от WGS и базираните на PCR методи намалява с увеличаване на размера на алелът „523“.

Cistanche tubulosa

След това настоящото проучване изследва дали вариантът TOMM40 '523' е замесен в риска от PD и не открива връзка между носителството на алелни варианти и риска от развитие на PD. Когато са групирани, генотипните и алелните честоти изглеждат подобни между контролите и PwP в двете независими кохорти и когато кохортите са комбинирани. Това е в съгласие с предишна работа в полска кохорта от PD, която не показва връзка между алели, генотипове или хаплотипове „523“ с риска от PD или възрастта на поява на симптомите. За разлика от това, в шведска популация, по-висока честота на L/VL генотипа е наблюдавана при пациенти с PD в сравнение с контролите, въпреки че тези открития все още не са публикувани изцяло. Като се има предвид, че тези проучвания са проведени в различни етнически групи и че честотите на алелите "523" са етнически специфични, противоречивите констатации в проучванията до момента могат да показват, че "523" е рисков фактор в някои популации, но не и в други. Тъй като това е едва третото проучване за изследване на ролята на TOMM40 '523' в риска от PD, трябва да се извършат допълнителни проучвания в други етнически разнообразни популации.

Тъй като се смята, че участието на митохондриите в PD е ключов фактор за невронална дисфункция и дегенерация, е правдоподобно генетичен вариант, който модулира митохондриалната функция, да промени възрастта на поява на симптомите. Освен това AD и PD споделят няколко клинични, патологични и молекулярни характеристики, включително натрупване на токсичен протеин и митохондриална дисфункция под формата на дефекти на дихателната верига, оксидативен стрес, увреждане на митохондриалната ДНК и морфологични аномалии. Предишни проучвания показват, че дължината на TOMM40 '523' във възрастта на поява на AD, особено при носители на алела APOE ε3, но съществуват смесени констатации. Например, въпреки че Roses et al. съобщават, че по-дългите дължини на алел „523“ са свързани с риска от AD и по-ранна възраст на начало, първоначалните констатации не са възпроизведени в други популации. Такива различни констатации могат да бъдат резултат от различни методологии и различни съображения за влиянието на APOE ε локуса, който е добре установен като най-силният генетичен предиктор на AD. Повечето проучвания досега не съобщават за връзка между вариацията на APOE ε с чувствителността към PD, какъвто беше и случаят в настоящото проучване. Докато настоящите констатации не показват никакви положителни доказателства за интерактивни ефекти между TOMM40 '523' и APOE ε генотипове относно риска от PD, те предполагат, че двата локуса могат да имат малки независими и противоположни ефекти върху определянето на възрастта на поява на симптомите. Докато първоначалните регресионни анализи в кохортата на PPMI показаха, че възрастта на началото е значително забавена от носителството на генотипа S/S '523', това не беше възпроизведено след корекция за ковариати или в австралийската кохорта. Тази разлика обаче може да бъде причинена от специфичен за страната или географския регион ефект, както се вижда от други генетични изследвания. Струва си да се отбележи, че само едно предишно проучване е изследвало тази връзка, въпреки че не е ясно дали това проучване е завършило строг анализ на интерактивните ефекти на TOMM40 и APOE, както беше проведено в настоящото проучване. Като такъв е необходим допълнителен задълбочен анализ в по-големи кохорти на PD, за да се определи значимостта на настоящите констатации.

Понастоящем функционалните ефекти от вариацията в дължината на алела „523“ са слабо разбрани поради недостига на изследвания в тази област. Докато няколко проучвания предполагат, че VL алелът увеличава TOMM40 mRNA експресията и S алелът потиска експресията, други не са открили значителни разлики в нивата на mRNA между S и VL вариантите. Скорошно проучване показа, че свръхекспресията на TOMM40 in vitro е свързана с по-големи потенциали на митохондриалната мембрана, честота на дишане, свободен респираторен капацитет, нива на АТФ, амилоид-бета резистентност и усвояване на протеини. От друга страна, друго проучване наблюдава корелация между дефицита на протеин TOM40 и повишения оксидативен стрес, намаленото производство на АТФ и анормалните концентрации на протеин комплекс I в мозъците на пациенти с PD и миши модели, свръхекспресиращи алфа-синуклеин. Както е в литературата понастоящем, е необходимо по-нататъшно изясняване на биологичните последици от регулираната нагоре или надолу експресия на TOMM40, за да се даде представа за неговата потенциална роля в риска от PD и модификацията на заболяването.

Ефектите на Cistanche

Заключение

Като цяло, това проучване имаше за цел да проучи риска и модифициращата болестта роля на варианта TOMM40 '523' в две независими кохорти на PD. TOMM40 играе съществена роля в митохондриалния внос и митофагията, а полиморфизмът „523“ е свързан с възрастта на поява на AD и с когнитивен спад, свързан с възрастта. Въпреки че това проучване изяснява, че TOMM40 '523' сам по себе си не е предиктор за риска от PD, то повдига възможността, както при AD, да е генетичен маркер за възрастта на поява на симптомите при PD. Въпреки че не са убедителни, нашите открития в голямата международна кохорта PPMI предполагат, че носителството на генотипа S/S '523' може да бъде защитно по отношение на забавяне на възрастта на поява на симптомите и може да изисква по-нататъшно изследване в други популации. Важно е, че ефектът от съвместното носителство на алела APOE ε4, който изглежда има противоположен ефект върху възрастта на начало, трябва да се вземе предвид в бъдещи проучвания. Въпреки че не са значими за модулиране на риска от PD, бъдещите проучвания трябва да разгледат възможната роля на TOMM40 '523' като определящ фактор за възрастта на поява на симптомите и траекторията на симптомите. Като се има предвид, че наскоро беше проведено фаза 3 клинично изпитване на терапевтично средство за превенция и забавяне на появата на AD, включващо участници, стратифицирани по TOMM40 '523'46, констатациите, докладвани тук, са забележителни и могат да позволят проектирането на проучвания, фокусирани върху симптомите при PD за така необходимите подобрения в резултатите и грижите за пациентите.

Препратки

1. Moon, HE & Paek, SH Митохондриална дисфункция при болестта на Паркинсон. Exp. Neurobiol. 24, 103 (2015).

2. Nicolson, GL Митохондриална дисфункция и хронично заболяване: Лечение с естествени добавки. Интегрирайте Med. 13, 35–43 (2014).

3. Zhu, J. & Chu, CT Митохондриална дисфункция при болестта на Паркинсон. J. Алцхаймер Dis. 20, 1 (2010).

4. Larsen, PA et al. Хипотезата за невродегенерация на Alu: специфичен за примати механизъм за невронален транскрипционен шум, митохондриална дисфункция и проява на невродегенеративно заболяване. Алцхаймер и деменция 13, 828–838 (2017).

5. Bose, A. & Beal, MF Митохондриална дисфункция при болестта на Паркинсон. J. Neurochem. 139 (Допълнение 1), 216–231 (2016).

6. Humphries, AD et al. Дисекция на митохондриалния път на внос и сглобяване за човешки Tom40. J. Biol. Chem. 280, 11535–11543 (2005).

7. Bertolin, G. et al. Машината TOMM е молекулярен превключвател в PINK1 и PARK2/PARKIN-зависим митохондриален клирънс. Автофагия 9, 1801–1817 (2013).

8. Heinemeyer, T., Stemmet, M., Bardien, S. & Neethling, A. Недооценени роли на транслоказата на външните и вътрешните митохондриални мембранни протеинови комплекси при човешки заболявания. DNA Cell Biol. 38, 23–40 (2019).

9. Roses, AD et al. Полиморфизъм с променлива дължина на TOMM40 предсказва възрастта на късното начало на болестта на Алцхаймер. Фармакогеномика J 10, 375–384 (2010).

10. Roses, A. Наследен променлив поли-Т повторен генотип в TOMM40 при болестта на Алцхаймер. Арх. Neurol 67, 536–541 (2010).

11. Guerreiro, RJ & Hardy, J. TOMM40 Асоциация с болестта на Алцхаймер: истории за APOE и неравновесие на връзката. Арх. неврол. 69, 1243–1244 (2012).

12. Chiba-Falek, O., Gottschalk, WK & Lutz, MW Te ефекти на поли-T алелите TOMM40 върху фенотипове на болестта на Алцхаймер HHS публичен достъп. Демент на Алцхаймер 14, 692–698 (2018).

13. Roses, A. et al. TOMM40 и APOE: Изисквания за репликационни проучвания за връзка с възрастта на поява на заболяването и обогатяване на клинично изпитване. Демент на Алцхаймер. 9, 132–136 (2013).

14. Li, G. et al. TOMM40 интрон 6 поли-Т дължина, възраст при начало и невропатология на AD при индивиди с APOE ε3/ε3. Алцхаймер. демент. 9, 554–561 (2013).

15. Sabbagh, MN, Pope, E., Cordes, L., Shi, J. & DeCourt, B. Терапевтични съображения за APOE и TOMM40 при болестта на Алцхаймер: почит към Allen Roses MD. Експертно мнение. разследване. Лекарства 30, 39–44 (2021).

16. Zeitlow, K. et al. Биологичната основа на генетичната асоциация на TOMM40 с късното начало на болестта на Алцхаймер. Biochim. Biophys. Acta Mol. Основа Dis. 1863, 2973–2986 (2017).

17. Lutz, MW, Crenshaw, DG, Saunders, AM & Roses, AD Генетична вариация в един локус и възраст на поява на болестта на Алцхаймер. Алцхаймер. демент. 6, 125–131 (2010).

18. Linnertz, C. et al. Характеризиране на поли-Т варианта в гена TOMM40 в различни популации. PLoS ONE 7, e30994 (2012).

19. Linnertz, C. et al. Цис-регулаторният ефект на свързан с болестта на Алцхаймер поли-Т локус върху експресията на гени TOMM40 и аполипопротеин Е. Алцхаймер. демент. 10, 541–551 (2014).

20. Payton, A. et al. Поли-Т вариант на TOMM40 модулира генната експресия и е свързан с речниковия запас и намаляването на непатологичното стареене. Neurobiol. Стареене 39(217), e1-217.e7 (2016).

21. Bender, A. et al. TOM40 медиира митохондриална дисфункция, предизвикана от натрупване на -синуклеин при болестта на Паркинсон. PLoS ONE 8, e62277 (2013).

22. Cruchaga, C. et al. Анализи на асоцииране и експресия с еднонуклеотидни полиморфизми в TOMM40 при болестта на Алцхаймер. Арх. неврол. 68, 1013–1019 (2011).

23. Hayden, KM et al. Хомополимерният полиморфизъм в гена TOMM40 допринася за когнитивното представяне при стареене. Алц Хелмърс. демент. 8, 381–388 (2012).

24. Ю, Л. и др. APOE ε4-TOMM40 '523 хаплотипове и рискът от болестта на Алцхаймер при по-възрастните кавказки и афро-американци. PLoS ONE 12, e0180356 (2017).

25. Johnson, SC et al. Ефектът на поли-Т дължината на TOMM40 върху обема на сивото вещество и познанието при хора на средна възраст с APOE ε3/ε3 генотип. Демент на Алцхаймер. 7, 456–465 (2011).

26. Burggren, AC и др. Изтъняването на хипокампа е свързано с по-дълги дължини на TOMM40 поли-Т варианта в отсъствието на варианта APOE ε4. Демент на Алцхаймер. 13, 739–748 (2017).

27. Пеплонска, Б. и др. Общите генетични варианти на TOMM40 и APOE не са рискови фактори за болестта на Паркинсон. Neurobiol. Стареене 34 (2078), e1-2078.e2 (2013).

28. Lafta-Mesa, J., Brodin, L. & Svenningsson, P. Нуклеотидни повторения като генетични рискови фактори в шведска кохорта на болестта на Паркинсон. пн. Разстройство. 33, S14–S117 (2018).

29. Gorecki, AM и др. Единични нуклеотидни полиморфизми, свързани с чревната хомеостаза, влияят върху риска и възрастта при поява на болестта на Паркинсон. Отпред. Стареене на неврологията. 12, 603849 (2020).

30. Hughes, AJ, Daniel, SE, Kilford, L. & Lees, AJ Точност на клиничната диагноза на идиопатична болест на Паркинсон: клинично патологично изследване на 100 случая. J Neurol Neurosurg Psychiatry 55, 181–184 (1992).

31. Li, H. & Durbin, R. Бързо и точно подравняване на кратко четене с трансформация на Burrows-Wheeler. Биоинформатика 25, 1754–1760 (2009).

32. Robinson, JT et al. Интегративен преглед на геномиката. Нац. Биотехнология. 29, 24–26 (2011).

33. Bussies, PL et al. Използване на местно генетично потекло за оценка на TOMM40–523′ и риск от болестта на Алцхаймер. неврол. Женет. 6, 1 (2020).

34. Saunders, A. et al. Специфичност, чувствителност и предсказуема стойност на аполипопротеин-Е генотипизиране за спорадична болест на Алцхаймер. Lancet 348, 90–93 (1996).

35. Oh, MJ, Chung, EK, Shin, YM, Lee, KO & Park, YS Генотипизирането на аполипопротеин Е с помощта на PCR-RFLP беше полезно за анализ на връзките на семейства с болестта на Алцхаймер. Exp. Mol. Med. 29, 161–164 (1997).

36. Inzelberg, R. et al. Връзка между амантадин и появата на деменция при болестта на Паркинсон. пн. Разстройство. 21, 1375–1379 (2006).

37. Papadimitriou, D. et al. Моторни и немоторни характеристики на носители на p.A53T алфа-синуклеинова мутация: надлъжно изследване. пн. Разстройство. 31, 1226–1230 (2016).

38. Ganguly, G., Chakrabarti, S., Chatterjee, U. & Saso, L. Протеинопатия, оксидативен стрес и митохондриална дисфункция: кръстосани разговори при болестта на Алцхаймер и болестта на Паркинсон. Drug Des. Разв. тер. 11, 797–810 (2017).

39. Su, B. et al. Анормална митохондриална динамика и невродегенеративни заболявания. Biochim. Biophys. Acta 1802, 135–142 (2010).

40. Jun, G. et al. Цялостно търсене на локуси на чувствителност към болестта на Алцхаймер в региона на APOE. Арх. неврол. 69, 1270–1279 (2012).

41. Federof, M., Jimenez-Rolando, B., Nalls, MA & Singleton, AB Голямо проучване не разкрива връзка между APOE и болестта на Par kinson. Neurobiol. дис. 46, 389–392 (2012).

42. Vefring, H., Haugarvoll, K., Tysnes, OB, Larsen, JP & Kurz, MW Ролята на APOE алелите при възникване на болестта на Паркинсон. Норвежкото проучване на ParkWest. Acta Neurol. Сканиране. 122, 438–441 (2010).

43. van Doormaal, PTC et al. Анализ на гена KIFAP3 при амиотрофична латерална склероза: многоцентрово проучване за оцеляване. Neurobiol. Стареене 35 (2420), e13-2420.e14 (2014).

44. Bekris, LM, Lutz, F. & Yu, C.-E. Функционалният анализ на генетичната вариация на APOE локус включва регионални подобрители в регулирането както на TOMM40, така и на APOE. J. Hum. Женет. 57, 18–25 (2012).

45. Хедског, Л. и др. Биохимични изследвания на Poly-T варианти в TOMM40 гена, свързан с болестта на Алцхаймер. J. Алцхаймер Dis. 31, 527–536 (2012).

46. ​​Бърнс, ДК и др. Проучването TOMORROW: Дизайн на клинично изпитване на болестта на Алцхаймер със забавено начало. Демент на Алцхаймер 5, 661–670 (2019).

Megan C. Bakeberg 1,2, Madison E. Hoes 1, Anastazja M.Gorecki 1,3, Frances Theunissen 1,4, Abigail L. Pfaf 1,4, Jade E. Kenna 1,2, Kai Plunkett 1, Sulev Kõks 1 ,4, P.AnthonyAkkari 1,2,4, Frank L. Mastaglia 1,2,4 & Ryan S.Anderton 1,2,5.

1. Perron Institute for Neurological and Translational Science, Nedlands, WA, Австралия.

2. Център за невромускулни и неврологични разстройства, Университет на Западна Австралия, Недландс, Вашингтон, Австралия.

3. Училище по биологични науки, Университет на Западна Австралия, Кроули, Вашингтон, Австралия.

4. Центърът за молекулярна медицина и иновативна терапия, Университет Мърдок, Мърдок, Вашингтон, Австралия.

5. Институт за здравни изследвания и училище по здравни науки, Университет на Нотр Дам Австралия, 19 Mouat Street, Fremantle, WA 6959, Австралия.