Базирани на пола разлики в плазмените автоантитела към протеините на централната нервна система при ветерани от войната в Персийския залив спрямо здрави и симптоматични контроли

Контакт: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Имейл:audrey.hu@wecistanche.com

Mohamed B. Abou-Donia 1,*, Maxine H. Krengel 2, Elizabeth S. Lapadula 1, Clara G. Zundel 2, Jessica LeClair 3, Joseph Massaro 3, Emily Quinn 3, Lisa A. Conboy 4, Efi Kokkotou 4, Даниел Д. Нгуен 5, Мария Абреу 6,7, Нанси Г. Климас 6,7 и Кимбърли Съливан 5,*

1 Катедра по фармакология и биология на рака, Медицински център на Университета Дюк, Дърам, NC 27710, САЩ;

2 Катедра по неврология, Факултет по медицина на Бостънския университет, Бостън, MA 02118, САЩ;

3 Катедра по биостатистика, Училище по обществено здраве на Бостънския университет, Бостън, Масачузетс 02118, САЩ;

4 Катедра по медицина, Харвардско медицинско училище, Бостън, Масачузетс 02115, САЩ;

5 Катедра по здравеопазване на околната среда, Училище по обществено здраве на Бостънския университет, Бостън, Масачузетс 02118, САЩ;

6 Д-р Kiran C. Patel College of Osteopathic Medicine, Institute for Neuroimmune Medicine, Nova Southeastern University, Fort Lauderdale, FL 33314, САЩ;

7 Отдел по имунология, Медицински център Маями VA, Маями, Флорида 33125, САЩ

Резюме:

Ветераните от войната в Персийския залив (GW) през 1991 г. страдат от болестта на войната в Персийския залив (GWI) в продължение на почти 30 години. Това заболяване обхваща множество системи на тялото, включително централната нервна система (ЦНС). Диагнозата и лечението на GWI е трудно, тъй като няма обективен диагностичен биомаркер. Наскоро докладвахме за новоразработен кръвен биомаркер, който разграничава GWI от GW здрави контроли и симптоматични контроли със синдром на раздразнените черва (IBS) и миалгичен енцефаломиелит/синдром на хроничната умора (ME/CFS). Настоящото проучване е предназначено да сравни нивата на тези биомаркери между мъже и жени с GWI, както и специфични за пола ефекти в сравнение със здрави ветерани от GW и симптоматични контроли (IBS, ME/CFS). Резултатите показват, че мъжете и жените с GWI се различават по 2 от 10 плазмени автоантитела, като мъжете показват значително повишени нива. Мъжете и жените с GWI показват значително различни нива на автоантитела в 8 от 10 биомаркера към невронни и глиални протеини в плазмата спрямо контролите. В обобщение, настоящото проучване разглежда ползата от използването на плазмени автоантитела за CNS протеини за разграничаване между мъжете и жените ветерани с GWI и други здрави и симптоматични контролни групи.

Ключови думи: автоантитела на ЦНС; болест от войната в Персийския залив; пол; биомаркери; протеини; миалгичен енцефаломиелит/синдром на хроничната умора; синдром на раздразнените черва

екстракт от Cistanche tubulosa

1. Въведение

Ветераните от войната в Персийския залив (GW) са страдали от състояние, известно като болест от войната в Персийския залив (GWI), което обхваща множество телесни системи, включително централната нервна система (ЦНС) [1–3]. Това хронично състояние засяга приблизително 250,000 ветерани от GW, включително голяма част от 40,000 жени, разгърнати във войната. GWI има припокриващи се, но различни симптоми от други заболявания, които също засягат жените, включително миалгичен енцефаломиелит/синдром на хроничната умора (ME/CFS) и синдром на раздразнените черва (IBS). Липсата на обективни диагностични маркери сведе до минимум способността за сплотено диагностициране и лечение на множеството симптоми на GWI. Наскоро оценихме кандидат плазмен биомаркер за GWI и показахме разлики в индивидите, които отговарят на критериите за GWI спрямо GW здрави и не-ветерани контроли с IBS и CFS. Като се имат предвид различните симптоми на GWI, наблюдавани между мъжете и жените, следващата ни цел беше да оценим възможните разлики в тези плазмени биомаркери между половете [4–8]. Определянето дали автоантителата на ЦНС се различават между мъжете и жените с GWI и техните съответни контроли ще помогне за по-нататъшното усъвършенстване на диагностичната полезност на тях като плазмени биомаркери. Жените, които са служили в GW през 1991 г., съобщават за множество здравословни проблеми, много от които са свързани с пола. Някои проучвания предполагат повишени нива на здравословни проблеми на жените и инфекции на пикочния мехур в сравнение с контролите на ветерани от ерата на GW [9]. Във Ft. Установено е, че Devens Cohort (FDC) на ветерани от GW, GW жени в сравнение с контролите без ветерани имат по-висок риск от диабет, но по-нисък риск от хипертония в сравнение с Националното изследване на здравето и храненето (NHANES) възраст и пол- съответстваща кохорта [8].

За разлика от тях, мъжете, използващи GW, съобщават за повишени нива на седем хронични здравословни състояния в сравнение с мъжете NHANES, включително значително по-високи шансове за съобщаване на хипертония, висок холестерол, инфаркт, диабет, инсулт, артрит и хроничен бронхит [8]. Тъй като това проучване показа, че мъжете с GW са изложени на повишен риск от медицински състояния, които са известни рискови фактори за по-късно сърдечно-съдови и мозъчно-съдови заболявания (т.е. хипертония, висок холестерол, диабет), мъжете с GW могат да покажат повишени нива на биомаркери на ЦНС в сравнение с техните жени ветерани двойници. Въпреки това, в едно скорошно проучване, използващо голямата кохорта от биохранилища от епохата на GW (GWEBC), жените, използващи GW, са значително по-склонни да съобщават за симптоми, свързани с когнитивни, неврологични проблеми и проблеми с настроението, отколкото жените от ерата на GW [4]. Следователно жените GW могат също да показват повишени биомаркери, свързани с ЦНС, в сравнение с други кохорти жени. Освен това, когато се сравняват разгърнати мъже ветерани от GW срещу жени, е установено, че жените ветерани от GW използват повече амбулаторни и болнични здравни грижи 5 години след разполагането [10]. Установено е също, че жените с GW имат по-висок процент на тежки и умерени случаи на GWI в сравнение с техните колеги мъже [5,11–13]. Няколко фактора могат да обяснят наблюдаваните полови разлики в GWI и индивидуалните симптоми, включително полови разлики в чувствителността към експозиции на невротоксични вещества в театъра и/или по-високи експозиции сред мъжкия персонал. Още през 1996 г. спекулирахме, че химическите експозиции по време на GW са утаяващ фактор в GWI [14,15].

ефекти отекстракт от Cistanche tubulosa

Ние демонстрирахме в експериментални проучвания, че комбинираното излагане на пестициди и пиридостигмин бромид (PB) причинява невротоксични ефекти, които пречат на функцията на невроните и глиалните клетки, което води до дълготрайни и потенциално невродегенеративни ефекти [14–16]. Невродегенерацията включва смърт на невронни и глиални клетки и освобождаване на тяхното съдържание в кръвообращението през нарушената кръвно-мозъчна бариера (BBB), което след това може да бъде открито чрез автоантитела на ЦНС в плазмата [17]. По-рано показахме промени в BBB в нашите животински модели на експозиции на GWI [18]. По-рано също показахме, че тези плазмени маркери могат да бъдат открити в ниски нива при индивиди без значително заболяване, но се увеличават при тези с повече симптоматика [16,19]. ЦНС има два вида клетки: неврони и поддържащи глиални клетки. Невронните клетки съдържат няколко цитоскелетни протеини, включително тау и неврофиламенти [20,21]. Заедно с микротубулите, направени от тубулин, те образуват гръбнака на аксоналния цитоскелет. Тези протеини участват в аксоналния транспорт на основни хранителни вещества, аминокиселини и органели надолу по аксона [22]. Свързаните с микротубулите протеини (MAP) -2 и тау насърчават полимеризацията и стабилизирането на микротубулите в аксоните, кръстосаните мостови неврофиламенти и микротубулите, които се свързват един с друг; това помага да се поддържа цитоскелета за аксонален транспорт [23]. Тау протеините са локализирани предимно в аксона на невронните клетки. Поддържащите глиални клетки, олигодендроцитите в ЦНС и клетките на Шван в периферната нервна система (PNS), произвеждат миелинов основен протеин (MBP) и миелин-свързан гликопротеин (MAG), които са мембранни протеолипиди [24]. Глиалните астроцитни протеини продуцират глиален фибриларен киселинен протеин (GFAP), компонент на цитоскелета на астроглията, който е силно специфичен за ЦНС и се освобождава от астроцита в извънклетъчното пространство след увреждане на ЦНС [25]. Калций-свързващият S100B протеин също се освобождава от астроцитни глиални клетки (Фигура 1).

Много от тези невронни цитоскелетни и особено глиални протеини се намират само в ЦНС и техните автоантитела се откриват в периферната кръв, ако тези протеини в даден момент са изтекли през BBB и имунната система монтира отговор на автоантитела към тях [18,26] . Времевият ход на това нарушение на BBB може да се е случило някога в миналото при тези индивиди, което е довело до изтичане на тези протеини от неврони и/или глия. Така че, въпреки че S100B, маркер за текущ компромис с BBB, не се различава в нашето предишно проучване при ветерани с GWI, това не означава, че нарушение на BBB не е настъпило някъде в миналото, причиняващо трайни откриваеми автоантитела към тези CNS протеини в кръвта . Brain Sci. 2020, 10, x ЗА РЕЦЕНЗИЯ 3 от 16, който е силно специфичен за ЦНС и се освобождава от астроцита в извънклетъчното пространство след увреждане на ЦНС [25]. Калций-свързващият S100B протеин също се освобождава от астроцитни глиални клетки (Фигура 1). Много от тези невронни цитоскелетни и особено глиални протеини се намират само в ЦНС и техните автоантитела се откриват в периферната кръв, ако тези протеини в даден момент са изтекли през BBB и имунната система монтира отговор на автоантитела към тях [18,26] . Времевият ход на това нарушение на BBB може да се е случило някога в миналото при тези индивиди, което е довело до изтичане на тези протеини от неврони и/или глия. Така че, въпреки че S100B, маркер за текущ компромис с BBB, не се различава в нашето предишно проучване при ветерани с GWI, това не означава, че нарушение на BBB не е настъпило някъде в миналото, причиняващо трайни откриваеми автоантитела към тези CNS протеини в кръвта .

Настоящото проучване изследва ефектите на пола върху наличието на циркулиращи автоантитела от клас имуноглобулин G (IgG) срещу специфични за ЦНС невронални и глиални протеини в плазмата на ветерани от GW с и без GWI, както и при симптоматични контроли без ветерани (IBS, и ME/CFS). По-конкретно, предположихме, че мъжете и жените ветерани с GWI ще се различават един от друг по отношение на разпределението на протеини на автоантитела на ЦНС и че мъжете и жените на GW ще имат по-високи нива на протеини на автоантитела на ЦНС, отколкото други симптоматични групи с хронични заболявания, включително IBS и ME/CFS . Поради експозиция по време на войната, всички ветерани от GW биха могли да имат някакво ниво на компромис с BBB, както се вижда от автоантитела на ЦНС в плазмата, но ние предположихме, че тези с GWI ще имат по-високи нива на тези кръвни маркери

2. Материали и методи

2.1. Проучване на населението

Методите са същите като нашето наскоро публикувано проучване [19]. Накратко, плазмата от ветерани от GW беше предоставена от Консорциума за изследване на заболяванията от войната в Персийския залив (GWIC), проучването за динамично моделиране на GWI от Nova Southeastern University, проучване, финансирано от Програмата за медицински изследвания, насочена към Конгреса (CDMRP), до Фондацията за изследвания на ветераните в Южна Флорида и Education, Inc., изпитването за лечение с акупунктура и биохранилище за изследване на раздразнените черва в Харвард/BIDMC. Одобрението на институционалния съвет за преглед (IRB) беше получено от Бостънския университет, Нова Югоизточния университет, Маями VAMC и Харвардския университет. Същите стандартни оперативни процедури бяха използвани за всяко място на изследване за флеботомия, разделяне на плазмата и аликвотиране. Плазмените проби бяха получени от пациенти на гладно и съхранени при -80 ◦C. Те останаха замразени до анализите. Участниците се съгласиха на съответните си проучвания, използвайки насоките на Международната конференция за хармонизиране на добрата клинична практика (ICH GCP). Канзаските GWI критерии бяха използвани за определяне на случаи на GWI и контроли [27]. Критериите за GWI в Канзас изискват ветераните от GW да подкрепят симптоми в поне 3 от 6 области на симптоми (умора, болка, когнитивни/неврологични/настроение, стомашно-чревни, респираторни и кожа). Контролът на ветераните включваше разположени ветерани от GW 1991, които не отговаряха на GWI на Канзас или на критериите за изключване. Критериите за изключване на GWI в Канзас изключват лица, които съобщават, че са диагностицирани с друго медицинско състояние, което би могло да обясни техните хронични медицински симптоми, включително ветерани с анамнеза за централна нервна система или големи психиатрични разстройства, които могат да повлияят на когнитивната функция (напр. епилепсия, инсулт, мозък тумор, множествена склероза, болест на Паркинсон, болест на Алцхаймер, шизофрения). Плазмени проби от симптоматични контроли идват от предишни проучвания на индивиди с ME/CFS и IBS [28,29]. Случаите на ME/CFS са определени чрез използване на критериите на Центъра за контрол и превенция на заболяванията (CDC) от 1994 г. [28]. Участниците в IBS отговарят на критериите на Рим III [29]. Пълните кохорти са описани в предишни статии (GWIC, CFS, IBS, GWIC подпроба [16,30–33]).

2.2. Материали

Източниците на протеин също са описани по-рано [19]: Тубулин (човешки рекомбинантен, Prospec Cat. # PRO-982), микротубулно-свързан протеин 2 (MAP-2, човешки рекомбинантен, Origene, Cat. # TP316775, човешки рекомбинантен), Tau-381 (човешки рекомбинантен, Millipore Cat. #AG952), неврофиламентен протеин (NFP, Prospec, Cat #PRO-523), калмодулин киназа II (човешки рекомбинантен, CaMKII, Novus Биологични вещества, Cat #H000000H15-P01), алфасинуклеин (човешки рекомбинантен, AnaSpec Cat. #AS-55555), миелинов основен протеин (MBP, човешки, Fitzgerald Cat. #30R- AM030), асоцииран с миелин гликопротеин (MAG, човешки рекомбинантен, Sinobiological Cat. 131-86 H02H), глиален фибриларен киселинен протеин (GFAP, човешки, CalBiochem Cat. #345996), S100B протеин (човешки, Millipore Cat. #30R -AS002). Кози античовешки IgG, конюгиран с пероксидаза от хрян и подобреният хемилуминесцентен реагент беше получен от Amersham Pharmacia Biotech (Piscataway, NJ, USA). Натриев додецил сулфат (SDS) гелове, 2–20 процента градиент (8 × 8) и 15 тМ трис-глицин бяха получени от Invitrogen (Карлсбад, Калифорния, САЩ). Всички останали материали са закупени от Amersham.

полза от екстракта от Cistanche tubulosa

2.3. Етична декларация

Одобрение за използването на съхранени кръвни проби от всички места за изследване за това проучване е получено от институционалния прегледен съвет за клинични изследвания на здравната система на университета Дюк на 9.10.2017 г. и от институционалния прегледен съвет на медицинския кампус на Бостънския университет на 19.01. 2018 г. Специфичните компоненти на протокола за университета Дюк бяха: Протокол ID: Pro00003202, Референтен номер: 335940, Главен изследовател: Мохамед Абу Дония, Заглавие на протокола: „Нараняване на нервната система“. Специфичните компоненти на протокола за Бостънския университет бяха Протокол ID: H-34334, Референтен номер: 1288716, Главен изследовател: Кимбърли Съливан, Заглавие на протокола: „Нов серум за автоантитела и биомаркери на цереброспиналната течност при ветерани с болест от войната в Персийския залив.“ Плазмени проби бяха споделени от одобрени от IRB хранилища от проучвания в Бостънския университет (IRB # H-32768), Югоизточния университет NOVA/Медицински център Маями VA (IRB # 4987.76 и IRB # 4987.75), болница Бет Израел/Харвардския университет ( IRB # 2011P-000124) и Училището по акупунктура в Нова Англия (IRB # 09-204).

2.4. Процедури

2.4.1. Плазмени процедури

Всички места следват един и същ протокол: за венепункция, обработка на кръвта, разделяне на плазмата, аликвотиране и съхранение при -80 ◦C. Същият протокол за флеботомия и проба бяха разпространени в писмен вид на всички места и включваха гладуване преди вземане на кръв сутрин. Всички анализирани проби са базови кръвни проби, събрани преди интервенционната терапия. Пробите, използвани в това изследване, не са били предварително размразени и са били без хемолиза чрез визуална проверка.

2.4.2. Western blot анализ

В това проучване беше използван Western blot анализ за определяне на автоантитела срещу специфични протеини в плазмената проба на случаи на GWI и здрави и симптоматични контроли по пол. Този анализ позволява определянето на автоантителата и свързаните изоформи на антигена. Както беше описано по-горе, всяка плазмена проба беше анализирана в три екземпляра [19]. Всички протеини бяха заредени при 10 ng/лента с изключение на IgG, който беше зареден като 100 ng/лента. Протеините бяха денатурирани и подложени на електрофореза върху SDS-PAGE (градиент 4 процента до 20 процента), закупен от Invitrogen (Карлсбад, Калифорния, САЩ). Един гел се използва за всяка серумна проба. Протеините бяха прехвърлени към мембрани от поливинилиден флуорид (PVDF) (Amersham). Неспецифичните места на свързване бяха блокирани с Tris-буфериран SalineTween (TBST) (40 mM Tris (pH 7.6), 300 mM NaCl и 0.1 процента Tween 20), съдържащ 5 процента обезмаслено мляко на прах за 1 час при 22 ◦C. Мембраните се инкубират със серумни проби при 1:100 разреждания в TBST с 3% обезмаслено мляко на прах за една нощ при 4 ◦C. След пет промивания в TBST, мембраните се инкубират с 1:2000 разреждане на кози античовешки IgG, конюгиран с пероксидаза от хрян (Amersham). Мембраните са разработени чрез подобрена хемилуминесценция, използвайки протокола на производителя (Amersham) и записващо устройство за променлив модел Typhoon 8600 (GE Lifesciences, Marlborough, MA, USA). Интензитетът на сигнала беше количествено определен с помощта на софтуера за анализ на изображения Bio-Rad версия 4.5 (Херкулес, Калифорния, САЩ). Всички тестове бяха проведени, като изследователите бяха заслепени за контрола на случаите и статуса на пола на пробите.

2.4.3. Специфичност на плазмените автоантитела

Преди това проверихме специфичността на плазмата и серумното автоантитело чрез извършване на тест за конкуренция пептид/антиген, при който серумът и плазмата бяха добавени с целевия протеин или пептид [34]. Серумът от произволни здрави контроли се смесва със или без тау, MAP2 или MBP. Протеиновата смес се центрофугира при 15,000 rpm, за да се изчерпят всякакви имунни комплекси. След това супернатантите бяха внимателно отстранени и използвани в Western blotting. Спецификите на автоантителата срещу всички тествани протеини бяха потвърдени в последващо проучване [35].

2.5. Статистика

Обединените данни са представени като средна стойност ± SD за непрекъснати променливи и брой и процент на участниците във всяка категория за категориални променливи. Демографските стойности на субектите бяха сравнени с контролните групи, като се използва непрекъснат t-тест на Students и хи-квадрат за категорични променливи. Средните стойности на автоантитела на мъже и жени с GWI бяха сравнени с помощта на анализ на ковариацията (ANCOVA), коригирайки възрастта и расата. Расата се използва дихотомно (кавказка или не). След това средните стойности на GWI жени бяха сравнени със GW здрави жени и след това повторени за GWI мъже и GW здрави мъже. И накрая, средните стойности на жените с GWI бяха сравнени с комбинираните 3 контролни групи (контроли с GW, IBS, ME/CFS) с помощта на ANCOVA, коригирайки възрастта и расата; този анализ беше повторен за мъжете. Двустранна p-стойност < 0.05="" беше="" приета="" като="" статистически="" значима="" за="" всички="" анализи="" и="" анализите="" не="" бяха="" коригирани="" за="" множество="" сравнения.="" анализите="" бяха="" извършени="" с="" помощта="" на="" sas="" версия="" 9.4="" (sas="" institute="" inc.="" 2013.="" cary,="" nc,="">

ползи от екстракт от Cistanche tubulosa

2.6. Изчисления

Измерването на оптичната плътност за случаите и контролите беше разделено на концентрацията на серумен IgG; тази стойност за всеки субект беше нормализирана спрямо контролите и изразена като промяна спрямо здрави контроли. Следователно, резултатите са изразени като средни трикратни стойности на анализа на произволни единици за оптична плътност, нормализирани към оптичната плътност на IgG в сравнение със здрави контроли.

2.7. Индекс на автоантитела на ЦНС (CAI)

Този индекс определя общото невродегенеративно състояние на индивида въз основа на нивото на автоантитела в плазмата. Изчислява се чрез добавяне на всички стойности на автоантитела за всеки нервен протеин и след това сумата се разделя на броя на използваните автоантитела. Накрая, стойността се умножава по 10, за да се получи лесен CAI резултат, както беше докладвано по-рано под предишното име индекс на невродегенерация [19].

3. Резултати

3.1. Демография на участниците

Извадката от проучването включва общо 171 ветерани с GWI (137 мъже, 34 жени), общо 56 GW мъже здрави контроли и 4 GW жени здрави ветерани контроли, общо 3 мъже и 32 жени контроли с IBS и общо 5 мъже и 45 жени CFS симптоматични контроли (Таблица 1). Някои от групите (Мъже GWI спрямо Жени GWI и GWI спрямо всички комбинирани контроли) бяха значително различни по възраст и раса (кавказка или не), така че всички допълнителни анализи контролираха тези демографски променливи.

Това проучване докладва резултатите от използването на нашите новоразработени плазмени невродегенеративни биомаркери за разграничаване на мъже и жени обслужващ персонал, който е служил в GW 1990/1991 и е развил симптоми на GWI или е останал здрав. Освен това бяха проведени анализи за откриване на разлики между жени с GWI спрямо жени с GW и след това комбинираната контролна група жени (здрави ветерани с GW, IBS, ME/CFS) и между мъже с GWI срещу здрави мъже с GW и след това с комбинираната контролна мъжка група. Нивата на 10 циркулиращи автоантитела срещу невронни протеини бяха анализирани в плазмата на мъже и жени ветерани с GWI, със здрави мъже и жени с GW и със симптоматични мъже и жени със CFS и IBS, които бяха използвани като контроли.

3.2. Ефекти от пола върху нивата на автоантитела срещу плазмени невронни протеини

3.2.1. Резултати от автоантитела, анализирани по пол за случаи на GWI и само здрави GW

Това проучване включва 171 плазмени проби от ветерани с GWI, включително 137 (80,2 процента) мъже (средна възраст 49.{5}} години) и 34 жени (19,9 процента) (със средна възраст 46,9 години) (Таблица 1 ). Бяха открити разлики между мъжете и жените по отношение на автоантитела в плазмата в групите с GWI, така че мъжете с GWI показват значително по-високи нива на тубулин и MAG в сравнение с жените ветерани с GWI (Таблица 2, Фигура 2). Нямаше антитела, когато жените са имали по-високи средни стойности от мъжете. Също така сравнихме 56 GW здрави мъже (средна възраст 50,5 години) с 4 GW здрави жени (средна възраст 56,5 години). Въпреки че ни липсваше статистическа мощност, не бяха открити значителни разлики между здравите контроли на мъжете и жените с GW за което и да е от автоантителата (данните не са показани).

3.2.2. Резултати от автоантитела в плазмата на мъже ветерани с GWI спрямо здрави мъже ветерани и след това жени с GWI срещу здрави жени ветерани

Вторият анализ сравнява мъже ветерани с GWI (N=137) с GW здрави мъже (N=56) и GWI жени (N=34) с GW здрави жени (N=4 ). В сравнение със здравите мъже, мъжете с GWI имат значително по-високи стойности на автоантитела за 9 от 10-те автоантитела с изключение на S100B. В сравнение със здрави жени, жените с GWI имат значително по-високи стойности на автоантитела за 2 от 10-те автоантитела, включително GFAP и Tubulin (Таблица 3).

3.2.3. Резултати от автоантитела в плазмата на мъже ветерани от GWI срещу всички мъже контроли и жени ветерани от GWI спрямо всички жени контроли

Третият анализ сравнява мъже ветерани с GWI (n {{0}}) и комбинирани IBS, ME/CFS и здрави контролни GW ветерани мъже (n=64) и жени ветерани с GWI (n=34) и комбинирани жени с IBS, ME/CFS и здравен контрол GW ветерани (n=81) (Таблица 4). В сравнение с контролите изцяло от мъже, мъжете с GWI показват значително по-високи (p < 0.01)="" средни="" нива="" на="" 9="" от="" 10="" автоантитела="" срещу="" неврални="" протеини="" (тубулин,="" тау,="" map-2,="" mbp,="" nfp,="" mag,="" camkii,="" -syn="" и="" gfap).="" не="" се="" наблюдава="" значителна="" разлика="" за="" s100b.="" жените="" ветерани="" с="" gwi="" показват="" значително="" повишени="" (p=""><0,01) средни="" нива="" на="" 8="" от="" 10="" автоантитела="" в="" сравнение="" с="" комбинираната="" контролна="" група="" жени="" (ibs,="" me/cfs,="" здрави="" контролни="" ветерани="" с="" gw),="" включително="" тубулин,="" тау,="" map{{17}="" },="" mbp,="" mag,="" nfp,="" camkii="" и="" -syn="" (таблица="">

3.2.4. CAI стойности по пол при мъже и жени GWI случаи спрямо мъже и жени контроли

Когато всички автоантитела бяха комбинирани в CAI резултат, мъжете с GWI имаха най-високи стойности на общите комбинирани автоантитела, както е посочено от CAI резултат от 41,1, а жените с GWI показаха CAI резултат от 32,4. Тези стойности са статистически значимо различни от ANCOVA, коригирани за възрастта и расата (p=0.007). Резултатът CAI на контролните мъже с GW имаше средна стойност от 21,4, което беше статистически по-ниско от мъжете с GWI (p < 0.0001)="" (фигура="" 3).="" резултатът="" cai="" на="" контролните="" жени="" с="" gw="" има="" среден="" резултат="" от="" 12,0,="" което="" е="" статистически="" по-ниско="" от="" жените="" с="" gwi="" (p=""><0,021). комбинираната="" мъжка="" контролна="" група="" има="" среден="" cai="" от="" 21,5,="" което="" е="" статистически="" значимо="" по-ниско="" от="" мъжката="" група="" gwi="" (p=""><0,0001). в="" допълнение,="" комбинираната="" контролна="" група="" жени="" има="" среден="" cai="" от="" 18,7,="" което="" също="" е="" значително="" по-ниско="" от="" групата="" жени="" gwi="" (p=""><0,0001). в="" това="" проучване="" нашите="" резултати="" за="" мъже="" и="" жени="" с="" gwi="" показаха,="" че="" техните="" стойности="" на="" cai="" са="" по-високи="" от="" 90="" процента="" от="">

4. Обсъждане

Това проучване, използващо нашите по-рано валидирани плазмени биомаркери за автоантитела на ЦНС, показва, че има разлика между мъжете и жените ветерани с GWI, като мъжете ветерани имат значително по-високи нива за 2 от 10-те автоантитела (тубулин, MAG), които са свързани с аксонални и олигодендроцитни функции (Фигура 2). Когато се комбинират всички автоантитела в невродегенеративния индекс на автоантитела на ЦНС (CAI), значителна

Наблюдава се разлика между мъже с GWI и жени с GWI, така че мъжете с GWI имат по-голямо общо протеиново натоварване с автоантитела и значително по-висока стойност на CAI. Вторият ни набор от анализи сравнява мъже ветерани с GWI със здрави контролни мъже GW и след това повтори анализите за жени ветерани с GWI в сравнение със здрави жени GW. Нашите следващи анализи сравняват мъже ветерани с GWI с изцяло мъжки контроли от нашето предишно проучване (здрави GW ветерани, не-ветерани с IBS или ME/CFS) [19]. След това направихме същите анализи, сравнявайки жени ветерани с GWI с комбинираната контролна група от всички жени (не-ветерани с IBS и ME/CFS). Резултатите показват, че мъжете с GWI имат значително по-високи нива на автоантитела за 9 от 10-те автоантитела в сравнение със здрави мъже ветерани с GW или с комбинираната мъжка контролна група.

Жените с GWI показаха значително по-високи стойности за 2 от 10-те автоантитела в сравнение със здрави жени ветерани от GW и с 8 от 10 автоантитела в сравнение с тяхната съответна комбинирана контролна група жени (неветерани с IBS и ME/CFS). CAI анализите, сравняващи GWI мъже с тяхната мъжка контролна група и GWI жени със съответната им контролна група, също показват значително по-високи стойности за GWI мъже и жени, с двойни стойности в сравнение със съответните контроли. Тези резултати се добавят към нашите предишни констатации, които предполагат, че използването на гранична стойност от 30 или повече на CAI резултата би разграничило GWI от други хронични заболявания. Тези резултати показват, че тази граница съответства както на мъжете, така и на жените ветерани с GWI. Въпреки че мъжете и жените ветерани с GWI имат по-високи нива на автоантитела от съответните им контролни групи, те се различават един от друг само по два протеина на автоантитела на ЦНС. Въпреки това, общият комбиниран CAI резултат е значително по-висока стойност за мъжете с GWI. Двата значително различни протеина включват тубулин и MAG, които са свързани с функционирането на аксони и олигодендроцити, които са свързани с историята на леки травматични мозъчни наранявания (mTBI) и експозиции на химически оръжия. Тези резултати съответстват на нашите предишни проучвания, показващи повишени нива на mTBI и излагане на химически оръжия по време на войната, особено при мъже ветерани с GWI [30,36,37].

Всъщност тази хипотеза за множество удари предполага, че тези с експозиция на mTBI и химически оръжия ще докладват повече хронични здравословни симптоми, които може да са свързани с тези аксонални и свързани с миелина патобиологични маркери. Съответно Carney et al. сравнява бойни преживявания, професионални и други експозиции, свързани със службата, и използване на здравни грижи на мъже и жени ветерани от GW и съобщава за подобен военен опит, но с мъже ветерани, които по-често участват в дейности, свързани с битки. Въпреки това не са открити значителни различия между половете при излагане на разтворители/нефтохимикали, инфекциозни заболявания, невротоксини, топлинен стрес, травма или радиация [38]. В допълнение, жените ветерани с GWI се различават от здравите контроли на жените GW по два маркера, включително глиален маркер (GFAP) и невронален цитоскелетен маркер (Tubulin). Тези резултати предполагат, че жените с GWI изглежда показват повече невронни цитоскелетни и невровъзпалителни промени в сравнение със здрави GW контроли или жени с IBS или ME/CFS. Мъжете ветерани с GWI се различават от GW здравите мъже с по-високи стойности на всички автоантитела, с изключение на острия глиален BBB маркер S100B и стойността на CAI, която е два пъти по-висока от тази на контролите.

Когато жените с GWI бяха сравнени с комбинираната контролна група, те показаха по-високи нива на автоантитела върху всички маркери, с изключение на глиалните маркери GFAP и S100B. Отново тяхната стойност на CAI беше почти два пъти по-висока от тази на комбинираните контроли. Подобно на предишния анализ, мъжете ветерани с GWI не се различават от съответните им контроли за глиалното активиране и острия BBB маркер S100B. Това предполага, че мъже ветерани от GWI може да показват повече хронично глиално активиране, невронално увреждане и невровъзпаление, отколкото техните мъжки контролни здрави и симптоматични партньори с IBS и ME/CFS, тъй като S100B е маркер за текущо нарушение на BBB, а GFAP е маркер за текущо невровъзпаление [39,40]. Това е така, защото GFAP се секретира от активирани астроцити, което води до невровъзпаление [41–43]. По отношение на интегрирането на нашите констатации в по-широкия обхват на изследването на GWI, свързано с половите различия, беше доказано, че има разлики в имунно-възпалителните маркери и в общите нива на здравни симптоми между мъжете и жените ветерани от GW [5,8,13]. ,44–46]. Настоящото проучване добавя към литературата, че мъжете ветерани от GW имат по-високи общи стойности на автоантитела (оценени чрез съотношението CAI) и че констатациите са в съответствие с мъжете и жените, които потенциално изпитват повишени автоантитела в подобна степен, но с по-малка увеличаване на автоантитела при жени, свързано с по-голямо натоварване на симптомите. Тези резултати предполагат, че е необходимо по-нататъшно проучване на чувствителността на граничната стойност на CAI от 30 за мъже и жени ветерани с GWI. Автоантителата към невронни протеини в допълнение към кръвните биомаркери също са индикации за невродегенерация и могат да обяснят механизмите на мозъчните заболявания и ефектите на стареене [26,47].

ползи от екстракта от Cistanche tubulosa

Понастоящем единствените последователни рискови фактори за GWI са химически експозиции и история на mTBI [30,36,37,48–51]. Тези химикали включват пиридостигмин бромид, пестициди, включително инсектицидите перметрин и линдан, както и репелента за насекоми, DEET (N, N-диетил-m-толуамид), органофосфат (OP) инсектициди и нервнопаралитични газове, зарин и циклозарин, които сега са известно, че повлиява неблагоприятно ЦНС при незначителни или комбинирани дози [3,14,15,48,51–58]. Изследванията на механизмите, чрез които OP съединенията причиняват невродегенерация, са установили, че OP повишават активността и експресията на калциево-калмодулин киназа II (CaMKII), която причинява хиперфосфорилиране на невронни протеини, което води до тяхната агрегация и забавяне на аксоналния транспорт, което води до смърт на невронни клетки [51,59–62]. В съгласие с това е нашето предишно откритие, че екипажите на авиокомпаниите, които са били изложени на ОП, са развили автоимунни антитела срещу невронни протеини [34]. Повишените автоантитела към невронални протеини като Tau, NFP, MAG, MBP и GFAP са в съответствие с изследването за образна диагностика на мозъка в друга група екипажи на авиокомпании, което показва намалена микроструктура на бялото мозъчно вещество и церебрална перфузия, което може да бъде потенциална причина за когнитивни увреждания и дефицит на настроението, докладван от екипажите на самолета [63]. Значението на това откритие е, че GFAP е маркер за активиране на астроцити и астроцитите могат директно да взаимодействат и ограничават мозъчната васкулатура, включително капиляри, които участват в церебралната перфузия и невровъзпалението. Оплакванията от здравни симптоми, докладвани от ветерани от GW, са в съответствие с последствията след излагане на пестициди като органофосфати, пиретроиди и DEET [51,64,65].

Повишени автоантитела срещу неврофиламент, тау, тубулин и миелин основни протеини, които са биомаркери за миелин и невронни цитоскелетни нарушения, включително микротубулна нестабилност, аксонална дегенерация и променен аксонален транспорт, са открити в много клетъчни и животински проучвания на индуцирани от токсични модели на GWI [66–74]. Нашите резултати са в съответствие с предишни доклади, показващи увеличени различни автоантитела в по-малко и след това по-голямо изследване на кръвни проби на ветерани от GW [16,19,75–78]. Доколкото ни е известно, това е първото проучване за оценка на половите ефекти на тези автоантитела при ветерани с GWI в сравнение със здрави и симптоматични групи за сравнение. В обобщение, резултатите от настоящото изследване върху ефекта на пола върху кръвните биомаркери показват, че нивата на автоантитела са значително по-високи както за мъжете, така и за жените ветерани от GW в сравнение с контролите [19]. Когато имаше разлика в пола, мъжете ветерани с GWI показаха по-високи нива на автоантитела, както и общия CAI резултат от жените ветерани с GWI. Това е в съответствие със ситуацията на театъра на войната, че въпреки че мъжете и жените са имали подобен военен опит, мъжете по-често са участвали в битки и са имали по-високи нива на mTBI [30,36–38]. Това не означава, че жените ветерани нямат повишени нива на други симптоми на това мултифакторно разстройство, а по-скоро, че мъжете ветерани изглежда показват повече разлики в автоантителата на ЦНС, отколкото жените ветерани, както е посочено от по-високите общи стойности на CAI.

Ограничения

Както повечето проучвания, нашето проучване имаше ограничения. Имахме малки размери на групите в някои анализи, които намалиха способността ни да виждаме разликите между групите. Това беше особено вярно за сравненията на жените. Тъй като основният фокус на това проучване беше да се оцени GWI спрямо симптоматичните контролни групи, ние нямахме здрава контролна група без ветерани за сравнение, което може да даде повече яснота на резултатите, ако тази група беше включена. В това проучване използвахме критериите на Канзас за GWI, които трябваше да изключат известни случаи на разстройства, включително болестта на Алцхаймер (AD), болестта на Паркинсон (PD) и други хронични заболявания, които биха могли да обяснят техните хронични симптоми [27]. В това проучване ние демонстрирахме асоциации между автоантитела, особено при ветерани от GWI, в сравнение със здрави и симптоматични контроли, стратифицирани по пол. Въпреки това, времевата връзка остава неясна между тези състояния и производството на автоантитела. Необходими са повече изследвания, за да се определи дали това са кръвни протеини на ЦНС от експозиции преди 30 години или има текущи промени в ЦНС, които предизвикват тези протеини на автоантитела. Други по-големи проучвания с жени ветерани също биха помогнали за по-нататъшното валидиране на патобиологичното въздействие на GWI върху жените ветерани. Основна сила на нашето проучване е, че то представлява както здрави, така и симптоматични групи ветерани от GW, както и симптоматични контроли без ветерани с ME/CFS или IBS. Това предполага, че както мъжете, така и жените ветерани с GWI се различават не само от техните здрави контроли на ветерани от GW, но също така имат повече разлики в ЦНС, отколкото други групи мъже и жени с хронични мултисимптомни заболявания. В допълнение, анализите на автоантителата на ЦНС бяха извършени, като лабораторният персонал беше заслепен за състоянието на случая на всички участници.

5. Изводи

Тази година се навършват 30 години от войната в Персийския залив от 1990/1991 г. През по-голямата част от това време е имало липса на диагностични инструменти за точно диагностициране на разстройството, което е възпрепятствало както точните диагнози, така и много необходимото лечение за ветераните. Нашата лаборатория беше една от първите, които предложиха и документираха, че GWI е свързано с химически експозиции по време на войната и че тези експозиции са повлияли неблагоприятно на ЦНС. В допълнение, ние документирахме разлики в автоантителата между GWI и GWhealthy и симптоматични контроли. Това проучване документира, че има полов ефект за тези групи с мъже и жени с GWI, показващи по-високи нива на автоантитела от съответните им контролни групи и с мъже ветерани с GWI, показващи най-голямото бреме от автоантитела. След по-нататъшно валидиране, ние се надяваме, че нашият новоразработен обобщен резултат на индекса на невродегенерация на автоантитела на ЦНС (CAI) от 30 или повече може да бъде използван за разработване на обективни диагностични маркери на GWI и за сравняване на ефективността на изпитванията на лечението както за мъже, така и за жени ветерани от GW.

Това е нашият продукт против умора! Кликнете върху снимката за повече информация!

Препратки

1. Racgwi, R. Заболяване от войната в Персийския залив и здравето на ветераните от войната в Персийския залив: Препоръки за изследване; Правителствена печатница на САЩ: Вашингтон, САЩ, 2008 г.

2. Racgwi, R. Заболяване от войната в Персийския залив и здравето на ветераните от войната в Персийския залив: Актуализация на изследванията и препоръки, 2009–2013 г.; Правителствена печатница на САЩ: Вашингтон, САЩ, 2014 г.

3. Уайт, РФ; Стийл, Л.; O'Callaghan, JP; Съливан, К.; Bins, JH; Golomb, BA; Блум, FE; Бункър, JA; Крауфорд, Ф.; Грейвс, JC; et al. Скорошни изследвания на болести от войната в Персийския залив и други здравословни проблеми при ветерани от войната в Персийския залив от 1991 г.: Ефекти от излагане на токсични вещества по време на разполагане. Cortex 2016, 74, 449–475. [CrossRef] [PubMed]

4. Съливан, К.; Кренгел, М.; Хебоян, В.; Шилдрот, С.; Wilson, CC; Iobst, S.; Климас, Н.; Coughlin, SS Разпространение и модели на симптоми сред жените ветерани от ерата на войната в Персийския залив от 1991 г.: 25 години по-късно. J. Здраве на жените 2020, 29, 819–826. [CrossRef] [PubMed]

5. Хебоян, В.; Кренгел, М.; Съливан, К.; Iobst, S.; Климас, Н.; Wilson, CC; Coughlin, SS Сексуални различия при заболяване от войната в Персийския залив: Повторен анализ на данни от проучването на военновъздушните сили на CDC с помощта на CDC и модифицирани дефиниции на случаите в Канзас. J. Occup. Environ. Med. 2019, 61, 610–616. [CrossRef] [PubMed]

6. Coughlin, SS; Хебоян, В.; Съливан, К.; Кренгел, М.; Wilson, CC; Iobst, S.; Klimas, N. Сърдечно-съдови заболявания сред жените ветерани от ерата на войната в Персийския залив от 1991 г. J. Environ. Health Sci. 2019, 5, 24–25. [CrossRef] [PubMed]

7. Coughlin, SS; Кренгел, М.; Съливан, К.; Пиърс, PF; Хебоян, В.; Wilson, CC Преглед на епидемиологичните проучвания на здравето на жените ветерани от войната в Персийския залив. J. Environ. Health Sci. 2017, 3. [CrossRef] [PubMed]

8. Зундел, CG; Krengel, MH; Heeren, T.; Yee, MK; Grasso, CM; Janulewicz Lloyd, PA; Coughlin, SS; Съливан, К. Процент на хронични медицински състояния при ветераните от войната в Персийския залив от 1991 г. в сравнение с общото население. Вътр. J. Environ. Рез. Обществено здраве 2019, 16, 949. [CrossRef] [PubMed]

9. Pierce, PF Мониторинг на здравето на жените ветерани от войната в Персийския залив. Федерална награда за медицински сестри. Mil. Med. 2005, 170, 349–354. [CrossRef]

10. Пиърс, PF; Антонакос, С.; Deroba, BA Използване на здравни грижи и удовлетворение по отношение на специфични за пола здравословни проблеми сред жените военни. Mil. Med. 1999, 164, 98–102. [CrossRef]

11. Улф, Дж.; Проктър, SP; Ериксън, DJ; Hu, H. Рискови фактори за мултисимптомно заболяване при ветерани от американската армия от войната в Персийския залив. J. Occup. Environ. Med. 2002, 44, 271–281. [CrossRef]

12. Стийл, Л.; Sastre, A.; Юркович, М.М.; Cook, MR Комплексни фактори в етиологията на заболяването от войната в Персийския залив: експозиции по време на война и рискови фактори в подгрупите на ветерани. Environ. Здравна гледна точка. 2012, 120, 112–118. [CrossRef]

13. Дурса, ЕК; Барт, SK; Портър, BW; Шнайдерман, AI Здравен статус на жени и мъже от войната в Персийския залив и ветерани от епохата в Персийския залив: проучване, базирано на населението. Проблеми със здравето на жените 2019, 29, S39–S46. [CrossRef] [PubMed]

14. Абу-Дония, MB; Уилмарт, КР; Абдел-Рахман, АА; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Повишена невротоксичност след едновременна експозиция на пиридостигмин бромид, DEET и хлорпирифос. Фундамент. Приложение Токсикол. 1996, 34, 201–222. [CrossRef] [PubMed]

15. Абу-Дония, MB; Уилмарт, КР; Jensen, KF; Oehmen, FW; Kurt, TL Невротоксичност в резултат на съвместно излагане на пиридостигмин бромид, деет и перметрин: Последици от химически експозиции от войната в Персийския залив. J. Toxicol. Environ. Здраве 1996, 48, 35–56. [CrossRef] [PubMed]

16. Абу-Дония, MB; Конбой, Луизиана; Kokkotou, E.; Якобсън, Е.; Elmasry, EM; Elkafrawy, P.; Нийли, М.; Бас, CRD; Съливан, К. Скрининг за нови биомаркери на централната нервна система при ветерани с болест от войната в Персийския залив. Невротоксикол. Teratol. 2017, 61, 36–46. [CrossRef]

17. Bowyer, JF; Саркар, С.; Burks, SM; Хес, JN; Толани, С.; O'Callaghan, JP; Hanig, JP Микроглиално активиране и отговори на васкулатурата, които са резултат от остра експозиция на LPS. Невротоксикология 2020, 77, 181–192. [CrossRef]

18. Абдел-Рахман, А.; Шети, Аляска; Abou-Donia, MB Разрушаване на кръвно-мозъчната бариера и невронна клетъчна смърт в cingulate cortex, dentate gyrus, таламус и хипоталамус при плъх модел на синдрома на войната в Персийския залив. Neurobiol. дис. 2002, 10, 306–326. [CrossRef]

19. Абу-Дония, MB; Lapadula, ES; Krengel, MH; Куин, Е.; LeClair, J.; Massaro, J.; Конбой, Луизиана; Kokkotou, E.; Абреу, М.; Климас, Н.Г.; et al. Използване на плазмени автоантитела на протеини на централната нервна система за разграничаване на ветерани с болест от войната в Персийския залив от здрави и симптоматични контроли. Brain Sci. 2020, 10, 610. [CrossRef]

20. Лий, Г.; Cowan, N.; Kirschner, M. Първичната структура и хетерогенността на тау протеина от мозъка на мишката. Наука 1988, 239, 285–288. [CrossRef]

21. Таляферо, П.; Рамос, AJ; Onaivi, ES; Еврард, SG; Lujilde, J.; Brusco, A. Невронният цитоскелет и синаптичните плътности се променят след хронично лечение с канабиноидния рецепторен агонист WIN 55, 212-2. Brain Res. 2006, 1085, 163–176. [CrossRef]

22. Laferrière, NB; MacRae, TH; Браун, DL Синтез и сглобяване на тубулин в диференциращи неврони. Biochem. Cell Biol. 1997, 75, 103–117. [CrossRef]

23. Хоши, М.; Акияма, Т.; Shinohara, Y.; Мията, Й.; Огавара, Х.; Нишида, Е.; Sakai, H. Протеин-кинас-С-катализирано фосфорилиране на микротубулно-свързващия домен на протеин 2, свързан с микротубули, инхибира способността му да индуцира тубулинова полимеризация. Евро. J. Biochem. 1988, 174, 225–230. [CrossRef] [PubMed]

24. Jauch, ЕК; Lindsell, C.; Бродерик, Дж.; Fagan, SC; Тили, пр.н.е.; Levine, SR Асоциация на серийни биохимични маркери с остър исхемичен инсулт: Националният институт по неврологични разстройства и изследване на инсулт с рекомбинантен тъканен плазминогенен активатор. Удар 2006, 37, 2508–2513. [CrossRef] [PubMed]

25. Кьовешди, Е.; Lückl, J.; Букович, П.; Фаркас, О.; Пал, Дж.; Czeiter, E.; Szellár, D.; Дочи, Т.; Комоли, С.; Büki, A. Актуализация на протеиновите биомаркери при травматично мозъчно увреждане с акцент върху клиничната употреба при възрастни и педиатрия. Acta Neurochir. 2010, 152, 1–17. [CrossRef] [PubMed]

26. Мейн, К.; Уайт, JA; McMurran, CE; Ривера, FJ; de la Fuente, AG Стареене и невродегенеративни заболявания: Приятел или враг ли е адаптивната имунна система? Преден. Стареене на неврологията. 2020, 12, 572090. [CrossRef] [PubMed]

27. Steele, L. Разпространение и модели на заболяване от войната в Персийския залив при ветерани от Канзас: асоциация на симптомите с характеристиките на лицето, мястото и времето на военна служба. Am. J. Epidemiol. 2000, 152, 992–1002. [CrossRef] [PubMed]

28. Фукуда, К.; Straus, SE; Хики, И.; Шарп, MC; Добинс, JG; Komaroff, A. Синдромът на хроничната умора: цялостен подход към неговото определение и изследване. Международна група за изследване на синдрома на хроничната умора. Ан. Стажант. Med. 1994, 121, 953–959. [CrossRef]

29. Лонгстрет, GF; Thompson, WG; Chey, WD; Houghton, LA; Mearin, F.; Spiller, RC Функционални разстройства на червата. Гастроентерология 2006, 130, 1480–1491. [CrossRef]

30. Янулевич, П.; Кренгел, М.; Куин, Е.; Heeren, T.; Туми, Р.; Килиани, Р.; Zundel, C.; Ajama, J.; O'Callaghan, J.; Стийл, Л.; et al. Хипотезата за множество удари за заболяване от войната в Персийския залив: Самоотчетено излагане на химическо/биологично оръжие и лека травматична мозъчна травма. Brain Sci. 2018, 8, 198. [CrossRef]

31. Янулевич, Пенсилвания; Сет, РК; Карлсън, JM; Ajama, J.; Куин, Е.; Heeren, T.; Климас, Н.; Lasley, SM; Horner, RD; Съливан, К.; et al. Чревният микробиом при ветераните от войната в Персийския залив: предварителен доклад. Вътр. J. Environ. Рез. Обществено здраве 2019, 16, 751. [CrossRef]

32. Конбой, Л.; Сейнт Джон, М.; Schnyer, R. Ефективността на акупунктурата при лечението на болестта на войната в Персийския залив. Contemp Clin. Изпитания 2012, 33, 557–562. [CrossRef]

33. Конбой, Л.; Герке, Т.; Хсу, Кентъки; Сейнт Джон, М.; Голдщайн, М.; Schnyer, R. Ефективността на индивидуализираните акупунктурни протоколи при лечението на болестта на войната в Персийския залив: Прагматично рандомизирано клинично изпитване. PLoS ONE 2016, 11, e0149161. [CrossRef]

34. Абу-Дония, MB; Abou-Donia, MM; Elmasry, EM; Монро, JA; Mulder, MFA Автоантитела към специфични за нервната система протеини са повишени в серуми на членове на екипажа на полета: биомаркери за увреждане на нервната система. J. Toxicol. Environ. Здраве A 2013, 76, 363–380. [CrossRef] [PubMed]

35. Абу-Дония, MB; Сулиман, Н.Б.; Siniscalco, D.; Антонучи, Н.; ElKafrawy, P. De novo кръвни биомаркери при аутизъм: автоантитела срещу невронни и глиални протеини. поведение. Sci. 2019, 9, 47. [CrossRef] [PubMed]

36. Yee, MK; Seichepine, DR; Janulewicz, PA; Съливан, Калифорния; Проктър, SP; Krengel, MH Самоотчетено травматично мозъчно увреждане, здраве и честота на хронично мултисимптомно заболяване при ветерани от 1990-1991 войната в Персийския залив. J. Рехабилитация след травма на главата. 2016, 31, 320–328. [CrossRef]

37. Yee, MK; Janulewicz, PA; Seichepine, DR; Съливан, Калифорния; Проктър, SP; Krengel, MH Множество леки травматични мозъчни наранявания са свързани с повишени нива на здравни симптоми и заболявания от войната в Персийския залив в кохорта от 1990-1991 ветерани от войната в Персийския залив. Brain Sci. 2017, 7, 79. [CrossRef]

38. Carney, CP; Сампсън, TR; Voelker, М.; Улсън, Р.; Торн, П.; Doebbeling, BN Жените във войната в Персийския залив: Боен опит, експозиции и последващи здравни грижи. Mil. Med. 2003, 168, 654–661. [CrossRef]

39. Капурал, М.; Krizanac-Bengez, L.; Барнет, Г.; Perl, J.; Масарик, Т.; Аполон, д.; Расмусен, П.; Mayberg, MR; Janigro, D. Serum S-100beta като възможен маркер за нарушаване на кръвно-мозъчната бариера. Brain Res. 2002, 940, 102–104. [CrossRef]

40. Сиракуза, Р.; Фуско, Р.; Cuzzocrea, S. Астроцити: Роля и функции в мозъчните патологии. Преден. Pharm. 2019, 10, 1114. [CrossRef]

41. O'Callaghan, JP; Jensen, KF; Miller, DB Количествени аспекти на астроглиозата, предизвикана от лекарства и токсиканти. Neurochem. Вътр. 1995, 26, 115–124. [CrossRef]

42. инж. Л.Ф.; Ghirnikar, RS GFAP и астроглиоза. Мозъчен патол. 1994, 4, 229–237. [CrossRef]

43. Аурел, А.; Rosengren, LE; Карлсон, Б.; Olsson, JE; Зборникова, В.; Haglid, KG Определяне на концентрациите на S-100 и глиални фибриларни киселинни протеини в цереброспиналната течност след мозъчен инфаркт. Удар 1991, 22, 1254–1258. [CrossRef] [PubMed]

44. Браун, MC; Sims, KJ; Gifford, EJ; Goldstein, KM; Джонсън, MR; Уилямс, CD; Provenzale, D. Разлики, основани на пола, сред ветераните от ерата на войната в Персийския залив от 1990–1991 г.: демографски данни, поведение в начина на живот и здравословни условия. Проблеми със здравето на жените 2019, 29 (Допълнение 1), S47–S55. [CrossRef] [PubMed]

45. Craddock, TJ; Fritsch, P.; Rice, MA, Jr.; дел Росарио, RM; Милър, DB; Флетчър, Масачузетс; Климас, Н.Г.; Бродерик, Г. Роля на хомеостатичното задвижване в увековечаването на сложно хронично заболяване: болест на войната в Персийския залив и синдром на хроничната умора. PLoS ONE 2014, 9, e84839. [CrossRef]

46. ​​Smylie, AL; Бродерик, Г.; Фернандес, Х.; Раздан, С.; Барнс, З.; Collado, F.; Сол, С.; Флетчър, Масачузетс; Klimas, N. Сравнение на специфични за пола имунни сигнатури при заболяване от войната в Персийския залив и синдром на хроничната умора. BMC Immunol. 2013, 14, 1–14. [CrossRef] [PubMed]

47. Lobo, PI Роля на естествените IgM автоантитела (IgM-NAA) и IgM анти-левкоцитни антитела (IgM-ALA) при регулиране на възпалението. Curr. Горна част. Microbiol. Immunol. 2017, 408, 89–117.

48. Съливан, К.; Кренгел, М.; Брадфорд, У.; Стоун, С.; Томпсън, ТА; Heeren, T.; White, RF Невропсихологично функциониране във военни апликатори за пестициди от войната в Персийския залив: Ефекти върху скоростта на обработка на информацията, вниманието и визуалната памет. Невротоксикол. Teratol. 2018, 65, 1–13. [CrossRef]

49. Чао, LL; Rothlind, JC; Карденас, Вирджиния; Майерхоф, DJ; Weiner, MW Ефекти от ниско ниво на излагане на зарин и циклозарин по време на войната в Персийския залив през 1991 г. върху мозъчната функция и структурата на мозъка при американски ветерани. Невротоксикология 2010, 31, 493–501. [CrossRef]

50. Чао, LL; Абаджиян, Л.; Hlavin, J.; Майерхоф, DJ; Weiner, MW Ефекти от ниско ниво на експозиция на зарин и циклозарин и заболяване от войната в Персийския залив върху структурата и функцията на мозъка: проучване в 4T. Невротоксикология 2011, 32, 814–822. [CrossRef]

51. Golomb, BA Инхибитори на ацетилхолинестеразата и болести от войната в Персийския залив. Proc. Natl. акад. Sci. САЩ 2008, 105, 4295–4300. [CrossRef]

52. Михалович, LT; Кели, Калифорния; Съливан, К.; O'Callaghan, JP Експозиция на инхибитор на ацетилхолинестеразата като иницииращ фактор в развитието на заболяването от войната в Персийския залив, хронично невроимунно разстройство при разположени ветерани. Неврофармакология 2020, 171, 108073. [CrossRef]

53. O'Callaghan, JP; Кели, Калифорния; Локър, Арканзас; Милър, DB; Lasley, SM Кортикостеронът задейства невровъзпалителния отговор към DFP при мишки: Потенциален животински модел на заболяването от войната в Персийския залив. J. Neurochem. 2015, 133, 708–721. [CrossRef] [PubMed]

54. Winkenwerder, W. Доклад за експозицията на околната среда: Окончателен доклад за пестициди Министерство на отбраната на САЩ, Служба на специалния помощник на заместник-министъра на отбраната (персонал и готовност) от болести от войната в Персийския залив, медицинска готовност и военно разполагане; Правителствена печатница на САЩ: Вашингтон, САЩ, 2003 г.

55. Чери, Н.; Крийд, Ф.; Силман, А.; Dunn, G.; Бакстър, Д.; Smedley, J.; Тейлър, С.; Macfarlane, GJ Здраве и експозиции на ветерани от войната в Залива на Обединеното кралство. Част II: Връзката на здравето с експозицията. Окупирай. Environ. Med. 2001, 58, 299–306. [CrossRef] [PubMed]

56. Хейли, RW; Kurt, TL Самоотчетено излагане на невротоксични химически комбинации по време на войната в Персийския залив. Напречно епидемиологично проучване. JAMA 1997, 277, 231–237. [CrossRef] [PubMed]

57. Низенбаум, Р.; Барет, DH; Рейес, М.; Рийвс, Стресови фактори на внедряването на WC и хронично мултисимптомно заболяване сред ветераните от войната в Персийския залив. J. Nerv. Мент. дис. 2000, 188, 259–266. [CrossRef]

58. Съливан, К.; Кренгел, М.; Проктър, SP; Дивайн, С.; Heeren, T.; White, RF когнитивно функциониране при търсещи лечение ветерани от войната в Персийския залив: употреба на пиридостигмин бромид и посттравматично стресово разстройство. J. Psychopathol. поведение. Оценявайте. 2003, 25, 95–103. [CrossRef] 59. Patton, SE; O'Callaghan, JP; Милър, DB; Abou-Donia, MB Ефект от пероралното приложение на три-о-крезил фосфат върху in vitro фосфорилиране на мембранни и цитозолни протеини от пилешкия мозък. J. Neurochem. 1983, 41, 897–901. [CrossRef]

60. Lapadula, ES; Lapadula, DM; Abou-Donia, MB Биохимични промени в седалищния нерв на кокошки, третирани с три-о-крезил фосфат: Повишено фосфорилиране на цитоскелетни протеини. Neurochem. Вътр. 1992, 20, 247–255. [CrossRef]

61. Abou-Donia, MB Участие на цитоскелетни протеини в механизмите на индуцирана от органофосфорен естер забавена невротоксичност. Clin. Exp. Pharm. Physiol. 1995, 22, 358–359. [CrossRef]

62. Торес-Алторо, Мичиган; Mathur, BN; Drerup, JM; Томас, Р.; Lovinger, DM; O'Callaghan, JP; Bibb, JA Органофосфатите нарушават регулацията на допаминовата сигнализация, глутаматергичната невротрансмисия и индуцират маркери за невронално увреждане в стриатума. J. Neurochem. 2011, 119, 303–313. [CrossRef]

63. Ренеман, Л.; Schagen, SB; Mulder, M.; Mutsaerts, HJ; Hageman, G.; de Ruiter, MB Когнитивно увреждане и свързаната загуба на бяла микроструктура на мозъка при членове на екипажа, изложени на изпарения от двигателно масло. Поведение при изображения на мозъка. 2016, 10, 437–444. [CrossRef]

64. Petras, JM Soman невротоксичност. Фундамент. Приложение Токсикол. 1981, 1, 242. [CrossRef]

65. Абдел-Рахман, АА; Шети, Аляска; Abou-Donia, MB Острата експозиция на зарин повишава пропускливостта на кръвно-мозъчната бариера и предизвиква невропатологични промени в мозъка на плъх: Връзки доза-отговор. Neuroscience 2002, 113, 721–741. [CrossRef]

66. Белград, Й.; De Pace, R.; Fields, RD Автофагия в миелинизираща глия. J. Neurosci. 2020, 40, 256–266. [CrossRef] [PubMed]

67. Нотън, SX; Бек, WD; Wei, Z.; Qu, G.; Terry, AV, Jr. Мултифункционалните съединения литиев хлорид и метиленово синьо намаляват отрицателните ефекти на диизопропилфлуорофосфата върху аксоналния транспорт в кортикалните неврони на плъхове. Токсикология 2020, 431, 152379. [CrossRef]

68. Нотън, SX; Terry, AV, Jr. Невротоксичност при остра и повтаряща се експозиция на органофосфат. Токсикология 2018, 408, 101–112. [CrossRef]

69. Нотън, SX; Ернандес, CM; Бек, WD; Поддар, И.; Янасък, Н.; Lin, P.-C.; Terry, AV, Jr. Повтарящите се експозиции на диизопропилфлуорофосфат водят до структурни нарушения на миелинизирани аксони и персистиращи увреждания на аксоновия транспорт в мозъците на плъхове. Токсикология 2018, 406, 92–103. [CrossRef]

70. Гао, Дж.; Нотън, SX; Бек, WD; Ернандес, CM; Wu, G.; Wei, Z.; Янг, X.; Бартлет, MG; Terry, AV, Jr. Хлорпирифос и хлорпирифос оксон увреждат транспорта на свързани с мембраната органели в кортикалните аксони на плъхове. Невротоксикология 2017, 62, 111–123. [CrossRef]

71. Qiang, L.; Rao, AN; Мостославски, Г.; Джеймс, MF; Комфорт, Н.; Съливан, К.; Baas, PW Препрограмиране на клетки от ветерани от войната в Персийския залив в неврони за изследване на болестта от войната в Персийския залив. Неврология 2017, 88, 1968–1975. [CrossRef]

72. Ернандес, CM; Бек, WD; Нотън, SX; Поддар, И.; Адам, B.-L.; Янасък, Н.; Мидълтън, C.; Terry, AV, Jr. Повтарящото се излагане на хлорпирифос води до продължителни увреждания на аксоналния транспорт в мозъка на жив гризач. Невротоксикология 2015, 47, 17–26. [CrossRef]

73. Рао, AN; Патил, А.; Бродник, З.Д.; Qiang, L.; Espana, RA; Съливан, Калифорния; Черно, ММ; Baas, PW Фармакологично увеличаващото се ацетилиране на микротубулите коригира ефектите на органофосфатите върху невроните, изострени от стреса. Трафик 2017, 18, 433–441. [CrossRef]

74. Terry, AV, Jr. Функционални последици от повтаряща се експозиция на органофосфат: Потенциални нехолинергични механизми. Pharmacol. Там. 2012, 134, 355–365. [CrossRef] [PubMed]

75. Джоши, У.; Pearson, A.; Evans, JE; Langlois, H.; Saltiel, N.; Ojo, J.; Климас, Н.; Съливан, К.; Keegan, AP; Оберлин, С.; et al. Метаболитът на перметрин е свързан с адаптивни имунни отговори при заболяване от войната в Персийския залив. Поведение на мозъка. имунна. 2019, 81, 545–559. [CrossRef] [PubMed]

76. Вождани, А.; Thrasher, JD Клетъчни и хуморални имунни аномалии при ветерани от войната в Персийския залив. Environ. Здравна гледна точка. 2004, 112, 840–846. [CrossRef] [PubMed]

77. Skowera, A.; Стюарт, Е.; Дейвис, ЕТ; Клиър, AJ; Unwin, C.; Хъл, Л.; Исмаил, К.; Hossain, G.; Wessely, SC; Peakman, M. Антинуклеарни автоантитела (ANA) при пациенти със заболяване, свързано с войната в Персийския залив и синдром на хроничната умора (CFS). Clin. Exp. Immunol. 2002, 129, 354–358. [CrossRef] [PubMed]

78. Хокама, Й.; Empey-Campora, C.; Hara, C.; Хига, Н.; Siu, N.; Lau, R.; Курибаяши, Т.; Yabusaki, K. Фосфолипиди в острата фаза, свързани с кардиолипина на митохондриите в серума на пациенти със синдром на хроничната умора (CFS), хронично отравяне с риба Ciguatera (CCFP) и други заболявания, приписвани на химикали, война в Персийския залив и морски токсини. J. Clin. лаборатория. анален 2008, 22, 99–105.