Ефективността и механизмът на тонизиращия метод на бъбреците и далака за предотвратяване и лечение на миелосупресия, предизвикана от адювантна химиотерапия на колоректален рак

Миелосупресияпредизвикана от химиотерапия е проблем, който не може да бъде пренебрегнаттерапии за рак. Китайската медицина (CM) се използва за предотвратяване и лечение на миелосупресия, причинена отадювантна химиотерапияпри пациенти сколоректален рак(CRC) от години. Клиничните изпитвания са предназначени да оценят ефективността на CM върху индуцирана от химиотерапия миелосупресия (CIM) при пациенти с CRC. обачевисококачествени доказателствасе изисква за вземане на решения в клиничната практика и основният механизъм на CM остава неясен. По този начин бяха проведени систематичен преглед и мета-анализ, за ​​да се предоставят висококачествени доказателства за ефективността на CM върху потискането на костния мозък, причинено отадювантна химиотерапияпри пациенти с CRC. Второ, чревната микробиота на пациенти с CRC, диагностицирани със стадий II (висок риск)/III, получаващи адювантна химиотерапия и квалифицирани като далак ибъбречна недостатъчностбеше разследван. И накрая, ние се опитахме да проучим механизма на Qitu Erzhi Decoction (QED), който е бил използван за предотвратяване на CIM при пациенти с CRC от професор Yufei Yang, въз основа на мрежова фармакология и експериментално.

НОВА БИЛКА ЗА ЛЕЧЕНИЕБЪБРЕЧЕН ДЕФИЦИТ

Част 1 Ефективност на пероралната китайска медицина за миелосупресия, предизвикана от адювантна химиотерапия при пациенти с CRC: систематичен преглед и мета-анализ

Цел: Да се ​​оцени ефикасността на пероралната CM за превенция и лечение на миелосупресия, предизвикана от адювантна химиотерапия при пациенти с CRC.

Методи: Бяха претърсени 8 електронни бази данни от тяхното създаване до 20 януари 2021 г. Проверката и извличането на данни бяха извършени независимо от двама рецензенти. Двама изследователи оцениха методологичното качество на квалифицирани изследователи, използвайки инструмента Risk of Bias (ROB). RevMan 5.3 беше приложен за мета-анализа.

Резултати: Общо 37 документа бяха включени в проучването, всички от които бяха рандомизирани контролирани проучвания (RCT), включващи общо 2705 субекта. Резултатите от мета-анализа показват, че оралната CM значително намалява честотата на левкопения (RR=0.67, 95%CI[0.61,0.75], P<0.00001), hemoglobin         reduction         (RR=0.75,95%CI[0.63, 0.89], P<0.0009), thrombocytopenia                  (RR=0.71,95%CI[0.60,0.82], P<0.0001), neutropenia(RR=0.60,95%CI[0.46,0.79], P=0.0003), grade       3/4        leukopenia(RR= 

{{0}}.36,95%CI[0.21,0.64],P=0.04),степен 3 /4 намаление на хемоглобина (RR=0.36,95% CI[0.13, 0.95], P=0.04) и степен 3/4 неутропения (RR=0.38,95%CI[0.16,0.89], P=0.03), индуцирана от адювантна химиотерапия при пациенти с CRC. Пероралната CM обаче не може да намали честотата на еритропения , степен 3/4 тромбоцитопения или степен 3/4 еритропения. Освен това пероралната CM не изглежда полезна за увеличаване на броя на белите кръвни клетки (WBC), броя на червените кръвни клетки (RBC), тромбоцитите (PLT) или хемоглобина (HGB).

Заключения: Оралният CM може да бъде ефективен при намаляване на случаите на левкопения, анемия, тромбоцитопения, неутропения, степен 3/4 левкопения, степен 3/4 намаляване на хемоглобина и степен 3/4 неутропения, предизвикана от адювантна химиотерапия при пациенти с CRC. Може да се препоръча перорален CM за превенция и лечение на миелосупресия, причинена от адювантна химиотерапия при пациенти с колоректален рак.

Част 2 Проучване на характеристиките на чревната микробиота на пациенти със стадий II (висок риск)/II рак на дебелото черво и ще получат адювантна химиотерапия и диагностицирани с Ян дефицит на далак и бъбречен синдром въз основа на китайската медицина

Цел: Да се ​​изследват характеристиките на чревната микробиота при пациенти с рак на дебелото черво, които ще получат адювантна химиотерапия и са диагностицирани с дефицит на Янг на далак и бъбречен синдром (D група) или не (N група).

Методи: Субекти от болница Xiyuan на Китайската академия на китайските медицински науки, болница на провинция Дзянсу по китайска медицина и т.н. бяха наети и бяха разделени на две групи според диференциацията на синдрома на CM. Проби от изпражнения на квалифицирани пациенти бяха събрани и анализирани с помощта на 16s rDNA технология за секвениране с висока производителност.

Резултати: Квалифицирани са 32 пациенти, съответно 11 и 21 в D група и N група. Няма статистическа разлика между двете групи по отношение на пол, възраст или първично място на рак. Нямаше статистическа разлика между двете групи по отношение на богатството на общността, разнообразието или равномерността. Съотношението Firmicutes към Bacteroidetes (FBR) в D групата е по-ниско от това на N групата, въпреки че и Firmicutes, и Bacteroidetes са преобладаващите популации на двете групи. Enterobacteriaceae се увеличава в D групата, докато sutterellaceae се увеличава в N групата. Освен това, както Clostridia, така и Flavobacteriales се увеличават в групата D с

Статистическа разлика

Заключения: Няма разлика между дефицита на Янг на синдрома на далака и бъбреците и други синдроми на TCM при пациенти с рак на дебелото черво и преминаващи към адювантна химиотерапия по отношение на богатството, разнообразието или равномерността на общността. FBR може да се различава между двата синдрома на TCM. Sutterellaceae се увеличава в групата N, докато Enterobacteriaceae, clostridia и Flavobacteriales се увеличават в групата D.

Част 3 Изследване на молекулярния механизъм на QED при лечението на индуцирана от химиотерапия миелосупресия, базирано на мрежова фармакология

Цел: Да се ​​изследва молекулярният механизъм на QED при лечението на CIM.

Методи: (1) Основните съставки на QED бяха търсени във Фармакологичната база данни и платформа за анализ на традиционната китайска медицина (TCMSP) и Енциклопедията на традиционната китайска медицина (ETCM). (2) Качете потенциалните ефективни съставки в Swiss Target Prediction, за да получите целите. (3) Целите, свързани със заболяването, бяха получени чрез запитване в базата данни TTD, базата данни Gene Card, Drugbank Online и базата данни OMIM. (4) Анализът на Wayne беше използван за получаване на пресечната точка на целите, свързани с болестта на CIM, и потенциалните цели на QED. Беше извършена мрежа за взаимодействие протеин-протеин (PPI) в база данни с низове. (5) Анализът на генната онтология (GO) и анализът на пътя на обогатяване на енциклопедията на Киото ген и геном (KEGG) на ключови целеви протеини бяха проведени чрез платформата за данни Metascape. Бяха представени резултатите от GO и KEGG анализа.

Резултати: 15,6,10,10,11 и 49 съставки бяха идентифицирани като потенциални активни съставки на Hedysarum Multijugum Maxim (Huang qi), Angelicae Sinensis Radix (Dang GUI), Ecliptae Herba (Mo han lian), Fructus Ligustri Lucidi ( Nv zhen zi), Cuscutae Semen (Tu si zi) и Fructus Psoraleae (Bu gu zhi), съответно. Общо

575 мишени бяха определени като основни мишени на QED. 3205 мишени, свързани със заболяването на CIM, бяха получени с помощта на 4 бази данни. 347 мишени на QED биха могли да имат терапевтичен ефект върху CIM. Анализът на PPI мрежовата карта установи, че много цели могат да бъдат включени в този процес, като PIK3CA, PIK3R1, MAPK1, SRC, MAPK3, AKT1, STAT3.GO анализът и анализът на пътя на обогатяване на KEGG показа, че QED може да предотврати и/или лекува CIM чрез клетъчно стареене, PI3K-Akt сигнален път и NF-kB сигнализиране

пътека.

Заключения: QED може да повлияе на сигналния път на PI3K-Akt, клетъчното стареене и/или NF-kB сигналния път за предотвратяване и/или лечение на CIM.

Част 4 Установяване и сравнение на модел на индуцирана от химиотерапия миелосупресия при BALB/c мишки от 5-Fu/5-Fu плюс L-OHP

Цел: Да се ​​установи CIM модел в BALB/мишки, използвайки 5-Fu плюс L-OHP, и да се сравни новият модел с вече съществуващ модел, който използва 5-Fu само.

Методи: 100 мъжки BALB/c мишки бяха разделени на случаен принцип в 5 групи:5-Fu (висока доза)(MH)група(n=20),5-Fu(ниска доза) (ML)група(n=20),5-Fu+L-OHP

(висока доза)(DH)група (n=20),5-Fu+L-OHP (ниска доза)(DL)група(n=20)и контролна група(n =20) и миелосупресията е предизвикана с помощта на {{10}}Fu 180 mg/kg,5-Fu 150 mg/kg,5-Fu 150 mg/kg плюс L -OHP 7,2 mg/kg, 5-Fu 112,5 mg/kg плюс L-OHP 5,4 mg/kg и 0,9% разтвор на натриев хлорид чрез интраперитонеална инжекция, съответно. Измерват се общото състояние, теглото, левкоцитите, еритроцитите, PLT и HGB в периферната кръв. Ядрени клетки от костен мозък (BMNC) бяха тествани върху d6 и d13, след като мишките бяха умъртвени.

Резултати: (1) Смъртност: Има 4 и 6 мишки, които са умрели в MH групата и DH групата от d7 до d13, съответно. (2) Тегло: в сравнение с контролната група, теглото на мишките в моделните групи първо намалява, особено както в DH групата, така и в DL групата, а след това теглото се увеличава. (3) В сравнение с контролната група, както WBC, така и PLT в четирите моделни групи намаляват на d6(P<0.01).WBC of mice in the M-H group recovered to a level close to the control group(P>0.05), while the WBC of mice in the ML group, D-H group, and D-L group surpassed both the baseline and control group on d13, though the difference was not statistically significant(P>0.05).PLT на мишки в четирите моделни групи се увеличи значително и беше по-висок както от изходната, така и от контролната група (P<0.01). The experiment witnessed a sustained downward trend of RBC and HGB in the four model groups during the whole process. (4)Compared to the control group, BMNCs of mice in the four model groups decreased significantly(P< 0.01)on d6. There was an escalating trend of BMNCs on d13 compared to d6, though lower than the BMNCs in the control group(P<0.01).BMNCs of mice in the D-L group were more than those in the M-L group and D-H group(P<0.01).10vwW.

Заключения: (1) Всичките четири режима могат да индуцират BALB/c мишки да развият миелосупресия. (2) Смъртността в групата MH и групата DH е съответно над 30% и 50%, което показва прекомерна доза в двете групи. (3) Няма разлики между групата ML и групата DL по отношение на миелосупресия, тегло и смъртност.

Част 5 Експериментално изследване на ефекта и механизма на QED при лечението на индуцирана от химиотерапия миелосупресия

Цел: Да се ​​оцени ефективността на QED върху миелосупресията, предизвикана от 5-Fu, и да се изследва механизмът.

Методи: 120 мъжки BALB/c мишки бяха разделени на случаен принцип в 6 групи, с 20 мишки във всяка група: контролна група (C група), моделна група (M група), G-CSF група (G група), висока доза от групата QED(QED-H), средна доза от групата QED (QED-M) и ниска доза от групата QED (QED-M). Различни дози QED бяха дадени на QED-H групата, QED-M групата и QED-L групата от d-6 до d13 чрез интрагастрално приложение. На d0 миелосупресията се индуцира чрез инжектиране на 5-Fu във всичките 6 групи, с изключение на мишките в С групата. На мишките в групата G се прилага G-CSF чрез интраперитонеална инжекция от d1 до d13. На d-7,d0 и през ден след моделирането, мишките се претеглят и се взема кръвна проба с помощта на метода на маншета на опашката за тестване на WBC, RBC, HGB и PLT на мишки. 10 мишки във всяка група бяха евтаназирани съответно на d6 и d13. BMNCs, клетъчния цикъл на BMNCs и TNF-a/IL-  6/ROS/ Тествани са INF-y/SCF в плазмата. В допълнение, тъканите от костен мозък на 3 мишки в С групата, М групата и QED-M групата бяха събрани за изследване на експресията на p38, E2F и c-myc с помощта на Western blot и qPCR методи.

Резултати: (1):①На d6, в сравнение с група C, левкоцитите на групата M са намалели (p<0.01), WBC of both QED-H and QED-M group were higher than M group(P<0.01 or  P<0.05); on  d13, WBC  of  M  group  was  lower  than  C  group(P<0.01), WBC  of QED-M group was increased compared with the M group(P<0.05).②Both RBC and HGB of mice in the M group decreased compared with the C group both on d6 and d13 (P<0.05  or  P<0.01); there  was  no  difference  between  the  M  group  and  the  QED groups  in  terms  of RBC  or  HGB.③PLT  declined  in  the  M  group(P<0.01)on  d6

докато се увеличава ond13 в сравнение с групата C. Нямаше статистически значими 11

Предговор

Последната статистика за рака от Международната агенция за изследване на рака (IARC) показва, че през 2020 г. е имало 1,9 милиона нови случая на колоректален рак и 930000 смъртни случая от колоректален рак по света; имаше 560000 нови случая на колоректален рак в Китай и около 290000 смъртни случая от колоректален рак. Честотата и смъртността от колоректален рак все още нарастват в световен мащаб и в моята страна.

40%-50% от пациентите с колоректален рак са диагностицирани в ранен и среден стадий, при което радикалната хирургия е ключът към лечението. За пациенти с постоперативен патологичен стадий II (висок риск)/стадий III или пациенти след радикална операция за стадий IV, адювантната химиотерапия може допълнително да подобри преживяемостта без заболяване (DFS) и/или общата преживяемост (OS) на пациента. Въпреки това, потискането на костния мозък, причинено от адювантна химиотерапия, често води до намаляване на химиотерапевтичните лекарства, забавяне на химиотерапията или дори прекратяване. Хематопоетичните растежни фактори (HGF), които се използват широко в клиничната практика, могат да се използват за предотвратяване и лечение на потискане на костния мозък, причинено от химиотерапия, но някои пациенти имат слаб отговор на HGF. В същото време употребата на HGF може да доведе до нови клинични проблеми.

В моята страна превенцията и лечението на потискане на костния мозък, причинено от химиотерапия, от традиционната китайска медицина се приема от много клинични лекари и пациенти.

Въпреки това, повечето от съществуващите свързани клинични проучвания са проучвания с малка извадка. Ефикасността на традиционната китайска медицина при предотвратяване и лечение на потискане на костния мозък, причинено от химиотерапия, трябва да бъде обективно оценена и нейният механизъм на действие трябва да бъде допълнително проучен.

Професор Янг Юфей, преподавателят, обобщи дългогодишния си клиничен опит и въз основа на водещия принцип за „облагодетелстване на тези, които са увредени“ в Класическата вътрешна медицина на Жълтия император, формулира рецептата Qitu Erzhi за предотвратяване и лечение на потискане на костния мозък причинени от адювантна химиотерапия за колоректален рак чрез укрепване на далака и бъбреците. Клиничното приложение има значителна ефикасност. Механизмът на действие на рецептата Qitu Erzhi обаче все още не е ясен.

Това проучване (1) използва систематичен преглед и мета-анализ, за ​​да оцени ефикасността на традиционната китайска медицина при предотвратяване и лечение на потискане на костния мозък, причинено от адювантна химиотерапия за колоректален рак, за да предостави медицина, основана на доказателства за клиничната практика; (2) предварително изследва характеристиките на разпределението на чревната флора при пациенти с дефицит на далак и бъбрек Ян след радикална операция за стадий II (висок риск)/стадий III на рак на дебелото черво; (3) изследва механизма за ефикасност на рецептата Qitu Erzhi при предотвратяване и лечение на потискане на костния мозък, причинено от химиотерапия, базирано на мрежова фармакология; (4) изследва метода на приложение и оптималната доза 5-Fu в комбинация с животински модел на индуцирано от оксалиплатин потискане на костния мозък; (5) изследва и провери механизма на ефикасност на предписанието Qitu Erzhi при предотвратяване и лечение на 5-предизвикано от Fu потискане на костния мозък чрез експерименти с животни.

Това проучване е проведено въз основа на ключовия проект на Националната ключова научноизследователска и развойна програма на Министерството на науката и технологиите на Китайската народна република „Модернизиране на изследванията на традиционната китайска медицина“ „Изследване на синергичния ефект и механизма на последователно предписване на ободряващ далак и тонизиращ бъбрек при адювантна химиотерапия на рак на дебелото черво (2017YFC1700604)“ и Националната природонаучна фондация на Китай „Проучване на механизма на последователна терапия на ободряващ далак и тонизиращ бъбрек при подобряване на индуцирана от химиотерапия храносмилателен тракт и токсичност на костния мозък въз основа на стволови клетки регенерация, регулирана от Wnt/-катенин (8197142427)".