Антилипидна пероксидация и анти-радиационни ефекти на общия гликозид на Cistanche

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, Mu Hu Yati, Du Niansheng

[Резюме]:Общ гликозид на Cistanche(GCs) може значително да повиши SOD активността на миши червени кръвни клетки, да намали серумното съдържание на MDA, да увеличи съдържанието на ДНК и РНК в чернодробните и бъбречните тъкани и може значително да насърчи увреждането, причинено от⁶⁰Coоблъчване. Възстановяването на активността на SOD в миши червени кръвни клетки и съдържанието на нуклеинова киселина в далака намалява съдържанието на MDA в черния дроб, което предполага, че защитният ефект на GCs (Тотален гликозид наЦистанче) върху нуклеиновите киселини ирадиозащитае тясно свързано с негоантилипидна пероксидацияефект.

Ключови думи:Общ гликозид на Cistanche, ДНК, РНК, антилипидна пероксидация, радиациязащита

Цистанчеима ефект на подхранване на жизнената енергия, подхранваща есенция и укрепване на Ян. В древните предписания против стареене и удължаване на времето от миналото вероятността за поява е на второ място след женшена. Съвременната литература съобщава за товаЦистанчеможе да подобри имунната функция на тялото (1); насърчаване на паметта и подобряване на интелигентността; регулира нервната система, подобрява сексуалната функция и предотвратява стареенето (2). Суровият препарат наЦистанчеможе да повиши SOD активността на миши червени кръвни клетки; значително намаляване на съдържанието на миокарден липофусцин (3); подобряват способността за синтез на ДНК на животни с дефицит на Ян и значително удължават живота на плодовите мушици (4). Въпреки това, няма доклад за фармакологичните ефекти на GC (Общ гликозид на Cistanche) у нас и в чужбина. Това проучване има за цел да проучи защитния ефект на GC (Общ гликозид на Cistanche) върху нуклеинови киселини,радиациязащита, иантилипиденпероксидация.

Общ гликозид на Cistancheантилипидна пероксидация

1 Материал и методи

1.1 Лекарства и реактиви

Общ гликозид на Cistanche, извлечено отЦистанче Салса(Cistanche salsa CAMey) от Северен Синдзян, основната съставка еPhnylethanoildГликозиднаЦистанче, а методът за екстракция се основава на японската литература (Патентована публикация (A) Sho 63-198627) Proceeding, предоставена от професор Du Niansheng, Катедра по растителна химия, Катедра по фармация. Тиобарбитурова киселина, произведена от Shanghai Reagent No. 1 Factory; Стандартните продукти на ДНК и РНК бяха предоставени от Shanghai Milk Company и Института по биохимия, Китайската академия на науките, и двата бяха тествани за чистота съгласно метода за определяне на фосфор [5].

1.2 Ефект на GC срещу липидна пероксидация (Общ гликозид на Cistanche)

110 NIH мишки, тежащи (22,5 ± 2,1) g, както мъжки, така и женски, бяха разделени на случаен принцип в 4 групи: на контролната група беше даден нормален физиологичен разтвор (NS) 20 ml·kg -1·d-1 сонда (ig); GCs (Общ гликозид на Cistanche) група, GC (Общ гликозид на Cistanche) 62,5, 125, 250 mg·kg -1 ден -1, ig бяха дадени за 18 дни всеки, след последното приложение за 2 часа, очните ябълки бяха извадени и 50 ul кръв бяха взети на тествайте SOD в червените кръвни клетки Vitality; останалата кръв за приготвяне на серум, измерване на серумното съдържание на MDA; бързо вземете сърцето, черния дроб, мозъка, бъбреците и други органи, изплакнете с лед нормален физиологичен разтвор, пригответе всеки тъканен хомогенат, екстрактът от SOD на червените кръвни клетки се приготвя съгласно литературата (6). Приготвяне на ДНК и РНК екстракт: вземете сърцето, претеглете черния дроб, мозъка и бъбречните органи, нарежете ги в мелница, добавете 2 ml, 15 процента трихлороцетна киселина, смилайте го в хомогенат в баня с ледена вода и прехвърлете в епруветка за центрофугиране , изплакнете купата на мелницата с 2 ml 15 процента трихлороцетна киселина общо 3 пъти, прехвърлете цялата промивна течност в центрофужната епруветка, центрофугирайте 4000 r·min-1 за 10 минути, изхвърлете супернатантата. След добавяне на 2 ml абсолютен етанол към утайката и смесване, поставете я във водна баня при 90 градуса и я загрейте за 2 минути. След охлаждане се центрофугира при 4000 r·min -1 за 10 минути и супернатантата се изхвърля. Добавете 8 ml 5 процента трихлороцетна киселина към утайката и разбъркайте добре, поставете я във водна баня при 90 градуса за 15 минути, центрофугирайте след охлаждане, 4000 r·min -1 за 10 минути, изсипете супернатантата в 10 ml мерителна колба и добавете 1 ml към утайката 5 процента трихлороцетна киселина, разбъркайте добре, центрофугирайте, 4000r·min-1, 5 минути и след това изсипете супернатантата в мерителна колба от 10 ml, разредете обема с дестилирана вода и разбъркайте добре. Подготвени са ДНК и РНК екстракти. Определяне на биохимични показатели: активността на SOD на червените кръвни клетки се измерва по метода на пирогалолова автооксидация [7]; серумното съдържание на M DA се измерва чрез метода на оцветяване с TBA [8]; Екстрактите от ДНК и РНК бяха измерени съответно чрез метод за оцветяване с дифениламин и орцинол. Съдържанието на ДНК и РНК във всяка тъкан беше измерено чрез колориметрия (5).

Защитен ефект на GCs (Общ гликозид на Cistanche) Нарадиациязащита

1.3 Антирадиационният ефект на GCs (Общ гликозид на Cistanche)

120 NIH мишки с тегло (21,0 ± 2,2) g, както мъжки, така и женски, бяха разделени на случаен принцип в 4 групи: нормална група, NS 20 ml kg -1 ден-1 за 18 дни; останалите 90 мишки са получили⁶⁰Ко гама лъчи веднъж Цяло тялооблъчване, дозата на експозиция е 6 Gy и след това разделена на групи наранявания: NS 20 ml·kg -1·ден-1 веднага следоблъчване; GCs (Общ гликозид на Cistanche) група за лечение: 125 и 250 mg·kg съответно следоблъчване-1·d-1, 18 дни всеки, 2 часа след последното приложение на всяка група, активността на SOD в червените кръвни клетки, чернодробното съдържание на MDA, съдържанието на ДНК и РНК в тъканите на черния дроб и далака и черен дроб и далак се определят съгласно гореспоменатите експериментални методи. Наблюдение на морфологията на тъканите. Всички данни са изразени като x ±s и обработката на t-теста се извършва между групите.

2 резултата

2.1 Ефект на GCs (общ гликозид на Cistanche) срещу липидна пероксидация

2.1.1 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху активността на SOD в еритроцитите и серумното съдържание на MDA при нормални мишки:Както може да се види от таблица 1, GC (Общ гликозид на Cistanche) 62.5 mg·kg -1 group is compared with the control group There was no difference (P>0.05). GCs (Tотален гликозид на Cistanche) 125, 250 mg·kg -1 група може значително да увеличи активността на SOD в червените кръвни клетки (P<0.01) and="" reduce="" the="" serum="" mda="" content="" (p=""><>

Таблица 1: Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху активността на SOD в еритроцитите и серумното съдържание на M DA при нормални мишки

2.1.2 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на ДНК на различни органи при нормални мишки:Както може да се види от Таблица 2, в сравнение с контролната група, няма значителна разлика вДНКcontent of the heart and brain in each administration group (P>0.05) ). GCs (Общ гликозид на Cistanche) 62,5 mg·kg -1 група няма ефект върху съдържанието на ДНК в черния дроб и бъбреците; GCs (Общ гликозид на Cistanche) 125 mg·kg -1 група и 250 mg·kg -1 група имат чернодробно ДНК съдържание в сравнение с контролната група, увеличено с 9,6 процента (P<0.05), 14.2%="" (p=""><0.01); the="" content="" of="" dna="" in="" the="" kidney="" increased="" by="" 15.4%,="" 16.0%,="" respectively,="" compared="" with="" the="" control="" group="" (p=""><>

Таблица 2 Ефекти на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на ДНК на различни органи при нормални мишки

2.1.3 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на РНК в различни органи при нормални мишки:As can be seen from Table 3, compared with the control group, there was no significant difference in the RNA content of the heart and brain in each administration group (P>0.05) ). GCs (Общ гликозид на Cistanche) 62,5 mg·kg -1 група няма ефект върху съдържанието на РНК в черния дроб и бъбреците; съдържанието на чернодробна РНК в GCs (Общ гликозид на Cistanche) 125 и 250 mg·kg -1 група се е увеличила с 18,1 процента и 26,2 съответно в сравнение с контролната група. процента (всички P<0.01); compared="" with="" the="" control="" group,="" the="" rna="" content="" of="" the="" kidney="" increased="" by="" 20.9%="" and="" 25.4%="" respectively="" (all=""><>

Таблица 3 Ефекти на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на РНК на различни органи при нормални мишки

2.2 Антирадиационен ефект на GCs (общ гликозид на Cistanche)

2.2.1 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху активността на SOD в еритроцитите и съдържанието на M DA в черния дроб на облъчени мишки:Както може да се види от таблица 4, активността на SOD в еритроцитите в увредената група е с 46,8% по-ниска от тази в нормалната група (P<0.01), compared="" with="" the="" injury="" group,="" the="" gcs="">Общ гликозид на Cistanche) 125 и 250 mg·kg -1 групата на лечение се е увеличила съответно с 52,1 процента и 52,4 процента (P<0.01). compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" liver="" mda="" content="" of="" the="" injury="" group="" was="" significantly="" increased="" by="" 24.3%="" (p=""><0.01), and="" the="" liver="" mda="" content="" of="" each="" treatment="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" injury="" group="" by="" 18.4%,="" 17.9%=""><0.01), slightly="" higher="" than="" that="" of="" the="" normal="" group="" (p=""> 0.05).

2.2.2 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху черния дробДНКи РНК съдържание на облъчени мишки: The liver DNA and RNA content of the injured group was lower than that of the normal group, but there was no significant difference (P>0.05); the liver DNA of the treatment group Although the RNA content increased slightly compared with the injury group, the difference was not significant (P>0.05).

Таблица 4 Ефект на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху активността на SOD в червените кръвни клетки и съдържанието на MDA в черния дроб на облъчени мишки

2.2.3 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на ДНК и РНК в далака на облъчени мишки:Таблица 5 показва, че съдържанието на ДНК в далака на увредената група е по-ниско от това на нормалната група с 15,5 процента (P<0.01), and="" each="" treatment="" group="" was="" more="" damaged="" the="" group="" increased="" by="" 14.9%="" and="" 15.2%="" respectively=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p="">0.05). Съдържанието на РНК в далака в увредената група е с 18,6% по-ниско от това на нормалната група (P<0.05). compared="" with="" the="" injured="" group,="" each="" treatment="" group="" increased="" by="" 15.0%="" and="" 20.3%="" (p=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p=""> 0.05).

Таблица 5 Ефекти на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху съдържанието на ДНК и РНК в далака на облъчени мишки

2.2.4 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху морфологията на далака на облъчени мишки:Фигура 1 по-долу показва, че в увредената група и в нормалната група, оцветяването на ядрото в бялата пулпа на далака и телцата на далака е по-светло, съдържанието на ДНК е намалено, оцветяването на цитоплазмата е по-светло и съдържанието на РНК е значително по-ниско. В сравнение с GCs (общ гликозид на Cistanche) 125 mg·kg -1 група и групата с увредени, цялостната структура на далака е близка до нормалната. Ядрото на корпускулата на далака беше оцветено в наситено лилаво, съдържанието на ДНК беше значително увеличено, цитоплазмата беше оцветена в наситено червено и съдържанието на РНК беше значително повишено.

Фигура 1 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху морфологията на далака на облъчени мишки

2.2.5 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху морфологията на чернодробните тъкани на облъчени мишки:Фигура 2 показва, че групата с нараняване има по-светло оцветяване на хепатоцитните ядра около порталната област на чернодробния лобул, отколкото нормалната група, съдържанието на ДНК е значително намалено и цитоплазмата е оцветена Чернодробните клетки стават по-светли и РНК частиците на чернодробните клетки са значително намалени. GCs (Общ гликозид на Cistanche) 125 mg·kg -1 групата на лечение е по-тъмно лилава в ядрото на хепатоцита около чернодробната лобуларна портална зона на групата на нараняване и съдържанието на ДНК е значително повишено, а цитоплазмата е оцветена в тъмно червено, РНК Съдържанието се е увеличило значително.

3 Дискусия

Активността на SOD на човешките еритроцити намалява значително с възрастта и серумните пероксиди: съдържанието постепенно се увеличава [9]. В тази статия беше отбелязано, че GC (Общ гликозид на Cistanche) групата значително повишава активността на SOD в миши червени кръвни клетки, намалява серумното съдържание на MDA и увеличава съдържанието на РНК в тъканта на черния дроб и бъбреците, което показва, че GCs (Общ гликозид на Cistanche) може да допълни потреблението на SOD или да намали намаляването на активността на SOD, като по този начин засили способността за отстраняване на ендогенни свободни радикали, забавяйки скоростта налипидна пероксидацияв тялото, повишавайки антиоксидантния капацитет и намалявайки увреждането на свободните радикали върху нуклеиновата киселина и други биологични макромолекули, предизвиквайки защитния ефект на CGS (Общ гликозид на Cistanche) върху нуклеиновите киселини е свързано с неговатаантилипидна пероксидацияефект. Това също предполага, че GC (Общ гликозид на Cistanche) може да има ефект на насърчаване на синтеза на нуклеинови киселини и забавяне на разграждането и разрушаването на нуклеиновите киселини и допълнително насърчаване на протеиновия синтез, като по този начин помага за производството на имунни вещества, ускорява възстановяването и регенерацията на тъканните клетки и подобрява защитата на тялото способности [6], неговият механизъм на действие трябва да бъде проучен в дълбочина. В литературата се съобщава, че подобряването на имунната функция на тялото може да забави преждевременното стареене, а естеството на стареенето е тясно свързано с метаболизма на нуклеиновата киселина [10]. Следователно, в комбинация сантилипидна пероксидацияи имуноусилващи ефекти на GCs (Tотален гликозид на Cistanche), това предполага, че GC (Общ гликозид на Cistanche) иматантилипидна пероксидацияи ефекти за подобряване на имунната система.Обща сумаГликозид на Cistancheима ефект против стареене.

Фигура 2 Ефектът на GCs (общ гликозид на Cistanche) върху морфологията на чернодробната тъкан на облъчени мишки

След като тялото се облъчи с⁶⁰Co, могат да бъдат произведени голям брой токсични свободни кислородни радикали, причинявайки силналипидна пероксидацияреакция, разрушаваща нуклеинови киселини, протеини, ензими и други биологични макромолекули и причиняваща увреждане на клетките и тъканите [11]. Вижда се, че увреждащото действие нарадиацияе тясно свързано слипидна пероксидация. GCs(Общ гликозид на Cistanche) групата за лечение в този експеримент може значително да насърчи възстановяването на активността на SOD в червените кръвни клетки на облъчените мишки и възстановяването на съдържанието на нуклеинова киселина в далака и да инхибира черния дроблипидна пероксидация. Формиране. Това показва, черадиациязащитен ефект на GC (Общ гликозид на Cistanche) е важно за предотвратяване на щетите от свободните радикали. Хистоморфологията също показва, че GCs (Общ гликозид на Cistanche) може да възстанови структурата на черния дроб и далака, увредени следоблъчванеи може да насърчи възстановяването на нуклеинови киселини, което предполага, че радиопротективният ефект на GCs (Общ гликозид на Cistanche) Също така еантилипиден Пероксидацияе свързано и неговият механизъм трябва да бъде допълнително проучен.

4 Използвана литература

1. Гао Хайцян. Изследване на китайската патентна медицина, 1984; 11 (11): 34

2. Sato Tiao и др. Чуждестранна медицина, китайска медицина и секция по китайска медицина, 1987 г.; 9(6): 33

3. Li Qiaoru и др. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine, 1990; (11): 22

4. Yu Nancai и др. Китайски вестник за традиционна китайска медицина, 1990 г.; 15(6): 22

5. Zhang Longxiang и др. Пекин: People's Education Press, 1984: 217

6. Ding Kexiang и др. Вестник по геронтология, 1987; 7(2): 42

7. Zhou GL и др. Biochemi Biophys, 1986; 4:71

8. Chen Shunzhong и др. JC lin Lab Tech, 1984; 2(4): 7

9. Wu Li и др. Вестник по геронтология, 1990 г.; 10(6):353

10. Лю Джунда. Вестник по геронтология, 1993; 13(6): 375

11. Kergonon JF и др. Biochimi, 1981;63:555