Три неоплазми при евразийска видра (Lutra Lutra): злокачествен меланом, трихобластом и аденом на млечната жлеза
Apr 14, 2023
Резюме
18--годишна женска евразийска видра умря от отпадъци. Аутопсията разкри кожни образувания по носа и гърдите, подкожни образувания по корема и множество възли в черния дроб и белите дробове. Злокачествен меланом е открит в назалната кожна маса и е метастазирал в черния дроб, белите дробове, бъбреците, надбъбречните жлези, млечните жлези и левия мандибуларен лимфен възел. Туморните клетки бяха белязани за вълнови протеини, меланом и S100. кожната маса на гръдния кош се състоеше от вретеновидни туморни епителни клетки и беше диагностицирана като трихобластом. Подкожна коремна маса се наблюдава като аденом на млечната жлеза. Това е първият доклад за три тумора, първичен злокачествен меланом, трихобластом и аденом на млечната жлеза, при евразийска видра.
Ключови думи
Евразийска видра, злокачествен меланом, вретеновидноклетъчен трихобластом, тройни неоплазми,Cistanche добавки.

Щракнете тук, за да знаетеПолзите от Cistanche
Видрите са класифицирани като подсемейство видри от семейство Mustelidae и са разпространени в няколко страни, особено евразийската видра (Lutra Lutra) е вид видра, който пътува из Европа, Азия и Африка. Евразийската видра живее в широк спектър от водни местообитания и има средна продължителност на живота около 17 години. Няколко вида тумори са описани в Lutrinae, като тумори на гладките мускули и базалноклетъчни карциноми. При евразийската видра се съобщава за злокачествен меланом, чревен лимфом и хепатоцелуларен аденом. По-рано докладваните злокачествени меланоми включват множество подкожни възли, които се появяват в дорзалната дясна и лява гръдна област, метастазиращи в лимфни възли и черния дроб. Множество първични тумори са докладвани само при една морска видра. Тук докладваме случай на злокачествен меланом с едновременен трихобластом и аденом на млечната жлеза при евразийска видра.
{{0}}-годишна женска евразийска видра, родена в зоологическа градина в Япония и транспортирана до друга зоологическа градина в Миязаки, беше наблюдавана с подкожна коремна маса на 16-годишна възраст. Две години по-късно се наблюдава зачервен нос и образуване на кожа на гръдния кош. 2 месеца по-късно бяха извършени биопсии на назалната маса (2,1 × 2,6 cm) и левия мандибуларен лимфен възел (2,2 × 3.0 cm) на анестезираното животно и беше извършена аспирационна цитология с тънка игла на гръдния кош кожна маса (2,2 × 2,2 cm) и подкожна коремна маса (3,8 × 4,0 cm). Три дни след биопсията животното развива анорексия и хипермобилност и умира 6 дни по-късно. Видрата беше прехвърлена в отдела по ветеринарна патология на университета Миядзаки за аутопсия.
Аутопсията разкри неправилна черна корпоративна маса (2,3 x 2,8 cm) кървене и язви по кожата на носа, почти покриващи повърхността, покриваща носа и прилепнали към кожата (Фигура 1). Масата на режещата повърхност беше сива и черна на цвят, а границата между твърдата маса и заобикалящата нормална тъкан беше неясна (Фигура 1). Не се наблюдава проникване на кожата на носа в развиващата се носна или устна кухина. Кожни и подкожни маси се наблюдават от страничните и вентралните страни на левия гръден кош с диаметри съответно 2,5 × 3,5 cm и 4.0 × 4.0 cm. Вижда се тежък подкожен оток в периферната област на гръдната маса и масата беше кистозна в тъмносив цвят върху повърхността на среза. Коремната подкожна маса беше кистозна, съдържаше кръв и беше бяла върху повърхността на среза с папиларни издатини. Масата имаше ясни граници със заобикалящата нормална тъкан. Левият долночелюстен лимфен възел беше увеличен (3,5 × 4,5 cm) и имаше твърда сиво-бяла повърхност на срязване. Имаше четири възела от лявата страна на черния дроб, 7.{{20}} × 9.0, 2,5 × 3.0, 2.{{3{ {34}}}} × 2,0 и 1,5 × 1,0 cm в диаметър, които бяха меки и тъмночервени или тъмнозелени. Лобовете са съответно опашати, десни средни и квадратни. Обвивката на левия чернодробен възел беше грапава и се виждаха фибрин и кръвни съсиреци. Всички възли бяха тъмночервено плътно в разрез с кръвоизлив в околните области и ясни граници между нодулите и околната нормална тъкан. В белите дробове се наблюдават множество бели до черни възли с диаметър 1 ~ 5 mm. в коремната кухина имаше хеморагичен асцит (~250 ml). Може да се наблюдава бледност на лигавицата.

Ефектите на Cistanche
Пробите бяха събрани, фиксирани в 10 процента неутрален буфериран формалин, рутинно вградени в парафин, 3 μm срезове и оцветени с хематоксилин и еозин (HE). Цитокератин-специфични първични антитела (клон AE1/AE3; Dako, Glostrup, Дания; подготвени за употреба), виментин (клон V9; Dako; подготвени за употреба), мелан А (клон A103; Dako; разреждане 1 /50), меланом (клон PNL2; Dako; готов за употреба) и S100 (поликлонален. Dako; готов за употреба). Антигените се получават чрез инкубиране на цитокератин, виментин и S100 с цитратен буфер (рН 6.0) или меланин а и меланома с Tris-EDTA буфер (рН 9.0) в продължение на 10 минути при 105 градуса. Histofine Simple Stain MAX-POTM (Multi) (Nichirei Bioscience, Токио, Япония) се използва за всички първични антитела. Хромогенният агент беше 0,05 процента 3,3'-диаминобензодиазин (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) и 0,03 процента водороден пероксид в трис-солнокиселинния буфер. Хематоксилинът се използва като противооцветяващ агент. Кръстосаната реактивност на първичното антитяло с видра се потвърждава чрез анализ на носната тъкан и изотип IgG в този случай.
Микроскопско изследване на назална дермална маса, черен дроб, бял дроб, бъбрек, надбъбречна жлеза, гърда и ляв мандибуларен лимфен възел разкрива туморна меланоцитна хиперплазия. Туморни клетки бяха открити в дермата, нахлувайки в околната нормална тъкан без капсула, прикрепени към назалното дермално-епидермално съединение (Фигура 2А). Морфологията на туморните клетки е разделена на два типа: епителиоидна или полигонална и вретеновидна. Епителиоидни или полигонални туморни клетки са подредени в подобни на слуз снопове, въжета или гнезда, с единични двойноовални ядра, единични изпъкнали нуклеоли и оскъдна цитоплазма (Фигура 2В). Туморните клетки с вретеновидна форма бяха подредени в потокови снопове и съдържаха едно удължено вретеновидно ядро и едно малко ядро (Фигура 2C). В първичните и метастатичните тъкани няколко епителиоидни или полигонални туморни клетки съдържат меланин, докато вретеновидни туморни клетки не съдържат меланин. Клетъчната анизотропия е умерена и нуклеоплазменото съотношение е високо. Честотата на митотичния знак е 2 или 3/полета с голямо увеличение. Имаше огнища на туморни клетки в черния дроб, белите дробове, бъбреците, надбъбречните жлези и гърдата и огнища на туморни клетки в лимфните или кръвоносните съдове (Фигура 3). Нормалната структура на лимфните възли беше заменена от хиперплазия на туморни клетки и некроза в левия мандибуларен лимфен възел. четири чернодробни възли и няколко белодробни възли бяха доминирани от туморна меланоцитна хиперплазия и кръвоизлив в чернодробните възли. В назалната кожна маса, черния дроб, белите дробове, бъбреците, надбъбречните жлези, гърдата и левите мандибуларни лимфни възли, всички туморни клетки са положителни за виментин, епителиоидните или полигоналните туморни клетки са положителни за меланома и S100 отрицателни (Фигури 3 и 4А). Вретеновидните туморни клетки в назалната кожна маса са S100 положителни и меланомни отрицателни (Фигура 4В). Нито един тип клетка не е маркиран с цитокератин и меланин А. Нормалните меланоцити в кожата в този случай са положителни за вълнови протеини, меланом и меланин А и отрицателни за S100.

Екстракт от цисатанче
Кожната маса на гръдния кош се състои от вретеновидни до кръгли епителни туморни клетки, които се простират в подкожната тъкан в дермата. Туморните клетки образуват множество кисти в завъртяна подредба, недиференцирани спрямо триадата на космения фоликул, кисти от кератинов рог и кератинизация на косата (Фигури 5A и 5B). Клетките имаха малко цитоплазма и съдържаха само малко количество меланин, а ядрата бяха удължени и с форма на совалка. Дегенерирали възпалителни клетки и некротични остатъци се наблюдават в центъра на кистите, докато богати на меланин макрофаги се наблюдават в интерстициалния и кистозния център. Туморните клетки бяха белязани с цитокератин, но не и с други антитела (Фигура 5С). Въз основа на хистологичните и имунохистохимичните находки беше поставена диагноза космат бластом на вретеновидни клетки.
Подкожна коремна маса, показваща папиларна хиперплазия на епитела на гърдата в подкожната тъкан. Масата беше капсулирана, добре дефинирана и не нахлуваше в околната нормална тъкан. При сквамозната метаплазия туморните клетки показват папиларна или тубулна хиперплазия (Фигура 6А). Клетъчната анизотропия е минимална и митотичните фигури са редки. Туморните клетки са положителни за кератин и отрицателни за вълнови протеини (Фигура 6В). Около туморната тъкан се виждат нормални млечни жлези. Следователно коремната маса е диагностицирана като обикновен аденом на млечната жлеза с плоскоклетъчна метаплазия.
Въпреки че са докладвани други видове тумори при евразийските видри, трихобластома и аденом на млечната жлеза не са докладвани. В допълнение, множество тумори при видри са много редки, въпреки че холангиокарцином, тумор на гладката мускулатура и феохромоцитом са докладвани при морски видри. В настоящия случай са наблюдавани три тумора. Тъй като това е първият доклад за трихобластом или аденом на млечната жлеза при евразийска видра, появата на такъв случай е от значение.
Меланомът произлиза от меланоцитите и е един от туморите на кожата на косата, устата, очите и краката. Съобщава се, че те са често срещани при няколко домашни животни като кучета, котки, коне и прасета, както и при диви животни като рогатия кон (Connochaetes taurinus), белия тигър (Panthera tigris) и маймуната резус ( Macaca mulatta). При кучетата меланомите имат клетъчни варианти, като балонни и вретеновидни видове. Няколко критерия за злокачественост на меланома при кучета са добре известни, например, митотични цифри над 3/10 високо на поле показват злокачествено заболяване. В предишен случай на злокачествен меланом при 11--годишна евразийска видра, туморните клетки се представят като подкожни възли в десния и левия гръдни прешлени и метастазират в лимфните възли и черния дроб. Злокачественият меланом при животните може да метастазира в локални лимфни възли и органи чрез лимфни съдове. В настоящия случай първични туморни клетки са открити в назалната маса и метастазират в черния дроб, белите дробове, бъбреците, надбъбречната жлеза, гърдата и левия мандибуларен лимфен възел чрез лимфни или кръвоносни съдове. Туморните меланоцити може първоначално да са метастазирали в левия мандибуларен лимфен възел, тъй като структурата на лимфния възел е почти напълно заменена от туморни клетки. Тъй като животното е имало хеморагичен асцит и множество ронливи чернодробни възли, причината за смъртта може да е анемия, дължаща се на кръвоизлив от чернодробните възли и изтощение поради кахексия, причинена от злокачественото заболяване.

Herba Cistanche
Меланоцитните тумори при животни обикновено реагират с вълнови протеини, меланин А, PNL2, S100, TRP-1 и TRP-2. При хората HMB-45 и маркерите за тирозиназа също са полезни. В настоящия случай имуномаркирането с виментин, меланом и S100 е извършено върху туморни меланоцити, но не и върху меланин А. От друга страна, нормалните меланоцити са положителни както за меланом, така и за меланин А. Въз основа на тези резултати подозираме, че меланин А експресията в меланоцитите на тумора на видрата може да бъде намалена или загубена. При хора и кучета меланин А е по-малко чувствителен към няколко вида меланом в сравнение с други меланоцитни маркери. Използвайки няколко антитела, като вълнов протеин, меланом А, меланом и S100, може да е важно да се диагностицира злокачествен меланом при евразийските видри.
Вретеноклетъчен трихобластом, класифициран преди това като базалноклетъчен тумор при котки, се наблюдава най-често при котки. В настоящия случай морфологията на туморните клетки на гръдната кожна маса включва дълги вретеновидни ядра с оскъдна цитоплазма и само малко количество меланин. В допълнение, туморът проявява мултифокални кистозни лезии и вид, подобен на вихър. Тези констатации са подобни на тези на вретеновидноклетъчния тип на трихобластома при котки. Тъй като в този случай не се наблюдава трохоидална диференциация на космените фоликули, кератинови рогови кисти и кератинизация на косата, се изключва възможността за епителиом на косата.
Туморите на млечната жлеза са чести при женските домашни животни, но рядко срещани при видрите. В този случай туморът се появява в подкожната област на корема. Епителните туморни клетки между нормалните млечни жлези не показват никакви злокачествени характеристики. Нова класификация на тумори на млечната жлеза при кучета [6] беше докладвана от Goldschmidt et al. Въз основа на горните находки и диагностични критерии беше поставена диагноза аденом на млечната жлеза
Приложения



Препратки
1. Acharjyo, LN и Mishra, CG 1983. Бележка за дълголетието на два вида индийски видри в плен. J. Bombay Nat. Хист. Soc. 80: 636.
2. Adetunji, SA, Krecek, RC, O'Dell, N., Prozesky, L., Steyl, J. и Arenas-Gamboa, AM 2018. Меланом при златни и кралски гну (Connochaetes taurinus). J. Zoo Wildl. Med. 49: 134–142.
3. Bae, IH, Pakhrin, B., Jee, H., Shin, NS и Kim, DY 2007. Хепатоцелуларен аденом при евразийска видра (Lutra lutra). J. Vet. Sci. 8: 103–105.
4. Bartlett, SL, Imai, DM, Trnpkiewicz, JG, Garner, MM, Ogasawara, S., Stokol, T., Kiupel, M., Abou-Madi, N. и Kollias, GV 2010. Чревен лимфом на гранулирани лимфоцити при рибар (Martes pennanti) и евразийска видра (Lutra lutra). J. Zoo Wildl. Med. 41: 309–315.
5. Фрейзър, К. С., Херън, Ей Джей, Хайнс, ME 2-ри. и Altman, NH 1993. Имунохистохимични и морфологични характеристики на интрадермален невоцелуларен невус (доброкачествени интрадермални съединителни меланоцити) при маймуна резус (Macaca mulatta). ветеринарен лекар Патол. 30: 306–308.
6. Goldschmidt, M., Peña, L., Rasotto, R. и Zappulli, V. 2011. Класификация и степенуване на тумори на млечната жлеза при кучета. ветеринарен лекар Патол. 48: 117–131.
7. Goldschmidt, MH и Goldschmidt, KH 2017. Епителни и меланоцитни тумори на кожата. стр. 88–141. В: Тумори при домашни животни, 5-то изд. (Meuten, изд. DJ), John Wiley & Sons, Ames.
8. Goldschmidt, MH, Dunstan, RW, Stannard, AA, Tscharner, CV, Walder, EJ и Yager, JA 1998. Хистологична класификация на епителни и меланоцитни тумори на кожата на домашни животни. стр. 18–101. В: Международна хистологична класификация на туморите на домашни животни на Световната здравна организация, 2-ро издание, том. 3 (Шулман, изд. FY), Институт по патология на въоръжените сили, Вашингтон, окръг Колумбия
9. Jungbluth, AA 2008. Серологични реагенти за имунохистохимичен анализ на метастази на меланома в сентинелни лимфни възли. Семин. диагностика Патол. 25: 120–125.
10. Mason, CF и Macdonald, SM 1986. LUTRA LUTRA. стр. 7–45. В: Видри: Екология и опазване (Mason, CF ed.), Cambridge University Press, Cambridge.
11. Накамура, К., Танимура, Х., Кацураги, К., Шибахара, Т. и Кадота, К. 2002. Диференциран базалноклетъчен карцином при капска видра без нокти (Aonyx capensis). J. Comp. Патол. 127: 223–227.
12. Ramos-Vara, JA и Miller, MA 2011. Имунохистохимична идентификация на кучешки меланоцитни неоплазми с антитела срещу меланоцитен антиген PNL2 и тирозиназа: сравнение с Melan A. Vet. Патол. 48: 443–450.
13. Rao, AT, Achaejyo, LN и Mohanty, AK 1991. Злокачествен меланом при бял тигър. Indian J. Vet. Патол. 15: 113–114.
14. Smedley, RC, Spangler, WL, Esplin, DG, Kitchell, BE, Bergman, PJ, Ho, HY, Bergin, IL и Kiupel, M. 2011. Прогностични маркери за кучешки меланоцитни неоплазми: сравнителен преглед на литературата и цели за бъдещо разследване. ветеринарен лекар Патол. 48: 54–72.
15. Smith, SH, Goldschmidt, MH и McManus, PM 2002. Сравнителен преглед на меланоцитните неоплазми. ветеринарен лекар Патол. 39: 651–678.
16. Spangler, WL и Kass, PH 2006. Хистологичните и епидемиологични основи за прогностични съображения при кучешка меланоцитна неоплазия. ветеринарен лекар Патол. 43: 136–149.
17. Stetzer, E., Williams, TD и Nightingale, JW 1981. Холангиоцелуларен аденокарцином, лейомиома и феохромоцитом при морска видра. J. Am. ветеринарен лекар Med. ст.н.с. 179: 1283–1284.
18. Weber, H. and Mecklenburg, L. 2000. Злокачествен меланом при евразийска видра (Lutra lutra). J. Zoo Wildl. Med. 31: 87–90.
19. Williams, TD и Pulley, LT 1981. Лейомиоми при две морски видри, Enhydra lutris. J. Wildl. дис. 17: 401–404.
Наоюки ФУКЕ1, Нгуен Ван ДИЕП1,2, Такуя ХИРАЙ1, Mathurot SUWANRUENGSRI1, Уда Захли ИЗЗАТИ1и Риоджи ЯМАГУЧИ1
1. Катедра по ветеринарна патология, Факултет по земеделие, Университет на Миязаки, Миязаки 889-2192, Япония
2. Факултет по ветеринарна медицина, Виетнамски национален университет по земеделие, Trau Quy, Gia Lam, Ханой 10000, Виетнам






