WT1 импулсна човешка CD141+ ваксина с дендритни клетки има висок потенциал при имунотерапия, насочена към солидни тумори

Резюме:

Дендритните клетки (DC) са мощни клетки, които играят критична роля в противотуморния имунитет и тяхното използване в имунотерапията на рак отключва скрити способности като ефективна терапия. За да увеличим максимално пълния потенциал на DC, ние разработихме DC ваксина, наречена CellgramDC-WT1 (CDW). CDW се импулсира с WT1, антиген, обикновено експресиран в солидни тумори, и се индуцира със золедронат за подпомагане на DC узряването. Въпреки че нашето предишно проучване се фокусира върху използването на Rg3 като индуктор на DC узряване, проблемите с контрола на качеството и достъпа ни накараха да изберем золедронат като по-добра алтернатива. Освен това, CDW секретира IL-12 и IFN-, които индуцират диференциацията на наивни Т клетки до активни CD8+ Т клетки и предизвикват цитотоксичен Т лимфоцитен (CTL) отговор срещу ракови клетки с WT1 антигени. Чрез потвърждаване на идентичността и функцията на CDW, ние вярваме, че CDW е подобрена DC ваксина и притежава обещаващ потенциал в областта на имунотерапията на рака.

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Ключови думи:

DC ваксина; CD141; дендритни клетки; золедронат; Т-клетъчно активиране; имунотерапия на рак; солиден тумор; ракови антигени; тумор на Wilms 1 (WT1); тумор-свързани антигени

1. Въведение

Ракът е водещата причина за смърт в света и докато традиционните методи на лечение включват хирургия, химиотерапия и облъчване, те често причиняват неблагоприятни странични ефекти поради неспособността да се прави разлика между раковите и нормалните клетки [1]. Въпреки това, скорошният напредък в областта на имунотерапията позволи разработването на ваксини срещу рак, които имат за цел да активират имунната система на тялото, за да се насочат конкретно към раковите клетки и следователно да минимизират страничните ефекти [2]. Противраковите ваксини използват предимно тумор-асоциирани антигени или тумор-специфични антигени за активиране на антиген-специфичните лимфоцити на имунната система [3]. Активираните лимфоцити, предимно Т клетки, поемат ефекторни функции като цитотоксичност и производство на цитокини, за да контролират прогресията на рака [4]. Различните видове ваксини срещу рак използват специфичен набор от имунни клетки, като естествени клетки убийци (NK) [5] и дендритни клетки (DC) [6]. От тях DC са антиген-представящи клетки (APC) и играят критична роля в активирането на имунния отговор чрез Т клетки. Основната характеристика на DC включва способността за улавяне на антигени и обработка на протеина в пептид, който да бъде представен на Т клетките от главните молекули на комплекса за хистосъвместимост (МНС). Въпреки това, DC включва хетерогенна популация с всяка подгрупа, която носи различни фенотипове и функции [7].

растение цистанче, повишаващо имунната система

DC се разделят основно на класически/конвенционални DC (cDC), плазмоцитоидни DC (pDC) и DC, получени от моноцити (mo-DC). Има две широки групи cDC: тип 1 DC (cDC1), който основно представя антигени, използвайки MHC клас I, за да предизвика CTL отговор от CD8+ Т клетка (CTL), и тип 2 DC (cDC2), който използва MHC клас II за насърчаване на отговор от CD4+ Т клетка (помощна Т клетка) [8]. Плазмоцитоидните DC са уникална подгрупа от DC, които са специализирани в секретирането на интерферон тип I (IFN) [9]. Mo-DC участва предимно във възпалението и насърчава TH17 имунния отговор [10] (Фигура 1A). Понастоящем mo-DC се използва най-много в областта на изследванията на DC противоракова имунотерапия [11–13]. Въпреки че mo-DC се понася добре и е безопасен, ниската терапевтична ефикасност възпрепятства широкото му използване. Ограничението на mo-DC е демонстрирано in vitro, където те показват ограничена способност да мигрират към лимфните възли, за да активират силни цитотоксични Т-лимфоцитни (CTL) отговори [14]. За да се преодолеят ограниченията на настоящите режими на DC ваксина, cDC1 беше избран в това проучване, тъй като има най-добрата способност за представяне на антиген и демонстрира висок CTL отговор. Въпреки че проучванията върху cDC1 ваксините се увеличават, cDC1 все още не е изследван в клинично изпитване [15].

Получихме мононуклеарни клетки (MNC) от костен мозък и след това изолирахме CD34+ клетки (хемопоетични стволови клетки) с помощта на техниката за разделяне на клетки MACS®. Клетките се пролиферират с помощта на гранулоцитно-макрофагов колониостимулиращ фактор (GM-CSF), фактор на стволови клетки (SCF) и Fms-подобен тирозин киназен рецептор 3 (FLT3)-лиганд, който директно индуцира диференциация в DC [16] и диференциация в DC се индуцира с GM-CSF и интерлевкин 4 (IL-4). Незрелият DC разпознава WT1 протеина като антиген и узрява с помощта на золедронат. WT1 (тумор на Wilms1) антиген е силно експресиран в различни злокачествени заболявания и различни солидни тумори. Следователно WT1 е използван като една от целите на имунотерапията за рак [17]. Zoledronate е лекарство от класа на бифосфонатите, което се използва широко за лечение както на остеопороза, така и на скелетни метастази. Освен това золедронатът инхибира ензима фарнезил дифосфат синтаза, който играе роля в пътя на мевалоната и в последващото пренилиране на малки GTPase протеини, като Ras [18]. След това зрелият DC се финализира като DC ваксина (Фигура 1A). Като цяло, зрелите DC секретират различни цитокини, за да индуцират активирането на имунните клетки [19] и се свързват директно с Т клетките за представяне на антиген [20]. Т-клетките реагираха с DC, за да станат помощни Т-клетки (CD4+), за да подпомогнат имунния отговор или цитотоксични Т-клетки (CD8+), за да инициират директно противоракови ефекти [21] (Фигура 1B). Съставът на DC ваксината беше потвърден чрез поточна цитометрия и функцията на ваксината беше анализирана чрез тест за секреция на цитокини, промяна на Т клетки и анализ на цитотоксични Т лимфоцити (CTL).

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Enhance Imunity

【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2. Резултати

2.1. Профили на поточна цитометрия, илюстриращи DC ваксина с висока експресия на CD141+

За да се потвърди идентичността на DC, бяха анализирани различни маркери, включително CD141 (най-широко използваният cDC1 маркер), CD1c (маркер на cDC2) и CD303a (маркер на pDC). В допълнение, HLA-DR, CD80 и CD86, които са маркери за активиране, също бяха анализирани. За разлика от 70% от cDC2, открит в човешката DC в кръвта, произведеният DC се състои предимно от cDC1 (CD141+ клетки) и двойната положителна поява на CD141+CD1c+ в активиран DC е също потвърдено [22,23]. Освен това, резултатите показват значително високо ниво на активност за DC (Фигура 2A, B). Промените в клетъчната морфология също бяха проследени с помощта на пълна кръвна картина (CBC) за различни времеви точки в производството на DC. Докато повечето от клетките пролиферират като моноцити във фазата на пролиферация (Таблица 1), фазата на диференциация води до постепенно намаляване на моноцитите до ниво на изчезване към края на производствения процес.

Фигура 2. Идентифициране на CDW подгрупи. Фенотипни характеристики на ДК. По време на процеса на диференциация, DC се импулсират с WT1 протеин и се третират с 1 цМ золедронат в продължение на 3 часа. Данните показват експресията на стимулаторен маркер и подтип на DC, представителен за човешки DC (n=5) (A). Резултатите са показани като точкови диаграми (B).

Таблица 1. По време на процеса на пролиферация и диференциация от CD34+ клетки към DC, фенотипните промени бяха анализирани с помощта на CBC.

2.2. Плазмено ниво на IL-12 и IFN-цитокини, определено чрез ELISA

От многото цитокини, секретирани от DC, най-представителните са IL-12 и IFN-. IL-12 регулира възпалението чрез свързване на вродени и адаптивни имунни отговори. Повечето от индуцираните от IL-12- ефекти са медиирани от секрецията на IFN- и се оказват критични за индуцирането на Th1 клетки. IFN- играе ключова роля в активирането на клетъчния имунитет и впоследствие стимулирането на антитуморния имунен отговор [24–26]. За да се провери ефикасността на CDW, нивата на секреция на IL-12 и IFN бяха анализирани чрез взаимодействие с Т клетки. Докато само Т клетките и Т клетките, третирани с непулсирани DC условия, доведоха до нива на секреция, които бяха подобни едно на друго, когато групите бяха сравнени с тези на групата Т клетки + CDW, индукцията на CDW върху Т клетки даде два пъти нивото на IL -12(Фигура 3A) и значително повишава нивото на IFN- (Фигура 3B).

Фигура 3. Индукционно сравнение на CDW върху Т клетки чрез анализ на цитокини. Секрецията на IL-12 (A) и IFN- (B) се измерва само в Т клетки (активиран IL-2 и Trans ACT), Т клетки + непулсиран DC и Т клетки + CDW съвместна култура супернатанта с помощта на ELISA анализ (n=3). ELISA се извършва, като се използва супернатантата в момента на завършване. Анализът беше извършен чрез SigmaPlot. *** p < 0.001.

2.3. Ефектът на Zoledronate върху диференциацията и съзряването на cDC1 в CDW

В предишното проучване Rg3 [27], гинзенозид, намерен в Panax ginseng, е използван за индуциране на узряването на DC; обаче, крайният продукт се състоеше от слой примеси, причинявайки трудности при контрола на качеството. Золедронатът е използван като заместител на Rg3 за преодоляване на този проблем и е анализиран ефектът му върху индуцирането на DC узряване. Най-съществената разлика между ефектите на двете вещества е способността на золедроната да дава изключително висока експресия на cDC1 (CD141+ клетки) повърхностен маркер (Фигура 4А). По този начин, тъй като cDC1 е известно, че е най-добрият DC подтип в представянето на антиген, золедронатът е избран за индуциране на DC узряване [18]. Оптималното време на лечение със золедронат за индуциране на DC узряване също беше оценено. Въпреки че 24-часовото лечение доведе до достатъчна част от CD141+ клетки, делът на CD141+ клетките в резултата от 3-часовото лечение беше по-голям с приблизително 20%, а CD86 (ко- стимулиращ маркер) съотношението при 3-часовото лечение също е по-голямо с 30%. В допълнение, като се има предвид механизмът на действие на золедронат, по-краткото време на лечение от 3 часа в сравнение с 24 часа се счита за по-ефективно за получаване на по-високо качество на DC (Таблица 2).

Фигура 4. Ефект на золедронат върху диференциацията и узряването на cDC1 при производството на DC ваксина. Ефекти на золедронат в DC ваксина. В процеса на производство на DC ваксина, 3-часово лечение със золедронат индуцира диференциация и узряване на DC до cDC1 и дава по-високо ниво на CD141 маркер. Фенотипните маркери бяха анализирани чрез поточна цитометрия за сравняване на Rg3 (n=4) и золедронат (n=5), които бяха използвани за индуциране на DC узряване. *** p < 0.001.

Таблица 2. Ефект от времената на лечение със золедронат (3 часа и 24 часа) върху повърхностните маркери.

2.4. Индуцирани от CDW ваксинация WT1 антиген-специфични Т-клетъчни отговори

Фигура 5. CDW увеличава CD8+ Т клетките, за да насърчи цитотоксичността срещу раковите клетки. Ефект на CDW върху Т клетъчния отговор, оценен чрез CTL. IL-2 и Trans-Act са стимулатори на Т клетки и са използвани за стимулиране на Т клетки. Активираните Т клетки се култивират съвместно с DC за първата индукция, която продължава седем дни, и втората индукция, която продължава до 10 дни. Промените в Т клетъчния подтип бяха анализирани чрез поточна цитометрия (А). Т клетките, култивирани в продължение на 10–14 дни, се култивират съвместно с ракови клетки, експресиращи WT1 в съответствие с подходящи съотношения в 96-плака с ямки. След -72 h степента на оцеляване на раковите клетки беше анализирана с помощта на CCK8 (B–D). Т клетки, индуцирани от CDW група (В). Група само с Т клетки (активиран IL-2 и Trans ACT) (C). Т клетки, индуцирани от непулсирана DC група (D). * p < 0,05, *** p < 0,001.

2.5. Потвърждение за безопасността на ваксината CellgramDC

И в двете групи на приложение (3,4 × 104 клетки/животно или 1,7 × 105 клетки/животно) не са наблюдавани аномалии по отношение на смърт или общи симптоми в резултат на приложеното вещество.

По време на периода на наблюдение не са наблюдавани токсикологично значими промени в групите на приложение (3,4 × 104 клетки/животно или 1,7 × 105 клетки/животно) в резултат на приложеното вещество. Наблюденията включват телесно тегло (Фигура 6A), анализ на урината (Фигура 6B), прием на храна, офталмологичен преглед, хематологичен преглед, биохимичен преглед на кръвта, тегло на органа, аутопсия и тест за локална поносимост (Допълнение 1, Таблици S1–S9). Различни тестове бяха потвърдени чрез сравняване на DC, получен от стволови клетки (CellgramDC) и DC, получен от моноцити (mo-DC). Оцеляването и размерът на тумора на мишки също са тествани. Размерът на тумора в stem-DC групата е намален с повече от 50% в сравнение с този на mo-DC групата и процентът на преживяемост също е увеличен, потвърждавайки силен противораков ефект (Допълнение 2).

Фигура 6. Проучване за токсичност на подкожна доза CellgramDC при C57BL/6 мишки. За тестване на безопасността и токсичния отговор на CellgramDC, женски и мъжки мишки от щам C57BL/6 бяха инжектирани подкожно с CellgramDC за общо шест седмици (една инжекция на седмица). Безопасността на Cell gramDC е ​​тествана чрез подкожно инжектиране на женски и мъжки мишки за общо шест седмици (една инжекция на седмица). Групите за приложение се състоят от две групи: 10 мишки, инжектирани с 3,4 × 104 клетки/животно и 15 мишки, инжектирани с 1,7 × 105 клетки/животно. Отрицателна контролна група се състои от 15 мишки и се инжектира интравенозно с разтвор, съставен от ексципиент, плазмен разтвор-A/човешки серумен албумин (HSA) 90% + DMSO 10% и физиологичен разтвор за шест седмици (една инжекция на седмица). За да се тества за обратим токсичен отговор, на пет мишки от всяка сравнителна група, отрицателна контролна група и 1,7 × 105 клетки/група на приложение на животни бяха дадени две седмици от периода на възстановяване. По време на периода на възстановяване са наблюдавани проверка на теглото (A), анализ на урината (B), общи симптоми, измерване на приема на храна и офталмологичен преглед. След периода на наблюдение бяха извършени хематологични изследвания, биохимични изследвания на кръвта и измерване на теглото на органите, както и визуални и хистопатологични изследвания при аутопсия.

Ние потвърдихме стабилността и ефективността на CellgramDC. CDW, който е импулсен с WT1 и третиран със золедронат, също ще бъде тестван за токсичност и ефикасност и се очакват подобрени резултати.

3. Дискусия

В CDW ваксината, която е произведена, cDC1 е с най-високото съотношение и показва високо ниво на активност. cDC1 са клетки с най-добра способност за представяне на антиген и са отговорни за основната функция на DC. Като се има предвид как cDC1 съставлява рядка подгрупа на DC [~0.03% от PBMC] [28], преобладаването на CD141+ популацията в CDW е ясно предимство при повишаване на ефикасността на ваксина. Освен това, cDC1 в CDW секретира цитокини (IL-12 и IFN-) на високо ниво и е в състояние да индуцира диференциацията на наивни Т клетки до активни CD8+ Т клетки. В предишното ни проучване Rg3 беше използван като фактор за узряване, но като се има предвид трудността при получаване на доставка и контрол на качеството на крайния продукт, золедронатът беше използван като заместител за преодоляване на тези предизвикателства. DC, индуциран от золедронат, е изследван, за да се анализира ролята му като индуктор на V 9 δ Т клетъчно активиране [29]. Золедронатът е клас бифосфонати и бифосфонатите индуцират активността на δ Т клетките да произвеждат бързо и изобилно провъзпалителни цитокини [30], като вземем това предвид, ние проектирахме нашия експеримент, за да тестваме ефектите от краткосрочно лечение. В нашето проучване золедронат (в сравнение с Rg3) индуцира активиране на CD8+ Т клетки в CDW и също така повишава нивото на cDC1. Първото клинично изпитване беше проведено за DC, индуциран от Rg3 (NCT 046158-45) от нашето предишно проучване, но резултатите не са докладвани. Очакваме обаче подобрени резултати в бъдещи клинични изпитвания, използващи DC, индуциран от золедронат, предвид настоящите открития.

растение цистанче, повишаващо имунната система

Напоследък има много проучвания около имунотерапията срещу рак и най-изследваните терапии са CAR-T [31,32] и CAR-NK [33,34]. Тези терапии са потвърдили своята ефикасност и са силно очаквани за лечение на рак. CAR-T обаче е ограничен до лечението на рак на кръвта, който включва много малка част от всички видове рак [35]. Освен това пациентите могат да страдат от странични ефекти от лечението, като синдром на освобождаване на цитокини (CRS) [36]. За да се преодолеят тези недостатъци, се изследва имунната терапия, използваща NK клетки. NK клетките са силно мощни лимфоцити и се насочват към рак чрез множество широко експресирани активиращи лиганди. В резултат на това NK клетките могат да се справят с ограниченията на автоложната CAR Т клетъчна терапия. Съществуват обаче няколко потенциални недостатъка при използването на NK клетки, като трудности в клетъчната култура, непосредственост в пиковата активност на клетъчната кинетика и по-кратко присъщо дълголетие, както и ограничен фенотип на паметта в продължителността на живота и отговора [34,37]. ,38]. Други изследвания включват комбинирани терапии, използващи DC или Т клетки и инхибитори на имунни контролни точки като анти-PD1 (протеин на програмирана клетъчна смърт1) [39] или анти-PD-L1 (лиганд на програмирана смърт1) [40]. Съвместното приложение на тези лекарства позволява насочването към имуносупресивната туморна микросреда и в ход са допълнителни изследвания за повишаване на ефикасността на тези терапии.

Ползи от Cistanche tubulosa- укрепване на имунната система

Изследванията за разработване на DC ваксина за имунотерапия непрекъснато се увеличават и се постигат много напредъци в тази област. DC играе централна и критична роля в напредналата имунна система и DC ваксината може да предложи предимство в сравнение с други начини на имунотерапия за рак. Тъй като DC не убива директно раковите клетки, нормалните клетки не се засягат, което елиминира неблагоприятните странични ефекти. Освен това, чрез пулсиране на DC с WT1, антиген, обикновено експресиран в много солидни тумори [17], DC ваксината може да се насочи към солидни туморни модели. Преди да вземем решение за протеиновия антиген WT1, експериментирахме с различни видове антигени. Чрез използването на продукти с гарантирано качество, както и различни антигени като пептид, каптиватор или поп микс, антигенът с най-голям ефект беше, когато се използва като протеин. Следователно използвахме WT1 протеин за пулсиране на антиген. Най-широко проучваният подход в DC терапията използва mo-DC импулсен с WT1 във връзка с химиотерапия [12]. Безопасността и имуногенността на mo-DC е потвърдена чрез клинични изпитвания [13]. Докато други изследвания на DC ваксини разработват своите ваксини, използвайки DC, получен от моноцити от кръв, ние прогнозирахме, че DC, получен от стволови клетки, ще има повишен потенциал. Освен това е известно, че cDC има по-голяма мощност от mo-DC, което ни тласка към това изследване. Следователно CDW може да бъде по-добра алтернатива на mo-DC, тъй като основният му компонент е cDC1, DC подтип с най-ефективната способност за кръстосано представяне. Въпреки че цитотоксичната активност е подобна в Т клетките + непулсирана DC група и CDW група, ние предполагаме, че това е така, защото непулсираната DC също е вид cDC1 клетка. Независимо от това, CDW може ефективно да предизвика силен антитуморен имунен отговор чрез увеличаване на популацията на cDC1. Чрез предклиничното проучване тествахме токсичността при многократно прилагане на DC ваксината. Процесът на разработване и производство на CDW е проверен и се надяваме да проведем допълнителни проучвания, за да тестваме подобрените ефекти на CDW. Въпреки че ефикасността беше потвърдена in vitro, беше проведено проучване за токсичност на дозата за валидиране на ефикасността in vivo. След като бъдат докладвани резултатите от клиничните изпитвания, използващи CDW, ние възнамеряваме да насочим нашите изследвания в посока, която ще подобри текущите изследвания.

Препратки

1. Padma, VV Преглед на целевата терапия на рака. BioMedicine 2015, 5, 19. [CrossRef] [PubMed]

2. Schirrmacher, V. Ваксините срещу рак и онколитичните вируси проявяват много по-ниски странични ефекти при пациенти с рак, отколкото други системни терапии: сравнителен анализ. Biomedicines 2020, 8, 61. [CrossRef] [PubMed]

3. Смит, CC; Селицки, SR; Чай, С.; Armistead, PM; Винсент, БГ; Serody, JS Алтернативни тумор-специфични антигени. Нац. Рак 2019, 19, 465–478. [CrossRef] [PubMed]

4. Лу, Х.; Джао, X.; Li, Z.; Hu, Y.; Wang, H. От CAR-T клетки до CAR-NK клетки: Развиващ се имунотерапевтичен метод за хематологични злокачествени заболявания. Отпред. Oncol. 2021, 11, 720501. [CrossRef]

5. Чу, Дж.; Гао, Ф.; Ян, М.; Джао, С.; Ян, З.; Shi, B.; Liu, Y. Естествени клетки убийци: обещаваща имунотерапия за рак. J. Превод. Med. 2022, 20, 240. [CrossRef] [PubMed]

6. Сабадо, RL; Балан, С.; Bhardwaj, N. Имунотерапия, базирана на дендритни клетки. Cell Res. 2017, 27, 74–95. [CrossRef] [PubMed]

7. Patente, TA; Пиньо, депутат; Оливейра, АА; Еванджелиста, GCM; Бергами-Сантос, PC; Barbuto, JAM Човешки дендритни клетки: Тяхната хетерогенност и потенциал за клинично приложение в имунотерапията на рак. Отпред. Immunol. 2019, 9, 3176. [CrossRef]

8. Колин, М.; Bigley, V. Подгрупи на човешки дендритни клетки: Актуализация. Имунология 2018, 154, 3–20. [CrossRef]

9. Фицджералд-Бокарсли, П.; Dai, J.; Singh, S. Плазмоцитоидни дендритни клетки и тип I IFN: 50 години конвергентна история. Cytokine Growth Factor Rev. 2008, 19, 3–19. [CrossRef]

10. Сегура, Е.; Тузо, М.; Bohineust, A.; Капучио, А.; Chiocchia, G.; Hosmalin, A.; Далод, М.; Сумелис, В.; Amigorena, S. Човешки възпалителни дендритни клетки индуцират Th17 клетъчна диференциация. Имунитет 2013, 38, 336–348. [CrossRef]

11. Geskin, LJ; Дамяно, JJ; Патроне, ЦК; Бътърфийлд, Л.; Kirkwood, JM; Falo, LD Три метода за зареждане на антиген във ваксини с дендритни клетки за метастатичен меланом. Melanoma Res. 2018, 28, 211. [CrossRef] [PubMed]

12. Гуо, З.; Юан, Й.; Chen, C.; Лин, Дж.; Ма, Q.; Liu, G.; Гао, Й.; Huang, Y.; Чен, Л.; Чен, Л.-З.; и др. Траен пълен отговор на заредена с неоантиген ваксина с дендритни клетки след анти-PD-1 терапия при метастатичен рак на стомаха. Npj Прециз. Oncol. 2022, 6, 34. [CrossRef] [PubMed]

13. Бол, К.Ф.; Schreibelt, G.; Раболд, К.; Wculek, SK; Шварце, JK; Дзионек, А.; Teijeira, A.; Кандалафт, LE; Ромеро, П.; Coukos, G.; и др. Клиничното приложение на имунотерапията на рака, базирана на естествено циркулиращи дендритни клетки. J. Immunother. Рак 2019, 7, 109. [CrossRef] [PubMed]

14. Коя, Т.; Дата, И.; Кавагучи, Х.; Watanabe, A.; Сакамото, Т.; Тоги, М.; Като, JT; Йошида, К.; Kojima, S.; Янагисава, Р.; и др. Дендритни клетки, предварително импулсирани с тумор на Wilms 1 в оптимизирана култура за ваксинация срещу рак. Pharmaceutics 2020, 12, 305. [CrossRef] [PubMed]

15. Джоу, Й.; Слоун, Н.; Хрисикос, ТТ; Кирисюк, О.; Babcock, RL; Медик, YB; Li, HS; Kleinerman, ES; Watowich, SS Ефикасност на ваксината срещу първичен и метастатичен рак с in vitro генерирани CD103+ конвенционални дендритни клетки. J. Immunother. Рак 2020, 8, e000474. [CrossRef]

16. Куето, Ф.; Sancho, D. Оста Flt3L/Flt3 в биологията на дендритните клетки и имунотерапията на рака. Ракови заболявания 2021, 13, 1525. [CrossRef]

17. Янагисава, Р.; Коидзуми, Т.; Коя, Т.; Сано, К.; Койдо, С.; Nagai, K.; Кобаяши, М.; Окамото, М.; Сугияма, Х.; Shimodaira, S. WT1-импулсна ваксина с дендритни клетки, комбинирана с химиотерапия за резециран рак на панкреаса във фаза I проучване. Противоракови. Рез. 2018, 38, 2217–2225. 18. Орсини, Г.; Failli, A.; Легитимо, А.; Adinolfi, B.; Романини, А.; Consolini, R. Zoledronic acid модулира узряването на дендритни клетки, получени от човешки моноцити. Exp. Biol. Med. 2011, 236, 1420–1426. [CrossRef] [PubMed]

19. Шмид, СВ; Нино-Кастро, AC; Schultze, JL Регулаторни дендритни клетки: Има повече от просто имунна активация. Отпред. Immunol. 2012, 3, 274. [CrossRef]

20. Тай, Й.; Wang, Q.; Korner, H.; Джан, Л.; Wei, W. Молекулярни механизми на активиране на Т клетки от дендритни клетки при автоимунни заболявания. Отпред. Pharmacol. 2018, 9, 642. [CrossRef]

21. Алфей, Ф.; Ho, P.-C.; Lo, W.-L. Вземането на решения при тумори управлява Т-клетъчния антитуморен имунитет. Онкоген 2021, 40, 5253–5261. [CrossRef] [PubMed]

22. Гранот, Т.; Сенда, Т.; Дърводелец, DJ; Мацуока, Н.; Weiner, J.; Гордън, CL; Мирон, М.; Кумар, BV; Griesemer, A.; Хо, С.-Х.; и др. Дендритните клетки показват подгрупа и тъканно-специфична динамика на съзряване през човешкия живот. Имунитет 2017, 46, 504–515. [CrossRef] [PubMed]

23. Бретон, Г.; Лий, Дж.; Джоу, YJ; Шрайбер, JJ; Келер, Т.; Puhr, S.; Anandasabapathy, N.; Schlesinger, S.; Каски, М.; Лиу, К.; и др. Циркулиращи прекурсори на човешки CD1c+ и CD141+ дендритни клетки. J. Exp. Med. 2015, 212, 401–413. [CrossRef] [PubMed]

24. Tugues, S.; Буркхард, SH; Ох, И.; Vrohlings, M.; Nussbaum, K.; vom Berg, J.; Кулиг, П.; Becher, B. Нови прозрения за IL-12- медиирано потискане на тумора. Клетъчна смърт Разл. 2015, 22, 237–246. [CrossRef]

25. Ашур, Д.; Arampatzi, P.; Павлович, В.; Förstner, KU; Кайшо, Т.; Beilhack, A.; Ерхард, Ф.; Lutz, MB IL-12 от ендогенен cDC1, а не ваксина DC, е необходим за Th1 индукция. JCI Insight. 2020, 5, e135143. [CrossRef]

26. Йоргованович, Д.; Песен, М.; Wang, L.; Zhang, Y. Роли на IFN- в туморната прогресия и регресия: преглед. Биомаркировка. Рез. 2020, 8, 49. [CrossRef]

27. Син, К.-ж.; Чой, KR; Лий, SJ; Lee, H. Имуногенна клетъчна смърт, индуцирана от гинзенозид Rg3: Значение в базираната на дендритни клетки антитуморна имунотерапия. Имунна мрежа. 2016, 16, 75–84. [CrossRef]

28. Jongbloed, SL; Касианос, AJ; Макдоналд, KJ; Кларк, GJ; Ju, X.; Ангел, CE; Chen, C.-JJ; Дънбар, PR; Wadley, RB; Джийт, В.; и др. Човешки CD141+ (BDCA-3)+ дендритни клетки (DCs) представляват уникална миелоидна DC подгрупа, която кръстосано представя некротични клетъчни антигени. J. Exp. Med. 2010, 207, 1247–1260. [CrossRef]

29. Ногучи, А.; Канеко, Т.; Камигаки, Т.; Фуджимото, К.; Озава, М.; Сайто, М.; Арийоши, Н.; Goto, S. Золедронат-активирана V 9 δ Т клетъчна имунотерапия е осъществима и възстановява увреждането на δ Т клетки при пациенти със солидни тумори. Цитотерапия 2011, 13, 92–97. [CrossRef]

30. Хюит, RE; Лисина, А.; Грийн, AE; Слей, ES; Цена, DA; Sewell, AK Отговорът на острата фаза на бифосфонатите: Бързото и обилно производство на провъзпалителни цитокини от gd Т клетки на периферната кръв в отговор на амино бифосфонати се инхибира от статини. Clin. Exp. Immunol. 2005, 139, 101–111. [CrossRef]

31 юни, CH; О'Конър, RS; Кавалекар, OU; Ghassemi, S.; Milone, MC CAR Т клетъчна имунотерапия за човешки рак. Наука 2018, 359, 1361–1365. [CrossRef] [PubMed]

32. Sterner, RC; Sterner, RM CAR-T клетъчна терапия: Текущи ограничения и потенциални стратегии. Рак на кръвта J. 2021, 11, 69. [CrossRef] [PubMed]

33. Xie, G.; Донг, Х.; Liang, Y.; Хам, JD; Rizwan, R.; Chen, J. CAR-NK клетки: обещаваща клетъчна имунотерапия за рак. EBioMedicine 2020, 59, 102975. [CrossRef] [PubMed]

34. Джан, Л.; Meng, Y.; Фън, X.; Han, Z. CAR-NK клетки за имунотерапия на рак: От пейката до леглото. Биомаркировка. Рез. 2022, 10, 12. [CrossRef] [PubMed]

35. Марофи, Ф.; Мотавали, Р.; Сафонов, В.А.; Тангавелу, Л.; Юмашев, AV; Александър, М.; Шомали, Н.; Chartrand, MS; Pathak, Y.; Джарахян, М.; и др. CAR Т клетки в солидни тумори: Предизвикателства и възможности. Stem Cell Res. Там. 2021, 12, 81. [CrossRef]

36. Сантомасо, Б.; Bachier, C.; Westin, J.; Резвани, К.; Shpall, EJ Другата страна на CAR Т-клетъчната терапия: синдром на освобождаване на цитокини, неврологична токсичност и финансова тежест. Am. Soc. Clin. Oncol. образование Книга 2019, 39, 433–444. [CrossRef]

37. Лиу, С.; Галат, В.; Галат, Й.; Лий, YKA; Уейнрайт, Д.; Wu, J. NK клетъчна имунотерапия на рак: от основна биология до клинично развитие. J. Hematol. Oncol. 2021, 14, 7. [CrossRef]

38. Стрелцова, М.; Устюжанина, М.; Барсов, Е.; Куст, С.; Величински, Р.; Kovalenko, E. Telomerase обратната транскриптаза увеличава пролиферацията и продължителността на живота на човешки NK клетки без обезсмъртяване. Biomedicines 2021, 9, 662. [CrossRef]

39. Гарис, CS; Arlauckas, SP; Kohler, RH; Трефни, депутат; Гарен, С.; Piot, C.; Engblom, C.; Pfirschke, C.; Сивицки, М.; Gungabeesoon, J.; и др. Успешната анти-PD{2}} ракова имунотерапия изисква кръстосано взаимодействие между Т клетки и дендритни клетки, включващо цитокините IFN- и IL-12. Имунитет 2018, 49, 1148–1161.e7. [CrossRef]

40. Тонгчот, С.; Jirapongwattana, N.; Luangwattananun, P.; Chiraphapphaiboon, W.; Chuangchot, N.; Са-Нгуанракса, Д.; О Чароенрат, П.; Thuwajit, P.; Yenchitsomanus, P.-T.; Thuwajit, C. Адоптивен трансфер на антинуклеолинови Т клетки, комбиниран с PD-L1 инхибиране срещу тройно отрицателен рак на гърдата. Mol. Рак Ther. 2022, 21, 727–739. [CrossRef]