Албумин и мегалин, които трябва да знаете

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Част Ⅱ: Бъбречна работа с албумин – от ранни открития до настоящи концепции

Якуб Гбурек, Богуслава Конопска и Кшищоф Гол ˛аб

НАТИСНЕТЕ ТУК ЗА ЧАСТ Ⅰ // НАТИСНЕТЕ ТУК ЗА ЧАСТ Ⅲ

цистанчеможе да лекувабъбрекзаболяванеподобрявамбъбречна функция

3.3. Кубилин

Кубилинбеше идентифициран катоалбуминрецептор от Birn et al. през 2000 г. [64]. Авторите са изолираникубилинот мембраните на четката на бъбрека на плъх, използвайки афинитетна хроматография с имобилизиран албумин. Те също така определят константата на дисоциация на комплекса чрез повърхностен плазмонен резонанс (Kd=0.63 uM) и демонстрират, че инбредни кучета с функционален дефект накубилини мишки с инхибиранмегалинекспресия отделят значителни количества албумин в урината. Освен това, те също така посочват взаимното взаимодействие на двата рецептора в ендоцитозата на албумин.

Кубилине извънклетъчен гликопротеин с молекулно тегло около 460 kDa. Първоначално той е идентифициран като антиген на тератогенни антитела, произведени в зайци след инжектиране на бъбречна четка. Първоначално известен като гликопротеин 280 (gp280), той се намира в проксималните бъбречни тубули и епитела на жълтъчната торбичка. Неговата експресия е открита и в илеума, матката и плацентата. Първоначално не се приписват лиганди на този протеин. По-късни проучвания показаха товакубилине идентичен с рецептора на комплекса присъщ фактор-витамин B12 (IF-B12), присъстващ в тънките черва. Приписана му е функцията на рецепторен протеин [65]. Човекъткубилингенът е разположен на 10p12.33-p13 хромозома. Този протеин е съставен от N-терминална част от 110 аминокиселини, последвана от 8 домена, подобен на епидермален растежен фактор (EGF-подобен) и 27 домена, подобен на комплемента C1r/C1s, протеин на морски таралеж, свързан с епидермален растежен фактор (Uegf ), и костен морфогенен протеин1 (CUB).Кубилинняма трансмембранен домейн. N-краят е отговорен за вграждането на протеин в мембраната. Всеки CUB домейн се състои от 110 аминокиселинни остатъка. Структурата на CUB домейните се състои от два слоя от пет антипаралелни листа, също свързани чрез -структури. Те представляват най-консервативната област на молекулата и са отговорни за свързването на лиганда. В допълнение къмалбумини IF-B12, желязосъдържащи протеини (трансферин, хемоглобин, миоглобин), аполипопротеин А1 и витамин D свързващ протеин също могат да бъдат свързани 56,59,66,67I. Анализ на свързване на албумин с експресиран in vitroкубилинфрагменти направиха възможно идентифицирането на местата за свързване в CUB домейни 6-8 [68]. Тези места вероятно ще се припокриват частично с местата на свързване на хемоглобина, както е показано в конкурентно проучване, използващо HK-2 клетки (проксимален тубул на човешки бъбрек, възрастен мъж, обезсмъртен папилом) [69].

Кубилинне е напълно независим ендоцитен рецептор. За неговата правилна мембранна локализация и стабилност, той трябва да взаимодейства с AMN протеина. В допълнение, този протеин е отговорен закубилининтернализация. Наскоро беше демонстрирано, че последователността на FXNPXF в цитоплазмения домен на AMN е функционално активна и медиира секвестрацията на комплекса чрез взаимодействие с адапторни протеини: деактивирания протеин -2 (Dab2) и автозомно-рецесивен протеин на холестеролемия (ARH). Интернализацията на CUBAM може да възникне и чрез свързване смегалин[55,70]. Мегалинизглежда е отговорен закубилинподдържане на клетъчната мембрана. Едновременно отделяне накубилинот мембраната и загубата му с урината е открита при пациент със синдром на Donnai-Barrow/FOAR (Facio-Oculo-Acustico-Renal Syndrome) поради функционална мутация в този рецепторен ген, водеща до неговото цитоплазмено задържане [71].

Основната роля на CUBAM в тръбнитеалбуминусвояването е демонстрирано в скорошни проучвания при мишки с бъбречно-специфичен нокаут накубилинимегалин, при които се наблюдава умерена тубулна албуминурия [54,72]. Това наблюдение беше потвърдено и от генетичен и фенотипен анализ на пациенти със синдром на Imerslund-Gräsbeck, причинен от мутация вкубилинили AMN ген. И в двата случая албуминът и другите лиганди накубилинса били изгубени в урината [58].

интересно,кубилинимегалинсъщо са открити в гломерули на плъхове и хора по модел, подобен на докладвания замегалин. Кубилинразкрива както повърхностна, така и вътреклетъчна експресия в подоцитите [73]. Освен това,кубилинЕкспресията на иРНК се открива в мезангиалните клетки, но липсата на амнион предполага товакубилинне е напълно функционален в тези клетки. Въпреки това,албуминендоцитозата е значително нарушена при индуцируемамегалинусловия на нокдаун в стабилно трансдуцирани мезангиални клетки |74]. Тези констатации може да са важни за по-доброто разбиране на гломерулните пътища.

cistanche мъжки ползи

3.4. Мегалин

Мегалинбеше идентифициран катоалбуминрецептор от Cui et al. през 1996 г. [75]. Изследването е извършено in vivo чрез инжектиране на проксимални тубули на плъхове с албуминови разтвори, белязани с колоидно злато или 125Iiodine изотоп. В експеримента беше определено влиянието на много съединения върху тубулното усвояване на тези протеини. Прилагането на рецептор-асоцииран протеин (RAP), цитохром С намалява и гентамицинът напълно инхибира тубулната реабсорбция на белязан албумин. Тези лиганди се характеризират с висок афинитет къммегалини тяхното присъствие ефективно възпрепятства свързването на албумин през този рецептор. Същото се отнася и за EDTA, хелатор на Ca2 плюс йони, който също инхибира усвояването. Това показваше, чемегалиндопринася за тубулната реабсорбция на този протеин. Тези заключения бяха потвърдени чрез афинитетна хроматография върху колона с имобилизиранмегалин.

Мегалинпървоначално е открит като антиген при мембранозна нефропатия тип Heymann и е наречен гликопротеин 330 (gp 330). През 1994 г., след успешен опит за клониране, неговата структура е по-известна и името е променено на използваното в момента [76. Човекътмегалингенът е разположен на хромозома 2g24-g31.Мегалине голям трансмембранен протеин, който принадлежи към семейството на липопротеиновите рецептори с ниска плътност. В проксималните тубули,мегалинсе намира в апикалната мембрана и покрити с клатрин ендоцитни везикули. Този протеин има молекулно тегло 600 kDa и се състои от около 4600 аминокиселинни остатъка. Theмегалинмолекулата съдържа голям N-терминален извънклетъчен домен, единичен трансмембранен домен и къс С-терминален цитоплазмен фрагмент. Извънклетъчният домен има четири области, богати на цистеин и е отговорен за свързването на лигандите. Няколко повторения на последователност, подобна на епидермалния растежен фактор (EGF) и беден на цистеин фрагмент, съдържащ YWTD мотив, разделят лиганд-свързващия регион от частта за вграждане. Сигналната последователност е отговорна за дисоциацията на лиганда в киселата ендозомна среда. Цитоплазмената част съдържа три NPXY мотива, които инициират процеса на албуминова ендоцитоза чрез концентриране на рецептори в покрити вдлъбнатини чрез деактивирания протеин -2(Dab2) адаптерен протеин [77]. Набирането на този адаптер на свой ред зависи от фосфорилирането, катализирано от протеин кинази B (Aktl и Akt2) [78,79].

Мегалинсъщо има способността да свързва много други протеини. Освен албумин, неговите лиганди включват inter alia: аполипопротеини (B, E, HD), витамин транспортиращи протеини (A, D, B12), хормони (ангиотензин I, епителен растежен фактор, лептин), ензими и техните инхибитори (лизозим, плазминоген) и други [80]. В случая на албумин, местата на свързване на рецепторната молекула все още не са картографирани. Той също така интернализира комплекса CUBAM и неговите лиганди, включително албумин. Образуваните комплекси се интернализират с образуването на ранни ендозоми. След подкиселяване на ендозомната среда, комплексът се дисоциира и свободният рецептор се рециклира към клетъчната повърхност чрез плътни апикални тубули [59,66,67,81].

Струва си да се спомене, че високата глюкоза регулирамегалин-медиирана албуминова ендоцитоза в клетки на проксималните тубули на бъбреците. Повишените нива на плазмената глюкоза инхибиратмегалинекспресия и следователно албуминова ендоцитоза [61].

cistanche мъжки ползи

3.5. Неонатален Fc рецептор на имуноглобулинов фрагмент

Последните проучвания върху бъбречната абсорбция на албумин показват важната роля на неонаталния Fc рецептор (FcRn) в процеса на възстановяване на албумина от филтрата и защитата на този протеин срещу вътреклетъчно разграждане. FcRn е хетеродимерен трансмембранен протеин, подобен по своята структура на главния комплекс за хистосъвместимост (MHC) клас I молекули. Често се среща в ендотелните и епителните клетки. Неговото присъствие е потвърдено в гломерулни подоцити и в проксималните тубули. Има способността независимо да свързва албумин и имуноглобулини IgG в кисела среда (рН 5-6). Увеличаването на стойността на рН над 7 води до освобождаване на лиганди от рецептора [82]. FcRn в подоцитите присъства във везикули, принадлежащи към киселинното ендозомално отделение и е отговорен за свързването на имуноглобулини и албумин, преминали през гломерулния капилярен ендотел към филтрационното пространство. Филтрираните протеини се абсорбират от подоцита чрез ендоцитоза и/или пиноцитоза и след това се свързват от FcRn при киселото рН на ендозомите. Ендоцитните везикули, натоварени с протеини, претърпяват трансцитоза към лумена на капсулата на Bowman. В условия на повишаване на pH комплексът протеин-рецептор се дисоциира и непокътнатият протеин се освобождава от клетката към първичния филтрат. Предполага се, че този процес предпазва тесните филтриращи процепи от запушване с големи протеини [83,84]. Част от албумина, филтриран и реабсорбиран в проксималните тубули, не подлежи на разграждане в лизозомите на тубуларния епител и най-вероятно се възстановява в процеса на трансцитоза. В този теоретичен модел FcRn свързва албумина, който се освобождава от неговите рецептори, вероятномегалин/кубилинкомплекс в киселата ендозомна среда и след това се насочва чрез трансцитоза към базалното място на тубулните епителни клетки, където се освобождава в интерстициалната тъкан като следствие от повишаване на pH [85]. Въпреки че в светлината на настоящите резултати от изследванията възстановяването на албумин чрез трансцитоза, включваща FcRn в проксималните тубули, се извършва, това е маргинален феномен за нормалната хомеостаза на албумин в тялото [56].

cistanche мъжки ползи