Апоцининът подобрява индуцираното от мононатриев глутамат увреждане на тестисите чрез нарушена кръвно-тестисна бариера и параметрите на оксидативния стресⅡ

Резултати

3.1. Серумни нива на тестостерон, FSH и LH

Нивата на тестостерон в групата на MSG са по-ниски в сравнение с контролната група. Въпреки че групата на MSG плюс APO показва повишаване на нивата на тестостерон в сравнение с групата на MSG, това увеличение не е статистически значимо (Фигура 1A). Нивото на FSH е по-високо в групата на MSG в сравнение с контролната група. Нивото на FSH в групата на MSG плюс APO беше намалено в сравнение с групата на MSG (Фигура 1B). Намалените нива на LH в групата на MSG и повишените нива на LH в групата на MSG плюс APO не са статистически значими в сравнение с експерименталните групи (Фигура 1C).

3.2. Нива на MDA, GSH и SOD в тестисите

Нивото на тъканния MDA е повишено в групата на MSG в сравнение с контролната група. От друга страна, когато се сравнява групата на MSG плюс APO с групата на MSG, се наблюдава значително намаляване на MDA (Фигура 1D). Нивата на GSH и SOD намаляват значително в групата на MSG в сравнение съответно с контролната и APO групите. Значително увеличение на нивата на GSH и SOD беше разкрито в групата на MSG плюс APO в сравнение с групата на MSG (Фигура 1E, F).

Щракнете за cistanche tubulosa капсули за тестостерон

3.3. Брой на сперматозоидите, подвижност и морфология

Нормална морфология се наблюдава в проби от сперма в контролната група и APO групите (Фигура 2A, B). Голям брой сперматозоиди с морфологични аномалии са наблюдавани в групата на MSG (Фигура 2C). В групата на MSG плюс APO бяха открити малко анормални сперматозоиди, тъй като по-голямата част от сперматозоидите бяха с нормална морфология (Фигура 2D).

Броят на сперматозоидите и подвижността са по-ниски в групата на MSG в сравнение с контролните и APO групите. Тези параметри са повишени значително в групата на MSG плюс APO в сравнение с групата на MSG (Фигура 2E, F).

3.4. Съотношение тегло на тестисите/телесно тегло

Въпреки че съотношението тегло на тестисите/телесно тегло в групата на MSG се наблюдава като по-ниско в сравнение с другите експериментални групи, това намаление не е статистически значимо. Няма статистическа разлика в съотношението тегло на тестисите/телесно тегло между експерименталните групи (Фигура 3E).

3.5. Хистопатологични резултати

Светлинно микроскопско изследване на тестикуларна тъкан чрез H&E оцветяване разкрива нормална морфология на семенните тубули в контролната група. (Фигура 3(A1)). Интактна тестикуларна морфология се наблюдава в APO групата (Фигура 3(B1)). В групата на MSG, зародишният епител на семенните тубули е дезорганизиран. Вакуоли, показващи видимо увреждане на тъканите, бяха открити в базалния компартмент на семенните тубули (Фигура 3(C1)). Тези морфологични нарушения са отразени в значително висок хистопатологичен резултат за тази група. В групата на MSG плюс APO, по-голямата част от семенните тубули отразяват нормалната морфология, с ограничен брой дегенерирани семенни тубули (Фигура 3(D1)).

В сравнение с групата на MSG, хистопатологичният резултат е значително нисък в контролната и APO групите. Хистопатологичният резултат се повишава значително в групата на MSG и е значително намален в групата на MSG плюс APO в сравнение с групата на MSG (Фигура 3F). В допълнение, дебелината на семенните тубули в групата на MSG е ниска в сравнение с другите експериментални групи. В групата на MSG плюс APO има значително увеличение на дебелината на тубулите в сравнение с групата на MSG (Фигура 3G). Контролните и APO групите показват силна PAS-позитивност (Фигура 3(A2, B2)) за базалните мембрани на семенните тубули с правилна морфология. Влошените базални мембрани на семенните тубули на MSG водят до намалена PAS-позитивност на срезовете. (Фигура 3(C2)). PAS-позитивността на групата MSG плюс APO беше почти еквивалентна на контролната група, с малък брой нарушени семенни тубули, представящи отделени базални мембрани (Фигура 3(D2)). Морфологиите на тестикуларните тубули и tunica albuginea бяха нормални в контролната група (Фигура 3(A3)), APO групата (Фигура 3(B3)) и MSG плюс APO групата (Фигура 3(D3)). Въпреки това, в групата с MSG (Фигура 3(C3)), се наблюдава мастна тъкан в tunica albuginea и морфологията на тубулната строма също е нормална.

3.6. Резултати за PCNA

Голям брой PCNA-позитивни клетки в семенния епител, като тъмнокафяви, се наблюдават в контролните и APO групите (Фигура 4(A1, B1)). В групата на MSG беше забелязано намаляване на броя на PCNA-позитивните клетки на семенния епител (Фигура 4(C1)). Също така, PCNA-положителни сперматогенни клетки в лумена на семенните тубули се наблюдават в групата на MSG. Индексът на пролиферация, най-нисък в групата на MSG, е повишен в групата на MSG плюс APO в сравнение с групата на MSG (Фигура 4E). Групата MSG плюс APO също показва увеличение на PCNA-позитивните клетки в семенния епител (Фигура 4(D1)).

3.7. Резултати за TUNEL Immunocytochemistry

В контролните и APO групите TUNEL-позитивните клетки бяха ниски (Фигура 4(A2, B2)). Броят на TUNEL-позитивните клетки е по-висок в групата на MSG, отколкото в другите експериментални групи (Фигура 4(C2)). TUNEL-позитивните клетки бяха по-малко в групата на MSG плюс APO, отколкото в групата на MSG (Фигура 4(D2)). Апоптотичният индекс е по-висок в групата на MSG, отколкото в другите експериментални групи. Имаше сравнително намаление на този индекс в групата MSG плюс APO (Фигура 4F).

3.8. Резултати за NOX-2 имунофлуоресценция

Слаба NOX-2 имунопозитивност се наблюдава при контролните (Фигури 5A–C) и APO групите (Фигури 5D–F). Най-висока имунореактивност се наблюдава в групата с MSG (Фигура 5G–I), докато намаление е открито в групата с MSG плюс APO (Фигура 5J–L). Отрицателните контроли на имунофлуоресцентния анализ на NOX-2 са показани на фигура S1.

3.9. Резултати за ZO-1 и оклудин имунохистохимия

Позитивите на ZO-1 и оклудин бяха открити като тъмночервен цвят в базолатералната цитоплазма на клетките на Сертоли, разположени в семенния тубул на зародишния епител. Докато интензитетите на ZO-1 и оклудиновата имунореактивност са най-високи в контролната група (Фигура 6A–C, Фигура 7A–C, Фигура 8(A1, A2) и Фигура 9A, B) и APO групата (Фигура 6D– F, Фигура 7D–F и Фигура 8(B1, B2)) и намаление в разпределението на имунореактивностите се наблюдава в групата с MSG (Фигура 6G–I, Фигура 7G–I и Фигура 8(C1, C2)). Увеличаване на ZO-1 и положителността на оклудин се наблюдава в групата на MSG плюс APO в сравнение с групата на MSG (Фигура 6J–L, Фигура 7J–L и Фигура 8(D1, D2)).

3.10. Резултати от трансмисионен електронен микроскоп

В контролните и APO групите се наблюдава нормална ултраструктура на тубуларен зародишен епител на семенни тръби, представящ множество сперматозоиди и клетки на Сертоли, свързани помежду си с плътни връзки (Фигура 10А). APO групата има подобна ултраструктура като контролната група (Фигура 10B). В групата с MSG са наблюдавани вакуолизация и липидни капчици в зародишните епителни клетки на семенните тубули, разделение между клетъчните връзки на Сертоли-Сертоли и влошена базална ламина на семенните тубули (Фигура 10C). Ултраструктурата на групата MSG плюс APO отразява нормалната организация на семенните тубули с малко липидни капчици в цитоплазмата (Фигура 10D)

Как Cistanche повишава тестостерона?

Cistanche е билка, традиционно използвана в китайската медицина за повишаване на енергията, либидото и цялостната жизненост. Смята се, че Cistanche може да повиши нивата на тестостерон чрез инхибиране на активността на ензим, наречен ароматаза, който превръща тестостерона в естроген. Установено е също, че Cistanche увеличава производството на лутеинизиращ хормон (LH) в тялото. LH играе решаваща роля в регулирането на производството на тестостерон в тестисите. Чрез увеличаване на нивата на LH, Cistanche може индиректно да повиши производството на тестостерон. Освен това Cistanche съдържа и няколко фитохимикали като ехинакозид и актеозид, които притежават антиоксидантни свойства. Тези съединения могат да помогнат за защита на тестисите и други репродуктивни органи от оксидативно увреждане, като по този начин подобряват тяхната функция и увеличават производството на тестостерон. Като цяло, точните механизми, чрез които Cistanche повишава нивата на тестостерон, не са напълно разбрани, но вероятно това е взаимодействие на инхибиране на ароматазата, увеличаване на производството на LH и осигуряване на антиоксидантна подкрепа на репродуктивната система.

Следва продължение...

Мерве Аджикел-Елмас 1,*, Салва Асма Алгилани 1, Бегум Шахин 1, Йозлем Бингол Озакпинар 2, Мерт Гечим 2, Кутай Короглу 3 и Серап Арбак 1

1 Катедра по хистология и ембриология, Факултет по медицина, Acibadem Mehmet Ali Aydinlar University, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. No. 32, Atasehir, Истанбул 34752, Турция

2 Катедра по биохимия, Факултет по фармация, Университет Мармара, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Истанбул 34854, Турция

3 Катедра по хистология и ембриология, Факултет по медицина, Университет Мармара, Basibuyuk Yolu No. 9 D:2, Maltepe, Истанбул 34854, Турция