Целомоцитите на олигохетния земен червей Lumbricus Terrestris (Linnaeus, 1758) като еволюционен ключ на защита: Морфологично изследване
May 30, 2023
Резюме
Метазоите имат няколко механизма на вътрешна защита за своето оцеляване. Вътрешната защитна система еволюира заедно с организмите. Annelidae има циркулиращи целомоцити, които изпълняват функции, сравними с фагоцитните имунни клетки на гръбначните животни. Няколко проучвания показват, че тези клетки участват в процесите на фагоцитоза, опсонизация и разпознаване на патогени. Подобно на гръбначните макрофаги, тези циркулиращи клетки, които проникват в органите от целомичната кухина, улавят или капсулират патогени, реактивни кислородни видове (ROS) и азотен оксид (NO). Освен това те произвеждат набор от биоактивни протеини, участващи в имунния отговор и изпълняват детоксикационни функции чрез тяхната лизозомна система.
Целомоцитите могат също да участват в литичните реакции срещу целевите клетки и освобождаването на антимикробни пептиди. Нашето изследване идентифицира имунохистохимично целомоцити на Lumbricus terrestris, разпръснати в епидермалния и съединителния слой отдолу, както в надлъжния, така и в слоя на гладката мускулатура, имунореактивни за TLR2, CD14 и -Tubulin за първи път. TLR2 и CD14 не са напълно колокализирани един с друг, което предполага, че тези целомоцити може да принадлежат към две различни семейства. Експресията на тези имунни молекули върху целомоцитите на Annelidae потвърждава тяхната решаваща роля във вътрешната защитна система на тези протостоми на Oligochaeta, което предполага филогенетична консервация на тези рецептори. Тези данни биха могли да осигурят допълнителна представа за разбирането на вътрешната защитна система на Annelida и сложните механизми на имунната система при гръбначните животни.
Целомоцитите са тясно свързани с имунитета. Целомоцитите са клетки, свързани с имунната система. Те могат да секретират различни имунни фактори, като цитокини, интерлевкини, антигени и антитела, за да регулират и подобрят имунната способност на организма.
Целомоцитите изпълняват различни имунни функции, включително регулиране на клетъчните имунни отговори като антиген-представящи клетки, директно убиване на патогени и анормални клетки и участие в регулирането на възпалението и имунните отговори. В допълнение, някои проучвания показват, че целомоцитите могат също да подобрят имунитета към потенциални патогени чрез натрупване на клетки на имунната памет, като по този начин подобряват имунитета на тялото.
Следователно поддържането на нормалната функция и количеството на целомоцитите е от решаващо значение за имунитета на организма. В същото време, чрез регулиране и засилване на имунната функция на целомоцитите, имунитетът на тялото също може да бъде подобрен, за по-добро предотвратяване и лечение на различни заболявания. От това можем да видим значението на имунитета. Cistanche може да повиши имунитета. Cistanche е богат на различни антиоксидантни вещества, като витамин С, витамин С, каротеноиди и др. Тези съставки могат да поглъщат свободните радикали, да намалят оксидативния стрес и да подобрят имунитета. системно съпротивление.
Click cistanche tubulosa ползи
Ключови думи
Анелиди, целомоцити, земен червей, еволюция, имунитет.
Въведение
Вътрешните защитни механизми позволяват оцеляването на гостоприемника в метазоите. Тези механизми стават все по-сложни с еволюцията на организмите. За разлика от дейтеростомите на гръбначните, протостомите нямат адаптивен имунитет, базирайки защитата си на вроден имунитет [56]. Първоначалната линия на защита срещу бактерии и микроорганизми при гръбначните е бързото активиране на вродени имунни клетки и молекули. Наскоро безгръбначните станаха кандидати за анализ на вродения имунитет, за да разкрият стратегиите и сложността на адаптивния имунен отговор на гръбначните. Безгръбначните са развили различни активни имунни механизми, включително производството на антимикробни пептиди, коагулация, фагоцитоза и реакции на капсулиране [20, 24]. Тези механизми зависят от "рецепторите за разпознаване на образи" (PRRs), вродени имунни молекули, които могат да разграничат "собствените" от "не-собствените" мембранни компоненти.
Разпознаването на "свързани с патогени молекулярни модели" (PAMPs) регулира началото на основните сигнални пътища, до активирането на гени, кодиращи възпалителни медиатори, антимикробни пептиди и регулатори на фагоцитоза [32]. Oligochaetes annelids (земни червеи) са се превърнали в модел за сравнителна имунология и, подобно на пиявиците, се използват за биомониторинг на земната и водната среда (B.-T. [48, 52, 53, 72]. Земните червеи са снабдени с вродени, силно развити , и ефективни защитни механизми срещу опасни микроорганизми от околната среда.Първата механично-биологична линия на защита, която отделя тялото на пръстеновидните червеи от външната среда, е тегументът, съставен от епидермис и мускулни слоеве.Той има кутикула с тънък слой от мукополизахариди и протеини, които действат като антимикробна бариера [20].
При земните червеи клетъчната и хуморалната имунна система работят заедно за първи път в еволюцията на метазоите. Смята се, че течността в целомичната кухина е отговорна за хуморалните имунологични дейности. Целомичната кухина на земните червеи е пълна с течности, съдържащи свободни и блуждаещи целомоцити и техните пигментирани агрегати, наречени кафяви тела, продукт на капсулирането на нахлуващи бактерии и остатъци от частици. Няколко биологични процеса, включително хемолитични, протеолитични, цитотоксични и антибактериални, се извършват от целомичната течност на земните червеи [19, 24, 29]. Целомът директно комуникира с външната среда чрез дорзалните пори и свързаните нефридиални тубули, които екскретират метаболитите. Тези пори също участват в елиминирането на бактерии и изтощени целомоцити. При условия на стрес, целомичната течност и суспендираните клетки могат бързо да бъдат изхвърлени чрез повишаване на вътреколонното налягане [24].
Целомоцитите на земните червеи са съществен елемент от вродения клетъчен имунитет. Тези клетки приличат на левкоцити на гръбначни както по морфология, така и по функция [33]. Целомоцитите изпълняват широк спектър от задачи, включително клетъчна цитотоксичност, капсулиране и фагоцитоза. Те могат да бъдат разделени на две основни субпопулации: меланоцити и амебоцити (хиалинни и гранулирани) [33]. Хиалиновите и гранулираните амебоцити участват във фагоцитозата и капсулирането, изразявайки различни PRR [23, 60]. Тези циркулиращи клетки, които мигрират в тъканите от целомичната кухина, са много подобни на макрофагите на гръбначните животни, поглъщащи или капсулиращи патогени, реактивни кислородни видове (ROS) и азотен оксид (NO) [39]. Елеоцитите произвеждат широк спектър от биоактивни протеини, които участват в хуморалния имунен отговор и също детоксикират тялото чрез тяхната лизозомна система [24]. Целомоцитите могат да участват в литичните реакции срещу целевите клетки и освобождаването на антимикробни пептиди. Сред имунните механизми експериментите с трансплантация са показали съществуването на саморазпознаване при земните червеи [28].
Анелидните целомоцити бързо образуват имунни механизми срещу бактерии, паразити и дрожди чрез клетъчни реакции [59]. Този бърз отговор се медиира от разтворими антибактериални молекули, като лизозим, лизенин и лубрицин [22, 42, 68]. Силно запазени имунологични молекули, като индикатори на клетъчната повърхност, бяха открити върху целомоцити с помощта на цитометричен анализ. По-специално, целомоцитите реагираха със специфични за бозайници антитела, показвайки повърхностна положителност към антитела анти-CD11a, CD45RA, CD45RO, CDw49b, CD54, b2-M и Ty-1 [30, 34].
Нашето изследване има за цел да оцени имунохистохимично присъствието на TLR2, CD14 и -Tubulin за първи път в целомоцити на Lumbricus terrestris (Linnaeus, 1758), широк, многосегментиран, цилиндричен земен червей, принадлежащ към семейство Lumbricidae (Annelida, Oligochaeta) , хермафродит, дълъг от 8 до 10 cm [55]. Подобряването на знанията за вътрешната защитна система на безгръбначните може да помогне за разбирането на по-сложния имунитет на гръбначните животни и, следователно, еволюцията на имунния отговор [63].
Материали и методи
Проби и подготовка на тъкани
Пробите от Lombricus terrestris идват от нашата лабораторна хистотека. Преди това те бяха взети в незамърсено открито поле и аклиматизирани в продължение на две седмици в прясна почва, както се съобщава от Licata et al. [51] и след това бяха приготвени по стандартните методи за светлинна микроскопия. Пробите бяха потопени в имунна (параформалдехид 4 процента) (05-W01030705, BioOptica Milano SpA, Милано, Италия) за два часа. След това се третират с дехидратираща етанолна скала (от 30 до 100 процента етанол) и след това се подготвят за включване в парафин с помощта на ксилен.
Веднъж включени, две тънки срезове от 3–5 μm, изрязани с ротационен микротом, бяха поставени върху всяко стъкло.
Хистология
Морфологични и хистохимични оцветявания бяха използвани за обработка на слайдовете [4, 6]. След това срезовете се рехидратират с помощта на прогресивни алкохолни разтвори (от 100 до 30 процента етанол), до дестилирана вода след депарафинизиране в ксилол [17], G. [75], впоследствие те се оцветяват с помощта на трихром Mallory и AB/PAS [3] . След оцветяване слайдовете бяха монтирани с помощта на Eukitt (BioOptica Milano SpA, Милано, Италия, Европа). Данните за щамовете, използвани в това проучване, са включени в таблица 1.
Имунофлуоресценция
Депарафинизираните срезове се третират с 5% разтвор на натриев борохидрид за елиминиране на автофлуоресценцията, след това се използва 2,5% разтвор на говежди серумен албумин (BSA) и след това срезовете се инкубират за една нощ с първични антитела срещу TLR2, CD14 и -тубулин [40]. ]. След това се извършва инкубация на вторични антитела. За да се избегне избелване, срезовете бяха монтирани с помощта на Fluoromount™ водна среда за монтиране (Sigma-Aldrich, Taufkirchen Германия, Европа). Експериментите бяха проведени без първичните антитела като отрицателна контрола (данните не са показани). За да се потвърди, че първичните антитела са имунопозитивни, тъканите на кожата на плъхове са използвани като положителна контрола (данните не са показани) [5, 47, 74].
Срезовете бяха анализирани под конфокален лазерен сканиращ микроскоп Zeiss LSM DUO с META модул (Carl Zeiss MicroImaging GmbH, Йена, Германия, Европа) с хелиево-неонови (543 nm) и аргонови (458 nm) лазери с различни дължини на вълната [7] . За подобряване на снимките е използван Zen 2011 (софтуер LSM 700 Zeiss, Oberkochen, Германия, Европа). С помощта на Adobe Photoshop CC версия 2019 (Adobe Systems, Сан Хосе, Калифорния, САЩ) цифровите изображения бяха обединени в съставна фигура. След това кривите на интензитета на флуоресценцията бяха оценени с помощта на функцията Zen 2011 "Display profile" [58]. Подробностите за антителата са обобщени в таблица 2.
Количествен анализ
Бяха събрани данни за количествен анализ чрез изследване на десет секции и двадесет полета на проба. Клетъчната положителност и броят бяха оценени с помощта на ImageJ софтуер 1.53e. Броят на целомоцитите, които са положителни за TLR2, CD14 и -тубулин, беше преброен с помощта на SigmaPlot версия 14.0 (Systat Software, Сан Хосе, Калифорния, САЩ). Нормално разпределените данни бяха анализирани с помощта на еднопосочен ANOVA и t-тест на Student. Отчитат се средни стойности и стандартни отклонения (SD) на броя на имунореактивните целомоцити: ** p По-малко или равно на 0.01, * p По-малко или равно на 0,05.
Резултати
Земният червей Lumbricus terrestris има еднослоен епител и покриваща влакнеста кутикула, които съставляват епидермиса. Съединителната и мускулната тъкан, които съставляват по-голямата част от стената на тялото, лежат под епидермиса. Епидермалния епител поддържа колагеновата кутикула различна от останалата част от организма и е отговорен за производството на този кутикуларен колаген. Кутикулата, епидермисът, надлъжният мускул и циркулярният мускул се виждат при хистологично изследване на напречното сечение на телесната стена на земните червеи. Епидермисът е морфологично добре очертан; той е или единичен епителен слой, или псевдостратифициран; състои се от опорни, базални, жлезисти и сетивни клетки (фиг. 1). Имунофлуоресцентният анализ при наблюдение с конфокален микроскоп показва положителни целомоцити за TLR2 (фиг. 2, 3), CD14 (фиг. 2) и -тубулин (фиг. 3), разпръснати в епидермиса и съединителния слой отдолу, и двата в надлъжния и в гладкомускулния слой. TLR2 и CD14 не са напълно колокализирани един с друг, което предполага, че тези целомоцити може да принадлежат към две различни семейства (фиг. 2). Освен това, мукозните жлезисти клетки са тубулин-положителни в епидермиса (фиг. 3). Чрез анализиране на функцията "профил на дисплея" на конфокалния микроскоп, ние потвърдихме пиковете на флуоресценция на колокализация между тестваните антитела.
Количественият анализ разкрива подобен брой положителни целомоцити за отделните тествани антитела, както е показано в таблица 3.
Дискусия
Отговорите на гостоприемника срещу нахлуващи патогени са физиологични механизми, принадлежащи на всички живи организми. От появата на първите еукариотни клетки са се развили няколко защитни процеса, за да се гарантира целостта на клетката, хомеостазата и оцеляването на гостоприемника [25]. Безгръбначните са развили набор от защитни реакции, които ефективно разпознават и отстраняват чужди материали, микроби или паразити. Докато хордовите имат адаптивен имунитет, лофотрохозоите като земни червеи разчитат предимно на вродени имунни клетки, като фагоцити (амебоцити, целомоцити), които включват филогенетично запазени PRRs за медииране на имунния отговор [41]. Рецепторите за почистване, TLR и Nod-подобните рецептори (NLR) са видни представители при безгръбначните. След свързване на рецептор-лиганд, сигналната трансдукция инициира сложна каскада от клетъчни реакции, водещи до производството на една или повече ефекторни молекули, участващи в имунния отговор [61]. Целомичният цитолитичен протеин (CCF), липополизахарид-свързващият протеин (EaLBI/BPI) и Toll-подобният EaTLR рецептор са трите вида PRRs, които са идентифицирани досега в земните червеи [65, 66]. CCF е идентифициран и характеризиран като имунна молекула на целомичната течност и целомоцитите на Eisenia foetida (Savigny, 1826). CCF, свързвайки се с микробните антигени, може да задейства профенолоксидазната каскада, важен имунен механизъм на безгръбначни, който също проявява опсонизиращи свойства, като по този начин насърчава фагоцитозата [18, 35].
TLRs са еволюционно запазени рецептори за мембранно разпознаване [9, 15], които разпознават чужди антигени, използвайки PAMPs [2] и допринасят за модулирането на имунния отговор [8, 9, 11, 36]. Бодо и др. [24] демонстрират наличието на TLR върху целомоцити на пръстеновидна олигохета Eisenia andrei (Bouché, 1972) [24]. Сканта и др. (2013) изолира TLR на земен червей (EaTLR) от E. andrei. Голямото вътрешновидово разнообразие на този рецептор показва наличието на няколко TLR гена в генома на E. andrei. TLR от пръстеновидната полихета Capitella teleta (Blake, Grassle и Eckelbarger, 2009), EaTLR и TLR на мекотели и бодлокожи споделят много прилики, според филогенетични изследвания [66]. Прочазкова и др. подчертан EaTLR и множествен цистеинов клъстер (MCC) EaTLR, експресиран в телесните тъкани на земните червеи. Първият е особено изобилен в храносмилателната система, докато вторият може да действа в ембрионалното развитие и отговора срещу паразити [61]. Освен това, присъствието му в целомоцитите може да бъде свръхекспресирано поради натрупване на бактерии [66]. Целомоцитите на Lumbricus terrestris успяха да разпознаят моноцитите in vitro като несамостоятелни, потвърждавайки техния капацитет за имунно разпознаване [62]. Изследванията на транскриптомиката потвърждават наличието на 18 TLRs в полихетни пръстеновидни Arenicola marina (Linnaeus, 1758) [67].
По-рано сме демонстрирали присъствието на TLR2 в няколко гръбначни [4, 11, 12, 16, 46, 54] и урохордати [14, 45].
След тези данни, нашето проучване характеризира имунохистохимично TLR2 в целомоцити на Lumbricus terrestris за първи път. Колокализирахме TLR2/CD14 и TLR2/-тубулин, потвърждавайки два клетъчни типа целомоцити, както се съобщава от Engelmann [33]. Не всички целомоцити са били колокализирани за тестваните антитела, което предполага вероятна функционална и структурна диверсификация на тези клетки. Въпреки че няма експериментални доказателства, наличието на TLR2/CD14 колокализирани целомоцити може да предполага, че тези клетки могат да бъдат амебоцити, участващи във фагоцитоза, докато целомоцити, експресиращи само TLR, може да са меланоцитни клетки, участващи в имунния отговор, но не изпълняващи фагоцитни функции [1, 37 , 38], SJ [49, 50], p., [57, 71]. Въпреки Bodó et al. което предполага отсъствието на TLR в меланоцитите на E. andrei с помощта на qPCR [23], TLR2-позитивните меланоцити се откриват в L. terrestris, което предполага разлика между видовете земни червеи, както вече се предположи на базата на ядрена генома [64].
Проучване на Eguielor et al. [31] при пиявица Glossiphonia complanata (Linnaeus, 1758) идентифицира морфологично и хистохимично три основни типа клетки (макрофагоподобни клетки, NK-подобни клетки, гранулоцити тип I и II), използвайки различни античовешки маркери при мишка, специфична за макрофаги CD14 и CD61 [44] и NK клетки CD56 и CD57 [43]. Тази кръстосана реактивност към антитела, генерирани срещу CD антигени на бозайници, е в съгласие с литературните данни за филогенетични корелации между анелиди и гръбначни [21, 30] и може да бъде пример за еволюционно запазване на тези имунни молекули.
Миши анти-човешки анти-CD24, анти-туморен некрозис фактор (TNF)-, анти-CD45RA и анти-CD45RO антитела са локализирани в повърхностите на целомоцитите на земния червей Eisenia foetida [30, 34], което предполага, че тези молекули са силно запазени по време на филогенезата. Тези проучвания са в съответствие с предишни изследвания, демонстриращи, че повърхностните антигени на целомоцитите са кръстосано реагиращи с антитела срещу CD14, CD11b и CD11c, произведени в бозайник Temiste petricola (Amor, 1964), характеризиращи фагоцити, положителни към анти-CD14, CD11b и CD11c антитела [21 ]. Чрез тези данни нашите резултати показват фагоцитни клетки, имунореактивни към CD14 в Lumbricus terrestris.
Освен това, ние демонстрирахме имунопозитивността на целомоцитите към -тубулин, колокализиран с TLR2, показвайки връзка между цитоскелета, микротубулите и вродения имунен отговор, медииран от TLR2. Колокализацията на TLR2 и -Tubulin потвърждава участието на тубулин в транспорта на TLR върху повърхността на мембраната. Проучване на Heli Uronen-Hansson et al. [70] показват екстензивна тубуловезикуларна експресия на TLR2 и TLR4 върху вътрешни и външни моноцити, както и в дендритни клетки. Тъй като тези рецептори са колокализирани с -тубулин и са свързани директно с комплекса на Голджи, микротубулите могат да служат като канал за пренос на TLR везикули [70]. Тубулинът също присъства в епидермиса, като помага да се поддържа неговата цялост [27] и се намесва в заздравяването на рани [73], като по този начин подпомага вродената имунна система, както се съобщава и от проучвания върху Nematoda Caenorhabditis elegans (Maupass, 1900) [27, 69].
Колокализацията, потвърдена от функцията "профил на дисплея" на конфокалния микроскоп, потвърждава получените резултати, подчертавайки пика на флуоресценция, съответстващ на свързването на антителата със съответните антигени.
В заключение, нашето проучване идентифицира чрез конфокална микроскопия целомоцити, имунореактивни към TLR2, CD14 и -Tubulin за първи път в Oligochaeta annelid Lumbricus terrestris. Тези данни не само потвърждават важното еволюционно запазване на тези молекули, но също така задълбочават познанията ни за вътрешната система за защита на безгръбначните, особено пръстеновидните, и могат да предоставят полезни индикации за бъдещи изследвания, подобрявайки изследването на сложните вродени имунни механизми на горни гръбначни животни.
Изявление на институционалния съвет за преглед
Етичният преглед и одобрението бяха отменени за това проучване, тъй като към пробите не бяха приложени експериментални процедури.
Авторски принос
Концептуализация, Алесио Алески; формален анализ, Алесио Алески и Анджело Фумиа; разследване, Алесио Алески, Джоеле Капило, Анджело Фумиа, Марко Албано, Емануеле Месина, Нунциакарла Спано, Симона Перголици и Евгения Рита Лауриано; обработка на данни, Алесио Алески, Джоеле Капило, Анджело Фумиа, Марко Албано, Емануеле Месина, Нунциакарла Спано, Симона Перголици и Евгения Рита Лауриано.; писане—оригинална подготовка на черновата, Алесио Алески; писане – рецензия и редакция, Алесио Алески, Джоеле Капийо, Нунциакарла Спано, Симона Перголици и Евгения Рита Лауриано; визуализация, Алесио Алески и Анджело Фумиа; супервизия, Eugenia Rita Lautiano. Всички автори са прочели и са съгласни с публикуваната версия на ръкописа.
Финансиране
Това изследване не получи външно финансиране.
Наличие на данни и материали
Данните, представени в това проучване, са достъпни в статията.
Декларации
Етично одобрение и съгласие за участие
Не е приложимо.
Конкуриращи се интереси
Авторите декларират липса на конфликт на интереси.
Препратки
1. Aderem A, Underhill DM. Механизми на фагоцитоза в макрофагите. Annu Rev Immunol. 1999; 17 (1): 593–623. https://doi.org/10.1146/annur ev.immunol.17.1.593.
2. Akira S, Uematsu S, Takeuchi O. Разпознаване на патогени и вроден имунитет. клетка. 2006; 124 (4): 783–801. https://doi.org/10.1016/j.cell.2006.02.015.
3. Alesci A, Albano M, Savoca S, Mokhtar DM, Fumia A, Aragona M, Lo Cascio P, Hussein MM, Capillo G, Pergolizzi S, Spanò N, Lauriano ER. Конфокална идентификация на имунни молекули в Skin Club клетки на Zebrafsh (Danio rerio, Hamilton 1882) и тяхната възможна роля в имунитета. Биология. 2022;11(11):1653. https://doi.org/10.3390/biology11111653.
4. Alesci A, Capillo G, Fumia A, Messina E, Albano M, Aragona M, Lo Cascio P, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Конфокална характеристика на чревни дендритни клетки от Myxines до Teleosts. Биология. 2022;11(7):1045.https://doi.org/10.3390/biology11071045.
5. Alesci A, Capillo G, Mokhtar DM, Fumia A, D'Angelo R, Lo Cascio P, Albano M, Guerrera MC, Sayed RKA, Spanò N, Pergolizzi S, Lauriano ER. Експресия на антимикробен пептид Piscidin1 в мастни клетки на хрилете на гигантски тинен скипер Periophthalmodon schlosseri (Pallas, 1770). Int J Mol Sci. 2022;23(22):13707. https://doi.org/10.3390/ijms232213707.
6. Alesci A, Cicero N, Fumia A, Petrarca C, Mangifesta R, Nava V, Lo Cascio P, Gangemi S, Di Gioacchino M, Lauriano ER. Хистологичен и химичен анализ на тежки метали в бъбреците и хрилете на Boops Boops: Меланомакрофагите центрове и Rodlet клетки като екологични биомаркери. Токсици. 2022; 10 (5): 218. https://doi.org/10.3390/toxics10050218.
7. Alesci, A., Fumia, A., Miller, A., Calabrò, C., Santini, A., Cicero, N., & Lo Cascio, P. (2022). Спирулина насърчава агрегацията на макрофагите в черния дроб на рибата зебра (Danio rerio). Nat Prod Res, 1–7. https://doi.org/10.1080/14786419. 2022.2089883.
8. Alesci, A., Gitto, M., Kotańska, M., Lo Cascio, P., Miller, A., Nicosia, N., Fumia, A., & Pergolizzi, S. (2022). Имуногенност, ефективност, безопасност и психологическо въздействие на иРНК ваксините срещу COVID-19. Human Immunol, S0198885922001586. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2022.08.004.
9. Alesci, A., Lauriano, ER, Aragona, M., Capillo, G., & Pergolizzi, S. (2020). Маркиране на гръбначни клетки на Лангерханс, от риби до бозайници. Acta Histochemica, 122 (7): 151622. https://doi.org/10.1016/j.acthis.2020.151622.
10. Alesci A, Lauriano ER, Fumia A, Irrera N, Mastrantonio E, Vaccaro M, Gangemi S, Santini A, Cicero N, Pergolizzi S. Relationship between Immune Cells, Depression, Stress, and Psoriasis: Could the Use of Natural Products Бъди полезен? Молекули. 2022; 27 (6): 1953.
11. Alesci, A., Pergolizzi, S., Capillo, G., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Пръчковидни клетки в бъбрек на златна рибка (Carassius auratus, Linnaeus 1758): Светлинно и конфокално микроскопско изследване. Acta Histochemica, 124(3):151876.
12. Alesci, A., Pergolizzi, S., Fumia, A., Calabrò, C., Lo Cascio, P., & Lauriano, ER (2022). Мастни клетки в червата на златна рибка ( Carassius auratus ): Имунохистохимична характеристика. Acta Zoologica.
13. Alesci A, Pergolizzi S, Fumia A, Miller A, Cernigliaro C, Zaccone M, Salamone V, Mastrantonio E, Gangemi S, Pioggia G, Cicero N. Имунна система и психологическо състояние на бременни жени по време на COVID-19 .Пандемия: Микронутриентите способни ли са да поддържат бременност? хранителни вещества. 2022;14(12):2534. https://doi.org/10.3390/nu14122534. 14. Alesci, A., Pergolizzi, S., Lo Cascio, P., Capillo, G., & Lauriano, ER (2022). Локализация на вазоактивен чревен пептид и имунореактивни клетки, подобни на toll-рецептор 2, в ендостил на urochordate Styela plicata (Lesueur, 1823). Microsc Res Tech, https://doi.org/10.1002/jemt.24119.
15. Alesci A, Pergolizzi S, Lo Cascio P, Fumia A, Lauriano ER. Невронна регенерация: Сравнителен преглед на гръбначните животни и нови перспективи за невродегенеративни заболявания. Acta Zoologica. 2021. https://doi.org/10. 1111/азо.12397.
16. Alesci A, Pergolizzi S, Savoca S, Fumia A, Mangano A, Albano M, Messina E, Aragona M, Lo Cascio P, Capillo G, Lauriano ER. Откриване на чревни чашковидни клетки на широкохрилния Hagfsh Eptatretus Cirrhatus (Forster, 1801): Оценка с конфокална микроскопия. Биология. 2022;11(9):1366.https://doi.org/10.3390/biology11091366.
17. Alturkistani HA, Tashkandi FM, Mohammedsaleh ZM. Хистологични петна: Преглед на литературата и казус. Global J Health Sci. 2015; 8 (3): 72. https://doi.org/10.5539/gjhs.v8n3p72.
18. Beschin A, Bilej M, Brys L, Torreele E, Lucas R, Magez S, De Baetselier P. Конвергентна еволюция на цитокини. Природата. 1999;400(6745):627–8.https://doi.org/10.1038/23164.
19. Bilej M, De Baetselier P, Beschin A. Антимикробна защита на земния червей. Folia Microbiol. 2000;45(4):283–300. https://doi.org/10.1007/BF028 17549.
20. Bilej M, Procházková P, Šilerová M, Josková R (2010) Имунитет срещу земни червеи. В: Söderhäll K, edotiro. Имунитет на безгръбначните, том. 708. Бостън: Springer; стр. 66–79). https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_4.
21. Blanco GAC, Escalade AM, Alvarez E, Hajos S. LPS-индуцирано стимулиране на фагоцитоза в sipunculan червей Themiste petricola: Възможно участие на човешки CD14, CD11B и CD11C кръстосано реактивни молекули. Dev Comp Immunol. 1997; 21 (4): 349–62. https://doi.org/10.1016/ S0145-305X(97)00007-4.
22. Bodó K, Boros Á, Rumpler É, Molnár L, Böröcz K, Németh P, Engelmann P. Идентифициране на нови лубрицинови хомолози в земните червеи Eisenia andrei. Dev Comp Immunol. 2019; 90: 41-6.
23. Bodó, K., Ernszt, D., Németh, P., & Engelmann, P. (2018). Различни имунни и свързани със защитата молекулярни отпечатъци в разделени целомоцитни подгрупи на земни червеи Eisenia andrei. Оцеляване на безгръбначни J, 338–345.
24. Bodó K, Kellermayer Z, László Z, Boros Á, Kokhanyuk B, Németh P, Engelmann P. Индуциран от нараняване вроден имунен отговор по време на сегментна регенерация на земния червей, Eisenia andrei. Int J Mol Sci. 2021;22(5):2363.
25. Бухман, К. (2014). Еволюция на вродения имунитет: улики от безгръбначни през риби до бозайници. Граници в имунологията.
For more information:1950477648nn@gmail.com
