Сравнение на контролните ефекти на ризосферните почвени бактерии върху почвените болести на Cistanche Deserticola

Резюме: За скрининг за ризосферни бактерии, които имат контролен ефект върху пренасяните от почвата заболявания на Cistanche deserticola, бяха използвани различни години на засаждане на Cistanche deserticola под широколистни гори в окръг Tonghua. Използвайки ризосферната почва на Cistanche deserticola като материал, бактериите бяха изолирани с помощта на методът на градиентно разреждане и антагонистичните бактерии бяха скринирани с помощта на метода на конфронтация на плочата. Резултатите показват, че от ризосферата на Cistanche deserticola са изолирани 37 бактериални щама от почвата, а 8 щама имат инхибиращ ефект върху болестта на Cistanche deserticola. Сред тях щамовете с код 5-2, 11-6 и 11-7 проявяват антибактериална активност. Ефектът е най-значителен. 9 щама имат инхибиторен ефект върху мана по стъблото на Cistanche deserticola и в сравнение с CK, инхибиторните ефекти на два бактериални щама 15-6 и 11-1 на ниво {{10}}.01 Има много значителна разлика в бактериалния диаметър, като три бактериални щама, 11-1, 15-6 и 15-5, показват значителни разлики на ниво 0,05. 9 щама Има известен инхибиторен ефект върху кореновото гниене на Cistanche deserticola, но нито един от тях не е значим, като щамовете 11-7 имат най-големия антибактериален диаметър. Бактериите 5-2, 11-1, 11-7Щамове 15-5 и 15-6 могат да бъдат допълнително идентифицирани и допълнително изследвани.

Cistanche deserticola

Щракнете тук, за да видите продуктите за чай Cistanche deserticola

【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Ключови думи:Cistanche deserticola; Широколистна гора; Биологичен контрол; Метод на конфронтация на плочи

Cistanche deserticola [1] се отглежда главно в района на планината Changbai и е основната производствена зона на Cistanche deserticola в Китай, представляваща 85 процента от производството в страната и 52 процента от световното производство. Cistanche deserticola съдържа различни биоактивни компоненти като сапонини и полизахариди, които са изследвани и имат определени ефекти в области като противотуморни, имунология и хранене. Качеството и добивът на Cistanche deserticola са ограничени от пренасяните от почвата болести на Cistanche deserticola [3], което означава, че патогените в почвата могат да повредят корените и стъблата на културите и да причинят заболявания. Пренасяните от почвата болести на Cistanche deserticola включват кореново гниене, сива плесен, гниене по стъблата, увяхване и внезапна смърт. Болестта на Cistanche се причинява от Fusarium oxysporum, който може да причини болестни петна по стъблата и листата, което в крайна сметка води до полягане и смърт на Cistanche. Патогенните бактерии на болестта Cistanche deserticola wilt са предимно Rhizoctonia solani [6]. Заразеното място произвежда болестни петна, разпространява се в околността и в крайна сметка цялото растение изсъхва и умира. Болестта на кореновото гниене на Cistanche deserticola се причинява от Fusarium oxysporum [7], който може да произведе голям брой спори за дифузия и пролиферация, което води до патологични промени в корените на Cistanche deserticola, невъзможност за нормално усвояване на хранителни вещества от почвата и в крайна сметка коренът на Cistanche deserticola изгнива и умира.

Cistanche deserticola florescence

Използването на микроорганизми за превенция и контрол на заболявания е екологично и без замърсяване ефективно средство за биологичен контрол. Въпреки че химическият контрол има значителни ефекти и бърз ефект и може ефективно да контролира болестите в краткосрочен план, вредата от него за околната среда и почвата често е необратима. Това изследване има за цел да скринира ризосферните бактерии от Cistanche deserticola, които имат антибактериални ефекти върху болести, пренасяни от почвата, и осигуряват референтна основа за производството на микробни агенти.

1 Материал и методи

1.1 Материали

През юли 2020 г. бяха използвани конвенционални методи за събиране на почвени проби от базата на Cistanche deserticola под широколистната гора в град Shihu, окръг Tonghua, с години на засаждане от 2, 5, 8, 11 и 15 години, както и почва от площи без засаждане на Cistanche deserticola. Пробите бяха охладени при 4 градуса в лабораторията и номерирани за бъдеща употреба. Използвайте PDA среда за култивиране на гъбички и говежди екстракт от пептонова среда за култивиране на бактерии.

Пустинна жива цистанче

Три патогенни бактерии, Fusarium sp., Rhizoc tonia solani и Fusarium solani, бяха предоставени от микробиологичната лаборатория на Тонгхуа Нормален университет.

1.2 Експериментални методи

Методът на градиентно разреждане беше използван за изолиране на микробни щамове в ризосферната почва на Cistanche deserticola [10], а методът на конфронтация на плочата беше използван за скрининг на ризосферни бактерии с антагонистични ефекти. Първо, активирайте три вида патогенни бактерии в средата на PDA [11] и след това направете бактериална торта с колонията, обърната надолу. Инокулирайте го в центъра на PDA средата и използвайте инокулационен пръстен, за да инокулирате ризосферни бактерии на разстояние 23 mm от ръба на съда, без да се инокулират бактерии като празна контрола. Извършете 3 повторения за всяко третиране, инкубирайте при 30 градуса за 4-7 дни, наблюдавайте за наличието на антибактериални кръгове [12] и измерете антибактериалния диаметър.

Данните бяха анализирани с помощта на софтуер Excel 2016 за статистика на данни и софтуер DPS за анализ на данни.

2 Резултати и анализ

Изолиране и пречистване на бактерии в ризосферната почва на Panax ginseng под широколистни гори

37 бактериални щама са изолирани от почва от женшен под широколистни гори и почва от ризосфера на женшен от различни години на засаждане, както е показано в таблица 1.

Таблица 1 Брой и номериране на бактерии, изолирани от ризосферна почва на женшен

Забележка: В таблицата възрастта на засаждане на Cistanche deserticola е 0, което се отнася за почвата в района, където не е засадена Cistanche deserticola. Първата цифра представлява възрастта на засаждане на Cistanche deserticola, а последната цифра представлява номера на щама

2.2 Скрининг на биоконтролиращи бактерии в ризосферната почва на Cistanche deserticola под широколистни гори

Чрез експерименти бяха предварително скринирани 8 щама бактерии с антагонистичен ефект върху болестта Cistanche wilt, 9 щама бактерии с антагонистичен ефект върху болестта Cistanche wilt и 10 щама бактерии с антагонистичен ефект върху болестта Cistanche wilt.

2.2.1 Антагонистичен ефект на бактерии за биоконтрол върху болестта Cistanche wilt

Сред 37-те щама бактерии, изолирани от ризосферната почва на Cistanche deserticola, 8 щама имат инхибиторен ефект върху Fusarium oxysporum, докато 29 щама нямат инхибиторен ефект. Съгласно експеримента за конфронтация с плосък панел, беше измерен диаметърът на инхибиторната зона на всяка антибактериална бактерия срещу патогена на болестта на Cistanche deserticola wilt [13]. Трите повторени експериментални данни бяха въведени в Excel и анализът на значимостта на разликата беше извършен върху данните с помощта на DPS софтуер. Резултатите са показани в таблица 2.

Таблица 2 Определяне на контролния ефект на различни антибактериални бактерии върху болестта на Cistanche deserticola wilt

Резултатите от анализа показват, че само диаметрите на инхибиране на {{0}} са значително различни от контролата, докато диаметрите на инхибиране на 5-2, 11-6 и 11-7 са значително различен от контролния. Сред леченията нямаше разлика на ниво 0.01. На ниво 0,05 имаше значителна разлика между бактериите 11-7 и 11-1, 15-5 и 15-6, докато нямаше значителна разлика между бактериите 11-7 и 5-2, 11-4, 11-5 и 11-6. Бактериите 5-2, 11-6 и 11-7 могат да бъдат разгледани за по-нататъшно изследване на техните антибактериални ефекти в полето.

2.2.2 Антагонистичен ефект на бактерии за биоконтрол върху мана по стъблото на Cistanche deserticola

От 37 бактериални щама, изолирани от ризосферата на почвата на Cistanche deserticola, 9 щама имат инхибиторен ефект върху Fusarium oxysporum, докато 28 щама нямат инхибиторен ефект. Резултатите от статистическия анализ са показани в таблица 3.

Таблица 3 Определяне на контролния ефект на различни антибактериални бактерии върху болестта на Cistanche deserticola Wilt

От резултатите от анализа в таблица 3 може да се види, че в сравнение с CK, има много значителна разлика в антибактериалния диаметър на двата бактериални щама 15-6 и 11-1 при 0 .01 ниво, а при ниво 0,05 има много значителна разлика в антибактериалния диаметър на трите бактериални щама 15-6, 11-1 и 15-5. Няма значителна разлика между други фактори и CK. Няма значителна разлика в антибактериалния диаметър между трите бактериални щама 11-1, 15-5 и 15-6 при различните лечения. Имаше значителна разлика в антибактериалния диаметър между 15-6 и други бактерии и нямаше значителна разлика между 5-2, 11-1, 11-3, 11-4, 11-7 и 15-5, но беше значително в сравнение с 0-3 и 15-4. 15-6, 11-4 и 15-5 имат най-добър бактериален контролен ефект и могат да бъдат допълнително тествани за тяхната ефективност.

2.2.3 Антагонистичен ефект на биоконтролните бактерии върху кореновото гниене на Cistanche deserticola

Таблица 4 Определяне на контролния ефект на различни антибактериални бактерии върху кореновото гниене на Cistanche deserticola

Резултатите в таблица 4 показват, че бактериите 11-7 имат известен инхибиращ ефект върху увяхването на женшен, но ефектът не е значителен. Тези 10 групи бактерии нямат значителен инхибиращ ефект върху патогенните бактерии в сравнение с контролната група.

3 Резюме и дискусия

В този експеримент общо 37 бактериални щама са изолирани от ризосферната почва на женшен, засаден за 2, 5, 8, 11 и 15 години без женшен под широколистни гори. Отсечени са осем щама бактерии с инхибиторен ефект върху болестта на женшен, като щамовете 5-2, 11-6 и 11-7 имат най-значими антибактериални ефекти. Девет щама имат инхибиращ ефект върху болестта на женшен. В сравнение с CK, има много значителна разлика в антибактериалния диаметър на два бактериални щама, {{10}} и 11-1, на ниво 0.01. На ниво 0,05 има много значителна разлика в антибактериалния диаметър на три бактериални щама, 11-1, 15-6 и 15-5. 9 щама имат определени инхибиторни ефекти върху кореновото гниене на женшен, но нито един от тях не е значим, като щамовете 11-7 имат най-голям инхибиторен диаметър.

Супермен билки цистанче

Сред тях бактериалните щамове 5-2, 11-1, 11-7, 15-5 и 15-6 могат да се използват като отлични антибактериални бактерии за култивиране и размножаване, като се изучават допълнително техните антибактериални ефекти в областта. Инхибиторният ефект върху други патогенни бактерии на болестите на женшен се нуждае от допълнително проучване.

Пустинен женшен

Използването на микроорганизми за контрол на болестите по растенията има малко въздействие върху околната среда и хората, което отразява концепцията за устойчиво развитие [14] и има широки перспективи за развитие. Пускането на биологични агенти в производство и популяризиране също ще подобри информираността на хората за опазването на околната среда. Използването на бактериостатични агенти, подходящи за полето, ще донесе дългосрочни ползи и устойчиви екологични ползи.

справка

[1] Чен Хонгю, Цао Янг, Янг Хуапин. Анализ на приложната стойност на участието на Lin Xiashan в култивирането на женшен [J]. Въведение в традиционната китайска медицина, 2019, 25 (06): 67-68 плюс 81

[2] Zhang Lianxue, Chen Changbao, Wang Yingping и др. Изследване върху непрекъснатото отглеждане на женшен и неговите разтвори [J] Journal of Jilin Agricultural University, 2008,30 (4): 481-485491

[3] Парк Джингпей, Дай Юецян, Джоу Сяомей. Напредък на изследванията в биологичния контрол на болестите на женшен [J]. Journal of Jilin Normal University (Natural Science Edition), 2021, 42 (04): 103-107

[4] Предварително проучване на скрининга, идентификацията и оценката на антибактериалната ефикасност на 7 антибактериални щама на заболявания на женшен от Shao Tianwei [D]. Медицински колеж в Пекин, 2017 г

[5] Дън Фанг. Изследване на болестта на увяхването на женшен [J]. Journal of Plant Pathology, 1989, (02): 122

[6] Гао Уей. Цялостни техники за превенция и контрол на болестта на увяхването на женшен [J]. Приятели на богатството на фермерите, 2018 г., (19): 29

[7] Чен Деде. Анализ на патогени на кореново гниене на женшен и гниене на ръжда и скрининг и идентифициране на антагонисти [D]. Аграрен университет в Джилин, 2019 г

[8] Ли Хаою. Изолиране и идентифициране на антагонистични микроорганизми в картофена ризосферна почва и предварително изследване на техните антибактериални ефекти [D]. Аграрен университет на Вътрешна Монголия, 2020 г

[9] Шао Тианвей, Дин Ванлонг, Ли Йонг. Скрининг и идентифициране на антагонистични щамове на патогенни бактерии от женшен [J]. Съвременна китайска медицина, 2017, 19 (05): 693-697

[10] Zhang Jiejing, Chen Dede, Gao Jixuan и др. Скрининг и идентифициране на антибактериални бактерии срещу болестта на гниене на ръжда от женшен и тяхното въздействие върху микробното разнообразие в ризосферната почва [J]. Вестник на Jilin Agricultural University, 2020, 42 (05): 526-532

[11] Сун Уей. Метод за бактериално активиране [J]. Ръководство за безопасност на храните, 2020 г., (35): 78

[12] Дзян Джу. Биологичен контрол на пренасяните от почвата гъбични заболявания при женшен [D]. Университет Хейлундзян, 2010 г

[13] Wei Chuanhao, Wang Meiqin. Инхибиторният ефект на антибактериалната бактерия GHt-q6 върху патогена на увяхването на краставицата [J]. Shanxi Agricultural Science, 2021, 49 (04): 494-498

[14] Song Jinqiu, Tian Canxi. Биологичен контрол на растителни ендофити при болести по растенията [J]. Селскостопанска механизация на Хубей, 2020 г., (04): 69-70