Откриване на хуморален и клетъчен имунен отговор към анти-SARS-CoV-2 BNT162b2 ваксина при кърмещи жени и нелекувани и инфектирани преди това лица

Това проучване изследва хуморалните и клетъчните отговори на анти-SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA ваксина при кърмещи жени и нелекувани и серопозитивни индивиди през първите шест месеца след ваксинацията. Шестдесет и един доброволци, ваксинирани с две дози BNT162b2 иРНК ваксина, са включени в проучването. Вътрешно разработеният ELISA беше използван за количествено определяне на SARS-CoV-2 RBD-специфични антитела. Експресията на маркер на клетъчната повърхност и вътреклетъчният IFN-анализ се извършват чрез поточна цитометрия. Концентрациите на IFN-, IL-6 и TNF се определят чрез ELISA. Значително покачване на нивата на анти-RBD IgG антитела се наблюдава 14 дни след първата доза ваксина (p< 0.0001) in serum and milk. The expression of CD28 on CD4+ T cells was significantly higher compared to baseline (p< 0.05). There was a significant increase (p≤ 0.05) in the B cell lymphocyte subset after revaccination and an increased percentage of CD80+ B cells. The expression of IFN-γ in peripheral blood lymphocytes, CD3+ T cells, and serum was significantly increased (p< 0.05). No significant difference in immune response was observed between breastfeeding women and other study participants. The anti-SARS CoV-2 BNT162b2 mRNA vaccine induced measurable and durable immune response in breastfeeding women and naïve and previously infected individuals. 

Cistanche ползи за мъжете - укрепване на имунната система

Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Enhance Imunity

【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1. Въведение 

Глобалното широко разпространение на вируса SARS-CoV-2 след регистрирания първи специален случай на 31 декември 2019 г. в Ухан, Китай, доведе до световна пандемия от коронавирусната болест-19 (COVID{{ 5}}), с около 648 милиона случая и 6,6 милиона смъртни случая до 18 декември 2022 г.1. Смъртността при COVID-19 се свързва с прекомерното производство на провъзпалителни цитокини като IL-6, TNF- и IL-1, така наречената „цитокинова буря“, която може да доведе до синдром на остър респираторен дистрес и обширно увреждане на тъканите, водещо до многоорганна недостатъчност2. Бързите подобрения в диагностиката, лечението и въвеждането на ваксинации обаче се очаква да допринесат за постоянен спад в броя на заразените лица, необходимостта от хоспитализация и в крайна сметка намаляване на смъртността. В Сърбия първият официално регистриран случай е на 6 март 2020 г., а ваксинацията е започнала на 24 декември 2020 г. В момента има четири ваксини, достъпни за общото население, Vero Cell–Inactivated (Sinopharm), Vaxzevria (ChAdOx{{ 22}}S [рекомбинантен], AstraZeneca), Sputnik V (Gam-COVID-Vac, Gamaleya) и Comirnaty (BNT162b2, BioNTech–Pfizer). В допълнение към производството на специфични антитела, ефективният имунен отговор срещу SARS-CoV-2 изисква активиране на клетъчния имунитет. Компонентите на клетъчния имунитет, включително помощни CD4+ и цитотоксични CD8+ Т клетки, клетки естествени убийци (NK) и В клетки, в рамките на първите часове и дни след излагане на този вирус се очаква да намаляване на симптомите на заболяването, предотвратяване на прогресирането на заболяването, хоспитализацията и смъртта. Активираните Т-хелперни (Т) клетки могат индиректно да убиват заразените клетки и да поддържат функцията на В-клетките и отговора на антителата, като произвеждат интерферон- (IFN-)3,4. Доказано е, че фенотипът Т1 е свързан с по-ниска тежест на заболяването COVID-195, поради което стратегиите за разработване на ваксини срещу COVID-19 също трябва да вземат под внимание възможността за активиране на Т клетки за производство на IFN. Съобщава се, че клетъчният имунитет към SARS-CoV-2 може да бъде открит до 6 месеца след заразяването при над 90% от индивидите6. По този начин се очакваше, че ваксинацията ще доведе до измерим клетъчен имунитет, който ще допринесе за битката срещу пандемията. Нови резултати показват, че освен активирането на B клетки в зародишните центрове7, анти-SARS-CoV-2 иРНК ваксините трябва да генерират шипове протеин-специфични CD4+ и CD8+ Т клетъчни отговори8. Въпреки че титърът на антителата обикновено корелира с ефикасността на ваксината, В и Т клетките са важни за защитата при повторно излагане на вирусни антигени. Тези В и Т клетки на паметта се очаква да бъдат генерирани от SARS-CoV-2 иРНК ваксини и трябва да играят роля в контролирането на репликацията на вируса, ограничавайки разпространението на вируса9. Въпреки че не са докладвани сериозни нежелани събития, специфичният отговор на ваксинацията срещу SARS-CoV-2 при бременни и кърмещи жени и бебета, чиито майки са получили ваксината по време на кърмене, все още се оценява и остава спорна тема10,11. Това изследване имаше за цел да проучи за първи път месечните хуморални и клетъчни отговори на анти-SARS-CoV-2 BNT162b2 мРНК ваксина при кърмещи жени и при нелекувани и серопозитивни лица през първите шест месеца след ваксинацията в Сърбия, и двугодишно самостоятелно докладвано проследяване на дългосрочната безопасност.

материали и методи

Дизайн на изследването и събиране и обработка на проби.

Общо 61 доброволци (45 SARS-CoV-2 нелекувани, 16 SARS-CoV-2 възстановени според PCR-потвърдени доклади) бяха включени в проучването и наблюдавани в периода от януари до 2 ноември{ {11}}21. Средното време между естествената инфекция и ваксинацията при предишни инфектирани индивиди е 3,18±0,98 месеца, с диапазон от 2–5 месеца. Всички участници са били на възраст над 18 години и не са показвали признаци на респираторни инфекции по време на ваксинацията. Повечето участници бяха здравни работници от Института по онкология и радиология на Сърбия (44; 72%). Участниците бяха ваксинирани с две дози BNT162b2 иРНК ваксина (с интервал от 3 седмици). Всички вземания на кръв са извършени в одобрени медицински центрове при стриктни протоколи и наблюдение. Четирима участници бяха кърмещи майки, които доброволно съпоставиха проби от кръв и мляко. Пробите бяха събрани в 6-времеви точки: точка 1—предварителна ваксинация (базова линия), точка 2–14 дни след първична имунизация, точка 3–1 месец след първична имунизация, точка 4–2 месеца след първична имунизация, точка 5–3 месеца след първичната имунизация и точка 6–6 месеца след първичната имунизация. 10–20 mL периферна кръв бяха взети за всяка времева точка, както и 1 mL мляко за 4 участващи кърмачки. Серумът се получава от периферна кръв чрез центрофугиране веднага след вземане на кръв и се съхранява при -20 градуса. Мононуклеарни клетки от периферна кръв (PBMC) се изолират от хепаринизирана кръв с градиент на плътност Lymphoprep (Nypacon, Oslo, Норвегия), центрофугират се при 500 g за 40 минути и се промиват три пъти в RPMI 1640 културална среда (CM) (Sigma, St. Louis , MO), допълнен с 10% фетален телешки серум (FCS) (Sigma, St. Louis, MO). След промиване PBMC веднага се използва за имунофенотипен анализ. Проучването е одобрено от Комитета по етика на Института по онкология и радиология на Сърбия (№ 899–01 от 01.04.2021 г.), като всички участници са подписали информирано съгласие. Всички участници бяха интервюирани от опитен медицински персонал. Дългосрочно самостоятелно докладвано проследяване на нежеланите ефекти след ваксинация е проведено в продължение на две години след първата доза ваксина.

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Откриване и количествено определяне на SARS‑CoV‑2 RBD-специфични антитела.

Експресията на RBD на шиповия протеин на SARS-CoV-2 (NCBI: YP_009724390, AA319-541) беше извършена в HEK-293 Т клетъчна линия след предварително публикувана процедура12 . Рекомбинантният протеин се пречиства до хомогенност и полученият добив е 5{{20}}0 mg на L от клетъчната култура. Накратко, рекомбинантният RBD протеин се използва за покриване на плаки с мастно дъно 96-ямки (Thermo Scientific NUNC-MaxiSorp, САЩ) при крайна концентрация от 10 ug/mL (50 μL/ямка) в покриващ буфер (15 mM Na2CO3/35 mM NaHC03, рН 9.5) при 4 градуса за една нощ. Плаките се промиват с TBS, съдържащ 0.05% Tween 20 (TBST) и се блокират с 1% BSA в TBST за 2 часа при 37 градуса. Разредените серуми се инкубират при 37 градуса за 1 час в TBST, съдържащ 0.1% BSA, и след това плаките се промиват с TBST. За общо специфично определяне на IgG, козе анти-човешко-IgG-AP конюгирано антитяло (Novus Biologicals, САЩ) се разрежда 1/1000 в блокиращ разтвор и се добавя към ямките. След инкубиране в продължение на 1 час при 37 градуса, плаките се промиват 5 пъти с TBST и се проявяват с 4-нитрофенил фосфат в продължение на 1 час при 37 градуса. Абсорбцията се измерва при 450 nm (А450).

Поточен цитометричен анализ.

Имунофенотипът на клетъчната повърхност на мононуклеарните клетки на периферната кръв (PBMC) беше идентифициран с помощта на следните комбинации от директно белязани моноклонални антитела (mAbs): CD3FITC/CD28PE/CD4PerCP, CD80PE/CD19PerCP, CD80PE/CD14PerCP (Becton Dickinson, Сан Хосе, САЩ). Пробите се приготвят, както е описано по-горе13, като се използват 1 × 105 прясно изолирани PBMCs в 100 μL RPMI 1640, допълнен с 10% фетален телешки серум (FCS, Sigma), инкубирани за 30 минути при 4 градуса с 20 μL подходяща комбинация от mAb, промити два пъти с ледено студен фосфатно буфериран физиологичен разтвор (PBS) и фиксиран с 1% параформалдехид преди FACS анализи. Експресията на повърхностен маркер беше количествено определена на FACSCalibur поточен цитометър (Becton-Dickinson, Сан Хосе, САЩ). Общо 10, 000–50, 000 затворени събития, проверени като периферни кръвни лимфоцити (PBL) и моноцити, според техните физически характеристики, характеристики на разсейване напред (FSC) и характеристики на странично разсейване (SSC) ), бяха събрани за проба и анализирани с помощта на софтуера CellQUEST. Клетъчните подгрупи бяха изразени като процент в периферната кръв.

Вътреклетъчен IFN‑ анализ.

За вътреклетъчно оцветяване на IFN 1×, 106 PBMCs се инкубират с Phorbol 12-миристат 13-ацетат (PMA) (50 ng/mL) плюс йономицин (500 ng/mL) в продължение на 4 часа при 37 градуса и с Brefeldin A (10 ug/mL) за последните 3 часа, както е описано по-горе14. Клетките първо се оцветяват за повърхностен антиген с CD3 PerCP антитяло, фиксират се и след пермеабилизация с BD FACS пермеабилизиращ разтвор 2 (BD Biosciences) се оцветяват за анти-IFN-PE (Becton Dickinson). Вътреклетъчният IFN се изразява като процент в PBL, както и в CD3 Т лимфоцити.

ELISA.

Концентрациите на IFN-, IL-6 и TNF в серумите на изследваните участници бяха определени с търговски комплекти ELISA без покритие, съгласно инструкциите на производителя (Invitrogen). Концентрациите на цитокини се определят в точка 1 (преди ваксинация), точка 3 (1 месец след първична имунизация) и точка 4 (2 месеца след първична имунизация). Накратко, ELISA плаките бяха покрити с подходящи улавящи антитела в покриващ буфер и инкубирани една нощ при 4 градуса. Първо, плаките бяха промити и блокирани с ELISA/ELISAASPOT разредител. След 1 час инкубиране, плаките се промиват и към ямките се добавят серумни проби и стандарти. След инкубиране, промиване и аспирация, съгласно инструкциите на производителя, разтворът на антитялото за откриване се добавя към всяка ямка. След това плочите се промиват и аспирират; разтворът на авидин-HRP се добавя към ямките и се инкубира в продължение на 30 минути. След това плаките се промиват и към всяка ямка се добавя (3,3',5,5'-тетраметилбензидин) ТМВ разтвор. Плаките се инкубират в продължение на 15 минути при стайна температура и ензимната реакция се прекратява чрез добавяне на стоп разтвор. Абсорбцията се измерва при 450/520 nm с помощта на четец на плаки Multiskan EX Termo Labsystems15. Статистически анализ. Резултатите са представени като индивидуални стойности със стандартна грешка на средната (SEM). Разликите между стойностите бяха сравнени с помощта на несдвоен t-тест и Wilcoxon signed-rank test и резултатите бяха счетени за статистически значими, ако p<0.05. The analysis was performed using GraphPad Prism 9.0 (GraphPad, La Jolla, CA, USA).

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Резултати

3.1 Участници в изследването и обработка на серум/мляко.

Характеристиките на участниците в проучването са представени в таблица 1. От 61 доброволци, които са получили ваксината срещу SARS-CoV-2 BNT162b2 mRNA, са събрани общо 344 серумни проби в 6 времеви точки, започвайки от изходното ниво преди ваксинацията до 6 месеца след първата ваксинационна точка. Повечето участници в проучването (97%) съобщават за локални нежелани реакции към ваксинацията под формата на лека болка в ръката/рамото и умора, които продължават 1-2 дни. Само трима участници са получили втората доза ваксина със закъснение, двама поради неблагоприятни ефекти при първичната ваксинация (кожен обрив, алергия) и един поради откриване на бременност след първата доза. Не се съобщава за инфекция между двете дози ваксина. След шест месеца наблюдение само 3 (5%) от участниците са били заразени със SARS-CoV-2 и не е открита сериозна форма на заболяване, изискваща хоспитализация. Седем участнички са забременяли след ваксинация, една 2 седмици след първата доза, една 4 месеца след първата доза и 5 над 12 месеца след първата доза. Дългосрочното самоотчитано проследяване не разкрива неблагоприятни ефекти, свързани с ваксинацията, до две години след първата доза при кърмещи жени или други участници в проучването.

Количествено определяне на SARS‑CoV‑2 RBD-специфични антитела в серума и млякото на участниците в изследването.

Анализирайки нивата на постваксиналните анти-RBD IgG антитела в серума, се наблюдава значително повишаване на анти-RBD IgG нивата дори 14 дни след първата доза ваксина в цялата анализирана група в сравнение с нивата на IgG преди ваксинацията (17,47±51,49 AU /mL спрямо 7828,28±24 157,29 AU/mL, p<0.0001) (Fig. 1a). Te serum levels of anti-RBD IgG continued to rise to 2 months post-vaccination, when a decrease was detected, which lasted up to 6 months, steadily. The levels of anti-RBD IgG antibodies were compared at each time point between naïve and previously infected individuals (Fig. 1b-c), and it was determined that the difference was statistically significant at baseline (point 1), as previously infected individuals had a higher level of antibodies before vaccination (7.23±0.77 AU/mL vs. 54.47±101.40 AU/mL, p<0.01). The difference was statistically significant also in points 2 (3979.48±3277.27 AU/mL vs. 22,581.99±49,570.63 AU/mL, p<0.05), 5 (2369.16±1934.31 AU/ mL vs. 6366.83±6875.85 AU/mL, p<0.01), and 6 (461.96±375.41 AU/mL vs. 766.04±317.35 AU/mL, p<0.05). The decline in antibody levels had the same dynamics in both groups but remained at higher levels in previously infected individuals for up to 6 months. No other analyzed parameters were correlated with a significantly different level of antibodies in serum (age, gender, smoking status). When comparing levels of anti-RBD IgG antibodies in other participants and breastfeeding women (Fig. 1d-e), no significant differences in serum antibody levels were observed in any of the comparisons. Anti-RBD IgG antibodies were also detected in the milk of 4 breastfeeding women (Fig. 1f). In lower levels, they presented with the same dynamics of rising and decline as detected in the serum. Comparing the levels of anti-RBD IgG antibodies in milk at each time point to baseline, (Fig. 1f), it was determined that the difference was statistically significant at points 2 (6.57±0.77 AU/mL vs. 152.13±35.83 AU/ mL, p<0.01) and 6 (6.57±0.77 AU/mL vs. 117.31±25.64 AU/mL, p<0.01).

Таблица 1. Характеристики на участниците в изследването.

Фигура 1. Серумни нива на анти-RBD IgG антитела в (a) цялата анализирана група, (b нелекувани, c) инфектирани преди това индивиди, (d) цяла група без кърмещи жени, (e) кърмещи жени и (f) в мляко на кърмачки. Резултатите са представени като индивидуални стойности със стандартна грешка на средната стойност (SEM) от три независими повторения. Разликите между стойностите бяха сравнени с помощта на несдвоен t-тест и резултатите бяха счетени за статистически значими, ако p<0.05. * p<0.05; **p<0.01; *** p<0.0001.

Поточен цитометричен и вътреклетъчен IFN‑ анализ.

Данните, получени чрез цитометричен анализ, показват, че експресията на CD28 върху CD4+ Т клетки в периферната кръв на 2 месеца след втората доза ваксина е значително по-висока в сравнение със стойностите преди ваксинацията (42,84±5,37% спрямо 37,75). ±5,96%, p<0.05, Wilcoxon signed-rank test) (Fig. 2a). Tere was a signifcant increase (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) in the prevalence of B cell lymphocyte subset (CD19+) from 6.87±1.17% to 8.73±1.54%, two months afer revaccination, as well as an increased percentage of CD80+ B cells from 1.72±0.28% to 1.99±0.28% (Fig. 2b). Furthermore, fve weeks afer revaccination, a signifcant (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) increase in the percentage of CD14+CD80+ cells from 1.15±0.38% to 5.87±0.95% was detected in the monocyte gate (Fig. 2c). Te expression of IFN-γ in PBLs, as well as in CD3+ T cells was signifcantly (p < 0.05, Wilcoxon signed rank test) increased at 1 week afer the second vaccine dose (1.84 ± 0.13% in PBL and 1.32 ± 0.10% in CD3+ T cells) compared to pre-vaccination baseline values (0.88 ± 0.13% in PBL and 0.72 ± 0.12% in CD3+ T cells) (Fig. 3a). Furthermore, serum levels of IFN-γ were signifcantly increased in all participants from the initial value of 16.69±0.29 pg/mL to 17.72±0.41 pg/mL (p<0.05, Wilcoxon signed rank test) (Fig. 3b), as well as in naive from 16.55±1.77 pg/mL to 17.26±2.53 pg/mL and in a group and previously infected individuals, from 15.93±2.01 pg/mL to 19.90±4.32 pg/mL at 1 week afer revaccination (Fig. 3c). Tere was no signifcant (p>0.05, Wilcoxon signed rank test) разлика в серумните нива на IL-6 и TNF- 1 седмица и пет седмици след втората доза ваксина в сравнение със стойностите преди ваксинацията като цяло група, както и при наивни или предишно заразени индивиди (допълнителна фигура 1a-d).

Дискусия

Избухването на респираторна инфекция SARS-CoV-2 имаше дълбок отрицателен ефект върху различни аспекти от ежедневието, включително обществени, образователни и свързани със здравето проблеми, които не са пряко свързани със самата болест на COVID-1916–18 . Глобален подход към ваксинирането беше необходим, за да допълни мерките за дистанциране в борбата с болестта и много проучвания изследваха ефикасността и ефикасността на различни видове ваксини, разпространени по света през 2021 г. В Сърбия понастоящем са налични само междинни доклади за хуморален имунитет 2 и 3 месеца след ваксинацията19 ,20 и са в съответствие с данните, докладвани в това проучване. В нашата анализирана кохорта до 6 месеца след ваксинацията беше открита 100% степен на сероконверсия след първата доза ваксина. Само 5% от участниците трябваше да получат втората доза ваксина със закъснение. Няма съобщения за SARS-CoV-2 инфекция между две дози ваксина. До шест месеца на наблюдение само 5% от участниците са били заразени, без да е необходима хоспитализация. Титрите на анти-RBD SARS-CoV-2 IgG антитела са значително по-високи в сравнение с изходното ниво дори след първата доза ваксина, което допринася за идеята, че използването на BNT162b2 mRNA ваксина е ефективен подход за бързи хуморални отговори срещу оригиналния вирусни щамове. Серумните нива на IgG продължават да се повишават до 2 месеца след ваксинацията, когато се установява стабилно понижение до анализирания период от 6 месеца. Установено е, че инфектирани преди това индивиди имат по-високи титри на IgG в сравнение с нелекувани индивиди до 6 месеца, което е единственият фактор, допринасящ за различни нива на антитела. Анти-RBD IgG антитела също бяха открити в млякото на кърмещи жени в нашето и някои предишни проучвания21, със съвпадаща динамика на титъра, както в серума. Подобни доклади са публикувани за IgA антитела след естествена инфекция22. Тъй като понастоящем има ограничени данни за рисковете и ползите от ваксинирането на кърмещи жени, тези резултати са обещаващи в светлината на възможна пасивна имунизация на кърмачета, хранени с кърма, дори след 6 месеца след ваксиниране на майките. Не са наблюдавани значителни разлики в нивата на серумните антитела между нелекувани или инфектирани преди това лица и кърмещи жени, което подсилва наблюденията, че отговорът на ваксините срещу SARS-CoV-2 не се влияе от лактацията. Настоящите препоръки гласят, че ваксинацията трябва да се обмисли за всички лица на възраст 6 месеца и по-големи, включително тези, които са бременни или се опитват да забременеят сега или в бъдеще и кърмят, независимо от техния предишен статус на инфекция с COVID-1923. Нашето проучване допринася за тежестта на доказателствата24, които предполагат, че не е имало непосредствена вреда за кърмещи жени, получаващи ваксина срещу SARS-CoV-2, или за техните кърмачета. Също така седем участници в проучването забременяха след ваксинация, една 2 седмици след първата доза, една 4 месеца след първата доза и 5 над 12 месеца след първата доза. Наскоро проведени дългосрочни последващи интервюта на участници в проучването потвърдиха, че също не е имало непредвидени вреди за кърмещи жени или техните кърмачета, или всеки друг участник, две години след получаване на ваксината срещу SARS-CoV-2.

Фигура 2. Процент на (а) CD3+CD28+ и CD4+CD28+ Т лимфоцити, (б) CD19+ и CD{{6 }}CD80+ B лимфоцити, (c) CD14+CD80+ моноцити в периферна кръв. Резултатите са представени като индивидуални стойности със средна ± стандартна грешка на средната (SEM). Разликите между стойностите бяха сравнени с помощта на Wilcoxon signed-rank test и резултатите бяха счетени за статистически значими, ако p<0.05. * p<0.05.

Появата на нови тревожни варианти, както и наличието на доклади за бързо намаляване на нивата на анти-SARS CoV-2 антитела след естествена инфекция и ваксинация25 повишиха несигурността относно ролята на компонентите на клетъчния имунитет. Няколко проучвания, изследващи имунологичния отговор на ваксинирани индивиди в Сърбия, съобщават само за хуморален имунитет19,20. В това проучване беше открита повишена експресия на костимулаторни рецептори CD28 върху CD4+ Т клетки и CD80 върху В клетки 2 месеца след прилагането на втората доза ваксина. Освен това, експресията на CD80 върху моноцитите се увеличава 1- месец след пълна ваксинация.

Пролиферацията и диференциацията на Т клетките в ефекторни или клетки на паметта изисква представяне на антиген, ко-стимулация и цитокини. Най-добре защитените ко-стимулатори на Т клетките са двойки молекули, B7-1 (CD80) и B7-2 (CD86). Те обикновено се експресират върху антиген-представящи клетки (APCs) като дендритни клетки, В клетки, макрофаги, моноцити и Т-клетки. Тяхната експресия върху моноцитите също е важна за активирането на лимфоцитите и адаптивния имунитет26. Двата основни рецептора, присъстващи на повърхността на Т-лимфоцитите, които свързват CD80 и CD86, са CD28 и цитотоксичният протеин 4, свързан с Т-лимфоцитите (CTLA-4). Свързването към CD28 активира лимфоцитите и следователно засилва имунния отговор27. Резултатите, получени в това проучване, показват, че CD4+ Т клетките се активират от получените от S антиген епитопи, представени върху активирани В клетки и моноцити 2 месеца след втората доза от ваксината. Различни данни предполагат, че CD4 Т клетките са предимно активирани след иРНК ваксина 28, 29, докато в някои проучвания се съобщава, че CD4 и CD8 Т клетките са еднакво представени и активирани 30. Тан и др. наскоро наблюдава, че 3 месеца след ваксинацията средното количество специфични за Спайк Т-клетки е еквивалентно на това, което е открито при реконвалесцентни пациенти в подобно време след инфекция със SARS-CoV-231. Освен това, компонентите на адаптивния имунитет (както при предишно заразени, така и при ваксинирани) изглеждат независимо регулирани6,32,33 и липсва корелация между производството на антивирусни антитела и честотата на Т клетките. В допълнение, настоящите иРНК ваксини предизвикват имунни отговори, ограничени до Spike протеина. Въпреки това, потенциално защитната роля на Т клетките, специфични за други структурни и неструктурни протеини, също ще трябва да бъде оценена34. Идеята, че полиантигенните ваксини могат да упражняват по-голям контрол срещу вирусни варианти, отколкото моноантигенните, като ваксини, базирани на Spike протеин, може да има солидна обосновка35,36.

Фигура 3. (а) Експресия на IFN- във всички и CD3+ Т лимфоцити от периферна кръв. Серумно ниво на IFN- в (b) цялата анализирана група, (c) нелекувани и инфектирани преди това индивиди. Резултатите са представени като индивидуални стойности със стандартна грешка на средната стойност (SEM). Разликите между стойностите бяха сравнени с помощта на Wilcoxon signed-rank test и резултатите бяха счетени за статистически значими, ако p<0.05. * p<0.05.

В това проучване бяха открити повишени нива на IFN- във всички лимфоцити и в CD3+ Т клетки 7 дни след пълната ваксинация. Също така се наблюдава повишено ниво на IFN- в серума на всички ваксинирани индивиди, както при нелекувани със SARS-CoV-2, така и при инфектирани преди това индивиди 7 дни след пълната ваксинация. По този начин, базираните на иРНК индуцирани от ваксина Спайк-специфични Т клетки, които изобилно произвеждат IFN-. IFN- е ключов цитокин с антивирусни свойства и е доказано, че инхибира репликацията на SARS-CoV-28. Бързото предизвикване на IFN- от ваксината BNT162b2, демонстрирано в това проучване, показва благоприятен Т-клетъчен имунен отговор срещу вируса SARS-CoV-2. Имунологичната реакция, предизвикана от SARS-CoV-2, също включва производството на множество провъзпалителни цитокини, предимно IL-6 и TNF- и промените в техните нива може да са свързани с прогнозата на заболяването. Докладвани са тежки и фатални случаи на COVID-19 при лица с повишени нива на цитокини37. Въпреки това, в това проучване не е открита значителна разлика в серумните нива на IL-6 и TNF- 7 дни и до 1 месец след пълна ваксинация, което може да е резултат от специфични характеристики на кохортата и времето на вземане на проби.

Тези данни представляват първите публикувани доклади за траен имунитет, като се вземат предвид както хуморалният, така и клетъчният компонент, който се фокусира върху кърмещи жени. Това може да бъде особено полезно за бъдещи мета-анализи на тази и други чувствителни подгрупи от населението, тъй като данните от балканската област за славянското население обикновено липсват при по-големи многонационални усилия.

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Изводи

Анти-SARS-CoV-2 BNT162b2 иРНК ваксината индуцира измерими и трайни хуморални и клетъчни отговори при кърмещи жени и както наивни, така и инфектирани преди това лица през първите шест месеца след ваксинацията в Сърбия. Не са докладвани сериозни неблагоприятни ефекти от ваксинацията и само 5% от участниците са били заразени със SARS-CoV-2 през първите шест месеца след ваксинацията, без да е необходима хоспитализация. Не са докладвани непредвидени вреди за кърмещи жени или техните кърмачета две години след получаване на ваксината срещу SARS-CoV-2. Следващите проучвания в областта трябва да се съсредоточат върху стратегии за изследване и разработване на ваксини, които могат да държат COVID-19 и потенциални подобни пандемии под по-бърз и дълготраен контрол. Трябва също така да се инвестират усилия за предоставяне на насоки, основани на знания, правилно справяне с дезинформацията, особено около чувствителните субпопулации като кърмещи жени, улесняване на достъпа до ваксини в моменти на голяма нужда и укрепване на общото доверие в науката.

Cistanche ползи - укрепва имунната система

Препратки

1. СЗО, Табло за управление на Коронавирус (COVID-19) на Световната здравна организация на СЗО. https://covid19.who.int/ (2022).

2. Hojyo, S. et al. Как COVID-19 предизвиква цитокинова буря с висока смъртност. Infamm. Regen. 40, (2020).

3. van Eeden, C., Khan, L., Osman, MS & Tervaert, JWC Естествена дисфункция на клетките убийци и нейната роля при COVID-19. Вътр. J. Mol. Sci. 21, 6351 (2020).

4. Sette, A. & Crotty, S. Адаптивен имунитет към SARS-CoV-2 и COVID-19. Клетка 184, 861–880 (2021).

5. Chen, G. et al. Клинични и имунологични характеристики на тежка и умерена коронавирусна болест 2019. J. Clin. Инвестирам. 130, 2620–2629 (2020).

6. Dan, JM et al. Имунологична памет към SARS-CoV-2, оценена до 8 месеца след инфекцията. Science 80, 371 (2021).

7. Turner, JS et al. SARS-CoV-2 мРНК ваксините предизвикват устойчиви реакции на човешкия зародишен център. Нац. 596, 109–113 (2021).

8. Painter, MM et al. Бързата индукция на антиген-специфични CD4+ Т клетки е свързана с координиран хуморален и клетъчен имунитет към SARS-CoV-2 иРНК ваксинация. Имунитет 54, 2133-2142.e3 (2021).

9. Goel, RR et al. иРНК ваксинацията предизвиква трайна имунна памет към SARS-CoV-2 с продължаваща еволюция до варианти, които предизвикват безпокойство. bioRxiv Prepr. Серв. Biol. https://doi.org/10.1101/2021.08.23.457229, (2021)

10. Muyldermans, J., De Weerdt, L., De Brabandere, L., Maertens, K. & Tommelein, E. Ефекти от ваксинацията срещу covid-19 върху кърмещи жени: систематичен преглед на литературата. Преден. Immunol. 13, 1498 (2022).

11. Golan, Y. et al. Covid-19 mRNA ваксинация при кърмене: оценка на нежеланите събития и свързаните с ваксината антитела в диадите майка-бебе. Преден. Immunol. 12, 777103 (2021).

12. Arbeitman, CR и др. Структурно и функционално сравнение на SARS-CoV-2-шипов рецепторен свързващ домен, произведен в Pichia pastoris и клетки на бозайници. Sci. Справка 10, 21779 (2020).

13. Коневич, Г. и др. Оценка на функционалния капацитет на NK клетки на пациенти с меланом в in vitro модел на контакт на NK клетки с K562 и femx туморни клетъчни линии. J. Membr. Biol. 250, 507–516 (2017).

14. Konjević, G. et al. Намаленото активиране на CD161 и повишената експресия на инхибиторен рецептор на CD158a върху NK клетки е в основата на нарушената цитотоксичност на NK клетките при пациенти с мултиплен миелом. J. Clin. Патол. https://doi.org/10.1136/jclinpath-2016-203614 (2016).

15. Stanojković, TP и др. Оценка на експресията на цитокини и циркулиращите подгрупи на имунни клетки като потенциални параметри на остра радиационна токсичност при пациенти с рак на простатата. Sci. Rep. 10, 19002 (2020).

16. Cavic, M. et al. Проучване на реалния ефект на пандемията от SARS-CoV-2 върху молекулярната диагностика при пациенти с рак и лица с висок риск. Експерт преп. мол. диагностика 21, 101–107 (2021).

17. Хасан, И., Мукайгавара, М., Кинг, Л., Фернандес, Г. и Шридхар, Д. Поглед назад е 2020? Уроци по глобално управление на здравеопазването една година след началото на пандемията. Нац. Med. 27, 396–400 (2021).

18. Чавич, М., Граховац, Й., Зец, Р., Стефанович, М. и Алексич, Е. Преглед на първата година от пандемията от SARS-CoV-2 в Сърбия и Пиротския окръг. Пирот. З б. 46, 1–23 (2021).

19. Lijeskić, O. et al. Проспективно кохортно проучване на кинетиката на специфични антитела срещу SARS-CoV-2 инфекция и срещу четири SARS-CoV-2 ваксини, налични в Сърбия, и ефективността на ваксината: 3-месечен междинен доклад. Ваксини 9, (2021).

20. Петрович, В., Вукович, В., Патич, А., Маркович, М. и Ристич, М. Имуногенност на BNT162b2, BBIBP-CorV и Gam-COVID-Vac ваксини и имунитет след естествен SARS-CoV{{7 }} инфекция-Сравнително проучване от Нови Сад. Сърбия. PLoS One 17, e0263468 (2022).

21. Yeo, KT et al. Неутрализираща активност и мРНК на ваксина срещу SARS-CoV-2 Устойчивост в серума и кърмата след ваксинация BNT162b2 при кърмещи жени. Преден. Immunol. 12, (2022).

22. Pace, RM et al. Млякото от жени, диагностицирани с COVID-19, не съдържа SARS-CoV-2 РНК, но има постоянни нива на SARS-CoV-2-специфични IgA антитела. Преден. Immunol. 12, 5566 (2021).

23. CDC, C. за ваксини DC и P. COVID-19 по време на бременност или кърмене. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/vacci nes/recommendations/pregnancy.html (2022 г.).

24. Bethesda (MD), NI of CH и HD База данни за лекарства и кърмене (LactMed). Ваксини срещу COVID-19. (2022).

25. Jo, DH et al. Бързо намаляващи титри на SARS-CoV-2 антитела в рамките на 4 месеца след BNT162b2 ваксинация. Ваксини 9, (2021).

26. Carreno, BM & Collins, M. Te B7 семейство лиганди и неговите рецептори: нови пътища за костимулиране и инхибиране на имунните отговори. Annu. Rev. Immunol. 20, 29–53 (2002).

27. Esensten, JH, Helou, YA, Chopra, G., Weiss, A. & Bluestone, JA CD28 костимулация: От механизъм към терапия. Имунитет 44, 973–988 (2016).

28. Geers, D. et al. Проблемните варианти на SARS-CoV-2 частично избягват хуморалните, но не и Т-клетъчните отговори при COVID-19 реконвалесцентни донори и ваксинирани. Sci. Immunol. 6, (2021).

29. Tarke, A. et al. Въздействие на вариантите на SARS-CoV-2 върху общата CD4 + и CD8 + Т-клетъчна реактивност при заразени или ваксинирани лица. Клетъчни отчети. Med. 2, (2021).

30. Sahin, U. et al. Ваксината BNT162b2 индуцира неутрализиращи антитела и полиспецифични Т клетки при хора. Нац. 2021 5957868 595, 572–577 (2021).

31. Тан, AT и др. Бързо измерване на SARS-CoV-2 шипове Т клетки в цяла кръв от ваксинирани и естествено инфектирани индивиди. J. Clin. Инвестирам. 131, (2021).

32. Chia, WN и др. Динамика на отговорите на SARS-CoV-2 неутрализиращи антитела и продължителност на имунитета: надлъжно проучване. Te Lancet Microbe 2, e240–e249 (2021).

33. Reynolds, CJ et al. Дискордантни неутрализиращи антитела и Т-клетъчни отговори при асимптоматична и лека SARS-CoV-2 инфекция. Sci. Immunol. 5, (2020).

34. Lopandić, Z. et al. IgM и IgG имунореактивност на SARS-CoV-2 рекомбинантен m протеин. Вътр. J. Mol. Sci. 22, (2021).

35. Altmann, DM, Boyton, RJ & Beale, R. Имунитет към SARS-CoV-2 варианти, които предизвикват безпокойство. Наука 371, 1103–1104 (2021).

36. Matchett, WE et al. Авангардно: Нуклеокапсидната ваксина предизвиква независим от пиковете SARS-CoV-2 защитен имунитет. J. Immunol. 207, 376–379 (2021).

37. Costela-Ruiz, VJ, Illescas-Montes, R., Puerta-Puerta, JM, Ruiz, C. & Melguizo-Rodríguez, L. SARS-CoV-2 инфекция: Ролята на цитокините при COVID{{ 7}} заболяване. Цитокинов растежен фактор Rev. 54, 62 (2020).