Ефект на таншинон IIA върху LPS-индуциран възпалителен отговор в зависим от ROS-NLRP3 инфламазомен начин в RAW264.7 клетки

За повече информация:emily.li@wecistanche.com

Акценти

Tan IIA може да инхибира възпалителния отговор и експресията на NLRP3, стимулирани от LPS или LPS плюс ATP. Ацетилцистеин (N-ацетил-1-цистеин, NAC), ROS инхибитор, може да инхибира LPS плюс ATP-индуцирано повишаване на нивото на NLRP3. Механизмът, лежащ в основата на ефектите на Tan IIA, може да включва регулирането на пътя на ROS-NF-κB/P38-NLRP3. Това проучване допълнително характеризира молекулярния механизъм на Tan IIA и предоставя нови мисли за неговата клинична терапия.

Резюме

Появяващите се доказателства показват, че Tanshinone IIA (Tan IIA) предотвратява увреждане на кардиомиоцитите, сърдечните фибробласти и атеросклерозата. Въпреки това, молекулярният механизъм, който е в основата на ефектите на Tan lA, все още е неясен. Да се ​​изследва ролята на Tan ll A във възпалителния отговор по ROS-NLRP3 зависим от инфламазома начин. RAW264.7 клетки, стимулирани с LPS, бяха привлечени, за да произведат клетъчен модел на възпалителен отговор. Нашите резултати показват, че производството на NO е значително увеличено след стимулиране от LPS. andTan IIA третиран значително намалява нивото на NO. Експресията на иРНК на NLRP3. IL-1B и TNF-a бяха значително инхибирани от Tan LLA в сравнение с клетките, третирани с LPS. Протеиновата експресия на NLRP3. IKBa, pp65/p65 и pp38/p38 бяха подписани ефективно намалени от Tan IIA, в сравнение с LPS или LPS плюс ATP стимулирани групи. Междувременно. Tan IA значително инхибира нивото на ROS, индуцирано от LPS плюс ATP. И NAC, ROS инхибитор, може също да инхибира протеиновата експресия на NLRP3. Въз основа на тези открития може да се спекулира, че механизмът, лежащ в основата на ефекта на Tan IIA, може да включва регулирането на пътя на ROS-NF-kB/P38-NLRP3. Това проучване допълнително характеризира молекулярния механизъм на Tan IA и предоставя нови мисли за неговата клинична терапия.

Ключови думи: Таншинон IIA,Възпаление, NLRP3 инфламазома, ROS

Предимства на продуктите Cistanche

Заден план

Макрофагите играят важна роля в поддържането на сърдечната хомеостаза и оркестрирането на възстановяването на тъканите, както и ремоделирането. всърцепровалпациенти, повишените серумни провъзпалителни цитокини се предполага, че са предсказващи биомаркери за влошени клинични резултати ивъзпалениеможе да допринесе за прогресията на сърдечната недостатъчност [1]. Въпреки товавъзпалениесе очертава като терапевтична цел за лечение на сърдечно-съдови заболявания, но изглежда, че широката имуносупресия не е успяла да подобри клиничните резултати нито след миокарден инфаркт (МИ), нито при сърдечна недостатъчност [2,3].

Няколко клинични проучвания показват, че инхибирането на anвъзпалителенпът, като напримервъзпалителенцитокин, IL-1, може ефективно да намали повтарящите се сърдечно-съдови събития [4, 5]. Може да се предположи, че имуномодулацията на възпалителния отговор има важно диагностично и терапевтично значение в процеса на сърдечно-съдови заболявания.

Инфламазомата NLRP3 е най-широко изследваната от всички видове инфламазоми. Документирано е, че инфламазомата NLRP3 играе решаваща роля при много заболявания, като множествена склероза (MS), болест на Алцхаймер (AD), атеросклероза, затлъстяване и захарен диабет тип 2 [6] и все повече доказателства сочат, че NLRP3 inflammasome също участва в миокардна исхемия/реперфузионно увреждане (MI/RI) [7,8]. Механизмите на активиране на NLRP3 могат да включват генериране на реактивни кислородни видове (ROS), изтичане на калий и освобождаване на катепсини в цитозола след лизозомна дестабилизация. Когато клетките са стимулирани от патогени или сигнали за опасност, NLRP3 се активира и се набира про-каспаза -1 чрез адаптерния протеин ASC. NLRP3. ASC и про-каспаза-1 направиха NLRP3 възпалителен комплекс. Под действието на инфламазомата NLRP3, про-каспаза-1 се активира до каспаза-1, което в крайна сметка води до секрецията на IL-1 и IL-18 и причинява серия от възпалителни реакции [9,10].

Tan IIA е липоразтворима съставка на Danshen (Sahia miltiorrhiza Bge), притежаваща различни биологични свойства и участваща в серия от биохимични реакции. Тан IA имаанти-възпалителен, антиоксиданти насърчава ефекта на ангиогенезата и също така е широко използван за лечение на заболявания на сърдечно-мозъчно-съдовата система [1, 12]. Появяващите се доказателства показват, че Tan IIA предотвратява увреждане на кардиомиоцитите, сърдечните фибробласти, атеросклерозата иневровъзпаление[13-16]. Въпреки това, молекулярният механизъм, който е в основата на ефектите на Tan IIA, все още е неясен.

По време на исхемично/реперфузионно увреждане моноцитите/макрофагите, неутрофилите и ендотелните клетки иницииратвъзпалителенреакция, предизвикваща освобождаването на различнивъзпалителенцитокини, което води до повишен съдов пермеабилитет, тъканен оток и увреждане. Макрофагът е важен тип клетка за регулиране на възпалението сред всичкивъзпалителенклетъчни видове и играе решаваща роля в процеса на инфаркт на миокарда [17]. Моноцитите/макрофагите, привлечени към увредения миокард, могат допълнително да освободят ROS, възпалителни медиатори и протеази, които влошават миокардното увреждане [18].

Поради причината, че макрофагите играят важна роля в поддържането на сърдечната хомеостаза и оркестрирането на възстановяването на тъканите, ние набрахме RAW264.7 клетки, стимулирани с LPS, за да произведем клетъчен модел на възпалителен отговор. Настоящото проучване изследва дали Tan IIA има ефект върху LPS стимулирани макрофаги и механизмите, лежащи в основата на ефектите на Tan ⅡA върху макрофагите по ROS-NLRP3 начин, зависим от инфламазома.

Материали и методи

Клетъчна култура и лечение

Клетката RAW264.7 е закупена от Центъра за клетъчна култура на Китайската академия на медицинските науки (Пекин, Китай). Клетките се култивират в среда DMEM (висока глюкоза), добавят се 10 процента фетален волски серум (FBS), 100 U/mL пеницилин и 100 ug/mL стрептомицин. Клетките се култивират при 37 градуса в напълно овлажнена атмосфера с 5 процента CO2. За всички експерименти клетките бяха третирани при 80-90 процента клетъчно сливане. Клетките бяха третирани с различни концентрации на Tan IIA (при 10, 1 и 0.1 uM) за различно време, със или без 1 ug/mL LPS. Междувременно клетките в контролната група бяха третирани с равен обем 0,1 процента DMSO.

Измерване на производството на NO

NO Assay Kit (Beyotime, Китай) беше използван за измерване на производството на NO съгласно инструкциите на производителя. Накратко, стандартите бяха разредени с DMEM плюс 10 процента FBS и 50 μL стандарт или супернатант от клетъчна култура бяха добавени към всяка ямка на 96-плаката с ямки. След това 50uL от Griess Reagent I и II се пипетират във всяка ямка на плочата и оптичната плътност (OD) се открива от Varioskan LUX многомодов четец на микроплаки при 540 nm.

Екстракция на РНК

Клетките RAW264.7 се посяват при плътност от 1 × 106 клетки/ямка с 10 процента FBS DMEM в плаки с шест ямки. 24 часа по-късно средата беше отстранена и вместо това добавена среда DMEM без серум и антибиотици. Клетките RAW264.7 бяха третирани с DMSO (контрола), LPS (1 ug/mL) и LPS плюс Tan IIA (10,1 и 0,1 uM за 6 часа. След това общата РНК беше екстрахирана, за да се открие нивото на иРНК на NLRP3, IL{ {18}} и TNF-. Общата РНК се екстрахира чрез използване на реагента TRIzol (Ambion). РНК се измерва чрез концентрации Va ултрамикрофлуоресцентен спектрофотометър (DeNovix). HiFiScript комплект за синтез на cDNA (cwbiotech) се използва за обратна транскрипция съгласно инструкциите на производителя 1 ug РНК проби се транскрибира обратно и етапите на реакцията са както следва: 42 градуса С за 50 минути, 85 градуса С за 5 минути и след това се поддържа при 4 градуса.

RT-PCR

Количественият PCR (OPCR) анализ беше проведен с O-PCR инструмент (Lightcycler 96, Roche), използвайки UltraSYBR смес (cwbiotech). PCR протоколът беше 95 градуса за 10 минути, последван от 40 цикъла от 95 градуса за 10 секунди, 56 за 30 секунди и 72 за 32 секунди. Праймерите, използвани за qRT-PCR, са показани както следва: GADPH-Напред: 5'-AACTTTGGCATTGTGGAAGG-3';GADPH-Обратно:5'-ACACATTGGGGGTAGGAACA-3',NLRP3-Напред: 5'-ATGCTGCTTCGACATCTCCT-3'NLRP3-Назад:5'-AACCAATGCGAGATCCTGAC-3';IL-1 -Напред:5'-GCCCATCCTCTGTGACTCAT-3';IL{ {32}}Назад:5'-AGGCCACAGGTATTTTGTCG-3':TNF- -Напред:5'-GCAGATGGGCTGTACCTTATC-3'TNF-a-Назад:5'-GCAGATGGGCTGTACCTTATC-3 ! Нивото на генна експресия се изчислява с помощта на 2-AACt метода.

Western blotting

Уестърн блотинг се провежда със следнотоантитела: анти-NLRP3 антитяло (CST), анти-pp38 антитяло (CST), анти-p38 антитяло (CST), анти-pp65 антитяло (CST), анти-GADPH антитяло (протеинова технология), анти- -тубулиново антитяло (протеинова технология), анти-HMGB1 антитяло (протеинова технология), анти-p65 антитяло (протеинова технология), анти-IKB- антитяло (протеинова технология). Протеиновите фракции се екстрахират от лизатите на култивираните клетки и се използва комплект за подобрен BCA протеинов анализ (Beyotime, Китай) за измерване на протеиновите концентрации. Протеините се денатурират и разделят върху SDS-PAGE, след което се прехвърлят към PVDF мембрана. След блокиране с QuickBlockTMBlocking Buffer (Beyotime, Китай) за 1 час, PVDF мембраните след това се инкубират с първични антитела за една нощ при 4 градуса. След това мембраните се промиват с Western Wash Buffer (Beyotime, Китай) три пъти и се инкубират с HRP конюгирани вторични антитела за 1 час при стайна температура. Беше използван комплект BeyoECL Plus (Beyotime, Китай) за откриване на протеините съгласно инструкциите на производителя. C-DiGit 3600 (Li-Cor, САЩ) беше използван за изображение и лентите бяха количествено определени от Image J Software.

Измерване на натрупването на ROS

DCFH-DA проба Комплект за анализ на реактивни кислородни видове (Beyotime, Китай) беше използван за измерване на вътреклетъчните нива на ROS в клетки RAW264.7 съгласно инструкциите на производителя. Накратко, DCFH-DA се разрежда с DMEM среда без серум и крайната концентрация се коригира до 10 μM/L. След инкубиране с 10 μM DCFH-DA багрило за 30 минути при 37 градуса С, клетките RAW264.7 се промиват три пъти с безсерумна DMEM среда, така че да се отстрани излишъкът от DCFH-DA. За положителна контрола към клетките се добавят 1 μL от Rosup. Флуоресценцията се определя количествено с помощта на обърнат микроскоп Nikon IX73. Изображенията на клетките бяха измерени с помощта на Image J Software.

Статистически анализ

Всички експерименти бяха повторени поне три пъти. Софтуерът SPSS беше използван за всички анализи, а GraphPad Prism 5 беше извършен за графичния чертеж. Всички резултати са дадени като средна стойност ± SD. Еднопосочният ANOVA беше използван за анализиране на данни между групите и сдвоено сравнение с помощта на SNK-q теста. Стойност P< 0.05="" was="" considered="" statistically="" significant="" in="" all="">

Фигура 1. Tan IIA притежава регулаторен ефект върху производството на NO, NLRP3, IL-1, TNF-mRNA

изразяване

A. RAW264.7 Клетки НЕ произвеждат различни групи. Клетките бяха предварително третирани с Tan IIA 10 цМ, 1 цМ и

{{0}}.1µM за 30 минути и стимулиран с LPS (1 ug/mL) за 24 часа. * P <0,05 спрямо="" ctrl,="" #="" p=""><0,05 спрямо="" lps.="" bd.="" тан="">

притежава регулаторен ефект върху експресията на иРНК на TNF-, NLRP3 и IL-1. Клетките бяха предварително третирани с Tan IIA

Резултати

Ефектът върху клетките RAW264.7 БЕЗ производство на лечение с Tan IIA

NO, втора молекула-преносител, изпълнява различни функции в клетъчните физиологични и патологични процеси. NO, секретиран от макрофагите, играе важна роля във възпалителни, имунни и антивирусни реакции [19, 20]. Поради това NO може да се използва за оценка на ефектите на LPS върху имунните и възпалителните реакции. Клетките бяха третирани с различни концентрации на Tan IIA (при 10, 1 и 0,1 μM) със или без 1 ug/mL LPS за 24 часа, а клетките в контролната група бяха третирани с равен обем от 0,1 процента DMSO. Както е показано на Фигура 1А, в сравнение с контролната група, в моделната група, стимулирана с LPS за 24 часа, производството на NO значително се увеличава (P<0.05); and="" various="" concentrations="" of="" taniia="" treatment="" (at="" 10,="" 1,="" and="" 0.1="" μm)="" significantly="" decreased="" the="" no="" production=""><0.05) of="" the="" cells="" stimulated="" with="">

Ефектът върху експресията на NLRP3, IL-1 и TNF-mRNA на лечението с Tan IIA

Клетките RAW264.7, стимулирани с LPS, могат да индуцират активирането на възпалителния отговор и той може да бъде подобрен от Tan IIA, включително експресията на mRNA на NLRP3, IL-1 и TNF-. Както е показано на Фигура 1B-D, в сравнение с контролната група, в моделната група, стимулирана с LPS, експресията на mRNA на NLRP3, IL-1 и TNF- беше значително повишена (P < {{1{{14}="" }}}.05);="" различните="" концентрации="" на="" лечение="" с="" tan="" iia="" (при="" 10,="" 1="" и="" 0,1="" μm)="" значително="" намаляват="" експресията="" на="" mrna="" на="" nlrp3,="" il-1="" и="" tnf-="" (p=""><0,05) в="" клетки,="" стимулирани="" с="">

Ефектът върху NLRP3 протеиновата експресия на лечението с Tan IIA

ATP, втора сигнална молекула, е активатор, необходим за активиране на инфламазома на NLRP3. И така, ATP беше използван за индуциране на активирането на NLRP3 [21, 22]. Нашите резултати показват, че LPS плюс ATP индуцира активирането на експресията на NLRP3 протеин и може да бъде подобрено от Tan IIA. Както е показано на Фигура 2, в сравнение с контролната група, в моделната група, индуцирана от LPS плюс ATP, нивото на протеинова експресия на NLRP3 беше значително повишено (P < 0.05);="" и="" лечението="" с="" taniia="" (при="" 10="" μm)="" значително="" намалява="" протеиновата="" експресия="" на="" nlrp3="" (p=""><0.05) в="" клетки,="" стимулирани="" с="" lps="" плюс="">

LPS-индуцираното активиране на NF-κB и p38 пътя може да бъде инхибирано от Tan IIA

Както е показано на Фигура 2, в сравнение с контролната група, в клетките, стимулирани с LPS или LPS плюс ATP, протеиновата експресия на IKB, pp65/p65 беше значително повишена (P < 0.05);="" и="" лечението="" с="" tan="" iia="" (при="" 10="" μm)="" значително="" намалява="" регулирането="" нагоре.="" нивото="" на="" протеин="" на="" pp38/p38="" се="" регулира="" нагоре="" в="" клетки,="" стимулирани="" с="" lps="" плюс="" atp,="" и="" регулирането="" нагоре="" се="" инхибира="" от="" tan="" iia="" (10="" μm)="" (фигура="" 2).="" въпреки="" това,="" нивото="" на="" протеин="" на="" pp38/p38="" не="" се="" променя="" значително="" в="" клетките,="" стимулирани="" с="" lps.="" освен="" това,="" протеиновата="" експресия="" на="" hmgb1="" също="" беше="" повишена="" в="" клетки,="" индуцирани="" с="" lps="" или="" lps="" плюс="" atp,="" но="" не="" показа="" статистическа="" разлика.="" тези="" резултати="" предполагат,="" че="" lps="" или="" lps="" плюс="" atp="" индуцирано="" активиране="" на="" nf-κb="" и="" p38="" пътя="" може="" да="" бъде="" инхибирано="" от="" tan="">

Tan IIA притежава регулаторен ефект върху ROS

За да се потвърди дали Tan IIA може да почисти вътреклетъчните ROS, производството на вътреклетъчни ROS беше оценено чрез флуоресцентна микроскопия с помощта на комплект за анализ на реактивни кислородни видове. Клетките RAW264.7 бяха изложени на LPS в продължение на 6 часа и 1 mM ATP беше добавен 30 минути преди клетките да бъдат събрани. ROS-позитивните клетки се визуализират като яркозелени петна и лечението с LPS плюс ATP повишава значително нивото на вътреклетъчния ROS в сравнение с това в контролната група (Фигура 3). Междувременно лечението с Tan IIA инхибира значително LPS плюс ATP-индуцираното увеличение на вътреклетъчния ROS (Фигура 3). Тези резултати предполагат, че Tan IIA има антиоксидантен капацитет.

Фигура 3. Tan IIA притежава регулаторен ефект върху експресията на ROS (мащабна лента 50 μm)

Клетките бяха предварително третирани с Tan IIA 10µM за 30 минути и стимулирани с LPS (1 ug/mL) за 5,5 часа. АТФ се добавя 30 минути преди клетките да бъдат събрани. A. Представителни флуоресцентни изображения на клетъчна ROS експресия. Б. Количествени данни за средна стойност за три отделни експеримента. * P <0,05 спрямо="" ctrl,="" #="" p=""><0,05 спрямо="" lps/lps="" плюс="">

Фигура 4. NAC притежава регулаторен ефект върху протеиновата експресия на NLRP3.

Клетките бяха предварително третирани с Tan IIA 10µM за 30 min и стимулирани с LPS (1 ug/mL) /LPS (1 ug/mL) плюс NAC (1mM) за 5,5 часа. АТФ се добавя 30 минути преди клетките да бъдат събрани. A. Представителен Western блот на NLRP3. Б. Количествени данни за средна стойност за три отделни експеримента. * P <0,05 спрямо="" ctrl,="" #="" p=""><0,05 спрямо="" lps="" плюс="">

NAC притежава регулаторен ефект върху NLRP3

Ацетилцистеин (N-ацетил-1-цистеин, NAC), чистач на ROS, може да инхибира протеиновата експресия на NLRP3. Както беше споменато по-горе, протеиновата експресия на NLRP3 се увеличи значително след стимулиране с LPS плюс ATP за 6 часа и лечението с Tan IIA инхибира LPS плюс ATP-индуцираното повишаване на нивото на NLRP3 протеин. Освен това, лечението с NAC може също да инхибира LPS плюс ATP-индуцираното повишаване на нивото на NLRP3 протеин значително (Фигура 4). Тези резултати показват, че регулаторният ефект на Tan IIA върху NLRP3 може да зависи от пътя на ROS-NLRP3.

Дискусия

Макрофагите участват в процеса на възпалителния отговор и играят решаваща роля в процеса на инфаркт на миокарда. Моноцитите/макрофагите, привлечени към увредения миокард, могат допълнително да освободят ROS, възпалителни медиатори и протеаза, което влошава миокардното увреждане [23]. Клетките RAW264.7 се считат за доминиращ експериментален модел на макрофаги и играят важна роля в изследването на възпалителни сигнални пътища, свързани с макрофагите [24]. Макрофагите играят жизненоважна роля в поддържането на сърдечната хомеостаза и оркестрирането на възстановяването на тъканите, както и ремоделирането. LPS-стимулираните RAW264.7 клетки са широко използвани за изследване на лекарства, притежаващи противовъзпалителни свойства и основни механизми [25,26].

NLRP3 инфламазомата е жизненоважен медиатор на възпалителните реакции и има все повече доказателства, че NLRP3 инфламазомата играе решаваща роля при сърдечните заболявания. В човешките артериални съдове високата експресия на NLRP3 е свързана с рискови фактори за атеросклеротични заболявания и тежестта на коронарната артериална болест [27], а нивото на NLRP3 гени, свързани с инфламазома, е свързано с атеросклеротична плака [28]. Активирането на инфламазомата NLRP3 също е свързано с неблагоприятно сърдечно ремоделиране. NLRP3 се активира в кардиомиоцити в модел на неблагоприятно сърдечно ремоделиране на мишки, предизвикан от напречна аортна констрикция (TAC), и активирането на NLRP3 инфламазома доведе до трансформацията на про-каспаза-1 в нейната активна форма [29]. MCC950.a NLRP3 възпалителният инхибитор може да инхибира атеросклеротичния ефект, вероятно по начин да инхибира адхезията на моноцитите и да намали натрупването на макрофаги в плаките [30].

Tan IIA е основен мономер, извлечен от Danshen, притежаващ различни биологични свойства. Тан ⅡA имаанти-възпалителен, антиоксиданти насърчава ефекта на ангиогенезата и се използва широко за лечение на заболявания на сърдечно-мозъчно-съдовата система [11]. Появяващите се доказателства показват, че Tan A предотвратява увреждане на кардиомиоцитите, сърдечните фибробласти, атеросклерозата иневровъзпаление[13-16]. Нашите предишни проучвания показват, че Tan IIA проявява противовъзпалителен ефект чрез инхибиране на сигналния път на TLR4-MyD88-NF-KB и коригиране на свързаната експресия на miRNA в LPS-стимулирани RAW264.7 клетки [31] . В допълнение, Tan IIA може да насърчи поляризацията на макрофагите от провъзпалителен M1 фенотип към противовъзпалителен M2 фенотип [32]. Въпреки това, молекулярният механизъм, който е в основата на ефектите на Tan IIA, все още е неясен.

Нашите резултати показват, че производството на NO значително се увеличава в RAW264.7 клетки, стимулирани с LPS, и лечението с Tan IIA (при 1 0, 1 и 0,1 uM) значително намалява производството на NO от клетките. Клетките RAW264.7, стимулирани с LPS, могат да индуцират активирането на възпалителния отговор и той може да бъде подобрен от Tan IIA, включително експресията на иРНК на NLRP3, IL-1 и TNF-.ATP е втора сигнална молекула на Активиране на възпаление на NLRP3. В проучването ATP е използван за индуциране на активирането на NLRP3. Резултатите показват, че LPS плюс ATP индуцира активирането на експресията на NLRP3 протеин и това може да бъде подобрено от Tan IIA. В клетките, стимулирани с LPS или LPS плюс ATP, протеиновата експресия на IKBa, pp65/p65 беше значително повишена; и лечението с Tan IA （при 10 μM） значително намалява регулирането нагоре. Протеиновото ниво на рр38/р38 се регулира нагоре в клетки, стимулирани с LPS плюс ATP, и регулирането нагоре се инхибира от Tan IA (10uM). Освен това, протеиновата експресия на HMGB1 също беше повишена в клетки, индуцирани с LPS или LPS плюс ATP, но не показа статистическа разлика. Тези резултати предполагат, че LPS или LPS плюс ATP индуцирано активиране на NF-kB и p38 пътя може да бъде инхибирано от Tan IIA.

Лечението с LPS плюс ATP повишава значително нивото на вътреклетъчната ROS, а Tan IIA инхибира значително индуцираното от LPS плюс ATP увеличение на вътреклетъчната ROS. Ацетилцистеин (N-ацетил-I-цистеин, NAC) е чистач на ROS. NAC може значително да инхибира индуцираното от IPS плюс ATP повишаване на нивото на NLRP3 протеин. Тези резултати предполагат, че Tan IIA има антиоксидантен капацитет и че регулаторният ефект на Tan IIA върху NLRP3 може да зависи от пътя на ROS-NLRP3.

Да обобщим. Tan IIA може да инхибира възпалителния отговор и експресията на NLRP3, стимулирани от LPS или LPS плюс ATP, а NAC може да инхибира LPS плюс ATP-индуцирано повишаване на нивото на NLRP3. По този начин може да се спекулира, че механизмът, който е в основата на ефектите на Tan IIA, може да включва регулирането на пътя на ROS-NF-kB/P38-NLRP3. Това проучване допълнително характеризира молекулярния механизъм на Tan IA и предоставя нови мисли за неговата клинична терапия.

Препратки

1 M.DeBerge.SJ. Shah, L. Weilbacher и др. Макрофаги при сърдечна недостатъчност с намалена спрямо запазена фракция на изтласкване. Тенденции Mol. Med 2019, 25: 328-340.

2. GH. Gislason, S. Jacobsen, JN Rasmussen и др. Риск от смърт или повторен инфаркт, свързан с употребата на селективни инхибитори на циклооксигеназа-2 и неселективни нестероидни противовъзпалителни лекарства след остър миокарден инфаркт. Тираж 2006, 113: 2906-2913

3. DM McNamara, R. Holubkov, RCStarling, et al. Контролирано изпитване на интравенозен имуноглобулин при наскоро възникнала дилатативна кардиомиопатия. Circulation 2001, 103:2254-2259.

4. PM Ridker, BMEverett, T. Thuren и др. Противовъзпалителна терапия с канакинумаб за атеросклеротично заболяване. N Engl J Med 2017,377:1119-1131. PMRidker, JG MacFadyen, T. Thuren и др.

5. Ефект на инхибирането на интерлевкин-1бета с канакинумаб върху инцидентен рак на белия дроб при пациенти с атеросклероза: проучвателни резултати от рандомизирано, двойно-сляпо, плацебо-контролирано проучване. Lancet 2017,390:1833-1842. H. Guo, JB Callaway, JP Ting.

6. механизъм на действие, роля при заболяване и терапевтични средства. Nat Med 2015,21:677-687.

7. L.Minutoli.D.Puzzolo, M.Rinaldi и др. ROS-медиирано NLRP3 инфламазомно активиране в мозъка. сърце. бъбрек и исхемия на тестиса/реперфузионно увреждане. Oxid Med Cell Longley 2016.2016: 2183026.

8. M.KawaguchiM.TakahashiTHata, et al. Възпалителното активиране на сърдечните фибробласти е от съществено значение за миокардна исхемия/реперфузионно увреждане. Circulation 2011, 123:594-604. Г. Тренделенбург. Молекулярна регулация на клетъчната съдба

9. при церебрална исхемия: роля на инфламазомата и свързаните с нея пътища. J Cereb Blood Flow Metab 2014,34:1857-1867.

10.C. Джин, RAFlavell. Молекулярен механизъм на NLRP3 възпалителна активация. J Clin Immunol 2010, 30: 628-631.

11.Y. Цай. W, Zhang, Z.Chen и др. Последни прозрения за биологичните дейности и системите за доставяне на лекарства на таншиноните. Int J Nanomedicine 2016,11:121-130.

12. М.Акабери, М.Ираншахи, С.Мехри. Молекулярни сигнални пътища зад биологичните ефекти на дитерпените на видовете салвия в неврофармакологията и кардиологията. Phytother Res2016.30:878-893.

13. D. Wang, Y. Liu, G. Zhong и др. Съвместимост на таншинон IIA и астрагалозид IV при отслабване на увреждане на кардиомиоцитите, предизвикано от хипоксия. Ethnopharmacol 2017,204:67-76.

14. W. Chen, X.Li, S.Guo и др. Tanshinone IIA хармонизира пресичането на автофагията и поляризацията в макрофагите чрез miR-375/KLF4 пътя за намаляване на атеросклерозата. Int Immunopharmacol 2019,70:486-497.

15. YT Tsai, SHLoh, CY Lee, et al. Таншинон А инхибира силно индуцирания от глюкоза синтез на колаген чрез ядрен фактор еритроиден 2-свързан фактор 2 в сърдечните фибробласти. Cell Physiol Biochem 2018,51:2250 2261.

16.N. Huang, Y.Li, Y. Zhou и др. Невропротективен ефект на мезенхимни клетки, инкубирани с таншинон IA, стволови Abeta25-35-индуциран 5C при невровъзпаление. Behav Brain Res 2019,365:48-55.

17.Т. Heidt. G Courtesies, P Dutta, et al. Диференциален принос на моноцитите към сърдечните макрофаги в стационарно състояние и след миокарден инфаркт. Circ Res 2014,115:284-295.

18. С. Щефенс, Ф. Монтекуко, Ф. Мах. Възпалителният отговор е цел за намаляване на миокардната исхемия и реперфузионното увреждане. Thromb Haemost 2019,102:240-247.

19.J. MacMicking, OW Xie. C. Nathan Азотен оксид и функция на макрофаги Annu Rev Immunol 1997, 15: 323-350.

20.ШШШ. W, WU НЕ на работа. Клетка 1994.78: 919-925.

21. L. Franchi, T. Eigenbrod, R. Munoz-Planllo и др. Инфламазомата: платформа за активиране на каспаза-1-, която регулира имунните отговори и патогенезата на заболяването. Nat Immunol 2009,10:241-247.

22. X. Dong Z. Zheng, P. Lin и др. ACPA насърчават производството на IL-1бета при ревматоиден артрит чрез активиране на възпалителната NLRP3. Cell Mol Immunol 2019.

23. PJ. Мъри, Т. А. Уин. Защитни и патогенни функции на макрофагите. Nat Rev Immunol 2011,11:723-737.

24. G Pascual, AL Fong, S.Ogawa и др. Зависещият от SUMOylation път медиира трансрепресията на гени за възпалителни реакции от PPAR-gamma. Nature 2005,437:759-763.

25.X. Zhang G.Wang, ECGurley и др. Флавоноидният апигенин инхибира индуцирания от липо полизахарид възпалителен отговор чрез множество механизми в макрофагите. PLoS One 2014,9:e107072.

26. Z. Yuan, MA Syed, D. Panchal, et al. Медиираната от куркумин епигенетична модулация инхибира експресията на TREM-1 в отговор на липополизахарид. Int J Biochem Cell Biol 2012, 44: 2032-2043.

27.F.Zheng.S, Xing. Zhong, et al NLRP3 инфламазомите показват висока експресия в аортата на пациенти с атеросклероза. Heart Lung Circ 2013, 22: 746-750.

28. G Paramel Varghese, L. Folkersen, RJ Strawbridge, et al. NLRP3 възпалителна експресия и активиране при човешка атеросклероза. J Am Heart Assoc 2015,5.

29.Т. Suetomi, A. Willeford, CSBrand, др. Възпалението и NLRP3 инфламазомна активация, инициирана в отговор на претоварване с налягане от Ca(2 plus)/калмодулин-зависима протеин киназа II делта сигнализиране в кардиомиоцитите, е от съществено значение за неблагоприятно сърдечно ремоделиране. Circulation 2018, 138:2530-2544.

30. T. van der Heijden, E. Kritikou, W. Venema и др. Инхибирането на инфламазома на NLRP3 от MCC950 намалява развитието на атеросклеротични лезии при мишки с дефицит на аполипопротеин Е - кратък доклад. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2017, 37:1457-1461.

31. G Fan.X. Дзян. X. Wu, e1 ал. Противовъзпалителна активност на таншинон IIA в LPS-стимулирани RAW264.7 макрофаги чрез miRNA и TLR4-NF-kappaB път. Възпаление 2016,39: 375-384.

32. S. Gao, Y. Wang, D. Li и др. Таншинон IIA облекчава възпалителния отговор и насочва поляризацията на макрофагите в липополизахарид-стимулирани RAW264.7 клетки. Възпаление 2019, 42: 264-275.