Ефективност на комбинираното лечение с екстракти от Laminaria Japonica и Cistanche Tubulosa при растежа на косата

Kyungha Shin1#, Tae-Su Kim2#, Jangbeen Kyung1, Dajeong Kim1, Dongsun Park1, Ehn-Kyoung Choi1, Sung-Pyo Lee2, Woong-Suk Yang2, Myung-Hwa Kang3, Yun-Bae Kim1*

1 Колеж по ветеринарна медицина, Национален университет Chungbuk, Cheongju, Корея

2Misuba RTech Co., Ltd., Asan, Корея

3 Департамент по хранителни науки и хранене, Университет Хосео, Асан, Корея

Тъй като загубата на коса на скалпа напоследък се е увеличила дори при младите хора, което сериозно засяга качеството на живот на индивидите, стимулиращите растежа на косата ефекти на екстракта от Laminaria japonica (LJE) иCistanche tubulosaекстракт (CTE) бяха изследвани. След потвърждаване на анагенната фаза на фоликулите при бръснене, мъжки C57BL/6 мишки бяха приложени дермално с 3 процента миноксидил или перорално приложени с комбинациите от LJE и CTE в продължение на 21 дни. Миноксидилът насърчава възстановяването на косата и повишава активността на -глутамил транспептидаза (-GTP) и алкална фосфатаза (ALP). В допълнение, миноксидил повишава нивата на епидермалния растежен фактор (EGF) и съдовия ендотелен растежен фактор (VEGF). Съвместното прилагане на LJE и CTE при 54 mg/kg LJE плюс 162 mg/kg CTE оказва синергичен стимулиращ ефект върху възстановяването на косата, сравним с 3 процента миноксидил. LJE преференциално засилва активността на ALP, докато CTE повишава както -GTP, така и ALP активността, както и експресиите на EGF и VEGF. In vivo моделът на възпаление на въздушната торбичка, индуцираната от карагенан съдова ексудация и повишените концентрации на азотен оксид и простагландин Е2 в ексудатите бяха синергично потиснати чрез съвместно прилагане на LJE и CTE. В допълнение, възпалителната клетъчна инфилтрация беше значително инхибирана от комбинираното лечение. Резултатите предполагат, че комбинираното перорално лечение с LJE и CTE в подходящи дози и съотношения предотвратява загубата на коса и подобрява алопецията, което може да бъде частично медиирано от техните противовъзпалителни дейности.

Ключови думи:Растеж на косата, възпаление, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa,комбинирано лечение

За повече информация моля свържете се с:Joanna.jia@wecistanche.com

Цистанчеdeserticola има много ефекти, щракнете тук, за да научите повече

Напоследък косопадът на скалпа се увеличава дори при млади хора, което сериозно засяга качеството на живот на индивида. Въпреки че плешивостта не е сред здравословните проблеми, тя може да причини дълбок психологически дискомфортен социален стрес. Поради това е от голям интерес да се разработят нови превантивни и/или терапевтични материали за косопад и възстановяване на косата. Въпреки пазара от милиарди долари, има няколко налични в момента ефективни продукта [1]. Космените фоликули се ремоделират по време на циклични периоди на растеж (анаген), регресия (катаген), почивка (телоген) и отделяне (екзоген) [2]. По време на катаген,

много от фоликулните клетки претърпяват програмирана клетъчна смърт (апоптоза) [3], намалявайки размера на фоликулите, когато фоликулите навлизат в телоген. Активирането на рядко циклични епителни стволови клетки, разположени в областта на изпъкналостта на фоликулите, прави фоликулна регенерация в началото на следващата анагенна фаза [4]. Потомството на стволовите клетки образува нова фоликуларна матрица по време на ранния анаген, а стволът на косъма и вътрешната коренова обвивка произлизат от тези относително недиференцирани матрични клетки [5]. Добре известно е, че размерът на космения фоликул и продължителността на анагенната фаза определят съответно размера (диаметъра) и дължината на космения ствол. Този цикличен растеж на косата се регулира от различни растежни фактори.

Миноксидил, финастерид и пропеция се предлагат в търговската мрежа за забавяне на косопада и улесняване на повторния растеж на косата. Миноксидилът като вазодилататор проявява страничен ефект за улесняване на растежа на косата [6], което може да се дължи на неговите дейности за доставяне на хранителни вещества и отваряне на калиеви канали [7,8]. Миноксидилът е ефективен при андрогенна алопеция, наред с други лечения на плешивост, въпреки че ефективността му изчезва в рамките на месеци след прекратяване на лечението. За сравнение, финастерид и пропеция, терапевтични средства за доброкачествена хиперплазия на простатата и рак на простатата, са регистрирани в много страни за андрогенна алопеция (оплешивяване при мъже). Finasteride и propecia са синтетични антиандрогени, инхибиращи тип II 5- редуктаза, ензим, който превръща тестостерона в дихидротестостерон (DHT) в клетките на папилата в дъното на космените фоликули [9]. Laminaria japonica, Undaria pinnatifida и Cladosiphon okamuranus, широко разпространени в много страни, са били използвани като терапевтични средства в ориенталската медицина за дълъг период от време. В предишни проучвания фукоиданът, сулфатен полизахариден комплекс, е бил извлечен и идентифициран от морските водорасли и е потвърдено, че притежава антиоксидантни, антикоагулативни, противоракови и противовъзпалителни действия [10,11]. След това са доказани благоприятните ефекти на фукоидан върху възпалителни заболявания, исхемия, имунна дисфункция и тумори [12,13]. От друга страна,Екстракт от Cistanche tubulosa(CTE) също се използва широко за традиционно лечение в Китай. CTE подобрява притока на кръв чрез понижаване на нивата на холестерола в кръвта [14]. Наскоро беше съобщено, че CTE намалява производството на тумор-некрозисфактор- (TNF-) и интерлевкин-4 (IL-4), които са основни фактори за производството на азотен оксид (NO) във възпалителния път [15]. Ние също така показахме, че фукоидан от екстракт от Laminaria japonica (LJE) и CTE синергично отслабват възпалението in vitro и in vivo [16]. Трябва да се отбележи, че е доказано, че има тясна връзка на възпалението на кожата (особено на слъзните жлези) с алопецията [17]. По този начин се появяват противовъзпалителни аспекти на лечението на алопеция [18]. Въз основа на дейностите за подобряване на притока на кръв и възпалението, ние изследваме комбинираната ефикасност на LJE и CTE върху растежа на косата и основния(те) механизъм(и), в сравнение с 3 процента миноксидил (Hyundai Pharmaceutical, Сеул, Корея), добре известен продукт за коса подобрител на растежа.

ЦистанчеЕкстракт против косопад

Материали и Методи

Материали

LJE и CTE бяха получени от Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Корея). Изсушен прах от Laminaria japonica се екстрахира в пречистена вода при 60oC в продължение на 24 часа, филтрува се през 0,45 µm мембрана, дезинфекцира се и се изсушава чрез пулверизиране. Cistanche tubulosa се екстрахира в 80 процента етанол, дезинфекцира се, концентрира се и се изсушава. LJE и CTE се държат при 4oC, смесват се (1:3) и се разтварят в пречистена вода преди употреба и се прилагат перорално в обем от 5 mL/kg.

Животни

Мъжки C57BL/6 мишки за изследване на растежа на косата и мъжки ICR мишки за изследване на възпалението бяха закупени от Daehan Biolink (Eumseong, Корея) и настанени в стая с постоянни условия на околната среда (23±2ºC; 45-65 процента относителна влажност ; 12-часов цикъл светло-тъмно; 150-300 лукс яркост). Пелетната храна и пречистената вода бяха достъпни ad libitum. Всички експерименти с животни бяха одобрени от Институционалния комитет за грижа и използване на животни (IACUC) на Националния университет Chungbuk (CBNU), Корея, и проведени съгласно стандартните оперативни процедури (SOP) на Центъра за лабораторни изследвания на животни, CBNU.

Лечение за растеж на косата

След потвърждаване на анагенната фаза чрез наблюдение на хомогенно-розовия цвят на кожата в задната кожа на C57BL/6 мишки (на 6 седмици, n=8/група) след подстригване в телогенната фаза, косата беше обръсната [1 ,19,20]. От следващия ден се избират мишки без видими драскотини и се третират орално с LJE (18 или 54 mg/kg), CTE (54 или 162 mg/kg) или тяхната смес (18 плюс 54 или 54 плюс 162 mg/kg) веднъж на ден в продължение на 21 дни. Ниски дози LJE (18 mg/kg) и CTE (54 mg/kg) са от изчислени дози за хора от 100 mg/тяло (70 kg) и 300 mg/тяло след преобразуване на телесното тегло на повърхностната площ (Km{{23} } съответно за човек/Km=3 за мишка). Високите дози LJE и CTE бяха определени на 3 пъти, самостоятелно или в комбинация, за да се оценят максималните синергични ефекти [16]. Миноксидил (3 процента, 0,2 mL) се прилага локално веднъж дневно върху обръснатата кожа по същата схема с лечението с LJE/CTE.

Грубо наблюдение на растежа на косата

На интервали от 3- дни след бръснене и по време на лечението, мишките бяха леко анестезирани с диетилов етер и бяха направени снимки на гърба им. Съотношението на повторно израстване на косата (обръсната зона/обръсната зона) върху снимките беше анализирано с помощта на компютъризирана система за анализ на изображения (Imageinside, Daejeon, Корея).

Микроскопско изследване на космените фоликули

На 14 и 21 ден мишките бяха умъртвени чрез дълбока анестезия с диетилов етер и техните гръбни кожи бяха отстранени [1]. Гръбната кожа беше разрязана на две части. Фиксирани с формалин, вградени в парафин тъканни срезове (5 µm в диаметър) на една част бяха оцветени с хематоксилин-еозин, за да се изследва броят на космените фоликули и хистологичните находки. Другата част от тъканта беше замразена в течен азот за ензимен анализ и имуноанализ.

Анализ на ензимната активност

Кожната тъкан се хомогенизира в 4 обема фосфатен буфер (рН 7.4). Хомогенатът се центрофугира при 3,000 rpm за 20 минути и супернатантата се използва за анализ на активността на -глутамил транспептидаза (-GTP) и алкална фосфатаза (ALP), като се използва р-нитрофенол фосфат (PNPP)-DEAV като субстрат [1,21].

Количествено определяне на растежните фактори

Епидермалният растежен фактор (EGF) и съдовият ендотелен растежен фактор (VEGF) бяха количествено определени с помощта на комплекти за ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) (R&D Systems, Минеаполис, САЩ) съгласно инструкциите на производителя [1,22].

Лечение на възпаление

ICR мишки (на 7 седмици, n=8/група) бяха третирани перорално с LJE (18 или 54 mg/kg), CTE (54 или 162 mg/kg) или тяхна смес (18 плюс 54 или 54 плюс 162 mg/kg) веднъж дневно в продължение на 7 дни [16]. На първия ден от лечението с LJE и CTE, мишките бяха инжектирани подкожно с 10 mL стерилен въздух в задната страна, за да се образува торбичка [16,23,24]. След 2 и 5 дни торбичката се инжектира отново с 5 mL въздух. Един час след последното третиране с LJE и CTE, 1 ml карагенан (1 процент във физиологичен разтвор; Sigma-Aldrich, Сейнт Луис, САЩ) или неговият носител (физиологичен разтвор) се инжектира в торбичката.

Анализ на ексудатите

Въздушната торбичка се промива с 1 ml студен физиологичен разтвор 6 часа след инжектирането на карагенан и нетният обем

е регистрирана промивна течност [16]. Общият брой на възпалителни клетки, включително неутрофили, моноцити и лимфоцити, се определя с помощта на колтер брояч. Концентрациите на NO и простагландин Е2 (PGE2) се определят с Griess reagent (Sigma-Aldrich) и

ензимен имуноанализ (EIA), използвайки съответно комплект Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, САЩ) [16].

Цистанчеекстракт против стареене и косопад

Статистически анализ

Данните са представени като средна ± стандартна грешка. Статистическата значимост се определя чрез еднопосочен анализ на дисперсията, последван от posthoc теста на Tukey за множество сравнения. P-стойности<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Резултати

Прилагането на миноксидил (3 процента), референтен материал, значително улеснява растежа на косата на C57BL/6 мишки, показвайки почти пълно покритие (92,4 процента) на обръснатата зона (фигури 1, 2B) в сравнение с 29,2 процента при нормално растеж (Фигури 1, 2A) на ден 21. Въпреки че е по-малко ефективно от прилагането на миноксидил, пероралното лечение с LJE също улеснява растежа на косата, което води до 33,5 и 69,1 процента покритие съответно при 18 и 54 mg/kg (Фигури 1, 2C, 2D). CTE също е ефективен за подобряване на растежа на косата, достигайки 73,6 и 80,4 процента

покритие при 54 и 162 mg/kg, съответно (Фигури 1, 2E, 2F). Трябва да се отбележи, че комбинираната терапия с високи дози LJE (54 mg/kg) и CTE (162 mg/kg) забележително подобрява растежа на косата от ден 12, сравнимо с ефекта на миноксидил (фигури 1, 2H), въпреки че ниските дози LJE (18 mg/kg) и CTE (54 mg/kg) упражняват синергичен ефект само в ранна фаза (Фигури 1, 2G).

В сравнение с нормалните космени фоликули (Фигура 3A), приложението на миноксидил подобрява целостта на космените фоликули, показвайки по-големи фоликули и по-дебели косми (Фигура 3B). Такива ефекти са открити и в кожите на мишки, третирани с LJE и/или CTE (Фигури 3C-3H). По-специално, ефикасността на укрепване на космения фоликул на комбинираното лечение на LJE и CTE е сравнима с тази на миноксидил.

Прилагането на миноксидил повишава активността на -GTP, който индуцира космените фоликули към анагенна фаза с 90-120 процента

на ден 14 и 21, в сравнение с нивото на нормална кожа (Фигура 4). LJE (54 mg/kg) също повишава ензимната активност, въпреки че има големи вариации. CTE упражнява подобни ефекти, като значително повишава активността на -GTP на ден 14. Интересното е, че комбинираното лечение на LJE и CTE допълнително повишава ензимната активност по-високо, отколкото когато екстрактите се използват самостоятелно.

Активността на ALP, маркер за костен растеж и ангиогенеза, значително се повишава в кожата на 14 и 21 ден след локално приложение на миноксидил (Фигура 5). LJE и CTE също повишават активността на ALP след перорално приложение по дозозависим начин. По-специално, ензимната активност беше синергично подобрена чрез комбинирано лечение с LJE и CTE.

При анализа на EGF, добре известен фактор за растеж на косата, приложението на миноксидил повишава нивото на EGF

3,5 гънки от нормалната контрола на двата дни 14 и 21 (Фигура 6). LJE (18 mg/kg) повиши EGF само на ден 21, докато CTE (162 mg/kg) силно регулира производството си на ден 14 и 21. Интересно е да се отбележи, че комбинираното лечение на LJE и CTE дори при ниските дози показват подчертани синергични ефекти.

Лечението с миноксидил също повишава нивото на VEGF с 50-80 процента над контролната стойност (Фигура 7). Въпреки че LJE е неефективен, CTE упражнява забележителни подобряващи ефекти. В допълнение, комбинираната терапия на LJE и CTE показва синергична активност в ранната фаза на 14-ия ден.

Инжектирането на карагенан във въздушната торбичка на мишка ICR увеличава обема на ексудата в торбичката 6 пъти над контролното ниво (Таблица 1). Такава повишена ексудация беше значително отслабена чрез лечение с LJE (18 и 54 mg/kg) или CTE (54 и 162 mg/kg). По-специално, комбинираното лечение с LJE и CTE допълнително намалява

обемът на ексудата в сравнение с индивидуалните ефекти. Броят на възпалителните клетки се увеличава драстично чрез инжектиране на карагенан: съответно 34,6, 4,2 и 24,9 пъти контролни нива за неутрофили, моноцити и лимфоцити (Таблица 1). Въпреки това, LJE и CTE значително намаляват възпалителните клетки по дозозависим начин, при който LJE е донякъде по-добър от CTE. Очаквано, синергични ефекти при възпалителната клетъчна инфилтрация бяха постигнати чрез съвместно прилагане на LJE и CTE.

Успоредно с възпалителната клетъчна инфилтрация в торбичката, съдържанието на NO и PGE2 в торбичката също драстично се увеличава след инжектиране на карагенан (Таблица 1). В сравнение с лекия ефект на LJE,

CTE значително понижи концентрацията на NO. Комбинираното лечение на LJE и CTE допълнително намалява нивото на NO по дозозависим начин. По подобен начин повишеното ниво на PGE2 е синергично

потиснати от комбинираната терапия на LJE и CTE (Таблица 1).

Цистанчеекстракт подобряваимунитети предотвратява загубата на коса

Дискусия

Човешката глава има средно 100000 космени фоликула.

През целия си живот всеки фоликул расте и се отделя около 20 пъти, показвайки ежедневна загуба на коса от 100 нишки [25]. Загубата на коса, включително алопеция и плешивост, е тревожно състояние за мъжете и жените, особено в съвременното общество. Поради това е от голямо значение разработването на нови терапии, които предотвратяват косопада и подобряват лечението на косата; т.е. съдовата ексудация и възпалителната клетъчна инфилтрация са синергично потиснати. При количествен анализ основните възпалителни медиатори NO и PGE2 са значително контролирани след перорално едновременно приложение на LJE и CTE. Интересно е, че тъй като LJE показва противовъзпалителна активност, по-висока от тази на полупречистения фукоидан [16], се предполага, че може да има допълнителна(и) активна(и) съставка(и), освен фукоидан, в LJE.

Взети заедно, резултатите показват, че комбинираното перорално лечение с LJE и CTE подобрява загубата на коса чрез регулиране на растежните фактори и свързаните с тях ензимни активности и отчасти чрез противовъзпалителен потенциал. Следователно се предполага, че комбинация, включваща LJE и CTE в подходящи клинични дози и съотношения, може да бъде кандидат рецепта за пациенти с косопад.

Благодарности

Това изследване беше финансово подкрепено от Водещото промишлено развитие за икономически регион на Водещата промишлена служба Chungcheong, Корейския институт за напредък на технологиите (KIAT) и Министерството на икономиката на знанието (MKE), и отчасти от Програмата за развитие на хранителни технологии с висока добавена стойност , Министерство на земеделието, храните и селските райони (MAFRA; грант номер 113034-3).

Конфликт на интереси Авторите декларират, че няма финансов конфликт на интереси за публикуване на тези резултати.

Препратки

1. Ким JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Насърчаване на ефекта на смеси от билкови екстракти върху повторното израстване на косата при мишки C3H / HeJ. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.

2. Paus R, Cotsarelis G. Биологията на космените фоликули. N Engl J Med 1999; 341 (7); 491-497.

3. Cotsarelis G. Косменият фоликул: умиращ за внимание. Am J Pathol 1997; 151 (6): 1505-1509.

4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Клетките, задържащи етикета, се намират в областта на издутината на пилосебацеалната единица: последици за фоликуларните стволови клетки, цикъла на косата и карциногенезата на кожата. Cell 1990; 61 (7): 1329-1337.

5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Морфогенеза и обновяване на космените фоликули от възрастни мултипотентни стволови клетки. Cell 2001; 104 (2): 233-245.

6. Burton JL, Marshall A. Хипертрихоза, дължаща се на миноксидил. Br J Dermatol 1979; 101 (5): 593-595.

7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Механизъм на действие на индуцираната от миноксидил сулфат вазодилатация: роля за повишена K плюс пропускливост. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245 (3): 751-760.

8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Миноксидил сулфатът е активният метаболит, който стимулира космените фоликули. J Invest Dermatol 1990; 95 (5): 553-557.

9. Kaufman KD, Dawber RP. Финастерид, тип 2 5алфа-редуктазен инхибитор, при лечението на мъже с андрогенна алопеция. Expert Opin Investig Drugs 1999; 8(4): 403-415.

10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Антивирусни свойства на фукоиданови фракции от Leathesia difformis. Фитомедицина 1999; 6(5): 335-340.

11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Потенциален антиоксидантен и антикоагулантен капацитет на фракции на фукоидан с ниско молекулно тегло, извлечени от Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46 (1): 6-12.

12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan подобрява бъбречния кръвен поток в ранния стадий на бъбречна исхемия/реперфузионно увреждане при плъхове. J Physiol Pharmacol 2001; 52 (1): 137-143.

13. Li N, Zhang Q, Song J. Токсикологична оценка на фукоидан, извлечен от Laminaria japonica при плъхове Wistar. Food Chem Toxicol 2005; 43 (3): 421-426.

14. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Хипохолестеролемичните ефекти на екстракта от Cistanche tubulosa, китайско традиционно сурово лекарство, при мишки. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.

15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. Инхибиторен ефект на актеозид, изолиран от Cistanche tubulosa върху освобождаването на химически медиатор и производството на възпалителни цитокини от RBL-2H3 и KU812 клетки. Планта Мед 2010; 76(14): 1512- 1518.

16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Синергични противовъзпалителни ефекти на Laminaria japonica fucoidan и екстракт от Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012; 28 (2): 91-97.

17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Асоциацията на възпаление на слъзната жлеза с алопеция ареата. Орбита 2015; 34 (1): 45-50.

18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, Lis-Swiety A. Нови аспекти на лечението на алопеция ареата. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.

19. Hattori M, Ogawa H. Биохимичен анализ на растежа на косата от аспектите на стареенето и ензимните дейности. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.

20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. Ефект на лосиона за скалп DREAMMO® върху стимулирането на растежа на косата в модел на алопеция на C57BL/6 мишки. Lab Anim Res 2006; 22 (1): 91-96.

21. Ханджиски Б.К., Айхмюлер С., Хофман У., Чарнецки Б.М., Паус

R. Алкална фосфатазна активност и локализация по време на цикъла на миша коса. Br J Dermatol 1994; 131 (3): 303-310.

22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF-рецепторна сигнална трансдукция. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.

23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Противовъзпалителни ефекти на етанолов екстракт от Angelica gigas в модел на възпаление на карагенан-въздушна торбичка. Exp Anim 2009; 58 (4): 431-436.

24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Противовъзпалителни ефекти на суперкритичен екстракт от Houttuynia cordata в модел на възпаление на карагенан-въздушна торбичка. Lab Anim Res 2012; 28 (2): 137-140.

25. Rebora A. Патогенеза на андрогенната алопеция. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.

26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, ново съединение за насърчаване на растежа на косата in vitro и in vivo модели на мишка. J Dermatol Sci 2001; 25 (3): 213-218.

27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Използване на активността на гама-глутамил транспептидаза като маркер за цикъл на коса и индукция на анаген в миши космени фоликули. J Invest Dermatol 1994; 103 (1): 122-126.

28. Hamada K, Suzuki K. Оценка на биохимични индекси като маркер за цикъл на коса при C3H мишки. Exp Anim 1996; 45 (3): 251-256.

29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Сулфатираният полизахарид фукоидан стимулира остеогенната диференциация на човешки мастни стволови клетки. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.

30. Даниленко DM, Ring BD, Pierce GF. Растежни фактори и цитокини в развитието и цикъла на космения фоликул: последни прозрения от животински модели и потенциала за клинична терапия. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.

31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo насърчава растежа на космените фоликули на мишки чрез контролирано освобождаване на растежни фактори. Биоматериали 2003; 24(13): 2387-2394.

32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Хемотаксичният ефект на фактор, произхождащ от клетките на дермалната папила, върху клетките на външната обвивка на корена. J Dermatol Sci 2001; 25 (3): 206-212.

33. Stenn KS, Paus R. Контроли на цикъла на космения фоликул. Physiol Rev 2001; 81 (1): 449-494.

34. Chapman RE, Hardy MH Ефекти от интрадермално инжектиран и локално приложен миши епидермален растежен фактор върху растежа на вълната, кожата и вълнените фоликули на мериносови овце. Aust J Biol Sci 1988; 41 (2): 261-268.

35. Дворжак HF, Браун LF, Детмар М, Дворжак AM. Фактор на съдов пермеабилитет/фактор на съдов ендотелен растеж, микроваскуларен пермеабилитет и ангиогенеза. Am J Pathol 1995; 146 (5):

1029-1039.

36. Ellis RA, Moretti G. Съдови модели, свързани с катогенните космени фоликули в човешкия скалп. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448- 457.

37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Ангиогенните свойства на космения фоликул на вибриса на плъх са свързани с луковицата. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.

38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Контрол на растежа на косата и размера на фоликула чрез VEGF-медиирана ангиогенеза. J Clin Invest 2001; 107 (4): 409-417.

39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. Разпределение на VEGF иРНК безразлични етапи на космения фоликул чрез флуоресцентна in situ хибридизация, комбинирана с конфокална лазерна микроскопия. В: Изследване на косата за следващото хилядолетие (Van Neste DJJ, изд.), Elsevier, Амстердам, 1996 г.; pp 407-412.

40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Успешно лечение на косопад, подобен на алопеция ареата, с контактен сенсибилизатор дибутилестер на квадратна киселина (SADBE) в C3H/HeJ мишки. J Invest Dermatol 1999; 113 (1): 61-68.