Ефекти от времето на контралатералната нефректомия и исхемичните състояния върху бъбречната фиброза след едностранно бъбречно исхемично-реперфузионно увреждане Ⅱ
Oct 27, 2023
Резултати
Протокол 1: Ефекти от интервала между контралатералната нефректомия и uIRI върху преминаването на AKI CKD Степента на преживяемост намалява с удължаването на интервала между контралатералната нефректомия и IRI
Както се споменава в експеримент 1, исхемичната продължителност е фиксирана на 24 минути с основна телесна температура от 37 C в uIRI. Ние наблюдаваме ефекта от времето на контралатералната нефректомия след uIRI върху оцеляването на мишки. Данните показват, че в групата от ден 7 (контралатералния непокътнат бъбрек е резециран 7 дни след uIRI), всичките осем мишки са оцелели. За групата от ден 10, една мишка умира в деня след контралатералната нефректомия, с процент на преживяемост от 87,5%. За групата от ден 14, една мишка умира на първия ден след контралатералната нефректомия и две мишки умират два дни след контралатералната нефректомия, с процент на преживяемост от 62,5%. Тези резултати показват, че степента на преживяемост на мишките постепенно намалява с удължаването на контралатералната нефректомия, когато другите два фактора на влияние са фиксирани (Фигура 2 (A)).
НАТИСНЕТЕ ТУК, ЗА ДА ВЗЕМЕТЕ БИЛКОВА ФОРМУЛА CISTANCHE ЗА БЪБРЕЦИ
Бъбречната функция намалява с удължаването на интервала между контралатералната нефректомия и uIRI
В сравнение с фиктивната контрола, SCr и BUN са значително по-високи при всички мишки след контралатерална нефректомия (p < {{0}}.05), което показва, че всички те страдат от бъбречно увреждане. Освен това, нивата на SCr и BUN се повишават с удължаване на интервала между контралатералната нефректомия и uIRI (p <0,05) (Фигура 2(B,C))
Бъбречното хистологично увреждане се влошава с удължаване на интервала между контралатералната нефректомия и uIRI
HE оцветяването показва, че бъбречната тъкан на фиктивната група е структурно нормална на 8 седмици след uIRI. Във всички групи на uIRI бяха открити няколко патологични промени след AKI в бъбрека (Фигура 3(A)), включително различни степени на вакуолна дегенерация на тубулни епителни клетки, отлепване на границата на четката, фокална дезинтеграционна некроза, дилатация на някои тубулни лумени и бъбрек оток на тубулни епителни клетки с променлива морфология. Освен това, някои гломерули са набръчкани и склерозирани, с хиперплазия на мезангиалните клетки и разширена капсула на Bowman. Възпалителна клетъчна инфилтрация също се наблюдава в интерстициалния бъбрек. Резултатите за тубулно и гломерулно патологично увреждане на увредения бъбрек са по-високи от фалшивите (p < 0.05), което показва, че uIRI с контралатерална нефректомия значително уврежда бъбрека. Резултатите от патологични увреждания на бъбреците се увеличават с удължаване на контралатералната нефректомия (p <0,05) (Фигура 3(B,C)). Тези констатации показват, че възрастта на бъбречното патологично увреждане постепенно се увеличава с удължаването на контралатералната нефректомия след uIRI.
Фигура 2. Ефекти от времевите интервали между контралатералната нефректомия и едностранното исхемично-реперфузионно увреждане (uIRI) върху степента на преживяемост и бъбречната функция. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0, а резекцията на десния бъбрек беше проведена в различни времеви точки (ден 7, ден 10 и ден 14) с исхемична продължителност, фиксирана на 24 минути с основната телесна температура е фиксирана на 37 C по време на бъбречна исхемия. (A): Преживяемостта на мишките във всяка група се оценява и се представя като процент. (B и C): Бъбречната функция е оценена чрез серумен креатинин (SCr) и уреен азот в кръвта (BUN). n ¼ 5–8/група. р <0,05.
Фигура 3. Ефекти от времевите интервали между контралатералната нефректомия и едностранното исхемично-реперфузионно увреждане (uIRI) върху хистологичното увреждане на бъбрека. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0, а резекцията на десния бъбрек беше проведена в различни времеви точки (ден 7, ден 10 и ден 14) с исхемична продължителност, фиксирана на 24 минути с основната телесна температура е фиксирана на 37 C по време на бъбречна исхемия. Хистологичното увреждане на бъбрека се определя чрез оцветяване с хематоксилин-еозин (HE). (A): Представително оцветяване с HE на увредения бъбрек, което показва типичните хистопатологични характеристики на патологични промени след AKI, включително различни степени на вакуолна дегенерация на тубулни епителни клетки, отделяне на ръба на четката, фокална дезинтеграционна некроза, дилатация на някои тубулни лумени (# ), едем на бъбречни тубулни епителни клетки с променлива морфология и възпалителна клетъчна инфилтрация (%). Някои гломерули са набръчкани и склеротични, с хиперплазия на мезангиалните клетки (&) и разширена капсула на Bowman (увеличение, 400). (B): Полу-количествено определяне на тубулно увреждане. (C): Полу-количествено определяне на гломерулно увреждане. n ¼ 5–8/група. р <0,05.
Бъбречната фиброза се влошава с удължаване на интервала между контралатералната нефректомия и теглото на бъбрека на uIRI.
Трансформацията от AKI в CKD обикновено се характеризира с бъбречна фиброза [19] и намаляването на теглото на бъбреците е макроскопски индикатор за бъбречна фиброза [2]. Така че ние измерихме теглото на бъбреците (тегло на бебето, калибрирано по телесно тегло), за да проучим предварително ефекта от времевите интервали между uIRI и забавената контралатерална нефректомия върху прехода AKI-CKD. В сравнение с фиктивната група, всички uIRI групи показват значително намаление на теглото на бъбреците (p < 0.05), което показва, че всички мишки в uIRI групите са имали бъбречна фиброза. Разликата в теглото на бъбреците се променя значително, когато разликата във времевия интервал между контралатералната нефректомия и uIRI е 3 дни, а теглото на бъбреците намалява постепенно с увеличаване на интервала (Фигура 4(A)).
Трихромно петно на Masson.
Беше извършено трихромно оцветяване на Masson, за да се наблюдава допълнително ефектът от времевите интервали между контралатералната нефректомия и uIRI върху бъбречната фиброза. Не е наблюдавана значима бъбречна интерстициална фиброза във фиктивната група, докато различни степени на фиброзни промени в бъбреците на всички uIRI групи са наблюдавани на 8 седмици след uIRI (Фигура 4(B)). Полу-количественият анализ на фиброзната област показа, че фиброзната област на бъбрека в групите с uIRI е значително повишена в сравнение с тази във фиктивната група (p < 0.05), което показва, че преходният модел AKI CKD беше успешно изпълнен. Освен това, със забавянето на контралатералната нефректомия, бъбречната фиброза става все по-тежка (р <0, 05), което показва, че степента на бъбречна фиброза се е променила значително, когато интервалът между контралатералната нефректомия и uIRI е 3 дни. С удължения интервал от време между контралатералната нефректомия и uIRI, степента на бъбречна фиброза се влоши още повече (Фигура 4(C)).
Фигура 4. Ефекти от времевите интервали между контралатералната нефректомия и едностранното исхемично-реперфузионно увреждане (uIRI) върху бъбречната фиброза. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0, а резекцията на десния бъбрек беше извършена в различни времеви точки (ден 7, ден 10 и ден 14) с исхемична продължителност, фиксирана на 24 минути с основната телесна температура е фиксирана на 37 C по време на бъбречна исхемия. Бъбречната фиброза се оценява чрез теглото на бъбрека, трихромното оцветяване на Masson и експресията на фибронектин (FN), колаген I (COL-I) и актин на гладката мускулатура (a-SMA). (A): Бъбречно тегло към телесно тегло. (B): Представително трихромно оцветяване на Masson на увредения бъбрек, което показва типичните фиброзни промени (%) (увеличение, 200). (C): Полу-количествено определяне на фиброзната област, открита чрез трихромно оцветяване на Masson. (D): Количествени RT-PCR анализи за експресия на FN в бъбрека. (E): Количествени RT-PCR анализи за експресия на COL-I в бъбрека. (F): Представителни Western blot изображения за FN, COL-I и a-SMA. (G): Стълбова диаграма, показваща експресията на FN протеин, нормализирана от b-актин. (H): Стълбова диаграма, показваща експресията на COL-I протеин, нормализирана от b-актин. I: Диаграма, показваща експресията на a-SMA протеин, нормализирана от b-актин. n ¼ 5–8/група. р <0,05.
Натрупване на извънклетъчен матрикс (ECM).
Бъбречната интерстициална фиброза се характеризира с отлагане на ECM [2], като FN и COL-I, в интерстициалната област на бъбрека. Western blot и RT-PCR анализ показаха, че експресиите на FN и COL-I в бъбрека са значително повишени във всички uIRI групи в сравнение с фиктивната група (p < 0.05), което показва, че че всички деца са претърпели фиброзни промени. Нивата на експресия на FN и COL-I в бъбрека са по-високи със забавянето на контралатералната нефректомия (p <0,05) (Фигура 4(D–H)).
Миофибробласти в бъбреците.
Бъбречната фиброза се характеризира с натрупване на миофибробласти и последващо производство на ECM [20]. a-SMA се използва за откриване на количеството миофибробласти на 8 седмици след IRI. Western blot анализът показа, че експресията на a-SMA в бъбречните тъкани значително се повишава във всички uIRI групи в сравнение с фиктивната група (p < 0.05), което показва, че миофибробластите са ясно изразени в повече в бъбреците на всички увредени мишки. Експресията на a-SMA е по-висока със забавянето на контралатералната бъбречна резекция (p <0,05) (Фигура 4(F,I)). Тези резултати показват, че миофибробластите в бъбречната тъкан на uIRI се променят значително през 3-те дни между uIRI и контралатералната нефректомия и че миофибробластите постепенно се увеличават с по-дълги интервали.
Протокол 2: ефекти на основните телесни температури по време на исхемия върху прехода AKI-CKD
Степента на преживяемост намалява с повишаването на основната телесна температура по време на исхемия
Както бе споменато в експеримент 2, за да се изследва ефектът от основните телесни температури по време на исхемия върху прехода AKI-CKD, продължителността на исхемията беше фиксирана на 24 минути и контралатералният непокътнат бъбрек беше отстранен 14 дни след uIRI. Данните показват, че в групата с 36 C (телесната температура на сърцевината на мишките по време на исхемия е контролирана на 36 C), една мишка е починала на първия ден след контралатералната нефректомия и степента на преживяемост е 87,5%. За групата с 36,5 C две мишки умряха през първите 2 дни след контралатералната нефректомия, със 75% процент на преживяемост. В сравнение с групата с 36,5 C, има още една мишка, починала на втория ден след контралатерална нефректомия с процент на преживяемост от 62,5% в групата с 37 C. В групата с 37,5 C, с изключение на трите мишки, които са починали през първите 2 дни след контралатералната нефректомия, една мишка е починала 3 дни след контралатералната нефректомия, с процент на преживяемост от 50%. В допълнение към това, което се случи в групата с 37,5 C, една мишка умря 5 дни след контралатералната нефректомия в групата с 38 C и степента на преживяемост беше 37,5%. Тези резултати показват, че степента на преживяемост на мишките постепенно намалява с повишаването на основната телесна температура по време на исхемия (Фигура 5(A)).
Бъбречната функция намалява с повишаването на вътрешната телесна температура по време на исхемия
В сравнение с фиктивната група, uIRI доведе до значително увеличение на SCr и BUN във всички uIRI групи (p < {{0}}.05), което предполага, че всички мишки в uIRI групите са развили бъбречно увреждане след контралатерална нефректомия. Сравненията между две групи със съседни температури показват, че SCr и BUN на мишки се повишават с повишаване на 0.5 C в исхемичната телесна температура, но няма статистическа разлика (p > 0.05) , което предполага, че има по-слабо изразени промени в бъбречната функция с разлика в основната температура от 0,5 C по време на исхемия. Въпреки това, SCr и BUN значително се повишават, когато основната телесна температура се повиши с 1 C или повече по време на исхемия (p <0,05), което предполага, че бъбречната функция значително се е променила с 1 C разлика в основната телесна температура по време на исхемия. Бъбречната функция намалява по-значително с повишаване на исхемичната телесна температура (Фигура 5(B,C)).
Увреждането на бъбречната тъкан се влошава с повишена вътрешна телесна температура по време на исхемия
Според оцветяването с HE, структурата на бъбречната тъкан на мишките във фиктивната група е нормална. Индуцирани от IRI патологични промени са наблюдавани във всички потребителски групи, като различни степени на вакуолна дегенерация на тубулни епителни клетки, отделяне на ръба на четката, фокална дисинтеграционна некроза, дилатация на някои тубулни лумени и оток на бъбречните тубулни епителни клетки с променлива морфология, както и като набръчкани и склеротични гломерули, хиперплазия на мезангиални клетки и разширена капсула на Bowman, възпалителна клетъчна инфилтрация в бъбречния интерстициал (Фигура 6(A)).
Резултатите от патологично увреждане на бъбречните тубули и гломерули показват, че в сравнение с фиктивната група, патологичното увреждане на бъбрека във всички групи с uIRI е значително по-тежко (p < {{0}}.05 ), което предполага, че очевидно патологично увреждане на бъбрека се е появило във всички групи на uIRI и че моделът AKI-CKD е разработен успешно. Сравнението между две групи със съседни температури показа, че има увеличение на резултатите от патологични увреждания на бъбреците с 0.5 C увеличение на основната телесна температура по време на исхемия, но няма статистическа значимост (p > 0,05), докато бъбреците патологичното увреждане значително се увеличава с повишаване на основната телесна температура с 1 C и повече по време на исхемия (p <0,05) (Фигура 6(B,C)). Тези резултати показват, че хистопатологичното увреждане на бъбрека се променя значително с 1 C разлика в основната телесна температура по време на исхемия и постепенно се увеличава с повишената основна телесна температура по време на исхемия.
Бъбречната фиброза се влошава с повишаването на вътрешната телесна температура по време на исхемия Бъбречно тегло.
В сравнение с фиктивната група, uIRI причинява значително намаляване на теглото на бъбреците във всички uIRI групи и мишки с различна исхемична телесна температура развиват различна степен на бъбречна фиброза. Сравненията между две групи със съседни температури показват, че намаляването на теглото на бъбреците няма значителна разлика, когато основната телесна температура се повиши с {{0}}.5 C по време на исхемия (p > 0.{{ 7}}5), което предполага, че разликата от 0,5 C в основната телесна температура по време на исхемия няма значителен ефект върху промяната на теглото на бъбреците. Когато основната телесна температура по време на исхемичния период има разлика от 1 C, теглото на бъбреците се променя значително (p <0,05) и постепенно намалява с повишаване на исхемичната телесна температура (Фигура 7(A)).
Фигура 7. Ефекти от основните телесни температури по време на исхемия върху бъбречна фиброза при мишки с uIRI и забавена контралатерална нефректомия. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0 и резекцията на десния бъбрек беше проведена при различни вътрешни телесни температури (36 C, 36,5 C, 37 C, 37,5 C и 38 C) с исхемичното време на левия бъбрек, фиксиран на 24 минути, а десният бъбрек беше отстранен 14 дни след IRI на левия бъбрек. Бъбречната фиброза се оценява чрез теглото на бъбрека, трихромното оцветяване на Masson и експресията на фибронектин (FN), колаген I (COL-I) и а-гладкомускулен актин (a-SMA). (A): Бъбречно тегло към телесно тегло. (B): Представително трихромно оцветяване на Masson на увредения бъбрек, което показва типичните фиброзни промени (%) (увеличение, 200). (C): Полу-количествено определяне на фиброзната област, открита чрез трихромно оцветяване на Masson. (D): Количествени RT-PCR анализи за експресия на FN в бъбрека. (E): Количествени RT-PCR анализи за експресия на COL-I в бъбрека. (F): Представителни Western blot изображения за FN, COL-I и a-SMA. (G): Стълбова диаграма, показваща експресията на FN протеин, нормализирана от b-актин. (H): Стълбова диаграма, показваща експресията на COL-I протеин, нормализирана от b-актин. (I): Стълбова диаграма, показваща експресията на a-SMA протеин, нормализирана от b-актин. n ¼ 3–7/група. р <0,05. NS: незначителен.
Трихромно петно на Masson.
На 8 седмици след uIRI резултатите от трихромното оцветяване на Masson показват, че в сравнение с фиктивната група, фиброзната област на бъбречните тъкани във всички uIRI групи е значително повишена (p < 0.05), което показва, че фиброзен резултат се наблюдава във всички групи на uIRI. Сравненията между две групи със съседни температури показват, че площта на бъбречната фиброза се увеличава, но без статистическа значимост, когато основната телесна температура се повишава с 0.5 C по време на исхемия (p > 0.{{10} }5), което предполага, че разликата от 0,5 C в основната телесна температура по време на исхемия няма значителен ефект върху бъбречната фиброза. За всеки 1 C повишение на основната телесна температура по време на исхемия, зоната на бъбречната интерстициална фиброза значително се увеличава (p <0,05), което показва, че 1 C увеличение на основната телесна температура по време на исхемия има значително въздействие върху бъбречната интерстициална фиброза и бъбречна фиброза постепенно се влошава с повишаването на вътрешната телесна температура по време на исхемия (Фигура 7(B,C)).
ECM в бъбречната тъкан. Данните показват, че в сравнение с фиктивната група, експресиите на FN и COL-I в бъбречните тъкани на всички uIRI групи са значително повишени (p < 0.05), което е в съответствие с резултати от оцветяването на Masson. Сравненията между две групи със съседни температури показаха, че експресиите на FN и COL-I в бъбречните тъкани се повишават с 0.5 C повишаване на основната телесна температура по време на исхемия, но няма статистически значима разлика (p > {{8 }}.05), което показва, че разлика от 0,5 C в основната телесна температура по време на исхемия не е имала значителен ефект върху отлагането на ECM, докато експресията на FN и COL-I се увеличава значително с 1 C увеличение на основната телесна температура по време на исхемия (p <0.05) и те са имали по-изразено увеличение с повишаване на телесната температура. В заключение, отлагането на ECM или фиброзният резултат в бъбречните тъкани се увеличава с по-високата основна телесна температура по време на исхемия (Фигура 7(D–H)).
Миофибробласти в бъбречната тъкан.
В сравнение с фиктивната група, експресиите на a-SMA в бъбречната тъкан на всички uIRI групи са значително повишени (p < 0.05), което предполага, че миофибробластите са значително увеличени във всички uIRI групи . Сравненията между две групи със съседни температури показаха, че експресията на a-SMA в бъбреците се увеличава, когато основната телесна температура се повишава с 0.5 C по време на исхемия, но няма значима разлика (p > 0 .05), което предполага, че разликата от 0,5 C в исхемичната телесна температура няма значим ефект върху промените в бъбречните миофибробласти. Освен това, експресията на a-SMA в бъбречните тъкани значително се увеличава с 1 °C увеличение на исхемичната телесна температура, а увеличението на експресията на a-SMA е по-значимо с повишаване на телесната температура (p <0,05), което предполага, че миофибробластите се променят значително, когато разликата в основната телесна температура по време на исхемия е 1 C или повече. Заедно с повишаването на основната телесна температура по време на исхемия, миофибробластите в бъбречните тъкани постепенно се увеличават (Фигура 7(F,I)).
Протокол 3: ефекти от продължителността на исхемията върху прехода AKI-CKD
Степента на преживяемост намалява с увеличаване на продължителността на исхемията. Както беше споменато в експеримент 3, за да се изследва ефектът от продължителността на исхемията върху прехода AKI-CKD, исхемичната телесна температура беше фиксирана на 37 C по време на uIRI и контралатералният бъбрек беше отстранен 14 дни след uIRI. Резултатите показват, че в групата с 21 минути (продължителността на исхемията е 21 минути), една мишка е умряла съответно 1d и 2d след отстраняване на контралатералния бъбрек, с процент на преживяемост от 75%, а още една мишка е починала 2 дни след контралатералната нефректомия в групата на 24 минути, с процент на преживяемост от 62,5%. В 27-минутната група четири мишки, две мишки, една мишка и една мишка умряха съответно на 1 ден, 3 дни, 5 дни и 7 дни след контралатерална нефректомия и степента на преживяемост беше {{ 18}}%. По подобен начин, пет мишки, две мишки и една мишка умряха на 1 ден, 2 дни и 3 дни след контралатерална нефректомия в групата на 30-минута и процентът на преживяемост беше 0%. Това показва, че процентът на преживяемост намалява с увеличаване на продължителността на исхемията, тъй като всички мишки в групата с 27 минути и 30-min групата умират съответно 7 дни и 3 дни след контралатерална нефректомия (Фигура 8(A)).
Бъбречната функция е намалена с по-голяма продължителност на исхемията
Данните показват, че в сравнение с фиктивната група, както групата на 21 минути, така и групите на 24 минути показват значително увеличение на SCr и BUN (p < 0.05), което показва, че бъбречната функция е намалена. В сравнение с групата на 21 минути, групата на 24 минути показва по-изразено увеличение на SCr и BUN (p <0,05), което показва, че бъбречната функция се е променила значително с 3 минути разлика в продължителността на исхемията и по-очевидно намаляване на бъбречната функция може да се види с по-голяма исхемична продължителност (Фигура 8(B,C)).
Фигура 8. Ефекти от продължителността на исхемията върху степента на преживяемост и бъбречната функция при мишки с uIRI и забавена контралатерална нефректомия. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0, а резекцията на десния бъбрек беше проведена при различна исхемична продължителност (21 минути, 24 минути, 27 минути и 30 минути) с фиксирана основна телесна температура при 37°С по време на бъбречна исхемия, а десният бъбрек беше отстранен 14 дни след IRI на левия бъбрек. (A): Преживяемостта на мишките във всяка група се оценява и се представя като процент. (B и C): Бъбречната функция е оценена чрез серумен креатинин (SCr) и уреен азот в кръвта (BUN). n ¼ 5–6/ група. р <0,05.
Хистопатологичното увреждане на бъбреците се влошава с по-голяма продължителност на исхемията
Според оцветяването с HE, структурата на бъбречната тъкан на мишките във фиктивната група е нормална. В сравнение с фиктивната група, 21-минутната група и 24-минутната група са имали патологични промени в различна степен, включително вакуолна дегенерация на тубулни епителни клетки, отлепване на границата на четката, фокална дезинтеграционна некроза, дилатация на някои тубуларни лумени, оток на тубулни епителни клетки на бъбреците с различна морфология , набръчкани и склеротични гломерули, хиперплазия на мезангиални клетки и разширена капсула на Bowman и възпалителна клетъчна инфилтрация в интерстициума (Фигура 9(A)). Резултатите за патологични увреждания на бъбречните тубули и гломерули са значително по-високи както в 21-минутните, така и в 24-минутните групи в сравнение с фиктивната група (p < 0.05), което показва, че значително бъбречно патологично увреждане се е развило в и двете потребителски групи. Освен това, групата от 24 минути има по-високи резултати за патологични увреждания на бъбреците и по-тежки патологични увреждания в сравнение с групата от 21 минути (p <0,05) (Фигура 9(B,C)), което предполага, че патологичните увреждания на бъбреците имат значителни промени с 3 мин. разлика в исхемичната продължителност. Колкото по-голяма е продължителността на исхемията, толкова по-тежко е патологичното увреждане на бъбрека
Бъбречната фиброза се влошава с по-голяма продължителност на исхемията Тегло на бъбрека.
В сравнение с фиктивната група, както 21-минутната, така и 24-минутната група показват значително намаление на теглото на бъбреците (p < 0.05), а групата на 24 минути има по-забележимо намаление на теглото на бъбреците в сравнение с групата на 21 минути (p <0.05). Те показват, че една 3-минутна разлика в продължителността на исхемията е довела до значителна промяна в теглото на бъбреците и по-очевидно намаляване на теглото на бъбреците може да се види при по-голяма продължителност на исхемията (Фигура 10(A)).
Трихромно петно на Masson. Трихромното оцветяване на Masson и полу-количественото определяне на анализа на фиброзната област показаха, че няма значима интерстициална фиброзна промяна във фиктивната група, докато различни степени на фиброзни промени бяха наблюдавани в бъбречния интерстициал както в 21 min, така и в 24 min групите (p < { {3}}.05). В сравнение с 21-минутната група, 24-минутната група има по-висока степен на фиброза на бъбречната тъкан (p <0,05), което показва, че бъбречната фиброза значително се е променила с 3 минути разлика в исхемичната продължителност и че по-тежка бъбречна фиброза ще стане с по-дълга исхемична продължителност (Фигура 10(B,C)).
ECM в бъбречната тъкан. Western blot и RT-PCR анализ показаха, че в сравнение с фиктивната група, експресиите на FN и COL-I значително се увеличиха както в 21-минутните, така и в 24-минутните групи (p < 0.05) , което показва, че индуцираният от IRI ECM се е увеличил значително в групите с uIRI и бъбрекът е претърпял значителна фиброзна прогресия. В сравнение с 21-минутната група, експресиите на FN и COL-I са по-изразени в бъбречната тъкан в 24-минутната група (p <0,05), което показва, че отлагането на ЕСМ в бъбречните тъкани се е променило значително с 3-минутна разлика в продължителността на исхемията и отлагането на ECM се увеличават с удължената продължителност на исхемията (Фигура 10(D–H)).
Миофибробласти в бъбречната тъкан. Western blot анализът показа, че в сравнение с фиктивната група, експресията на a-SMA на бъбреците в групите от 21 минути и 24 минути значително се повишава (p < 0.05), което показва, че миофибробластите са имали значително увеличение на бъбреците в групите с uIRI и е настъпила значителна фиброзна прогресия. Експресията на a-SMA значително се повишава с 3-минутното увеличение на исхемичната продължителност (p <0,05) и се откриват повече миофибробласти с удължена исхемична продължителност (Фигура 10(F,I)).
Фигура 9. Ефекти от продължителността на исхемията върху бъбречно хистологично увреждане при мишки с uIRI и забавена контралатерална нефректомия. Левият бъбрек беше подложен на IRI на ден 0, а резекцията на десния бъбрек беше проведена при различна исхемична продължителност (21 минути, 24 минути, 27 минути и 30 минути) с фиксирана основна телесна температура при 37°С по време на бъбречна исхемия, а десният бъбрек беше отстранен 14 дни след IRI на левия бъбрек. Хистологичното увреждане на бъбрека се определя чрез оцветяване с хематоксилин-еозин (HE). (A): Представително оцветяване с HE на увредения бъбрек, което показва типичните хистопатологични характеристики на патологични промени след AKI, включително различни степени на вакуолна дегенерация на тубулни епителни клетки, отделяне на ръба на четката, фокална дезинтеграционна некроза, дилатация на някои тубулни лумени (# ), едем на бъбречни тубулни епителни клетки с променлива морфология и възпалителна клетъчна инфилтрация (%). Някои гломерули са набръчкани и склеротични, с хиперплазия на мезангиалните клетки (&) и разширена капсула на Bowman (увеличение, 400). (B): Полу-количествено определяне на тубулоинтерстициално увреждане. (C): Полу-количествено определяне на гломерулно увреждане. n ¼ 5–6/група. р <0,05.
Поддържаща услуга на Wecistanche-най-големият износител на cistanche в Китай:
Имейл:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/телефон:+86 15292862950
Пазарувайте за повече подробности за спецификациите:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
