Чревна пропускливост и депресия при пациенти с възпалително заболяване на черватаⅠ
Dec 20, 2023
Резюме: Депресията е глобален здравен проблем, който изисква ранна и точна диагноза, за да се осигури бърз достъп до подходящо лечение. Скорошното внимание се фокусира върху анализирането на оста мозък-черва-микробиота сред множество психопатологични пътища. Чревната бариера играе ключова роля и дисфункциите, възникващи на това ниво, имат отражение върху психичното здраве. Настоящото проучване има за цел да проучи ролята на биомаркерите за чревна пропускливост, т.е. калпротектин, зонулин, липополизахарид-свързващ протеин (LBP) и чревен протеин, свързващ мастни киселини (I-FAB), при депресия при пациенти с възпалително заболяване на червата (IBD). ).
Това е първото проучване от този вид, което се провежда в Румъния, Източна Европа, с акцент върху пациенти с болест на Crohn и улцерозен колит. Установените корелации между депресия и калпротектин и депресия и LBP имат потенциала да хвърлят светлина върху процеса на бързо диагностициране на депресия с помощта на биомаркери. Тъй като депресията е свързана с намаляване на качеството на живот на хоспитализирани пациенти с IBD, необходимостта от достъп до подходящо лечение трябва да бъде спешна.
1. Въведение
Депресията е индивидуално, професионално и социално увреждане, свързано със соматични заболявания [1,2] и с висок риск от смъртност от самоубийство [3]. Въпреки това достъпът до специалисти, правилната диагноза и ефективното лечение са ограничени [4]. Ранната и точна диагноза [5,6], както и персонализиран избор на лечение [7], са необходими за намаляване на страданието и финансовата тежест на заболяването [3]. Според диагностичните критерии в Диагностичния и статистически наръчник за психични разстройства (DSM V) [8], депресията е афективно разстройство с хетерогенна група от симптоми. За да бъдете диагностицирани, е необходимо наличието на пет от деветте следните симптома: потиснато настроение, липса на удоволствие, затруднено заспиване и апетит, ниски енергийни нива, когнитивни промени, чувство за вина и вина и суицидни идеи. Досега точното патофизиологичните механизми за извличане на полза от ефективно лечение не са известни. Няколко механизма са поставени под въпрос, но теориите все още се развиват.
По този начин са изследвани дисфункции на хипоталамо-хипофизната ос, невротрансмитери, вагусов нерв, късоверижни метаболити на мастни киселини, триптофан, възпалителни фактори и оста мозък-черва-микробиота [9–12]. Доказано е, че не само свързаните със стреса разстройства водят до промени в състава на чревната микробиота чрез оста хипоталамус-хипофиза-надбъбречна жлеза, но и червата засягат
централната нервна система чрез вагусна стимулация, чревна пропускливост и освобождаване на възпалителни и противовъзпалителни съединения и промени в циркулиращите агенти в кръвта [13]. През последните две десетилетия изследването на участието на оста мозък-черва-микробиота в психичните разстройства набра скорост [9,14]. В този контекст ролята на синдрома на пропускливите черва е получила повече внимание [15,16].
Чревната бариера има основна роля в храносмилането и усвояването на хранителните вещества; на второ място, тя стриктно контролира транспорта на антигени от лумена в субмукозата и поддържа баланса между толерантността и имунния отговор, който причинява възпаление. Целостта на чревната бариера може да бъде повлияна от диета, дисбиоза на чревната микробиота или от други фактори. Те имат потенциала да причинят имунеактивиране чрез транслокация на микробни антигени и метаболити. Понастоящем серумният зонулин, протеинът, свързващ чревните мастни киселини (IFABP/FABP2) и LBP, както и фекален албумин, калпротектин и зонулин, са анализирани като чревна пропускливост маркери [17]. Калпротектинът е протеин, който свързва калций и цинк, първоначално изолиран от левкоцити; той е полезен при разграничаване на възпалително заболяване на червата от синдром на раздразнените черва. Той играе основна роля по време на възпаление и се счита за протеин в острата фаза [18]. ].
Нормалните стойности са между 10 и 50 или 60 (ug/g). Стойности над 200 (ug/g) могат да показват възпалително заболяване, а стойности над 500–600 (ug/g) със сигурност показват наличието на чревно заболяване [19]. Липополизахарид-свързващият протеин (LBP) е основен липиден компонент на външната мембрана на грам-отрицателни бактерии [20], което причинява ендотоксемия [21]. LBPis, произведен от хепатоцити, мастна тъкан и чревни клетки, функционира като протеин на остра фаза I и играе важна роля в имунния отговор [22]. LBP присъства в серума в концентрации от 5-15 mg/mL и се увеличава 10 до 50 пъти по време на реакцията на острата фаза. Бариерната функция се поддържа от зонулин, известен като единственият физиологичен модулатор на близки вътреклетъчни връзки (TJs) [15,23, 24]. Зонулин обратимо отваря TJ, действайки върху протеазно-активирания рецептор 2, разположен във вътреклетъчното пространство на съединителния комплекс [25]. Средната стойност на зонулин е 34 ng/mL [26].
Свързващият чревни мастни киселини протеин (I-FABP/FABP2) е един от деветте различни идентифицирани FABP, които принадлежат към суперсемейство протеини, които свързват липидите. Основната роля е във вътрешноклетъчния транспорт и регулирането на абсорбцията на мастни киселини [27]. Когато възникне увреждане на епителната чревна бариера, I-FABP се освобождава в кръвообращението и неговата плазмена концентрация се увеличава [28]. Праговата стойност за I-FAPB се счита за 2 ng/mL. В този контекст ние имахме за цел да изследваме ролята на биомаркерите на чревната пропускливост при депресия при пациенти с възпалително заболяване на червата (IBD) чрез (i) изследване на връзката между калпротектин, зонулин, LBP , IFABP/FABP2 и депресия и чрез (ii) оценка на влиянието на депресията върху качеството на живот.
2. Материали и методи
2.1. Група за учене
Първоначалната група включваше 60 пациенти от клиниката по гастроентерология на окръжната клинична болница в Констанца между април и юни 2021 г. Критериите за включване бяха диагноза IBD, възраст 18 и повече години, познания по четене и писане и съгласие за участие в проучването. Критериите за изключване бяха отказ на съгласие, тежка депресия или други тежки психични разстройства, за които те бяха насочени към специализирана психиатрична служба. След информирано съгласие пациентите се свързаха по телефона от изследовател, за да приложат социодемографски въпросник за депресията и въпросник за качеството на life. В проучването са включени 30 пациенти, преминали през всички етапи на проучването.
2.2. Използвани въпросници
Въпросникът за здравето на пациента -9 (PHQ-9) [29] беше приложен към участниците, за да се оцени нивото на депресия, от което са били засегнати. Този стандартен въпросник съдържа девет елемента, на които трябва да се отговори въз основа на симптомите, които пациентът е имал през последните 14 дни. Резултатите са класифицирани както следва: 1–4 минимална депресия, 5–9 лека депресия, 10–14 умерена депресия, 15–19 умерено тежка депресия и 20–27 тежка депресия. По подобен начин приложихме въпросник за качеството на живот (EQ{{ 14}}D) [30,31] за събиране на данни относно качеството на живот. Елементите, включени в този инструмент, са мобилността на пациента, самообслужването, ангажираността с обичайните дейности, болката или дискомфорта и изпитаната тревожност или депресия. На въпросите се отговаря по петстепенна скала.
2.3. Вземане на проби и лабораторен анализ
Серологични проби за зонулин, IFABP/FABP2, LBP и фекални проби за калпротектин бяха събрани съгласно протокола за събиране и транспортиране на потенциално инфекциозни биологични проби. Серумните проби бяха събрани чрез венозна пункция, на гладно и във вакутейнер с активираща кърпа. Фекални проби бяха събрани от спонтанно отделени изпражнения в контейнери без носеща среда. Серумът е тестван за зонулин с MyBioSource Kit, Inc. (Сан Диего, Калифорния, САЩ). и IFABP/FABP2 и LBP с комплект Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Ухан, Китай). Пробите бяха тествани за калпротектин с комплекта EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Всички тестове бяха извършени чрез ензимно-свързан имуносорбентен тест (ELISA) на ADALTIS Analyzer GEN-4 и Victor X4 съгласно инструкциите на производителя на комплекта.
Диапазонът на нормалните стойности е определен от производителя на комплекта само за калпротектин, както следва: По-малко или равно на 50.0 mcg/g като норма, 50.1– 120,0 mcg/g като гранична стойност и По-голяма или равна на 120,1 mcg/g като положителна за чревно заболяване. За зонулин производителят на реакционния комплект не е посочил долни граници на откриване. Долната граница на откриване за комплекта IFABP/FABP2 е 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL за LBP и 3,125 ng/mL за калпротектин. За зонулин, I-FABP/FABP2 и LBS/LBP производителят на комплекта не е съобщил диапазон от нормални стойности и са използвани стойности, използвани от други автори в техните изследвания. Серумът се екстрахира от всяка кръвна проба чрез центрофугиране при 3000 × g за 30 минути с помощта на центрофуга Thermo Scientific SL16R.
Всички получени серуми бяха държани замразени при -200 ◦C до извършване на анализите. За IFABP/FABP2 и LBP, пробите бяха разредени до 1/2 с буфер за разреждане на пробата преди тестване. Пробите от изпражненията се съхраняват при -20 ◦C до деня на тестването. Екстракцията на проба от изпражнения се извършва с помощта на 980 iu буфер за екстракция заедно с 20 mg изпражнения, разбърква се в продължение на 30 s и след това се центрофугира при 2000 × g за 10 минути, като се използва центрофуга Thermo Scientific SL16R. След това разреждането на пробите се извършва с 980 iu буфер за проба и 20 iu супернатант за екстракция.
За четирите маркера бяха използвани микроплаки с 96 ямки, покрити с улавящи антитела: анти-калпротектин антитела, анти-IFABP/FABP2 антитела, анти-LBP антитела или анти-зонулинови антитела. Принципите на теста бяха същите, базирани на ензимно-свързана имунологична тестова технология (ELISA). Стандартни проби, тестови проби и биотин-конюгирани антитела за откриване бяха добавени по-късно към ямките. TMB субстрати (3,30,5,50-тетраметилбензидин) бяха използвани за визуализиране на ензимната реакцияHRP (пероксидаза от хрян). HRP катализира TMB, за да произведе син продукт, който се променя на жълт след добавянето на разтвор за спиране на киселината.
Плътността на жълтото петно беше пропорционална на количеството проба, уловена в плаката. Интензитетът на цвета се измерва при 450 nm в четеца на микроплаки и след това се изчислява целевата концентрация.
2.4. Статистически анализ
Статистическият анализ беше извършен с помощта на IBM SPSS статистически софтуер версия 23 (Armonk, NY, САЩ: IBM Corp.). Данните са представени като медиана и IQR (интерквартилендиапазон P75–P25) за непрекъснати променливи в случай на изкривени разпределения или като проценти за категориални променливи.
Тъй като тестът за нормалност на Шапиро-Уилк показва, в случая на анализираните непрекъснати променливи, статистически стойности на теста, чиято вероятност (p) е по-ниска от нивото на значимост {{0}}.05, условието на нормалността не е изпълнена, с изключение на променливите LBP и PHQ 9, за които p >=0.05. Сметнахме, че непараметричният подход за изследване на корелацията между въпросните променливи, с представянето на корелационния коефициент на Spearman (ρ) и вероятността (p), свързана с него, е по-подходящ. Нивото на значимост беше определено на 0,05.
Естествено билково лекарство за облекчаване на запек - Cistanche
Cistanche е род паразитни растения, който принадлежи към семейство Orobanchaceae. Тези растения са известни със своите лечебни свойства и се използват в традиционната китайска медицина (ТКМ) от векове. Видовете Cistanche се срещат предимно в сухи и пустинни райони на Китай, Монголия и други части на Централна Азия. Растенията Cistanche се характеризират със своите месести, жълтеникави стъбла и са високо ценени заради потенциалните си ползи за здравето. В TCM се смята, че Cistanche има тонизиращи свойства и обикновено се използва за подхранване на бъбреците, повишаване на жизнеността и поддържане на сексуалната функция. Използва се и за справяне с проблеми, свързани със стареенето, умората и цялостното благосъстояние. Въпреки че Cistanche има дълга история на употреба в традиционната медицина, научните изследвания за неговата ефикасност и безопасност продължават и са ограничени. Известно е обаче, че съдържа различни биоактивни съединения като фенилетаноидни гликозиди, иридоиди, лигнани и полизахариди, които могат да допринесат за лечебните му ефекти.
на Wecistanche'sцистанче на прах, цистанче таблетки, цистанче капсули, и други продукти са разработени с помощта напустиненцистанчекато суровини, всички те имат добър ефект за облекчаване на запек. Специфичният механизъм е следният: Смята се, че Cistanche има потенциални ползи за облекчаване на запек въз основа на традиционната му употреба и някои съединения, които съдържа. Докато научните изследвания конкретно върху ефекта на Cistanche върху запека са ограничени, се смята, че има множество механизми, които могат да допринесат за потенциала му за облекчаване на запек. Слабителен ефект:Цистанчеотдавна се използва в традиционната китайска медицина като средство за лечение на запек. Смята се, че има лек слабителен ефект, който може да помогне за насърчаване на движенията на червата и да предизвика запек. Този ефект може да се дължи на различни съединения в Cistanche, като фенилетаноидни гликозиди и полизахариди. Овлажняване на червата: Въз основа на традиционната употреба се счита, че Cistanche има овлажняващи свойства, специално насочени към червата. Насърчаването на хидратацията и смазването на червата може да помогне за омекотяване на инструментите и да улесни по-лесното преминаване, като по този начин облекчава запека. Противовъзпалителен ефект: Запекът понякога може да бъде свързан с възпаление в храносмилателния тракт. Cistanche съдържа определени съединения, включително фенилетаноидни гликозиди и лигнани, за които се смята, че имат противовъзпалителни свойства. Чрез намаляване на възпалението в червата може да помогне за подобряване на редовността на движението на червата и облекчаване на запека.
