Невронни корелати на предизвиканите от съня ползи върху обработката на травматична памет, част 3

3|РЕЗУЛТАТИ

3.1|Поведенчески резултати

Както се очакваше от докладваните по-рано резултати (Kleim et al., 2016), тук успешно повторихме благоприятния ефект от дрямката върху по-късното развитие на проникване. Участниците, които са останали будни, след като са гледали филма за травма, съобщават средно за 4,19 ± 0.8 тревожни прониквания, свързани с филма, през следващите 7 дни. За разлика от това, участниците в двете групи за дрямка при травма съобщават само за 2,92 ± 0,3 травматични прониквания.

Паметта е една от важните функции на мозъка и е от решаващо значение за нашия живот и обучение. Трябва да помним много неща всеки ден, като телефонни номера, упътвания, рождени дни и др. И благоприятните ефекти могат да подобрят паметта ни до голяма степен.

Първо, добрите навици на живот са важна част от полезните ефекти. Достатъчният сън, балансираната диета и подходящите упражнения могат да насърчат здравето на мозъка и да подобрят паметта. Изследванията показват, че хроничното лишаване от сън и нередовното ежедневие могат да повлияят на работата на паметта, което прави хората по-вероятно да бъдат разсеяни и да страдат от загуба на паметта. Следователно добрите навици в начина на живот могат да допринесат много за предотвратяването на тези състояния.

Второ, научаването на нови знания и умения също може да има благоприятно въздействие върху паметта. Научаването на нещо ново стимулира нервната система на мозъка да създава повече нови неврони и синапси. Тези нови неврони и синапси укрепват мозъчните връзки и помагат за подобряване на паметта. Следователно усвояването на нови знания и умения може да направи хората по-умни и да имат по-добра памет.

И накрая, психичното здраве също е един от важните фактори, които влияят благотворно на паметта. Стресът и безпокойството могат да накарат хората да забравят нещата по-лесно, докато положителните емоции могат да подобрят паметта. Положителните емоции и емоции могат да стимулират невротрансмитери като допамин и окситоцин в мозъка, като по този начин насърчават мозъчната дейност и подобряват паметта. Следователно установяването на здравословно емоционално и психическо състояние може значително да подобри нашата памет.

За да обобщим, полезните жизнени навици, усвояването на нови знания и умения и здравословното емоционално и психологическо състояние могат значително да подобрят нашата памет. В живота трябва да се съсредоточим върху упражняването и изграждането на тези аспекти, за да се справим по-добре със сложните задачи и предизвикателства на паметта в съвременния живот. Вижда се, че трябва да подобрим паметта и Cistanche deserticola може значително да подобри паметта, тъй като Cistanche deserticola е традиционен китайски лекарствен материал, който има много уникални ефекти, един от които е да подобрява паметта. Ефикасността на мляното месо идва от различните активни съставки, които съдържа, включително киселина, полизахариди, флавоноиди и др. Тези съставки могат да насърчат здравето на мозъка по различни начини.

Щракнете върху познайте добавките за подобряване на паметта

Разликата между групите на бодърстване и дрямка беше значителна (t(56)=1.73, p =.045; сравнение на групите: събуждане след травма спрямо traumanap и дрямка след травма + повторно активиране; вижте Фигура 1b) .

За нивото на яркост, свързано с интрузиите, открихме незначително значим ефект между групите на събуждането и дрямката, с по-висока възприемана яркост на натрапванията в групата на събуждането с травма (M=26.3 ± 5.8) в сравнение с групи с дрямка след травма (M=17.7± 2.4), t(56)=1.63, p =.055, вижте Фигура 1c (сравнение на групи: traumawake срещу.дрямка след травма и дрямка след травма + реактивиране). Не открихме ефект за нивото на дистрес, свързано с проникванията, p > .10 (групово сравнение: събуждане след травма срещу дрямка след травма и дрямка след травма + повторно активиране).

За разлика от благоприятния ефект на съня върху по-късните натрапвания, повторното активиране на травматичния филм по време на дрямка чрез аромат, свързан с филма, няма значителен допълнителен ефект върху развитието на натрапването в сравнение с групата на дрямка (без повторно активиране). Докато участниците в групата само с дрямка съобщават за 3,3 ± 0.5 прониквания, групата с дрямка + реактивиране съобщава за 2,6 ± 0.4 прониквания.

Броят на проникванията не се различава значително между двете групи за дрямка (сравнение на групите: дрямка след травма срещу дрямка след травма + повторно активиране), p > .10. По същия начин, нивото на отчетен дистрес (само дрямка след травма: 18,6 ± 3,8 и дрямка след травма + група за реактивиране: 13,4 ± 2,9) и яркост (само дрямка след травма: 19,6 ± 3,5 и дрямка след травма + група за реактивиране: 15,5 ± 3,1) е сравнимо между двете групи за дрямка, p > .10 (сравнение на групите: дрямка след травма срещу дрямка след травма + реактивиране): Обърнете внимание, че на описателно ниво броят на проникванията и нивото на дистрес и яркост е малко по-нисък за групата дрямка + реактивиране в сравнение с групата само за дрямка.

За подробности относно данните за съня, моля, вижте Допълнителна таблица 1 и раздела Резултати на Допълнителните материали.

3.2|Субективна оценка на снимките

След фазата на задържане, записването на мозъчната активност, както и задачата за памет на Стърнберг (имплицитна), участниците оцениха изображенията, използвани като разсейващи фактори в задачата за памет на Стърнберг. Важно е, че оценките на възбудата и валентността на филмовите снимки силно зависят от типа филм, който участниците са гледали преди интервала на задържане.

Участниците в групите за филми за травми оцениха филмовите снимки като значително по-възбуждащи (t(93)=6.39, p <.001, вижте Фигура 2) и по-негативни (t(93)=6.14, p < 0,001) в сравнение с тези участници, които са гледали неутралния контролен филм (сравнение на групите: контролно събуждане и контролна дрямка спрямо събуждане при травма и дрямка след травма и дрямка след травма + повторно активиране).

В рамките на групите за дрямка, оценките на възбудата на филмовите картини значително корелират с проникванията (r=.438, p=.006, вижте Фигура 2b), яркостта (r=.517, p=.001) и бедствие (r=.507,p=.001) от проникванията. Тези резултати бяха открити и за valencerationings, където корелация с интрузии (r=.462, p=.004), яркост (r=.512, p=.001) и бедствието (r=.501, p=.001) на проникванията беше показано.

Обърнете внимание, че всички участници гледаха едни и същи филмови снимки по време на фазата на отвличане на вниманието на задачата на Стърнберг и оценките. По този начин разликите в оценките, както и невронните корелати, записани по време на гледането на тези снимки, могат да се дължат единствено на паметта за предишното излагане на травма спрямо контролния филм.

3.3|fMRI диференциални контрасти: Експериментална травма и контрол по време на будност и сън

Когато гледането на филма с травма беше последвано от период на будност, участниците, които бяха кодирали филмова картина (неутрална реплика), показаха повишена мозъчна активност в следните региони в сравнение с групата, която гледаше контролния филм: В групата на събуждането с травма, имплицитно извличането на спомени за експериментални травми по време на задачата на Стърнберг доведе до повишена мозъчна активност в ретросплениалния кортекс/прекунеуса, задния цингуларен кортекс (PCC) и ACC в сравнение с контролната група на събуждане, както беше съобщено по-рано (Gvozdanovicet al., 2017) (контраст на първо ниво : филмови снимки > разбъркани картини и контраст на второ ниво: експериментална травматична група > контролна група след събуждане, всички p < .05, фамилна грешка, коригирана за множество сравнения за целия мозък на ниво клъстер, вижте Фигура 3a). Неутралните филмови сигнали предизвикаха тези мозъчни активации; те показват представянето на емоционалната памет на филма с травмата (вижте Допълнителни материали за повече информация относно снимките на филма).

Интересното е, че когато участниците подремнаха след гледане на филма с травмата, тези увеличения на мозъчната активност (показателни за представяне на травматичния филм в емоционална памет) напълно липсваха (контраст на първо ниво: филмови картини > разбъркани картини и контраст на второ ниво: експериментална травма групи > контролна група след сън вижте Фигура 3b). При директно сравняване на контрасти на групи травми; виж Фигура 3d). Важно е, че активността в клъстерния пик на тези региони прогнозира по-малко развитие на интрузия през следващите 7 дни в експерименталните групи за дрямка при травма (r=.347, p=.033). Корелацията не е значима в експерименталната група на събуждане с травма (r=.102, p > .60).

Дрямка след гледане на филм за травма също доведе до повишено активиране в няколко области на мозъка по време на имплицитно извличане на спомени за травма: групите за дрямка при травма показаха повишена активация в малкия мозък, веретеновидната извивка, долния темпорален и долния тилен лоб в сравнение с експерименталната група за събуждане при травма (контраст на първо ниво : филмови снимки > разбъркани картини и контраст от второ ниво: сън > събуждане в рамките на експерименталните травматични групи; всички p < 0,05, семейна грешка коригирана за множество сравнения за целия мозък на ниво клъстер [CDT от p =. 001]; вижте фигура 3e). В допълнение към целия мозъчен анализ, ние изследвахме разликите в активността между групите в будно състояние и дрямка в две априори дефинирани ROI, които са особено подходящи за обработка и извличане на травматични спомени: амигдалата и хипокампуса. Интересното е, че дрямка след травмафилма повишава активността в левия и десния хипокампус и лявата амигдала по време на имплицитно извличане на спомени за травма в сравнение с групата с травма от събуждане (и двете pFWE. малък обем. пик<.05, first-level contrast: film pictures > scrambled pictures, and second-level contrast: nap groups > wake within the experimental trauma groups, see Figure 4 and Supplementary Table 7).

3.5|Ефекти на TMR върху травматичните спомени

Когато се сравнява само групата на дрямка с групата на дрямка + реактивиране, дрямка + реактивиране след травма се свързва с повишено активиране в горния и средния фронтален гирус. Нямаше значително активиране за противоположния контраст (всички p < .05, семейна грешка, коригирана за множество сравнения за целия мозък на ниво клъстер [CDT от p=.001]). Тази дейност не корелира с прониквания.

3.6|Мозък-поведение корелира

Корелациите на Spearman разкриват значителна корелация между левия хипокампус и сумата от навлизания (r=.382, p=.018, вижте Фигура 4b) и техния субективно възприет дистрес (r=.351 ,p=.031) през следващите 7 дни след експериментална експозиция на травма в рамките на групите за дрямка, но не и в групата на будно състояние. Нещо повече, активността на лявата амигдала също корелира със сумата от интрузии през следващата седмица (r=.381, p=.018) и със субективния възприет дистрес по време на тези интрузии (r {{14 }} .355,p=.029) в рамките на групите за дрямка. Има също незначително значима корелация между преживяната яркост на интрузиите и лявата амигдала (r=.307, p=.061) и левия хипокампус (r=.306,p=.062). Освен това оценките на възбудата на филмовите снимки значително корелират с амигдалата (r=.384, p=.017) и хипокампуса (r=.370, p=.022) в рамките на групите за дрямка. Тези резултати бяха открити и за оценки на валентността, където има корелация с амигдалата (r=.346, p=.033) и хипокампуса (r=.356, p {{40 }} .028).

4| ДИСКУСИЯ

Тук ние очертаваме невронни корелати на експериментално възстановяване на паметта за травма след сън в сравнение с будност в експериментална среда. В този дизайн между субектите, участниците са гледали или атравма, или контролен филм и са претърпели или 60-минутна дрямка, 60-минутна дрямка плюс реактивиране на филма за травма по време на SWS, или будност. Участниците са завършили имплицитно задача за запаметяване и попълване на дневник за проникване в продължение на 7 дни след експеримента. Резултатите разкриват, че участниците, които са спали след експериментална травма, показват по-малко натрапвания през следващата седмица. TMR не е имал допълнителни ефекти върху развитието на проникване.

Участниците, които са гледали филма за травма, са показали по-високи рейтинги на филмови снимки както след събуждане, така и след дрямка, отколкото контролната група, когато са били изложени на неутрални филмови снимки. Това предсказа по-късно развитие на проникване в групите за дрямка. Когато се разглеждат невронните корелати, значителни невронни разлики в ретроспленалния кортекс/прекунеус, PCC и ACC бяха открити между експерименталната травма и контролната група само след будност. Тази невронна активност, свързана с травма, липсваше след сън. Освен това, експерименталната група за събуждане при травма разкри по-силна активност в префронталните региони, по-специално в ACC. Допълнителни анализи показаха, че експерименталната група с травма на сън разкри по-силно активиране в хипокампуса и амигдалата по време на филмови снимки в сравнение с експерименталната група с травма на сън. Този модел на активиране корелира значително с оценките на филмовата картина и сумата от натрапчиви спомени през следващите 7 дни.

Като основна констатация, проникванията са намалели през следващата седмица след първоначална дрямка непосредствено след експерименталната травма. Това показва, че сънят потенциално интегрира паметта на травмата в семантични мрежи (Stickgold, 2002). Следователно, участниците може да са по-склонни да възприемат паметта за травма като отделна от миналото, а не като настояще, което води до по-малко натрапчиви спомени. Интересното е, че няма значително влияние на TMR върху развитието на натрапчивост, въпреки че може да се наблюдава тенденция за по-малко натрапчивост. Това може да се обясни или с едва доловим ефект от успешния TMR, или с факта, че участниците в групата за дрямка плюс реактивиране са спали по-добре, отколкото в групата за дрямка (проявява се чрез по-малко сън на NREM етап 1 [Shrivastava et al., 2014] в групата за дрямка плюс реактивация ).

Освен това предишни изследвания съобщават, че броят на целевите реактивации по време на SWS е повлиял на последващото извличане на паметта (Oudiette & Paller, 2013). Дрямките в нашето проучване се състоеха само от 60 минути и следователно на участниците бяха приложени по-малък брой реактивации. По този начин участниците не са имали пълен цикъл на сън и само няколко участници са преминали през REM сън, за който се съобщава, че влияе на кондиционирането на страха и процесите на изчезване (Pace-Schott et al., 2015; Spoormakeret al., 2014). Въпреки че нови изследвания разкриха доста оскъден ефект на TMR по време на REM върху силата на емоционалната памет (Lehmannet al., 2016; Rihm & Rasch, 2015), точната оценка на влиянието на REM съня върху обработката на паметта за травма остава интересен въпрос, който все още не е отговори напълно.

Нашето откритие, че експозицията на експериментална травма сама по себе си влияе върху обработката на филмовата картина и рейтингите допълнително подчертава ефективността на парадигмата. Важно е, че в групите за дрямка рейтингите на филмовата картина предсказваха развитието на проникването. Това показва, че обработката на паметта изглежда вече е оформена на ранно ниво след излагане.

Нашите резултати относно свързаните с травма невронни корелати в ретросплениалния кортекс/прекунеус, PCC и ACC, както беше съобщено по-рано (Gvozdanovic et al., 2017), се припокриват с мета-анализи на невронните корелати на паметта за травма при пациенти с ПТСР (Sartory et al. ., 2013). Интересното е, че докладваните невронни корелати, свързани с травма, не могат да бъдат намерени след 60-минутна дрямка, което показва, че сънят намалява ефектите от експерименталната травма. Това откритие подкрепя предишната концепция за полезна и терапевтична роля на съня след излагане на травма (Kleim et al., 2016; van der Helm et al., 2011), като свързаните с травмата невронни корелати отсъстват след 60-минута след излагане на травма експерименталната травма. По-конкретно, това показва потенциална интеграция на свързани с травма невронни корелати в семантични мрежи след сън, което в крайна сметка води до отслабена реакция на мозъка, когато се сблъска със стимули, свързани с травма. Допълнителни резултати разкриват, че групата с травма показва намалено активиране в опашката, таламуса, допълнителната моторна зона и цингулума в сравнение с контролната група след сън. Амигдалата се проектира към опашката по време на обработката на паметта (McGaugh, 2004), а допълнителната двигателна зона е свързана с готовност за действие (Cunnington et al., 2005), което може да е променен механизъм след сън само когато се гледа неутрален филм. Тази дейност е потенциално намалена или липсва при участници, които са били изложени на филм с травма.

Когато сравнихме различните състояния (събуждане, сън и сън плюс реактивиране) след експериментална травма, открихме медиирано от съня хипокампално и амигдално активиране по време на имплицитната травма памет. Предишни изследвания съобщават, че зависещите от хипокампуса спомени са специфично консолидирани по време на SWS (Raschet al., 2007). Това може да обясни наблюдаваното изместване на активирането в хипокампуса. Освен това амигдалата е свързана с обработката на заплахите и тревожността (Dolan & Vuilleumier, 2003; Lang et al., 2000; LeDoux, 2003) и е от централно значение при ПТСР (Pitmanet al., 2012). Променената активност в амигдалата след сън може да подчертае значението на съня при обработката на заплахата и свързаните с тревожността свойства на експериментална травма.

В групата на съня това активиране в хипокампуса и амигдалата корелира с последващото развитие на интрузия през следващите 7 дни. Интересното е, че колкото по-високо е активирането на хипокампа и амигдалата, толкова по-голям е броят на проникванията. Като цяло паметта след сън обикновено става по-скоро независима от хипокампуса (Rasch & Born, 2013).

Този процес обаче отнема време (Rasch & Born, 2013). Нашите резултати може да са показателни, че наистина е имало иницииране на процес на интегриране на паметта, докато дисфункционалните неинтегрирани спомени все още се обработват в хипокампуса и амигдалата. По-конкретно, не всички спомени, свързани с експериментална травма, може да са станали независими от хипокампуса още след кратка дрямка и травматичните спомени може да бъдат допълнително обработени през следващата седмица. Струва си да се отбележи, че по-силен ефект от интегрирането на паметта с по-малко активност на хипокампа и амигдалата вече може да се очаква след цяла нощ на сън.

Допълнителни индивидуални структурни разлики в обема на хипокампа също могат да бъдат отговорни за този докладван ефект.

Освен това, нашите анализи на целия мозък разкриха повишена активация в малкия мозък, веретеновидния извивка и долния темпорален лоб в рамките на групите с травма след дрямка в сравнение с будност. Предишни изследвания разкриха, че различните подрегиони на малкия мозък са от централно значение за психопатологията на посттравматичното стресово разстройство (Рабелино и др., 2018). Нещо повече, малкият мозък като цяло изглежда участва в регулирането на емоциите (Schutter & van Honk, 2009), а веретенообразният извивка се свързва със съвпадение на емоциите при здрави индивиди (Dricu & Fruhholz, 2020). ПТСР също се обсъжда като разстройство на темпоралния лоб, при което промените в невронната обработка в темпоралния лоб са свързани с повторно преживяване на ПТСР (Engdahl et al., 2010).

Невронните корелати след будност в експерименталната травмагрупа разкриват по-силна кортикална активност в предния и средния цингулум в сравнение с активността след сън. Цингулумът е свързан с емоционална обработка в предишни изследвания. В зависимост от подрегиона на цингулума се обработват различни емоции, като предната и средната част на цингулума участват в обработката на страха (Vogt, 2005). ACC също се съобщава в контекста на обработката на травматична памет (Sartory et al., 2013), което показва отделна първична обработка, свързана с травма, след будност.

Продължителността на съня след травма също може да бъде решаваща за натрапчивата обработка на паметта. Предишни изследвания показаха, че продължителността на съня след травма в реалния живот през първата нощ значително влияе върху развитието на проникването, като твърде малко (1 час) или твърде много (12,5 часа) сън се свързва с повече прониквания (Porcheret et al., 2020) . Напротив, в нашето проучване дрямката се състоеше от кратка продължителност (60 минути) и въпреки това такава кратка продължителност на съня беше свързана с по-малко намеси. Важно е, че имаше съществени разлики между проучването на Porcheret и нашата дизайнерска настройка. Докато в проучването на Porcheret, травмата от реалния живот и пълната първа нощ на съня (актиграфия и дневник на съня) бяха оценени в наблюдателно проучване, нашето проучване се състоеше от интервенционално проучване, използващо парадигмата на филма за травма при здрави доброволци, където е оценена само дрямка (PSG мерки). В допълнение, нашето проучване имаше интервенция на съня веднага след излагане на травматичен филм, за да предизвика незабавно интегриране на паметта. Следователно бъдещите изследвания трябва конкретно да оценят как продължителността на съня след травма модулира последващото развитие на интрузивни симптоми.

Важно ограничение на нашето проучване е, че измервахме само здрави участници и че гледането на филм с травма вероятно е по-сходно с свидетелството на травма, отколкото с преживяването. Пробите от пациенти с посттравматичен стрес вероятно ще разкрият допълнителни или променени невронни промени след сън, с променени и по-сложни модели на сън. Предишни изследвания наистина показаха разлики в поведенческите и физиологични нива между пациенти с ПТСР и здрави контроли, изложени на травма. Парадигмата на филма за травма е добре установена при предизвикване на подобни на ПТСР симптоми; въпреки това здравите участници се възстановяват от тези симптоми след часове, дни или седмица (James et al., 2016). Освен това бъдещите проучвания трябва допълнително да оценят както TMR по време на REM сън, така и като цяло REM сън в детайли след излагане на травма чрез удължаване на продължителността на съня. Сравнението със съня през цялата нощ може да разкрие допълнителна информация, свързана с посттравматичния стрес.

Освен това, тъй като нашата извадка от здрави субекти включва само жени, това допълнително ограничава нашите открития. До 50% от жените развиват ПТСР след сексуално насилие (Chivers-Wilson, 2006). И все пак, тъй като подобни физиологични, емоционални и паметови ефекти на парадигмата на филма за травма бяха открити при жени и мъже в предишни изследвания (Weidmann et al., 2009), бихме очаквали потенциално обобщаване на промените в невронната активност при мъже. Независимо от това, бъдещите изследвания трябва да се съсредоточат върху това дали нашите точни резултати при жени могат да бъдат обобщени за мъже и дали са засегнати същите области на мозъка.

Структурните промени в мозъка и променената мозъчна функционалност също могат да бъдат фактор на уязвимост, който се появява преди травмата. Такива промени могат да доведат до променена обработка на преживена травма. Бъдещите изследвания трябва също така да вземат предвид фактори на уязвимост като атрофия на хипокампа (Gilbertson et al., 2002) и разлики в кодирането по време на травматичното събитие, за да идентифицират допълнително предсказващи фактори.

Като цяло ние предоставяме нови прозрения за невронните корелати на обработката на паметта за травма и полезната роля на съня след експериментална травма. Свързаната със съня обработка след експериментална травма се подчертава от активността на хипокампа и амигдалата и корелира с развитието на интрузия. Нашите резултати показват, че сънят улеснява обработката на травматична памет и по този начин предотвратява по-късни намеси. Бъдещите изследвания трябва да се съсредоточат върху възможността за максимизиране на полезните ефекти от съня върху обработката на травматична памет при пациенти с ПТСР.

ПРЕПРАТКИ

Американската психиатрична асоциация, DSM-5 Работна група. (2013). Диагностично и статистическо ръководство за психични разстройства (5-то издание). American PsychiatricPublishing.

Barnes, DC, & Wilson, DA (2014). Възпроизвеждането, наложено от сън с бавни вълни, модулира както силата, така и прецизността на паметта. The Journal of Neuroscience, 34 (15), 5134–5142.https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.5274-13.2014 г.

Born, J., & Wilhelm, I. (2012). Системна консолидация на паметта по време на сън. Психологически изследвания, 76 (2), 192–203.https://doi.org/10.1007/s00426-011-0335-6

Brawn, TP, Nusbaum, HC, & Margoliash, D. (2018). Реконсолидация, зависима от съня след дестабилизация на паметта при скорци. Nature Communications, 9 (1), 3093.https://doi.org/10.1038/s41467-018-05518-5

Brewin, CR (2014). Епизодична памет, перцептивна памет и тяхното взаимодействие: Основи за теория на посттравматичното стресово разстройство. Психологически бюлетин, 140 (1), 69–97.https://doi.org/10.1037/a0033722

Brewin, CR, Dalgleish, T., & Joseph, S. (1996). Теория за двойно представяне на посттравматичното стресово разстройство. Психологически преглед, 103 (4), 670–686.

Бътлър, Г., Уелс, А. и Дюик, Х. (1995). Различни ефекти от безпокойство и образи след излагане на стресиращ стимул: пилотно проучване. Поведенческа и когнитивна психотерапия, 23, 45–56.

Chivers-Wilson, KA (2006). Сексуално насилие и посттравматично стресово разстройство: Преглед на биологичните, психологическите и социологическите фактори и лечения. McGill Journal of Medicine, 9 (2), 111–118.

Clark, IA, & Mackay, CE (2015). Психични образи и посттравматично стресово разстройство: невроизобразителен и експериментален психопатологичен подход към натрапчиви спомени за травма. Граници в психиатрията, 6,104.https://doi.org/10.3389/fpsyt.2015.00104

For more information:1950477648nn@gmail.com