Част 3: Различни роли за деацетилазния домейн на HDAC3 в хипокампуса и медиалния префронтален кортекс при формирането и изчезването на паметта

за повече информация:ali.ma@wecistanche.com

Моля, щракнете тук обратно към част 2

КликнетеCistanches и Cistanche за подобряване на паметта

Благодарности

Специални благодарности на д-р Norbert J. Fortin за помощта му при статистическия анализ.

Източници на финансиране: Тази работа беше подкрепена от субсидии на Националния институт по злоупотребата с наркотици и Националния институт за психично здраве (DA025922, DA036984, MH101491) за MAW и NIDA и субсидии на Националния институт по стареене (NIA) (F32 DA043998 и T32 AG{{ 6}}) към YA.

Препратки

Alenghat T, Meyers K, Mullican SE, Leitner K, Adenidži-Adele A, Avila J, Bucan M, Ahima RS, Kaestner KH, Lazar MA. Ядреният рецепторен корепресор и хистон деацетилаза 3 управляват циркадната метаболитна физиология. Природата. 2008 г.; 456:997-1000. [PubMed: 19037247]

Balderas I, Rodriguez-Ortiz CJ, Salgado-Tonda P, Chavez-Hurtado J, McGaugh JL, Bermudez-Rattoni F. Консолидацията на разпознаването на обекти и контекстпаметвключват различни региони на темпоралния лоб. Научете Mem. 2008 г.; 15: 618-624. [PubMed: 18723431]

Baltan S, Bachleda A, Morrison RS, Murphy SP. Експресия на хистонови деацетилази в клетъчни отделения на мозъка на мишката и ефектите на исхемията. Transl Stroke Res. 2011 г.; 2: 411-423. [PubMed: 21966324]

Barrett RM, Malvaez M, Kramar E, Matheos DP, Arrizon A, Cabrera SM, Lynch G, Greene RW, Wood MA. Хипокампалният фокален нокаут на CBP засяга специфични хистонови модификации, дългосрочно потенциране и дългосрочнопамет. Невропсихофармакология. 2011 г.; 36: 1545-1556. [PubMed: 21508930]

Bowers ME, Xia B, Carreiro S, Ressler KJ. HDAC инхибиторът от клас I RGFP963 подобрява консолидацията на изчезване на страха. Научете Mem. 2015 г.; 22:225-231. [PubMed: 25776040]

Broide RS, Redwine JM, Aftahi N, Young W, Bloom FE, Winrow CJ. Разпределение на хистонови деацетилази 1–11 в мозъка на плъх. J Mol Neurosci. 2007 г.; 31:47–58. [PubMed: 17416969]

Burger C, Gorbatyuk OS, Velardo MJ, Peden CS, Williams P, Zolotukhin S, Reier PJ, Mandel RJ, Muzyczka N. Рекомбинантни AAV вирусни вектори, псевдотипирани с вирусни капсиди от серотипове 1, 2 и 5, показват диференциална ефективност и клетъчен тропизъм след доставка до различни области на централната нервна система. Mol Ther. 2004 г.; 10: 302-317. [PubMed: 15294177]

Dere E, Huston JP, De Souza Silva MA. Фармакологията, невроанатомията и неврогенетиката на разпознаването на един опитен обект при гризачи. Neurosci Biobehav Rev. 2007; 31: 673-704. [PubMed: 17368764]

Ennaceur A. Еднократно разпознаване на обект при плъхове и мишки: методологични и теоретични въпроси. Behav Brain Res. 2010 г.; 215: 244-254. [PubMed: 20060020]

Fanselow MS, Dong HW. Дали дорзалния и вентралния хипокампус са функционално различни структури? неврон. 2010 г.; 65:7–19. [PubMed: 20152109]

Fischle W, Dequiedt F, Hendzel MJ, Guenther MG, Lazar MA, Voelter W, Verdin E. Ензимната активност, свързана с клас II HDACs, зависи от мултипротеинов комплекс, съдържащ HDAC3 и SMRT/N-CoR. Mol Cell. 2002 г.; 9:45–57. [PubMed: 11804585]

Fuchs RA, Evans KA, Ledford CC, Parker MP, Case JM, Mehta RH, Вижте RE. Ролята на дорзомедиалния префронтален кортекс, базолатералната амигдала и дорзалния хипокампус в контекстното възстановяване на търсенето на кокаин при плъхове. Невропсихофармакология. 2005 г.; 30: 296-309. [PubMed: 15483559]

Fuchs RA, Eaddy JL, Su ZI, Bell GH. Взаимодействията на базолатералната амигдала с дорзалния хипокампус и дорзомедиалния префронтален кортекс регулират индуцираното от контекста на лекарството възстановяване на търсенето на кокаин при плъхове. Eur J Neurosci. 2007 г.; 26:487-498. [PubMed: 17650119]

Gräff J, Tsai LH. Хистоново ацетилиране: молекулярна мнемоника върху хроматина. Nat Rev Neurosci. 2013; 14:97-111. [PubMed: 23324667]

Гюнтер МГ, Барак О, Лазар М.А. Корепресорите SMRT и N-CoR са активиращи кофактори за хистон деацетилаза 3. Mol Cell Biol. 2001 г.; 21: 6091-6101. [PubMed: 11509652]

Guenther MG, Yu J, Kao GD, Yen TJ, Lazar MA. Сглобяването на репресивния комплекс SMRT-хистон деацетилаза 3 изисква TCP-1 пръстенния комплекс. Genes Dev. 2002 г.; 16:3130-3135. [PubMed: 12502735]

Haberland M, Montgomery RL, Olson EN. Многото роли на хистон деацетилазите в развитието и физиологията: последици за заболяването и терапията. Nat Rev Genet. 2009 г.; 10:32–42. [PubMed: 19065135]

Hartig J, Stefanko DP, Multani ML, Figueroa DX, McQuown SC, Wood MA. Инхибирането на HDAC модулира зависимото от хипокампус дългосрочнопаметза местоположение на обект по зависим от CBP начин. Научете Mem. 2011 г.; 18:71–79. [PubMed: 21224411]

Haettig J, Sun Y, Wood MA, Xu X. Специфичното за клетъчния тип инактивиране на хипокампалния CA1 нарушава разпознаването на обект в зависимост от местоположението в мишката. Научете Mem. 2013; 20: 139-146. [PubMed: 23418393]

Isaac WL, Nonneman AJ, Neisewander J, Landers T, Bardo MT. Лезиите на префронталния кортекс по различен начин нарушават подсиленото от кокаин условно предпочитание към място, но не и условно отвращение към вкуса. Behav Neurosci. 1989 г.; 103: 345-355. [PubMed: 2706078]

Jenuwein T, Allis CD. Превеждане на хистоновия код. Наука. 2001 г.; 293:1074-1080. [PubMed: 11498575]

Kalivas PW, McFarland K. Мозъчни вериги и възстановяване на поведението, търсещо кокаин. Психофармакология (Берл). 2003 г.; 168:44-56. [PubMed: 12652346]

Kojima N, Wang J, Mansuy IM, Grant SG, Mayford M, Kandel ER. Спасяване на увреждането на дългосрочното потенциране при fyn-дефицитни мишки чрез въвеждане на Fyn трансген. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94:4761-4765. [PubMed: 9114065]

Kouzarides T. Хроматинови модификации и тяхната функция. клетка. 2007 г.; 128: 693-705. [PubMed: 17320507]

Краснова IN, Li SM, Wood WH, McCoy MT, Prabhu VV, Becker KG, Katz JL, Cadet JL. Транскрипционни отговори на подсилващите ефекти на кокаина в хипокампуса и кората на плъхове. Гени Мозъчно поведение. 2008 г.; 7: 193-202. [PubMed: 17640290]

Kwapis JL, Alaghband Y, López AJ, White AO, Campbell RR, Dang RT, Rhee D, Tran AV, Carl AE, Matheos DP, Wood MA. Контекстът и слуховият страх се регулират различно от активността на HDAC3 в латералните и базалните субнуклеуси на амигдалата. Невропсихофармакология. 2017 г.; 42: 1284-1294. [PubMed: 27924874]

Lahm A, Paolini C, Pallaoro M, Nardi MC, Jones P, Neddermann P, Sambucini S, Bottomley MJ, Lo Surdo P, Carfi A, Koch U, De Francesco R, Steinkuhler C, Gallinari P. Разкриване на скритата каталитична активност на гръбначни клас IIa хистонови деацетилази. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104: 17335-17340. [PubMed: 17956988]

LaLumiere RT, Niehoff KE, Kalivas PW. Инфралимбичният кортекс регулира консолидирането на изчезване след самоприлагане на кокаин. Научете Mem. 2010 г.; 17: 168-175. [PubMed: 20332188]

Лоран V, Уестбрук RF. Инактивирането на инфралимбичния, но не и на прелимбичния кортекс уврежда консолидирането и възстановяването на изчезването на страха. Научете Mem. 2009 г.; 16: 520-529. [PubMed: 19706835]

Lebrón K, Milad MR, Quirk GJ. Забавено припомняне на изчезването на страха при плъхове с лезии на вентралния медиален префронтален кортекс. Научете Mem. 2004 г.; 11: 544-548. [PubMed: 15466306]

Levenson JM, Sweatt JD. Епигенетични механизми: обща тема при гръбначните и безгръбначнитепаметобразуване. Cell Mol Life Sci. 2006 г.; 63:1009-1016. [PubMed: 16596331]

López AJ, Kramar E, Matheos DP, White AO, Kwapis J, Vogel-Ciernia A, Sakata K, Espinoza M, Wood MA. Специфични за промотора ефекти на DREADD модулация върху хипокампалната синаптична пластичност иФормиране на паметта. J Neurosci. 2016 г.; 36:3588-3599. [PubMed: 27013687]

Malvaez M, Sanchis-Segura C, Vo D, Lattal KM, Wood MA. Модулирането на модификацията на хроматина улеснява изчезването на предизвиканото от кокаин условно предпочитание на място. Биологична психиатрия. 2010 г.; 67:36-43. [PubMed: 19765687]

Malvaez M, Mhillaj E, Matheos DP, Palmery M, Wood MA. CBP в nucleus accumbens регулира индуцираното от кокаин хистоново ацетилиране и е от решаващо значение за поведението, свързано с кокаин. J Neurosci. 2011 г.; 31: 16941-16948. [PubMed: 22114264]

Narvaez M, McQuown SC, Rogge GA, Astarabadi M, Jacques V, Carreiro S, Rusche JR, Wood MA. Селективният инхибитор на HDAC3- засилва изчезването на поведението на търсене на кокаин по устойчив начин. Proc Natl Acad Sci US A. 2013; 110: 2647-2652. [PubMed: 23297220]

Марен С. Невробиология на павловския страх от състояние. Annu Rev Neurosci. 2001 г.; 24: 897-931. [PubMed: 11520922]

Marie-Claire C, Laurendeau I, Canestrelli C, Courtin C, Vidaud M, Roques B, Noble F. Fos, но не и Cart (кокаин и амфетамин-регулиран транскрипт) се свръхекспресира от няколко лекарства за злоупотреба: сравнително проучване, използващо реално време количествена полимеразна верижна реакция в мозъка на плъх. Neurosci Lett. 2003 г.; 345:77-80. [PubMed: 12821175]

McQuown SC, Wood MA. HDAC3 и хипотезата за молекулярната спирачна накладка. Neurobiol Learn Mem. 2011 г.; 96:27-34. [PubMed: 21521655]

McQuown SC, Barrett RM, Matheos DP, Post RJ, Rogge GA, Alenghat T, Mullican SE, Jones S, Rusche JR, Lazar MA, Wood MA. HDAC3 е критичен отрицателен регулатор наформиране на дългосрочна памет. J Neurosci. 2011 г.; 31:764-774. [PubMed: 21228185]

Meyers RA, Zavala AR, Neisewander JL. Дорзалните, но не вентралните хипокампални лезии нарушават кондиционирането на кокаиновото място. Невроотчет. 2003 г.; 14: 2127-2131. [PubMed: 14600510]

Mullican SE, Gaddis CA, Alenghat T, Nair MG, Giacomin PR, Everett LJ, Feng D, Steger DJ, Schug J, Artis D, Lazar MA. Хистон деацетилаза 3 е епигеномна спирачка в алтернативното активиране на макрофагите. Genes Dev. 2011 г.; 25:2480-2488. [PubMed: 22156208]

Mumby DG. Перспективи върху паметта за разпознаване на обекти след увреждане на хипокампа: уроци от проучвания при плъхове. Behav Brain Res. 2001 г.; 127: 159-181. [PubMed: 11718890]

Parkinson JA, Olmstead MC, Burns LH, Robbins TW, Everitt BJ. Дисоциация в ефектите на лезии на сърцевината и черупката на nucleus accumbens върху поведението на апетитния павловски подход и потенцирането на условното подсилване и локомоторната активност от D-амфетамин. J Neurosci. 1999 г.; 19:2401-2411. [PubMed: 10066290]

Peixoto L, Abel T. Ролята на ацетилирането на хистони при формирането на паметта и когнитивните увреждания. Невропсихофармакология. 2013; 38:62-76. [PubMed: 22669172]

Penney J, Tsai LH. Хистонова деацетилаза в паметта и познанието. Научен сигнал. 2014 г.; 7: re12. [PubMed: 25492968]

Peters J, LaLumiere RT, Kalivas PW. Инфралимбичният префронтален кортекс е отговорен за инхибирането на търсенето на кокаин при угаснали плъхове. J Neurosci. 2008 г.; 28: 6046-6053. [PubMed: 18524910]

Peters J, Kalivas PW, Quirk GJ. Веригите за изчезване на страх и пристрастяване се припокриват в префронталния кортекс. Научете Mem. 2009 г.; 16: 279-288. [PubMed: 19380710]

Pfaffl MW. Нов математически модел за относително количествено определяне в RT-PCR в реално време. Nucleic Acids Res. 2001 г.; 29:e45. [PubMed: 11328886]

Pfaffl MW, Георгиева TM, Георгиев IP, Ontsouka E, Hageleit M, Blum JW. RT-PCR количествено определяне в реално време на инсулиноподобен растежен фактор (IGF)-1, IGF-1 рецептор, IGF-2, IGF-2 рецептор, инсулинов рецептор, растежен хормон рецептор, IGF-свързващи протеини 1, 2 и 3 при говеда. Domest Anim Endocrinol. 2002 г.; 22:91–102. [PubMed: 11900967]

Quirk GJ, Russo GK, Barron JL, Lebron K. Ролята на вентромедиалния префронтален кортекс при възстановяването на изчезналия страх. J Neurosci. 2000 г.; 20:6225-6231. [PubMed: 10934272]

Quirk GJ, Garcia R, Gonzalez-Lima F. Префронтални механизми при изчезване на условен страх. Биологична психиатрия. 2006 г.; 60:337-343. [PubMed: 16712801]

Рескорла РА. Сравнение на скоростите на асоциативна промяна по време на придобиване и изчезване. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2002 г.; 28: 406-415. [PubMed: 12395498]

Rogge GA, Singh H, Dang R, Wood MA. HDAC3 е отрицателен регулатор на формирането на паметта, свързана с кокаиновия контекст. J Neurosci. 2013; 33:6623-6632. [PubMed: 23575859]

Roozendaal B, Hernandez A, Cabrera SM, Hagewoud R, Malvaez M, Stefanko DP, Haettig J, Wood MA. Свързаната с мембраната глюкокортикоидна активност е необходима за модулирането на дългосрочната памет чрез модификация на хроматина. J Neurosci. 2010 г.; 30: 5037-5046. [PubMed: 20371824]

Rumbaugh G, Sillivan SE, Ozkan ED, Rojas CS, Hubbs CR, Aceti M, Kilgore M, Kudugunti S, Puthanveettil SV, Sweatt JD, Rusche J, Miller CA. Фармакологичната селективност в рамките на хистонови деацетилази от клас I предсказва ефекти върху синаптичната функция и спасяването на паметта. Невропсихофармакология. 2015 г.; 40:2307-2316. [PubMed: 25837283]

Sando R 3rd, Gounko N, Pieraut S, Liao L, Yates J 3rd, Maximov A. HDAC4 управлява програма за транскрипция, която е от съществено значение за синаптичната пластичност и памет. клетка. 2012 г.; 151: 821-834. [PubMed: 23141539]

Sierra-Mercado D Jr, Corcoran KA, Lebron-Milad K, Quirk GJ. Инактивирането на вентромедиалния префронтален кортекс намалява изразяването на условен страх и влошава последващото припомняне на изчезването. Eur J Neurosci. 2006 г.; 24:1751-1758. [PubMed: 17004939]

Stafford JM, Raybuck JD, Ryabinin AE, Lattal KM. Увеличаването на ацетилирането на хистони в хипокампусно-инфралимбичната мрежа засилва изчезването на страха. Биологична психиатрия. 2012 г.; 72:25-33. [PubMed: 22290116]

Stefanko DP, Barrett RM, Ly AR, Reolon GK, Wood MA. Модулиране на дългосрочната памет за разпознаване на обекти чрез HDAC инхибиране. Proc Natl Acad Sci US A. 2009; 106:9447-9452. [PubMed: 19470462]

Sun Z, Feng D, Fang B, Mullican SE, You SH, Lim HW, Everett LJ, Nabel CS, Li Y, Selvakumaran V, Won KJ, Lazar MA. Независимата от деацетилаза функция на HDAC3 в транскрипцията и метаболизма изисква корепресор на ядрения рецептор. Mol Cell. 2013; 52: 769-782. [PubMed: 24268577]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Дискретни лезии с хинолинова киселина на прелимбичния медиален префронтален кортекс на плъхове засягат кокаин- и MK-801-, но не и индуцираното от морфин и амфетамин възнаграждение и психомоторна активация, измерени с парадигмата за кондициониране на предпочитанието за място. Behav Brain Res. 1998 г.; 97: 115-127. [PubMed: 9867237]

Tzschentke TM, Schmidt WJ. Функционална хетерогенност на медиалния префронтален кортекс на плъхове: ефекти на дискретни специфични за подзона лезии върху индуцирано от лекарството условно предпочитание на място и поведенческа сенсибилизация. Eur J Neurosci. 1999 г.; 11: 4099-4109. [PubMed: 10583498]

Vogel-Ciernia A, Matheos DP, Barrett RM, Kramar EA, Azzawi S, Chen Y, Magnan CN, Zeller M, Sylvain A, Haettig J, Jia Y, Tran A, Dang R, Post RJ, Chabrier M, Babayan AH, Wu JI, Crabtree GR, Baldi P, Baram TZ, Lynch G, Wood MA. Неврон-специфичната хроматинова регулаторна субединица BAF53b е необходима за синаптичната пластичност и памет. Nat Neurosci. 2013; 16: 552-561. [PubMed: 23525042]

Vogel-Ciernia A, Wood MA. Неврон-специфично ремоделиране на хроматин: липсваща връзка в епигенетичните механизми, лежащи в основата на синаптичната пластичност, паметта и нарушенията на интелектуалното увреждане. Неврофармакология. 2014 г.; 80:18-27. [PubMed: 24140580]

White AO, Kramar EA, López AJ, Kwapis JL, Doan J, Saldana D, Davatolhagh MF, Alaghband Y, Blurton-Jones M, Matheos DP, Wood MA. BDNF спасява зависимата от BAF53b синаптична пластичност и свързаната с кокаин памет в nucleus accumbens. Nat Commun. 2016 г.; 7:11725. [PubMed: 27226355]

Winters BD, Saksida LM, Bussey TJ. Памет за разпознаване на обекти: невробиологични механизми на кодиране, консолидиране и извличане. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32:1055-1070. [PubMed: 18499253]

Zhang J, Kalkum M, Chait BT, Roeder RG. N-CoR-HDAC3 ядрен рецепторен корепресорен комплекс инхибира JNK пътя през интегралната субединица GPS2. Mol Cell. 2002 г.; 9: 611-623. [PubMed: 11931768]

Акценти

► Блокирането на активността на HDAC3 деацетилаза в дорзалния хипокампус подобрява дългосрочната памет за местоположението на обекта, но няма ефект върху формирането на памет, свързана с кокаин. ► Нарушаването на HDAC3 деацетилазния домейн в прелимбичния кортекс няма ефект върху формирането на памет, свързана с кокаин. ► Блокирането на активността на HDAC3 деацетилаза в инфралимбичния кортекс няма ефект върху екстинкцията. ► Прекъсването на HDAC3 деацетилазната активност в дорзалния хипокампус води до улеснено изчезване.

Фигура 1.

Доминантният отрицателен точков мутантен вирус (HDAC3(Y298H)-v5 експресира ефективно в дорзалния хипокампус. (A) V5 епитоп е добавен към точковия мутантен вирус. (B) Представително имунофлуоресцентно изображение, показващо експресия на V5 епитопния маркер (зелен) в дорзален хипокампус (DH) след инфузия на AAV-HDAC3(Y298H)-v5. Не се наблюдава оцветяване с V5 с контролния вирус AAV-EV. Клетките бяха насрещно оцветени с DAPI (синьо). (C) V5 mRNA беше значително повишена в DH на мишки, инфузирани с AAV-HDAC3(Y298H)-v5, AAV-EV n {{20}}, HDAC3(Y298H)-v5 n=4. (D) HDAC3 също беше значително повишен в DH на мишки, инфузирани с AAV-HDAC(Y298H)-v5 в сравнение с AAV-EV контроли, AV-EV n=6, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. *p < 0,05.

Фигура 2.

Блокиране на HDAC3 дейност в DH подобрена памет за местоположение на обект (OLM), но не и за разпознаване на обект (ORM). (A) Мишките получиха подпрагово обучение (3 минути) в среда с два идентични обекта и получиха тест за задържане 24 часа по-късно, при който един обект се премести на ново място. Схемата описва методите за B и C. (B) Мишки, на които е даден AAV-HDAC3(Y298H)-v5, показват значително предпочитание към местоположението на новия обект 24 часа след обучението в сравнение с EV контролите, AAV-EV n {{10 }}, HDAC3(Y298H)-v5 n=6. (C) Групите не се различават по общото време за изследване на двата обекта. (D) Мишките получиха подпрагово обучение (3 минути) в среда с два идентични обекта и получиха тест за задържане 24 часа по-късно, при който един обект беше заменен с нов (ORM), AAV-EV n=9, HDAC3(Y298H)-v5 n=7. Схемата описва методите за E и F. (E) Нито AAV-EV контрола, нито AAV-HDAC3(Y298H)-v5 мишки показват значително предпочитание към новия обект. (F) Групите не се различават по общото време за изследване на двата обекта. *p <>

Фигура 3.

Блокирането на активността на HDAC3 в дорзалния хипокампус няма ефект върху образуването на индуцирана от кокаин CPP памет. (A) Схема на процедурата кокаин-CPP. (B) Експресия на кокаин-CPP, посочена чрез среден резултат на CPP (времето, прекарано в двойка кокаин (CS плюс) минус двойка физиологичен разтвор (CS−) ± sem). При 5 mg/kg кокаинова кондиционираща доза, AAV-HDAC3(Y298H)-v5 мишки показват сходен CPP резултат с EV контролите по време на пост-теста, AAV-EV n=15, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}.

Фигура 4.

Фокалната хомозиготна генна делеция на Hdac3 в дорзалния хипокампус няма ефект върху образуването на индуцирана от кокаин CPP памет. (A) Схема на процедурата кокаин-CPP. (B) Експресия на кокаин-CPP, посочена чрез среден резултат на CPP (времето, прекарано в двойка кокаин (CS плюс) минус двойка физиологичен разтвор (CS−) ± sem). При 5 mg/kg кокаинова кондиционираща доза, Hdac3flox/flox мишки показват сходен CPP резултат с Hdac3 плюс/плюс контроли по време на пост-теста. (C) Представително имунофлуоресцентно изображение, показващо експресия на HDAC3 (зелено) в дорзалния хипокампус след инфузия на AAV2.1 Cre, влят в мишки Hdac3 plus / plus и Hdac3flox/flox. Клетките бяха насрещно оцветени с DAPI (синьо). (D) Количественото определяне на имунооцветяването потвърди, че HDAC3 е значително намален при Hdac3flox/flox мишки в сравнение с Hdac3 плюс / плюс контроли, Hdac3 плюс / плюс n=12, Hdac3flox/flox n=11. *p <>

Фигура 5.

Блокирането на активността на HDAC3 в прелимбичния кортекс (PrL) няма ефект върху образуването на индуцирана от кокаин CPP памет. (A) Схема на процедурата кокаин-CPP. (B) Експресия на кокаин-CPP, посочена чрез среден резултат на CPP (времето, прекарано в двойка кокаин (CS плюс) минус двойка физиологичен разтвор (CS−) ± sem). При 5 mg/kg кокаинова кондиционираща доза, AAV-HDAC3(Y298H)-v5 мишки показват сходен CPP резултат с EV контролите по време на пост-теста, AAV-EV n=12, HDAC3(Y298H)-v5 n {{ 19}}. (C) Представително имунофлуоресцентно изображение, показващо експресия на епитопен маркер V5 (зелен) след инфузия на AAV-HDAC3(Y298H)-v5, насочен към PrL. Не се наблюдава V5 оцветяване с AAV-EV контролния вирус. Клетките бяха насрещно оцветени с DAPI (синьо), а невроните бяха насрещно оцветени с NeuroTrace (червено). Експресията на V5 беше до голяма степен ограничена до прелимбичната област на медиалния префронтален кортекс. (D) Насочена вирусна инфузия в PrL. Защрихованите области на изображенията на атласа на мишката илюстрират представителната степен на вирусна инфузия.

Фигура 6.

Блокирането на активността на HDAC3 в инфралимбичния кортекс (IL) няма ефект върху изчезването на индуцираната от кокаин CPP памет. (A) Схема на процедурата кокаин-CPP. (B) Експресия на кокаин-CPP, посочена чрез среден резултат на CPP (времето, прекарано в двойка кокаин (CS плюс) минус двойка физиологичен разтвор (CS−) ± sem). Първоначално животните са били обучени на 20 mg/kg кокаин. Впоследствие животните получиха интра-IL AAV-EV или AAV-HDAC3(Y298H)-v5 вирусни инфузии и беше изследвана паметта за изчезване. AAV-HDAC3(Y298H)-v5 мишки показват сходен CPP резултат с EV контролите по време на пост-тестове 2–5, AAV-EV n=17, HDAC3(Y298H)- v5 n=16. (C) Представително имунофлуоресцентно изображение, показващо експресия на епитопен маркер V5 (зелено) след инфузия на AAV-HDAC3(Y298H)-v5, насочена към IL. Не се наблюдава V5 оцветяване с AAV-EV контролния вирус. Клетките бяха насрещно оцветени с DAPI (синьо), а невроните бяха насрещно оцветени с NeuroTrace (червено). Експресията на V5 беше до голяма степен ограничена до инфралимбичната област на медиалния префронтален кортекс. (D) Насочена вирусна инфузия в IL. Защрихованите области на изображенията на атласа на мишката илюстрират представителната степен на вирусна инфузия.