Част 4 Изследванията показват, че автофагията играе важна роля в регулирането на клетъчното отлагане на LD

Моля свържете сеoscar.xiao@wecistanche.comза повече информация

2.14. Анализ на лактат дехидрогеназа (LDH).

Съгласно инструкциите на производителя, клетките се поставят в 96-ямкова плака при 5000 клетки/ямка и се събира културална среда за измерване на нивата на LDH с тестов комплект (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute). След това абсорбцията на пробите беше открита от Multiskan Spectrum (Thermo Fisher Scientific) при 450 nm.

2.15. BODIPY493/503, BODIPY 581/591 C11 и MitoTracker наситено червено оцветяване

Живите клетки се промиват с PBS и се инкубират с 2 ug/ml BOD-IPY 493/503 (InvitrogenTM, Cat D3922) или BODIPY 581/591 C11 (BD-C11)（2.0 μM, InvitrogenTM, Cat D3861）в PBS за 15 минути при 37 градуса. За оцветяване с MitoTracker Deep Red живите клетки се инкубират с 0,5 ug/ml MitoTracker Deep Red (InvitrogenTM, Cat M22426) в PBS за 30 минути при 37 градуса. След това клетките се промиват два пъти в PBS и се фиксират в 3,5 процента PFA за 10 минути, последвано от промиване и обратно оцветяване с Hoechst 3342 (Sigma, Cat B2261) за 10 минути, преди да бъдат покрити върху стъклени слайдове за изобразяване.колко цистанче да приематеИзображенията бяха наблюдавани и снимките бяха заснети чрез флуоресцентна микроскопия (Olympus, Токио, Япония).

Моля, щракнете тук, за да научите повече

2.16. Оцветяване по Hoechst и PI

Клетките се оцветяват с Hoechst 33,342 (1 ul, разреден в 500 ul PBS, Sigma, Cat B2261) и (или) PI (0,1 ul, разреден в 500 ul PBS, Solarbio, (cistanche sleep) CA1020) за 10 минути и след това фиксирани и наблюдавани чрез флуоресцентна микроскопия (Olympus, Токио, Япония).

2.17.Флоуцитометрия

Клетките се усвояват и се изплакват с D-hank, след което се оцветяват с Анексин V-FITC (5 ul, разредени в 500 ul PBS)/PI (0,1 ul, разредени в 500 ul PBS) комплект за апоптоза (CA1020, Solarbio, Пекин, Chian ) съгласно протокола на производителя. След това апоптотичните клетки бяха анализирани с помощта на поточна цитометрия (guava easyCyterM 8, Millipore, САЩ). Митохондриалните ROS и измерванията на потенциала на митохондриалната мембрана бяха извършени, както е публикувано 【12】. Клетките SH-SY5Y се оцветяват с MitoSOX (2,5 μM, Invitrogen, САЩ) или с JC1 (10 ug/ml, T-3168, Invitrogen, САЩ) при 37 градуса за 30 минути. След двукратно промиване с PBS, клетките се ресуспендират в студен PBS, съдържащ 1% FBS за поточен цитометричен анализ. Данните бяха анализирани със софтуер FCS Express (Guava Easy CyterM8, Millipore, Hayward, CA, USA).

2.18. Тестове за дишане на морско конче

Митохондриалната респираторна функция в живи SH-SY5Y клетки беше измерена с помощта на анализатора на екстрацелуларен поток Seahorse (XFe96) (Agi-lent, Санта Клара, САЩ) чрез промени в скоростта на потребление на кислород (OCR). Клетките SH-SY5Y, посяти при 3 × 10³ клетки/ямка, бяха оставени да се придържат към плаките с клетъчна култура Seahorse и да достигнат приблизително 80 процента сливане по време на експеримента. (чай от цистанче) На следващия ден клетките бяха предварително третирани с Ка и след това изложен на MPP* за още 24 часа. OCR се открива при базални условия, последвано от последователно добавяне на 1 μM олигомицин, 1 μM FCCP, както и 1 μM ротенон и антимицин А.

Cistanche може да подобри имунитета

2.19. Статистически анализ

Данните бяха представени като средно ± SEM. Значимостта на разликата се определя чрез t-тест на Student, двупосочен анализ на дисперсията или еднопосочен анализ на дисперсията (ANOVA), последван от post hoc теста на Tukey. Разликата се счита за значителна при P<>

3. Резултати

Резултат1. Ka възстановява двигателната дисфункция и повишава нивата на допамин в стриатума на MPTP/p PD модел мишки

За да се изследва невропротективният ефект на патогенезата на Kaon PD, 4-месечни мъжки C57BL/6 мишки бяха инжектирани с невротоксина MPTP, за да се установи моделът на MPTP/p PD и бяха третирани с Ka (фиг. la). След индукция на модела, тестът с въртяща се пръчка и тестът с полюс бяха използвани за оценка на двигателните и поведенческите характеристики на мишките в различните групи. Както е показано, времето за изпълнение на ротарод е значително намалено при мишки, третирани с MPTP, и този ефект е предотвратен от Ka (фиг. 1b). (ползи от cistanche tubulosa) Ka също така възстановява поведенческите дефицити, индуцирани от MPTP, както е показано от намаленията на времето за обръщане и общото време в полюсния тест (Фиг. 1c и d), без да повлиява телесното тегло на мишките (Фиг. le). Освен това, HPLC анализът показа, че нивото на допамин в стриатума е значително намалено при MPTP/p-провокирани мишки и това ниво е възстановено чрез третиране с Ka (фиг. 1f). (екстракт от цистанче тубулоза) Лечението с Ka също облекчава MPTP/ p-индуцирано намаляване на нивата на дихидрокси-фенил оцетна киселина (DOPAC, метаболит на допамин) в стриатума (Фигура 1g).супермен билки цистанчеТези резултати предполагат, че Ka възстановява двигателната дисфункция и повишава нивата на допамин в стриатума при MPTP-индуцирани PD мишки.

Резултат 2. Ka облекчава загубата на DA неврони в SNpc на MPTP/p PD модел мишки

След това, за по-нататъшна оценка на невропротективния ефект на Kaon MPTP/p-индуцирано DA невронно увреждане, ние изследвахме тирозин хидроксилазни (TH) неврони в миши SNpc чрез имунооцветяване. Както е показано на фиг. 2а и b, MPTP/p индуцира значително намаляване на броя на TH невроните, което беше облекчено от лечението с Ka. Освен това стереологичното преброяване на общите неврони в SNpc, както е определено от Nissl

Фиг. 1. Лечението с Ka облекчава двигателната дисфункция и повишава нивата на допамин в стриатума на MPTP/p PD моделни мишки.

(a) Схематична диаграма на експерименталния дизайн. (cistanche tubulosa reddit) (b) Времето на пръчката беше измерено за теста с въртяща се пръчка в три последователни дни. (cd) Времето, необходимо за обръщане (време на завъртане) и спускане по стълб (време на изкачване) беше записано за теста на стълб. ( д ) Телесното тегло на мишка се измерва в края на изследването. (fg) Допамин (DA) и дихидрокси-фенил оцетна киселина (DOPAC) в стриатума бяха анализирани чрез високоефективна течна хроматография. Данните са изразени като средно±SEM.n=9-10 за всяка група в (b,c,d);n=6-8 за всяка група в (f,g).ns, незначително,* П<><><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" mptp,1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine;="" ka,kaempferol.="" staining,="" verified="" that="" the="" loss="" of="" th+="" cells="" reflected="" cellular="" death="" but="" not="" the="" downregulation="" of="" th="" expression="" and="" showed="" that="" ka="" treatment="" restored="" the="" decrease="" in="" the="" number="" of="" nissl-positive="" neurons="" in="" the="" snpc="" of="" mptp-treated="" mice="" from="" 43.3%="" to="" 25.4%="" (fig.="" 2c="" and="" d).in="" addition,="">ползи от биофлавоноидитеKa значително подобрява MPTP-индуцираната редукция в експресията на TH и DAT протеин, както е измерено чрез Western blotting (Фигура 2e-g). Това доказателство потвърждава невропротективния ефект на Kaon в миши модел на PD.

Резултат 3. Ka намалява натрупването на LD вакуоли и оксидативния стрес в SNpc на MPTP/p-третирани мишки

Все повече доказателства показват участието на LDs в NDDs [10], последователно нашата предишна работа идентифицира повишени LDs в SNpc на MPTP-индуцирани PD мишки [12]. LDs могат лесно да бъдат идентифицирани и да показват кръгли структури с ниска плътност с хомогенни аморфно съдържание [28]. Обикновено LDs могат да бъдат разградени чрез автофагия, за да се избегне натрупването [29].купи цистанчеЗа да се изследва дали Ka може да регулира LDs в PD, натрупването на LDs беше анализирано чрез трансмисионна електронна микроскопия (TEM) в SNpc на контролни, MPTP/p и MPTP/p ＋ Ka мишки. Както е показано в предишната ни работа [12], броят и размерът на LD бяха

повишени при MPTP/p мишки в сравнение с третираните с физиологичен разтвор контроли (Фиг. 3a и b) и са значително намалени при Ka-третирани мишки (Фиг. 3c-e). Освен това, при мишки, третирани с Ka, LDs се наблюдават по-често и наблизо, затворени в или разградени от автолизозоми, които се определят като електронно-плътни липофусцинови гранули. Допълнително хистологично оцветяване на TH неврони с BODIPY, багрило, което специфично маркира неутрални липиди и обикновено се използва за откриване на LDs [30], показа, че както броят, така и размерът на BODIPY плюс LDs в SNpc са по-високи при PD мишки, отколкото при контролите, и бяха значително намалени от третиране с Ka (фиг. 3f-h).

Ако LDs не могат да бъдат разградени своевременно, натрупаните LDs могат да претърпят пероксидация и да допринесат за митохондриален ROS-медииран стрес [4],разстояниекоето усилва невротоксичността и прогресията на заболяването. Следователно, ние допълнително изследвахме профилите на експресия на гени, свързани със защита срещу свободна FA токсичност (Gpx8), неутрализиране на окислителни видове, супероксидни радикали (Sod3) и водороден пероксид (Cat), и FA метаболизъм (Acsbg1 и Dbi), както се съобщава [31] , всички от които бяха поразително намалени в SNpc на MPTP-третирани мишки в сравнение с контролите, и тези ефекти бяха подобрени при Ka-третирани PD мишки (Фиг. 3i). По подобен начин MPTP/p също повишава нивата на експресия на иРНК

Фиг.2. Ka подобрява загубата на DA неврони в SNpc на MPTP/p PD модел мишки.

(ab) Микроснимки на тирозин хидроксилаза (TH)-позитивни неврони (a) и стереологичен брой на TH-позитивни неврони в substantia nigra pars compacta (SNpc) (b). Скалите са както са посочени. (cd) Микроснимки на положителни за крезил виолетови клетки (c) и стереологични преброявания на положителни за крезил виолетови клетки в SNpc (d). Мащабна лента, 120 um. (напр.) Western blot анализ на експресията на TH и DAT протеин в SNpc (e) и количествен анализ (f,g). Количествено определените данни се нормализират към контролната група с физиологичен разтвор. Данните са изразени като средна стойност ± SEM.*P<><0.01, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.n="4-5" for="" each="" group.="" ve,="" vehicle,="" ka,="" kaempferol;="" mptp,1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydroloyridine..="" (for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="" article.="" of="" nadph="" oxidase="" subunits="" such="" as="" nox1,="" nox2,="" and="" nox4="" in="" the="" snpc="" of="" mptp/p="" mice,="" which="" were="" further="" blunted="" by="" ka="" treatment="" (fig.="" 3j).="" taken="" together,="" these="" data="" suggest="" that="" ka="" alleviates="" mptp/p-induced="" ld="" accumulation,="" peroxidation,="" and="" ros-mediated="">

Резултат 4. Ka защитава SH-SY5Y клетки срещу индуцирана от MPP плюс апоптоза

MPP, активният метаболит на MPTP, инхибира ензимите на митохондриалния комплекс и причинява клетъчна смърт, която е пряко свързана с PD [32]. След това проучихме дали Ka може да предотврати индуцирана от MPPt невронална апоптоза in vitro. Както е показано на Фиг. 4a и b, MPPt (40 uM, 24h) индуцира освобождаването на LDH от SH-SY5Y клетки, а Ka (30 и 60 uM) значително отслабва освобождаването на LDH, без да повлиява клетъчното оцеляване (Фиг. 4a). Тъй като Ka индуцира значителен защитен ефект при концентрация от 30 μM （фиг. 4b), използвахме тази концентрация в следващите експерименти. Резултатите от оцветяването на Hoechst/PI също показват, че Ka значително намалява процента на клетките с MPPt-индуцирана кондензация на хроматин (Фиг. 4c и d) и клетъчна апоптоза, както се вижда от повишения интензитет на флуоресценция на Hoechst (Фиг. 4c) и процента на Клетки, оцветени с Hoechst/PI (Hoechst плюс /PI') (фиг. 4е). Също така, както е установено чрез поточна цитометрия, MPP плюс индуцира клетъчна апоптоза, доказана от увеличения процент на оцветени с анексин V клетки (AV /PI и AV плюс /PI плюс) е защитена от Ka (фиг. 4f и g). В допълнение, Ka значително обърна промените, предизвикани от MPP, в свързаната с апоптоза протеинова експресия, както се вижда от регулирането нагоре на Bcl-2, регулирането надолу на Bax (фиг. 4hi-j) и намаленото разцепване на каспаза-3 (Фиг. 4h, k). Тези данни предполагат, че Ka може да премахне вредните ефекти на MPPt върху клетъчното оцеляване.

Резултат 5. Ka потиска индуцираното от MPPt натрупване на LD и липидна пероксидация, които медиират митохондриалното увреждане в SH-SY5Y клетки

Последните проучвания показват, че неочакваното натрупване на LD може да доведе до повишен стрес, медииран от липидна пероксидация, и да ускори митохондриалната дисфункция, което насърчава невродегенерацията [10]. Предишната ни работа също показа, че повишените LDs в SNpc са свързани с патология на PD при мишки [12]. За да изследваме дали защитният ефект на Ka е свързан с натрупването на LD in vitro, първо извършихме LD-специфично оцветяване в SH-SY5Y клетки, използвайки BODIPY 493/503 и наблюдавахме повишено отлагане на LD (повишени нива на неутрални липиди)

Резултат 6. Ka насърчава аутофагията и намалява производството на mtROS в третирани с MPP плюс SH-SY5Y клетки

Обикновено LDs се доставят до лизозомите чрез автофагия и могат да бъдат разградени на FAs, за да се избегне пероксидация. Въпреки това, доказателствата показват, че аутофагията е нарушена, което играе решаваща роля при PD [2]. Когато автофагията включва порциониране на LDs, които да бъдат разградени в лизозомите (фиг. 6а), процесът се нарича конкретно липофагия [2]. За да проучим дали аутофагията е включена в невропротективния ефект на Ka, ние изследвахме нивата на протеини, свързани с аутофагия. Както е показано на Фиг. 6b-d, в култивирани SH-SY5Y клетки, нивото на асоциирана с микротубули белтъчна лека верига 3 (LC3)-II беше значително намалено, докато експресията на p62 беше значително повишена в клетките, третирани с MPP плюс, както е измерено чрез имуноблотинг, и този ефект е значително обърнат от Ka. Допълнително изследвахме промените в аутофагията чрез имунооцветяване за LC3. За да се позволи на автофагозомите да се натрупват в клетките, беше добавен бафиломицин, за да се предотврати сливането на автофагозомите с лизозомите. Както е показано, повишен брой LC3b puncta бяха открити в MPP*-третирани клетки, което показва нарушено автофагично разграждане и този ефект също беше обърнат от Ka (фиг. 6e и f). Тези резултати показват, че LD в клетките SH-SY5Y се мобилизират чрез аутофагия за евентуално отстраняване и че Ka може да насърчи аутофагията за намаляване на натрупването на окислени липиди. Повишената липидна пероксидация може да влоши митохондриалното увреждане чрез увеличаване на митохондриалния оксидативен стрес [4]. В допълнение, лечението с Ka значително намалява силното генериране на mtROS, както е определено чрез оцветяване с MitoSOX (фиг. 6g и h), и намалява броя на дисфункционалните митохондрии, както е определено от специфичните за митохондриите етикети за разграничаване на дишането (MitoTracker наситено червено) и общото ( MitoTracker зелено) митохондрии (фиг. 6i и j). В допълнение, за да имаме директен изглед на митохондриалните промени, ние допълнително открихме степента на потребление на кислород (OCR) от анализатора Seahorse XF. Както е показано на Фиг. 6k, дишането на митохондриите е намалено в третирани с MPPt клетки, докато лечението с Ka очевидно обръща това увреждане, причинено от MPP plus (Фиг. 6k).

Резултат7. Инхибирането на аутофагията обръща потискащия ефект от натрупването на Kaon LD, митохондриална дисфункция и DA невронално увреждане in vitro

За да се проучи дали аутофагията е един от основните механизми, чрез които Ka медиира неврозащитата на DA, беше използван инхибиторът на аутофагията 3-MA. Ние открихме, че инхибиторните ефекти на Ka върху MPP#-индуцирано увреждане, включително намалено натрупване на LD (фиг. 7a и b), намалено производство на mtROS (фиг. 7c и d) и облекчена митохондриална дисфункция (фиг. 7e и ​​f) в SH-SY5Y клетките бяха значително блокирани от 3-MA. Тъй като окислението на LD и митохондриалната дисфункция са тясно свързани с DA невронална смърт, ние след това изследвахме първично култивирани DA неврони. Ние третирахме култивирани мезенцефалон TH плюс неврони с Ka и/или MPPf и количествено определихме броя и дължината на TH плюс невронни процеси чрез имунооцветяване. Морфологичният анализ разкрива, че броят и дължината на невронните процеси са значително намалени от MPP плюс и защитени от Ka, и тази защита е допълнително обърната от 3-MA (Фиг.7g-i). Тези данни показват, че Ka облекчава увреждането на DA невроните чрез насърчаване на аутофагията.

Резултат 8. Заглушаването на Atg5 премахва Ka-медиираната превенция на загуба на неврони in vivo

За по-нататъшно потвърждаване, че Ka защитава срещу MPTP/p-индуцирана TH плюс загуба на неврони по начин, зависим от автофагията, ние заглушихме Atg5 чрез микроинжектиране на адено-асоцииран вирус (AAV), експресиращ предварително характеризирана shRNA срещу Atg5 в двустранния мезенцефалон (фиг. .8a), както е описано по-рано [25]. В предварителните експерименти, ние наблюдавахме, че Atg5 shRNA трансфекция в продължение на 2 седмици постига достатъчна GFP експресия в TH плюс неврони (Фиг. 8b) и инхибира ATG5 експресията в SNpc на инжектираните мишки (Фиг. 8в). Открихме, че нокдаунът на Atg5- обръща невропротективния ефект на Ka, както се вижда от повишената протеинова експресия на TH (фиг. 8d и e) и увеличения брой TH плюс неврони (фиг. 8f и g). Тези данни допълнително подкрепят приноса на аутофагията към защитния ефект на Ka при PD мишки. В заключение, ние потвърдихме, че Ka предпазва от MPTP/p-индуцирано увреждане чрез намаляване на LD окислението и митохондриалната дисфункция чрез насърчаване на аутофагията.

4. Обсъждане

Настоящото проучване показа, че естествената малка молекула Ka е ключов фактор, чрез който автофагичното сигнализиране може да инхибира липидната оксидативна токсичност. Нашите резултати показват, че пътят на аутофагията е ключова регулаторна верига, чрез която Ka облекчава пероксидацията на LD и последващото увреждане на митохондриите и се фокусира върху ролята на регулираната от аутофагия LD токсичност за облекчаване на увреждането на митохондриите, като същевременно предотвратява невродегенерация поради прекомерен оксидативен стрес (фиг. 9).

LD са вътреклетъчните места за съхранение на неутрални липиди [5] и са критични за липидния метаболизъм и енергийната хомеостаза, докато дисфункцията на LD е свързана с много заболявания [16]. Натрупаните доказателства предполагат, че ролите на LDs в биологията и патологията са значително по-широки, отколкото се смяташе досега. В ЦНС доказателствата показват, че повишените LDs в неврони и глия са замесени в невродегенеративна патология [10,36]. По-подробно, LDs са открити както в аксоните на Aplysia неврони, култивирани in vitro [37], така и в мозъчни участъци от Модели на болестта на Хънтингтън [38]. Освен това беше показано, че невроните са особено чувствителни към липидна токсичност и натрупването на LD, които не могат да бъдат отстранени своевременно, води до ускорена пероксидация на LD и може да доведе до невродегенерация [17].

Натрупването на липиди в хиперактивни неврони е токсично не само поради чувствителността на тези липиди към пероксидация. Освен това, съдържанието на излишните LDs може да навлезе в неокислителни метаболитни пътища, предизвиквайки прекомерно производство на керамид, който е токсичен за клетките [39]. Скорошни проучвания показват също, че в LD-дефектни клетки, FAs могат да бъдат превърнати в ацилкарнитини, които след това причиняват митохондриална дисфункция и производство на ROS [40]. Тези процеси вероятно ще имат специфични и дълбоки последици в хиперактивните неврони, тъй като дисфункционалните митохондрии компрометират капацитета за консумация на FA, а производството на mtROS допълнително причинява липидна пероксидация на мембраната.

По този начин хомеостазата на LD трябва да бъде добре контролирана в невроните, което е критично за избягване на токсичност и в крайна сметка поддържане на здравето на мозъка. В настоящото изследване ние открихме, че малката естествена молекула Ka инхибира невроналната LD токсичност, която се проявява като повишено натрупване на LD, повишена липидна пероксидация и повишена генна експресия, свързана с липидна токсичност в MPP#-инфектирани SH-SY5Y клетки. По-важното е, че също така показахме, че лечението с Ka намалява 45]. В настоящото проучване наблюдавахме дефектна аутофагия/липофагия в MPPt-увредени невронни клетки, включително намалени нива на LC3-II и повишена експресия на p62, и увеличен брой LC3B puncta, отложени в клетките. Дефектната липофагия в увредени SH-SY5Y клетки беше обърната чрез лечение с Ka. Като следствие, Ka намалява натрупването на окислени LDs, увредени митохондрии и генериране на mtROS в MPP#-третирани SH-SY5Y клетки. Важно е, че инхибирането на аутофагията от 3-MA премахва Ka-медиираното елиминиране на окислени LDs и увредени митохондрии и облекчаването на DA невронно увреждане in vitro. Освен това, инхибирането на аутофагията чрез нокдаун Atg5 in vivo обърна защитните ефекти на Kaon DA невронална дегенерация в MPTP-индуцирания PD миши модел. Взети заедно, тези открития показват, че Ka инхибира свързаното с LD токсичност митохондриално увреждане чрез насърчаване на аутофагия в експериментален PD модел.

Натрупващите се доказателства показват, че повишеното генериране на mtROS е основна характеристика на невроните с висока активност и е наблюдавано при много NDD, включително PD [46]. Докладите за това дали ROS е причина или следствие от образуването на LD са противоречиви [47,48]. Интересното е, че нашите in vitro резултати показват, че фармакологичното инхибиране на LD пероксидацията с о-токоферол предотвратява генерирането на mtROS и потенциалните аномалии на митохондриалната мембрана и облекчава митохондриалните редукции, както се вижда от оцветяването с Tomm20 в SH-SY5Y клетки, което подкрепя идеята, че LD пероксидацията играе роля причинно-следствена роля в индуцираната от MPP митохондриална дисфункция и генерирането на mtROS. Въпреки това е възможно повишените ROS първоначално да ускорят образуването на LD и впоследствие LDs да индуцират по-нататъшно генериране на ROS и да изострят вътреклетъчните и митохондриалните ROS нива.

В настоящото проучване ние показахме, че мишки с MPTP-индуциран PD имат високи нива на натрупване на LD, което е придружено от повишена загуба на DA неврони, ускорен ROS-медииран стрес и поведенчески дефицити. Лечението с Ka предотвратява токсичността на LD in vitro и подобрява загубата на DA неврони и поведенческите дефицити в модела на PD мишка и тези ефекти са зависими от автофагията. Следователно е разумно да се заключи, че Ka насърчава аутофагията и тази засилена аутофагия намалява натрупването на окислени LD, намалява производството на mtROS и облекчава митохондриалното увреждане в DA невроните, което допринася за инхибирането на LD токсичността, като по този начин отслабва PD патологията (фиг. 9).

Финансиране

Това изследване беше подкрепено от безвъзмездни средства от Националната фондация за природни науки на Китай (№ 81903587), проекта, финансиран от Фондацията за постдокторски науки в Китай (№ 2019M661807), Фондацията за природни науки на провинция Дзянсу (№ BK20190120) и Отворен проект на китайската първокласна дисциплина Materia Medica на Университета по китайска медицина в Нанкин (№ 2020YLXK006) и основен проект за иновации на лекарствата (№ 2018ZX09711001-003-007).

Тази статия е извлечена от Redox Biology 41 (2021) 101911