Първа част DsbA-L взаимодейства с VDAC1 при медиирана от митохондрии тубулна клетъчна апоптоза и допринася за прогресирането на остро бъбречно заболяване

Резюме

1. Предистория

ние демонстрирахме, че подобен на дисулфидна връзка A оксидоредуктаза протеин (DsbA-L) участва в прогресията на бъбречната фиброза. Въпреки това, точната функция на DsbA-L при остро бъбречно увреждане (AKI) и включените механизми все още не са изяснени.

2. Методи

Ние илюстрираме DsbA-L, взаимодействащ с VDAC1 чрез ко-IP (ко-имунопреципитация) in vitro и Viv и откриваме частите за взаимодействие от тях чрез експеримент с мутация. Горните констатации бяха проверени чрез тяхна съвместна локализация. В допълнение, ние конструирахме двата модела на PT-DsbA-L и VDAC1 KO мишки, за да проверим функцията на DsbAL и VDAC1 в модели на VAN, CL, P и I/R-индуциран AKI.

3. Констатации

PT-DsbA-L-KO мишките показват подобрение на I/R, VAN- и CLP-индуцираната прогресия на AKI чрез понижаване на VDAC1. И накрая, ние потвърдихме тези промени в сигналните молекули чрез изследване на HK-2 клетки и бъбречни биопсии, взети от пациенти с исхемичен или остър интерстициален нефрит (AIN), индуциран от AKI. Механично, DsbA-L взаимодейства с аминокиселини 9-13 и 22-27 на VDAC1 в митохондриите на BUMPT клетки, за да индуцира апоптоза на бъбречните клетки и митохондриално увреждане.

4. Тълкуване

Тази работа предполага, че DsbA-L, разположен в проксималните тубулни клетки, стимулира прогресията на AKI чрез директно регулиране на нивата на VDAC1. Заглавие: Ролята на DsbA-L при AKI.

5. Финансиране

Национална природонаучна фондация на Китай, безвъзмездна помощ от Ключов проект за наука и технологични иновации на провинция Хунан, Проект за международно сътрудничество и обмен на Министерството на науката и технологиите на провинция Хунан, проект на Бюрото за наука и технологии в Чанша, Фондация за природни науки на провинция Хунан, Фундаментален Изследователски фондове за централните университети на Централния южен университет, Фондация за иновации на провинция Хунан за следдипломна квалификация Китай Отдел за наука и технологии на провинция Хунан.

Ключови думи

DsbA-L; VDAC_I; Бакс; Cyt-c; АКИ

Щракнете тук, за да получите предимствата на Cistanche и да купите хапчета Cistanche

Въведение

Острото бъбречно увреждане (AKI), опустошително клинично усложнение с високи нива на заболеваемост и смъртност, засяга милиони пациенти по целия свят (1). AKI обикновено се предизвиква от сепсис, нефротоксични агенти и исхемично-реперфузионно увреждане (IRI) (2). Все още молекулярните механизми, лежащи в основата на AKI, все още не са напълно изяснени. Следователно, няма налични ефективни стратегии за лечение на AKI.

Увреждането на тубулните клетки е признато от десетилетия като важен двигател на AKI.3 С напредването на изследванията все по-голям брой изследователи установяват, че митохондриалното увреждане играе ключова роля в увреждането на тубулните клетки и че това първоначално увреждане е причинено от натрупването на ROS, производството на цитокини и клетъчна смърт (включително некроза и апоптоза); взети заедно, всички тези процеси допринасят за AKI.4-6 Въпреки че все повече изследвания се фокусират върху механизмите, лежащи в основата на митохондриалното увреждане при AKI,7- 12 точният механизъм, отговорен за митохондриалното увреждане, все още не е идентифициран.

Дисулфидна връзка Подобен на оксидоредуктаза протеин (DsbAL) за първи път е идентифициран като митохондриален протеин в чернодробни клетки на плъх.13 Предишни проучвания показват, че DsbA-L предотвратява затлъстяване, възпаление, инсулинова резистентност или индуцирана от диета или диабетна нефропатия (DN) бъбречно увреждане.14-18 Интересно е, че скорошното ни проучване установи, че DsbA-L медиира бъбречна фиброза, предизвикана от едностранна уретерална обструкция (UUO). Въпреки това, ролята и механизмът на тубуларния DsbA-L при AKI все още са напълно неизвестни.

В настоящото изследване, проксималната тубулна делеция на DsbA-L (PT-DsbA-L-KO) в миши модел води до забележимо отслабване на I/R, заедно с ванкомицин (VAN) и лигиране и пункция на цекума (CLP )-индуцирана AKI. Последователно, DsbA-L също медиира I/R, VAN- и LPS-индуцирана апоптоза в миши бъбречни проксимални тубуларни епителни клетки (BUMPT). Интересното е, че открихме, че DsbA-L взаимодейства с 9-13 и 22 27 регионите на волтаж-зависимия анионен канал 1 (VDAC1), ключов член на VDAC фамилията протеини19 21; тези ефекти са наблюдавани както при in vivo, така и при in vitro митохондриални проби и човешки проби от AKI. Освен това, ние демонстрирахме, че PTVDAC1-KO също подобрява апоптозата на бъбречните клетки както при in vitro, така и при in vivo модели на AKI. Колективно, ние демонстрирахме, че DsbA-L взаимодейства с VDAC1 в медиираната от митохондриите апоптоза на тубулни клетки и следователно причинява прогресията на AKI.

Cistanche tubulosa

Материали и методи

1. Етична декларация

Проучването е одобрено от Съвета за преглед на втората болница Xiangya, Китайска народна република (№ 2018065) ​​и това проучване включва 18 пациенти. Всички участници преди включването в проучването са били наети с писмено информирано съгласие. Всички експерименти с животни са в съответствие с ръководните принципи, одобрени от Комитета по етика на грижата за животните на Втора болница Xiangya, Китайска народна република (№ 2020310).

2. Антитела и реактиви

Anti-COXIV (ab33985, RRID: AB_879754), VDAC1 (ab14734, RRID: AB_443084), and PGC-1a (ab191838, RRID: AB_2721267) antibodies were obtained from Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Anti-Caspase3 (9662, RRID: AB_331439) and cleavedcapase3 (9664, RRID: AB_2070042) antibodies were purchased from Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Anti-Bax (50599-2-Ig, RRID: AB_2061561), Cyt-c (10993-1-AP, RRID: AB_2090467), NRF1 (12482- 1-AP, RRID: AB_2282876), GAPDH (60004-1-Ig, RRID: AB_2107436), and b-tubulin (10094-1-AP, RRID: AB_2210695) antibodies were obtained from Proteintech (Rosemont, IL, USA). The anti-DsbA-L antibody was provided by Dr. Feng Liu(14). All secondary antibodies (MitoTracker Green FM and MitoTracker Red CMXRos) were obtained from Thermo Fisher Scientific (Waltham, MA, USA). The calcium ionophore was purchased from Sigma-Aldrich (Shanghai, China). Antimycin A (>95 процента чистота, ab141904) и комплект за фракциониране на митохондрии/цитозол (ab65320) са закупени от Abcam (Cambridge Science Park, Cambridge, UK). Целевата последователност за миши DsbAL е описана по-рано.22

3. Създаване на модели на AKI чрез исхемична реперфузия, CLP и VAN

C57BL/6J мъжки мишки (RRID: MGI:5657312) на възраст 8-10 седмици бяха закупени от Hunan SJA Laboratory Animal Co., Ltd. Мишки, показващи проксимална тубул-специфична DsbA-L или VDAC1 делеция, бяха получени чрез кръстосване на DsbA-L (flox/flox) мишки (предоставени от д-р Feng Liu) или VDAC1 (flox/flox) мишки (получени от Шанхайски моделни организми) с PEPCK-Cre мишки (предоставени от д-р Volker Haase (Университета на Пенсилвания, Филаделфия, Пенсилвания) ), както е описано по-горе.22,23 Мъжки мишки (на възраст 8-10 седмици) бяха подложени на исхемия, CLP и VAN нефротоксична AKI, както е описано по-горе.23 27 За исхемична AKI, двустранната бъбречна артерия беше непрекъснато клипсирана за 28 минути, последвано от реперфузия за 24 часа или 48 часа.Телесната температура на мишките се поддържа на приблизително 37 градуса.За CLP-индуцирана AKI, сляпото черво се лигира плътно на позиция 1,5 cm от върха.Това е последвано от пункция за 18 ч. За увреждане на VAN, мишките бяха интраперитонеално инжектирани с единична доза VAN в доза от 600 mg/kg за 7 последователни дни, както е описано по-горе.28, 29 В допълнение, мишките C57BL/6 бяха инжектирани с DsbA-L или VDAC1 плазмиди, или VDAC1 siRNA (в доза от 15 mg/kg) през опашната вена два пъти седмично22; физиологичен разтвор се използва като контролна инжекция. За всяко проучване ние анализирахме пробите заедно, за да избегнем пристрастия, въз основа на предишните проучвания и използвахме софтуера PASS, за да определим размера на извадката (n=6). Изключихме пробата, която умря или не успя да установи модела преди крайната точка. Експерименталните мишки бяха групирани по таблица със случайни числа. Изследователите не са били заслепени по време на експеримента, но са били заслепени по време на разпределението, събирането на проби и анализа на данните. Всички експерименти с животни са в съответствие с ръководните принципи, одобрени от Комитета по етика на грижата за животните на Втора болница Xiangya, Китайска народна република. Мишките бяха настанени в 12-h светла/тъмна среда със свободен достъп до стандартна диета за гризачи и вода.

Herba Cistanche

4. Клетъчна култура и модел на исхемия-реперфузия

BUMPT клетки, получени от д-р Wilfred Lieberthal (Училище по медицина на Бостънския университет) или HK{{0}} клетки, получени от Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech, бяха култивирани с DMEM (Gibco, 11965092) с добавен 10 процента FBS (Gibco, 10100147) и 1 процент пеницилин-стрептомицин (Gibco, 15140163) при 37 градуса в 5 процента CO2. За исхемичния клетъчен модел, BUMPTs клетките бяха третирани с 10 mM антимицин А (инхибитор на митохондриален комплекс III, Abcam, ab141904) и 1,5 mM калциев йонофор (Sigma, A23187) в балансиран солев разтвор на Hanks (Hyclone, SH30030.02) за 2 h.30 След това заменихме HBSS с DMEM среда за 0, 2 и 4 h за етапа на реперфузия. Клетъчната апоптоза се открива чрез морфология и имуноблотинг за апоптотични индикатори, включително разцепена каспаза3, Bax и Cyt-c. Няколко плазмида бяха създадени и трансфектирани в клетки чрез липофекция: DsbA-L, HA-VDAC1-1-25, HA-VDAC1-26-366, HA-VDAC1-пълна дължина, HA-VDAC{{33 }}D9-13,22-27, HAVDAC1-D39-45,55-57 и HA- VDAC1-D9-13, 22-27 D39-45,55-57 и siRNA за DsbA-L и VDAC1. Шест до осем часа след трансфекцията културалната среда се заменя с DMEM. Последователностите на DsbA-L siRNA и VDAC1 siRNA за мишки бяха съответно 50 - GCAUGGAGCAACCAGAGAUTT -30 и 50 - CCAGAGCAACTTCGCAGTT -30; последователностите за разбърканата NC siRNA бяха 50 -UUCUCGAACGUGUCACGUTT-30. Последователностите на DsbA-L siRNA и VDAC1 siRNA за хора бяха съответно 50 - UCAUUUGCCAUGUAUAGUCCU-30 и 50 -UAUUAAGCCAAAUCCAUAGCC -30; последователностите за разбърканата NC siRNA бяха 50 -AACCACUCAACUUUUUCC CAA -30. След това моделът на IR беше индуциран, когато клетъчната плътност достигна 90 процента.

5. Поточна цитометрия

Проточната цитометрия се извършва съгласно инструкциите на комплекта за откриване на апоптоза на FITC Анексин V (BD, 556547). BUMPT или HK-2 Клетки с различно третиране бяха събрани с помощта на трипсин без EDTA и промити три пъти с PBS, последвано от FITC за 15 минути и PI за 5 минути при стайна температура и накрая изследвани чрез поточна цитометрия.

6. Пациенти с AKI и вземане на проби

Протоколът беше одобрен от Съвета за преглед на Втора болница Xiangya, Китайска народна република. Това проучване включва 18 пациенти, включително 12 мъже и 6 жени. Принципът на набиране се основава на бъбречна биопсия. Информацията за пациента е допълнена в Таблица 1. Пробите от бъбречна биопсия са получени от пациенти, живеещи с болести с минимална промяна (MCD) (n=6) и предизвикана от исхемичен или остър интерстициален нефрит (AIN) AKI (n{{6} }). Декларираме, че цялото проучване е в съответствие с всички съответни етични разпоредби за изследвания с човешки участници и е проведено в съответствие с принципите на Декларацията от Хелзинки и че проучването е в съответствие с насоките на Министерството на науката и технологиите за преглед и одобрение на Човешки генетични ресурси. Критериите за включване и изключване на MCD бяха описани в нашето предишно проучване.23 За IR: Критерии за включване: 1 Биопсия за пациенти с исхемия-реперфузия, 2 Възраст под 75 години; Критерии за изключване1: изключете пациенти с тумори, открити при постоперативни медицински прегледи,2 изключете пациенти с анамнеза за диабет, подагра, хипертония, уринарна туберкулоза или съответно инфекция. За AIN: Критерии за включване1: Клинично диагностициран като остър интерстициален нефрит2 Пациенти с AIN, потвърдени с биопсия,3 Възраст под 75 години; Критерии за изключване1: Изключете пациенти с абнормален креатинин в кръвта преди приемане,2 изключете пациенти с анамнеза за диабет, подагра, хипертония, уринарна туберкулоза или инфекция. След това тези проби бяха използвани за оцветяване на HE, TUNEL и имунохистохимия, както и имунопреципитация (IP) и имуноблотинг.

7. Имунопреципитация

Цитоплазмата и митохондриите от BUMPT клетки и бъбречна тъкан от мишки и пациенти с AKI бяха разделени с помощта на комплекта за фракциониране на митохондрии/цитозол (Abcam, ab65320); комплектът е използван според инструкциите на производителя. Антителата (DsbA-L, VDAC1, HA или IgG) се свързват с магнитните перли. След това добавихме митохондриален/цитоплазмен лизат и го инкубирахме в продължение на три часа. След това сместа се елуира и изследва за експресия на свързани маркери чрез имуноблотинг.

8. Относителна количествена PCR (qPCR)

РНК се екстрахира от BUMPT клетки или бъбречна тъкан чрез реагента Trizol (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, САЩ). След това РНК се транскрибира обратно в сДНК на първата верига, като се използва комплектът Prime Script RT Reagent и gDNA Eraser (TaKaRa, RR037A), както е описано по-горе.31'34 След това използвахме кДНК като шаблон с TB green (TaKaRa, RR820A) и Light cycler 96 (Roche) със следните двойки праймери: DsbA-L: 5 - AAATATGGGGCCTT TGGGCT-3'(напред) и 5'- TAGCAACTCCAAGCGGTCA G-3'(обратен); и GAPDH: 5'-GGTCTCCTCTGACTTCACA-3'(напред) и 5'-GTGAGGGTC TCTCTCTTCCT-3'(обратен); PGC- 1a: 5'-ATGTGTCGCCTTCTTGCTCTTCC-3 (напред) и 5'-CTCCCGCTTCTCGTGCTCTTTG-3'(обратен); NrF1:5'-TCTGCTGTGGCTGATGGAGA GG-3'(напред) и NrF1:5'-GATGCTTGCGTCGTCTGGATGG-3 (назад);

9. Откриване на BUN и креатинин

Откриването на BUN и креатинин се извършва съгласно протокола на BUN (кит за анализ на съдържанието на урея азот Beijing Boxbio Science & Technology Co, Ltd.) и комплект за анализ на креатинин (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Китай).

10. HE оцветяване, TUNEL оцветяване, имунохимия, имунофлуоресценция и имуноблотинг

Бъбречната тъкан се поставя в парафин и след това се нарязва на секции за различни видове оцветяване, както е описано по-горе. 26,35 Хистологията се оценява чрез оцветяване с хематоксилин и еозин. Критериите, използвани за оценяване на увреждане на бъбречните тубули, бяха описани по-рано.23 Оцветяването с TUNEL беше използвано за оценка на апоптозата в бъбречните клетки. Пропорцията (процент) на TUNEL-позитивните клетки в 10-20 микроскопични полета на тъканен срез се използва като количествен индикатор за апоптоза.26 За имунохимично оцветяване тъканните срезове се инкубират една нощ при 4 градуса С със специфично първично антитяло ( DsbA-L 1:200 или VDAC1 1:100). На следващата сутрин срезовете се инкубират с вторично антитяло за 30 минути при 37 градуса и след това реагират с DAB за 5-10 минути. За имунофлуоресцентно оцветяване срезовете се инкубират със специфично първично антитяло (DsbA-L 1:200, VDAC1 1:100) за една нощ при 4 градуса, последвано от вторично флуоресцентно антитяло за 1 час при 37 градуса на тъмно. След това се добавя DAPI за 3-5 минути и срезовете се наблюдават чрез флуоресцентна микроскопия. Митохондриалното оцветяване се извършва по стандартен протокол. Протеиновите лизати от BUMPT клетки или бъбреци се събират и след това се центрофугират, за да се събере супернатантата, съдържаща протеините. Супернатантът се подлага на SDS-PAGE и след това се прехвърля върху PVDF мембрана. След това мембраните се инкубират с първично антитяло за една нощ при 4 градуса, последвано от вторично антитяло за 1 час при стайна температура. Концентрацията на антиCOXIV, VDAC1, PGC-1a, Bax, Cyt-c, NRF1, GAPDH и b-тубулин е 1:1000. Концентрацията на анти-каспаза3 и разцепена капаза3 е 1:2000.

Добавка Cistanche

11. Статистика

Всички данни бяха представени като средства § SD. Двустранните t-тестове на Student бяха използвани за сравнения на две групи. Еднопосочен ANOVA, последван от post hoc анализ на Tukey, беше използван за множество сравнения. Тестът Kruskal Walls беше използван за данните с ненормално разпределение. Софтуерът Graph Pad 8.0 беше използван за анализ на данните и P<0.05 was considered statistically significant.

12. Роля на източника на финансиране

Финансиращите не са участвали в дизайна на изследването, събирането на данни, анализа, интерпретацията или писането на ръкописа.

Препратки

1 Zuk A, Bonventre JV. Остра бъбречна травма. Annu Rev Med. 2016; 67: 293-307.

2 Zhou D, Tan RJ, Lin L, Zhou L, Liu Y. Активирането на рецептора на хепатоцитен растежен фактор, c-met, в бъбречните тубули е необходимо за повторна защита след остро бъбречно увреждане. Kidney Int. 2013; 84 (3): 509-520.

3 O'Neal JB, Shaw AD, Billings FT. Остро бъбречно увреждане след сърдечна операция: текущо разбиране и бъдещи насоки. Критична грижа. 2016; 20 (1): 187.

4 Ishimoto Y, Inagi R. Митохондрии: терапевтична цел при остро бъбречно увреждане. Трансплантация на Nephrol Dial. 2016; 31 (7): 1062–1069. официална публикация на Европейската асоциация по диализа и трансплантация – Европейска бъбречна асоциация.

5 Linkermann A, Chen G, Dong G, Kunzendorf U, Krautwald S, Dong Z. Регулирана клетъчна смърт при AKI. J Am Soc Nephrol. 2014; 25 (12): 2689–2701.

6 Agarwal A, Dong Z, Harris R, et al. Клетъчни и молекулярни механизми на AKI. J Am Soc Nephrol. 2016; 27 (5): 1288–1299.

7 Morigi M, Perico L, Rota C, et al. 3-Зависимите от сиртуин митохондриални динамични подобрения предпазват от остро бъбречно увреждане. J Clin Investig. 2015; 125 (2): 715–726.

8 Yu X, Xu M, Meng X и др. Ядреният рецептор PXR е насочен към AKR1B7 за защита на митохондриалния метаболизъм и бъбречната функция при AKI. Sci Transl Med. 2020; 12 (543): 7591–7605.

9 Stoppe C, Averdunk L, Goetzenich A, et al. Защитната роля на инхибиторния фактор на миграцията на макрофагите при остро бъбречно увреждане след сърдечна операция. Sci Transl Med. 2018; 10 (441): 4886–4898.

10 Wei Q, Sun H, Song S и др. МикроРНК-668 потиска MTP18, за да запази митохондриалната динамика при исхемично остро бъбречно увреждане. J Clin Investig. 2018; 128 (12): 5448–5464.

11 Tran M, Tam D, Bardia A, et al. PGC-1alpha подпомага възстановяването след остро бъбречно увреждане по време на системно възпаление при мишки. J Clin Investig. 2011; 121 (10): 4003–4014.

12 Lan R, Geng H, Singha PK, et al. Митохондриална патология и гликолитично изместване по време на атрофия на проксималните тубули след исхемична AKI. J Am Soc Nephrol. 2016; 27 (11): 3356–3367.

13 Harris JM, Meyer DJ, Coles B, Ketterer B. Нова глутатион трансфераза (13-13), изолирана от матрицата на митохондриите на черния дроб на плъх, има структурно сходство с клас тета ензими. Biochem J. 1991; 278 (Pt 1): 137–141.

14 Bai J, Cervantes C, Liu J, et al. DsbA-L предотвратява предизвикано от затлъстяване възпаление и инсулинова резистентност чрез потискане на активирания с освобождаване на mtDNA път cGAS-cGAMP-STING. Proc Natl Acad Sci САЩ. 2017; 114 (46): 12196–12201.

15 Chen H, Bai J, Dong F, et al. Чернодробният DsbA-L предпазва мишки от индуцирана от диета хепатостеатоза и инсулинова резистентност. FASEB J. 2017; 31 (6): 2314–2326.

16 Liu M, Xiang R, Wilk SA, et al. Специфичната за мазнини свръхекспресия на DsbA-L насърчава мултимеризацията на адипонектин и предпазва мишките от предизвикано от диетата затлъстяване и инсулинова резистентност. Диабет. 2012; 61 (11): 2776–2786.

17 Chen X, Han Y, Gao P, et al. Дисулфидна връзка Протеин, подобен на оксидоредуктаза, предпазва от ектопично отлагане на мазнини и свързано с липидите увреждане на бъбреците при диабетна нефропатия. Kidney Int. 2019; 95 (4): 880–895.

18 Dai XG, Xu W, Li T и др. Участие на индуцирана от фосфатаза и хомолог на тензин предполагаема киназа 1-Паркин-медиирана митофагия при септично остро бъбречно увреждане. Chin Med J (Engl). 2019; 132 (19): 2340–2347.

19 Shoshan-Barmatz V, Nahon-Crystal E, Shteinfer-Kuzmine A, Gupta R. VDAC1, митохондриална дисфункция и болестта на Алцхаймер. Pharmacol Res. 2018; 131: 87-101.

20 Geisler S, Holmstrom KM, Skujat D, et al. PINK1/Parkin-медиирана митофагия зависи от VDAC1 и p62/SQSTM1. Nat Cell Biol. 2010; 12 (2): 119–131.

21 Lipper CH, Stofleth JT, Bai F, et al. Редокс-зависимо стробиране на VDAC от mitoNEET. Proc Natl Acad Sci САЩ. 2019; 116 (40): 19924–19929.

22 Li X, Pan J, Li H, et al. DsbA-L медиирана бъбречна тубулоинтерстициална фиброза при UUO мишки. Nat Commun. 2020; 11 (1): 4467.

23 Zhang D, Liu Y, Wei Q, et al. Тубуларният p53 регулира множество гени, за да медиира AKI. J Am Soc Nephrol. 2014; 25 (10): 2278–2289.

24 Xu X, Wang J, Yang R, Dong Z, Zhang D. Генетично или фармакологично инхибиране на EGFR подобрява индуцираната от сепсис AKI. Oncotarget. 2017; 8 (53): 91577–91592.

25 Wang J, Li H, Qiu S, Dong Z, Xiang X, Zhang D. MBD2 регулира miR-301a-5p, за да индуцира апоптоза на бъбречните клетки по време на индуцирана от ванкомицин AKI. Клетъчна смърт Dis. 2017;8(10):e3120.

26 Xu L, Li X, Zhang F, Wu L, Dong Z, Zhang D. EGFR стимулира прогресирането на AKI към CKD чрез свръхекспресия на HIPK2. Теранотика. 2019; 9 (9): 2712–2726.

27 Zhang P, Yi L, Qu S, et al. Биомаркерът TCONS_00016233 управлява септичната AKI чрез насочване към сигналната ос miR-22-3p/AIFM1. Mol Ther Нуклеинови киселини. 2020; 19: 1027-1042.

28 Chen J, Wang J, Li H, Wang S, Xiang X, Zhang D. p53 активира miR-192-5p, за да медиира ванкомицин-индуцирана AKI. Sci Rep. 2016; 6: 38868.

29 Xu X, Pan J, Li H и др. Atg7 медиира апоптозата на бъбречните тубулни клетки при нефротоксичност на ванкомицин чрез активиране на PKC-делта. FASEB J. 2019; 33 (3): 4513–4524.

30 Лий ХТ, Емала CW. Прекондиционирането и аденозинът защитават човешки проксимални тубулни клетки в in vitro модел на исхемично увреждане. J Am Soc Nephrol. 2002; 13 (11): 2753–2761.

31 Ge Y, Wang J, Wu D, et al. lncRNA NR_038323 Потиска бъбречната фиброза при диабетна нефропатия чрез насочване към оста miR-324-3p/DUSP1. Mol Ther Нуклеинови киселини. 2019; 17: 741–753.

32 Wang J, Pan J, Li H, et al. lncRNA ZEB1-AS1 се потиска от p53 за бъбречна фиброза при диабетна нефропатия. Mol Ther Нуклеинови киселини. 2018; 12: 741-750.

33 Song YX, Sun JX, Zhao JH и др. Некодиращите РНК участват в регулаторната мрежа на CLDN4 чрез ceRNA-медиирано избягване на miRNA. Nat Commun. 2017; 8 (1): 289.

34 Zhu M, Liu J, Xiao J, et al. Lnc-mg е дълга некодираща РНК, която насърчава миогенезата. Nat Commun. 2017; 8: 14718.

35 Kishi S, Brooks CR, Taguchi K, et al. ATR на проксималните тубули регулира възстановяването на ДНК, за да предотврати неадаптивни реакции на бъбречно увреждане. J Clin Investig. 2019; 129 (11): 4797–4816.

Xiaozhou Li,a,b,1 Jian Pan,a,b,1 Huiling Li,c Guangdi Li,g Bohao Liu,a,b Xianming Tang,a,b Xiangfeng Liu,f Zhibiao He,a,b Zhenyu Peng,a ,b Hongliang Zhang,a,b Luxiang Wang,a,b Yijian Li,d Xudong Xiang,a,b Xiangping Chai,a,b Yunchang Yuan,e Peilin Zheng,h и Dongshan Zhang a,b *

отдел по спешна медицина, Китайска народна република

b Институт за спешна медицина и тежки заболявания, Втора болница Xiangya, Central South University, Changsha, Hunan 410011, Китайска народна република

c Отделение по офталмология, Китайска народна република

d Отделение по хирургия на пикочните пътища, Китайска народна република

e Отделение по гръдна хирургия, Китайска народна република

f Отделение по обща хирургия, Втора болница Xiangya, Китайска народна република

g Катедра по обществено здраве, Централен южен университет, Чанша, Хунан, Китайска народна република

h Отделение по ендокринология, Народна болница в Шенжен, Втори клиничен медицински колеж на университета Джинан, Първа свързана болница на Южния университет за наука и технологии, Шенжен, Китайска народна република

1 Xiaozhou Li и Jian Pan допринесоха еднакво за това проучване