ЕДНОКЛЕТЪЧНА RNA-SEQ РАЗКРИВА КРИТИЧНИТЕ РОЛИ НА СЪЗНАЧИТЕЛНИТЕ ПЪТИЩА НА ЦИТОЗОЛНАТА НУКЛЕИНОВА КИСЕЛИНА, МЕДИРАНА ОТ STING- И MDA5-, КАКТО И НА IFNAR/STAT2 СИГНАЛИЗАЦИЯ В РЕКОМБИНАНТЕН MVA-ИНДУЦИРАН ПРОТИВОТУМОРЕН ИМУНИТЕТ

Заден план

Онколитичните вируси са обещаващи терапевтични средства за напреднал рак поради способността им да индуцират антитуморен вроден и адаптивен имунитет. Модифицираният ваксиниа вирус Ankara (MVA) е атенюиран поксвирус с дефицит на репликация, безопасен за употреба от хора, което го прави благоприятна платформа за имунотерапия на рак. По-рано открихме, че генът E5R в MVA кодира инхибитор на cGAS/STING-медиирания цитозолен ДНК-чувствителен път. Конструираният MVA, изтриващ гена E5R и експресиращ растежен фактор на дендритни клетки (DC) Flt3L заедно с Т-клетъчен ко-стимулатор OX40L, генерира силен антитуморен имунитет, когато се доставя интратуморно. Ние също демонстрирахме, че интратуморното (IT) инжектиране на rMVA от 1-во поколение насърчава активирането на CD8+ по cGAS/STING и STAT1/STAT2-зависим начин и изчерпва OX40hi регулаторните Т клетки (Tregs) чрез OX40L/ OX40 взаимодействие и IFNAR сигнализиране. Генът E3L от MVA кодира инхибитор на цитозолните dsRNA-чувствителни пътища. Целта на това проучване е да се изследва дали rMVADE3L, със заличаването на E3L от rMVA (MVADE5R-hFlt3LmOX40L), допълнително подобрява своите антитуморни ефекти. Ние също се фокусирахме върху използването на едноклетъчна RNA-seq (scRNA-seq), за да изследваме промяната на имуносупресивната туморна микросреда чрез ИТ доставка на rMVADE3L.

Ползи от cistanche tubulosa-антитуморен

Методи

Създадохме rMVADE3L чрез изтриване на E3L гена от rMVA. Изследвахме вродените имунни отговори на DCs, получени от костен мозък (BMDCs) и туморни клетъчни линии към rMVADE3L и rMVA. Ние също сравнихме антитуморната ефикасност на двата вируса в модели на миши B16-F10 меланом и MC38 рак на дебелото черво. В допълнение, ние извършихме scRNA-seq на сортирани тумор-инфилтриращи CD45+ имунни клетки от тумори, събрани два дни след IT инжектиране с rMVADE3L или PBS в див тип, MDA5/STING-, STAT2-, или мишки с дефицит на IFNAR1-.

Ползи от cistanche tubulosa-антитуморен

Резултати

В сравнение с rMVA, rMVADE3L активира по-мощно както cGAS/STING-, така и MDA5/MAVS-медиираните пътища за отчитане на нуклеинова киселина в DC и туморни клетъчни линии. IT rMVADE3L генерира по-силни антитуморни ефекти от rMVA. Нашите резултати показаха, че след лечение с rMVADE3L е имало приток на възпалителни моноцити в туморите при WT мишки, липсващи при STAT2 или IFNAR нокаут мишки. Оценката на вирусни транскриптоми на едноклетъчно ниво разкри, че макрофагите и моноцитите са по-податливи на rMVA DE3L, отколкото други типове клетки. Транскриптомичните промени на DC подгрупи до голяма степен зависят от сигнализирането на IFNAR/STAT2. Обратно, медиираният от MDA5/STING път определя транскриптомния профил на възпалителни моноцити в отговор на rMVADE3L.

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Enhance Imunity

【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Изводи

Взети заедно, нашите резултати показват, че scRNA-seq е мощен подход за разпит на имунните отговори на гостоприемника към имуногенни вируси, което би насочило бъдещите дизайни на по-ефективна имунотерапия на рак, базирана на вируси.

cistanche tubulosa - подобряват имунната система

Благодарности

Тази работа беше подкрепена от стипендия за научни изследвания (LD) на Обществото на Мемориал Слоун Кетъринг (MSK), Фонд за технологично развитие на MSK (LD), Награда за развитие на кариерата на Института Паркър за имунотерапия на рака (LD), спонсорирана награда за научни изследвания от IMVAQ Therapeutics. Тази работа беше подкрепена отчасти от Swim Across America (JDW, TM), Института за изследване на рака Лудвиг (JDW, TM) и грантове R01 CA56821 (JDW) на Националния институт по рака. Това изследване също беше финансирано отчасти чрез NIH/NCI Cancer Center Support Grant P30 CA008748.

Cistanche ползи за мъжете - укрепване на имунната система