Изследвания върху седативния ефект на Cistanche Deserticola

за повече информация:Ali.ma@wecistanche.com

Минг-Чин Лу

Катедра по китайска диагностика, Китайски медицински колеж, 91 Hsieh Shih Road, Тайчунг, Тайван, ROC

Резюме

В това проучване ние изследвахмеуспокоителноефектнаЦистанчеdeserticolaмамо (CD) върху индуцираното от хексобарбитал време на сън при мишки и спонтанна двигателна активност чрез използване на автоматизиран измервател на активността при плъхове. Установено е, че суровият екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)може да удължи времето за сън, предизвикано от хексобарбитал, и да намали спонтанната двигателна активност, включително хоризонтална активност, време за ходене и общо разстояние. След това водната фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстрактът може да удължи времето за сън, предизвикано от хексобарбитал, и да намали спонтанната двигателна активност повече от тази на другата фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт при плъхове. Тези резултати предполагат, че екстрактът от CD етанол и неговата водна фракция притежаватуспокоителноефект. © 1998 Elsevier Science Ireland Ltd.

Ключови думи: Cistanche deserticola; седация; Автоматичен измервател на активността; Спонтанна двигателна активност

Cistanche deserticolaимаседативен ефект

Щракнете за продуктите на cistanche deserticola ma

1. Въведение

Цистанчеdeserticolaмамо (Orobanchaceae) (CD) е китайска традиционна медицина, широко използвана при лечението на безсъние, болка, умора и амнезия (Lee, 1986). В съвременните фармакологични изследвания, етанолов екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)установено е, че има ефект против стареене (Lee et al., 1990) и подобрява имунните функции (Chin and Su, 1993). Водният екстракт от екстракт от CD повишава синтеза на ДНК и активността на SOD (Chang et al., 1995) и изключва свободните радикали (Hsu и др., 1995). Както и да еуспокоителноефектна CD никога не е проучван. Седативният ефект на лекарствата може да бъде оценен чрез измерване на спонтанната двигателна активност при плъхове (Carpenedo et al., 1994; File and Fernandes, 1994; Hsieh et al., 1991). И така, целта на настоящото проучване беше да се оцениуспокоителноефектна CD чрез измерване на индуцираното от хексобарбитал време на сън при мишки и локомоторно поведение, включително хоризонтална активност, време на ходене и общо разстояние при плъхове, след което отделете екстракта от CD с различни разтворители, за да търсите неговите активни съставки.

2. Материали и методи

2.1. Подготовка на CD(Цистанчеdeserticola)

Коренища отЦистанчеdeserticolaMa. (Orobanchaceae) са закупени от пазара в Тайван и са удостоверени от д-р Yung Hsun Chang, Китайски медицински колеж, Тайчун. Екземпляр е депозиран в Департамента по ботаника, Китайски медицински колеж (идентификационен номер 15).

Коренища на CD(Цистанчеdeserticola)(2,5 kg) се нарязват и екстрахират с 50 процента етанол (3×3,5 l) чрез накисване (3 дни) и екстрактът се редуцира до сухо с вакуумен ротационен изпарител. Беше получен добив от 840 g (33,6 процента). Екстрактът се разтваря във вода и разтворът се екстрахира последователно с етилацетат и n-бутанол (Hsu et al., 1994), за да се получат фракциите с добиви от 24,9 g (3,0 процента; FrEtOAc) и 81,2 g (9,7 процента; FrBuOH ,), съответно. Добивът на водната фракция е 242.3 g (28.8 процента; FrH2O). Стъпките на разделяне са показани на фиг. 1.

Фиг. 1. Отделяне на коренището наЦистанчеdeserticola(CD).

2.2. Животни

Мъжки плъхове Sprague-Dawley с тегло между 200-250 g са използвани за изследване на двигателната активност. Мъжки ICR мишки, тежащи между 20-25 g, бяха използвани за изследване на хипнотичния ефект. Всички животни са държани в групи от пет на клетка при температурен контрол от 21-25 градуса и влажност от 5595 процента. Животните бяха настанени в клетка от метална телена мрежа най-малко 7 дни преди всеки експеримент. Стандартна пелетна диета и чешмяна вода бяха предоставени ad libitum.

2.3. Индуциран от хексобарбитал сън при мишки

В експерименталната група всяка фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракти се прилага перорално в доза от {{0}}.1,0.3, 1.0 g/kg телесно тегло на различни групи мишки. Един час по-късно се дава хексобарбитал (100 mg/kg, ip) за предизвикване на сън. Интервалът между загубата и възстановяването на рефлекса за изправяне беше използван като индекс на хипнотичния ефект (Fujimori, 1965). В контролната група вместо това е използван нормален физиологичен разтвор.

2.4. Измерване на спонтанната двигателна активност при плъхове

За тези измервания беше използван уредът за измерване на животинска активност Opto-Varimex (Columbus Instruments, САЩ). Апаратът се състоеше от акрилна клетка за монитор на активността (43,2 × 44,4 × 30,5 cm), която беше заобиколена от хоризонтални и вертикални сензори, които не се откриват от плъхове. Апаратът се състоеше също от петнадесет инфрачервени лъча, разположени на 2,65 cm един от друг по всяка ос. Два инфрачервени лъча бяха зададени като чувствителност на мониторите. Клетката беше затворена във вентилиран шкаф. Измерванията бяха извършени между 09:00–17:00 h.

Прекъсването на лъчите на фотоклетката се събира от микрокомпютър и се записват следните променливи: (1) Хоризонтална активност (HA): общ брой на прекъсванията на хоризонталните лъчи; (2) амбулаторно време (AT): времето, прекарано в амбулаторна дейност, измерено чрез прекъсване на различни лъчи; и (3) общо разстояние (TD): разстоянието, изминато от животното (cm) по време на периода на движение, измерено чрез многократно прекъсване на един и същ лъч или движение под два лъча с прекъсване от 1 s, включва поддържане, драскане и копаене ( Sanberg et al., 1985). Активността се записва в продължение на 1 час, като се започва 5 минути след поставяне на животното в тестовата клетка. Всеки плъх беше използван само веднъж и общо шест плъха бяха използвани за всяко третиране. Всяка част от CD(Цистанчеdeserticola)екстракт се прилага перорално в доза от {{0}}.1,0.3, 1.0 g/kg телесно тегло на различни групи плъхове. Един час по-късно беше записана спонтанна двигателна активност. Контролните плъхове получават само носители.

Цистанчеdeserticolaимауспокоителноефект

2.5. Химикали

Метанолът, n-бутанолът и етилацетатът са клас HPLC, получени от E. Merk.

2.6. Статистически анализ

Всички данни бяха анализирани статистически с помощта на ANOVA, последван от многократния тест на Дънкан, за да се сравнят техните разлики. PB0.05 се изискваше за статистическа значимост.

3. Резултати

3.1. Индуциран от хексобарбитал сън при мишки

Както е показано в таблица 1, етанолов екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)при {{0}}.1, 0.3 и 1.0 g/kg удължава индуцираното от хексобарбитал време на сън при мишки (PB0.01). Между всяка част от CD(Цистанчеdeserticola)екстракт, само водната фракция на CD екстракта при {{0}}.01, 0.03 и 0,3 g/kg може да удължи индуцираното от хексобарбитал време на сън при мишки (PB0 .01).

3.2. Измерване на спонтанната двигателна активност при плъхове

Както е показано на фиг. 2, етанолов екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)при {{0}}.1, 0.3 и 1.0 g/kg води до значително намаляване на всички спонтанни двигателни дейности на плъхове, включително хоризонтална активност, време на движение и общо разстояние (PB0.01). Между всяка фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт, само водната фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт при {{0}}.01, 0.03 и 0,3 g/kg може да доведе до значително намаляване на всички спонтанни двигателни активности при плъхове (PB0,01) (Фиг. 3).

Фиг. 2. Ефект на етаноловия екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)върху промените в спонтанната двигателна активност при плъхове. Данните са представени като средно 9S.EM от шест плъха. ANOVA за повтарящи се измервания, последвани от многообхватен тест на Дънкан. ** PB0.01, в сравнение с групата VEH

Фиг. 3. Ефект на всяка фракция от CD(Цистанчеdeserticola)екстракти за промените в спонтанната двигателна активност при плъхове. Данните са представени като средно9S.EM на шест плъха. ANOVA за повтарящи се измервания, последвани от многообхватен тест на Дънкан. ** PB0.01, в сравнение с групата VEH.

4. Обсъждане

Установено е, че етаноловият екстракт от CD(Цистанчеdeserticola)може да удължи индуцираното от хексобарбитал време на сън при мишки. След това водната фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстрактът може да удължи времето за сън, предизвикано от хексобарбитал, повече от другата фракция на екстракта от CD при мишки. Освен това етаноловите екстракти отЦистанчеdeserticolaмамо може значително да намали всички спонтанни двигателни дейности, включително хоризонтална активност, време на движение и общо разстояние при плъхове от резултата, показан на Фиг. 2. Водната фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт може да доведе до значително намаляване на всички спонтанни двигателни дейности при плъхове сред всяка фракция на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт.

При скорошни фитохимични изследвания беше установено, че водният слой на CD(Цистанчеdeserticola)екстракти, включващи цистанозид EI, 8-епидеоксилогенна киселина и генипозидова киселина. Тези съставки притежават много физиологични действия и фармакологична активност (Chinand Chang, 1994). Следователно, науспокоителноефектот водния слой на CD(Цистанчеdeserticola)екстракт може да е действието на цистанозид, 8-епидеоксилогенна киселина и генипозидова киселина. Седативните съставки на водния слой на CD екстракт ще бъдат изследвани по-късно.

В заключение CD(Цистанчеdeserticola)етаноловият екстракт и неговата водна фракция притежаватуспокоителноефект.

Благодарности

Изказвам искрените си благодарности на д-р Ming-TsuenHsieh от Института на китайските фармацевтични науки за неговата техническа помощ.

Цистанчеdeserticolaимауспокоително ефект

Препратки
Carpenedo, R., Chiarugi, A., Russi, P., Lombardi, G., Carla, V., Pellicciari, R., Mattoli, L., Moroni, F., 1994. Инхибиторите на кинуренин хидроксилазата и кинуренин повишават мозъчно образуване на кинуренат и имат
седативно и антиконвулсивно действие. Неврология 61, 237–243.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995 г. Проучване на силните ефекти наЦистанчеdeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G.Beck. и Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. Китайски вестник за китайски материали и медицина 26 (3), 143–146.
Chin, HL, Chang, CJ, 1994 г. Изследване на химическите съставки наЦистанчеdeserticolaмамо Китайски вестник за китайски материали и медицина 19 (11), 695–697.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Изследване на фармакологичните ефекти наЦистанчеdeserticolaмамо Китайски традиционни билкови лекарства 24 (10), 550–552.
File, SE, Fernandes, C., 1994. Dizocilpine предотвратява развитието на толерантност къмуспокоителноефектина диазепам при плъхове. Фармакология и биохимично поведение 47, 823–826.
Fujimori, H., 1965. Потенциране на барбиталната хипноза като метод за оценка на депресанта на централната нервна система. Психофармакология 7, 374–377.
Hsieh, MT, Peng, WH, Yeh, FH, Tsai, HY, Chang, YS, 1991. Проучвания върху антиконвулсивните, седативни и хипотермични ефекти на екстракти от Periostracum cicadae. Journal of Ethnopharmacology 35, 83–90.
Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chn, C., 1994 г. Изследване на химичните съставки наЦистанчеdeserticolaмамо Китайски вестник за китайски материали и медицина 25 (10), 509–513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995 г. Изследване на химическите съставки и фармакологичните ефекти наЦистанчеdeserticolaмамо иЦистанчесалса (CA Mey) G. Beck. Китайски традиционни билкови лекарства 26 (3), 143–146.
Lee, CJ, Chuan, S., Lee, SL, 1990. Изследване на ефекта против стареене наЦистанчеdeserticolaмамо Шанхайски вестник за традиционна китайска медицина 11, 22–23.
Lee, SJ, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu, Национален изследователски институт за публикации в китайската медицина, Тайпе, стр. 20. Sanberg, PR, Hangenmeyer, SH, Henault, MA, 1985.
Автоматизирано измерване на многовариантно локомоторно поведение при гризачи. Невроповедение, токсикология и тератология 7, 87–94.