Ефектите против стареене на Ludwigia Octovalvis върху мишки Drosophila Melanogaster и SAMP8, част 2

Химичен състав на LOE

За да се идентифицират механизмите, чрез които LOE предизвиква удължаване на живота при мухи, химичният състав на LOE беше анализиран чрез GC-MS. Седемнадесет основни пика се наблюдават в общата йонна хроматограма (фиг. 4) и са идентифицирани като известни съединения, изброени в таблица 2.

Гликозидът на цистанхе може също така да повиши активността на SOD в сърдечните и чернодробните тъкани и значително да намали съдържанието на липофусцин и MDA във всяка тъкан, като ефективно улавя различни реактивни кислородни радикали (OH-, H₂O₂ и др.) и предпазва от увреждане на ДНК, причинено от ОН-радикали. Cistanche phenylethanoid гликозидите имат силна способност за изчистване на свободните радикали, по-висока редуцираща способност от витамин С, подобряват активността на SOD в сперматозоидната суспензия, намаляват съдържанието на MDA и имат известен защитен ефект върху функцията на мембраната на спермата. Полизахаридите Cistanche могат да повишат активността на SOD и GSH-Px в еритроцитите и белодробните тъкани на експериментално стареещи мишки, причинени от D-галактоза, както и да намалят съдържанието на MDA и колаген в белите дробове и плазмата и да увеличат съдържанието на еластин, имат добър очистващ ефект върху DPPH, удължава времето на хипоксия при стареещи мишки, подобрява активността на SOD в серума и забавя физиологичната дегенерация на белия дроб при експериментално стареещи мишки. С клетъчна морфологична дегенерация експериментите показват, че Cistanche има добра антиоксидантна способност и има потенциала да бъде лекарство за предотвратяване и лечение на заболявания, свързани със стареенето на кожата. В същото време, ехинакозидът в Cistanche има значителна способност да улавя свободните радикали DPPH и може да улавя реактивни кислородни видове, да предотвратява индуцираното от свободните радикали разграждане на колагена и също така има добър възстановителен ефект върху увреждането на аниона от свободните радикали на тимина.

Кликнете върху Cistanche Chemist Warehouse

【За повече информация:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

LOE намалява острото оксидативно увреждане

Тъй като оксидативният стрес е най-популярната теория за обяснение как протича стареенето на молекулярно ниво, ние решихме да изследваме DPPH радикалната активност на LOE като критичен индикатор за неговия антиоксидантен капацитет. В нашите анализи LOE има силна DPPH радикална активност (IC50 3.15 ug/ml), между активността на аскорбиновата киселина (IC50 1.31 ug/ml) и тази на ресвератрола ( IC50 7.86 ug/ml), които бяха използвани като контроли (фиг. 5а). Въпреки това, DPPH активностите за отстраняване на радикалите на двете най-разпространени съединения, идентифицирани в LOE, - ситостерол и сквален, бяха открити само при минимални нива (фиг. 5а). Антиоксидантният капацитет на LOE може да се дължи на неговия богат на антиоксиданти състав, тъй като в нашия препарат за LOE присъства високо ниво на полифеноли (146,3±3,1 mg еквивалент на галова киселина на g сухо тегло; таблица 3), а флавоноидите са основен компонент сред полифенолите (90,2±2,6 mg рутин еквивалент на g сухо тегло).

Затова тествахме допълнително антиоксидантните свойства на LOE, като изложихме 10-дневни женски CS мухи, третирани с LOE, на паракват (метилвиологен, химикал, за който е известно, че генерира реактивни кислородни видове). Установихме, че мухите, получаващи добавка на LOE в храната си в продължение на 10 дни, показват повишена резистентност към индуцирана от паракват смъртност (фиг. 5b). Този резултат беше допълнително потвърден чрез анализиране на нивата на окислително увреждане при мухи, които са били третирани с паракват в продължение на 12 часа. Използвахме 4-хидроксиноненал (HNE), протеинов адукт, генериран от продукти на липидно окисление, като индикатор за оксидативно увреждане. Въпреки че добавянето на LOE не показва ефект върху базалното ниво на HNE при 10--дневни мухи, то значително намалява натрупването на HNE при мухи, третирани с 20 mM паракват (фиг. 5c).

-Ситостеролът е основен компонент в LOE, който допринася за удължаването на живота

Допълнително изследвахме ефектите на -ситостерол и сквален върху продължителността на живота на мухите. Интересното е, че - индуцираното от ситостерол удължаване на продължителността на живота при женски CS мухи (фиг. 6а) по дозозависим начин. Този продължаващ ефект обаче не се наблюдава при женски CS мухи, получаващи същите дози сквален (фиг. 6b).

Доказано е, че AMPK пътят медиира удължаване на продължителността на живота чрез DR както при C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007), така и при мухи (Stenesen et al. 2013). Затова проучихме дали LOE и -ситостеролът могат да регулират продължителността на живота чрез модулиране на AMPK пътя. Използвайки Drosophila S2 клетки, ние открихме, че LOE и -ситостеролът могат значително да подобрят фосфорилирането на AMPK (фиг. 6с). Подобни наблюдения бяха направени, когато клетките бяха поддържани при DR условия (0.5 × среда) (Фиг. 6с). Ако AMPK има основна роля в удължаването на продължителността на живота при мухите, предизвикано от -ситостерол, загубата на AMPK трябва да притъпи ефекта на дълголетие от -ситостерол. Тествахме тази хипотеза, като съборихме експресията на AMPK, по-специално в мастните тела на възрастни мухи (фиг. S1). Мастното тяло на Drosophila е еквивалент на черния дроб и мастната тъкан на бозайник и е отговорно за метаболизма. Свръхекспресията или нокдаунът на AMPK в мастните телесни клетки се свързва съответно с увеличена или намалена продължителност на живота на мухата (Stenesen et al. 2013). Ние комбинирахме UAS-AMPK.RNAi алел с RU486- индуцируем GeneSwitch GAL4 за мастното тяло (S106-GAL4). Възрастни мухи, носещи подходящи генетични елементи, бяха рандомизирани на храни, съдържащи RU486 (активиращият агент за драйверите GeneSwitch-Gal4) и/или - ситостерол. Ние открихме, че индуцираното от -ситостерол удължаване на продължителността на живота не се наблюдава, когато експресията на AMPK беше свалена специално в мастното тяло на възрастни мухи (фиг. 6d). Заедно тези данни предполагат, че полученият от LOE ситостерол може да модулира продължителността на живота, поне частично, чрез активиране на AMPK в мастното тяло на възрастни мухи.

Дискусия

Плодовите мухи имат сравнително кратък живот, вариращ от няколко седмици до няколко месеца, в зависимост от хранителните и други условия на околната среда. Например променен прием на калории, условия на чифтосване и температура на околната среда могат значително да променят продължителността на живота на мухата (Bauer et al. 2004). При добре дефинирани условия успяхме да демонстрираме, че хранителните добавки от LOE могат да удължат живота на мухите без очевиден отрицателен компромис.

Разработването на DR миметици се превърна в новопоявяваща се област за изследвания против стареене. 2-Дезоксиглюкозата, инхибитор на гликолизата (Lane et al. 1998), и метформин, който стимулира AMPK (Anisimov et al. 2003), са две молекули, които в момента се изследват като миметици на DR. Въпреки това, дългосрочното приложение на 2- дезоксиглюкоза или метформин може да доведе до нежелани странични ефекти, включително сърдечна недостатъчност и лактатна ацидоза, което ги прави малко вероятни кандидати за употреба като миметици на DR (Ingram et al. 2004; Sinclair 2005). Мухите, получаващи метформин, също не показват благоприятен ефект върху удължаването на живота (Slack et al. 2012). По този начин, получените от растения полифеноли като ресвератрол могат да осигурят алтернативен вариант. Доказано е, че ресвератролът удължава живота на дрожди, червеи и мухи, като имитира DR чрез Sir2-зависим път (Wood et al. 2004). Въпреки че ресвератролът не удължава живота на мишките, хранени ad libitum, той подобрява здравето и оцеляването на затлъстели мишки, хранени с висококалорична диета (Baur et al. 2006; Pearson et al. 2008). Тези резултати предполагат, че ресвератролът може да повиши устойчивостта към индуциран от високи калории стрес, което е в съответствие с резултатите, наблюдавани в проучвания, демонстриращи, че ресвератролът осигурява клетъчна защита от стрес, включително оксидативно увреждане (Araki et al. 2004) и гама радиация (Howitz et al. 2003).

Нашите данни предполагат, че LOE може да действа отчасти като DR миметик. Ние открихме, че LOE значително удължава продължителността на живота на мухи, хранени с висококалорична диета, но не показва адитивен ефект при условия на DR (фиг. 1). LOE също намалява когнитивния спад, свързан с възрастта, като го поддържа до ниво, подобно на това, наблюдавано при мухи при условия на DR. Ние показахме, че тези DR-подобни ефекти на LOE не се дължат на по-ниска консумация на храна, предизвикана от LOE (фигури 2 и 3). Нито други типични физиологични промени, свързани с DR, като намалена женска плодовитост или повишена двигателна активност, наблюдавани при мухи, третирани с LOE (фиг. 2). Доказано е, че DR повишава митохондриалната активност (Nisoli et al. 2005; Lopez-Lluch et al. 2006), но забавя или намалява оксидативния стрес и увреждане при мухи (Zheng et al. 2005), мишки (Qiu et al. 2010). ), маймуни (Zainal et al. 2000) и жени (Buchowski et al. 2012). Предполага се, че този наблюдаван ефект е ефект на "митохормеза", хипотеза, че повишената активност на митохондриите и производството на ROS може да задейства присъща защитна програма, което води до подобрена устойчивост на стрес и евентуално удължаване на живота (Schulz et al. 2007). Ние открихме, че LOE има силна DPPH радикална активност и че намалява индуцираното от паракват окислително увреждане и смъртност при мухи (фиг. 5), допълнително подкрепяйки нашата хипотеза, че LOE може да действа, поне отчасти, като DR миметик.

Нашите химически анализи потвърдиха, че LOE е богат източник на антиоксиданти, включително полифенолни съединения, фитостероли и сквален (фиг. 4 и таблица 2). Съобщава се, че -ситостеролът може да регулира експресията на протеини и антиоксидантната активност на манганова супероксид дисмутаза чрез естроген/фосфатидилинозитол 3-киназния път в макрофагите (Vivancos и Moreno 2005). Доказано е също, че хранителните добавки със сквален намаляват свързаните с възрастта оксидативни увреждания и поддържат енергийния статус на чернодробните митохондрии при възрастни плъхове (Buddhan et al. 2007). Въпреки че -ситостеролът и скваленът бяха двете най-разпространени съединения, идентифицирани в LOE чрез GC-MS анализи, нито едно от тях не показа очевидна активност на отстраняване на DPPH радикали в нашата система за анализ (фиг. 5). Възможно е антиоксидантните активности на LOE да включват уловители на свободни радикали като полифенолни съединения, докато - ситостеролът и скваленът могат да действат по други пътища, както е обсъдено по-горе. Други традиционни и интегративни медицински практики като R. rosea и C. longa са показали, че удължават продължителността на живота на мухите чрез пътища, свързани с антиокисляване и регулиране на известни гени, свързани със стареенето (Lee et al. 2010; Schriner et al. 2013 г., 2009 г.). Билковите екстракти обаче обикновено съдържат много съединения, които изискват системни биохимични анализи за идентифициране. Следователно механистичната интерпретация е трудна без идентифициране на чисто съединение. В настоящото проучване ние идентифицирахме -ситостерол като основен компонент, който допринесе за активността на LOE за удължаване на живота. Нашите данни предполагат, че индуцираното от ситостерол удължаване на живота изисква активиране на AMPK в мастното тяло на възрастни мухи. Това до голяма степен е в съгласие с предишни доклади, показващи, че AMPK е основният сензор за хранителни вещества и медиира удължаването на продължителността на живота чрез DR в C. elegans (Apfeld et al. 2004; Greer et al. 2007) и мухи (Stenesen et al. 2013).

Желателно е интервенциите за дълголетие не само да удължат продължителността на живота, но и да забавят появата и заболеваемостта от свързани с възрастта заболявания, тоест да удължат както продължителността на живота, така и продължителността на здравето. Предкогнитивните ефекти на LOE, които описваме както при мухи, така и при мишки SAMP8, също могат да бъдат от голям интерес за областта на стареенето. Доказано е, че SAMP8 мишки показват свързани с възрастта дефицити в задържането на паметта от 2-месечна възраст, когато са тествани върху задачи за пасивно избягване (Miyamoto et al. 1986). При тест за избягване на удар на крака, мишките SAMP8 също показват значително увреждане в усвояването и запазването на паметта от 6 до 9-месечна възраст, в сравнение с младите мишки SAMP8 (Flood and Morley 1993). Използвайки разпознаване на нови обекти и задачи за лабиринт с повишено T, можехме да наблюдаваме ясни свързани с възрастта дефицити в задържането на паметта между 3- и 8--месечни SAMP8 мишки, въпреки че нямаше разлики по време на периода на придобиване на задачата за повдигнат T лабиринт (фиг. 3). Тези наблюдения са допълнително доказателство, че SAMP8 мишки показват ранна поява на свързани с възрастта когнитивни дефицити и че увреждането се влошава с възрастта. Въпреки това, дългосрочното лечение с LOE (повече от 5 месеца) при SAMP8 мишки отслабва свързания с възрастта спад в задържането на паметта, без да повлиява физическата активност, приема на храна, консумацията на вода или телесното тегло (фиг. 3). Не наблюдавахме никакви странични ефекти при мишки, получаващи 5 месеца лечение с LOE (непубликувани наблюдения). Тези констатации са до голяма степен в съгласие с скорошен доклад, показващ, че многократното приложение на L. octovalvis в продължение на 28 дни при мишки (800 mg/kg≈2400 ug/ден срещу 400 ug/ден, използвани в нашето проучване) не е причинило смърт или токсикология ефекти (Kadum Yakob et al. 2012).

В обобщение, ние идентифицирахме LOE като нова интервенция против стареене, способна да удължи живота на мухите и да смекчи свързания с възрастта когнитивен спад както при мухите, така и при мишките SAMP8. GC-MS и други биохимични анализи предполагат, че LOE може да прояви своите ефекти против стареене чрез намаляване на окислителното увреждане и активиране на пътища, свързани с AMPK.

Благодарности Бихме искали да благодарим на Chuan-Hao Lai и Hao-Wei Wang (Hsiehyu Biotech Company Ltd.) и Shang-Tse Lee (Национален тайвански университет) за тяхната техническа помощ. Бихме искали да благодарим на Fly Core в Тайван за запасите от мухи и реактиви. Pei-Yu Wang е частично подкрепен от Националния научен съвет (NSC 98-2320-B-004-003-MY2 и NSC 100- 2311-B-002-017-MY3), Тайван.

Препратки

1. Alcedo J, Kenyon C (2004) Регулиране на дълголетието на C. elegans от специфични вкусови и обонятелни неврони. Neuron 41(1):45–55

2. Anisimov V, Semenchenko A, Yashin A (2003) Инсулин и дълголетие: антидиабетни бигуаниди като геропротектори. Биогеронтология 4 (5): 297–307

3. Apfeld J, O'Connor G, McDonagh T, DiStefano PS, Curtis R (2004) AMP-активираната протеин киназа AAK-2 свързва енергийните нива и инсулиноподобните сигнали с продължителността на живота в C. elegans. Genes Dev 18 (24): 3004–3009

4. Araki T, Sasaki Y, Milbrandt J (2004) Повишената биосинтеза на ядрен NAD и активирането на SIRT1 предотвратяват аксонална дегенерация. Наука 305 (5686): 1010–1013

5. Bauer JH, Goupil S, Garber GB, Helfand SL (2004) Ускорен анализ за идентифициране на интервенции за удължаване на живота при Drosophila melanogaster. Proc Natl Acad Sci USA 101(35):12980–12985

6. Baur JA, Pearson KJ, Price NL, Jamieson HA, Lerin C, Kalra A, Prabhu VV, Allard JS, Lopez-Lluch G, Lewis K, Pistell PJ, Poosala S, Becker KG, Boss O, Gwinn D, Wang M, Ramaswamy S, Fishbein KW, Spencer RG, Lakatta EG, Le Couteur D, Shaw RJ, Navas P, Puigserver P, Ingram DK, de Cabo R, Sinclair DA (2006) Ресвератролът подобрява здравето и оцеляването на мишки на високо ниво калорийна диета. Nature 444 (7117): 337–342

7. Bishop NA, Guarente L (2007) Два неврона медиират дълголетието, предизвикано от ограничаване на диетата при C. elegans. Nature 447 (7144): 545–549

8. Bonkowski MS, Rocha JS, Masternak MM, Al Regaiey KA, Bartke A (2006) Целенасоченото разрушаване на рецептора на растежния хормон пречи на полезните действия на ограничаването на калориите. Proc Natl Acad Sci USA 103(20):7901–7905

9. Boyd O, Weng P, Sun X, Alberico T, Laslo M, Obenland DM, Kern B, Zou S (2011) Nectarine насърчава дълголетието в Drosophila melanogaster. Free Radic Biol Med 50 (11): 1669–1678

10. Brand-Williams W, Cuvelier ME, Berset C (1995) Използване на метод на свободни радикали за оценка на антиоксидантната активност. LWT Food Sci Technol 28 (1): 25–30

11. Buchowski MS, Hongu N, Acra S, Wang L, Warolin J, Roberts LJ II (2012) Ефект от скромното калорично ограничение върху оксидативния стрес при жени, рандомизирано проучване. PLoS ONE 7(10):e47079

12. Buddhan S, Sivakumar R, Dhandapani N, Ganesan B, Anandan R (2007) Защитен ефект на хранителните добавки на сквален върху митохондриалната функция в черния дроб на възрастни плъхове. Простагландини Левкот Есент мастни киселини 76(6):349–355

13. Chan YC, Hosoda K, Tsai CJ, Yamamoto S, Wang MF (2006) Благоприятни ефекти на чая върху намаляване на когнитивните дефицити и мозъчни морфологични промени при мишки с ускорено стареене. J Nutr Sci Vitaminol (Токио) 52 (4): 266–273

14. Chang CI, Kuo CC, Chang JY, Kuo YH (2004) Три нови тритерпена от тип олеанан от Ludwigia octovalvis с цитотоксична активност срещу две човешки ракови клетъчни линии. J Nat Prod 67(1):91–93

15. Chen CP, Lin CC, Namba T (1989) Скрининг на тайвански сурови лекарства за антибактериална активност срещу Streptococcus mutans. J Ethnopharmacol 27 (3): 285–295

16. Choi JH, Kim D (2000) Ефекти от възрастта и диетичните ограничения върху продължителността на живота и оксидативния стрес на мишки SAMP8 с увреждания на ученето и паметта. J Nutr Health Aging 4(3):182–186

17. Chou HJ, Lai DM, Huang CW, McLennan IS, Wang HD, Wang PY (2013) BMP4 е периферно получен фактор за моторни неврони и намалява индуцираната от глутамат екситотоксичност in vitro. PLoS ONE 8(3):e58441

18. Colman RJ, Anderson RM, Johnson SC, Kastman EK, Kosmatka KJ, Beasley TM, Allison DB, Cruzen C, Simmons HA, Kemnitz JW, Weindruch R (2009) Ограничаването на калориите забавя началото на заболяването и смъртността при маймуни резус. Наука 325 (5937): 201–204

19. Cruz-Morales SE, García-Saldívar NL, González-López MR, Castillo-Roberto G, Monroy J, Domínguez R (2008) Острата рестрикция уврежда паметта в повдигнатия Т-лабиринт (ETM) и променя серотонинергичната активност в дорзолатералната стриатум. Behav Brain Res 195 (1): 187–191

20. De-Mello N, Carobrez AP (2002) Издигнат Т-лабиринт като животински модел на паметта: ефекти на скополамин. Behav Pharmacol 13(2):139–148

21. Flatt T, Min KJ, D'Alterio C, Villa-Cuesta E, Cumbers J, Lehmann R, Jones DL, Tatar M (2008) Drosophila germline modulation of insulin signaling and lifespan. Proc Natl Acad Sci USA 105(17):6368–6373

22. Flood JF, Morley JE (1992) Ранно начало на свързано с възрастта увреждане на отблъскващо и апетитно обучение при SAM-P/8 мишка. J Gerontol 47 (2): B52–B59

23. Flood JF, Morley JE (1993) Свързани с възрастта промени в придобиването и задържането при избягване на шока при мишка с ускорено стареене (SAM). Невробиолно стареене 14(2):153–157

24. Galleano M, Verstraeten SV, Oteiza PI, Fraga CG (2010) Антиоксидантни действия на флавоноидите: термодинамичен и кинетичен анализ. Arch Biochem Biophys 501 (1): 23–30

25. Greer EL, Dowlatshahi D, Banko MR, Villen J, Hoang K, Blanchard D, Gygi SP, Brunet A (2007) Път на AMPKFOXO медиира дълголетието, предизвикано от нов метод на диетично ограничение в C. elegans. Curr Biol 17(19):1646–1656

26. Howitz KT, Bitterman KJ, Cohen HY, Lamming DW, Lavu S, Wood JG, Zipkin RE, Chung P, Kisielewski A, Zhang LL, Scherer B, Sinclair DA (2003) Малкомолекулярни активатори на сиртуини удължават живота на Saccharomyces cerevisiae. Nature 425 (6954): 191–196

27. Hubbard BP, Gomes AP, Dai H, Li J, Case AW, Considine T, Riera TV, Lee JE, SY E, Lamming DW, Pentelute BL, Schuman ER, Stevens LA, Ling AJY, Armor SM, Michan S, Zhao H, Jiang Y, Sweitzer SM, Blum CA, Disch JS, Ng PY, Howitz KT, Rolo AP, Hamuro Y, Moss J, Perni RB, Ellis JL, Vlasuk GP, Sinclair DA (2013) Доказателство за общ механизъм на Регулиране на SIRT1 чрез алостерични активатори. Наука 339(6124):1216–1219

28. Ingram DK, Anson RM, De Cabo R, Mamczarz J, Zhu MIN, Mattison J, Lane MA, Roth GS (2004) Разработване на миметици за ограничаване на калориите като стратегия за дълголетие. Ann NY Acad Sci 1019 (1): 412–423

29. Kadum Yakob H, Manaf Uyub A, Fariza Sulaiman S (2012) Токсикологична оценка на 80 процента метанолов екстракт от Ludwigia octovalvis (Jacq.) PH Гарванови листа (Onagraceae) в BALB/c мишки. J Ethnopharmacol 142 (3): 663–668

30. Kaeberlein M, Powers RW, Steffen KK, Westman EA, Hu D, Dang N, Kerr EO, ​​Kirkland KT, Fields S, Kennedy BK (2005) Регулиране на репликативния живот на дрождите от TOR и Sch9 в отговор на хранителни вещества. Наука 310 (5751): 1193–1196

31. Lane MA, Ingram DK, Roth GS (1998) 2-Храненето с дезокси-D-глюкоза при плъхове имитира физиологичните ефекти от ограничаването на калориите. J Anti Aging Med 1 (4): 327–337

32. Lee KS, Lee BS, Semnani S, Avanesian A, Um CY, Jeon HJ, Seong KM, Yu K, Min KJ, Jafari M (2010) Куркуминът удължава продължителността на живота, подобрява продължителността на здравето и модулира израза на свързаните с възрастта стареещи гени в Drosophila melanogaster. Подмладяване Res 13(5):561–570

33. Lin SJ, Defossez PA, Guarente L (2000) Изискване на NAD и SIR2 за удължаване на продължителността на живота чрез ограничаване на калориите в Saccharomyces cerevisiae. Наука 289 (5487): 2126–2128

34. Lin SJ, Ford E, Haigis M, Liszt G, Guarente L (2004) Ограничаването на калориите удължава живота на дрождите чрез понижаване на нивото на NADH. Genes Dev 18(1):12–16

35. Lopez-Lluch G, Hunt N, Jones B, Zhu M, Jamieson H, Hilmer S, Cascajo MV, Allard J, Ingram DK, Navas P, de Cabo R (2006) Ограничаването на калориите предизвиква митохондриална биогенеза и биоенергийна ефективност. Proc Natl Acad Sci USA 103(6):1768–1773

36. Maia CSF, Ferreira VMM, Diniz JSV, Carneiro FP, de Sousa JB, da Costa ET, Tomaz C (2010) Придобиване на избягване на инхибиторите при възрастни плъхове, изложени на комбинация от етанол и метилживак по време на развитието на централната нервна система. Behav Brain Res 211 (2): 191–197

37. Mattison JA, Roth GS, Beasley TM, Tilmont EM, Handy AM, Herbert RL, Longo DL, Allison DB, Young JE, Bryant M, Barnard D, Ward WF, Qi W, Ingram DK, de Cabo R (2012) Въздействие на ограничаването на калориите върху здравето и оцеляването при маймуни резус от проучването на NIA. Nature 489 (7415): 318–321

38. Miyamoto M, Kiyota Y, Yamazaki N, Nagaoka A, Matsuo T, Nagawa Y, Takeda T (1986) Свързани с възрастта промени в ученето и паметта при мишка с ускорено стареене (SAM). Physiol Behav 38 (3): 399–406

39. Nisoli E, Tonello C, Cardile A, Cozzi V, Bracale R, Tedesco L, Falcone S, Valerio A, Cantoni O, Clementi E, Moncada S, Carruba MO (2005) Ограничаването на калориите насърчава митохондриалната биогенеза чрез индуциране на експресията на eNOS. Наука 310 (5746): 314–317

40. Pearson KJ, Baur JA, Lewis KN, Peshkin L, Price NL, Labinskyy N, Swindell WR, Kamara D, Minor RK, Perez E, Jamieson HA, Zhang Y, Dunn SR, Sharma K, Pleshko N, Woollett LA, Csiszar A, Ikeno Y, Le Couteur D, Elliott PJ, Becker KG, Navas P, Ingram DK, Wolf NS, Ungvari Z, Sinclair DA, de Cabo R (2008) Resveratrol забавя свързаното с възрастта влошаване и имитира транскрипционните аспекти на диетичните ограничения без удължаване на живота. Cell Metab 8(2):157–168

41. Peng C, Chan HYE, Huang Y, Yu H, Chen ZY (2011) Ябълковите полифеноли удължават средната продължителност на живота на Drosophila melanogaster. J Agric Food Chem 59 (5): 2097–2106

42. Qiu X, Brown K, Hirschey MD, Verdin E, Chen D (2010) Ограничаването на калориите намалява оксидативния стрес чрез SIRT3-медиирано активиране на SOD2. Cell Metab 12(6):662–667

43. Santos P, Bittencourt AS, Schenberg LC, Carobrez AP (2006) Повишена оценка на T-лабиринт на тревожност и ефекти на паметта на NMDA/glycine-B сайт лиганди, инжектирани в дорзалното периакведуктално сиво вещество и горния коликулус на плъхове. Неврофармакология 51 (2): 203–212

44. Schriner SE, Abrahamyan A, Avanessian A, Bussel I, Maler S, Gazarian M, Holmbeck MA, Jafari M (2009) Намалени нива на митохондриален супероксид и повишена защита срещу паракват в Drosophila melanogaster, допълнена с Rhodiola rosea. Free Radic Res 43 (9): 836–843

45. Schriner SE, Lee K, Truong S, Salvadora KT, Maler S, Nam A, Lee T, Jafari M (2013) Удължаване на живота на Drosophila от Rhodiola rosea чрез механизъм, независим от диетични ограничения. PLoS ONE 8(5):e63886

46. ​​Schulz TJ, Zarse K, Voigt A, Urban N, Birringer M, Ristow M (2007) Ограничаването на глюкозата удължава продължителността на живота на Caenorhabditis elegans чрез индуциране на митохондриално дишане и увеличаване на оксидативния стрес. Cell Metab 6(4):280–293

47. Shih PH, Chan YC, Liao JW, Wang MF, Yen GC (2010) Антиоксидантни и когнитивни стимулиращи ефекти на богата на антоцианин черница (Morus atropurpurea L.) върху мишки с ускорено стареене и превенция на болестта на Алцхаймер. J Nutr Biochem 21 (7): 598–605

48. Simons MJP, Koch W, Verhulst S (2013) Диетичното ограничаване на гризачите намалява скоростта на стареене, без да засяга началната смъртност - мета-анализ. Старееща клетка 12 (3): 410–414

49. Sinclair DA (2005) Към единна теория за ограничаване на калориите и регулиране на дълголетието. Mech Aging Dev 126(9):987– 1002

50. Slack C, Foley A, Partridge L (2012) Активирането на AMPK от предполагаемия диетичен миметик метформин е недостатъчно за удължаване на живота при Drosophila. PLoS ONE 7(10):e47699

51. Slinkard K, Singleton VL (1977) Анализ на общ фенол: автоматизация и сравнение с ръчни методи. Am J Enol Vitic 28 (1): 49–55

52. Soh JW, Marowsky N, Nichols TJ, Rahman AM, Miah T, Sarao P, Khasawneh R, Unnikrishnan A, Heydari AR, Silver RB, Arking R (2013) Куркуминът е раннодействащ специфичен за стадия индуктор на разширена функционалност дълголетие при Drosophila. Exp Gerontol 48(2):229–239

53. Sohal RS, Buchan PB (1981) Връзка между физическата активност и продължителността на живота при възрастната домашна муха, Musca domestica. Exp Gerontol 16(2):157–162

54. Stenesen D, Suh JM, Seo J, Yu K, Lee KS, Kim JS, Min KJ, Graff JM (2013) Биосинтезата на аденозин нуклеотид и AMPK регулира продължителността на живота на възрастните и медиира ползата от дълголетието на калорийното ограничение при мухи. Cell Metab 17(1):101–112

55. Takahashi RN, Pamplona FA, Fernandes MS (2005) Канабиноидният антагонист SR141716A улеснява придобиването на памет и консолидацията в повдигнатия Т-лабиринт на мишката. Neurosci Lett 380(3):270–275

56. Takeda T (2009) Мишка с ускорено стареене (SAM) със специални препратки към модели на невродегенерация, мишки SAMP8 и SAMP10. Neurochem Res 34 (4): 639–659

57. Valenzano DR, Terzibasi E, Genade T, Cattaneo A, Domenici L, Cellerino A (2006) Ресвератролът удължава продължителността на живота и забавя появата на свързани с възрастта маркери при краткотрайни гръбначни животни. Curr Biol 16(3):296–300

58. Vivancos M, Moreno JJ (2005) Бета-ситостеролът модулира антиоксидантния ензимен отговор в RAW 264.7 макрофаги. Free Radic Biol Med 39 (1): 91–97

59. Wang PY, Koishi K, McGeachie AB, Kimber M, MacLaughlin DT, Donahoe PK, McLennan IS (2005) Мюлерианското инхибиращо вещество действа като фактор за оцеляване на моторните неврони in vitro. Proc Natl Acad Sci USA 102(45):16421–16425

60. Wang PY, Neretti N, Whitaker R, Hosier S, Chang C, Lu D, Rogina B, Helfand SL (2009) Дълготраен Indy и ограничаването на калориите взаимодействат, за да удължат продължителността на живота. Proc Natl Acad Sci USA 106(23):9262–9267

61. Weindruch R, Walford R (1982) Диетично ограничение при мишки, започващо на 1-годишна възраст: ефект върху продължителността на живота и спонтанната заболеваемост от рак. Наука 215 (4538): 1415–1418

62. Wood JG, Rogina B, Lavu S, Howitz K, Helfand SL, Tatar M, Sinclair D (2004) Активаторите на сиртуин имитират ограничаване на калориите и забавят стареенето при метазои. Nature 430 (7000): 686–689

63. Wu Z, Liu SQ, Huang D (2013) Диетичните ограничения зависят от състава на хранителните вещества за удължаване на хронологичния живот на пъпкуващи дрожди Saccharomyces cerevisiae. PLoS ONE 8(5): e64448

64. Xiao B, Sanders MJ, Underwood E, Heath R, Mayer FV, Carmena D, Jing C, Walker PA, Eccleston JF, Haire LF, Saiu P, Howell SA, Aasland R, Martin SR, Carling D, Gamblin SJ ( 2011) Структура на AMPK на бозайници и нейното регулиране от ADP. Nature 472 (7342): 230–233

65. Zainal TA, Oberley TD, Allison DB, Szweda LI, Weindruch R (2000) Ограничаването на калориите на маймуните резус намалява оксидативното увреждане в скелетните мускули. FASEB J 14 (12): 1825–1836

66. Zheng J, Mutcherson R, Helfand SL (2005) Ограничаването на калориите забавя окислителното увреждане на липидите в Drosophila melanogaster. Старееща клетка 4 (4): 209–216

【За повече информация:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】