Терапевтичен ефект на Cistanche Deserticola върху дефекацията при модел на плъх със сенилен запек
Mar 27, 2022
Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Xia Zhang, Fa-Juan Zheng, Zhen Zhang
Резюме
ЗАДЕН ПЛАН
Запекът е едно от хроничните стомашно-чревни функционални заболявания. Това сериозно засяга качеството на живот. Cistanche deserticola (C. deserticola) очевидно може да лекува запек, но механизмът му не е изяснен. Предполагахме, че неговият механизъм подобрява чревната подвижност чрез стимулиране на интерстициалните клетки на Cajal (ICC). Активирането на C-kit рецептора на повърхността на ICC е тясно свързано с функцията на ICC и факторът на стволовите клетки (SCF)/C-kit сигналните пътища играят важна роля в него. За да се изследва механизмът за това как C. deserticola лекува запек, това проучване имаше за цел да установи модел на запек при плъхове и да проучи ролята на SCF/C-kit сигналния път в лечението.
AIM
Да се изследват сигналните пътища на SCF/C-kit в ролята на C. deserticola за лечение на запек чрез модел на плъх за запек.
МЕТОДИ
Четиридесет и осем 8-месечни плъхове Sprague–Dawley бяха разделени на 4 групи по метода на произволно тегло: нормална група (n=12), моделна група (n=12), група C. deserticola (n=12) и блокираща група (n=12). Нормалната група получи нормален физиологичен разтвор чрез сонда; моделната група получава лоперамид чрез сонда; блокерната група получава лоперамид и C. deserticola чрез сонда и STI571 се инжектира интраперитонеално. По време на лечението теглото, фекалните гранули и качеството на изпражненията се записват на всеки 10 дни. На 20-ия ден след индукцията на модела, тъканите на дебелото черво на всяка група бяха отстранени. Оцветяването с хематоксилин и еозин се използва за наблюдение на патологичните промени. Нивата на експресия на SCF, C-kit и Aquaporin гени бяха открити чрез имунохистохимия, Western blotting и количествена полимеразна верижна реакция в реално време. Епителните митохондрии на дебелото черво и бокалните клетки се наблюдават чрез трансмисионна електронна микроскопия.
РЕЗУЛТАТИ
В сравнение с нормалната група, с напредване на лечението теглото на плъховете в групата модел и блокер намалява значително, теглото на изпражненията намалява и качеството на изпражненията е сухо (P < {{0}}.{{6}="" }5).="" c.="" deserticola="" обърна="" намаляването="" на="" телесното="" тегло="" и="" теглото="" на="" изпражненията="" и="" подобри="" качеството="" на="" изпражненията.="" хистопатологичният="" анализ="" показва,="" че="" епителът="" на="" лигавицата="" на="" дебелото="" черво="" в="" моделната="" група="" е="" непълен="" и="" подреждането="" на="" жлезите="" е="" неправилно="" или="" увредено.="" лечението="" с="" c.="" deserticola="" подобрява="" целостта="" и="" непрекъснатостта="" на="" епителните="" клетки="" и="" правилното="" подреждане="" на="" жлезите.="" блокиращите="" агенти="" инхибират="" ефектите="" на="" c.="" deserticola.="" имунохистохимията="" и="" количествената="" полимеразна="" верижна="" реакция="" в="" реално="" време="" показват,="" че="" експресията="" на="" scf="" и="" c-kitпротеин="" или="" гени="" в="" тъканта="" на="" дебелото="" черво="" на="" моделната="" група="" е="" намалена="" (p=""><0,05), докато="" лечението="" с="" c.="" deserticola="" повишава="" експресията="" на="" протеин="" или="" ген="" (p=""><0.05). western="" blotting="" показва,="" че="" експресията="" на="" аквапорин="" apq3="" е="" повишена,="" докато="" експресията="" на="" cx43="" намалява="" в="" моделната="" група.="" третирането="" с="" c.="" deserticola="" инхибира="" експресията="" на="" apq3="" и="" насърчава="" експресията="" на="" cx43.="" трансмисионната="" електронна="" микроскопия="" показа,="" че="" митохондриите="" на="" епитела="" на="" дебелото="" черво="" в="" моделната="" група="" са="" подути="" и="" подредени="" безредно,="" а="" микровилите="" са="" оскъдни.="" състоянието="" е="" по-добро="" в="" групата="" на="" c.="" deserticola.="" мишки,="" третирани="" с="" блокер="" на="" sti571,="" потвърдиха,="" че="" блокирането="" на="" пътя="" на="" scf/c-kit="" инхибира="" подобряването="" на="" запека="" от="" c.="">
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
C. deserticola подобрява дефекацията при плъхове със запек, а сигналният път на SCF/C-kit, който е ключова връзка на функцията на ICC, играе важна роля в лечението.
Ключови думи:Cistanche deserticola; сенилен запек; Фактори на стволови клетки; C-комплект
прясна суровина от цистанче
ВЪВЕДЕНИЕ
Сенилният запек (SC) е едно от често срещаните хронични стомашно-чревни функционални заболявания при гериатрични пациенти, което предизвиква или влошава мозъчно-съдови инциденти и други заболявания и сериозно засяга качеството на живот на по-възрастното население[1,2]. Според традиционната китайска медицина, основните етиологията и патогенезата на SC са стомашно-чревна топлина, дефицит на Yin и Jin и чревно овлажняване [3,4], докато Cistanche deserticola (C. deserticola) може да затопли бъбреците и да отпусне червата. Изследователите съобщават, че ефектът на чревния подобряването на моториката и лечението на SC е ясно, но механизмът му не е изяснен [5,6]. Интерстициалните Cajalcells (ICCs) са специален тип мезенхимни клетки в стомашно-чревния тракт. Активирането на C-kit рецептора на повърхността на ICCs е тясно свързано с клетъчната пролиферация, диференциация и функция. ICCs участват в патогенезата на много гастроинтестинални моторни дисфункции[7,8]. Активирането на C-kit зависи от свързването на неговия лиганд фактор на стволови клетки (SCF)[9]. За изследване на ефекта и механизма на действие на C. deserticola върху SC, това проучване има за цел да установи SC модел при плъхове, индуцирани от лоперидол, за да изследва ролята на SCF/C-kit сигналния път при лечението на запек от C. deserticola.
МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ
Експериментални материали
Експериментални животни:Експерименталните животни бяха 48 мъжки 8-месечни плъхове Sprague Dawley с тегло 500-550 g; всички закупени от Changsha Tianqin BiotechnologyCo. Ltd. Плъховете са отгледани в лабораторията за животни на Chongqing Weisiteng BiomedicalTechnology Co. Ltd., на нормална дневна и нощна светлина, храна и напитки. Всички процедури са в съответствие с насоките за управление, издадени от Комитета по етика на болницата за традиционна китайска медицина в Чунцин.
Първични реактиви:Първичните реагенти включват лоперамид (Sigma, St. Louis, MO, Съединени щати), C. deserticola от Hubei Jurui Traditional Chinese Medicine DecoctionCo. Ltd., STI571 от китайски Selleck Co. Ltd. и SCF, C-kit, конексин 43 (Cx43), аквапорин 3 (AQP3) и -актин антитела (Abcam, Cambridge, MA, Съединени щати), PrimeScript II 1-ва верига cDNA Комплект за синтез и премикс Taq™ (Ex Taq™ версия 2.0) (Takara Co. Ltd., Япония).
добавки с екстракт от билки Cistanche
Методи
Подготовка и групиране на SC модел:За да се избегне влиянието на объркващи фактори като телесно тегло върху експерименталните резултати, плъховете бяха групирани на случаен принцип по метода на блоково случайно групиране. Четиридесет и осем плъха бяха хранени адаптивно за 1 седмица и плъховете бяха номерирани по реда на теглото от леки до тежки. Според реда на телесното тегло, плъховете бяха разделени на 12 зони (теглото на плъховете във всяка зона беше подобно), с 4 плъха във всяка зона. 12-те зони бяха разделени на 4 групи по 12 (нормален, модел, C. deserticola и блокер). На плъховете в моделната група е даден лоперамид (0.0625/100 g, 10 mL/kg) чрез сонда. Първата доза чрез сонда се удвоява и лекарството се дава в 10:00 всеки ден, веднъж на ден в продължение на 20 последователни дни. На нормалната група е дадено същото количество нормален физиологичен разтвор чрез сонда. В допълнение, моделната група беше третирана с C. deserticola (0.156 g/100 g, 10 ml/kg) чрез сонда. На блокерната група беше даден C. deserticola (0,156 g/100 g, 10 mL/kg) чрез сонда и STI571 (25 mg/mL, 1 mL/kg) чрез интраперитонеална инжекция. По време на експеримента телесното тегло, теглото на изпражненията и състоянието на изпражненията се записват на всеки 10 дни. Не е настъпила случайна смърт при нито един от плъховете. Двадесет дни по-късно плъховете бяха убити и тъканта на дебелото черво беше отстранена за изследване и консервиране в течен азот. Останалите части бяха фиксирани и вградени.
Хистопатологичен анализ:Плъховете, гладуващи една нощ, бяха анестезирани чрез интраперитонеална инжекция със 7 процента хлоралхидрат (5 mL/kg) на следващия ден. Коремът беше отворен, за да се отдели тъканта на дебелото черво и 8-10 mm от дебелото черво беше отстранено. Чревното съдържимо се отстранява чрез леко разклащане в предварително охладен полибутиленсукцинат и се фиксира за 24 часа в 4-процентен фиксиращ разтвор на параформалдехид. Извършено е конвенционално вграждане с парафин. Тъканните срезове (5 μm) се отстраняват за оцветяване с хематоксилин и еозин и хистопатологичната морфология се наблюдава под микроскоп.
Откриване на експресия на SCF и C-kit чрез имунохистохимично оцветяване:Парафиновите тъкани, изследвани чрез хистопатология по-горе, бяха нарязани, рехидратирани с нарязан на секции ксилен депарафинизиран градиентен етанол, антигенът беше коригиран чрез нагряване и запечатани за 1 час с кози серум при стайна температура. SCF и C-kit първични антитела бяха добавени на капки и тъканите бяха държани една нощ при 4 градуса. След изплакване с полибутиленсукцинат, пероксидазата от хрян се накапва, за да се маркира вторичното антитяло, изплаква се с полибутилен сукцинат за 5 минути, капва се 2,4-диаминомаслена киселина хромогенен разтвор, повторно се оцветява с хематоксилин, дехидратира се с обратен градиент алкохол, транспаризира се с ксилен и неутрален разтвор уплътнение от смола. Микроскопски ядрата са пурпурно-сини, а положителните резултати са кафяво жълти или жълти частици.
Откриване на експресия на C-kit mRNA в тъкан на дебелото черво чрез количествена полимеразна верижна реакция в реално време (RT-qPCR):Замразена тъкан на дебелото черво на плъх се смила с хомогенизатор и се добавя 1 mL RNAiso Plus. Общата РНК от тъкан на дебелото черво се екстрахира чрез метода на хлороформ/изопропанол и качеството на РНК се открива чрез гел електрофореза. След идентифициране от Bio-Rad гел изображение, 1 ug РНК се транскрибира обратно в сДНК от Takara PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit. Според базата данни на NCBI Gene ID: 64030, CDS регионът на C-kit гена беше намерен и комбиниран с NCBI Primer-Blast дизайн Праймерна последователност, която беше синтезирана от Sangon Biotech Co. Ltd, C-kit праймерна последователност, сенс верига 5'-AGGT GTACCGTTCCTGTCCC-3', антисенс верига 5'-GGCTGGATTTGCTCTTTGCTGT-3', - актинова сенс верига 5'-CTTCCTTCCTGGGTATGGAATC-3', антисенс верига 5'-CTGTGTTGGCATAGAGGTCTT-3'. PCR амплификацията се извършва на Bio-RadCFX90 PCR инструмент в реално време. Условията за PCR анализ бяха първоначална денатурация при 95 градуса за 5 минути, 30 цикъла от 95 градуса за 30 секунди, 60 градуса за 30 секунди и 72 градуса за 1 минута, последвано от окончателно удължаване при 72 градуса за 10 минути. 2-ΔΔCt (ΔCt=Ct стойност - -актин Ctvalue) беше взето за анализ на относителната генна експресия.
Откриване на нивото на протеинова експресия на Cx43 и AQP3 в тъкан на дебелото черво чрез Western blotting:Около 1 cm замразена тъкан на дебелото черво беше събрана и лизирана с RIPA силна пиролиза течност (100 μL). Тъканта се хомогенизира със стъклохомогенизатор 20 пъти и се прехвърля в 1.5 mL центрофужна епруветка. Супернатантата се екстрахира след центрофугиране при 12000 rpm при 4 градуса за 5 минути и концентрацията на общия протеин в супернатантата се определя по метода BCA. Отстранихме 25 ug денатуриран протеин, за да извършим електрофореза с натриев додецилсулфат-полиакриламиден гел и след това прехвърлихме протеините в гела към поливинилиден флуоридембрана при постоянен ток от 200 mA, след което запечатахме с 5% обезмаслено мляко, ограничаващо течността за 2 часа при стайна температура. Съответните първични антитела се разреждат със запечатваща течност, инкубират се при 4 градуса за една нощ, след това се промива резистентността на мембраната и се добавят втори антитела. След добавяне на ECL течност те бяха поставени под експонометра за тест чрез анализ на оптична плътност.
Трансмисионна електронна микроскопия:Взехме около 1 cm проксимална тъкан на дебелото черво, фиксирахме я в 2,5 процента глутаралдехид за 24 часа, дехидратирахме я с градуиран ацетон, вградихме я в Epon812 и изрязахме ултратънки срезове от 50 nm на ултрамикротом. Срезовете се оцветяват с ураниев диоксид ацетат и течност за боядисване на оловен цитрат при стайна температура в продължение на 10 минути. Наблюдавахме въси на дебелото черво, митохондриите на епителните клетки и бокалните клетки под трансмисионен електронен микроскоп Philips Tecnai-10.
Статистически анализ
Софтуерът SPSS 19.0 беше използван за анализ на данни, а софтуерът GraphPad Prism8.4 беше използван за изобразяване на резултатите. Тестът на Shapiro-Wilk беше използван за тестване на нормалността. Данните с нормално разпределение бяха представени чрез средно ± SD. Елементите за грешка бяха използвани за представяне на средната стойност ± SD на хемоглобина след лечението. T-тестът на студента беше използван за сравнение между две групи. Анализът на дисперсията беше използван за сравнение между множество групи. Методът Student-Newman-Keuls беше използван за сравнение между множество групи по двойки, а тестът на Dunnett беше използван за измерване на разликите между всяка експериментална група и контролна група последователно. проведено. Ако тестът за сферичност показа P > 0.{{10}}5, беше използван дисперсионен анализ на данните от повторното измерване. Ако P < 0,05,="" беше="" взето="" обобщеното="" уравнение="" за="" оценка.="" данните,="" които="" не="" съответстват="" на="" нормалното="" разпределение,="" бяха="" представени="" с="" m="" (p25,="" p75),="" а="" тестът="" за="" ранг-сума="" на="" kruskal-wallis="" h="" беше="" използван="" за="" сравнение="" между="" групите.="" тестът="" χ2="" е="" използван="" за="" сравнение="" между="" групите,="" когато="" данните="" са="" неподредени="" данни,="" а="" тестът="" χ2="" на="" pearson="" е="" използван,="" ако="" делът="" на="" клетките="" с="" теоретична="" честота="">< 5="" е="">< 20="" процента.="" ако="" делът="" на="" клетките="" с="" теоретична="" честота="">< 5="" е="" по-голям="" или="" равен="" на="" 20="" процента,="" се="" използва="" точният="" тест="" на="" фишер.="" p=""><0.05 беше="" използвано,="" за="" да="" се="" определи,="" че="" разликата="" е="" статистически="">
Фигура 1 Хистопатологични промени на дебелото черво.
РЕЗУЛТАТИ
Общи условия
Един ден след прилагането на лоперамид чрез сонда в сравнение с нормалната група, телесното тегло и теглото на изпражненията в моделната група бяха значително намалени (P < {{0}}.05),="" но="" нямаше="" значителна="" разлика="" в="" качеството="" на="" изпражненията="" резултат="" (p=""> 0,05). Лечението с C. deserticola в моделната група забави намаляването на телесното тегло и теглото на изпражненията (P< 0.05),="" but="" the="" bodyweight="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" reduced.="" after="" 10="" d="" of="" treatment,="" compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" body="" weight="" and="" stool="" volume="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" were="" further="" significantly="" reduced,="" and="" the="" stools="" were="" dry="" and="" almost="" contained="" no="" water="" (p="" <="" 0.05).="" the="" body="" weight="" loss="" of="" rats="" was="" also="" significantly="" reduced="" by="" treatment="" with="" c.="" deserticola="" (p="" <="" 0.05).="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" blocker="" group="" was="" not="" significantly="" different="" from="" that="" in="" the="" model="" group="" (p="" >="" 0.05).="" on="" day="" 20="" before="" sampling,="" the="" bodyweight="" of="" rats="" in="" the="" model="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" normal="" group,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.05),="" while="" the="" weight="" loss="" caused="" by="" constipation="" was="" inhibited="" by="" c.="" deserticola="" treatment,="" and="" the="" stool="" quality="" score="" was="" decreased="" (p="" <="">
Хистопатология на дебелото черво
Оцветяването с хематоксилин и еозин на тъкан на дебелото черво на плъхове е показано на фигура 1. В нормалната група чревните власинки са непокътнати, чревната лигавица е непокътната и непрекъсната, клетките и жлезите са подредени редовно. Мукозата и субмукозата не са инфилтрирани от възпалителни клетки и тъканната структура е нормална. В моделната група чревните власинки и лигавицата бяха до голяма степен унищожени, локалните власинки бяха отделени и разхлабени, а част от жлезистата структура изчезна. В групата с C. deserticola хистопатологичното оцветяване е по-малко от това на моделната група, но има некроза в някои бокалисти клетки. След интраперитонеално инжектиране в групата на блокера, в сравнение с групата на C.deserticola, все още имаше локална загуба на чревни власинки и имаше фрактура и загуба на чревна лигавица.
Фигура 2 Експресия на фактор на стволови клетки и съотношение на относителна оптична плътност в тъкан на дебелото черво чрез имунохистохимично откриване.
Откриване на експресия на фактор на стволови клетки и C-kit протеин чрез имунохистохимично оцветяване
Имунохистохимичното оцветяване показва, че SCF и C-kit са експресирани в дебелото черво на контролната група. В сравнение с контролната група, експресията на SCF и C-kit в моделната група беше значително намалена (P < 0.05).="" в="" сравнение="" с="" моделната="" група,="" експресията="" на="" scf="" и="" c-kit="" в="" групата="" на="" c.="" deserticola="" беше="" значително="" повишена="" (p="">< 0.05).="" нямаше="" разлика="" в="" експресията="" на="" scf="" и="" c-kit="" между="" групите="" блокер="" и="" модел="" (p=""><0,05, фигури="" 2="" и="">
RT-qPCR
RT-qPCR showed that expression of C-kit mRNA in the model group was significantly lower than in the normal group (Figure 4, P < 0.05). Compared with the model group, C-kit in the C. deserticola group was significantly increased (P < 0.05). There was no significant difference in C-kit mRNA level between the model and blocker groups (P >0.05). Тези резултати показват, че експресията на C-kit, коригирана от C. deserticola, участва в подобряването на запека, а блокерите инхибират ефикасността на C. deserticola.
ползи от цистанче салса
Western blotting
Western blotting показа, че протеинът AQP3 се експресира на ниско ниво в нормалната контролна група, докато беше значително увеличен в моделната група в сравнение с контролната група (Фигура 5) (P < 0.05)="" .="" експресията="" на="" aqp3="" протеин="" беше="" намалена="" след="" лечение="" с="" c.="" deserticola="" и="" инхибиторният="" ефект="" на="" c.="" deserticola="" върху="" експресията="" на="" aqp3="" беше="" инхибиран="" от="" лечение="" с="" блокер="" (p=""><0,05). експресията="" на="" cx43="" беше="" противоположна="" на="" тази="" на="" aqp3.="" тези="" резултати="" предполагат,="" че="" фармакологичният="" ефект="" на="" c.="" deserticola="" върху="" плъхове="" с="" sc="" е="" постигнат="" чрез="" насърчаване="" на="" експресията="" на="" cx43="" и="" инхибиране="" на="" експресията="" на="" aqp3="" (фигури="">
Трансмисионна електронна микроскопия
След индукция с лоперамид, митохондриално подуване и аутофагия се наблюдават в някои от епителните клетки на лигавицата на дебелото черво в моделната група. Броят и дължината на чревните микровили намаляха и се появи пикноза на чашкообразните клетки (Фигура 8). След третиране с C. deserticola броят на чревните микровили се увеличава. Микровилите бяха спретнато подредени и структурата беше завършена. Бокалистите клетки са с по-къса дължина, неправилна морфология на митохондриите и тежка пикноза на гоблетните клетки.
Фигура 3 Експресия на C-kit и съотношение на относителна оптична плътност в тъкан на дебелото черво чрез имунохистохимично откриване.
ДИСКУСИЯ
Запекът е често срещан при по-възрастното население и е един от честите симптоми, които влияят върху здравословното състояние и качеството на живот на възрастните хора[10,11]. От гледна точка на традиционната китайска медицина, Bai et al [12] вярват, че основната патогенеза на SC е дисфункцията на проводната функция на дебелото черво, сенилна телесна недостатъчност, постепенна загуба на чернодробни и бъбречни функции, липса на Чи и кръв и загуба на телесна течност ,което доведе до сухи изпражнения, водещи до запек[13]. SC оказва натиск върху пациентите и техните семейства в много аспекти и е важно да се изследва неговата патогенеза.
C. deserticola има функцията да тонизира бъбреците Ян, да благоприятства кръвта и да регулира имунитета на тялото [14]. C. deserticola и китайски билков отвар, съдържащ C. deserticola са били широко използвани при лечението на запек и клиничният ефект е забележителен. Du et al [15] откриха при плъх модел на дефицит на Yang и запек, че C. deserticola подобрява амплитудата на свиване на изолираното дебело черво, засилва контрактилитета на чревния тракт и връща нивото на стомашно-чревните хормони до нормалното. В допълнение, диетичните фибри на C. deserticola, страничен продукт от обработката на C. deserticola, подобряват капацитета за задържане на вода на изпражненията и имат предимството на ниска доза и добър ефект при подхранване на червата и подобряване на дефекацията [16]. Нашето проучване установи, че лечението с C. deserticola подобрява фекалната влажност и хистопатологията на дебелото черво на плъхове със запек.
ICC се намират в целия чревен тракт и играят жизненоважна роля в невронния контрол на движението на червата като пейсмейкъри и трансмисия на чревни нерви[17]. Протоонкоген кодираща рецепторна тирозин киназа, C-kit, се експресира от ICC, а SCFi е лиганд на C-комплект[18]. Системата SCF/C-kit е от решаващо значение за развитието на ICCs. Сигналната пътека на SCF/C-kit е анализирана по време на лечение на констипация с бавен трансфер при плъхове чрез акупунктура[19]. Електроакупунктурата в точката Tianshu увеличи броя на ICC на дебелото черво при мишки, третирани с ACK2-, повиши експресията на SCF и C-kit протеини и обърна фенотипа на ICC. Предписанието за ободряване на qi и далака може да увеличи експресията на ICC в тъканта на дебелото черво и да регулира експресията на C-kit и SCF иРНК, като по този начин подобрява симптомите на запек [20]. В нашето изследване имунохистохимията показа, че C. deserticola значително повишава експресията на SCF и C-kit протеин в модел на SC на плъх, а RT-qPCR показва, че C. deserticola значително повишава експресията на C-kitmRNA. Блокерът на C-kit инхибира повишената регулация на експресията на SCF и C-kit, индуцирана от C. deserticola.
Съдържанието на фекална вода и транспортирането на вода в дебелото черво са тясно свързани с AQP, които играят важна роля в метаболизма на чревната вода [21]. В проучване на плъхове със запек при бавен транспорт, отвара от дефекация значително подобрява симптомите на запек чрез регулиране на чревната абсорбция на вода чрез понижаване на AQP3 и AQP4[22]. В модел на функционален запек при плъх, механизмът на лечение с орален Xiaofu Tongjie Fluid за функционален запек може да се реализира чрез регулиране на експресията на вазоактивен интестинален полипептид и AQP3 в дебелото черво[23]. Пролуките играят съществена роля в медиирането на синхронното свиване на гладкомускулните клетки. Cx43 е най-важният протеин по време на този процес[24]. Загубата на експресия на Cx43 може да бъде частично отговорна за двигателната дисфункция на гладката мускулатура [25]. Възстановяването на мрежовата структура на чревната нервна система при плъхове с бавен транзитен запек може да подобри експресията на Cx43 и т.н. и симптомите на запек [26]. Тези резултати показват, че повишената експресията на AQP3 намалява съдържанието на фекална вода, което води до запек, което може да бъде важен механизъм на запек. Експресията на Cx43 може да бъде свързана със свиването на гладката мускулатура на червата и да намали появата на запек. В нашето проучване Western blottings показа, че експресията на Cx43 е повишена и експресията на AQP3 е инхибирана от лечение с C. deserticola, което води до повишена контракция на гладката мускулатура и намалена абсорбция на вода, а лечението с блокер обръща тези ефекти.
За повече информация, моля, щракнете тук.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В заключение, C. deserticola може да инхибира експресията на AQP3 и да насърчи експресията на Cx43 чрез пътя на SCF/C-kit, като по този начин подобрява констипацията, предизвикана от лоперамин, и намалява увреждането на тъканите на дебелото черво при възрастни плъхове. Това проучване предостави добра теоретична основа за клиничната употреба на C. deserticola.
