Част 2: Цистанозид от Cistanche Herba облекчава причинените от хипоксия репродуктивни увреждания при мъжете чрез потискане на оксидативния стрес

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Fengqi Yan1*, Xiaoliang Dou1*, Guangfeng Zhu1*, Mingyuan Xia1, Yahui Liu3, Xiaozi Liu3, Guojun Wu2, HeWang1, Bo Zhang1, Qiuju Shao4, Yong Wang1

НАТИСНЕТЕ ТУК ЗА ЧАСТ 1

Резултати

Ефекти от хипоксия върху GC-1 клетки

За да определим ефектите от хипоксията върху зародишните клетки, първо изследвахме промените в жизнеспособността на клетките след лечение с хипоксия с различни концентрации на кислород (20 процента, 15 процента, 10 процента, 5 процента) за 1,3, 5, и съответно 7 дни. Резултатите от анализа на CCK-8 показват, че в сравнение с контролната група (20 процента концентрация на кислород), клетките, изложени на хипоксия, показват значително намаляване на жизнеспособността (P <0,01; фигура="" 1a).="" освен="" това="" степента="" на="" тяхното="" оцеляване="" е="" обратно="" пропорционална="" на="" концентрацията="" на="" кислород="" и="" допълнително="" намалява="" с="" времето="" на="" индукция.="" за="" да="" се="" избегне="" прекомерен="" цитотоксичен="" ефект,="" 10="" процента="" концентрация="" на="" кислород="" и="" 3-дневно="" индукционно="" време="" бяха="" избрани="" като="" критерии="" за="" хипоксичния="" модел="" за="" последващи="" експерименти="" in="">

Впоследствие беше извършено FCM и имунофлуоресцентно оцветяване, за да се оцени допълнително промяната на пролиферацията на GC-1 клетки при лечение с хипоксия. Резултатите показват, че хипоксията може да индуцира спиране на GC-1 клетките във фазата G1, като по този начин намалява навлизането на клетките в S фазата и инхибира репликацията на ДНК. По този начин хипоксията значително намалява индекса на пролиферация наGC{{0}} клетки (P <0,01; фигура="" 1b).="" положителното="" ki-67оцветяване="" е="" друг="" специфичен="" биомаркер="" за="" пролифериращи="" клетки.="" следователно,="" ние="" също="" изследвахме="" съотношението="" на="" ki-67-положителните="" клетки="" със="" или="" без="" лечение="" с="" хипоксия.="" в="" сравнение="" с="" контролната="" група,="" лечението="" с="" хипоксия="" забележително="" намалява="" ki-67-положителните="" клетки,="" както="" е="" показано="" на="" фигура="">

След това имахме за цел да изследваме начина на инхибиране на жизнеспособността на клетките на GC{{0}}, предизвикано от хипоксия. Както се съобщава в литературата, нивото на ROS се повишава, когато плъховете са били изложени на хипобарна хипоксична среда [8, 20]. Следователно нивата на ендогенни ROS в GC-1 клетки бяха измерени с помощта на FCM анализ. Резултатите показват по-високи нива на ROS при хипоксия в сравнение с групата с нормален кислород (P <0,01; фигура="" 1d).="" натрупаните="" ros="" причиняват="" значително="" увреждане="" на="" днк,="" което="" от="" своя="" страна="" причинява="" активиране="" на="" пътя="" на="" клетъчната="" апоптоза="" и="" може="" да="" бъде="" основният="" етиологичен="" фактор="" за="" нарастващия="" риск="" от="" мъжко="" безплодие="" [21,="" 22].="" след="" това="" открихме="" ефекта="" на="" апоптотично="" активиране="" на="" хипоксията="" върху="" gc-1="" клетки="" чрез="" оцветяване="" с="" tunel.="" както="" е="" показано="" на="" фигура="" 1е,="" лечението="" с="" хипоксия="" води="" до="" повишаване="" на="" флуоресценцията="" на="" tunel="" в="" сравнение="" с="" контролната="" група,="" което="" показва="" увеличаване="" на="" апоптозата="" в="" моделната="">

лечение на диабет с добавка Cistanche

Тъй като ROS-индуцираното увреждане на клетките обикновено се причинява от OS, тествахме допълнително OS на GC-1клетки. Както е представено на Фигура 1F, нивата на LPO на GC-1 клетки в моделната група бяха значително повишени в сравнение с нивата на LPO на GC-1клетки в контролната група. Тези констатации предполагат, че индуцираното от хипоксия GC-1 клетъчно увреждане може да е свързано с OS, което се индуцира от натрупване на ROS.

Ефекти на Cis върху индуцирана от хипоксия GC{1}} клетъчна жизнеспособност in vitro.

Да се ​​изследва далицисможе да предотврати инхибиторните ефекти на хипоксията върху жизнеспособността на клетките на GC{{0}}, беше извършен анализ на CCK-8. GC-1 клетки бяха третирани с различни подтипове (Cis-A, B, C, H) и диапазони на концентрация (0.02 μM, 0.2 μM, 2 μM ) на Cis за 72 часа. Сравнението на моделната група с групата на DMSO показа, че DMSO не насърчава директно жизнеспособността на клетките GC{{10}} (Фигура 2А). Жизнеспособността на клетките обаче беше значително възстановена (P < 0.05)="" с="" лечение="" с="" cis.="" в="" сравнение="" с="" моделната="" група,="" всички="" cis-a,="" cis-b,="" cis-c="" и="" cis-h="" показват="" определени="" защитни="" ефекти="" върху="" предизвиканото="" от="" хипоксия="" увреждане="" на="" gc-1="" клетъчната="" жизнеспособност,="" а="" cis-b="" показва="" най-значимия="" ефект="" (фигура="" 2а).="" защитните="" ефекти="" на="" cis="" при="" 0.2="" μm="" са="" значително="" по-високи="" от="" защитните="" ефекти="" на="" cis="" при="" 0.02="" μm,="" докато="" разликата="" между="" 2="" μm="" и="" 0.2="" μm="" не="" е="" очевидна,="" което="" показва,="" че="" възстановеният="" gc{="" {29}}="" клетъчната="" жизнеспособност,="" индуцирана="" от="" cis,="" демонстрира="" зависимо="" от="" дозата="" увеличение="" в="" диапазона="" на="" концентрация="" от="" 0.02-0.2="" μm="" (фигура="" 2а).="" следователно,="" в="" съответствие="" с="" експерименталните="" нужди,="" 0,2="" μm="" cis="" беше="" избрано="" като="" оптимална="" концентрация="" в="" следващите="" in="" vitro="" експерименти.="" за="" по-нататъшно="" потвърждаване="" дали="" зародишните="" клетки="" наистина="" са="" били="" защитени="" от="" cis,="" беше="" извършено="" fcm="" и="" ki-67="" оцветяване,="" за="" да="" се="" оцени="" промяната="" в="" пролиферацията="" на="" gc-1="" клетки="" след="" третиране="" с="" cis.="" при="" третиране="" с="" cis="" делът="" на="" gc="" -1клетките="" във="" фаза="" g1="" бяха="" намалени.="" обратно,="" повече="" клетки="" навлязоха="" в="" s="" фазата,="" което="" предполага,="" че="" cis-третирането="" може="" да="" увеличи="" индекса="" на="" пролиферация="" на="" зародишни="" клетки="" (p=""><0.01; фигура="" 2b).="" статистиката="" за="" клетъчния="" цикъл="" на="" gc-1="" е="" показана="" на="" фигура="" 2bb.="" резултатите="" от="" оцветяването="" с="" ki-67="" също="" показват,="" че="" лечението="" с="" cis-a,="" cis-b,="" cis-c="" и="" cis-h="" значително="" подобрява="" съотношението="" на="" ki-67-позитивните="" клетки="" на="" gc,="" индуциран="" от="" хипоксия-1="" клетки="" in="" vitro="" (фигура="">

Фигура 2. Цис възстановена жизнеспособност на GC-1 клетки, предизвикана от хипоксия.

Механизмът на Cis предпазва зародишните клетки от хипоксия in vitro.

За да се изследва дали защитните ефекти на Cis върху GC-1 клетките са свързани с отстраняването на прекомерните ROS, флуоресцентното багрило DCFH-DA беше използвано за откриване на нивата на ROS във всяка група. Както е показано на Фигура 3A, 3B, лечението с DMSO не променя вътреклетъчното съдържание на ROS или нивото на LPO в сравнение с моделната група. Въпреки това, нивата на ROS в GC-1 клетките бяха значително намалени в групите, третирани с Cis (Фигура 3А). Освен това, намаление на LPO също се наблюдава в GC-1 клетки, подложени на Cis (Фигура 3B).

За по-нататъшно изследване на механизма, чрез който Cis защитава зародишните клетки от хипоксично увреждане, бяха извършени TUNEL-оцветяване и Western blot анализи за оценка на апоптозата. TUNEL оцветяването (Фигура 3C) показва значителна апоптоза в модела и DMSO групите. Въпреки това, по-малко апоптотични клетки са наблюдавани при лечение с Cis, което показва, че лечението с Cis намалява GC-1 клетъчната апоптоза. Освен това, експресията на PARP, Caspase-3, Bax и Bcl-2 беше измерена, за да потвърди молекулярния механизъм. Както е представено на фигура 3D, каспаза-3и PARP се активират в GC-1 клетки при хипоксия и това активиране се инхибира от Citreatment. В допълнение, съотношението Bax/Bcl-2е по-високо в моделната група, отколкото в контролната група, и лечението с Cis намалява съотношението Bax/Bcl-2 (Фигура 3D). Тези данни показват, че Cis има потенциален капацитет да намали предизвиканото от хипоксия оксидантно увреждане и този защитен ефект може да бъде постигнат чрез намаляване на натрупването на ROS и инхибиране на свързаната с каспаза активация на пътя на апоптоза.

Ензимният механизъм, инхибиращ OS, включва ловчи на свободни радикали като глутатион редуктаза (GR), глутатион пероксидаза (GPx) и супероксид дисмутаза (SOD) [23]. Ензимният механизъм, инхибиращ OS, играе съществена роля в предотвратяването на окислително увреждане в клетките и тъканите [23]. ]. За по-нататъшно валидиране на потенциалния механизъм на Cis инхибиране на индуцираната от хипоксия OS в GC-1 клетки, бяха измерени активностите на GR, GPx и SOD. Резултатите разкриха, че активностите на GR, GPx и SOD значително (P < 0.01,="" фигура="" 3e)="" намаляват="" при="" хипоксия="" в="" сравнение="" с="" контролните="" групи,="" а="" лечението="" с="" cis="" значително="" възстановява="" техните="" активности="" в="" gc="" -1="" клетки,="" изложени="" на="" хипоксия="" (p=""><0,05, фигура="" 3e),="" което="" предполага,="" че="" тези="" съединения="" могат="" да="" активират="" мощния="">антиоксидантсистема.

Фигура 3. Механизмът, чрез който Cis предпазва GC-1 клетките от увреждане, предизвикано от хипоксия.

Ефекти на Cis върху репродукцията при плъхове, предизвикани от хипобарихипоксия.

Да се ​​определят ефектите на хипобаричнияхипоксиявърху мъжки плъхове, първо тествахме морфологични изменения на тестисите при плъхове, предизвикани от хипобарна хипоксия. Резултатите от оцветяването с HE показват, че в контролната група нормалните сперматогенни клетки на различни етапи са подредени по подреден начин от базалната мембрана до лумена, а зрелите сперматозоиди са видими лумени на интубулите (Фигура 4А). В сравнение с контролите, в моделната група са наблюдавани патологични изменения на тестикуларната тъкан, базалната мембрана на епителните клетки на тестисите е подредена свободно, сперматогенният епител е изключително тънък и нивото и броят на зародишните клетки са значително намалени (Фигура 4А). Въпреки това, лечението с Cis забележително подобрява хистологията на индуцираното от хипобарична хипоксия увреждане на тестисите in vivo (Фигура 4А). Ние също така измерихме телесното тегло, теглото на тестисите, теглото на епидидима и теглото на семенните везикули на жлезите, което доведе до изчисляването на индекса на репродуктивния орган (съотношението репродуктивен орган/телесно тегло). Както е показано на Фигура 4B-D, индексът на репродуктивния орган (тестиси, епидидимис и жлеза на семенните везикули) е значително по-нисък в моделната група (P < 0.01),="" отколкото="" в="" контролната="" група.="" въпреки="" това,="" ефектът="" от="" хипобарната="" хипоксия="" върху="" репродуктивния="" органен="" индекс="" на="" плъхове="" е="" обърнат="" с="" лечението="" с="" cis="" (фигура="">

След това, активността на акрозомния ензим и скоростта на живите сперматозоиди на сперматозоидите на мъжки плъх също бяха измерени, за да се изясни увреждането на функцията на тестисите. Както е показано на Фигура 4E, 4F, акрозомеензимната активност и подвижността на сперматозоидите са по-ниски в моделната група плъхове, отколкото в контролната група (P < 0.01).="" въпреки="" това,="" в="" сравнение="" с="" плъхове="" в="" моделната="" група,="" активността="" на="" акрозомния="" ензим="" се="" възстановява="" при="" плъхове,="" третирани="" с="" 8="" mg/kg/ден="" cis(p="">< 0.05)="" (фигура="" 4d).="" освен="" това,="" както="" е="" показано="" на="" фигура="" 4f,="" лечението="" с="" cis="" също="" повишава="" скоростта="" на="" живи="" сперматозоиди;="" всички="" плъхове,="" третирани="" с="" 8="" mg/kg/d="" cis,="" показват="" значително="" повишен="" процент="" живи="" сперматозоиди="" (55,83="" ±="" 6,03="" процента,="" p="">< 0,05;="" 69.00="" ±="" 2,29="" процента,="" p="">< 0,01;="" 52,33="" ±="" 3,40="" процента,="">< 0.05;="" and="" 53.67="" ±="" 2.25%,="" p="" <="" 0.05="" respectively)="" when="" compared="" with="" the="" model="" rats="" (43.83="" ±="">

Взети заедно, тези резултати предполагат, че хипобарната хипоксична среда води до морфологични изменения на тестисите, загуба на тегло на репродуктивните органи и увреждане на функцията на тестисите при мъжки плъхове, а Cis може ефективно да защити репродуктивните органи от увреждане, предизвикано от хипоксия.

Фигура 4. Ефекти на Cis върху репродуктивната система на плъхове, изложени на хипобарна хипоксия.

Ефекти на Cis върху OS в тестисите на индуцирани от хипобарихипоксия плъхове.

Нивата на ROS и LPO в тестисите на плъхове бяха измерени, за да се анализират ефектите на Cis върху индуцирана от хипобарна хипоксия OS. Анализът на ROS разкрива, че в сравнение с контролната група нивата на ROS в тестисите в моделната група са значително повишени (P < 0.01="" фигура="" 5a).="" обратно,="" lpo="" е="" драстично="" повишен="" в="" тестисите="" (p="">< 0.01)="" при="" хипобарна="" хипоксия="" в="" сравнение="" с="" нормоксични="" условия="" (фигура="" 5b).="" въпреки="" това,="" лечението="" с="" cis="" промени="" горните="" промени="" (p=""><0,05), при="" които="" cis-b="" упражнява="" по-добри="" ефекти="" от="" други="" cis="" (фигура="" 5a,="" 5b).="" смята="" се,="" че="" предпазва="" тестисите="" чрез="" намаляване="" на="" ос="" при="" хипобарични="" хипоксични="" условия="" in="">

Освен това,апоптозабяха извършени анализи за по-нататъшна оценка на механизма, чрез който Cis защитава срещу увреждане на функцията на тестисите, предизвикано от хипобарна хипоксия. Резултатите от оцветяването с TUNEL (Фигура 5C) показват, че съществува значителна апоптоза в моделната група в сравнение с контролната група. Въпреки това, след лечение с Cis (8 mg/kg/ден), се наблюдават по-малко апоптотични клетки (P < 0.05)="" (фигура="" 5c).="" данните="" от="" westernblot="" също="" така="" показаха,="" че="" хипоксията="" и="" хипобарното="" лечение="" водят="" до="" активиране="" на="" caspase-3="" и="" parp="" и="" повишено="" съотношение="" bax/bcl-2="" в="" тъканта="" на="" тестисите,="" което="" показва="" увеличаване="" на="" апоптозата="" (фигура="" 5d).="" в="" допълнение,="" различни="" видове="" лечения="" с="" cis="" значително="" намаляват="" апоптозата="" в="" тестикуларната="" тъкан="" (фигура="" 5d).="" по="" подобен="" начин="" ihc="" анализът="" на="" тестикуларната="" тъкан="" показва="" подобни="" резултати="" (допълнителна="" фигура="">

За да проверим механизма на Cis-редуцирана OS, предизвикана от хипобарна хипоксия, тествахме допълнително активността на GR, GPx и SOD в тестикуларната тъкан. Както е показано на Фигура 5E, в сравнение с контролната група, лечението с хипобарна хипоксия значително намалява активността на GR, GPx и SOD (P < 0.01).="" лечението="" с="" cis="" обаче="" възстановява="" ензимните="" активности="" (gr,="" gpx="" и="" sod)="" на="" тъканта="" на="" тестисите="" при="" плъхове,="" третирани="" с="" хипобарна="" хипоксия="" (p=""><0,05). в="" заключение,="" cis="" изглежда="" предпазва="" тестисите="" чрез="" активиране="" на="" мощен="" ендогенен="" антиоксидантен="" ензимен="" защитен="" механизъм="" при="" условия="" на="" хипобарна="">

Фигура 5. Ефектът на Cis върху OS в тестисите на плъхове, предизвикани от хипобарна хипоксия.

Дискусия

Известно е, че в райони с голяма надморска височина хипобарната хипоксия засяга множество системи при хората, включителномъжки репродуктивен[4, 20]. Последните експериментални изследвания са насочени към разбиране на механизмите за това как хипобарната хипоксия уврежда мъжката репродуктивна система. В това проучване е изследван терапевтичният ефект на Cis екстракт от Cistanches Herba върху индуцирано от хипоксия репродуктивно увреждане. Резултатите показват, че Cis може да предпази мъжката репродуктивна система от хипоксично увреждане чрез намаляване на индуцираното от хипоксия натрупване на ROS и OS чрез повишаване на активността на ендогенни антиоксидантни ензими.

Cistanche подобрява наантиоксидантна ензимна активност.

ROS са получени от кислород свободни радикали, които играят жизненоважна роля в човешката физиология и патология. Ниските дози ROS са от съществено значение за капацитета на сперматозоидите, акрозомната реакция и сливането на сперматозоиди-овоцити [24, 25]. Въпреки това, прекомерното натрупване на ROS често води до увреждане на зародишните клетки и стромалните клетки, което води до мъжко безплодие [26]. ROS могат лесно да увредят клетъчните мембрани, нуклеинови киселини, протеини, ензими и други биологични макромолекули.

чрез пероксидация. Нещо повече, те също водят до потенциално клетъчно и ДНК увреждане, когато превишават антиоксидантния капацитет. Натрупаните доказателства подкрепят основната роля на ROS в патогенезата на мъжкия фертилитет [27, 28]. Производството на ROS се регулира от напрежението на кислорода. При хипоксични условия, наличният кислород в околната среда намалява и вискозитетът на кръвта се увеличава, като по този начин засяга много кислород-зависими метаболитни процеси в организма [29, 30]. Въпреки това, по-ниското атмосферно налягане на голяма надморска височина причинява лошо венозно връщане и намаляване на количеството кислород, транспортиран от кръвния поток до всички клетки на организма, което допълнително увеличава хипоксията на органите и клетките [29, 30]. По този начин, излагането на високо отношение води до поредица от хипоксични физиологични реакции, включително производството и натрупването на ROS, когато търсенето на кислород надвишава васкуларното снабдяване. Както бе споменато по-рано, натрупването на ROS води до различни вътреклетъчни ефекти, най-критичният от които е причиняването на OS в клетките.

OS се отнася до дисбаланс между реакциите на окисление и редукция, водещи до генериране на излишни окислители или молекули, които приемат електрон от друг реагент, който от своя страна произвежда ROS [31, 32]. ОС е добре разбрано, че може да се задейства от редица ендогенни и екзогенни фактори, включително излагане на голяма надморска височина. Сперматозоидите са клетки, които са особено податливи на OS, предвид техните неадекватни системи за възстановяване на клетките и високо съдържание на полиненаситени мастни киселини в плазмената мембрана [33]. Тъканите на тестисите и епидидима не са изключение, тъй като наличието на тежка OS е наблюдавано в кръглите сперматиди при плъхове, подложени на хипоксия [4]. OS засяга стабилността на ДНК, като по този начин застрашава целостта на генетичния материал на гаметата [34-36]. Въпреки това е потвърдено, че високото ниво на увреждане на ДНК в мъжките гамети води до активиране на апоптозното сигнализиране, което води до намаляване на броя на епидидималните сперми и увеличаване на процента на дефектните клетки [28, 37]. В настоящото изследване хипоксията значително намалява жизнеспособността на GC-1 клетките чрез индуциране на апоптоза и спиране на клетъчния цикъл. По-важното е, че значително повишени нива на ROS бяха показани чрез FCM анализ след стимулиране на хипоксия, с повишена скорост на апоптоза и по-високо активиране на съотношението Caspase-3, PARP и Bax/Bcl-2, което показва, че ROS може да активира апоптозата чрез активиране на Каспазен сигнален път по време на увреждане на фертилитета, предизвикано от хипоксия. Настоящите открития показват, че хипоксията води до прекомерно натрупване на ROS, причинявайки оксидативно увреждане на репродуктивните клетки. По този начин е важно да се идентифицират нови антиоксиданти, които могат да служат като ефективен подход за облекчаване на индуцираното от хипоксия увреждане на плодовитостта.

Цистанчеоблекчено увреждане на плодовитостта.

За защита срещу OS в тялото съществува сложна антиоксидантна система, съставена главно от ензимни фактори. При физиологични условия съдържанието на ROS и антиоксидантната система поддържат определен баланс. Свръхпроизводството на ROS обаче изчерпва антиоксидантната система на сперматозоидите, което води до OS, което причинява увреждане на ДНК на спермата и води до по-ниска плодовитост и нива на бременност [23]. По този начин, за справяне със свръхпроизводството на ROS и свързаните с него вредни ефекти на клетъчно ниво в мъжката репродуктивна система, са тествани различни антиоксидантни стратегии [23]. Понастоящем литературата относно използването на съединения с антиоксидантна активност и подобряване на функцията на спермата е обширна. Важно е, че повечето доклади описват подобрение в параметрите на сперматозоидите след перорален прием на антиоксиданти, включително подобрения в концентрацията и подвижността на сперматозоидите или намаляване на увреждането на ДНК [38]. Така все по-голям брой уролози предписват перорални антиоксиданти за безплодие поради проблеми, свързани с OS [39]. Тези антиоксиданти включват главно карнитини, витамини, цинк, мелатонин и естествени съединения [23, 40]. Понастоящем, с развитието на технологията за извличане на лекарства, все по-голям брой екстракти от TCM също се разглеждат за смекчаване на мъжкото безплодие, тъй като тези антиоксиданти могат да намалят разрушителните ефекти на OS [41]. Yüce A. и др. съобщава през 2013 г., че канелата има благоприятен ефект върху окислителния и антиоксидантния баланс в тестисите и качеството на спермата [42]. Zhang L и др. показват, че куркуминът значително подобрява подвижността на сперматозоидите при пациенти и намалява H2O2 [43]. В допълнение, различни други растителни екстракти като боровинка, минзухар, семена от нар и зелен чай също са показали, че защитават репродуктивната система чрез антиоксидантни механизми [27, 44-47]. Cistanches Herba е важен TCM, който притежава благоприятен профил на безопасност и широки медицински функции за лечение на безплодие, наред с други състояния [13]. Съвременните фармакологични изследвания са показали, че Cistanches Herba притежава различни дейности, като антиоксидантни, противовъзпалителни, хепатопротективни и анти-невро-дегенеративни заболявания [13, 48]. Следователно, екстракти, фракции или съединения от Cistanches Herba може да имат потенциални антиоксидантни свойства за лечение на безплодие.

Активните вещества в растенията, които подобряват плодовитостта, включват различни химични групи като PhGs, сапонини, кислородни летливи съединения и алкалоиди [41]. Проучванията на фармакологичната активност на PhGs показват, че PhGs проявяват широк спектър от биоактивности, като антиоксидантна, антирадиационна невропротекция и подобряване на сексуалната функция [49,50]. Сред тези дейности, антиоксидантът постепенно привлича вниманието. Съобщава се, че някои отделни компоненти или фракции на PhGs инхибират апоптозата на зародишните клетки, предизвикана от различни химикали, и техните антиоксидантни способности in vitro също са демонстрирани in vivo в няколко животински модела [51, 52]. Тези резултати показват, че PhGs могат да бъдат атрактивен кандидат за лечение. на мъжкото безплодие. Cis е активен PhG, който може да бъде изолиран от Cistanches Herba. В настоящото изследване изследвахме ефектите на Cis върху третирани с хипоксия клетки или модел на плъх и изследвахме основните молекулярни механизми. Проявява защитни действия при намаляване на жизнеспособността, предизвикана от хипоксия, и увеличаване на инпоптозата в GC-1 клетките и също така показва защитен ефект върху увреждане, предизвикано от хипоксия в репродуктивната система на плъхове in vivo. Наблюдава се значително намаляване на GR, GPx и SOD активностите при хипоксия в сравнение с нормоксичните групи, докато специфичните активности на GR, GPx и SOD значително се повишават в тестисите или GC-1 клетките, третирани с Cis. Изглежда, че защитава тестисите и GC-1 клетките при хипоксични условия чрез засилване на активността на антиоксидантните ензими.

Ензимните антиоксиданти функционират главно чрез пречистване на супероксидните аниони, като по този начин предотвратяват липидпероксидацията и увреждането на ДНК, за да предотвратят безплодието. Ензимните антиоксидантни механизми играят решаваща роля в предотвратяването на оксидативно увреждане [23]. Ензимният механизъм срещу OS включва ловчи на свободни радикали и зависими от глутатион ензими, включително GR, GPx и SOD [12]. Добре известно е, че антиоксидантните ензими са от съществено значение за мъжката репродуктивна система. В настоящото проучване ефектът от намалените антиоксидантни ензимни активности при хипобарна хипоксия беше придружен от повишени ROS и LPO в моделната група, което е в съответствие с предишни доклади [12]. Въпреки това, приложението на Cis доведе до възстановяване на антиоксидантните ензимни активности в GC{ {4}} клетки и тестисите на плъхове, което прави възможно генерирането на стратегии за прилагане на CistanchesHerba за предотвратяване на увреждане, предизвикано от хипобарна хипоксия, както беше предложено по-рано. Въпреки че настоящите резултати показват, че лечението с Cispartly намалява предизвиканото от хипоксия увреждане на зародишните клетки при плъхове, са необходими допълнителни изследвания, за да се разкрие пълната картина на неговите репродуктивни защитни ефекти. Например, специфичният механизъм на Cis засяга активността на антиоксидантните ензими. В допълнение, има въпрос дали някакви други механизми също могат да бъдат уместни, тъй като Cis само частично възстановява репродуктивните увреждания, причинени от хипоксия. И накрая, дали Cis има директен стимулиращ растежа ефект върху зародишните клетки също трябва да се разгледа.

Cistanche има aдиректен стимулиращ растежа ефектвърху зародишните клетки.

За повече информация, моля, щракнете тук.

Изводи

Като цяло, констатациите от това проучване подчертават потенциала на Cis като антиоксидант за лечение на индуцирано от хипоксия мъжко репродуктивно увреждане. Cis може да предпази от предизвикано от хипоксия мъжко репродуктивно увреждане чрез възстановяване на активността на антиоксидантния ензим, намаляване на ROS-индуцираната OS, едновременно с това повишаване на клетъчната жизнеспособност и намаляване на апоптозата. Важно е, че подтиповете Cis (Cis-A, Cis-B, Cis-C и Cis-H), изследвани в това проучване, показват известен защитен ефект върху репродуктивната система, а Cis-B показва най-значимия ефект. Следователно, ние спекулираме, че Cis може да бъде добър кандидат-антиоксидант за лечение на предизвикани от хипоксия репродуктивни увреждания при мъже, въпреки че точният основен механизъм изисква допълнително изследване.