Отварата от Tongluo Digui лекува бъбречно увреждане при диабетни плъхове чрез насърчаване на автофагията на подоцитите

Контакт:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

HAN Jiarui, ZHANG Yage, SHI Xiujie, PENG Zining, XING Yufeng, PANG Xinxin

Резюме

ОБЕКТИВЕН:

За изследване на ефектите от отвара Tongluo Digui върху бъбречно увреждане и индуцирана от стрептозотоцин аутофагия на подоцити при плъхове с диабет.

МЕТОДИ:

Мъжки плъхове Sprague-Dawley бяха разделени на случаен принцип в шест групи: нормални, модел, отвара Tongluo Digui (висока, средна и ниска доза) и валсартан. Стрептозотоцинът се инжектира интраперитонеално, за да се възпроизведе животинският модел с диабет. След 8 седмици беше оценена протеинурията, за да се установи моделът на диабетна нефропатия. Леченията се прилагат ежедневно по интрагастрален път. На 16-та седмица след сондата определихме 24-часовата концентрация на протеин в урината, кръвната глюкоза, серумния креатинин и концентрациите на уреен азот. След това плъховете бяха умъртвени и бъбреците бяха събрани и оцветени с периодична киселина-Шиф за оценка на патологичните промени в гломерулите, включително гломерулните подоцити чрез трансмисионна електронна микроскопия. Използва се Western blot анализ за определяне на експресията на нефрин, подоцин, p62, беклин-1, LC3Ⅱ/Ⅰ и p-mTOR/mTOR протеин в бъбречните тъкани.

РЕЗУЛТАТИ:

В сравнение с моделната група, отварата Tongluo Digui се свързва с намаляване на концентрацията на протеин в 24 часа в урината, кръвна глюкоза, хемоглобин A1c, серумен креатинин, концентрации на уреен азот, общ серумен протеин и албумин. Едновременно с това, мезангиалното мезентериално разширяване и сливането на израстъците на краката бяха намалени, гломерулната базална мембрана не беше значително удебелена и броят на подоцитите и броят на автофагозомите в подоцитите беше увеличен. Освен това експресията на протеини нефрин, подоцин, LC3Ⅱ и беклин-1 в бъбречната тъкан беше регулирана нагоре, докато експресията на протеин p62 беше регулирана надолу и фосфорилирането на mTOR беше инхибирано.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ:

Отварата от Tongluo Digui може да инхибира прогресията на диабетна нефропатия чрез инхибиране на mTOR фосфорилирането, като по този начин увеличава аутофагията за защита на подоцитите и намаляване на протеинурията.

Ключови думи:Диабетни нефропатии; автофагия; подоцит; Отвара от Tongluo Digui

ползи от стъблото на цистанчезабъбречна функция

ВЪВЕДЕНИЕ

Диабетната нефропатия (DN) е едно от тежките микроваскуларни усложнения на диабета, като 30 процента -40 процента от пациентите с диабет страдат от бъбречно заболяване. С нарастващата честота на диабет, DN се превърна в основната причина за терминална бъбречна недостатъчност в световен мащаб.1 Това е тежко икономическо бреме както за семействата, така и за обществото.

Увреждането на подоцитите е важна причина за прогресията на DN. Като терминално диференцирана клетка, аутофагията играе важна роля в поддържането на физиологичната функция на подоцитите.2,3 В нормално физиологично състояние има висока степен на аутофагия в рамките на подоцитите, която премахва увредените протеини и органели.4 Въпреки това, при диабет среда, аутофагията на подоцитите се инхибира, което предполага, че аутофагията на подоцитите играе важна роля в патогенезата на DN.5 DN принадлежи към категориите "Xiao Ke", "Guan Ge" и "едем" в традиционната китайска медицина. Теорията на традиционната китайска медицина е, че кръвният застой иИн дефицитса най-важните причини за DN.6 Следователно лечението на DN трябва да насърчава кръвообращението и да подхранва ин, а отварата Tongluo Digui е създадена за това. По-рано открихме, че отварата от Tongluo Digui има благоприятен терапевтичен ефект при DN. В това проучване ние имахме за цел да използваме индуцирания от стрептозотоцин (STZ) модел на плъх тип 1 DN, за да оценим ефекта на отварата Tongluo Digui върху бъбречно увреждане, автофагия и mTOR сигнален път. Ние също така проучихме основния молекулен механизъм на отварата Tongluo Digui за забавяне на прогресията на DN и предоставихме доказателства за клиничната превенция и лечение на DN.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Животни

Свободни от специфични патогени (SPF) плъхове Sprague-Dawley [n=60, мъжки, (150 ± 10) g; номер на сертификат за квалификация: SCXK (Yu) 2017-0001] са закупени от Henan Experimental Animal Center (Zhengzhou, Китай). Стандартен светлинен цикъл (14 часа светлина, 10 часа нощ), температура на закрито (23 ± 2) градуса, влажност (40 процента -50 процента), настаняване (три животни в клетка) и хранене (стерилизиран фураж и питейна вода). Експериментът е завършен в лабораторията на Центъра за клетъчни изображения на болницата за традиционна китайска медицина Хенан (Джънджоу, Китай). Всички експерименти са проведени съгласно ръководството за грижа и използване на лабораторни животни, публикувано от Националния институт по здравеопазване.

лекарства

Капсулите Валсартан (Val) са закупени от Novartis Pharma Schweiz AG (X2307 CN-b, Пекин, Китай). Отварата Tongluo Digui се състои от Shuichi (Hirudo) 12 g, Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) 30 g, Dihuang (Radix Rehmanniae) 20 g, Huangqi (Radix Astragali Perparata) 20 g, Danggui (Radix Angelicae Sinensis) 30 g, Zexie (Rhizoma) Alismatis) 10 g, Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei) 15 g, Gancio (Radix Glycyrrhizae) 6 g. Китайските билки са закупени от болницата за традиционна китайска медицина Хенан (Джънджоу, Китай).

Експериментален дизайн

Плъховете бяха разделени на случаен принцип в шест групи, всяка от които се състои от 10 плъха: контролна група (Ctrl), DN моделна група (STZ), DN модел с Val лечение група (Val), DN модел с Tongluo Digui декокт група лечение с висока доза (HTL) , DN модел с група за лечение със средна доза отвара Tongluo Digui (MTL) и модел DN с група за лечение с ниска доза отвара Tongluo Digui (LTL). Шестте групи плъхове бяха умъртвени на 16-та седмица след сондата и бяха събрани бъбреците.

Val (10 mg·kg－1·d－1) и отвара от Tongluo Digui в три различни дози се дават чрез сонда веднъж дневно в продължение на 16 седмици. Приложените дози се основават на уравнението за преобразуване на лекарствените дози между животни и хора. Доза за плъх (mg/kg)=доза за възрастен човек (mg/kg) × коефициент на преобразуване (6,25). На групите с високи, средни и ниски дози отвара от Tongluo Digui са дадени стомашна сонда от 5,4, 2,7 и 1,35 g·kg － 1·d － 1, съответно. Плъховете се претеглят всяка седмица. 24-h урината беше събрана чрез използване на метаболитни клетки в края на 0, 12 и 24 седмици. След края на лечението (на 24-та седмица), плъховете се анестезират чрез подкожно инжектиране на хлоралхидрат и проби от бъбреци и кръвна тъкан се събират и съхраняват при -80 градуса. Плъховете имаха свободен достъп до нормална диета за лабораторни животни и чиста вода (с изключение на описаното по-долу).

растение цистанче

Създаване на модела DN

STZ (Sigma, St. Louis, MO, USA) се използва за индуциране на диабет, както е описано по-горе.7 Всички 60 плъха имаха ограничен достъп до вода за 12 часа преди експериментите. От тях на 50 плъха е приложена единична интраперитонеална инжекция от STZ 60 mg/kg, разтворен в цитратен буфер (0.1 mol/L, рН 4.5). Диабетът се потвърждава чрез измерване на концентрациите на кръвна захар 72 часа след инжектирането на STZ. Животните с концентрация на глюкоза, по-голяма или равна на 16,7 mmol/L за три последователни дни, се считат за диабетици. След 8 седмици плъховете се настаняват в отделни метаболитни клетки и урината се събира в продължение на 24 часа за измерване на микроалбумин в урината (UAE). DN моделът беше потвърден при получаване на UAE, по-голямо или равно на 30 mg/24 h.

Биохимични показатели

Оценките на серума и урината бяха използвани за оценка на бъбречната функция на животните. Урината на плъх се оценява с помощта на метаболитната клетка. Кръвни проби от плъхове бяха получени чрез метода на отрязване на опашката.8 Пробите от серум и урина бяха замразени при -80 градуса до употреба. Серумният креатинин, урейният азот в кръвта, албуминът и концентрациите на протеин в урината се измерват чрез радиоимуноанализ. Нивата на хемоглобин A1c (HbA1c), C-пептид и инсулин бяха измерени с помощта на HbA1c ELISA комплект (Crystal Chem INC, Elk Grove Village, IL, САЩ), C-пептид Elisa комплект (Kainuo Bio Ltd., Пекин, Китай) и инсулин Комплект Elisa (Merck Millipore Co., Ltd., Бед Форд, Масачузетс, САЩ), следвайки съответно инструкциите на производителя. Пикочна киселина, общ серумен протеин (TP), албумин (ALB), аланин аминотрансфераза (ALT) и аспартат аминотрансфераза (AST) при плъхове бяха определени с автоматичен биохимичен анализатор.

Хистопатологично изследване

Фиксирана с формалин бъбречна тъкан беше вградена в парафин, нарязана на срезове с дебелина 3-4 μm и оцветена с периодична киселина-Шиф (PAS). Морфологични промени в бъбречната тъкан, включително пролиферация на мезангиални клетки, клетъчна инфилтрация и промени в мезангиалната матрица, бяха изследвани за всеки оцветен участък чрез светлинна микроскопия (NIKON D3100) (× 400).

Трансмисионен електронен микроскоп

TEM се използва за наблюдение на морфологията на подоцитите и мезангиалните клетки в бъбречната тъкан. Пресните бъбречни тъкани се разделят на блокове (< 1="" mm3="" ),="" were="" quickly="" fixed="" in="" 2%="" phosphate-buffered="" glutaraldehyde="" for="" at="" least="" 2="" h,="" washed="" three="" times="" with="" pbs,="" fixed="" in="" 1%="" osmium="" tetroxide="" for="" 2="" h,="" and="" then="" embedded="" in="" acetone="" wrap="" after="" dehydration.="" specimens="" were="" sliced="" in="" 50-60="" nm="" ultrathin="" sections,="" double-stained="" with="" 3%="" uranyl="" acetate="" and="" lead="" citrate,="" and="" then="" examined="" under="" a="" tem="" (jeol-jem-1400="" plus,="" japan="" electron="" optics="" laboratory,="">

Western blot анализ

Общият протеин се екстрахира от бъбречна тъкан чрез протеинов лизисен буфер (Solarbio Biotech, Пекин, Китай). Концентрациите на протеин в супернатантата бяха тествани с комплект за анализ на BCA (Solarbio Biotech, Пекин, Китай, PC0020). Проби, съдържащи 40 ug протеин, се разделят на електрофореза с 12 процента SDS-полиакриламиден гел (SDS PAGE) (Applygen, Пекин, Китай, B1004) и след това се прехвърлят в нитроцелулозна филтърна мембрана (Solar bio Biotech, Пекин, Китай). След блокиране с 5 процента обезмаслено мляко при стайна температура в продължение на 2 часа, -актин (Proteintech, артикулен номер: 60008-1-lg), LC3II/I (Ab cam, артикулен номер: ab48394), P62 (Proteintech, артикулен номер: 18420-1-AP), beclin-1 (протеинови технологии, артикулен номер: 11306-1-AP), p-mTOR (CST, артикулен номер: #5536), mTOR (CST, артикулен номер: # 2983), нефрин (Abcam, номер на позиция: ab58968) и подоцин (протеин всеки, номер на позиция: 20384 -1-AP) бяха добавени и инкубирани при 4 градуса за една нощ. След това тази смес се промива пет пъти с TBS плюс 0,05 процента Tween-20 (Solar bio Biotech, Пекин, Китай) (TBS-T) в продължение на 5 минути преди добавяне на вторичното антитяло (1∶2000) преди инкубиране на стайна температура за 1 час, промиване пет пъти с TBST за 5 минути, подлагане на цветно развитие с подобрена хемилуминесценция (ECL, Millipore, Billerica, MA, САЩ) и излагане с помощта на софтуера ImageJ за лентов анализ на сивата скала.

Статистически анализ

Данните бяха анализирани с помощта на софтуер SPSS (IBM SPSS Statistics за Windows, версия 23.0. 2014, Armonk, NY, USA). Разликите между групите бяха тествани с помощта на еднопосочен анализ на дисперсията, последван от теста на Tukey. Данните бяха изразени като средно ± стандартно отклонение. P <0,05 се="" счита="" за="">

лутеолин

РЕЗУЛТАТИ

Защитен ефект на отвара Tongluo Digui върху DN бъбреците на плъхове

Биохимични показатели като кръвна захар, гликиран хемоглобин, серумен креатинин, концентрация на уреен азот в кръвта и {{0}}-часова концентрация на протеин в урината бяха измерени 16 седмици след сондата. (Маса 1). Резултатите показват, че в сравнение с нормалната група, кръвната глюкоза, гликираният хемоглобин, серумният креатинин, концентрацията на уреен азот в кръвта, 24-часова концентрация на протеин в урината, TP и ALB са значително по-високи в моделната група (P < {{="" 7}}.01),="" като="" по="" този="" начин="" показва,="" че="" моделната="" група="" е="" имала="" нарушена="" бъбречна="" функция.="" в="" групата="" val="" както="" концентрацията="" на="" серумния="" креатинин,="" така="" и="" концентрацията="" на="" протеин="" в="" урината="" за="" 24="" часа="" са="" намалени="" (p=""><0,05). нещо="" повече,="" в="" групата="" с="" високи="" дози="" на="" отвара="" tongluo="" digui="" се="" наблюдава="" значително="" намаляване="" на="" кръвната="" глюкоза,="" hba1c,="" серумния="" креатинин="" и="" концентрациите="" на="" уреен="" азот,="" както="" и="" 24-часовата="" екскреция="" на="" урината="" (p=""><0,01). тези="" ефекти="" са="" зависими="" от="" дозата.="" няма="" значителни="" разлики="" в="" нивата="" на="" пикочна="" киселина,="" инсулин,="" alt="" и="" ast="" във="" всяка="" група="" плъхове.="" взети="" заедно,="" нашите="" открития="" показват,="" че="" отварата="" от="" tongluo="" digui="" облекчава="" увреждането="" на="" бъбреците="" и="" подобрява="" бъбречната="" функция="" при="" dn="" плъхове="" по="" дозозависим="">

Промените в DN бъбречната патология на плъхове бяха оценени чрез оцветяване с PAS след лечение с отвара на Tongluo Digui (Фигура 1). В сравнение с нормалната група се наблюдава значително увеличение в гломерулните мезангиални клетки и мезангиалната строма заедно с разширяване на мезангиалната област в моделната група. Гломерулната мезангиална зона се е увеличила при всяко от трите нива на доза отварата Tongluo Digui и в групата Val. Освен това, тези четири групи на лечение са намалили ширината на мезангиалната матрица в сравнение с моделната група, а гломерулната мезангиална зона в групата с висока доза Tongluo Digui отвара е по-малка, отколкото в групата Val. Тези открития показват, че отвара от Tongluo Digui забавя прогресията на DN гломерулни лезии.

Ефект на отварата Tongluo Digui върху увреждане на гломерулните подоцити при DN плъхове

Анализът Western blot беше използван за определяне на експресията на подоцитните маркерни протеини нефрин и подоцин (Фигура 2). В сравнение с нормалната група, експресията на двата протеина в моделната група беше значително намалена (P < 0.01),="" което="" показва="" увреждане="" на="" подоцитите.="" в="" допълнение,="" експресията="" на="" нефрин="" и="" подоцин="" се="" регулира="" нагоре="" в="" групите="" с="" отвара="" на="" tongluo="" digui="" в="" сравнение="" с="" моделната="" група="" (p=""><>

Ефект на отвара от Tongluo Digui върху аутофагията на гломерулните подоцити при DN плъхове

Промени в автофагозомите в гломерулните подоцити се наблюдават при ТЕМ (Фигура 3). Резултатите показват автофагозоми в гломерулните подоцити на нормалната група. Подоцитните автофагозоми отсъстваха в моделната група и процесите на подоцитните крака също изчезнаха. В трите дозови групи с отвара на Tongluo Digui и групата с валсартан наблюдавахме гломерулни подоцитни автофагозоми, което предполага, че отвара на Tongluo Digui засилва аутофагията на подоцитите при DN плъхове. Western blot беше използван за откриване на експресията на свързани с автофагия протеини P62, beclin-1 и LC3 Ⅱ (Фигура 4). В сравнение с нормалната група, експресията на beclin-1 и LC3Ⅱ в моделната група беше значително намалена (P < 0.01),="" докато="" експресията="" на="" p62="" беше="" значително="" повишена="" (p="">< 0.01).="" тези="" открития="" показват,="" че="" автофагията="" е="" отслабена="" при="" dn="" плъхове.="" в="" сравнение="" с="" моделната="" група,="" групата="" с="" висока="" доза="" отвара="" tongluo="" digui="" има="" повишена="" експресия="" на="" beclin-1="" и="" lc3ⅱ="" (p=""><0,05), заедно="" с="" понижена="" експресия="" на="" p62.="" заедно="" тези="" резултати="" показват,="" че="" бъбречният="" защитен="" ефект="" на="" отварата="" tongluo="" digui="" при="" плъхове="" с="" dn="" може="" да="" бъде="" свързан="" с="" повишена="" автофагия="" в="" бъбречните="">

Отварата Tongluo Digui засилва аутофагията на гломерулните подоцити при DN плъхове чрез инхибиране на mTOR фосфорилирането

Инхибирането на mTOR фосфорилирането засилва автофагията (Фигура 5). В сравнение с нормалната група, mTOR фосфорилирането в моделната група е повишено (P < 0.01),="" докато="" в="" групите="" с="" отвара="" tongluo="" digui="" то="" е="" инхибирано="" (p=""><0,05). това="" предполага,="" че="" отвара="" от="" tongluo="" digui="" засилва="" автофагията="" на="" подоцитите="" чрез="" инхибиране="" на="" активирането="" на="" mtor="" сигналния="" път.="" предишни="" проучвания="" показват,="" че="" автофагията="" предпазва="" подоцитите="" и="" подобрява="" бъбречната="">

ДИСКУСИЯ

DN се характеризира главно с признаци и симптоми като наличие на протеин в урината, висока кръвна захар, полидипсия, полифагия и полиурия. Симптомите са подобни на тези на традиционната китайска медицина, като "Xiao Ke", "Guan Ge" и "едем". Появата и развитието на DN са неделими от патологичната основа на дефицита на Ин и застоя на кръвта.6 С развитието на дефицита на Ин и застоя на кръвта, бъбрекът постепенно се уврежда, като по този начин се наблюдава загуба на протеин в урината, което допълнително води до образуване на микротромби и фиброза на бъбрека. Пациентите с DN неизбежно страдат от краен стадий на бъбречно заболяване.11

Отварата Tongluo Digui е създадена от Zhang Binghou, известен лекар по китайска традиционна медицина, и въз основа на неговия дългогодишен опит в лечението на DN.12, 13 Отварата Tougluo Digui се състои от Shuichi (Hirudo), Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis), Dihuang (Radix Rehmanniae), Huangqi (Radix Astragali Perparata), Danggui (Radix Angelicae Sinensis), Ze Xie (Rhizoma Alismatis), Dahuang (Radix et Rhizoma Rhei), Gancio (Radix Glycyrrhizae). Сред тях Shuizhi (Hirudo) и Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) са монархични лекарства, за които вярваме, че играят роля в подхранването на Ин и насърчаването на кръвообращението в DN. Guijia (Carapax et Plastrum Testudinis) подобрява имунитета и секреторното състояние на тялото и забавя стареенето.14 Shuizhi (Hirudo) има антикоагулантни, противотуморни, противовъзпалителни и антифиброзни ефекти наред с други фармакологични действия и може да подобри бъбречната патологични промени в DN за значително намаляване на серумния креатинин и концентрациите на уреен азот в кръвта и намаляване на екскрецията на протеин в урината.15,16 При DN увреждането на подоцитите играе важна роля във филтрационната бариера на гломерулната базална мембрана и при образуването на протеинурия.17 Нефринът и podocin са протеини на порите и мембраната на повърхността на подоцитите. Двата протеина взаимодействат, за да образуват комплекс, който играе ключова роля във функцията на гломерулната филтрационна бариера.18 Анормалното разпределение на протеиновата експресия води до различни степени на протеинурия.19 В това проучване индуцираните от STZ плъхове тип 1 DN показват увеличение при отделяне на протеин в урината и нарушена бъбречна функция за 24 часа. Освен това, PAS оцветяването показва, че броят на мезангиалните клетки и мезангиалната матрица се увеличават в моделната група, като по този начин показват, че моделът е успешно установен. Различни дози от отвара Tongluo Digui намаляват 24-часовите концентрации на протеин в урината и серумния креатинин и подобряват бъбречната патология на DN плъхове с намалени мезангиални клетки и матрица. Western blot анализът показа, че експресията на нефрин и подоцин в групата с отвара Tongluo Digui е по-висока в сравнение с тази в моделната група, което показва, че тази формула забавя прогресията на DN при плъхове чрез защита на подоцитите.

Автофагията е път за разграждането на лизозомните протеини в клетките и играе решаваща роля в изчистването на повредени или свръхекспресирани протеини, които поддържат клетъчната хомеостаза и цялост.20 Автофагията е неразделна част от лизозомната хомеостаза на подоцитите при диабет и засилената автофагия може да намали увреждането на подоцитите .5 След специфично нокаутиране на свързания с автофагията ген Atg5 в подоцитите, мишките постепенно показват повсеместна агрегация на протеини, митохондриално увреждане и активност на автофагия в подоцитите; подоцитите се увреждат и процесите на краката изчезват и се сливат, което показва, че автофагията се поддържа. Поддържането на нормална функция на подоцитите е важно. 21, 22 В това проучване ние изследвахме ефекта на отварата Tongluo Digui върху аутофагията в гломерулните подоцити, използвайки ТЕМ и Western blot анализ. ТЕМ показа, че броят на автофагозомите на подоцитите във всяка група с доза отварка Tongluo Digui се е увеличил в сравнение с моделната група. Освен това, Western blot показа експресия на свързаните с автофагията протеини LC3, беклин-1 и р62. В сравнение с моделната група, експресията на LC3Ⅱ и beclin-1 беше значително повишена в групата с отвара на Tongluo Digui, докато експресията на p62 протеин беше значително намалена. Тези открития показват, че отварата Tongluo Digui повишава нивото на автофагия в гломерулните подоцити.

Целевият протеин на рапамицин (mTOR) е един от основните регулатори на аутофагията.23 Той е широко разпространен в кората на бъбреците и медулата и играе роля в развитието на увреждане на DN подоцитите.24,25 В ситуации на висока глюкоза и стрес, mTOR се активира и фосфорилира, което води до фосфорилиране на неговите цели надолу по веригата и инхибиране на аутофагията. Liu et al 26 показаха, че инхибиторът на mTOR, рапамицин, специфично се свързва с mTOR киназа и инхибира активността на mTOR, засилва аутофагията на подоцитите и защитава бъбречната функция. Открихме, че фосфорилирането на mTOR е повишено в моделната група и че отварата Tongluo Digui инхибира този процес, което предполага, че отварата Tongluo Digui засилва аутофагията в подоцитите и може да инхибира активирането на сигналния път на mTOR.

В обобщение, отвара от Tongluo Digui може да инхибира аутофагията в подоцитите, да защити гломерулните подоцити, да поддържа целостта на гломерулната филтрационна мембрана, да намали 24-часовата екскреция на протеин в урината и да забави прогресията на DN чрез инхибиране на активирането на mTOR. Тези открития дават представа за по-нататъшно разбиране на защитния ефект на отварата Tongluo Digui при DN, но основният включен механизъм остава да бъде изяснен.

какво е цистанчеза бъбречно заболяване

ПРЕПРАТКИ
1 Tesch GH. Диабетна нефропатия - това имунно нарушение ли е? Clin Sci 2017; 131 (16): 2183-2199.
2 Li JJ, Kwak SJ, Jung DS и др. Биология на подоцитите при диабетна нефропатия. Kidney Int Suppl 2007; (106): S36-S42.
3 Liu N, Xu L, Shi Y, Zhuang S. Автофагия на подоцитите: потенциална терапевтична цел за предотвратяване на прогресията на диабетна нефропатия. J Diabetes Res 2017; 2017 (4): 1-6.
4 Mizushima N, Komatsu M. Автофагия: обновяване на клетки и тъкани. Cell 2011; 147 (4): 728-741.
5 Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Нарушената автофагия на подоцитите изостря протеинурията при диабетна нефропатия. Диабет 2016; 65 (3): 755-767.
6 Sun C, Xie QY, Meng QG. Проучване на закона за разпространение на TCM синдром на диабетна нефропатия. Пекин Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao 2015; 38 (4): 266-270.
7 Szkudelski T. Механизмът на действие на алоксан и стрептозотоцин в В клетки на панкреаса на плъх. Physiol Res 2001; 50(6):537-546.
8 Dang WY, Hou LY, Wu HM, Yan XM, Zheng XF, Hao J. Ефективност на отвара Qingre Lishi Yishen върху гломерулната фиброза на имуноглобулинова нефропатия в модел на плъх. J Tradit Chin Med 2019; 39(4): 516-523.
9 Lu MK, Gong XG, Guan KL. mTOR във функцията на подоцитите: добър ли е рапамицинът при диабетна нефропатия? Клетъчен цикъл 2011; 10(20): 3415-3416.
10 Hartleben B, Godel M, Meyer-Schlesinger C, et al. Автофагията влияе на чувствителността към гломерулна болест и поддържа хомеостазата на подоцитите при стареещи мишки. J Clin Invest 2010; 120(4): 1084-1096.
11 Sun GD, Li CY, Cui WP и др. Преглед на билкова традиционна китайска медицина за лечение на диабетна нефропатия. J Diabetes Res 2016; 2016: 5749857.
12 Zhao WJ, Cai Z, Meng Y, et al. Приложение на подхранващия бъбречен ин метод на Zhang Binghou при лечение на хронично бъбречно заболяване. Пекин Zhong Yi Yao 2016; 35 (4): 341-343.
13 Duan YF, Zhang HB. Представяне на опита на професор Джан Бинхоу в приложението. Xin Zhong Yi 2012; 44 (4): 147-149.
14 Yu XJ, Chen SH, Lu GY. Обзор на изследванията върху фармакодинамиката на костенурка "Ziyin Bushen". Dang Dai Yi Xue 2009; 15(10): 15-17.
15 Pang XX, Tong Y, Li HP, Han JR. Напредък на изследванията на пиявица и нейните екстракти при лечението на диабетна нефропатия. Guang Ming Zhong Yi 2019; 34 (1): 168-171.
16 Zhang ZL, Dong H. Напредък в изследванията на пиявицата и нейните активни съставки при лечението на диабетна нефропатия Zhong Xi Yi Jie He Yan Jiu 2018; 10(02): 106- 110.
17 Dai H, Liu Q, Liu B. Напредък на изследванията върху механизма на изчерпване на подоцитите при диабетна нефропатия. J Diabetes Res 2017; 2017: 2615286.
18 Martin CE, Jones N. Нефринова сигнализация в подоцита: актуализиран изглед на регулирането на сигнала в прорезната диафрагма и извън нея. Front Endocrinol (Лозана) 2018; 9: 302.
19 Jaakko P, Karl T. Молекулен състав на гломерулната филтрационна бариера. Biochem Bioph Res Co 2010; 396 (1): 164-169.
20 Noboru M, Beth L, Ana Maria C, Klionsky DJ. Автофагията се бори с болестта чрез клетъчно самосмилане. Nature 2008; 451 (7182): 1069.
21 Lenoir O, Jasiek M, Henrique C, et al. Ендотелна клетка
и подоцитната аутофагия синергично предпазват от индуцирана от диабет гломерулосклероза. Autophagy 2015; 11(7): 1130-1145.
22 Ilatovskaya DV, Levchenko V, Lowing A, Shuyskiy LS, Palygin O, Staruschenko A. Подоцитно увреждане при диабетна нефропатия: последствия от ангиотензин Ⅱ-зависимо активиране на TRPC канали. Sci Rep 2015; 5: 17637.
23 Rabanal-Ruiz Y, Otten EG, Korolchuk VI. mTORC1 като основен портал към автофагия. Есета Biochem 2017; 61 (6): 565-584.
24 Kim YC, Guan KL. mTOR: фармакологична цел за регулиране на автофагията. J Clin Invest 2015; 125 (1): 25-32.
25 Li XY, Wang SS, Han Z и др. Triptolide възстановява автофагията, за да облекчи диабетната бъбречна фиброза чрез miR-141-3p/PTEN/Akt/mTOR пътя. Mol Ther Нуклеинови киселини 2017; 9: 48-56.
26 Liu L, Yang L, Chang B, Zhang J, Guo Y, Yang X. Защитните ефекти на рапамицин върху клетъчната аутофагия в бъбречните тъкани на плъхове с диабетна нефропатия чрез mTORS6K1-LC3 Ⅱ сигнален път. Ren Fail 2018; 40(1): 492-497.