По-високи нива на етил глюкуронид за коса при пациенти с намалена бъбречна функция

ali.ma@wecistanche.com

Gudrun Høiseth и др

Заден план:

Нивата на косата на етил глюкуронид (EtG) често се използват за разграничаване на пиенето в социалните мрежи от тежкото пиене. Пациенти с намаленабъбречна функцияимат забавена екскреция на EtG и може да се подозира повишено инкорпориране в косата. Целта на това проучване беше да се сравнят EtGlevels на косата при пациенти с намаленибъбречна функцияна тези, наблюдавани при здрави доброволци.

Методи:Включени са 12 пациенти с бъбречно заболяване. Нивата на EtG в косата бяха коригирани към изчислен дневен прием на етанол (EDI) и сравнени с 21 публикувани преди това здрави индивиди.

Резултати: Нивата на EtG на косата при 12-те пациенти варират между < граница="" на="" откриване="" и="" 134="" pg/mg,="" а="" edi="" варира="" между="" 0.1="" и="" 12="" g.="" нивата="" на="" etg="" в="" косата="" са="" значително="" по-високи="" при="" пациентите="" в="" сравнение="" със="" здрави="" доброволци="" (p="">

Изводи:Тези предварителни резултати показват, че нивата на EtG в косата в популация от пациенти с са намалелибъбречна функциятрябва да се тълкува предпазливо.

Ключови думи:Алкохол, биомаркер, етил глюкуронид.

Щракнете върху предимствата и страничните ефекти на Cistanche tubulosa и Cistanche за подобряванебъбречна функция

НИВАТА НА етил глюкуронид (EtG) в косата се използват като маркер за дългосрочна употреба на алкохол и се предполага, че гранична стойност от 30 pg/mg в проксималния 3-cm сегмент на косата за откриване на високо дневно прием на алкохол (над 60 g/ден; Potgieter, 2000) през последните 3 месеца (Alt et al., 2000; Morini et al., 2009). Досега всички публикувани статии показват, че EtG в косата показва най-добрата диагностична чувствителност и специфичност за откриване на хронична тежка консумация на алкохол в сравнение с други традиционни биомаркери за етанол (EtOH). Само третирането на косата, като боядисване или изрусяване, може да повлияе негативно на определянето на EtG, докато всички останали оценени параметри (възраст, пол, цвят на косата и т.н.) изглежда не влияят на надеждността на EtG (Morini et al., 2010).

Наскоро показахме удължено време за откриване в урината за EtG и EtS при пациенти с намаленобъбречна функция(Hoiseth et al., 2012). Тъй като бъбречната екскреция е основният път на елиминиране на EtG и етил сулфат (EtS), това означава, че по-високи кръвни концентрации на EtG и EtS могат да се наблюдават при тази популация пациенти в сравнение със здрави доброволци след идентичен прием на алкохол. Тази ситуация е наблюдавана и при 1 индивид с бъбречно заболяване в предишно проучване (Hoiseth et al., 2009). По-високите нива на EtG в кръвта биха могли да доведат до повече инкорпориране в косата и впоследствие по-високи нива на EtG в тази матрица. Следователно целта на това проучване беше да се проучи дали нивата на окосмяване при пациенти с EtGin намаляватбъбречна функциясе различават от тези, наблюдавани при здрави доброволци.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Протокол от изследването

Nondialyzed renal disease patients were recruited from the renal failure clinic at Akershus University Hospital, Lørenskog, Norway. Inclusion criteria were serum creatinine value >90 lmol/L in women and >100 lmol/L при мъже (Rustad et al., 2004), изчислена скорост на гломерулна филтрация (GFR)<60 ml/min/1.73="" m2="" (automatically="" calculated="" from="" creatinine="" using="" the="" modification="" of="" diet="" in="" renal="" disease="" formula="" including="" age="" and="" sex;="" rule,="" 2007),="" and="" a="" diagnosis="" of="" decreased="">бъбречна функцияв дневника на пациента. Само пациенти с умерена употреба на алкохол бяха включени в нашето проучване, което беше одобрено от Националния комитет за изследователска етика в Норвегия, норвежката дирекция по здравеопазване и местната комисия по етика в университетската болница Акершус. Всички пациенти са подписали информирано съгласие преди да присъстват на проучването.

Приблизителен дневен прием на EtOH (EDI; изчислен на базата на последващ тест на времевата линия) за последните 3 месеца беше получен чрез интервюиране на вниманието на пациента относно вида напитка и количеството, консумирано в типичен ден. Получена е и информация от медицинското досие на пациентите. Това включваше диагнози, стойност на серумния креатинин и изчислената GFR като обективни измервания на индивидуалната бъбречна функция. Стойностите на аспартат аминотрансфераза (AST), аланин аминотрансфераза (ALT) и гама-глутамилтрансфераза (GGT) също бяха събрани като обективни мерки за възможна свръхконсумация на алкохол. Косата беше събрана от всеки пациент чрез отрязване на проба от коса възможно най-близо до кожата. 3-cm проксималният сегмент на косата, приблизително представляващ последните 3 месеца, беше предаден за EtG анализ. Резултатите от тези пациенти са сравнени с 21 публикувани преди това здрави доброволци (Politi et al., 2006).

Ефектът на цистанхата се подобрявабъбречна функция

Аналитични методи

EtG в косата се определя с помощта на публикуван преди това метод (Morini et al., 2006). Накратко, около 100 mg коса се измиват с 2 различни органични разтворителя (дихлорометан и метанол), изсушават се под поток от азот и се нарязват на малки парчета (сегменти с дължина от 1 до 2 mm). След това пробите се накисват в 700 lL дейонизирана вода с пента-деутериран етил глюкуронид (D5-EtG) като вътрешен стандарт и се инкубират една нощ при стайна температура. На следващия ден те бяха обработени с ултразвук в продължение на 2 часа и центрофугирани при 10,8009 g. Накрая, 8 lL се инжектират в системата за течна хроматография-тандемна масспектрометрия. Хроматографското разделяне се извършва в обърната фаза, изократен режим, като се използва подвижна фаза, съдържаща много висок процент вода (0,1 процента мравчена киселина плюс 1 процент ацетонитрил). Масспектрометърът беше използван в режими на наблюдение на множество реакции и отрицателна поляризация и 2 различни прехода бяха използвани за идентифициране на EtG и D5-EtG. Кривата на калибриране в диапазона от 3 до 200 pg/mg се използва за целите на количественото определяне. Границата на откриване (LOD) е 2 pg/mg, а долната граница на количествено определяне е 3 pg/mg.

Статистика

Разликите между нивата на коса на EtG при пациенти и здрави доброволци са изследвани с помощта на множествен линеен регресионен анализ с EDI като ковариата. Дадени са р-стойностите за разликата между групите (коригирани за дозите). P-стойност под 0.05 се счита за значима. Корелацията между нивата на косата на EtG и GFR или серумния креатинин беше оценена с помощта на непараметричния корелационен тест на Spearman.

РЕЗУЛТАТИ

Включени са 12 пациенти (8 мъже и 4 жени). Средната възраст е 64 години (диапазон от 42 до 84), а средният индекс на телесна маса е 26,2 kg/m2 (диапазон от 18,9 до 29,4). И трите критерия за намаленибъбречна функцияса присъствали при всички пациенти. Средната стойност на серумния креатинин е 189 lmol/L (диапазон от 130 до 670). Средната изчислена GFR е 29,2 mL/min/1,73 m2 (диапазон от 8,0 до 54,0) и всички пациенти са имали диагноза намалена бъбречна функция в медицинското си досие. Всички субекти са имали ALT, AST и GGT в нормалните граници (<=50 u/l="" for="" alt="" and="" ast,=""><= 60="" u/l="" for="" ggt;="" klauke="" et="" al.,="" 1993;="" rustad="" et="" al.,="" 2004;="" szasz,="">

Нивата на EtG на косата при 12-те пациенти варират междубъбречна функция. Това е показано в таблица 1. В публикуваните преди това 21 здрави доброволци, използвани за сравнение, EtG на косата варира между

При пациенти с намаленабъбречна функция(n=12), имаше значителна корелация между нивото на EtG inhair (коригирано за EDI) и GFR (ρ=0.61 на Spearman, p=0.036). Корелацията между EtG на косата (коригирана за EDI) и серумния креатинин е малко по-слаба и не е статистически значима (ρ=0.53 на Spearman, p=0.076).

ДИСКУСИЯ

Това проучване предполага, че сред хората, които пият алкохол, нивата на EtG в косата са по-високи при поне някои пациенти с намаленабъбречна функцияв сравнение със здрави доброволци. Връзката между нивото на EtG на косата и GFR също засили това предположение.

Откриването на по-високи нива на EtG в косата при тази група пациенти се очаква от теоретични съображения, но доколкото е известно на авторите, не е било разглеждано по-рано. В здрава популация предишни проучвания показват, че много малко хора, които пият в обществото, имат стойности на EtG на косата над предложената граница за тежка употреба на алкохол (30 pg/mg; Alt et al., 2000; Appenzeller et al., 2007a; Politi et al. , 2006; Прагст и Йеглес, 2008; Йеглес и др., 2004). Настоящата популация имаше стойности на EDI много под прага за тежко пиене, но 3 пациенти все още имаха EtG нива на косата, което предполага тежка консумация на алкохол. Освен това може да се предположи, че пациентите с бъбречно заболяване с по-висок прием, но все още в рамките на определението за социално пиене, по-често биха могли да надхвърлят нивото от 30 pg/mg и неправилно да бъдат класифицирани като тежки пиячи. Също така, при пациенти, при които се изисква много нисък прием на алкохол (напр. в случай на бъбречна трансплантация), измерването на нивата на EtG в косата може да доведе до фалшиви заключения за по-висок прием.

Първата слабост на това проучване е малкият брой пациенти. Това е следствие от размера на групата пациенти с действителното клинично състояние и общите съвети за тази група да се въздържат от консумация на алкохол. Настоящата работа трябва да се разглежда като предварителен доклад и са необходими по-големи проучвания за потвърждаване на резултатите. От друга страна, фактът, че нивата на EtG на косата при такъв ограничен брой пациенти са значително по-високи в сравнение със здрави доброволци, може да показва, че разликата е съществена. Втора слабост на настоящото проучване е, че пациентите са консумирали малки дневни количества алкохол, което води до стойности на EtG на косата под LOD за 7 от 12 участници. Това може да е следствие от това, че пациентите са следвали клиничните съвети за намаляване на консумацията на алкохол поради бъбречно заболяване. Отчитането на EDI също е възможно. От друга страна, беше използван валидиран въпросник, за да се сведе до минимум този източник на грешка, и същият въпросник беше използван в предишното проучване, използвано за сравнение. Също така, стойностите на AST, ALT и GGT в рамките на референтните стойности поне показват, че сред пациентите няма много пиячи. Освен това сравнихме резултатите от норвежките пациенти в настоящото проучване с италиански здрави доброволци. Това може да представлява несигурност по отношение на интерпретацията, но предишни доклади показват, че различната пигментация не влияе на резултатите от EtG в косата (Appenzeller et al., 2007b). Освен това беше използван същият аналитичен метод.

Като се имат предвид възможните последици от фалшиво положителна диагноза за тежко пиене въз основа на EtG на косата при пациенти с бъбречно заболяване, трябва да се предприемат допълнителни проучвания, за да се получи по-добра представа за връзката между консумацията на алкохол, степента на бъбречна недостатъчност и нивата на EtG на косата.

Cistanche е подходящ забъбречна функция

БЛАГОДАРНОСТ

Авторите са благодарни на д-р Eirik Pettersen от университетската болница Akershus за помощта при набирането на пациенти.

ПРЕПРАТКИ

Alt A, Janda I, Seidl S, Wurst FM (2000) Определяне на етил глюкуронид в проби от коса. Алкохол 35: 313–314.
Appenzeller BM, Agirman R, Neuberg P, Yegles M, Wennig R (2007a) Сегментно определяне на етил глюкуронид в косата: пилотно проучване. Криминалистика Int 173: 87–92.
Appenzeller BM, Schuman M, Yegles M, Wennig R (2007b) Концентрацията на етил глюкуронид в косата не се влияе от пигментацията. Алкохол 42: 326–327.
Hoiseth G, Morini L, Polettini A, Christophersen A, Morland J (2009) Кръвна кинетика на етил глюкуронид и етил сулфат при тежки пиячи по време на алкохолна детоксикация. Криминалистика Int 188: 52–56.
Høiseth G, Nordal K, Pettersen E, Mørland J (2012) Удължено време за откриване на EtG и EtS в урината при пациенти с намалена бъбречна функция. Alcohol Clin Exp Res DOI: 10.1111/j.1530-0277.2011.01713.x [Epub преди печат].
Klauke R, Schmidt E, Lorentz K (1993) Препоръки за извършване на стандартни ECCLS процедури (1988) за каталитичните концентрации на креатин киназа, аспартат аминотрансфераза, аланин аминотрансфераза и гама-глутамилтрансфераза при 37 градуса C. Комитет по стандартизация на Германското общество за клинична химия, Ензимна работна група на Германското общество за клинична химия. Eur J Clin Chem Clin Biochem 31:901–909.
Morini L, Politi L, Groppi A, Stramesi C, Polettini A (2006) Определяне на етил глюкуронид в проби от коса чрез течна хроматография/електроспрей тандемна масспектрометрия. J Mass Spectrom 41:34–42.
Morini L, Politi L, Polettini A (2009) Етил глюкуронид в косата. Чувствителен и специфичен маркер за хронично тежко пиене. Пристрастяване 104: 915–920.
Morini L, Zucchella A, Polettini A, Politi L, Groppi A (2010) Ефект от избелването върху етил глюкуронид в косата: in vitro експеримент. Криминалистика Int 198: 23–27.
Politi L, Morini L, Leone F, Polettini A (2006) Етил глюкуронид в косата: това надежден маркер ли е за хронични високи нива на консумация на алкохол? Пристрастяване 101: 1408–1412.
Potgieter A (2000) Наука, практика и нужди на пациентите от работата на обществото на Plinius Maior. Алкохол 35:16–24.
Pragst F, Yegles M (2008) Определяне на етил естери на мастни киселини (FAEE) и етил глюкуронид (EtG) в косата: обещаващ начин за ретроспективно откриване на злоупотреба с алкохол по време на бременност? The Drug Monit 30: 255–263.
Rule AD (2007) Разбиране на изчислената скорост на гломерулна филтрация: последици за идентифициране на хронично бъбречно заболяване. Curr Opin Nephrol Hypertens 16: 242–249.
Rustad P, Felding P, Franzson L, Kairisto V, Lahti A, Martensson A, Hyltoft PP, Simonsson P, Steensland H, Uldall A (2004) The Nordic Reference Interval Project 2000: Препоръчителни референтни интервали за 25 общи биохимични свойства. Scand J Clin Lab Invest 64: 271–284.
Szasz G (1974) Нови субстрати за измерване на активността на гама-глутамил транспептидаза. Z Klin Chem Klin Biochem 12:228.
Yegles M, Labarthe A, Auwarter V, Hartwig S, Vater H, Wennig R, Pragst F (2004) Сравнение на концентрациите на етил глюкуронид и етилов естер на мастни киселини в косата на алкохолици, пиячи в социалните мрежи и алкохолици. Криминалистика Int 145: 167–173