Полученият от Т-клетките интерлевкин-22 стимулира експресията на CD155 от раковите клетки, за да потисне функцията на NK клетките и да насърчи метастазите
Oct 10, 2023
РЕЗЮМЕ
Въпреки че Т-клетките могат да упражняват мощен антитуморен имунитет, подгрупа от Т-хелперни (Th) клетки, произвеждащи интерлевкин-22 (IL-22) в тумори на гърдата и белия дроб, е свързана с лоши резултати за пациентите. Тук изследвахме механизмите, чрез които тези Т клетки допринасят за заболяването. В миши модели на рак на белия дроб и рак на гърдата, конституционалната и Т-клетъчно-специфичната делеция на Il22 намалява метастазите, без да засяга растежа на първичния тумор. Делецията на IL-22 рецептора върху раковите клетки намалява метастазите до степен, подобна на тази, наблюдавана при мишки с дефицит на IL-22-. IL-22 индуцира висока експресия на CD155, който се свързва с активиращия рецептор CD226 върху NK клетки. Прекомерното активиране доведе до намалени количества CD226 и функционално увредени NK клетки, което повиши метастатичното бреме. IL-22 сигнализирането също се свързва с експресията на CD155 в масиви от данни при хора и с лоши резултати за пациентите. Взети заедно, нашите открития разкриват имуносупресивна верига, активирана от Т-клетъчен IL-22, която насърчава белодробни метастази.
Ползи от cistanche tubulosa-антитуморен
ВЪВЕДЕНИЕ
Основният отличителен белег на неопластичната прогресия и основната причина за свързаната с рака смъртност е способността на раковите клетки да се разпространяват във вторични места и да образуват метастази.1,2 Образуването на метастази може да бъде предотвратено чрез имунологично наблюдение, включващо естествени убийци (NK), цитотоксични , и Т хелперни (Th) 1 клетки.3,4 За разлика от тях, регулаторните Т клетки (Treg), циркулиращите моноцити и IL-17A, получен от Th клетки, образуват имуносупресивна микросреда, позволяваща имунно бягство и насърчаване на метастази. 4–6 Следователно е изключително важно да се идентифицират сигнални каскади, които определят функцията на про-антитуморогенните имунни клетки.7,8 Интерлевкин-22 (IL-22) е цитокин, произвеждан от Th17 и, при хората, също от подгрупата Th1, за която е известно, че насърчава растежа на раковите клетки, подобрява миграцията, предпазва от апоптоза, индуцира епителен към мезенхимален преход и поддържа стволови клетки на злокачествени клетки.9-13 Той също така насърчава ранната канцерогенеза, действайки върху прекурсорни лезии или незрели ракови стволови клетки.14–18 IL-22-продуциращи клетки, главно Th клетки, но също и гама делта (gd) Т клетки, инвариантни естествени клетки убийци (iNKT) и вродени лимфоидни клетки (ILCs) ), са открити при първични ракови лезии.19–24 IL-22 се експресира на биологично значими нива в гърдата, дебелото черво, белия дроб, стомаха и хепатоцелуларен карцином.9,11,12,25,26 В повечето проучвания , неговата експресия е свързана с лоша прогноза, по-висок стадий на заболяването и по-бърза прогресия на тумора.13,22–24,27–29 IL-22 действа изключително чрез IL-22 рецептора (IL{{40 }}R), съставен от две субединици, IL-22RA1 и IL-10RB.30,31 Действието на секретирания IL-22 се модулира от инхибитор, IL{{47} } свързващ протеин (IL-22BP, IL-22RA2), хомолог на IL-22RA1, който се произвежда главно от миелоидни клетки.32,33 При условия на стационарно състояние, IL -22 е основен хомеостатичен цитокин в епителните бариери като червата, белите дробове и кожата.34,35 На тези места IL-22 насърчава защитата, регенерацията и възстановяването, за да се поддържа целостта на бариерата,36, 37 и липсата му изостря индуцираната от възпаление карциногенеза.13,38 Заедно тези данни подчертават широките, контекстно-зависими функции на IL-22 както при физиологични, така и при патологични състояния. При рецепторно свързване IL-22 задейства Janus киназите Jak1 и Tyk2 за фосфорилиране на STAT3, STAT1 или STAT5, но IL-22 може да инициира други пътища надолу по веригата, включително каскадата на митоген-активирани протеин кинази (MAPK). или PI3K-AktmTOR сигнализиране, в зависимост от клетъчния контекст.13,36,39–44 Това разнообразие от сигнални пътища се отразява от множеството физиологични ефекти, които са свързани с IL-22 сигнализирането, включително тези, описани по-горе, както и защита от генотоксично увреждане и индукция на антибактериални пептиди, слуз, про- и противовъзпалителни цитокини и хемокини. 36,38,39,45,46 Раковите клетки индуцират производството на IL-22 от Th клетки при пациенти с рак на гърдата и белия дроб. 12,47,48 NLRP3 инфламазома, управлявано освобождаване на IL-1b индуцира производството на IL-22 от Т клетки в тумора и както IL-22+ Th клетки и сигнатура на NLRP3-IL-1b могат да бъдат намерени в туморни проби от рак на гърдата и белия дроб.48,49 Тук се заехме да очертаем механизъм, чрез който IL-22 насърчава прогресия на рак на гърдата и белия дроб. Открихме, че IL-22 насърчава разпространението на метастази в белия дроб, разкривайки верига, при която IL-22 медиира имуносупресията в метастатичната ниша чрез насърчаване на експресията на CD155 върху раковите клетки, което е свързано с намалена експресия на CD226 върху NK клетки и намалено производство на интерферон-g (IFNg). Клиничните данни показват, че активирането на такива пътища е свързано с резултатите за пациентите.
РЕЗУЛТАТИ
ползи от добавката Cistanche - повишава имунитета
IL-22 въздейства на дисеминирани ракови клетки в сингенни миши модели на карцином на белия дроб и гърдата
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 или язва), белите дробове бяха основното метастатично място в нашия модел със случайни метастази, открити другаде (не са показани). Il22 / мишки демонстрират намалено метастатично разпространение на Line-1 и 4T1 клетки в белия дроб в сравнение с животни от див тип, независимо от размера на първичния тумор, използвайки различни методи за откриване на метастази (Фигури 1B, 1C и S1A). Ние също така наблюдавахме подобен метастатичен фенотип в ортотопичен модел на рак на гърдата, където 4T1 клетки бяха имплантирани в мастната подложка на млечната жлеза (Фигура S2B). Всички използвани методи на заслепено макроскопско преброяване, клоногенни анализи или хистология показват висока последователност при откриване на по-ниско метастатично натоварване при Il22 / животни (Фигури 1B, 1C и S1C). Това предполага основната роля на IL-22 в метастатичния процес. След това принудихме метастази чрез интравенозно инжектиране на ракови клетки, което заобикаля необходимостта от отделяне и инвазия на тъкан (Фигура 1D). Интравенозните (iv) инжекции на двете клетъчни линии отразяват фенотипа в подкожния модел. Наистина бихме могли да потвърдим по-ниско метастатично натоварване при Il22 / мишки (фигури 1E и 1F). Тези резултати показват специфична роля на IL-22 в дисеминираните клетки в кръвообращението. За да разпознаем специфичните за щама ефекти, ние използвахме E0771 модел на рак на гърдата (Фигура 1G).50,51 Интравенозното инжектиране на E0771- GFP клетки разкри намалено метастатично натоварване в Il22 /животни, валидирано чрез поточна цитометрия (Фигури 1H и S1D). По подобен начин наблюдавахме по-ниско метастатично натоварване в черния дроб на мишки, когато E0771-GFP клетки бяха инжектирани интраспленично (Фигура S1E). Целият ляв бял дроб на мишки, инжектирани с E0771-GFP, беше оптически изчистен след протокол iDISCO за количествено определяне на метастазите с микроскопия на светлинен лист in situ (Фигура 1I).52 Тук Il22 / мишките показват намалена склонност към развитие на метастази , докато размерът на визуализираните метастази не се различава и няма специфичен модел на тяхната локализация (Фигура 1J). В обобщение, IL-22 действа върху дисеминирани ракови клетки, позволявайки метастази на рак на гърдата и белия дроб в белия дроб.
Т-клетките са подходящият източник на IL-22 в метастатичната ниша в белия дроб
По-рано идентифицирахме CD4+ Т клетки като основен източник на IL-22 в първични човешки белодробни тумори и проби от бронхоалвеоларен лаваж.12,47,48 За да очертаем източника на IL-22 в белите дробове на нашите модели, ние интравенозно инжектирахме E0771 клетки в Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP репортерни животни и количествено определихме IL-22+ клетки с помощта на поточна цитометрия (Фигури 2A и S2A).53 Популациите бяха определени като CD4+, CD{{15 }} и двойно отрицателни (DN) (CD4, CD8) ab Т клетки (CD3+ gdTCR NK1.1), gd Т клетки (CD3+ gdTCR+ NK1.1) и CD{{ 26}} NK1.1+ и CD3 NK1.1+ клетки (Фигури 2B и S2B). Наблюдавахме увеличение на фракцията на CD4+, CD8+ Т клетки и NK1.1+ клетки, които произвеждат IL-22 в белите дробове на инжектирани с тумор животни ( Фигури 2C, S2C и S2D). Тук CD4+ и CD8+ Т клетки съставляват по-голямата част от IL-22-продуциращи клетки в мишки, носещи тумор (Фигура 2C). Освен това установихме, че такива CD4+ Т клетки произвеждат IL-22, но не и IL-17A (Фигура 2D). Тези клетки имаха ниска експресия на CD44, потвърждавайки техния фенотип на паметта в съответствие с нашите предишни наблюдения (Фигура S2E). {56}} sc модел, който дава подобни резултати, с изключение на намалена част от CD8+ Т клетъчни IL-22 производители (фигури S2F–S2I). Можем също да идентифицираме, че IL-22+ клетките не коекспресират IFNg, което отделя миши IL-22 производители от Th1 подгрупата (Фигура 2G).49 Освен това използвахме конфокална микроскопия при прецизно изрязване белодробни срезове от репортерни животни, за да се изследва тяхното пространствено разпределение в белите дробове на инжектирани с тумор мишки. Тук можем да установим, че такива производители на IL-22 и IL-17A се локализират почти изключително в метастатичните огнища (Фигура 2E). Както беше показано чрез поточна цитометрия, не открихме корелация между производството на IL-22 и IL-17A от репортерните клетки в метастатичните огнища, което показва, че IL-22 и IL-17 наистина се произвеждат от две различни клетъчни подгрупи. Също така потвърдихме, че голяма част от клетките, произвеждащи IL-22-, са CD4+ Т клетки (Фигура 2E). Тъй като тези данни показват преобладаваща роля на Т клетките в производството на IL-22, ние генерирахме мишка Il22floxCd4cre с условна делеция на Il22 във всички зрели Т клетки (Фигура 2F). Когато са заразени с E0771-GFP клетки, Il22floxCd4cre мишки имат намалена склонност към развитие на метастази в белия дроб, напомнящо фенотипа, наблюдаван при глобалните Il22 / животни (Фигура 2F). Въпреки това, можем също така да потвърдим, че cre-рекомбиназата под контрола на CD4 промотор напълно премахва производството на IL-22 не само в CD4+, но и в CD8+ Т клетки, изолирани от далака на мишки Il22floxCd4cre и следователно този модел не може да се използва за определяне на специфичен източник на IL-22 (Фигура S2J). За да потвърдим ролята на Th клетките като решаващ източник на IL-22 в нашия модел, ние прехвърлихме див тип и Il22 / CD4+ Т клетки в Rag1 / II22/ животни, които впоследствие получиха E{{ 104}} GFP клетки iv (Фигура 2G). Тук можем да потвърдим, че производството на IL-22 от адаптивно прехвърлени CD4+ Т клетки е достатъчно за насърчаване на белодробни метастази в нашия модел, но е премахнато при използване на CD4+ Т клетки, изолирани от II22 / животни (Фигура 2G). Важно е, че разликите в метастазите са повлияни от присаждането на Т клетки при трансфер (Фигура S2K). В заключение, идентифицирахме Th клетките като достатъчен източник на IL-22, който предизвиква метастази в белите дробове на мишки, носещи тумор, и след това се опитахме да идентифицираме съответната целева клетка.
Фигура 1. Нокаутът на IL-22- намалява броя на белодробните метастази, но не засяга растежа на тумора в сингенни миши модели на карцином на белия дроб и гърдата
Фигура 2. Т клетките са основният източник на IL-22 в белите дробове на мишки, носещи тумор
Експресията на IL-22RA1 върху туморните клетки е незаменима за образуването на метастази
Експресията на IL-22RA1 е ограничена до нехемопоетични клетки и служи като ограничаващ фактор за сигнализирането на IL-22. За да разпитаме влиянието му върху метастатичния фенотип, ние генерирахме стабилна делеция на Il22ra1 в 4T1 и Line-1 клетки (Фигура 3A). В съответствие с нашите предишни констатации, туморният растеж на 4T1 Il22ra1 клетки беше до голяма степен незасегнат в сравнение с 4T1 контролни клетки (Фигура 3B). Въпреки това, мишки, които са инжектирани с 4T1 Il22ra1 клетки подкожно или iv, имат по-малко макроскопични и клоногенни метастази в белия дроб в сравнение с контролните 4T1 клетки (Фигури 3B и 3C). За да потвърдим, че този ефект не зависи от клонирането, ние генерирахме и анализирахме три клона Line-1 Il22ra1 и ги тествахме срещу три контролни клона, които дадоха подобни резултати (фигури 3D и 3E). Това потвърждава, че раковите клетки, експресиращи IL-22RA1-, са подходящата цел на IL-22 при предизвикване на белодробни метастази. За да изключим нецелевите ефекти на методологията, използвахме IL-22BP за инхибиране на IL-22 сигнализиране. Ние установихме клетъчни линии 4T1 и Line-1, които конститутивно секретират IL-22BP (Il22ra2+ ) (Фигура S3A). Когато се инжектират подкожно, клетките Line-1 Il22ra2+ растат сравнимо с контролата на мястото на имплантиране, както се вижда преди това в моделите Il22ra1 и Il22 / мишки, въпреки че клетките 4T1 Il22ra2+ растат по-бавно (Фигура S3B). Тук клетките 4T1 Il22ra2+ имат значително намален брой метастази при подкожно инжектиране (Фигура S3B и S3C). Въпреки по-голямата вариабилност, клетките Line-1 Il22ra2+ също образуват по-малко метастази, когато се инжектират подкожно или iv (Фигура S3D и S3E). По този начин неутрализацията на IL-22 чрез IL-22BP до голяма степен имитира фенотипа, наблюдаван при Il22ra1 клетки и Il22 / мишки, потвърждавайки значението на цитокина за метастатичния процес.
ползи от добавката Cistanche - повишава имунитета
IL-22 контролира растежа на туморните клетки по време на ранния етап на метастатично присаждане
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) и отделни клетки на mm2 белодробна тъкан (Фигура S4B). Не можахме да открием разлики 12 часа след инжектирането, което показва, че посяването може да не бъде силно повлияно от IL -22 (фигури S4C и S4D). Въпреки това, в 48-h времевата точка, броят на GFP+ клетките и колониите намалява в белия дроб на Il22 / мишки (фигури S4C и S4D). Това предполага ролята на IL-22 в предизвикването на ранни метастази в белите дробове. За да оценим скоростта на пролиферация, ние инжектирахме съвместно мишки с 5-етинил-20 -деоксиуридин (EdU) 4 часа преди изследването на 12, 24, 48 часа и 7 дни след инжектирането на тумор (Фигура S4E) . Подобно на микроскопското преброяване, ние не открихме разлики в броя на GFP + клетките по-рано от 48 часа след инжектирането (фигури S4F-S4G). За разлика от това, бихме могли да открием разлики в включването на EdU, което показва по-висока фракция на делящи се клетки само до ден 7 след инжектирането (Фигура S4G). По този начин ние разсъждаваме, че разликите в тежестта на белодробния тумор, засегнати от IL -22, наблюдавани още на 48 часа, са медиирани от механизъм, независим от пролиферацията.
Фигура 3. Експресията на IL-22RA1 върху туморни клетки е незаменима за образуването на метастази
IL-22 регулира експресията на CD155 върху туморните клетки и по този начин насърчава метастазите
Въз основа на нашите констатации, че IL-22 действа върху IL-22ra1+ ракови клетки, за да насърчи метастазите, извършихме масово РНК секвениране на 4T1 клетки, третирани с IL-22, за да очертаем допълнително основният механизъм (GEO: GSE202314) (Фигура 4A). Открихме 147 гена, които са диференцирано регулирани. От тях експресията на 133 гена е увеличена и 14 са намалели при лечение с IL-22 (Фигури 4B и S5A). Ние валидирахме Pvr (рецептор на полиовирус, Pvr) като една от най-значително увеличените цели, използвайки qPCR (Фигура S5B). Това е забележително, защото CD155, продуктът на Pvr, е свръхекспресиран при различни видове рак и притежава стимулиращи тумора свойства, включително метастази.54–56 За да потвърдим нашите открития, ние оценихме експресията на CD155 в IL-22-стимулиран 4T1, Линия -1 и E0771 клетки чрез поточна цитометрия (Фигура 4C). Открихме увеличение на експресията на CD155 във всички клетъчни линии за 72 часа (Фигури 4D и 4E), но този ефект липсваше в клетки без IL-22RA1 (Фигура S5C). След това оценихме въздействието на IL-22 върху експресията на CD155 в E0771-GFP клетки от белите дробове на мишки, носещи тумор (Фигура 4F). Тук можем да потвърдим, че клетките, имплантирани в Il22 / мишки, имат по-ниска експресия на CD155, което корелира с по-малка част от E0771-GFP клетки, открити чрез поточна цитометрия (Фигури 4G и 4H). За да проверим ролята на CD155 в метастазите, установихме Pvr Line-1 и 4T1 клетъчни линии (Фигури 4I, S5D и S5G). Въпреки че това имаше малък ефект върху способността им да растат подкожно (фигури S5E и S5F), то премахна способността за образуване на метастази в белия дроб (фигури 4J и S5H). Можем да обърнем този процес чрез конститутивна експресия на CD155 в Pvr клетки независимо от индуцираната от IL-22-регулация (Pvr+).
Фигура 4. IL-22 сигнализиране увеличава експресията на CD155 на повърхността на туморните клетки и придава резистентност към контрол на метастазите
При тази настройка бихме могли да индуцираме метастази в белите дробове на Il22 / мишки, подчертавайки връзката между тези две молекули и тяхната роля като медиатори на метастатичния процес (фигури 4K и S5I).
CD155 върху туморни клетки е свързан с намалена експресия на CD226 върху NK клетки и намалено производство на IFNg
CD155 играе присъща роля в пролиферацията и адхезията в раковите клетки, 54–57 между другото. Не открихме недостатъци в пролиферацията на Line-1 Pvr клетки in vitro (данните не са показани). Важно е, че CD155 има външна за клетката прометастатична роля, като се свързва с имуномодулаторните рецептори CD96, CD226 или TIGIT на повърхността на NK и Т клетките. антитуморни отговори в белите дробове на мишки, съдържащи 4T1-луцифераза+ клетки (4T1-Luc) (Фигура 5А). Ние потвърдихме с помощта на in vivo система за изобразяване (IVIS), че див тип и Il22/мишки имат подобно посяване на туморни клетки до 5-ия ден след инжектирането и разликите в туморното натоварване се увеличават в продължение на две седмици (Фигури 5B и 5C) . Наистина, дефектът на производството на IFNg от NK клетки, но не и други клетъчни типове, демонстрира загубата на хуморални ефекторни механизми (Фигури 5D, 5E и S6A) и корелира с по-голямо натоварване на тумора (Фигура S6B). Този ефект се открива постоянно в модела Line-1 sc (фигури S6C–S6E). Изследвани чрез цитометрия на чип, 60 проби от 4T1-мишки, носещи белодробни метастази, демонстрират повишена експресия на CD155 в метастатичните огнища в WT, но не и в Il22 / животни (Фигури 5F и S6F). Ние открихме по-висока инфилтрация на NK клетки в метастатичните огнища на Il22 / но не и WT животни, което предполага по-високо активиране и потвърждаване на зависимостта от NK клетки като антитуморни ефекторни клетки (Фигура 5F). CD226, но не TIGIT или CD96, се експресира диференциално от NK клетки и, в по-малка степен, от CD8+ Т клетки в белите дробове на див тип и Il22 / животни (Фигури 5G и S6G–S6H). CD226 е корецептор, важен за активирането на ефекторните функции на NK и CD8 Т клетките. Ето защо ние се заехме да проучим патофизиологичното му значение в нашия модел.61–64
cistanche tubulosa - подобряват имунната система
Блокирането на CD226 отменя антиметастатичния фенотип на животни с дефицит на IL-22-
Прекомерното CD{0}}медиирано сигнализиране, присъстващо в туморната микросреда, може да индуцира интернализация и разграждане на CD226 в ефекторни клетки.61,63 За да очертаем ролята на прекомерната експресия на CD155 върху CD226 и последващия антитуморен отговор, ние инжектирахме 4T1 контрола и Pvr+ клетки iv в Il22/ мишки и две групи също получиха анти-CD226 блокиращо антитяло (480.1) (Фигура 6А). Както Pvr+ клетките, така и блокадата на CD226 могат по подобен начин да стимулират белодробни метастази в Il22 / мишки и тези ефекти не са синергични (Фигура 6B). Подобно на нашите предишни наблюдения при животни от див тип, това беше достатъчно, за да инхибира производството на IFNg от NK клетки (Фигура 6C). И накрая, открихме намаляване на експресията на CD226 върху NK клетки в Pvr+-инжектирани мишки в сравнение с контролните клетки. Това корелира с намаления капацитет на тези NK клетки да произвеждат IFNg (Фигура 6D). Освен това, ние разпитахме потенциала на агонистичното TIGIT антитяло (IG9) да инхибира активирането на NK клетки в Il22 / животни и на блокадата на CD96 (3.3) за предотвратяване на инхибирането на функцията на NK клетките (Фигура 6E). Нито агонистът на TIGIT, нито антагонистът на CD96 променят броя на метастазите в сравнение с Il22 / животни, които са получили съответно контролни или Pvr+ 4T1 клетки (Фигура 6F). Когато се активира, TIGIT може да инхибира производството на IFNg от CD8+ T, но не и NK клетки (Фигура 6G). По този начин, IL-22- CD155 ос предизвиква намалена експресия на CD226 в NK клетки и ги прави инертни в туморната микросреда.
Експресията на CD155 допълва подписа на гена IL-22 при пациенти с рак на гърдата и белия дроб
И накрая, ние оценихме клиничното значение на CD155 в контекста на оста IL-22-IL-22RA1. Експресията на CD155 сама по себе си е свързана с неблагоприятна прогноза при различни ракови образувания.54 Ние анализирахме данни за секвениране на РНК от белодробен аденокарцином на атласа на генома на рака (TCGA) (TCGA: LUAD, n=504) и HER2- положителни проби на пациенти от набори от данни за инвазивен карцином на гърдата (TCGA: BRCA, n=110). Фокусирахме се върху ключови гени, свързани с IL-22-: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB и PVR. За да стратифицираме кохортите пациенти, ние използвахме агломеративно клъстериране, метод за групиране без надзор, което води до три основни клъстера (фигури 7A и 7B). Това разкрива отличителни модели на генна експресия: клъстер 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), клъстер 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) и клъстер 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (Фигура 7C). Тези клъстери бяха равномерно разпределени в тези две кохорти (Фигура 7D). Пациентите в клъстер 0 и LUAD набор от данни клъстер 2 са имали по-лоша преживяемост от пациентите в клъстер 1 (Фигура 7E). Оцеляването на клъстери 1 и 2 не се различава в двете кохорти (Фигура 7E). Освен това, ние изчислихме ограничено средно време на оцеляване (RMST) за клъстери 0 и 1, за да определим количествено разликата в очакваното време на оцеляване до пет години проследяване, което доведе до 361,18 дни за LUAD и 93,23 дни за BRCA (Фигура 7F). Клъстери 0 и 1 имат разлики в честотата на патологичните стадии на заболяването в тях в LUAD, но не и в кохортата BRCA (Фигура 7G). Важно е, че такива разлики в оцеляването между клъстери (IL22RA1hiPVRhi) и 1 (IL22RA1loPVRlo) произтичат главно от пациенти, диагностицирани в ранните (I и II), но не и в напреднали стадии на заболяването (III и IV) (Фигура S7A). За да оценим въздействието на всеки ген върху оцеляването, ние използвахме модела на пропорционалните опасности на Кокс. Както IL22RA1 (коефициент на опасност [HR]=1.23), така и PVR (HR=1.28) оказват влияние върху оцеляването, докато IL22RA2 и IL10RB не променят опасността в кохортата LUAD (Фигура S7B). Освен това, само CD226 (p=0.06), но не и TIGIT или CD96, имат тенденция да влияят на преживяемостта, в съответствие с нашите открития в предклиничните модели (Фигура S7B). Използвахме алгоритъма за деконволюция CIBERSORTx върху кохортата LUAD, за да оценим дали моделите на генна експресия на нашите клъстери оказват влияние върху инфилтрацията на имунните клетки при пациенти.65 Интересното е, че има увеличение на единиците CIBERSORTx за активирани NK клетки в клъстер 1 в сравнение с клъстерите 0 и 2 при пациенти с LUAD, докато няма разлики в NK клетките в покой или активираните CD4+ Т клетки на паметта (Фигура S7C) с подобна тенденция в кохортата BRCA (Фигура S7D). Заедно тези резултати от клинични кохорти демонстрират значението на регулаторната връзка между IL-22, получен от Т клетки, и CD155.
Фигура 5. Експресията на CD226 е по-висока при NK клетки в Il22–/– мишки
ДИСКУСИЯ
В това проучване открихме механизъм, чрез който Т-клетките произвеждат IL-22 за насърчаване на белодробни метастази в миши модели на рак на белия дроб и рак на гърдата. Механично, Т клетките в метастатичните огнища в белия дроб, предимно CD4+, произвеждат IL-22, който сигнализира директно през своя рецептор, експресиран в раковите клетки, насърчавайки експресията на прометастатичната молекула CD155.{{ 5}},58,59 Въпреки добре проучената панракова експресия на CD155 и неговите присъщи и външни роли в прогресията на рака,54 пътят, отговорен за регулирането на CD155 в злокачествените клетки, остава неуловим.66–68 Ние демонстрирахме, че IL{{ 15}} повишава експресията на CD155 в клетъчни линии на рак на белия дроб и гърдата in vitro и in vivo, докато неговата конститутивна експресия активира метастази в Il22 / мишки, в сравнение с контролните и дефицитни клетки. Повишената експресия на CD155 в туморната белодробна микросреда доведе до намаляване на ко-стимулиращата молекула CD226 върху NK клетки, намалявайки тяхната локализация към метастази и производството на IFNg, което корелира с по-голямо натоварване на тумора. В нашите предишни проучвания открихме натрупване на IL{21}}продуциращи Т клетки в проби от тумори на пациенти с недребноклетъчен белодробен карцином (NSCLC).12,48 Ние демонстрирахме, че раковите клетки задействат NLRP3- зависима секреция на IL-1b, която индуцира такова производство на IL-22 главно от Th клетки.18 Струва си да се отбележи, че при хората, поради разликите в цитокиновите профили на Th клетките, IL{{ 31}} също се индуцира в Th1 клетки. Възможно е това да наруши противотуморния имунен отговор. Важно е, че такива Th1 варианти могат частично да обяснят хиперпрогресията на рак при активиране на Т клетки след блокада на контролна точка.69 В съответствие с нашите предишни наблюдения, ние потвърдихме натрупването на IL-22-продуциращи CD4+ и CD{{38} } Т клетки, но също и NK1.1+ клетки, в метастатичната ниша в белия дроб на инжектирани с тумор животни. Важно е да се отбележи, че наблюдавахме специфични за щама разлики в натрупването на такива IL-22-продуциращи CD8+ Т клетки в нашите модели. Въпреки това, премахването на производството на IL-22 в общите зрели Т клетки беше достатъчно, за да обобщи ефекта, който наблюдавахме при животни с дефицит на IL-22-.70 Също така, адоптивният трансфер на CD4+ Т клетки в Rag / II22 / мишки е достатъчно, за да индуцира белодробни метастази, определяйки първостепенната роля на Th клетките като източник на IL-22. Обратно, нашите предишни констатации предполагат, че въпреки натрупването на CD8+ Т клетки в туморни проби, техният принос към групата IL-22 е незначителен.48 Във всеки случай, характеризирането на такива CD{{53 }} IL-22-произвеждащите Т клетки е от съществено значение за внимателна оценка на техните про- или антитуморни свойства, тъй като се появяват нови данни за тази субпопулация.71,72 Също така, основната роля на NK и NKT клетките в контрола на тумора надвишава тяхната потенциален принос към образуването на метастази чрез IL-22, което се разпознава в Rag / II22 / експеримент за адаптивен трансфер, използващ животни, лишени от зрели Т клетки, но имащи функционални NK клетки.37 Тази хипотеза е допълнително подкрепена от нашите открития в метастатичните огнища, където NK клетките са открити в по-голямо количество от цитотоксичните Т клетки, подчертавайки NK клетките като основни играчи в контрола на тумора в отсъствието на IL-22. Важно е да се отбележи, че ние се съсредоточихме върху продуцентите на IL-22 в метастатични огнища в белия дроб, но не взехме предвид техния произход, клоналност или тяхното разпространение в кръвта или лимфоидните органи. Освен това, различни източници на IL-22 насърчават прогресията на тумора по зависим от контекста начин, медииран от плейотропното действие на този цитокин. По тази линия, подобни IL-22-продуциращи клетки в различни отделения (бял дроб срещу далак срещу лимфен възел) биха могли различно да повлияят протуморните фенотипове или да нямат функция в зависимост от контекста, което ще трябва да бъде проучено допълнително. Проучванията за рак многократно докладват, че IL-22 влияе върху развитието и растежа на първични тумори и в крайна сметка върху неопластична прогресия. 26,73–76 Това схващане е оправдано главно от способността да се насърчава миграцията, инвазията и стволовостта на раковите клетки in vitro и по този начин насърчават образуването на метастази.76,77 Важно е, че аблацията на IL-22 може да облекчи имуносупресивната микросреда в Kras-мутантен модел на белодробен карцином.14 В настоящото проучване ние показахме, че увеличеното метастатично бреме е директен ефект на IL-22 върху дисеминирани IL-22RA1+ туморни клетки, което води до увеличен растеж на колонии. Важно е, че нашите данни не изключват официално въздействие върху нетуморни клетки. Като такова, влиянието на IL-22 върху разпространението на туморни клетки чрез присъщото действие на ендогенно експресиран IL-22R е широко подчертано от Giannou et al.78
Фигура 6. CD226 сигнализирането е необходимо за производството на IFNg от NK клетки
Ние демонстрирахме, че Pvr е един от гените с повишена експресия върху раковите клетки при лечение с IL-22. В този контекст клетките с дефицит на CD155- образуват малко метастази, както при див тип, така и при Il22 / мишки, и, което е важно, повторното въвеждане на CD155 ни позволи да възстановим метастатичния фенотип. Вътрешната роля на CD155 в раковите клетки е добре проучена и е известно, че влияе върху посяването, пролиферацията на туморни клетки и миграцията. 56, 57 Въпреки това, Pvr клетките не показват инхибирана пролиферация или миграция в ръцете ни и посяването на туморни клетки не се повлиява при Il22/мишки. Първоначално идентифициран върху антиген-представящи клетки, CD155 служи като външен промотор на прогресията на тумора, който потиска функцията на NK и Т клетките чрез свързване към CD96 и TIGIT на тяхната повърхност и индуцира интернализация и понижаване на регулацията на CD226.56,61–64,79–85Due към неговата имуносупресивна функция, CD155 в ракови и клетки гостоприемници проявява прометастатични свойства и се предлага като мишена за блокада на инхибиране на контролни точки.61, 86 NK клетките получават костимулиращ сигнал от антиген-представящи клетки чрез CD226. 87 Въпреки това, прекомерното стимулиране на CD226 в туморната микросреда води до интернализация и разграждане.63 Това обикновено се противодейства от CD96 и TIGIT, които свързват CD155 с по-висок афинитет.58 Интересно е, че е известно, че 4T1 клетките индуцират понижаване на CD226 при инфилтриране на тумор лимфоцити и потиска производството на IFNg.88 Тук демонстрирахме, че дефицитът на IL-22 запазва експресията на CD226 върху NK и CD8+ Т клетки. Въпреки това, само NK клетките имат драматично по-високи възможности за производство на IFNg и обратно корелират с метастатичното натоварване. Интересно е, че активирането на TIGIT сигнализиране в нашето проучване инхибира производството на IFNg от CD8+ T, но не и NK, клетки и не е достатъчно за увеличаване на метастатичното бреме. По подобен начин, друг рецептор за CD155, CD96, нито е диференцирано регулиран в Il22 / мишки, нито инхибирането му предотвратява метастази, което показва, че CD155 не потиска NK клетките чрез CD96 в нашия модел. Това подчертава специфичната за клетъчния тип регулация на антитуморните отговори от CD155 и неговите различни свързващи партньори.
Ползи от добавката Cistanche - как да подсилим имунната система
Щракнете тук, за да видите продуктите Cistanche Enhance Imunity
【Попитайте за повече】 Имейл:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Установено е влиянието на CD155 върху прогнозата и ролята му в патогенезата на рак на белия дроб, гърдата, дебелото черво и други видове рак.79–85 Има много доказателства за прогностичната значимост на IL-22 и свързаните с него гени при различни ракови образувания.10,21,27,75,89–91 Въпреки това, някои проучвания не съобщават за влияние на експресията на IL-22 върху преживяемостта.12 Докато тези несъответствия може да се дължат на хетерогенността в популации пациенти, вземане на проби и проблеми с докладването, много от тези проучвания се фокусират върху един ген, свързан с IL{12}} сигнализирането. Тук използвахме агломеративно групиране, за да разпознаем моделите на експресия на IL22RA1, IL22RA2, IL10RB и PVR в LUAD и BRCA кохорти в TCGA и да ги свържем с клиничните данни. Тук идентифицирахме три модела на експресия на тези гени: модел 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), модел 1 (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) и модел 2 (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Установихме, че високата експресия на IL22RA1 съвпада с високата експресия на PVR, което също води до лоши общи резултати за преживяемост, особено при пациенти, диагностицирани с ранни (I и II), но не напреднали (III и IV) патологични стадии, подчертавайки специфичната за етапа роля на този механизъм. Обратно, високата експресия на IL22RA2, известен също като IL-22BP, е свързана с по-ниска PVR експресия и по-добро оцеляване.18,34 Третият модел съответства на изцяло ниска експресия и представлява имунологично студени тумори.92 По тези линии , деконволюцията на CIBERSORTx показва, че клъстер 1, характеризиращ се с висока експресия на IL22RA2, включва генен подпис за активирани, но не и почиващи NK клетки в сравнение с други клъстери. Доказано е, че експресията на CD226 стратифицира пациентите за резултат в няколко клинични изпитвания на NSCLC.93 Въпреки това, поради двойния начин на пре- и пост-транслационна регулация на CD226, експресията не винаги се отразява в данните за секвениране на иРНК.94 Следователно проучванията, които се фокусират върху пост-транслационната регулация на CD226, оценете неговата експресия в клинични проби, използвайки оцветяване с антитела.63 Въпреки това, при запитване на набора от данни на TCGA относно връзката на партньорите, свързващи CD155 с оцеляването, само CD226 има тенденция към подобряване на прогнозата (log (HR) {{57 }}.24, p=0.06), докато TIGIT и CD96 не показват корелация с преживяемостта. Важно е, че туморните клетки, проектирани да секретират IL-22BP, образуват по-малко метастази, подчертавайки потенциала на пътя на IL-22 за целенасочена терапевтична интервенция. Това може да противодейства на туморната свръхекспресия на CD155, тъй като директното насочване към него остава предизвикателство поради сложна мрежа от ко-рецептори. Трябва допълнително да се отбележи, че дългосрочните ефекти от неутрализацията на IL-22 върху метастазите са неизвестни, но биха могли да имат пряко въздействие върху терапевтичното разглеждане на Т клетките или да предоставят обосновката за неутрализация на IL-22 с помощта на антитела с благоприятен профил на безопасност, като Fezakinumab (проучване NCT01941537) или конструиран IL-22 със структурно базиран дизайн.39,95 В обобщение, ние идентифицирахме IL-22-индуцирана свръхекспресия на CD155 върху туморните клетки като механизъм, който благоприятства метастатичния растеж. Тази съществена роля в прогнозата подчертава потенциала на IL-22 като терапевтична цел при рак. Досега неутрализирането на IL-22 се предлага главно като стратегия за лечение на автоимунни заболявания.31,49 Нашите данни за IL-22BP като неутрализатор на IL-22, които фенокопират глобален дефицит на IL-22, подкрепи терапевтичния потенциал за насочване към оста IL-22-IL-22R1 и трябва да бъде допълнително проучен в предклинични и клинични проучвания.
ПРЕПРАТКИ
1. Hanahan, D. и Weinberg, RA (2011). Отличителни белези на рака: следващото поколение. Клетка 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massague´, J. и Obenauf, AC (2016). Метастатична колонизация от циркулиращи туморни клетки. Nature 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK, and Kroemer, A. (2014). Естествените клетки убийци KLRG1(+) предпазват от белодробно метастатично заболяване чрез имунологично наблюдение. Онкоимунология 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Моме, М., Ритдорф, С. и Пантел, К. (2017). Циркулиращи и дисеминирани туморни клетки - механизми за имунен надзор и бягство. Нац. Rev. Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Брюховецка, Д., До¨ рр, Дж., Ендрес, С., Либи, П., Динарело, Калифорния, и Коболд, С. (2021). Интерлевкини при рак: от биология до терапия. Нац. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ и Pollard, JW (2015). Стимулиране на метастази от имунни клетки. Нац. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/nri3789.
7. Galon, J. и Bruni, D. (2020). Туморна имунология и туморна еволюция: преплетени истории. Имунитет 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , et al. (2018). Международно валидиране на консенсусния Immunoscore за класификация на рак на дебелото черво: проучване за прогноза и точност. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. и Wei, S. (2017). IL-22 подпомага прогресията на рака на гърдата чрез регулиране на HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S ., и др. (2014 г.). IL-22(+)CD4(+) Т клетки насърчават стволовостта на колоректален рак чрез активиране на STAT3 транскрипционен фактор и индуциране на метилтрансферазата DOT1L. Имунитет 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X., и Sun, B. (2011). Интерлевкин-22 насърчава човешки хепатоцелуларен карцином чрез активиране на STAT3. Хепатология 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/ hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ apper, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Хайдегер, С. и др. (2013). Интерлевкин -22 често се експресира в дребно- и едроклетъчен рак на белия дроб и насърчава растежа на резистентни на химиотерапия ракови клетки. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Ернандес, П., Гронке, К. и Дифенбах, А. (2018). Уловка-22: интерлевкин-22 и рак. Евро. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, и др. (2018). IL22 насърчава Kras-мутантен рак на белия дроб чрез индуциране на протуморен имунен отговор и защита на свойствата на стволови свойства. Рак Имунол. Рез. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B ., и Yin, C. (2019). MiR-486-5p инхибира IL-22-индуцирания епителен-мезенхимален преход на клетки от рак на гърдата чрез потискане на Dock1. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC и Choi, HS (2014). Интерлевкин-22 насърчава трансформацията на епителните клетки и туморогенезата на гърдата чрез активиране на MAP3K8. Карциногенеза 35, 1352–1361. https:// doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S. и Beaman, KD (2020). Интерлевкин-22 насърчава развитието на злокачествени лезии в миши модел на спонтанен рак на гърдата. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr. Murphy, AJ и др. (2012). IL-22BP се регулира от инфламазомата и модулира туморогенезата в червата. Nature 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/nature11535.
19. Перес, LG, Кемпски, Дж., Макгий, Х.М., Пелзкар, П., Агалиоти, Т., Джану, А., Кончала, Л., Брокман, Л., Уахиб, Р., Ксу, Х., и др. (2020 г.). TGFbeta сигнализирането в Th17 клетки насърчава производството на IL-22 и рак на дебелото черво, свързан с колит. Нац. Общ. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Майер, А., Старк, М., Карстенс, Дж. Х., Кристиансен, Х. и Брунс, Ф. (2012). Лангерхансова клетъчна хистиоцитоза на основата на черепа: ефективна ли е лъчетерапията с ниски дози? Представител на случая Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T. и др. (2012). Повишените интратуморни IL-22-продуциращи CD4(+) Т клетки и Th22 клетки корелират с прогресията на стомашния рак и предсказват лоша преживяемост на пациентите. Рак Имунол. Имунодруго. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s00262-012- 1241-5.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. и Zhang, H. (2018). Натрупването на Т-хелперни 22 клетки, интерлевкин-22 и миелоидни супресорни клетки насърчава прогресията на стомашния рак при пациенти в напреднала възраст. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.8612.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA, и Mahmoudi, M. (2018). Анализ на Th22, Th17 и CD4(+) клетки, ко-продуциращи IL-17/IL-22 в различни стадии на човешки рак на дебелото черво. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y ., и др. (2020 г.). Интратуморните клетки, произвеждащи IL22-, определят имуноевазивен подтип мускулно-инвазивен рак на пикочния мехур (2017). Защитна функция на IL-22BP при исхемия-реперфузия и индуцирано от ацетаминофен чернодробно увреждане. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L ., и Sun, B. (2013). IL-22 е свързан с развитието на човешки рак на дебелото черво чрез активиране на STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Фукуи, Х., Джан, X., Сън, К., Хара, К., Кикучи, С., Ямасаки, Т., Кондо, Т., Томита, Т., Ошима, Т., Ватари, Дж. ., и др. (2014 г.). IL-22, произведен от фибробласти, свързани с рак, насърчава инвазията на стомашни ракови клетки чрез STAT3 и ERK сигнализиране. бр. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Лиу, Т., Пенг, Л., Ю, П., Джао, Й., Ши, Й., Мао, X., Чен, В., Ченг, П., Уанг, Т., Чен, Н. ., и др. (2012). Повишените циркулиращи Th22 и Th17 клетки са свързани с прогресията на тумора и преживяемостта на пациентите при рак на стомаха при хора. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Николай, Е., Тадей, А., Ричи, Ф., Рола, С., Д'Елиос, М.М., Бенагиано, М., Бечи, П., Бенчини, Л., Рингреси, М.Н., Пини, А. ., и др. (2016). Вътретуморните IFN-гама-продуциращи Th22 клетки корелират с TNM стадирането и най-лошите резултати при рак на панкреаса. Clin. Sci. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. и Wang, H. (2014). Повишените вътретуморни нива на интерлевкин 22 и честотите на интерлевкин 22-продуциращи CD4+ Т клетки корелират с прогресията на рака на панкреаса. Панкреас 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.000000000000 0055.
30. Котенко, С.В., Изотова, Л.С., Мирочниченко, О.В., Естерова, Е., Дикеншитс, Х., Донъли, Р.П., и Пестка, С. (2001). Идентифициране на функционалния интерлевкин-22 (IL-22) рецепторен комплекс: IL-10R2 веригата (IL-10Rbeta ) е обща верига както на IL{{7 }} и IL-22 (IL- 10-свързан индуцируем фактор, получен от Т клетки, IL-TIF) рецепторни комплекси. J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. и O'Garra, A. (2019). IL-10 Семейство цитокини IL-10 и IL- 22: от фундаментална наука до клиничен превод. Имунитет 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020 г.). IL22BP медиира антитуморните ефекти на лимфотоксина срещу колоректални тумори при мишки и хора. Гастроентерология 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Котенко, С.В., Изотова, Л.С., Мирочниченко, О.В., Естерова, Е., Дикеншитс, Х., Донъли, Р.П., и Пестка, С. (2001). Идентифициране, клониране и характеризиране на нов разтворим рецептор, който свързва IL-22 и неутрализира неговата активност. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Дудаков, JA, Ханаш, AM и van den Brink, MRM (2015). Интерлевкин-22: имунобиология и патология. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K., and Sabat, R. (2004). IL-22 повишава вродения имунитет на тъканите. Имунитет 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. и Wolk, K. (2014). Терапевтични възможности на системата IL-22-IL-22R1. Нац. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. и Flavell, RA (2008). Вроденият и адаптивен интерлевкин-22 предпазва мишките от възпалителни заболявания на червата. Имунитет 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Шумахер, F., et al. (2019 г.). Интерлевкин-22 предпазва чревните стволови клетки от генотоксичен стрес. Nature 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM, and Garcia, KC (2021). Тъканно-защитните функции на интерлевкин -22 могат да бъдат отделени от провъзпалителните действия чрез структурно базиран дизайн. Имунитет 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. и Renauld, JC (2000). Клониране и характеризиране на IL-10-свързан индуцируем фактор, получен от Т клетки (IL-TIF), нов цитокин, структурно свързан с IL-10 и индуцируем от IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4,1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ и Renauld, JC (2002). Интерлевкин-22 (IL-22) активира JAK/STAT, ERK, JNK и p38 MAP киназните пътища в клетъчна линия на хепатома на плъх. Пътища, които са споделени и различни от IL-10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S. и de Waal Malefyt, R. (2004). Интерлевкин-22 активира STAT3 и индуцира IL-10 от епителните клетки на дебелото черво. Вътр. Имунофармакол. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK и Raychaudhuri, SP (2012). IL-22-индуцираната клетъчна пролиферация се регулира от PI3K/Akt/mTOR сигнална каскада. Цитокин 60, 38–42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€uhl, H. (2013). IFNalpha превръща IL-22 в цитокин, който ефективно активира STAT1 и неговите цели надолу по веригата. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ и Ouyang , W. (2008). Интерлевкин-22 медиира ранната защита на гостоприемника срещу прикрепване и премахване на бактериални патогени. Нац. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A., et al. (2005). Интерлевкин-22, член на подсемейството IL-10, индуцира възпалителни реакции в субепителни миофибробласти на дебелото черво. Гастроентерология 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et al. (2016). Интерлевкин-22 е повишен в лаваж от пациенти с рак на белия дроб и други белодробни заболявания. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Фойгт, К., Мей, П., Готшлих, А., Маркота, А., Венк, Д., Герлах, И., Фойгт, С., Статопулос, Г.Т., Аренд, КАМ, Хайзе, К., и др. (2017). Раковите клетки индуцират производството на интерлевкин-22 от CD4(+) Т клетките на паметта чрез интерлевкин-1, за да стимулират растежа на тумора. Proc. Natl. акад. Sci. САЩ 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.17051 65114.
49. Маркота, А., Ендрес, С. и Коболд, С. (2018). Насочване към интерлевкин-22 за лечение на рак. тананикам Ваксина. Имунодруго. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. и Ehrke, MJ (2005). Отдалечени метастази от подкожно разраснал E0771 медуларен аденокарцином на гърдата. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K. и Stock, CC (1952). Изследвания в туморния спектър. I. Сравнение на действието на метил бис (2-хлороетил)амин и 3-бис(2-хлороетил)аминометил-4-метоксиметил -5-хидрокси{{7} }метилпиридин върху растежа на различни тумори на мишки и плъхове. Рак 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P., and Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: прост, бърз метод за имуномаркиране на големи тъканни проби за обемно изобразяване. Клетка 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY и Smyth, MJ (2020). Туморни вътрешни и външни имунни функции на CD1
55. Семин. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. и Paolini, R. (2020). CD155: многофункционална молекула при туморна прогресия. Вътр. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. и Zhao, C. (2017). CD155, онкоимунологична молекула в човешки тумори. Cancer Sci. 108, 1934– 1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Моримото, К., Сатох-Ямагучи, К., Хамагучи, А., Иноуе, Й., Такеучи, М., Окада, М., Икеда, У., Такаи, Й. и Имаи, Т. ( 2008). Взаимодействието на раковите клетки с тромбоцитите, медиирано от Necl-5/рецептор на полиовирус, засилва метастазите на раковите клетки в белите дробове. Онкоген 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM и Smyth, MJ (2014). Рецепторите CD96 и CD226 се противопоставят един на друг в регулирането на функциите на естествените клетки убийци. Нац. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS, и Colonna, M. (2004). Най-модерно: CD96 (тактилен) насърчава адхезията на NK клетката към целевата клетка чрез взаимодействие с полиовирусния рецептор (CD155). J. Immunol. 172, 3994–3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. и Busch, DH (2022). ChipCytometry за мултиплексно откриване на протеинови и иРНК маркери върху човешки FFPE тъканни проби. STAR Protoc. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., и др. (2020 г.). IL15 стимулация с TIGIT блокада обръща CD155-медиирана NK-клетъчна дисфункция при меланома. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´, N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020 г.). Зависимата от Eomes загуба на ко-активиращия рецептор CD226 ограничава антитуморните функции на CD8 (+) Т клетките и ограничава ефикасността на имунотерапията на рака. Имунитет 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 06.09.2020 г.
63. Браун, М., Агилера, А.Р., Сундарраджан, А., Корвино, Д., Станард, К., Крумейх, С., Дас, И., Лима, Л.Г., Меза Гузман, Л.Г., Ли, К., и др. (2020 г.). CD155 върху туморни клетки предизвиква резистентност към имунотерапия чрез индуциране на разграждането на активиращия рецептор CD226 в CD8(+) Т клетки. Имунитет 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 10 септември 2020 г.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, и др. (2020 г.). Експресията на тумор CD155 е свързана с резистентност към антиPD1 имунотерапия при метастатичен меланом. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D., et al. (2019 г.). Определяне на изобилие от клетъчен тип и експресия от обемни тъкани с цифрова цитометрия. Нац. Биотехнология. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Сориани, А., Зингони, А., Чербони, К., Янито, М. Л., Рикарди, М. Р., Ди Джалеонардо, В., Чипители, М., Фионда, К., Петручи, М. Т., Гуарини, А., и др. (2009). ATM-ATR-зависимата повишена регулация на DNAM-1 и NKG2D лиганди върху множествени миеломни клетки от терапевтични средства води до повишена чувствителност на NK-клетките и е свързана със стареещ фенотип. Кръв 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
